Környezettechnológiai laboratóriumi gyakorlatok MÉRÉSI JEGYZŐKÖNYV az ” Enzimtechnológia” című gyakorlathoz
nevek:
beugró zárthelyi
Mérés helye:
Mérés ideje:
Gyakorlatvezető:
Jegyzőkönyv javítás dátuma: Gyakorlatvezető aláírása:
Megjegyzések:
1
gyakorlati munka
jegyzőkönyv
Feladatcsoport: A hallgató
név:
Mérés lényege, mérés menete: 1. A vízoldható keményítő nedvességtartalmának meghatározása:
2.
Az amiloglükozidáz enzim katalizáló hatásának vizsgálata pH=3,5- és 4,5 puffer-oldatokban
2
Feladatcsoport: A hallgató
név:
Mérési eredmények: A vízoldható keményítő nedvességtartalmának meghatározása: MÉRÉS Edény tömege
SZÁMOLÁS
Edény + Szárítás után Szárítás keményítő edény + tömeg keményítő
előtti Szárítás tömeg
utáni Nedvességtartalom
1 2 3 Átlag: %-os nedvességtartalom
3
Feladatcsoport: A hallgató
név:
Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának meghatározása pH=3,5-ös puffer oldatban: bemért vízoldható keményítő tömege: Jód Konc.: 0,05 M Faktor: f*c=
5 cm
g
pH =3,5
Tioszulfát
Higítások:
Konc.: 0,1 M Faktor: f*c= Fogyások 1.
3
hozzáadott jód anyagmennyisége: mol
3
50 cm keményítő oldat 3 2 cm 5M NaOH oldat 3 0,5 cm enzim oldat
Átlag:
3
Összesen:52,5 cm :
2. 3. fogyott tioszulfát anyagmennyiség:
cm
3
mol
fogyott tioszulfát anyagmennyiség /2= fogyott jód anyagmennyisége:
mol
mintában lévő glükóz anyagmennyisége= hozzáadott-fogyott jód anyagmennyisége: Minta térfogata: 5cm
Koncentráció Glükóz koncentráció hígítás nélkül Enzimaktivitás (mért glükózkoncentráció-szabad glükóz koncentráció)
3
mol
mmol/dm
3
mmol/dm
3
mmol/dm
3
Hidrolízis mértékének számítása pH=3,5 puffer-oldatban: a vízoldható keményítő nedvességtartalma:
%
a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma:
%
a vízoldható keményítő nettó keményítő tartalma:
%
(C6H10O5)n + nH2O = nC6H12O6 3 3 ....... g/100 cm ........ g/100 cm 3 3 ......... mol/100 cm = ................mmol/dm pH 3,5
Enzimaktivitás
Hidrolízis mértéke
4
Feladatcsoport: A hallgató
név:
Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának meghatározása pH=4,5 puffer oldatban: bemért vízoldható keményítő tömege: Jód Konc.: 0,05 M Faktor: f*c=
5 cm
g
pH =4,5
Tioszulfát
Higítások:
Konc.: 0,1 M Faktor: f*c= Fogyások 1.
3
hozzáadott jód anyagmennyisége: mol
3
50 cm keményítő oldat 3 2 cm 5M NaOH oldat 3 0,5 cm enzim oldat
Átlag:
3
Összesen:52,5 cm :
2. 3. fogyott tioszulfát anyagmennyiség:
cm
3
mol
fogyott tioszulfát anyagmennyiség /2= fogyott jód anyagmennyisége:
mol
mintában lévő glükóz anyagmennyisége= hozzáadott-fogyott jód anyagmennyisége: Minta térfogata: 5cm
Koncentráció Glükóz koncentráció hígítás nélkül Enzimaktivitás (mért glükózkoncentráció-szabad glükóz koncentráció)
3
mol
mmol/dm
3
mmol/dm
3
mmol/dm
3
Hidrolízis mértékének számítása pH=4,5 puffer-oldatban: a vízoldható keményítő nedvességtartalma:
%
a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma:
%
a vízoldható keményítő nettó keményítő tartalma:
%
(C6H10O5)n + nH2O = nC6H12O6 3 3 ....... g/100 cm ........ g/100 cm 3 3 ......... mol/100 cm = ................mmol/dm pH 4,5
Enzimaktivitás
Hidrolízis mértéke
A mérési eredmények értékelése:
5
Feladatcsoport: B hallgató
név:
Mérés lényege, mérés menete:
A vízoldható (előhidrolizált) keményítő szabad glükóz-tartalmának meghatározása:
Az amiloglükozidáz enzim katalizáló hatásának vizsgálata pH=5,5 és pH=6,5 puffer-oldatokban
6
Feladatcsoport: B hallgató
név:
Mérési eredmények: A vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma: a bemért vízoldható keményítő tömege: Jód Konc.: 0,05 M Faktor: f*c=
5 cm
g
Tioszulfát Koncentráció: 0,1 M Faktor f*c= Fogyások 1.
3
Átlag:
2. 3. fogyott tioszulfát anyagmennyiség:
hozzáadott jód anyagmennyiség:
mol
fogyott tioszulfát anyagmennyiség/2= fogyott jód anyagmennyisége:
mol
mol
mintában lévő glükóz anyagmennyisége= hozzáadott-fogyott jód anyagmennyisége: mol Minta térfogata: Koncentráció:
5 cm
3
mmol/dm
7
3
Feladatcsoport: B hallgató
név:
Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának meghatározása pH=5,5 puffer oldatban: bemért vízoldható keményítő tömege: Jód Konc.: 0,05 M Faktor: f*c=
5 cm
g
pH =5,5
Tioszulfát
Higítások:
Konc.: 0,1 M Faktor: f*c= Fogyások 1.
3
hozzáadott jód anyagmennyisége: mol
3
50 cm keményítő oldat 3 2 cm 5M NaOH oldat 3 0,5 cm enzim oldat
Átlag:
3
Összesen:52,5 cm :
2. 3. fogyott tioszulfát anyagmennyiség:
cm
3
mol
fogyott tioszulfát anyagmennyiség /2= fogyott jód anyagmennyisége:
mol
mintában lévő glükóz anyagmennyisége= hozzáadott-fogyott jód anyagmennyisége: Minta térfogata: 5cm
Koncentráció Glükóz koncentráció hígítás nélkül Enzimaktivitás (mért glükózkoncentráció-szabad glükóz koncentráció)
3
mol
mmol/dm
3
mmol/dm
3
mmol/dm
3
Hidrolízis mértékének számítása pH=5,5 puffer-oldatban: a vízoldható keményítő nedvességtartalma:
%
a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma:
%
a vízoldható keményítő nettó keményítő tartalma:
%
(C6H10O5)n + nH2O = nC6H12O6 3 3 ....... g/100 cm ........ g/100 cm 3 3 ......... mol/100 cm = ................mmol/dm pH 4,5
Enzimaktivitás
Hidrolízis mértéke
8
Feladatcsoport: B hallgató
név:
Az amiloglükozidáz enzimaktivitásának meghatározása pH=6,5 puffer-oldatban: bemért vízoldható keményítő tömege: Jód Konc.: 0,05 M Faktor: f*c=
5 cm
g
pH =6,5
Tioszulfát
Higítások:
Konc.: 0,1 M Faktor: f*c= Fogyások 1.
3
hozzáadott jód anyagmennyisége: mol
3
50 cm keményítő oldat 3 1 cm 5M NaOH oldat 3 0,5 cm enzim oldat
Átlag:
3
Összesen:51,5 cm :
2. 3. fogyott tioszulfát anyagmennyiség:
cm
3
mol
fogyott tioszulfát anyagmennyiség /2= fogyott jód anyagmennyisége:
mol
mintában lévő glükóz anyagmennyisége= hozzáadott-fogyott jód anyagmennyisége: Minta térfogata: 5cm
Koncentráció Glükóz koncentráció hígítás nélkül Enzimaktivitás (mért glükózkoncentráció-szabad glükóz koncentráció)
3
mol
mmol/dm
3
mmol/dm
3
mmol/dm
3
Hidrolízis mértékének számítása pH=6,5 puffer oldatban: a vízoldható keményítő nedvességtartalma:
%
a vízoldható keményítő szabad-glükóz tartalma:
%
a vízoldható keményítő nettó keményítő tartalma:
%
(C6H10O5)n + nH2O = nC6H12O6 3 3 ....... g/100 cm ........ g/100 cm 3 3 ......... mol/100 cm = ................mmol/dm pH 5,5
Enzimaktivitás
Hidrolízis mértéke
9
Feladatcsoport: B hallgató
név:
enzimaktivitás (mmol/dm3)
pH –enzimaktivitás görbe:
pH
A mérési eredmények értékelése:
10
Feladatcsoport: C hallgató
név:
Mérés lényege, mérés menete:
Az abszorbancia - D-glükóz koncentráció kalibrációs görbe felvétele
Az amiloglükozidáz enzim katalizáló hatásának vizsgálata különböző pH értékeken: a keletkezett D-glükóz koncentrációjának meghatározása spektrofotometriásan
11
Feladatcsoport: C hallgató
név:
Mérési eredmények:
D-glükóz koncentráció 3 2,00 g/dm 3 1,50 g/dm 3 1,00 g/dm 3 0,5 g/dm
abszorbancia 600 nm
abszorbancia
koncentráció g/dm3
12
Feladatcsoport: C hallgató
abszorbancia 600 nm
D-glükóz koncentráció 3 ( g/dm )
név:
enzimaktivitás 3 (mmol/dm )
pH=3,5 pH=4,5 pH=5,5 pH=6,5 vízoldható keményítő
enzimaktivitás (mmol/dm3)
pH –enzimaktivitás görbe:
pH A mérési eredmények értékelése:
13
Feladatcsoport: D hallgató
név:
Mérés lényege, mérés menete:
pH=5,5 foszfát puffer-oldat elkészítése
Az α-amiláz enzim katalizáló hatásának vizsgálata az enzim koncentrációjának függvényében 40 o C-on
14
Feladatcsoport: D hallgató
név:
Mérési eredmények: kémcső
keményítő3 oldat (cm )
α-amiláz-oldat 3 (cm )
puffer-oldat 3
(cm )
csapvíz 3
(cm )
szín (abszorbancia)
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10.
abszorbancia
α -amiláz oldat térfogata cm3 mérési eredmények értékelése:
15
megjegyzések
Feladatcsoport: E hallgató
név:
Mérés lényege, mérés menete:
pH=5,5 foszfát puffer-oldat elkészítése
Az α-amiláz enzim katalizáló hatásának vizsgálata az enzim koncentrációjának függvényében 60 o C-on
16
Feladatcsoport: E hallgató
név:
Mérési eredmények: kémcső
keményítő3 oldat (cm )
α-amiláz-oldat 3 (cm )
puffer-oldat 3
(cm )
csapvíz 3
(cm )
szín (abszorbancia)
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10.
abszorbancia
α -amiláz oldat térfogata cm3 mérési eredmények értékelése:
17
megjegyzések
