Informace z 16. mezinárodní konference o vaskulitidách My ANCA story a ANCA Ivo Lochman
Prof. Jo Bradwell, MD, Ph.D. Birmingham University & Binding Site Comp.
Seminář Binding Site, Olomouc 1993
Wilfried Stoecker zakladatel firmy Euroimmun
Wolfgang Schlumberger „korunní princ“ firmy Euroimmun
Ewald Müler-Kunert původní expert pro IIF firmy Euroimmun
1995 duben, veletrh Analytika, Mnichov, 1. kontakt s firmou Euroimmun 1996 vstup firmy Euroimmun na český trh prostřednictvím firmy Dynex 1997 1. Časomil, Praha – prezentace firmy Euroimmun 1998 2. Časomil, Piešťany – Doporučení SLI ČSAKI pro lab dg autoprotilátek
Doporučení pro laboratorní diagnostiku autoprotilátek závěry z pracovního semináře, Piešťany 1.-3.4.1998 2.5. ANCA Referenční metodou pro diagnostiku ANCA protilátek zůstavá IF technika na ethanolem fixovaných lidských granulocytech. Pro správnou diagnostiku je kritická správná příprava substrátu. Na granulocytech lze rozeznat dva typy ANCA pozitivity - pANCA a c-ANCA. Oba typy mohou být asociovány s pozitivitou proti několika antigenům, p-ANCA nejčastěji s myeloperoxidázou (MPO) a c-ANCA s proteinázou 3 (PR-3). Jednotlivé ANCA lze potom detekovat a stanovovat jejich koncentrace pomocí ELISA. Ukazuje se však, že ani toto stanovení není dnes ještě zcela spolehlivé a soupravami různých výrobců můžeme dosáhnout různé výsledky. IF pozitivitu p-ANCA a c-ANCA je nutné vždy verifikovat ještě na jiných substrátech, zvláště jsou-li přítomny společně s ANA protilátkami (jde především o p-ANCA pozitivitu). Takovýmito substráty jsou formolemfixované lidské granulocyty (p-ANCA na ethanolem fixovaných granulocytech se mění na c-ANCA) a opičí játra, eventuelně i HEp-2 buňky. Kromě verifikace či vyloučení nálezu na ethanolem fixovaných granulocytech lze tak určit i jiné ANCA než MPO-ANCA a PR3ANCA a GS-ANA (ANA specifické pro granulocyty). Podle doporučení EULAR by měly být tyto autoprotilátky vyšetřovány v ředění 1:20, některá pracoviště tvrdí, že až 1/3 pacientů může mít mimo stadium aktivního onemocnění titr c-ANCA protilátek nižší než 1:10 a doporučují vyšetřovat na c-ANCA séra neředěná nebo ředěná 1:3. Jako konjugát se používá polyvalentní konjugát anti-IgG,A,M.
2001 – Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: „Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám.“ 2003 – 11th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA 2004 - 7th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 – doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1).
Alergie 2005; 7(1): 57-8, za výbor SLI ČSAKI V.Král, předseda výboru SLI ČSAKI Výtah vyvěšen 7.4.2009 na www.sli-csaki.cz/metodiske pokyny/
Alergie 2005; 7(1): 57-8
Laboratorní diagnostika ANCA metodické doporučení SLI ČSAKI Vyšetření protilátek proti cytoplazmě neutrofilů se v posledních několika letech stalo součástí základních panelů autoprotilátek v imunologických laboratořích. Zkušenosti získané z diskusí na odborných fórech a v systému externí kontroly kvality SEKK vedly k rozhodnutí připravit metodické doporučení správného laboratorního diagnostického postupu. Doporučení připravil výbor Sekce laboratorní imunologie ČSAKI pod autorským vedením dr. Lochmana. Za recenzi textu a cenné připomínky výbor SLI děkuje prof. Bartůňkové. http://www.sli-csaki.cz/metodicke-pokyny/laboratorni-diagnostika-ancametodicke-doporuceni-sli-csaki/ vyvěšeno 7.4.2009
2001 – Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: „Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám.“ 2003 – 11th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA 2004 - 7th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 – doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1). 2010 –7th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev.
2001 – Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: „Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám.“ 2003 – 11th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA 2004 - 7th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 – doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1). 2010 –7th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev. 2011 – článek v Autoimmunity Rev., 11th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, R.L. Humbelem a M. Fritzlerem
Marvin Fritzler University Calgary
Alan Wiik René Luis Humbel Statum Serum Institut, Kodaň Univ. Luxemboug
2001 – Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: „Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám.“ 2003 – 11th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA 2004 - 7th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 – doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1). 2010 –7th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev. 2011 – článek v Autoimmunity Rev., 11th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, RL Humbelem a M. Fritzlerem 2012 – článek Postup pro vyšetřování ANCA, Alergie 15(2), výzva k nasání článku do Frontiers in Immunology – odkaz na mezinárodní skupinu a projednání na ANCA workshopu v dubnu 2013 v Paříži (N. Rasmussen)
Alergie 2012;14(2):147-8, vyvěšeno na www.sli-csaki.cz 30.7.2012 (i anglická verze)
Alergie 2012;14(2):147-8
EUVAS group - a new consensus for ANCA detection X. Bossuyt, J.W. Cohen-Tervaert, E. Csernok, J. Damoiseaux, N. Rasmussen, M. Snyder Reply to Dr. Lochman (15.6.2012): 1. First of all, we fully agree with your point of view that the international consensus statement on testing and reporting on ANCA needs to be urgently revised. Currently, the aim of our EUVAS group is to improve and revise the international recommendations for ANCA. 2. Concerning the terminology: We had considerable discussion about the terms – ANCA, GS-ANA and neutrophil specific autoantibodies (NSA) - at the ANCA Workshop in Cancun, 2007. It was the consensus that NSA and GS-ANA were not useful terms. The term ANCA described by IIF include all the relevant patterns that may be detected on ethanol-fixed granulocytes. There are three main patterns: C-, P- and AANCA. A positive ANCA pattern does not exclude concomitant ANA. 3. Requests for ANCA testing should enable distinction between a request for vasculitis/glomerulonephritis or other chronic inflammatory diseases (i.e.inflammatory bowel disease (IBD), autoimmune liver disease) (AILD) 4. The recommended screening assay for both disease groups is IIF on ethanol-fixed neutrophils. However, new developments in the detection of ANCA in vasculitis lead to novel strategies for ANCA screening. We are presently launching a project to establish a background for reappraisal of the international consensus for ANCA testing for diagnostic purpose. The evaluation of the obtained data would help us to prepare our meeting and to start the work to reach our goals. 5. We would like to organize an expert meeting at the next ANCA Workshop in Paris and to try to come to a new consensus on ANCA testing. Our issues only deal with vasculitis/glomerulonephritis and we would like to ask you if you would agree to participate and be ready to prepare a recommendation for the detection of ANCA in other inflammatory diseases. 6. Concerning “Frontiers in Immunology”: It could be an appropriate journal to publish the new recommendations and a consensus concerning the management of ANCA in other diseases than ANCA-associated vasculitis.
Savige J, Dimech W, Fritzler M, Gieken J, Hagen EC, Savige J, JC, GillisMcEvoy D, Benson E, Davies D, Esnault V, Falk Jennette R, Pusey C, Pollock W, Trevisin RJ,Wiik Hagen EC, Jayne D, Jennette JC, Paspaliaris B, M, A, Wong R. Addendum to International Pollock W, Pusey C, Savage CO,and Silvestrini R, of van der Consensus Statement on testing reporting Woude F, Wieslander J, Wiik A.: International antineutrophil cytoplasmic antibodies. Quality control Consensuscomments, Statementand on recommendations Testing and Reporting of guidelines, for testing Antineutrophil ). in other immune Cytoplasmic diseases. AmAntibodies J Clin Pathol(ANCA 2003;120: Am J Clin Pathol. 1999 Apr;111(4):507-13. 312–8.
Náměty Alana Wiika 9.4.2013: 1. Na sklíčka s EtOH-GR zařadit také lymfocyty (rozlišení ANCA a ANA) a po screeningu na těchto sklíčcích přejít hned na typizaci pomocí ELISA, blotu nebo ALBIA. byste nám 2. Nepoužívat termín A-ANCA 3. Jak ale připravit, rozlišit a definovat antigeny nabízené IS ve formě NETs? 4. Nesměšovat IIF terminologii (P-ANCA a C-ANCA) s terminologií názvu autoAb v ostatních imunoanalytických technikách (anti-PR3, anti-MPO atd.)
2001 – Návštěva Serum Staten Institute, Kodaň. Allan Wiik: „Jediné kvalitní granulocyty pro diagnostiku ANCA jsou ty, které si připravím sám.“ 2003 – 11th vasculitis & ANCA workshop, Praha - diskuse s A.Wiikem v kuloárech především o dg A-ANCA 2004 - 7th Dresden Symposium on Autoantibodies námitka prof. Shoenfeldovi v kuloárech k jeho interpretaci P-ANCA. (Já nic, podklady od Alana Wiika) 2005 – doporučení SLI ČSAKI pro dg ANCA v Alergii 7(1). 2010 –7th Int. Congress on Autoimmunity, Ljubljana - Prof. Shoenfeld slib, že z jeho laboratoře přednese někdo zásadní referát k dg ANCA. Nesplněno a výzva, napsat článek do Autoimmunity Rev. 2011 – článek v Autoimmunity Rev., 11th Dresden Symposium on Autoantibodies, konzultace navrhovaného schématu pro dg ANCA s A.Wiikem, RL Humbelem a M. Fritzlerem 2012 – článek Postup pro vyšetřování ANCA, Alergie 15(2), výzva k nasání článku do Frontiers in Immunology – odkaz na mezinárodní skupinu a projednání na ANCA workshopu v dubnu 2013 v Paříži (N. Rasmussen)
International vasculitis & ANCA workshops 1. 1988 Copenhagen (A. Wiik, N. Rasmussen) 2. 1989 Noordwijkerhout (F. van der Woulde, C. Kallenberg) 3. 1990 Washington, DC (C. Jennette, R. Falk) 4. 1992 Lübeck (W. Gross) 5. 1993 Cambridge (M. Lockwood, C. Pussey) 6. 1995 Paris (P. Lesavre, L.H. Noel) 7. 1996 Rochester (R. DeReeme) 8. 1998 Birmingham (P. Bacon) 9. 2000 Groningen (C. Kallenberg, JW Cohen Tervaert) 10. 2002 Cleveland (G. Hoffman, L. Calabrese) 11. 2003 Prague (V. Tesař, J. Bartůňková) 12. 2005 Heidelberg (K. Andrassy) 13. 2007 Cancun (L. F. Flores-Suarez) 14. 2009 Lund-Copenhagen (M.Segelmark, N. Rasmussen) 15. 2011 Chapel Hill (R. Falk, C. Jennette) 16. 2013 Paris (L. Guillevine) 17. 2015 London (C. Kallenberg)
Loic Guilervin President of 16th International Vasculitis & ANCA Workshop
• cca 1000 účastníků • plenární bloky vždy na zahájení dopoledne a odpoledne, pak 3- 4 paralelní tématické bloky • 52Institut přehledných sdělení Paris des Cordeliers, • 68 krátkých sdělení • 231 nástěnkových sdělení • 3 multicentrické studie (Rituximab USA, VB, Francie)
Results of ANCA testing in the DIA of IPH in Ostrava during 2011 – 2012 years
From the poster on 16th International vasculitis & ANCA workshop in Paris, Apr 14 -16, 2013
Terminologie: ANCA - Antineutrophil cytoplasmatic autoantibodies AAV – ANCA associated vasculitis
Klasifikace AAV: • • • •
MPA – microscopic polyangitis GPA – granulomatosis with polyangitis (Wegener’s) EGPA – eosinophilc granulomatosis with polyangitis (Churg-Strauss) renal limited vasculitis – projevuje se jako glomerulonefritída nerozlišitelná od glomerulonefridídy u MPA, GPA a EGPA
Laboratorní diagnostika AAV: Směřuje ke stanovování protilátek s jasně definovanými Ag. Zatím PR3 a MPO.
Léčba: Individualaizovaná, kombinace biologické léčby a klasických imunosupresiv
J. Charles Jennette, Ronald J. Falk: Pathogenesis of ANCA-associated vasculitis: Observations, theories and speculations. L1 on 16th vasculitis & ANCA workshop, Paris, 2016 • Stejně jako u mnoha dalších autoimunitních onemocnění jsou etiologie a patogeneze AAV multifaktoriální a zahrnují jak vyvolávající, tak predispoziční genetické faktory a vlivy prostředí, ztrátu imunologické tolerance a způsob řešení akutního poškození daným jedincem. • Z toho také plyne, že i léčba AAV musí být rozmanitá a řídit se patogezou daného onemocnění a stádiem nemoci. - Patologická autoimunitní reakce může být tlumena nebo přesměrovávána imunomodulační léčbou (anti-B lymfocytární terapie, adoptivní přenos Treg) - akutní nekrotizující poškozování může být snižováno protizánětlivou léčbou (tj. kortikoidy a inhibice komplementu) - chronická odpověď na poškození může být potlačována anti-fibrotickou léčbou (inhibitory angiotenzinkonvertázy)
RJ Falk, ME Free, DJ Ciavatta: How antigens influence the disease. An immunologist point of view. L12 on 16th Int. Vasculitis & ANCA workshop, Paris, 2013 • Pacienti s anti-MPO a s anti-PR3 se liší. • Relapsy u pacientů s anti-PR3 jsou častější, pacienti s anti-MPO mají delší klidová stadia nemoci. • Pacienti s anti-PR3 mají častěji onemocnění respiračního traktu s tvorbou granulomů, pacienti s anti-MPO trpí častěji nemocněním ledvin • Sérologická klasifikace AAV se ukazuje lepším klinickým rozlišovacím kritériem něž stávající oficiální klasifikační systém vaskulitíd • Existují geografické a etnické rozdíly ve výskytu anti-PR3 a anti-MPO vaskulitid. • Pro každou z těchto dvou AAV existují genetické predispozice, a to především v těchto lokusech: HLA-DQ, HLA-DP, SERPINA1 a PRTN3. • PR3 je sérinová proteáza, která se vyskytuje také ve formě mPR3 v membránách buněk. MPO ne. • Reaktivita T buněk včetně Tregs a B buněk proti oběma antigenům je srovnatelná. • Existuje překryv mezi GPA a MPA. 20% GPA pacientů má anti-MPO a 50% MPA pacientů má anti-PR3. • ANCA s nízkou aviditou (přirozené ANCA) se vyskytují v nízkých koncentracích i u zdravých jedinců.
Prognostický význam ANCA
Calculated five year Kaplan-Mayer survival in respectively the ANCA-PR3-positive group (n = 18), the ANCA-MPO-positive (n = 17) group, the atypical ANCA group (n = 19) and the gender and age matched random ANCA-negative group. The curves differ significantly (P=0.012, Wilcoxon test). Převzato z: Drooger J.C. et al., The Open Rheumatology Journal, 2009, 3, 14-17
Rozsáhlá diskuse s Nielsem Rasmussenem. EUVAS skupina pro dg ANCA se nesešla a nedá se spoléhat ani na to, že by byla aktivní v přípravě revize pro dg ANCA. Výzva: Připrav návrh textu revize a pošli k diskusi!
Co závěrem?
Niels Rasmussen
Nezbývá, než pokusit se napsat návrh revize doporučení pro dg ANCA a získat pro spolupráci vlivné osoby (A. Wiik, C. Jennette, R. Falk, N. Rasmussen aj.).
Specifičnost imunoanalytických metod Ivo Lochman oddělení imunologie a alergologie Zdravotní ústav Ostrava
XXIV. Kongres SSAKI a ČSAKI, Žilina, 14.-17. 10. 2009
Analytická funkce IS je založena na vyhodnocení několika signálů v daném prostoru a čase. Vyhodnocována je nejen kvalita, ale i kvantita signálu Pro její realizaci si vytvořil IS řadu prostředků, mezi které patří i protilátky, komplement a interleukiny. Vzhledem k tomu, že IS se rozhoduje na základě vyhodnocení několika signálů, nemůže být jeho logika booleanovská, ale je „fuzzy“ !!! Leung Q., Bentwich Z.: Scand.J.Immunol. 2002, 56, 224-232
Prostředky a nástroje IS nejsou založeny na přísné specifičnosti!
Imunoanalytické metody jsou metody založené na reakci antigenů s protilátkami, a proto nemohou již z principu poskytovat přísně specifické výsledky
Blázen • Blázen je člověk, který smýšlí jinak než jeho okolí • Jako blázen může být označován člověk psychicky nemocný, slabomyslný, ale i geniální • Blázen bývá většinou společností tolerován, pokud neprosazuje své myšlenky • Tichý blázen je k ničemu. Jen blázen, který poví, k něčemu je • Blázen promluví jen k tomu, kdo je připravený jej poslouchat • Jako blázen bývá označován člověk trpící šílenstvím (bláznovstvím, nepříčetností), tedy takový, který se neřídí obecně akceptovanými sociálními normami kultury, která jej obklopuje. V hovorové mluvě tak bývá označován jakýkoliv excentrik. Ve středověké kultuře měli blázni důležité místo. (Wikipedia) • Kto s chce blázniť, musí rozum mať. Slovenské přísloví • Na blázna je příliš hloupý (anglické přísloví) • Je sladké být bláznem v pravý čas. Horatius
Civilizační statky jsou soubory idejí a zkušeností, které platí jako všeobecně lidské z podstaty věci, nikoliv z vůle a dekretu určitých lidí. Jan Patočka
…..Civilizační statky vznikají jako odpovědi na skandální otázky, které se náhle vynořují ve společnosti. Ti, kteří je položili, jsou z ní někdy vyhnáni, často pak nacházejí na své otázky špatné odpovědi…… …..Dvě třetiny současné demokracie například jsou odpovědi na otázky, které položil Marx……. Václav Bělohradský: Proč nejsem antikomunistou, Právo, 18. 7. 2009 Civilizační statky jsou v podstatě jen dva – racionální argumentace a etika občanské rovnosti Václav Bělohradský: Čas prozření - Mezi postdemokratickou ekonomikou a demokratickou politikou, Právo, 16.5.2013
Všechno je relativní….. relativní jsou všechny pravdy, ale pak jsou relativní i všechny omyly. Nehodíš, člověče relativní, kamenem po žádném omylu; nemá-li ani kousíček pravdy, tož má aspoň své dobré příčiny, proč vznikl a byl … řekl-li jsem všechno je relativní, uklouzlo mi tím něco docela nerelativistického; neboť hříšné slovo ‘všechno’ páchne zarytým a tajným absolutismem. Pravý relativism musí dospěti k lepšímu poznání: skoro všechno je relativní … definitivní relativism vám praví … jsou věci, jež nejsou relativní. (K.Čapek: Kritika slov)
Každá polarizace vede k extremismu. (Václav Bělohradský)
Imunologie jako hra s možnostmi Ctirad John, SANQUIS 2005, 42, str.11
…… V Renčově „Císařově mimu“ se ve vzrušeném dialogu vyznává vladař Dioglecián: „Já však chci stálost, pevnost, řád.“ Herec Genesius císaře vybízí: „Hledej řád v tom, co se mění.“ …….Domnívám se, že tento dramatický fragment dobře vystihuje imunologii, úsek biologie vystavený neustálým proměnám. Považujeme ji dnes za integrující obor medicíny.……….
