Posouzení IVD: Posouzení IVD: Elecsys® y anti‐HCV II ROCHE Tesařová Eva, Křížová Eva, Pacasová Rita Tesařová Eva, Křížová Eva, Pacasová
8. střešovický transfuzní den ‐ Praha ‐ 26. listopadu 2014
Hepatitis C virus Hepatitis C virus • obalený RNA virus o průměru 50 nm • čeleď Flaviviridae, rod Hepacivirus čeleď Flaviviridae, rod Hepacivirus • objeven před 25 lety; infekce člověka po dobu mnoha staletí h l í • nejčastější parenterálně přenášená infekce j j p p • 3 % celosvětové populace • prevalence HCV v ČR < Č 0,5 %
Způsoby přenosu p yp způsob přenosu není znám 10% zdravotní služby, zdravotní služby transplacentárně 5%
transfuzí (před zahájením p povinného screeningu) g ) 10%
sexuální přenos 15%
infekce HCV 0%
nitrožilní uživatelé drog 60%
HCV v ČR, ČR celkem, lk IDU a podíl díl IDU 1200
% 100,0
podíl IDU
celkem
90,0
IDU
počet případů ů
1000 80,0
800
69,6 62 5 62,5 58,3
600
57,1
57,3
64,5 59,7
61 6 61,6
62 3 62,3
69,9
70,0
67,6
65,4
62 3 62,3
62 3 62,3
65,2
60,0 50,0
48,0 40,0 400 30,0 20,0 200 10,0 0
0,0
1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012
Screening dárců krve v ZTS Screening dárců krve v ZTS
• povinný screening DK v ČR zahájen v roce 1992 • sérologický test na zjištění přítomnosti anti‐HCV • soustavné zvyšování kvality IVD soustavné zvyšování kvality IVD – detekce přítomnosti protilátek (ELISA, CMIA, ECLIA) – detekce povrchových antigenů (CMIA) – detekce viru (PCR)
Postupy v ZTS Postupy v ZTS • Směrnice Evropského parlamentu a Rady Evropy S ě i E kéh l t R d E – 2002/98 ES, 2004/33 ES, 2005/61 ES a 2005/62 ES
• Zákon Zákon 378/2007 Sb. „o léčivech 378/2007 Sb. „o léčivech“ • Vyhláška 143/2008 Sb. „o lidské krvi“ ukládá při každém odběru provést vyšetření diagnostických vzorků získaných od d dárce dá zahrnující h jí í vyšetření š tř í k průkazu ůk známek á k infekce i f k – virem lidského imunodeficitu typů 1 a 2 (HIV 1 a 2), a to metodou stanovení protilátky a antigenu p24 – virem hepatitidy typu B (HBV), a to metodou stanovení povrchového antigenu – virem hepatitidy typu C (HCV), a to metodou stanovení p y yp ( ), protilátky – syfilis, a to metodou stanovení specifické protilátky proti Treponema pallidum Treponema pallidum
Hodnocení výsledku vyšetření Hodnocení výsledku vyšetření • • • • • •
•
Vyšetření se provádějí ze vzorku krve odebraného v den darování krve za účelem výroby transfuzních přípravků; v odůvodněných a dokumentovaných případech nejdéle 7 dní před darováním krve. V případě negativního výsledku se odebraná krev nebo její složka propustí pro další použití. V případě reaktivního výsledku se vzorek označí jako „iniciálně iniciálně reaktivní reaktivní“ (IR) a vyšetření téhož vzorku se opakuje dvakrát. V případě, že oba výsledky opakovaného vyšetření jsou negativní, interpretuje se celkový výsledek jako „negativní“ a odebraná krev nebo její složka se propustí pro další použití. V případě, žee jeden nebo oba výsledky opakovaného vyšetření jsou reaktivní, o označí načí se vvzorek orek jako „opakovaně reaktivní“ (OR). Vzorky opakovaně reaktivní se odesílají neodkladně ke konfirmačnímu vyšetření do Národní referenční laboratoře Státního zdravotního ústavu v Praze. Konfirmační vyšetření v NRL SZÚ se provádí ze vzorku, který byl použit pro screeningové vyšetření a zahrnuje také testy založené na odlišném principu. V případě pozitivního výsledku konfirmačního vyšetření š tř í anti‐HCV ti HCV se dárce dá t l vyřadí trvale ř dí z odběrů dbě ů a zajistí ji tí se jeho j h poučení č í o významu ý zjištěného jiště éh nálezu pro jeho zdraví. Pokud se jednalo o opakovaný odběr dárce, je zasílán ke konfirmaci do NRL SZÚ archivní vzorek z jeho posledního „negativního“ odběru. Transfuzní přípravky, vyrobené z krve příslušného dárce, jejichž doba použitelnosti probíhá, probíhá se vyřadí z léčebného použití. použití V případě negativních nebo nejasných výsledků konfirmačního vyšetření se dárce vyřadí dočasně z odběrů a vyšetření se opakuje za použití vzorku krve, odebraného v časovém odstupu minimálně 6 měsíců. V případě negativního výsledku konfirmačního vyšetření se dárce považuje za způsobilého k dalším odběrům, a to po uplynutí minimálně 6 měsíců od data odběru posledního vzorku.
Metodika • 2012 firma ROCHE ‐ Elecsys anti‐HCV II – screening anti‐HCV u dárců krve g
• v TTO FN Brno – 2013 – srovnávací studie • vyšetřeno 1 900 vzorků dárců krve ů ů • kvalitativní detekce anti kvalitativní detekce anti – HCV – Elecsys anti‐HCV II, technologie ECLIA, analyzátor Cobas e411 (IVD ROCHE) Cobas e411 (IVD ROCHE) – Architect anti‐HCV, technologie CMIA, analyzátor A hit t i2000SR (IVD ABBOTT) Architect i2000SR (IVD ABBOTT)
Cíl studie Cíl studie • srovnání senzitivity a specificity obou IVD obě IVD v ČR dosažitelná pro ZTS obě IVD v ČR dosažitelná pro ZTS
• • • •
studie rozdělena do 3 skupin studie rozdělena do 3 skupin každá skupina hodnocena zvlášť 4 různé šarže IVD ROCHE 2 různé šarže IVD ABBOTT 2 různé šarže IVD ABBOTT
Skupina 1 Skupina 1 • 1 858 vzorků dárců krve z roku 2013 • vzorky paralelně vyšetřeny oběma IVD vzorky paralelně vyšetřeny oběma IVD • 167 vzorků nových dárců krve, u nichž v minulosti i l i v TTO FN Brno B nebyla b l provedena d kvalitativní detekce na přítomnost anti‐HCV • ostatní vzorky, tj. 1 691 vzorků, bylo při použití IVD ABBOTT v minulosti, minulosti vyhodnoceno jako negativní s ohledem na nepřítomnost anti‐HCV ti HCV
Skupina 2 Skupina 2 • 40 40 archivních vzorků dárců krve z archivních vzorků dárců krve z roku 2008 roku 2008 • vzorky v TTO FN Brno skladovány ‐25°C a nižší • při použití IVD ABBOTT v minulosti získán p reaktivní výsledek ý opakovaně • konfirmací v NRL SZÚ nebyla potvrzena přítomnost řít t anti‐HCV ti HCV
Skupina 3 Skupina 3 • 2 2 archivní vzorky dárců krve z archivní vzorky dárců krve z roku 2008 roku 2008 • vzorky v TTO FN Brno skladovány ‐25°C a nižší • při použití IVD ABBOTT v minulosti získán p reaktivní výsledek ý opakovaně • konfirmací v NRL SZÚ potvrzena přítomnost anti‐HCV ti HCV
Skupina 1 výsledky Skupina 1 ‐ • celkem paralelně vyšetřeno 1 858 vzorků dárců krve, získaných v 2013 • 1 850 vzorků bylo shodně negativních 850 ků b l h d ě i í h • 4 vzorkyy byly y y shodně reaktivní (p (potvrzena pozitivita anti‐HCV v NRL SZÚ, u 2 vzorků zjištěna v TTO FN Brno pozitivita HCV RNA) • u 4 vzorků byl získán neshodný výsledek
4 neshodné výsledky 4 neshodné výsledky • 2 vzorky IVD ABBOTT negativní, IVD ROCHE reaktivní, konfirmace v NRL negativní • falešná reaktivita IVD ROCHE • 2 vzorky IVD ABBOTT reaktivní, IVD ROCHE negativní, konfirmace v NRL nejasná • doporučena opakovaná konfirmace v časovém odstupu 3 měsíců – 1. 1 dárce krve opakovaně nejasný (falešná reaktivita IVD ABBOTT) – 2. dárce nebyl opakovaně konfirmován
Specificita IVD pro skupinu 1 Specificita IVD pro skupinu 1 • specificita IVD ABBOTT pro vzorky skupiny 1 podmínkách TTO FN Brno byla y stanovena na vp 99,95 %, což je výsledek lepší než uvádí výrobce testu v příbalovém letáku ‐ 99,65 99 65 % • specificita IVD ROCHE pro vzorky skupiny 1 v podmínkách í ká h TTO FN Brno byla b l stanovena na 99,89 %, což je výsledek lepší než uvádí výrobce testu v příbalovém letáku ‐ 99,81 %
Skupina 2 výsledky Skupina 2 ‐ POČET VYŠETŘENÍ
IVD ABBOTT
IVD ROCHE
NRL SZÚ
24
reaktivní
negativní g
NEGATIVNÍ
14
reaktivní ki í
negativní i í
opakovaně NEJASNÝ k ě Ý
2
reaktivní
negativní
NEJASNÝ, opakovaná konfirmace neprovedena
Skupina 3 výsledky Skupina 3 ‐
POČET POČET VYŠETŘENÍ
IVD ABBOTT
IVD ROCHE
NRL SZÚ Ú
2
reaktivní
reaktivní
POZITIVNÍ
Souhrn 1 Souhrn 1 • specificita IVD ABBOTT ve skupině 1 ‐ 99,95 % • specificity IVD ROCHE ve skupině 1 specificity IVD ROCHE ve skupině 1 ‐ 99,89 % 99,89 % • u IVD bylo dosaženo lepších hodnot specificity, než udává výrobce ž dá á ý b • 91 % testovaných ý vzorků ((vzorkyy opakovaných p ý dárců krve) bylo v minulosti testováno IVD ABBOTT s negativním výsledkem. výsledkem Z uvedeného důvodu je třeba posuzovat skupinu 1 jako „výhodnější“ ýh d ější“ pro IVD ABBOTT. ABBOTT
Souhrn 2 Souhrn 2 • Všechny vzorky dárců krve, u nichž byla v NRL potvrzena pozitivita anti‐HCV protilátek, byly hodnoceny jako reaktivní, a to jak při použití IVD ABBOTT, tak i při použití IVD ROCHE. • U 40 vzorků byl při použití IVD ROCHE získán, shodně s NRL, negativní výsledek ve 24 případech, ve 14 případech neprokázána v NRL souvislost s HCV infekcí (na rozdíl od falešné reaktivity IVD ABBOTT); 2 případy nebylo možné opakovaně konfirmovat
Souhrn 3 Souhrn 3
Na základě výše definovaných h d í hodnotíme v TTO FN Brno B IVD ROCHE • s vynikající y j senzitivitou • s vyhovující specificitou pro rutinní použití v ZTS.
výsledků
Počet dárců krve FN Brno konfirmovaných NRL SZÚ CEM v Praze 12
10
p počet osob b ‐ dárců krrve
3
NAT
8 1 6 1 2 4
1
7 4
1
7
1
1 4
2
2 1
2
2 3
1 2
3
3 2
0
1
1
1
1
1
2
1
2 1
1
1
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 HIV
HCV
HBV
LUES
