.'
E
I(
0 NS0 A SIU M
SIOTEKHOLOO I
...
IN DON ESI A
CJ(onnfill 2 CJ(onsorsium <J3foleknol(V1l9ndonesia V/S"
'00
dtJll Oemin(Jl' 9rtJSiond Cf3loleknologl
di Kampus Universitas Muhammadiyah Malang, 20·21 September 1998 ,
• Kongres II KBI dan Seminar Nasional • Kumpulan Bahan Presentasi
dfselenggC1rC1ktJn oleh
%nsorsfum CBfoleknologf 9ndonesftJ,
(
) PUSDITAH UMM
",.
.
(
1 ;'.
102
KULTUR JARINGAN TANAMA N PENGHASIL PESTISIDA NABATI T. M. Ermayanti, Y. Sulistyowati, L. Sari, E. M. R. Siregar dan P.
Simar.juntak
Puslitbang Bioteknologi Ll PI, Jalan Raya Cibinong Km 46 Cibino,ly, 16911 Beberapa tanaman pcnghasil pestisida na bati yaitll Derris spp (d ens), Chrysantemum spp. (kJi.san) dan Azadirachta (mimba) diperbanyak atau ditum buhkan secara kultur jaringan. Media MS dperg un akan sebagai med ia dasar untu k perb anyakan tunas dan kom binasi beberapa sitoki nin dengan auksin ditam bahkan pad a med:a untuk mempercepat pembentukan kalus da n tunas majemuk , Media MS yang me ng andung auksin ISA dipergun akan untuk perbanyakan akar Derris e({iptfca. Diukur dari pertum bu han biomas da n jumah total akar penambahail 0.5 mgll IBA pada media MS ca ir menin gkatka n pertumbuhan akar deris lebih tinggi dibandingkan dengan penambahan 1.0 mgll ISA. KC\lus dall akar deris, tunas krisan, dan kalus mimba telah dianalisis secara kimia untuk melihat kandungan bahan aktifnya yang dibandingkan d~ngan ta03man yang tumbuh dilapangan, Transformasi batang Derris elliptica dengan bebera pa galur Agrobacterium dilakukan untuk meningkatkan kandungan rotenon yang berbentuk pada akar. Pe n ~\itian ini berg una untuk mengetahui kandungan bahan aktif yang dihasilkan oleh material in-vitro dan modifikasi kultur in-vitro diharapkan dengan meningkatkan kandu r:ga n bahan aktif tertentu. Kandu ngan bahan aktif pestisida yang diharapkan dari ketiga spesies yang dia m:)ti adal ah rolenon da ri deris, pirelrin da ri krisan dan azadirahtin dari mimba. '
D. DAFT AR PESERT A SEMI NAR NASIONAL BIOT EKNOLOGI
MALANG, 21 SEPTEMBER 1998
No. Reg .
N~
Mhs
Budlas:n Wa;,yuntari. MS
PAU Bio.teknologi IP B (Lab. Mikrobiologi & Biokimia)
002
Nurya tl Juli . Ora . MS .
Biologi. FM IPA, ITB ILab. Mikrobiologi)
003
Oea Indnani Astuti . SSi.
004
Pingkan Adiliawati , Dr", MS.
005
Livia R. Tanjunl/ . MS . Tri Widlyanlo . MSi. M. Badioeri . Drs. Djamhuriyah 5 Cai d. Ora . Dahrul Syah
Biologi·FMI PA ITS (La b. Mikrobiolo gi) ' 8iologi , FMIPA , ITB 'Lab. Mikrobiologi) Puslitbang Limnologi LlPI
Puslitbang Limnologi LlPI Puslilbang Limno l0gi LlPI Puslilbaroy Limnologi LlPI Mhs PAU 8ioleknologi IPB (L ab. Mlkrobiolo!Ji & Bioki rT}!!L_ _ PAU Bioteknologi IP B Mhs (L ab. Mikrobiologi & Biokimia) Uniit Penelitian Bioleknologi Perkebunan Tekni k Lingl
007 008 009
~
Nurul Alni , Ora.
011
Didiek Hadjar Goenadi, Dr, APU . 012 Mindri any Syafila Dr. 013 Marisa HandaLani , Ir. 01 4 Titin Supriatun , Dr. MS . 0 15 Yel y Yusri Gani, Ora, MS. -;- _ .. aii's"'a-ri usl. H, Ora , 016 MS.
01 8 Al i Mustofa Surur 017 Tin!in Hartati P, Ora, MS . 01 9 M. Ahkam Subroto , Dr. 020 Tjandra Chrismadha 021 Ambar Pertiwiningrum 022 A. Napoleon Dlnl Arl ani 024 " Elika Joenia rti Jo ni Kusnadi 026 Ag ustin K. 027 Jajai1 Fachiroh 028 Yanis W oro W .R. 029 Ar yogi , lr
-salam
023
r-m-' ( )
Ket
001
006
C)
InsUtu sl
'000--'
-LUkiria-n-Alf·uricJhy . Di ll
031
I Didik Eko Wahyonc, Ir
032
Dicky Pa mungkas , Ir
03:J 034 035
~owo
J . Pardsl, Ors , MS Sri HiSrda ning5ih
E. GlJmbira Sa id, Dr
Faperta. Univ. J end. Soedirman Biologi . FMIP A, UNP AD ?uslit bJ ng Biotekn olo gi LlPI Pu slilban g Limnologi LlPI S2 8ioteknologi UG M S2 Bioteknologi UGM S'2 Blotukno:og l UG M S2 Bioteknologl UGM S2 Bioleknol ogi UGM S2 Bioleknologi UGM S2 Biotekn ologi UG M S2 Bioteknologi UG M Inst al asi Penelitia n & Pengkaj ian Teknologi Pertanian (IPPTP) Gralj Inalalnl Po nelilla n & P4Ingkojlg n
Teknologi Pertanian (IPPTP) Grall
Instalasi Penelitian & Pengkajian Teknologi Perta nian (IPPTP) Grali Ins!alasi Penelitian & Pengkajia n Teknologl Pertanian (IP PTP)Grati S3 Agro nomllPB Bal ai Penelitli nTanl mln Kllclln g· kaclnga n dan Umbi-umbian (Balltkabl) Magi$ter Managemen Agribisni$ lMMA}IPB .
Mhs Mhs Mh5 Mhs Mhs Mhs ~hs
M~
Mhs
"
25 Susunan Acara
Seminar Nasional Bioteknologi
Senin. 21 September 1996
07.3) - C6.oo
Pendaftaran Peserta
C6.oo - 00.00
Pembukaan Seminar • Laporan Ketua Panitla Pelaksana • Sambutan Ketua KBI • SambUtan Reider UMMlMenteri Agama RI • Sambutan dan Pembukaan Resmi oleh Menristek
00.00 - 00.15
Rehat Kopi
00.1 5 - 00.45
Peresmian MAKSI •. Keynote Speech: " Kebijakan Nasional dalam Bidang Penelitian dan Penerapan Teknologi. Khususnya Bioteknologi dalam era Globalisaai" Moderator
00.45 - 11 .00
11.00 - 12.15
Sesl1 : Diskusi Panel tentang "Kebijakan dan
Stralegi Pengembaogan Bioteknologi di
Indonesia"
• Bloteknologi Pertanian Bioteknologi Industri • Bioteknologi Kesehatan Moderator Sesl 2 : Dislrusi Panel tentaog "Perkembangan
-Bioteknologj Regional
• The Role of Microbial Culture Collections For the Development of Biotechnology iI" The Region Agricultural Biotechnology in the Netherlands Examples of Public-Private Patnership in the Field The Genus Thermoplasma and Archeal Teraeter Lipid Moderator
12.15 - 12.3)
Presentasi PT. Mosanto SafetY Assestment of Genetically Engineered
Soybean Tolerant to Herbicide Roundup
12.3) - 13.15
ISOMASI
13.15 - 14.00
Presentasi Poster
14.00 - 15.15
Sesl 3 : Diskusi Panel tentang "Review HasH-
Hasil Penelitian sebagai Keberhasilan
Bioteknologi di Indonesia"
• Bioteknologi Pertanian Bioteknologi Industri • Bioteknologi Kesehatan Moderator
Panitia
Dr. Soedjalmiko Dr. A. Azis Darwis Prof. Dr. Malik Fajar Prof. Dr. Zuhal
Prof. Dr. Tien R.M. Prof. Dr. Zuhal
Prof. Dr. Oel Ban Uang
J
Dr. A. Azis Darwis Prof. Dr. Oel Ban Liang -../' Prof. Dr. A.Salam M. Sufro .. Dr. A. Machmud Thohari
Prof. Dr. Indrawati Gandjar
. Dr. A.P .M. den Nij& Dr. G.J .H. Grubben Dr. H.J. Frelsleben Prof. Dr. Joedoro Soedarsono Ibu Kartika Adiwilaga PhD
Dr. Soediono Moeljoprawirn Dr. Endang Sukara Dr. Umar A. Janie Prof. Dr. Wisjnuprapto
No . Reg.
Nama
036 007 038 039 040 041 042 043 044
Dameria Huta barat. Ora Pudji Hastuti, Ir, Dr Tyas Utami , Ir, Dr Siti Ari Budhiyan ti, Ir lehda Chayati , Ir Usdar I. Sudirman , Ir , Dr Sri Widowati, Ir, MAppSe Bambang Sunarko, Ir , Dr Yadi Setiad i, Dr
045
Latifah K. Darussman, Ir , Dr
046
Ricksy Prematuri , Ir, MS
047
Yulin Lesia ri, Ir , Dr
In stltusl BATAN - PA IR Fak. Tekn olo gi Pertanl an UGM Teknologi Pertanian UGM Teknologi Pertanian UGM Teknologi Pertanian UGM Lab . Mikologi . Biologi, FMIPA IP B Balitbio Tanaman Pangan Puslitbang Biologi LlPI PAU Biotekno logi IP B
(Lab. Bioteknol ogi Kehutanan)
PAU Bioteknologi IP B (Lab. Bioteknologi Ke hutanan) PA U Bioteknologi IP B
(L ab . Bioteknologi Kehutanan)
PAU Bioteknologi IPB (Lab. Bioteknol og i Kehutanan) PAU Bioteknologi IPB
(L ab. Bioteknologi Ke hutanan)
PAU Bioteknologi IPB (L ab. Bioteknologi Kehutanan) PAU Bioteknologi IPB (Lab. Bioteknologi Keh ut anan) PAU Bioteknologi IPB (Lab. Bioteknologi Kehutanan) PAU Bioteknologi IPB (Lab. Bioteknologi Kehutanan) Puslitban g Bioteknologi LlPI Puslitba ng Bioteknologi LlPI Puslitbang Bioteknol ogi LlPI PAU Bioteknologi IP B (Lab. Mikrobiologi & Biokimia) Biology, FMIP A UN IB RAW Ke huta nan UGM
: Ket
;
, I
,, ;
I I
I
048
Nampiah So'e,karno . Ir . Dr
049
Noor F aiqoh, Ir
050
Wiwik Ekyastuti
051
Hanna Artut l
052
Zulfarina
053
05 7 058
N. Sri Hart a! i Tri Muji Ermayanti Enny Sudarmonowali, Or Wibowo Mangunwa rdoyo , MS Sutiman B. Soc mitro Mohammad Na ier.1 , Dr
059
Al ex Ha rtan a, Dr
PAU IIm u Hayat IPB (Lab. Biologi Tum buhan)
060
Edy F. Lengkon g, Ir
PAU II mu Hayat IPB (La b. Biologi Tum buh an)
Mhs
061
Nou ke L. Mawikere , Ir
PAU IImu Hayat IPB (L ab. Biologi Tumbuhan )
Mhs
054 055 056
--._ -- - - -. --.- -------- -002' - - Se mu el D. Runtunuwu, Ir , PA'U IImu Hayat IPB
MS
(Lab. Biologi Tumbuhan)
063
Mu hamma d Jusu f, Ir, Dr
064
Syaiful Anwar, If, MS i
065
Vivi Anggraeni , Ir
066
Suhafsono, Ir , Of
067
Rosmimik, Dra
PAU Bioteknologi IPB (Lab. Biologi Molekular & Selular Tana man) PAU Bioteknologi IPB (Lab. Biologi Molekular & Selulaf Tanaman) PAU Bioteknologi IP B (Lab. Biologi Molekular & Selular Tanaman) PAU Bioteknologi IPB (Lab. Blologi Molekular & Selular Tanaman) Balitbio Tanaman Pangan
I ! Mhri Mhs Mhs
Mhs
-----Mhs
·Mhs
Mhs
h.'ULTUR JARINGAN BEBERAPA TANAt1\IAN PENGlUSll. PESTISIDA NAHATI T. M. Ermayanti, \'. Sulistyowati, 1. Sari. E. ~L R.
S ir~;U'
dm P Simanjuntak
Puslitbang Bioteknologi LIP!, Jalan Raya Bogor Km 46
o
Cibinon~.
16911
Tissue ('u ltur-<: ofP e ~l cide Pr o du-:m~ Plants. Tj~sue cUlture of Uc ,rris srp. ,Yt f)'$anthemum '1Ior~,t'ol iu"1 . :md Az.:;c/frc:ch!:. indl= '~a s est.abllsht- d in ordet' tl~ produ':- e bioadlve '~ o n~0und s for pesticides, l~atural1y, thes e spl"-cies produce rotenone, p),T emnn, and azadiracht in from Dern:: . Chrysamh£mwll and neem, respective iy, MS [fl",,j iurY! containing gvI"i",e leve ls o f auxins and cytokinins was us ed to set c allus and shoot cultures o fth", three ~'~': ies. and :;; li quid me dium 'w'as ut.ilized to culture roo t>: (,f L'<:rns e£lipllca. Chemical analys ls W;J S done to assess the bio3.cti',1€ compoufld of fn v (t "o materials of these sp e('ie ~ and the results were compared WIth that (If the o ri ginal plants. Tra'1sfom1ation of D, ellip tl ..:u shoots gro',:m in v itro with some strain~ of Agrobc;.derium Vias als o o:cnducted to increase the r otenone production Gr01;\-m of D eillp!ica untrans formed roots in MS liquid medium ,:,)ntaining 0 .5 m:;:! IBA ',vas hi gher than growth of r c'ols cultured in M S medium containing 1.0 mg/l IBA Abst rak Feber-apa tamrn an pengtmi l pcstisida nabati yaitu eeris spp. (dens). C1lfY$a.ntemum mor£folium (l-:ri!;a.'1) dan A::adirc:d---.tc: mdicc: (m imba) diperbanyak. atau diturn buhkan secara kultur j aringan. l:.1edia £./13 dipergunakan seb~a i media da!1a;-" LlntUy. peroanyabm tU:1aS dan kombin~cS i beberapa sitokinin dengan auks in ditambahkan pacta meC!3 unt.l.lk rner(:;:'ercepat pembentukan blus dan tunas majemuk. Medi a M3 yang mengandung auks in IBA .-iiFere:un?y.a'l '_lr;t'j~ FITC.a.'1),?y'(!f, uhr De ," ns iptio.:z. D iuhtr dar i perta.rnbal,an bi omas dar"! j tlT!1! ah to tal akar. penarnlA Jnn i} ,5 mw1 IBA pada mdia 1\.13 ( air m eningbtkan p
en
Kata ktmci : Denis spp., .A.zadirachta indicCl, Chrysanthemwn l.'lOr{folium, pesrisida nabati. kultur jaring:m.
K O NSORS I UM
BIOTEKNOLOGI
INDONES I A
1
b3~1:m bW1~~ _ . . . \':m~ . -..J
PE~"'DAIIULlt\.;~
Penelitian tentang tanaman
p~gha~
pestisida :l1ami (nahan) dilakukan
jaringan (Zieg,
ft .
rntmnbuhkan melalui kultur
d . 1983).
Penelitian ini meliputi kultur ja..'ingan yaitu kultur
se b a~
altematif Wltuk mendapatkan bahan
kalus, induksi akar dan kalus. kultur tunas. analisis kirnia
pellgendalian hama dan penyakit tanaman.
dengan metode KLT (kromatop'ati lapis upis) dan
PmggtID3an pc:stisida nabati be~i fat lebih aman
KCKT (kroID3tografi eair kinerja tinggi) dan tr:mforrnasi
dibandingkan dengan pestisida sintesis karena
pcstisida ffiltesis mempurryai beberapa peng3I1.1h
lmtnk mendapatkan akar rambut. Optimisasi mdia
negatif terutama bagi lingkwlgan karen a sitat
Imtuk pertumbuhan akar deris iliIalmk:m dengan
residurrya yang sulit terurai. Setelah beberapa
membandingkan pemberian 3Uksin de ngan kad3r yang
kali pemakaian sering menimbulkan kekebalan
berbeda. Sedangkan pada krisan. dibkukan pt rba.!lyakan
terhadap hama atau bahkan dapat menimbulkan
umas yang diinisiasi dan intemodus, dan hasil kultur :'1
terbentuknya biotipe barn sebingga mendorong
vitro ini dian:llisis secara kimia dibanuin::--km den1:-:m
memberi:m dosis yang lebih ting.gi dari
tanaman induknya (tanaman ex vitro ), B\lJer3pfi ba~an
~ebe1umnya,
tan:unan
Penggwlaan bahan beracun yang
herasaJ d:ui ekstrak tauaman untuk memb tffiUh
dan mimba dil-:ulturkal1 untuk rn~nd::tpat.!zan
kalm dan tunas secara in
vitro .
ser:mgga, cend:lwan at:mpun nematoda UITlumrrYJ tidak meaimbull;an pengamh negatif terhadap manusia dan he\van,
C)
fit au
BAHAN DAl~ CARA KER.JA
tingkat
keraclmannya sangat rendah, karma bahan·
a. Delfts (dens)
bahan aktifyang dikandwlg oleh [anaman
Batang dan daun Derris elliptic(I, D,
mempurryai sifat mudah terurai oleh panas dan
heptc2p!Jy£Ia. dan D. micrapJr;'ia yang masih
udara.
muds dan tanaman yang ditumbuhkm di pot
Penelitian ini menggunakan tiga ta.'1arnan yaitu Daris spp. (detis), Azadi.ra chla indica.
diisolasi dan direndam dal:uu lamtan benlate
3~;)
fiI.n0~i.,.J3
unmk selanjutrrya direllJaTn dalam
((05% H!!Ch selama 3 menit dan dlbil~E den f ' 111 -..J
..
_"
(klisan). Seeru'a alruni ketiga jt!nis lrul:unrul ini
aquades steri14 ·5 kali. Selanjutrrya c:kspian
m~ngim dung. bahan aktif yang b::rguna lmtuk
dittnnbuhkan pacta media M3
pestisida yaitu rotenon dari deris. azadirachtin
Skoog, 1962) yang mensandung bcrb:l?a.i zat
dan mimba dan rifenin d:ui krisan . PenrlJ1}sil
peng:lIU1 tumbuh lUltuk
men ~jnduk~ i
pir.::nin tetting.gi diperoleh d::ui C.
pertumbuhan kalu s dan
tl Hl3 S.
alaI!
(1fur:!.~hi(!e
&.
Kalus d::'1 l'a ta!lr:
ualUl dipuldallkan ke media
['..1:)
pada{ va{j~
ll1 ~ll1 pcr() H1 p ~!1UInbuhan
t ·nr:lk
UjW1~
b:llk..
ab r yang lebih
ab r yang nU11buh di media padat
yang sam:! dengall aknr yang terbenmk dan kalus.
dipotong s ~ :mjang 1-2 em. kemudian dipindahk.:m pada media MS eair yang
dan dari tanarnan yang tumbuh di rumah bea
m~llsan dlUlg
(ex vitl'C') dilakukan
1 atau 0.5 tugl1 IBA. Sebagai
p:mbanding abr ditanam pada media M3 eair tanpa
C)
p~nambahan
zat pengatur tumbuh. Akar
dengan cara ekstraksi bahan
kering tanaman meng,gunakan pelamt metanol telmis sebanyak 3 kali.
k~mudian
dipekatkan.
diinkubasi pada suhu 28·30 "c eli alas sbaker
KLT dilakukan dengan menggtmakan sistem
yang metllplUlyai 80 rpm. Pettumbuhan akar
pelamt heksan : etil asetat dengan perbandingan
maenati dengan eara memanen akar riap minggu,
4 : 1 dan 2 : 1; serta petroietnIl eter dan eril
kemudian akar ditimbang tUltuk mendapatkan
asetat (9 : 1). Sebagai pembanding digunak.:lll
berat basah dan berat keringnya. Selain itu
standar rotenon. Analisis KCKT dilakukan
jwnlah tot.al akar juga dihittmg. Pengamatan
dellgan menggunakan kolom Ultrasphere . Si (25
dilakuk:ll1 dengan riga ulangan untuk setiap kali
em x ~. 6 mm LD), duen petrolemn eter : etil
pan~n.
l )
A.nalisis kimia akar dati hasil kultur in \l tuo
Dengarl percobaan yang terpisah akar
asetat = 9 : 1, In-heksan : CHC~
= 3 : 2, flow
ditumbuhkan pada media MS carr yang
rate : 1. 5 ml!menit. Panjang gelombang yang
mengandwlg 1 mg1 IBA dan setelah 2 dan 4 t :lli
dicoba adalah 254 nm. Volume injeksi adalall 20
subkllltur akar dipanen, ditimbarlg b::rat basah
pI dengan pe1arut sampe1 petroleum benzeTI.
dan berat keringrrya kemudian diamilisis secar:J.
Konsentrasi stand:.rr ad:l13h 1 mg/ml.. Pada
KLT (kromatografi lapis tipis) dan KCKT
analisis KCKT dilihat nilai Rt (retention time)
(kromatografi cair kinerja ting,gi).
yang ada pada s:nnpel yang diinjeksikan,
Transfolmasi dilakukan dengan eara menginfeksi batang. dallll atau kalus dellgan
kemudian dib andingkan dengan nilai Rt pada standar rotmon.
beberapa galur Agrobacterium. Ekspl:m diinfeksi dengan carn menceIupkan eksplan ke daIam
h. Ch.rsanlJiemum morifolium
suspensi bakteri yang telah dittunbuhkan selama
Tlmas
kriS3D
(krisan)
dari t:maman yang berblmga
24 jam pada media LB atau YMB. Eksplan
merah. putih dankuning disteri1isasi dengan
kemudian ditanarn pad3 media MS padat tanp:t
menggunak.an lanlt3.fJ 50% kloroks sehma 1(J
: at pengatur twnbuh dan diinkubasi di lUang
menit 3tau 0.02% ~~2 selama 2 menit.
gd ap ber;;:uhu 26-28 0c. Akrrr h3~i! rran!'fonna <;: i
S~ h rlum
~ daJljlltnya
ekspiall direndam ke dahm lamtan fungisiu3
diisolasi dan ditallam pada liKdia MS
diIakllk3n stcriliC;: 3.si tcrlcblh (h.h.lIllI
cltir tllnpa penambahan zat pengafur nnnbuh.
benlate
Akar hasil transfon1l3si diin.kubasi dengan cara
penceluParl ke dalam etanol 70% sd:una 1
3
~dama
30 menit dilanjutkan dC'Hgan
m~i1jt.
Sctcbh
::Jquad~!;
~te!ilis:Ei
stern scbaIIyak 4·5 h:JJi. Ru as yanf2
mempunym S::ml b\lku dita..'1a...'11 pada media
lJ
~c l3ma
1 l11erut dan kcmudian direndrun dJlam
laflltan
O.U5~~J H~Ch
d:;:pl:lJl tlicllci d':l1g:m
~1S
k:llus dJri bat:mg dil::Jkuk:m dengaTI c:rra
v:lng lllengandung 2 mg:1 kinetin dan 0.0:: mg/l
memotong baiang dengan tlkuran panjang 1-2
!'lA.A i
em krnmdian mrnanamllva . nada
I1tau
deng:m prllambahall 1U
.
m~dia ~fS
mg.'! GA j C{2) (Earle d:lIlla.l'1g11::111::. 19'::',:))
PJd3t yang. Illen~andllng kruagai komuina"j
S ~tdah b~J1!mur
zat pengat!u' tumbuh. KOfiledoll Jipot011g
4
Illjn.~t'"
ilmns (iipanen dan
dihitung jumlah tunas majemut yang terb entuk.
::::C 3f3 membuiur menj3di dua bagnn
Pada perco baan teq)isah, sdelah 3 dan 5 l;.ali
kemudian
:o-ubkultur. tunas dipancn. ditimbang ber:Jt basoh
mmg311dung beb~rapa kombina::j z:n pmg:Jnlf
dan berat keringnya. Peng,eringan tunas
tumlmh (T!lbell).
pada media yan~
(buku) dibkukan dengrul cam menanam ekspJan
ma.'1 gan dengan suhu l1l:mg biasa. Turla~ kri~:m diekstraksi dengan
mtnggunak:m pelal11t petroleum
mellrulan~'a
Pcmbcnulkan nlnas S:mlping dari intcmQdus
dilakukan dengarl car:] h'ring angin di daJam
e t ~r
pada media MS tanpa zat pengatur tumbuh atau dan
y~ll1g I1k 'Il s andung
BAP. l(u1tur tunas dari
m<:t ::llJo l ;::~pC'rti d3Jam meto dc Z,eig <'t d. (198]) .
>:l nbrio dilakubn dmgcm carl'!
Sete!:lh dipisahkan masing,-masing ekm-at
embt10 d:11i biji yang sudah disterilisasi kemudian
dipd~atkan
ditaI1:1111 pada media 1..,.lS padat tanpa :at
:K 11
lJ
sdalTIa 5 merut IJHillksi
.13.11
dan dianalisis k bih 1:L'1jul d; llgan
p ~ ngatur
KCKT. Untuk KLT dil'1lI1aKan lamtan ~,
pengi:mbang petroielIDl der dan etil asdat (9 : 1). Sda.'1jutnya dru;
me ngi~ ola5i
twnbuh atau yang mengandwlg 1 mg!1
BAP.
prom KLT semua sanlpeJ HASIL DAi't PEl\rnAHASA~~
yang diekstraksi dan standar pird l1n dihitung nilai Rf-nya (reta.l'dasi faktor) . Analisis KJ-T dan
KCKT dilakukan menumt prose dnr Zdg tt d.
I.
il933). Pelilinmgan K3dru piret:rln pada sampd
dilaktllian d::ng:m mdihat
ar~a
D~ris
(Derris spp.)
Batang dan daun yang masih rdatif muda
dari :'rtiap ptmC3.K
,:i.Tt'rgun3k:l1l
kemudirul dib rm dilltkan dt ng:lll ,;:tand~u .
~eb3gai
e-k ,:,plan mampu
m::mbentuk blus pada J jcnis Dr.rr;:. deng:m pena.. nbah:m1 m;,-t ~A · D p:Jda media MS
(T:1bel 2). F;:'lIambah:m :ill kelapa
c. .17.aciirachia indica (ruimb,,) ::k !lli";} ~ ! b~ raTJ~
p~lllb-:lIruk3.11
dan K(·tlkd'-·ll llliIJIba
Low: p:lda
m eml1~rnbai
d:~ plall batan~
U
lUt:! ,lihkuk 11 I d::'tlf;.311 (:U3 ;n:: lrlJ.J am :'k'~: !3n
: ":::;/'., ':,,. Kalu:;
;131::;111 13rlltan tili!gi ~jda benJ:JI ': 3'; ;, .~d aJJl:] 30
2. lllill~~u ~ ~Id\lh 13.11:1111. Rata-rnt!.! pcmbentukall
!ll~nit.
kalm musih n:unpak l3..rnbat settingsa masili penu
dipindahkan ke dalam
~t anol
70% 4
Tl11llai
krbentul; dal:Jm
W3.ldl l
dilakukan optimasi media unmk mendapatkan
mengalami pencoklaran kemudian filti
kalus yang memplmyai pertumbuhan yang cep at
han setelah tanam.
Dengan menggunakan batang atau daun yang.
Berbagai kombinasi z:n pmganrr nnnbuh
masih relatif muda tidak diJumpai terjadinya
sitokinin dicobakan untuk induksi tunas sampin~ D.
pencoklatan jaringan.
eifiptica dan e k~lan batang. Ha$il percobaan
Semua kalus diPi:rbJilyak pada media :MS
u
:1Uk..~
dan
menunjukbn bahwa media temail\. tUltuk.stimul39
padat yang mengandung 2 mgi12,4-D. KahlS
pembenrukan tunas sanlPing adalah media MS yang
yang berasal dan batang D. efffplicQ tumbuh
mengandlmg 2 mg,1 kinetin dan 0.5 mg.." NA:\. rad3
lebih cepat dari kalus jenis yang lainnya sehing,g,a
media ini 2-5 tunas samping dapnt terbentuk 2-] seltiah
sebagian kalus dipindahkan pada media MS yang
tanam. Setelah 4 minggu dalam media ini tunas mampu
mengandwlg IDA untuk menb1nduksi
membentuk akar. Nanmn pembentukan akar menjadi
pembentukan akar advcntif Dcngan
lcbih cepat apabila tunas dipindahkan pada media MS
pena.l11bahan 1 mg;1 IDA sebanyak 1-4 akar "
dar-at mtmcul pada
~etiap
kalus, Akar kemudian
.
diisolasi dan dipindahJ.;,:m ke dalam meilia cair untuk pcrbanyakan.
lJ
b~b er:!p3
P~rtu mbuhan
yang mengandullg 1 mg.;1 IDA. Hasil transfOImasi eksplan deris dengan k berapa galur Agrabacteriwn tellera p3da laud 3. Dari Tabel] dapat dilihat balJwa aJ;:u
akar yang
ditanam pada media yang mengandung 0.5 mg/l
dapat terbentuk dati bakteri galur RIOOO dan
rnA lebih cepat rncilcapai rase cksponensia/
ATCC 15834. Dua akar hasil transfomlasi
pnu pada minggu ke lima. sedangk:m akar pada
dengan bakteri galur Rl000. keduanya tllmbull
media yang, mengandung 1 mg,1 IBA mencapai
dan ekspl:l1l batang, satu akar muncul dari
fase
eksponen~ial
pada ll1ing5"lJ ke 6 (Gambar 1
pangkal dan satu lagi mWlcul drui UjWlg batang
dan 2). Setdah rninggu ke 8 a/au 9, pada kedua
antara 6-j rninggu setelah infcksi Kedua akar
media. pertwnbuhan akar mulai menurun dan
kemudian diisolasi drul diturpbuhkan pada media
pengamatan dihentikan setelah panen rninggll ke
MS cairo Akar yang diisolasi dari pangkal tems
10 kar.:.na akar
~lldah
mulai nampak kecokIatan.
tumbuh dengan relatif cepat dan membentuk
Pertumbuh:m akar pada media 0,5 mg:1 IDA juga
akar·akar lareral. sedangkan akar yang berasal
1ebih baik dilihat dari pembentukan akar·akal'
dari ujlll1g batang mati dalruu media carr 1
I3t:ralnya (Gambar 3). Pada media ini hingp
minggu setdah tr3IIsfer. Oprimisasi media untuk
minggu ke 10 .iuIIllah Jkar lateralmasih terns
pertumbuhan akar hasil tramfollllJsi belwu
mmingkat namun ujung. njllng ak ar rerliil3f mulai
dilakllkan karen a masih terbatasnya m;Herial. Hal
(oUat. Ah:U y:Ulg. dirumbuhk:ll1 PJda medi ::t MS
semp a ju~';3 terj adi pada akar hasil tr:tl1:< folm asi
tanpa at peugatur Wllloul} ndak dap at tumb uh,
dengan galur ATCC 15834.
5
Hasil penclitian menunjukkan h:U1'.\"J
d isiensi tr.illsfoJTnasi dells masll
S 3m~3t
:::iry:r:;' :1 :J1:tif iPj !ecara i.'j " it Tc1 juga perlu
rendah.
dilakllk:m.
Dengan demikian masih diperhlk:m b eb~3 penelitian lanjutan untuk meningkatkan d isiemi. Beberapa cara yang tetah
2_Krisan (C morifonum)
b erha~il diTer~lrbn
fn lcnlodm
tl1n ~:taJ
y ang ditan am pada
pada tanarnan lain dianlacanya :JdaIah pelb kuan
m::dia :.'13 yang mengandung kinetin. NAA
asetosiringon (Sheikholasla.m & W~ e k s . 1987 ).
mauptm dengan CiA3 (media Xl dan X2)
pen~rrun:lan
m3fi1pu mmr,hasilkan tunas majemuk (Tabel 4).
jenis guta yang berbecta (CmgdQ ' i.
et.a1.. 1990) atau penambahan auksin Jan
Pembentukan tllllas nampak lebih cepat pada
antiauksin. Bahan-bahan di atas antara lain
media X2 (tC'rjadi serninggu setelah tanam) dan 2
berfungsi mengaktivkan vim lensi gen yan;
lIl11lgf:lI ~ d d ah t::tnam pada media Xl. Rata-rata
tcrdapat daIarn bakterl. Pemilihan eb:plan yang
jurnlah tun a ~ m3jemuk pada internodus yang
tepat juga perlu dilakukan lagi karel!a pad3
di i~iil alll p 'l d ~J
beberapa tanaman jenis
ek~plan
yang
Xl juga lebih tinggi dibandingkan
delltan ekspian yang clit:mam pada media Xl .
diptrgw1akan untuk transfo :masi ~;3.!1 ~~lt
r :1fiJ trkm bunp merah tidak terlihat adanya
TIJemp~llg3m hi
pci1Jh:jhiJll worfologl. tunas dari tanarn::m in vitro
£t.<:.1.,
d isknsi trallsfomlasj (Hlekp
1991: Nguyen Ei. al., 1992).
tila
dib:mdingt ~l
dengarl morfologi tunas
Dm hasil kultur akar D. l'Il;ptic.; yallg
twam :m yang hlmbuh di Iumah kaca, sedang.kan
diinisiasi dan kalus batang diperoieh biom:l';; dari
his::m bung:! putih dan ktming memptmyai datm
2 kali subk.-u1tur (akar in viua 1) pacta mtdi::i. }.1:~
·,:lIlg b-:rbcdl bentuknya dari daun taI1:!Inan yang
yang mengandung 1 mgil rnA
stb ~myak 0.3 0 ~6
mmbuh Jj mmah kaca yaitu lebih keriting
gram berat basah dan 0.1756 gram lJ:L~il ·1 kJIi subkultur (akar in vitro m. Hanya
diba~ an
d<: ll~an
lepi uaU11JTi3.
Dari tl!nas tanaman krisan bunga kuning
pelarut petroleum eter : etil asetat rne n ghajLI.; ~ia
YaD,; ditanam
Ililai Rf dari kedua sampd yang setUpa dellgan
wSlltJktlitm
standar rotenon dan setelah
diko l1 fum a~j
~~b anyak
deng:m
~ ecara
in vitro yang telm
~ eb anyak
3 kaIi
mdiperoleh biomasa
1.6451 g berat kering dan dati 5 kah
:l11:ilisis KeRT menuniukkan bahwa akar in
suLkulIUi lID Jipdoleh 1.0193 gram. Basil
t;:t··o I dan IT mempnnyai
3l13lisis Ki T yairu mlai Rftunas tanaman
53tu
Rt y~Ul1~ 53.1113
uengan standal rotenoll_Dengan di~i.rnI'Hll~aIl b:!l1\va akar
demi~jan
ha<;:11 klllmr
dapat
viU c dan u::ber3pa bagian tanaman ex vitro l
i3riw~~n
men~andU11~' ~eliy aW:l
rotenOll. Pen::-iit1:.tl1
,;dllOjutnY:l (bperluk:m
HIlmI-;
fli
q'''llunjul\kan niJai yang sen Jp a den ~ :m H:L'ldar. H:iil mlalisi; Kn:T memmjuU;all ba.bwa tunas
kU:Ulllhkasi kadar
kn s:m ;.' / 1':(10 kllll111g dan -' mal.lpUB 5 kali
:ut'hlrur tiJak mCilt andung pirellin I (Rt = 3.7)
[otenon drui hlllrur akru' dan upaya p:m!1<~taian 6
J:m II CRt =
~ S)
. namun nm E Lti3lfl kllning
''' It,,) m;!n~andW1g
IDA dipertuk31l untuk menjaga pemIDlbuhan
EX
piretrin 1 dan 11 deugan k3dar
y:mg rel3tif rmd:lh (Tabel
~).
kalus dan mencegah kalus dan terj3dinya
!'-'ihi Rt ke dua
senyawa ini se5uai dengan penelirian Zeig
.:!
penco kJatan (Ke:uney et aI., 1994).
d.
Kotiledon mimba yang ditan3tn pada media
(1983 ). Berdasarkan nilai Rt Itrsebut maka dap al
MS tanpa zat pengarur tumbuh tidak dapat
dikctahui b ah~-a lmtuk tunas kIisan
membentuk kalus. Dengan pen3tnbahan sitokinin
m~rah
f~i I'j:~'..~
dan putih mempunyai kadar piretrin yang
BAP yang dikombLnasikan dengan auksin baik
berbeda-beda bergantung pada umur tun:mTy a.
2,-1-D, L\A atatl IBA, kalus dapat terbentuk
Bunga tidak mengandung piretrin. Hal uri
namun mempul1yai struktur dan warna yang
berlawan3l1 dengan kadar bahan :Iktif y:mg
berbeda-beda Cfabd 7), Kalus rata-rata
terdapat pada C. cineraTia e/ aliwn yang p~d~
I ~rb cntuk
spesies ini bunga mmtpakan bagian t:mlUn:.ul
mempkall media tc:rcepat untuk induksi kalus
yang paling tinggi kandung:lI1 piretrinnya. D:ui
ret3[.!i pada media ini pellu dilakukan subkultur
Tabel 5. dapat dilihat bahwa beberapa
tun a~
2-3 rning{;,'tl setelah tanam. Media MSl
yang kbih cep:lt karena kalus menjadi berwama
tanaman i.>l vitro mempunyai k3dar pir::tI (11 y3n ~.
i·;::: d l::i:.lJ} ::e tdall bemtnlU' 3 minggu. Kadar
kbih tinggJ dib andingkan deIlg
::A-J'i d:m BAP yang ri:!ndah
i 'iWHmi...r1
(m~dia
!\-lS2)
menyckt't::m :;ebagian kalus berkembang
fX vitro.
m::mbcli:1ik aka!. 3. 1\fimba (A. indica)
L'1i"i1Si run as mimba dilakukan
Pembentl.1kan kalus pada mimba yang diinisiasi dati batang rata-rata teljadi 10-14
lli;;mbi:il:J::n. cmbrio dan illtemodus pada media
hm
MS tanpa pembt:rian zat pengatur tumbuh atau
setelah tanam Kalus berl;vama keb.,min:~:m dm
d,'llgan
mempunyai tekstur mabel atau kompa..\.:.
\lt fl ~\S
konsentrasi yang dikombinasikan dcngatl all
majcmuk pada media MS tanpa zat
' ~l;l t::J r " ~
prosentase pembentukan kallls yang belvariasi
han st'tc-Iah t:JnaIll. Tunas majemuk
vang tCllJt::lltilk paua media ini memplmyai
(Tabel6). Tanpa pemberian zat pengatur
pcrnlmbuh:m Y311? tidak bcrbeda dcngan hmas
tumbuh eksplan tidak mampu membentllk Llius.
tungg:!l. Juml:lh tums majemuk yang tITbentuk
SeI:mjutnyn tmUlk perbanyakan kallis
:1daJah ~·3 f1.1J13, ':"k"pbll. Tidal<
l !1\:w::u ;du.\1~' J. f/ Q;' .
1993). Media MS yang m.:ug:mdung BAP
BAP. Embrio dapat tmnbuh
p<:: nf;ar:n iumbuh (T abel 8). Tlmas muncuI
kelapa atau tanpa air kelapa menghasilkan
mg!1 BAP dan 4 m2l11BA (G:}t1tam.
p·~1t3mb3han
ehn bn hembang menjadi tunas tunggal atau
Femberian 3min yang berbeda dengau baba2:u
ilipinu:lhkan pada medi:l :i\lS V~I1:
den~an
Jl'!lllrm:ilit J ~ (\ali
nm ~ ~
uu. t'lJa meJia MS fl Dl
t~r1ihat
adanya
yang tumbuh pad a m ~ di:J
yan~ lIlengandwl~
Img;i
1', '. ;' , ' ltIU~ cmlJ!io yang tumbuh membentuk 7
tunas majemuk Sampai dengan aldlir
Kotiledon mimba merupakan eksplan terb:lit
pengamatan jumJah hlnaS yang terbentuk belum
lmtuk
dapat dihitlmg karma masih terlalu ked!. Secara
merupaI,.an
umum terlihat bahwa masing masing eksplan
tunas majemuk.. Eksplan yang dianlhillangsung
yang tumbnh paJa m-:dia yang mtngandtmg
dan tanaman
BAP mcmpunyai lunas majemuk kbih d:ui dua
kontanlln3Si yang sangat tillsg).
"m!!~
p~mbl:nnlkan
terb aiJ< tmruk pembentukan
dewa~a
memplUTyai tingkat
per ebplan.
~;f:l5a1ah
yang dfuad api dalarn percob am
D.,-\FfAR PUSTAKA
inisiasi tunas sampinf[ uaJi c'kspJan intemodus
L
.Earle. E.D.
~\
R.W. Langhans. 1974.
adalah kontaminasi. Komarninasi dJri eksplm
Propagation 'v"ctu:r"Santhemum in \;tro. "
embdo jauh lebih rendall dib:mdingk:m dcll:::an
.l.tdtiple picmiets from shoot tips 02nd chI?
kontarninasi yang teriadi pada cksphn.
establishment oftissue cuituTes, J. Amer.
intemodus. Pen:unbahal! BAT (0,3 -1 iil~' 1) P:ldil
Soc. Hort. Sci. 99 (2) : 128·132.
medi~ !vIS tidak berha~ii mcmri.!T!uJil~i
pertlL'11buhan tunas ltlajemuk dmi
'j
,~t~pbn
Gant.am, V.K., K. Nanda &: S.c. Gupta. 1993 . Dev elopment
tunas hlllggal.
(fsh ~~ots
.:;no' roots in
A . •1iSS. - a mw.'i cinaI tre e. Plant CelL Tis~ue
KE S]},IPULA.:.~ )
pk~plan
blus. dan embrio
J.
and
Or~an
Culture. 34 : 13 ·18.
Kearn ey, M., E.J. Allan, J.E . Hook('r & A.J . Mordu e. 1994. ArU{feedant f,;,'fects of
Pembentukan kalllS , :Ll{ar d:lri kllus dan tunas delis terutama D. cflipifca telall b~rhasil
ir; vftro cultu.re extracts ofth e neem tree,
didapat pada media lvIS y :mg dirmldifikaci.
Azadirachta indica againts the desrt locust (Sd listocerca gregaria (Forslcal)). Plant
berhasil mendapatkan akar, nanlUl! efi ::-i:mi
CeU. Tissue and ~.
transfonnasi tnasih pel Iii dituigkatkan. HJ'
Mllrashig~
Or~ an
Culture. 37 : 67·71.
T. and Sko og. F. (1962) A
3l1a1isis KCKT menunjukkm h~J m'J akar dens
n:vised medtu.'7I fo r rapid g1'owth and
S~Clra in
biocssC)-'s with tobacco tisw e culture.
yang dihllnbuhkan
rOfenon seperti pad3 :>kar
vitr,)
m;;n~:mrlung
nan f!lJlarnan
!'~: ".·t~·'
rhv~iol(l ~
Tunas kIis:ll1 in \, i u ,-, m;:lllpl lilyai k:mduIIgJ.l1
pirerrin yang lebih tinggi
rel1dah
se hing~a
P13marurn. 15 : 47).49 7 .
ShrikhiUldt, M .• S.R. Thengane & A.F.
di b alldin~k:i!i de n ~,:m
diperlukall beberap;'!
P~' T~ c, b;Jan
-\.: JdiraclJla indica A. .Juss. In \itro C:U. De\'. Biol 29P : 38-42.
8
6.
Zeig, R.G., S.W. Zitto & E ..I. Staba.
Acad. Sci. USA. 87 : 6708-6712.
1983. Selection o.lhigh flJ't't rin p roduci;,g tissue cultures. Pbnta ~f ~dic a. 48 : 88-91. i.
SheikllOlaslam. S.N. & D. P. 1987.
A CftOSy rI'1gC''1!'
thaliat13 explants
Phdep . M., A. Pf'tit, L. Martin. E.
Duhoux &. J . Tempe. 1991.
~'eeks .
p'C'!'!Z ot es high
veltlcill:lta Lam. Biotechnoloey. 9 : 461
by Agrobacterrum
tume ficiens. Plant :r-.lol. BioI. 8, 291·298. 8.
9.
~66 .
10. Nguyen, C., F. Dourgaud, P. Forlot &.
Cangt"losi, G., R.G. Ankrnbauer. &
E.W. Nester. 1990. Sugar induces the
A. Guckert. 1992. Establishment of
Agrobacterium v irulence gene through a
hairy Toot cz.Jiures ~fPsoraIea species.
per:plasmfc binding protej'1 and a
Plant Ceil Reports. 11 : 424·427. ·v
Tabell. Komposisi media Wltuk induksi kalus dari konledon mimba.
I. Rode
Kompoqsi
, Media'"
11S t:mpa zat pengatur tulnbuh 1/211S + 0.5 mg,1 2,4-D + 100 m1'1 air kdapa , ~lS2 I ~I S + O.lH mg/l 2.4 -D + 0.1 m~ il BAP MS3 11S + 0.05 mg..1 2,4-D + 1 mg,1BAP I MS4 MS + 0 .5 mg/ll~A + 1 mgf1 BAP +- 1 gil kasein hjdroli~ at + 50,'0 mk.ro ~ a I MSS i 1!S .;. 4 mg.l rnA + 1 m~,il BAP ... .. Mcdia MS4 diactl dan Shrikh:md:: ft ·: /' , 1993 daJl ~fS 5 MSO
I I
MSl
I
(J
'
Tabel2. Prosentase pembentukan ka}ns pada De rris
Jellis tanaman D. efftpttca D. In icrophvila
" - .t,
"'I
iI ~
Jellis i
eks' -:;plan
i
I
batan~
.
i I
i
bataw' i daun ,,
!
Jumbh ek~pl :.m V3..:.1~~-'~~cmb i~illik :lli.:rr (d:ui lurrll ~h t~t~I diinfek i) r---_ _ _ _ _ -+__d_3_u_n_ _ ___ balang kalus
I
GalliI' bal.;teIi
-I
, RIOOO 0 (1 3) ! 11AFF-1i24 (I (2) 8196 0 (11) A4 0 (1 5) , 07-20001 0 (1 5) _"_T_C_C_-l_5_S_34_-'-----_.U _·I - - =- 1(_4----=--)_ "'-_
2 (17) 0 (J 4 ) (I (5)
0 (") (\ (' )
i
i i i
(2)1 l! C' ) ! 0 (2) 0 (2)
I)
II
(I
(2 )
._lJJ1.._J_ 0 ll t
10
J
I
dan G:lUtam f[ d
1991
,
I I
1
I
Krisan bunga
~1 ~dia
kunin~
Xl
100
X2
100 100 100 100 100
~,
!i
putih
Ir--:=-:-:-
L)
I merah
pembenrnkan nma5 majemuk
~:)
Xl Xl Xl X2
Rata-rata jtnnlah o-,nas cT lanJet i
4.6
I
i i
5.4
i
I
Tabel 5. Kadar piretrin I dan piretrin n
Sampel
Piretrin I
3.7 4.0 3.6 3.8
Kuning II MerahI Merah IT
Pirf:trin II
_I .
_~
++
I
I!
. +-:-
I PutiJlI !
Putih IT Ktisan ex v it ro
Klming-b\Uiga Kuning-tunas
+
+
+
+
~"lerah-bunga
( )
Merah-tunas
I Putih-bunga
I
I I .J
c. morifolium dan h3siJ analisis KeKT.
Krisan in vitro KupingI
I
+
. Putih-tunas + + : tidak terdeteksi; + kadar kurang dari 100 ng/g: ++ kadar lebih dari 100 ng/g
11
Tabd 6. PI0 5 ~ntase pembt'lItukan kalus Illimba dati eksplan batatlg pada berbagai media. ~!~
'J.~ Ilembentukan kalus
~lS 1- 0.05 mg/12A·D
o
1~.7
__... _ _ _ t' 66 .7 ! MS + 0.1 m~il 2.4·D.;- , 66 .7 -' iI 0..J mg;lkin . etin i1 i MS T 0 _05 m f/l NAA + ! 33 .3 1 0.1 m~'l kinetiIl; 1\13 + 4 mr;1 2,4·D 100 j
Keteran~an
i MS + 0.1 mg,1 2,4·D
I
I I kompak, ktklU1in~:-allI
-+-1---:-fii-·a,...-br.:-:-t....,.k-·c,...-kunm --:· -ean kompak, kekuningan
100
12.5 ~._+~l~OO~mM~~~= · ~k~·e~laLP~a__ ~i_______ .:;.., M..:..,S;:....:,:ta1::..:1"",p.::,.a..:...h...::,.om.:..:..:..;.l..:...on"--_
_
I i\ompilk. keklullngan
--1-__________~
I
,-I
!
.
fiiabd. kekurllngan mabel, kekmtingan kompak, kekuningan
I
L
. MS + 0.04 mg.l12,4-D + : 100 ml1 air kelapa i
ll.; 1v1S + 0.5 mg/12.4-D I.
I I
L!_ _ _ _--.-.: ( _ ,_ _
._
__ : _
__
_
_ _ _ _- '
Tabel7. Pcmbentukan kalus Ja.il Lotil -: don rmmba..
It'
.r.,fedia'~
Ijmi kotiledo l1 -'rjmj-' --'-"TI!;ik() til ~ don I yang ditanam
:: kontmr..im:si
I kekrangan
I
berkalus ! I' ~' i i iJ n~~I.~i .__ _.. .... ___ _ ___ i \';JJ! ?:
1
----1
+ 1 -_ _ _- - , -_ _ _ _
lr-l_vI_s_o_-iI_ _ _l_o___l ___')___---+..l_ _ _(C_I)_--iIf-u_·d_ak_'_tum_b_l_lh_ _ _ _-l MS1 i n , l ~: i i 9 n ooo,'Q) I friabe\, kecoklatan ·MS2 66-1 , --- 5' 4 1-(, ~'~ 22-'- -(3-6.-1 --+-1-fii-'ab-e-l,-k-d'--lU-'lll-lg-an-,-(C'_'
I
I
- 1-
I- - - - + - - - - -
r
I
MS3 MS4
~
____
~
S9-t -
i MS5
•
i
,.jJ 156 6°:(,)
__________-+________________---li1
~!___
14 (5 5'!'Q)
'J
82
mabel, keklUllngan
--- .-- - _. _ ._.L _ _ ... ______..L._ _ _ _ _ _ _ ___
I
i
membentuk ak:rr fliabeL kompak, kehijauan, -i~-- ---:-.- 4~-·t -~(4~9--. 4-~~~)'--+-:fii-:-' a-:-b-el--.-ke-c"':"oL..kI:-a'-'-t.an---'---i
i
84-T· -- -~-<
____________
0 -..;,-)
,
"'lUltuk komposisi hbat T~ib d J,
Tabel8. Pcmbentul-;an tUllas IIw••bu dilli cmbriD
Ivledia
I
'
,1
1.- .
i Jnu, ~muno !i V1I1" .: .C. 0{
! i '_
_ _ _
: !\is tanpa : 11S +
__
~j.lt
11 mgll BAP
i
.-L
I '
~
mtananl __•. _ . -19
I
T'I~~ -~ rii)[i~ y:mg
mall , fll.:rtU!l!1 ';
peltUll3San
jm1
!! l;ontamm a :
_ _ .__ ._ .
. ._
;
~ii
__ . _ _ _ ••
3
.
_ _ _
_
~ o C.,]. 21] f.) :
93 ,]QQ tung~a1
: _ _
!
__
_ _ _ ____ •. _ .•
_
.L- _ _ _ _ _ _ _ _
! ----- -- - T - - - -- - --,- -- . 56
: 6 -;u.~. Inajt'!1luk
--- .. _---- (~ _I . B '~ .•) i HJOo,,} maj;!nmk
' ,
hi ; 39 , . -.L_ __ __ _ _ _ ______ . I
....1...._ _ _ _ _.....J
12
,
0.3 0.25
,....
~
....
0.2
~
. ~ 0.15
...
~
0.1
(.l.,
.-+- MS + 1 mglllBA _ MS + 0.5 mgJIlBA
0.05 0 0
4
3
2
5
10
9
8
7
6
Week Gambar I. Berat basah (gram) akar Derris elliplica yang ditumbuhkan pada med ia MS + 0.5 mg/IISA
o
(BB-0 .5) dan 1 mpjllBA (BB- 1) 0.05 ...--- - - --
- - - -- -- - - - - ---,
0.045 0.04
,.... 0.035
ell
::-
0.03
~
'0 0.025
;t
C 0.02
o
0.Q15
I
:-+- MS + 1 mglllBA :_ _ MS + 0.5 mgll lBA :
0.01 0.005
o ~~~~----------~----------~
o
4
3
2
5
6
9
7
10
Week
GambaI' 2. Berat kcri ng (gram) akar Derris elliplica yang ditumbuhkan pada media MS + 0.5 mg/ IISA
C)
(BK-O.S) Jan I Ill g/1 IBA (B K- I) 100 .
90
80
....
70
:::
GO
c
50
"8
40
~
::;
oc
,-+-MS + 1 mgJI lBA I : : _ MS + 05 mgn ISA
30 20
10
0 0
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Week
Gambar 3.
Jumlah akar Derris elliplica yang dilumbullk.ln pada media MS + 0.5 mgllll3A dan I mg/I I8A
