PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN PEGAGAN (Centella asiatica L. Urban) TERHADAP KERUSAKAN STRUKTUR HISTOLOGIS SEL HEPAR MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI PARASETAMOL DOSIS TOKSIK
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
NAILA SHOFWATI PUTRI G0011146
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET Surakarta 2014
PERSETUJUAN Skripsi dengan judul: Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pegagan (Centella asiatica L.Urban) terhadap Kerusakan Struktur Histologis Sel Hepar Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi Parasetamol Dosis Toksik Naila Shofwati Putri, NIM: G0011146, Tahun: 2014 Telah disetujui untuk diuji di hadapan Tim Ujian Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta Pada Hari Selasa, Tanggal 2 Desember 2014 Penguji Utama
Pembimbing Utama
Suyatmi, dr., M.Biomed.Sc
Muthmainah, dr., M.Kes
NIP. 19720105 200112 2 001
NIP. 19660702 199802 2 001
Pembimbing Pendamping
Penguji Pendamping
Ratih Puspita F,dr., M.Sc
Adji Suwandono, dr., SH
NIP. 19810208 200604 2 003
NIP. 19801213 200912 1 004 Tim Skripsi
Muthmainah, dr., M.Kes NIP. 19660702 199802 2 001
ii
PERNYATAAN Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 2 Desember 2014
Naila Shofwati Putri NIM. G0011146
iii
ABSTRAK Naila Shofwati Putri, G0011146, 2014. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pegagan (Centella asiatica L. Urban) terhadap Kerusakan Struktur Histologis Sel Hepar Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi Parasetamol Dosis Toksik. Skripsi. Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Latar Belakang: Daun Pegagan (Centella asiatica L. Urban) mengandung senyawa aktif yang bersifat antioksidan, yang mampu melindungi sel hepar dari radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol Daun Pegagan terhadap kerusakan struktur histologis sel hepar mencit yang diinduksi Parasetamol dosis toksik Metode Penelitian: Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan the post test only control group design. Sampel berupa 30 ekor mencit (Mus musculus) jantan, galur Swiss webster, berumur 2-3 bulan dengan berat badan ± 20 gram. Sampel dibagi secara random ke dalam 5 kelompok, dengan jumlah yang sama. Kelompok terdiri atas Kelompok Normal (KN), Kelompok Induksi (KI), Kelompok Perlakuan 1 (KP1), Kelompok Perlakuan 2 (KP2), dan Kelompok Perlakuan 3 (KP3). KN dan KI diberi akuades selama 14 hari. KP1, KP2, dan KP3 masing-masing diberi ekstrak etanol Daun Pegagan dengan dosis 5 mg/20 gBB mencit, 10 mg/20 gBB mencit, dan 20 mg/20 gBB mencit selama 14 hari. Parasetamol sebesar 5,07 mg/20 gBB mencit diberikan pada KI, KP1, KP2, dan KP3 pada hari ke-12, 13, dan 14. Pada hari ke-15, mencit dikorbankan dengan cara dislokasi leher dan hepar mencit dibuat preparat dengan metode Blok Paraffin dan pengecatan HE. Gambaran kerusakan sel hepar diukur dengan cara menghitung jumlah sel yang mengalami kerusakan inti (piknosis, karioreksis, dan kariolisis) dari tiap 100 sel hepar di zona sentrolobuler. Data dianalisis dengan uji One-Way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD. Hasil Penelitian: Pada penelitian ini diperoleh rerata jumlah kerusakan sel hepar pada KN sebesar 16,08 ± 5,160; KI 66,00 ± 3,275; KP1 44,58 ± 5,583; KP2 31,67 ± 2,188; KP3 26,17 ± 3,810. Hasil uji One-Way ANOVA didapatkan nilai *p = 0,000, menunjukkan terdapat perbedaan rerata jumlah kerusakan sel hepar yang bermakna paling tidak pada dua kelompok. Hasil uji Post Hoc LSD juga menunjukkan perbedaan yang signifikan antara kelima kelompok dengan *p = 0,000 untuk KN-KI, KN-KP1, KN-KP2, KN-KP3, KI-KP1, KI-KP2, KI-KP3, KP1-KP2, KP1-KP3 dan *p = 0,002 untuk KP2-KP3 Simpulan: Pemberian ekstrak etanol Daun Pegagan dapat mencegah kerusakan struktur histologis sel hepar mencit yang diinduksi Parasetamol dosis toksik. Kata kunci: Ekstrak etanol Daun Pegagan, Parasetamol, kerusakan histologis sel hepar .
iv
ABSTRACT Naila Shofwati Putri, G0011146, 2014. The Effect of Ethanolic Extract of Pegagan Leaves (Centella asiatica L. Urban) on Histological Damage of Hepatocyte on Paracetamol Induced Mice Model. Mini Thesis, Faculty of Medicine, Sebelas Maret University, Surakarta. Background: Pegagan Leaves (Centella asiatica L. Urban) contain antioxidative compounds, that can protect hepatocytes from free radicals. The aim of this research is to know the effect of ethanolic extract of Pegagan Leaves (Centella asiatica L. Urban) on histological damage of hepatocyte on Paracetamol induced mice model. Methods: This study was an experimental laboratory with the post test only control group design. Samples were 30 male Swiss webster mice, with 2-3 months old and ± 20 gr body weight, divided into 5 groups equally, namely Kelompok Normal (KN), Kelompok Induksi (KI), Kelompok Perlakuan 1 (KP1), Kelompok Perlakuan 2 (KP2), and Kelompok Perlakuan 3 (KP3). KN and KI were given aquadest for 14 days. KP1, KP2, and KP3 were given ethanolic extract of Pegagan Leaves in dose 5 mg/20 gbw, 10 mg/20 gbw, and 20 mg/20 gbw respectively for 14 days. Paracetamol in dose 5.07 mg/20 gbw were given to KI, KP1, KP2, and KP3 on the 12th, 13th, 14th day. On the 15th day, mice were sacrificed and livers were taken for preparation with Paraffin Block method and stained HE. The features of histological damage of hepatocyte were measured by counting the numbers of nucleus damage of hepotcyte (pyknosis, karyorrhexis, karyolysis) of 100 cells in the sentrolobuler zone. The data was analyzed by One-Way ANOVA test and continued by Post Hoc LSD test. Results: The means of histological damage of hepatocyte were 16.08 ± 5.160; 66.00 ± 3.275; 44.58 ± 5.583; 31.67 ± 2.188; 26.17 ± 3.810 for KN, KI, KP1, KP2, KP3 respectively. The result of One-Way ANOVA test showed a significant difference of mean, at least in two groups, *p = 0.000. The result of Post Hoc LSD test also showed a significant difference between five groups, *p = 0.000 for KNKI, KN-KP1, KN-KP2, KN-KP3, KI-KP1, KI-KP2, KI-KP3, KP1-KP2, KP1-KP3 and *p = 0.002 for KP2-KP3 Conclusion: The ethanolic extract of Pegagan Leaves can prevent histological damage of hepatocyte on Paracetamol induced mice model. Keywords: Ethanolic extract of Pegagan Leaves, Paracetamol, histological damage of hepatocyte
v
PRAKATA Puji dan syukur senantiasa penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Pegagan (Centella asiatica L. Urban) terhadap Kerusakan Struktur Histologis Sel Hepar Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi Parasetamol Dosis Toksik”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat mendapatkan gelar sarjana di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini tak lepas dari dukungan berbagai pihak. Maka penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 2. Ari Natalia Probandari, dr., MPH, PhD selaku Ketua Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 3. Suyatmi, dr., M.Biomed.Sc selaku Pembimbing Utama yang telah memberikan bimbingan, saran, dan motivasi bagi penulis. 4. Ratih Puspita F, dr., M.Sc selaku Pembimbing Pendamping yang telah memberikan bimbingan, saran, dan motivasi bagi penulis. 5. Muthmainah, dr., M.Kes selaku Penguji Utama yang telah memberikan masukan, saran, dan kritik demi kesempurnaan penulisan skripsi. 6. Adji Suwandono ,dr., SH selaku Penguji Pendamping yang telah memberikan masukan, saran, dan kritik demi kesempurnaan penulisan skripsi. 7. Seluruh Dosen dan Staf Laboratorium Histologi serta Enny, SH, MH dan Pak Sunardi dari bagian skripsi FK UNS Surakarta yang telah membantu dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini. 8. Ayahanda Ir. Moh. Hilmi, MT, Ibunda Churul Ain, SE, Adik Shoniya Alizzah dan juga keluarga besar yang selalu memberikan doa, dukungan, semangat, dan motivasi baik material maupun spiritual. 9. Sahabat-sahabat seperjuanganku Fitri F.R., Indah P.S., Nur Hidayah, Rabi’atul A., Riris A.W.K, dan Berlian P.S. yang telah memberikan dukungan dan motivasi serta membantu penulis selama pembuatan skripsi ini. 10. Sahabat tersayangku Ossy Anita Pratiwi. 11. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu, yang turut membantu dalam penyelesaian skripsi ini. Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini. Kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi perbaikan selanjutnya. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.
Surakarta, 2 Desember 2014 Naila Shofwati Putri
vi
DAFTAR ISI PRAKATA ....................................................................................................... vi DAFTAR ISI .................................................................................................... vii DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ x DAFTAR LAMPIRAN..................................................................................... xi BAB I.
PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah ......................................................... 1 B. Perumusan Masalah................................................................ 3 C. Tujuan Penelitian.................................................................... 3 D. Manfaat Penelitian.................................................................. 3
BAB II. LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka .................................................................... 4 1. Pegagan ............................................................................ 4 a. Deskrispi Tanaman ..................................................... 4 b. Taksonomi .................................................................. 6 c. Nama Lain ................................................................. 6 d. Kandungan Kimia ....................................................... 7 e. Khasiat........................................................................ 8 2. Hepar ................................................................................ 10 a. Anatomi ...................................................................... 10 b. Fisiologi...................................................................... 11 c. Histologi ..................................................................... 13 3. Parasetamol....................................................................... 16 a. Farmakodinamik ......................................................... 16 b. Farmakokinetik ........................................................... 17 c. Toksisitas Akut ........................................................... 17 4. Mekanisme Hepatotoksisitas Akibat Induksi Parasetamol Dosis Toksik..................................................................... 18
vii
5. Mekanisme
Hepatoprotektor
Ekstrak
Etanol
Daun
Pegagan terhadap Kerusakan Sel Hepar Akibat Induksi Parasetamol Dosis Toksik ................................................. 25 B. Kerangka Pemikiran ............................................................... 31 C. Hipotesis ................................................................................ 32 BAB III. METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian ....................................................................... 33 B. Lokasi Penelitian .................................................................... 33 C. Subjek Penelitian .................................................................... 33 D. Teknik Sampling .................................................................... 34 E. Rancangan Penelitian.............................................................. 34 F. Identifikasi Variabel Penelitian ............................................... 37 G. Definisi Operasional Variabel Penelitian................................. 37 H. Alat dan Bahan Penelitian....................................................... 40 I. Cara Kerja .............................................................................. 41 J. Teknik Analisis Data Statistik................................................. 48 BAB IV. HASIL PENELITIAN A. Data Hasil Penelitian .............................................................. 50 B. Analisis Data .......................................................................... 51 BAB V. PEMBAHASAN............................................................................. 55 BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN A. Simpulan ............................................................................... 59 B. Saran ..................................................................................... 59 DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 60 LAMPIRAN
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kandungan Nutrisi Tiap 100 Gram Daun Pegagan.......................... 8 Tabel 4.1 Rerata Jumlah Kerusakan Struktur Histologis Tiap 100 Sel Hepar Mencit pada Masing-Masing Kelompok ......................................... 51 Tabel 4.2 Ringkasan Hasil Uji LSD Antarpasangan Kelompok ...................... 54
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Pegagan (Centella asiatica L. Urban)....................................... 4
Gambar 2.2
Tiga Tipe Lobulus Hepar ......................................................... 14
Gambar 2.3
Pengamatan Mikroskopis Hepar Normal dengan Pengecatan Hematoksilin dan Eosin ........................................................... 16
Gambar 2.4
Jalur Metabolisme Parasetamol................................................ 22
Gambar 2.5
Perubahan Inti pada Sel Mati ................................................... 24
Gambar 2.6
Gambaran Histologis Hepar ..................................................... 25
Gambar 2.7
Skema Kerangka Pemikiran ..................................................... 31
Gambar 3.1
Skema Rancangan Penelitian ................................................... 35
Gambar 3.2
Skema Langkah-Langkah Penelitian ........................................ 46
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Tabel Nilai Konversi Dosis untuk Manusia dan Hewan Lampiran 2. Tabel Daftar Volume Maksimal Bahan Uji pada Pemberian Peroral Lampiran 3. Tabel Hasil Pengamatan Preparat Histologis Hepar Mencit (Mus musculus) Lampiran 4. Hasil Uji Statistik untuk Nilai Kerusakan Sel Hepar Mencit Lampiran 5. Foto Gambaran Mikroskopis Hepar Mencit Lampiran 6. Alat, Bahan, dan Kegiatan Penelitian Lampiran 7. Prosedur Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pegagan (Centella asiatica L. Urban) di LPPT UGM Lampiran 8. Surat Ijin Penelitian di Laboratorium Histologi FK UNS Lampiran 9. Ethical Clearance
xi
