PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L) TERHADAP KADAR SUPEROKSIDA DISMUTASE (SOD) DAN MALONDIALDEHIDE (MDA) HEPAR MENCIT BETINA (Mus musculus) YANG DIINDUKSI 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN SECARA IN VIVO
SKRIPSI
Oleh: FINKA AIDILA MIFATISUL CHORI NIM: 09620013
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013 i
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L) TERHADAP KADAR SUPEROKSIDA DISMUTASE (SOD) DAN MALONDIALDEHIDE (MDA) HEPAR MENCIT BETINA (Mus musculus) YANG DIINDUKSI 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN SECARA IN VIVO
SKRIPSI
Diajukan Kepada: Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)
Oleh: FINKA AIDILA MIFATISUL CHORI NIM: 09620013
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
ii
iii
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L) TERHADAP KADAR SUPEROKSIDA DISMUTASE (SOD) DAN MALONDIALDEHIDE (MDA) HEPAR MENCIT BETINA (Mus musculus) YANG DIINDUKSI 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN SECARA IN VIVO
SKRIPSI
Oleh: FINKA AIDILA MIFATISUL CHORI NIM: 09620013
Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persyaratan Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si) Tanggal : 5 Juli 2013 Penguji Utama:
Dr. drh. Bayyinatul Muctaromah, M.Si NIP. 19710919 200003 2 001
Ketua Penguji:
Kholifah Holil, M.Si NIP. 19751106 200912 2 002
Sekretaris Penguji:
Dr. Retno Susilowati, M.Si NIP. 19671113 199402 2 002
Anggota Penguji:
Dr. H. Munirul Abidin, M.Ag NIP. 19720420 200212 1 003
Mengesahkan, Ketua Jurusan Biologi
Dr.H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 001
iv
PERNYATAAN KEASLIAN TULISAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini : Nama NIM Jurusan Fakultas
: Finka Aidila Mifatisul Chori : 09620013 : Biologi : Sains dan Teknologi
menyatakan dengan sebenarnya bahwa skripsi yang saya tulis ini benar-benar merupakan hasil karya sendiri, bukan merupakan pengambil alihan data, tulisan atau pikiran orang lain yang saya akui sebagai hasil tulisan atau pikiran saya sendiri, kecuali dengan mencantumkan sumber cuplikan pada daftar pustaka. Apabila dikemudian hari terbukti atau dapat dibuktikan skripsi ini hasil jiplakan, maka saya bersedia menerima sanksi atas perbuatan tersebut.
Malang, Yang membuat pernyataan,
Finka Aidila Mifatisul Chori NIM. 09620013
v
MOTTO
Hai orang-orang yang beriman, Jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Sesungguhnya Allah beserta orang-orang yang sabar (QS. Al Baqarah: 153).
vi
PERSEMBAHAN Alhamdulillah, terima kasih Allah… perjuangan berat hambaMu yang lemah ini berakhir juga, Puji syukur selalu hamba panjatkan kehadiratMu ya Allah, terima kasih ya Allah… dengan kerikil-kerikil cobaan dariMu, hamba dapat mengerti arti hidup yang sesungguhnya. Skripsi ini merupakan penelitian dosen dan mahasiswa. Skripsi ini khusus saya persembahkan untuk: 1. Ibu dan Bapak tercinta Ibunda Sri Andayani dan Bapak Ahmad Bukhori, orang tua juara satu di seluruh dunia, yang tiada hentinya memberikan semangat, doa, dukungan, kasih sayang untuk kesuksesan anaknya 2. Adik-adikku tercinta, Siki Nuril Falestin dan Rian Faturrochman yang selalu mendukung dan memberikan semangat. Semoga mbak bisa menjadi panutan yang baik untukmu 3. Sahabat tercinta Dewi Mayasari yang selalu memberikan waktu dan tidak pernah berhenti memberikan semangat dan dukungannya untuk saya 4. Teman-teman seperjuangan saya Arum, Ayu Ludyasari, Asnal, Yusria, Adelina, dan semua teman-teman jurusan biologi yang tidak bisa saya sebutkan satu per satu yang selalu memberikan semangat, doa dan dukungan kepada saya. 5. Dosen-dosen pembimbing (Ibu Retno dan Bapak Munirul Abidin) yang telah memberikan bimbingannya selama ini. 6. Seluruh civitas akademika UIN Maulana Malik Ibrahim Malang, khususnya mas Bsyaruddin dan mas Sholehuddin, terima kasih telah membantu kelancaran penelitian dan dukungannya. Semoga skripsi ini bermanfaat. Sukron Jazakillah Finka Aidila Mifatisul Chori
vii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr.Wb Syukur Alhamdulillah penulis haturkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan Rahmat dan Hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan studi di Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang sekaligus menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Shalawat serta salam tetap terlimpah dan tercurah kepada suri tauladan kita yakni baginda Rasulullah Muhammad SAW pemimpin dan pembimbing abadi umat Islam. Karena melalui beliaulah kita menemukan jalan terang benderang dalam mendaki puncak tertinggi iman. Penelitian ini merupakan bagian dari penelitian bersama antara dosen (Dr. Retno Susilowati, M.Si) dengan mahasiswa dengan judul Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Kadar Superoksida Dismutase (SOD) dan Malondialdehide (MDA) Hepar Mencit (Mus musculus) Betina yang Diinduksi 7,12- Dimetilbenz (α) Antrasen Secara In Vivo. Selanjutnya penulis haturkan ucapan terima kasih seiring doa dan harapan jazakumullah ahsanal jaza’ kepada semua pihak yang telah membantu terselesaikannya skripsi ini. Ucapan terima kasih ini penulis sampaikan kepada: 1. Prof. Dr. Mudjia Raharjo selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang 2. Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang viii
3. Dr.H. Eko Budi Minarno, M.Pd selaku ketua jurusan Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang dan selaku wali dosen yang telah banyak memberikan saran selama proses perkuliahan 4. Dr. Retno Susilowati, M. Si dan Dr. H. Munirul Abidin, M.Ag selaku dosen pembimbing skripsi, yang telah banyak memberikan pengarahan dan pengalaman yang berharga. 5. Kholifah Holil, M. Si dan Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M. Si, sebagai dosen penguji yang telah memberikan saran terbaiknya. 6. Segenap civitas akademika Jurusan Biologi, terutama seluruh dosen, terima kasih atas segenap ilmu dan bimbingannya. 7. Bapak dan Ibu tercinta (Ayahanda Ahmad Bukhori dan Ibunda Sri Andayani) yang senantiasa memberikan doa, dukungan baik secara moral maupun spiritual demi terselesaikannya skripsi ini. Pengorbanan kalian sangat besar bagi penulis. 8. Muhammad Basyaruddin, S. Si selaku laboran di Laboratorium Fisiologi Hewan dan Laboratorium Biosistem Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang yang telah membantu dalam penelitian ini. 9. Teman satu angkatan dan teman seperjuangan khususnya Arum Rosida, Ayu Lusyasari, Asnal Bidaah, Yusria Nazza dan Adelina Cristiani yang senantiasa memberikan dukungan kepada saya dan membantu dalam memberikan ide-ide dalam penulisan skripsi ini. 10. Semua pihak yang ikut membantu dalam menyelesaikan skripsi ini baik berupa materi maupun moril. ix
Penulis berharap semoga skripsi ini bisa memberikan manfaat kepada para pembaca khususnya bagi penulis secara pribadi. Amin Ya Rabbal Alamin. Wassalamualaikum Wr. Wb
Malang, 28 Juni 2013 Penulis
x
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL .................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN ..................................................................... iii HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................... iv HALAMAN PERNYATAAN ..................................................................... v HALAMAN MOTTO .................................................................................. vi HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................. vii KATA PENGANTAR ................................................................................. viii DAFTAR ISI ................................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xiii DAFTAR TABEL ........................................................................................ xiv DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xv ABSTRAK ................................................................................................... xvi BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1 1.1. Latar Belakang ....................................................................................... 1 1.2.Rumusan Masalah ................................................................................... 7 1.3.Tujuan Penelitian .................................................................................... 8 1.4.Hipotesis Penelitian ................................................................................ 8 1.5.Manfaat Penelitian ................................................................................. 8 1.6.Batasan Masalah ..................................................................................... 9 BAB II KAJIAN PUSTAKA ..................................................................... 2.1. Hepar ..................................................................................................... 2.1.1 Deskripsi Hepar ................................................................................... 2.1.2 Fungsi Hepar ....................................................................................... 2.2. Kanker Hepar ........................................................................................ 2.3. Stress Oksidatif ..................................................................................... 2.3.1. Radikal Bebas ..................................................................................... 2.3.2. Peroksidasi Lipid ................................................................................ 2.4. Antioksidan ........................................................................................... 2.4.1. Penggolongan Antioksidan ................................................................ 2.4.1.1. Berdasarkan Reaksinya .................................................................... 2.4.1.2. Berdasarkan Sumbernya................................................................... 2.4.3. Mekanisme Kerja Antioksidan............................................................ 2.5. Tumbuhan Sirsak ................................................................................... 2.5.1. Klasifikasi Tumbuhan Sirsak ............................................................. 2.5.2. Kandungan Senyawa Daun Sirsak ...................................................... 2.5.3. Mekanisme Kerja Flavonoid .............................................................. 2.6. Senyawa Pemicu Kanker ...................................................................... 2.7. Kajian Al Quran Tentang Pemanfaatan Tumbuhan Sirsak ................... 2.8. Kerangka Konsep Berpikir ....................................................................
10 10 10 11 13 16 16 18 19 20 20 23 24 25 25 28 29 30 32 35
BAB III METODE PENELITIAN ........................................................... 36 3.1 Rancangan Penelitian ............................................................................. 36 xi
3.2 Variabel Penelitian .................................................................................. 36 3.3 Waktu Dan Tempat Penelitian ................................................................ 37 3.4 Populasi Dan Sampel Penelitian ............................................................ 37 3.5 Alat Dan Bahan ....................................................................................... 37 3.5.1 Alat ....................................................................................................... 37 3.5.2 Bahan.................................................................................................... 38 3.6 Pelaksanaan Penelitian ........................................................................... 38 3.6.1 Pelaksanaan Penelitian ........................................................................ 38 3.6.2 Penimbangan Berat Badan Hewan Coba ............................................. 38 3.6.3 Pembuatan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.) ...................... 39 3.6.4 Pembuatan Sediaan Larutan Na CMC 0,5 % Dan Penyiapan Larutan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.) .................................................... 39 3.6.5 Pembuatan sediaan larutan Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) ......... 41 3.6.6 Kegiatan Penelitian .............................................................................. 41 3.6.7 Perhitungan Dosis Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.) ........... 41 3.6.7.1 Perlakuan Pada Hewan Coba ............................................................ 42 3.6.7.2 Pengukuran Kadar Superoksida dismutase (SOD) dan Manoldialdehide (MDA ) .............................................................................................. 43 3.6.7.2.1 Pengukuran Kadar Superokside dismutase (SOD) ........................ 43 3.6.7.2.2 Pengukuran Kadar Malondialdehida (MDA) .............................. 43 3.7 Analisis Data .......................................................................................... 44 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil penelitian ....................................................................................... 45 4.1.1 Kadar Malondialdehide (MDA) Hepar Mencit Betina Yang Diinduksi Dimetilbenz (α) Antrasen ................................................................... 45 4.1.2 Kadar Superoksida Dismutase (SOD) Hepar Mencit Betina Yang Diinduksi Dimetilbenz (α) Antrasen ................................................... 48 4.2 Pembahasan ............................................................................................ 50 4.2.1 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Kadar Malondialdehide (MDA) Hepar Mencit (Mus musculus) yang diinduksi Dimetilbenz (α) Antrasen ........................................... 51 4.2.2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Kadar Superoksida Dismutase (SOD) Hepar Mencit (Mus musculus) yang diinduksi Dimetilbenz (α) Antrasen .......................... 63 BAB V PENUTUP ...................................................................................... 77 5.1. Kesimpulan ........................................................................................... 77 5.2. Saran ...................................................................................................... 77 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 78 LAMPIRAN ................................................................................................ 85 BUKTI KONSULTASI SKRIPSI ............................................................. 95 xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Anatomi Sel Hepar Tikus ..................................................................11 Gambar 2. Struktur MDA ..................................................................................19 Gambar 3. Cara kerja enzim pertahan tubuh terhadap radikal bebas ..................22 Gambar 4. Daun Sirsak (Annona muricata L.) .................................................26 Gambar 5. Tumbuhan Sirsak...............................................................................27 Gambar 6. Struktur Flavonoid ...........................................................................28 Gambar 7. Struktur DMBA ................................................................................31 Gambar 8. Jalur Metabolisme DMBA ...............................................................31 Gambar 9. Peta Konsep Berpikir .......................................................................35 Gambar 10. Jalur Metabolisme DMBA .............................................................53 Gambar 11. Struktur dari membran sel ...............................................................55 Gambar 12. Mekanisme pembentukan MDA selama proksidasi lipid dari asam lemak tidak jenuh ganda ................................................................56 Gambar 13. Struktur kimia kompleks MDA-TBA .............................................57 Gambar 14. Rata-rata kadar MDA dengan perlakuan yang berbeda ..................59 Gambar 15. Struktur Kimia Flavonoid ...............................................................62 Gambar 16. Reaksi pengukuran kadar SOD .......................................................63 Gambar 17. Rata-rata kadar SOD dengan perlakuan yang berbeda....................65 Gambar 18. Cara kerja enzim pertahanan tubuh terhadap radikal bebas ........... 68 Gambar 19. Nitrik oksida sebagai mediator aktivasi transkripsi gen antioksidan yang diinduksi oleh isoflavon ........................................................69
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1. Ringkasan ANOVA pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap kadar Malondialdehide (MDA) hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen ................... 46 Tabel 4.2. Ringkasan Uji BNT 1% dari penurunan kadar Malondialdehide (MDA) pada hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen yang diberi ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) ...................................................................................................... 47 Tabel 4.3. Ringkasan ANOVA pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap kadar Superoksida Dismutase (SOD) hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen .......... 49 Tabel 4.4. Ringkasan Uji BNT 1% dari peningkatan kadar Superoksida Dismutase (SOD) pada hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen yang diberi ekstrak etanol daun sirsak(Annona muricata L.) ............................................................... 49 Tabel 4.5. Tabel Data Mencit Perlakuan Dosis IV Yang Mati Sebelum Perlakuan Selesai .............................................................................................. 50
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Pengukuran kadar SOD dan kadar MDA Mencit ........................... 85 Lampiran 2. Kadar MDA Hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen .......................................................................................... 87 Lampiran 3. Kadar SOD Hepar mencit betina yang diinduksi dimetilbenz (α) antrasen .......................................................................................... 90 Lampiran 4. Foto Dokumentasi Penelitian.......................................................... 93
xv
ABSTRAK
Chori, Finka Aidila Mifatisul. 2013. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L) terhadap Kadar Superoksida Dismutase (SOD) dan Malondialdehide (MDA) Hepar Mencit Betina (Mus musculus) yang Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen secara In Vivo. Skripsi, Jurusan Biologi Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Malang. Pembimbing : (I). Dr. Retno Susilowati, M.Si. (II) Dr. H. Munirul Abidin, M. Ag
Kata Kunci : Annona muricata, SOD, MDA, Hepar, 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen
Adanya zat radikal bebas yang berlebihan menyebabkan terjadinya stress oksidatif. Tingginya stress oksidatif, menyebabkan peningkatan aktivitas radikal bebas dalam tubuh dan menurunkan aktivitas antioksidan enzimatis. Aktivitas radikal bebas tersebut hanya dapat dihambat oleh adanya antioksidan. Salah satu tanaman yang telah terbukti mengandung antioksidan adalah daun sirsak (Annona muricata L.). Kandungan daun sirsak yang bersifat sebagai antioksidan adalah flavonoid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap kadar Superoksida Dismutase (SOD) dan Malondialdehide (MDA) hepar mencit betina yang diinduksi 7,12- dimetilbenz (α) antrasen secara in vivo. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan enam perlakuan dan empat kali ulangan. Perlakuan yang digunakan adalah pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) dengan empat dosis, yaitu dosis I (100 mg/kg BB/oral/hari), dosis II (150 mg/kg BB/oral/hari), dosis III (200 mg/kg BB/oral/hari) dan dosis IV (250 mg/kg BB/oral/hari) . Untuk mengukur aktivitas antioksidan enzimatis, parameter yang digunakan adalah kadar Superoksida Dismutase (SOD). Untuk mengukur aktivitas radikal bebas, parameter yang digunakan adalah kadar Malondialdehide (MDA). Data yang didapat dianalisis menggunakan ANOVA dengan taraf signifikansi 1%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L) berpengaruh terhadap peningkatan kadar SOD dan penurunan kadar MDA pada hepar mencit betina (Mus musculus) yang diinduksi 7,12-dimetilbenz (α) antrasen (p < 0,05) . Dari keempat dosis ekstrak etanol daun sirsak yang diberikan, dosis 3 (200 mg/kg BB/oral/hari) merupakan dosis yang paling efektif dalam meningkatkan kadar SOD (99,6 U/ml) hingga mendekati kadar normal (135,4 U/ml) dan mampu menurunkan kadar MDA (16,607 nmol/ml) hingga mendekati kadar normal (8,25 nmol/ml).
xvi