PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN LAMTORO (Leucaena leucocephala) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH SEL LEUKOSIT, LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan oleh Binta Isnaeni Salma 1108010090
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto Purwokerto 2015
Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
HALAMAN PERSETUJUAN PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN LAMTORO (Leucaena leucocephala) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH SEL LEUKOSIT, LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c
Binta Isnaeni Salma 1108010090
Diperiksa dan disetujui oleh:
Pembimbing II
Pembimbing I
Dr. Nunuk Aries Nurulita M.Si.,Apt NIK 2160217
RetnoWahyuningrum,S.Farm.,M.Si.,Apt NIK 2160387
Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
HALAMAN PENGESAHAN PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN LAMTORO (Leucaena leucocephala) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH SEL LEUKOSIT, LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c
BINTA ISNAENI SALMA 1108010090
Telah dipertahankan di depan Panitia Ujian Skripsi Pada Hari Senin Tanggal 24 Agustus 2015 SUSUNAN PANITIA Ketua
Sekretaris
Anjar Mahardian Kusuma, M.Sc.,Apt NIK. 2160388
Erza Genatrika, M.sc., Apt NIK. 2160622 Penguji I
Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt NIK. 2160217 Mengetahui, Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt NIK. 2160217
iii Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
SURAT PERNYATAAN
Yang bertanda tangan dibawah ini, saya : Nama
: Binta Isnaeni Salma
NIM
: 1108010090
Program Studi
: Farmasi S1
Fakultas /Universitas
: Framasi/ UMP
Menyatakan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil karya saya dan bukan hasil jiplakan dari hasil karya orang lain. Menyatakan dengan sebenarbenarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil jiplakan dari hasil karya orang lain. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang tidak diterbitkan dari penulis lain, telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka dibagian akhir skripsi ini. Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku
Purwokerto, 5 Agustus 2015 Yang menyatakan,
Binta Isnaeni Salma
iv Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
INTISARI BINTA ISNAENI SALMA pada penelitian Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Lamtoro (Leucaena Leucocephala) Terhadap Aktivitas, Kapasitas Makrofag Dan Jumlah Sel Leukosit, Limfosit, Neutrofil Pada Mencit Jantan Galur Balb/c. Dibawah bimbingan Dr.NUNUK ARIES NURULITA M.Si.,Apt dan RETNO WAHYUNINGRUM S.Farm.,M.Si.,Apt Latar Belakang : Secara empiris daun lamtoro (Leucaena Leucocephala) biasa digunakan untuk obat luka, beberapa penelitian menunjukkan daun lamtoro berguna sebagai antibakteri, antiinflamasi dan antioxidant. Pada banyak penelitian daun lamtoro mempunyai kandungan flavonoid yang diduga berpengaruh terhadap peningkatan imunomodulator. Tujuan : Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi dari daun lamtoro (Leucaena Leucocephala) apakah mempunyai pengaruh pada sistem imun. Metode : Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah eksperimental dengan rancangan acak lengkap. Pengambilan ekstrak daun lamtoro (EDL) dengan cara maserasi yang dimodifikasi menjadi remaserasi. Lima belas mencit jantan Balb/c dibagi menjadi 5 kelompok. Tiga kelompok perlakuan (kelompok I) diberi EDL 100mg/kgBB,(kelompok II) diberi EDL 200mg/kgBB, (kelompok III) diberi EDL 300mg/kgBB. Kelompok kontrol positif (kelompok IV) diberi stimuno 9,1mg/kgBB dan kontrol negatif (kelompok V) diberi cmc na. Pada hari ke-8 diinfeksi dengan Staphylococcus aureus secara intraperitoneal. Aktivitas dan kapasitas makrofag dihitung pada cover slip dari cairan peritoneal mencit. Perhitungan jumlah leukosit, limfosit,dan neutrofil dari darah mencit dihitung dengan Hematology analyzer. Analisis statistik menggunakan ANOVA yang kemudian dilanjut dengan LSD. Hasil : Kapasitas makrofag dari kelompok EDL lebih tinggi dari kontrol negatif dan positif. Aktivitas makrofag kelompok EDL lebih tinggi dari kontrol negatif. EDL tidak meningkatkan jumlah leukosit ,dan neutrofil dari darah mencit. Namun meningkatkan jumlah limfosit. Kesimpulan : EDL meningkatkan aktivitas dan kapasitas makrofag cairan peritoneum model mencit Balb/c. EDL meningkatkan jumlah limfosit darah mencit Balb/c. EDL mempunyai potensi imunomodulator. Kata kunci : Ekstrak Daun Lamtoro, imunomodulator, kapasitas dan aktivitas dari fagositosis, Staphylococcus aureus
v Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
ABSTRACT BINTA ISNAENI SALMA on research Effect of Leaf Extract Lamtoro (Leucaena leucocephala) Against Activities, Macrophages Capacity and Number of Cells Leukocytes, lymphocytes, neutrophils Strains in Mice Male Balb /c. Under the guidance of Dr.NUNUK ARIES NURULITA M.Sc., Apt and RETNO WAHYUNINGRUM S.Farm., M.Sc., Apt Background: Empirically lamtoro leaf (Leucaena leucocephala) used to cure wounds, some research suggests that lamtoro leaves useful as antibacterial, antiinflammatory and antioxidant. In many studies have lamtoro leaf flavonoid supposed to influence the improvement of immunomodulators. Objective: The purpose of this study is to investigate potency of the leaves of Leucaena (Leucaena leucocephala) can effect the immune system . Methods: The method used in this study is a randomized experimental design with complete. Making lamtoro leaf extract (EDL) by maceration modified into remaserasi. Fifteen male mice Balb / c were divided into 5 groups. Three treatment groups (group I) were given EDL 100mg / kg, (group II) were given EDL 200mg / kg, (group III) were given EDL 300mg / kg. Positive control group (group IV) was given Stimuno 9,1mg / kg and negative control (group V) given the cmc na. On the day 8 infected intraperitoneally with Staphylococcus aureus. Activity and capacity is calculated on the cover slip macrophages from mouse peritoneal fluid. Calculation of the number of leukocytes, lymphocytes, and neutrophils from mice blood calculated by Hematology analyzer. Statistic analysis using ANOVA and then continue with LSD. Results: The capacity of macrophages from EDL group is higher than the negative and positive controls. EDL macrophage activity groups is higher than the negative control. EDL does not increase the number of leukocytes, and neutrophils from mice blood, but increase the number of lymphocytes. Conclusion: EDL increases the activity of macrophages and peritoneal fluid capacity models Balb / c mice. EDL increase the number of, lymphocytes from blood of Balb / c mice. EDL has a potential immunomodulator. Keywords: Leucaena Leaf Extract, immunomodulatory, the capacity and the activity of phagocytosis, Staphylococcus aureus
vi Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
PERSEMBAHAN
Dengan menyebut asma Allah SWT Yang Maha Pengasih Lagi Maha Penyayang ‘’ saya bersyukur kepada Allah SWT atas rahmat dan karuniaNya, sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik’’. Dengan penuh cinta kasih skripsi ini penulis persembahkan kepada kedua orang tua penulis yang telah bekerja keras dalam memberikan penulis yang terbaik dalam segala hal. Perjuangan dan pengorbanannya menjadikan semangat penulis dalam menjalankan kehidupan ini. Kepada kakak penulis yang tercinta yang memberikan dorongan semangat dan nilai-nilai kehidupan semoga selalu bersahabat dengan alam. Kepada adik penulis yang tersayang yang menghibur dan semoga selalu bahagia. Penulis juga mempersembahkan skripsi ini kepada teman-teman Fakultas Farmasi, semoga semua hal baik yang didapat dapat disalurkan dan dibagikan untuk hal-hal yang baik juga.
vii Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
MOTTO
‘’maju terus pantang mundur’’ “Berikan yang terbaik sebelum ada yang menggantikan”-salma “seindah-indahnya masa lalu,tetaplah akan menjadi masa lalu, tak akan terulang. Maka berterimakasihlah pada masa lalu yang mengantarkan kepada kehidupan sekarang”-salma
viii Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
KATA PENGANTAR Alhamdulillah segala puji bagi Allah pencipta seluruh alam, dan salawat serta salam saya haturkan kepada junjungan kita semua Nabi Muhammad SAW,membawa kita dari jaman yang tak tahu apa-apa ke jaman yang tahu segalanya. Atas segala pertolonganMu dan RidhloMu, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripsi dengan judul ‘’ PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN LAMTORO (Leucaena leucocephala) TERHADAP AKTIVITAS, KAPASITAS MAKROFAG DAN JUMLAH SEL LEUKOSIT, LIMFOSIT, NEUTROFIL PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/c’’. penelitian ini digunakan sebagai salah satu syarat dalam mencapai derajat sarjana Farmasi
di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah
Purwokerto.
Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, untuk itu dengan kerendahan hati penulis menyampaikan rasa hormat dan terimakasih banyak kepada : 1. Dr. Nunuk Aries Nurulita M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan menjadi Pembimbing I, yang telah memberi kesempatan, menjadi guru inspirasi serta meluangkan waktu untuk bimbingan dan saran dalam menyelesaikan skripsi ini. 2. Ibu Retno Wahyuningrum M.Si., Apt selaku dosen pembimbing II,yang telah memberi kesempatan, memotivasi meluangkan waktu untuk bimbingan dan saran dalam menyelesaikan skripsi ini. 3. Bapak dan Ibu Dosen Fakultas Farmasi yang telah mengamalkan ilmu bagi penulis
selama
menuntut
ilmu
di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Purwokerto. 4. Bapak Rochmadi selaku laboran di laboratorium Fakultas Farmasi yang membantu sampai selesainya skripsi ini. 5. Bapak dan Ibu yang telah memberikan pelajaran kehidupan, memotivasi dalam meraih cita-cita. 6. Sahabat-sahabatku terimakasih atas semangat dan diskusi yang mendukung penyelesaian skripsi ini.
ix Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
7. Seluruh warga kost Kartika yang selama ini menghiasi hari-hari dikala istirahat sejenak di kos. Semoga Allah SWT memberikan balasan limpahan yang lebih baik atas semua yang diberikan kepada penulis. Semoga karya tulis ini dapat bermanfaat bagi pembaca.
Purwokerto, 5 Agustus 2015
Penulis,
x Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
RIWAYAT HIDUP
: Binta Isnaeni Salma
Nama
Tempat,tanggal lahir : Brebes, 21 Desember 1992 Nama Ayah
: Muhammad Mabruk
Nama Ibu
: Aminah Spd.I
Nama Kakak
: Muhammad Furqoni Alkan
Nama Adik
: Era Tsalitsa Hasana
Riwayat Pendidikan : TK
: TK ABA Dk.Balapusuh,Tonjong
SD
: SDN 01 Tanggeran, Tonjong
SMP : SMP N 1 Tonjong SMK : SMK Semesta Bumiayu Program Keahlian Farmasi PT
: Fakultas Farmasi, Universiats Muhammadiyah Purwokerto
xi Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
DAFTAR ISI Daftar isi
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PERSETUJUAN .........................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN ..........................................................................
iii
HALAMAN PERNYATAAN .........................................................................
iv
INTISARI.........................................................................................................
v
ABSTRACT .....................................................................................................
vi
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................
vii
MOTTO ...........................................................................................................
viii
KATA PENGANTAR .....................................................................................
ix
RIWAYAT HIDUP ..........................................................................................
xi
DAFTAR ISI ....................................................................................................
xii
DAFTAR TABEL ............................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................
xvi
BAB I
BAB II
PENDAHULUAN ....................................................................
1
A. B. C. D.
Latar belakang .................................................................... Perumusan masalah ............................................................ Tujuan penelitian ................................................................ Manfaat penelitian ..............................................................
1 2 2 3
TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................
4
A. Uraian tanaman .................................................................. 1. Sistematika tanaman..................................................... 2. Nama latin ................................................................... 3. Kegunaan bagi masyarakat .......................................... 4. Kandungan kimia ......................................................... B. Sistem imun .......................................................................
4 4 4 4 4 5
xii Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
BAB III
C. Imunomodulator ............................................................... D. Stapilococcus aureus ..........................................................
7 7
METODOLOGI PENELITIAN ...............................................
9
A. B. C. D.
Jenis dan rancangan penelitian ........................................... 9 Variabel penelitian ............................................................. 9 9 Waktu dan tempat penelitian .............................................. Alat dan Bahan ................................................................... 10 10 1. Alat .............................................................................. 2. Bahan............................................................................ 10 E. Cara Penelitian ................................................................... 11 1. Penyiapan, pengumpulan bahan dan determinasi .. ..... 11 2. Pembuatan simplisia .................................................... 11 3. Pembuatan ekstrak etanol daun lamtoro ...................... 12 4. Identifikasi senyawa flavonoid dengan profil KLT .... 12 5. Bakteri uji ..................................................................... 13 6. Penetapan dosis ekstrak daun lamtoro ......................... 13 7. Penetapan dosis stimuno .............................................. 14 8. Pembuatan suspensi oral untuk mencit ........................ 14 a. Pembuatan latutan stok stimuno ...................... 14 15 b. Pembuatan larutan stok ekstrak daun lamtoro . 9. Pemberian bahan uji per oral........................................ 15 10. Uji pengaruh pemberian ekstrak daun lamtoro terhadap sel leukosit, limfosit, dan neutrofil………………………. 15 11. Uji fagositosis .............................................................. 15 a. Isolasi makrofag ............................................... 15 16 b. Fagositosis makrofag dengan latex beads ....... 12. Analisis data ................................................................ 17
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................
18
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN ................................................
33
A. Kesimpulan ........................................................................ B. Saran ...................................................................................
33 33
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... LAMPIRAN .....................................................................................................
34 37
xiii Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
DAFTAR TABEL Daftar tabel
Halaman
Tabel 1. Hasil ekstraksi daun lamtoro ..............................................................
20
Tabel 2. Hasil pemeriksaaan organoleptis ekstrak etanol daun .......................
20
Tabel 3. Hasil setelah penyemprotan dengan sitroborat .................................
21
Tabel 4. Kapasitas dan presentase aktivitas makrofag .....................................
26
Tabel 5. Jumlah leukosit, limfosit dan neutrofil ..............................................
30
xiv Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
DAFTAR GAMBAR Daftar gambar
Halaman
Gambar 1. Kromatogram identifikasi senyawa flavonoid dengan fase diam silika gel F254 dan fase gerak kloroform : metanol (9:1) ...........
21
Gambar 2. Sel makrofag kelompok perlakuan, kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif dengan pengamatan mikroskop (perbesaran 400x) .........................................................................
25
xv Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
DAFTAR LAMPIRAN Daftar lampiran
Halaman
Lampiran 1. Tabel jumlah sel leukosit, limfosit, dan neutrofil ........................
38
Lampiran 2. Tabel kapasitas dan aktivitas fagositosis .....................................
39
Lampiran 3. Perhitungan makrofag dengan haemocytometer..........................
40
Lampiran 4. Surat determinasi tanaman...........................................................
41
Lampiran 5. Persetujuan Etik ...........................................................................
42
Lampiran 6. Data statistik ................................................................................
43
xvi Pengaruh Pemberian Ekstrak..., Binta Isnaeni Salma, Fakultas Farmasi UMP, 2015
