ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID DARI DAUN MINDI (Melia azedarach L.)
SKRIPSI
Oleh: ERNA RACHMAWATI K. 100020062
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMAMDIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2006
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID DARI DAUN MINDI (Melia azedarach L.)
SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Di Surakarta
Oleh: ERNA RACHMAWATI K 100020062
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2006
i
PENGESAHAN SKRIPSI Berjudul :
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID DARI DAUN MINDI (Melia azedarach L.) Oleh: Erna Rachmawati K 100020062 Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Pada Tanggal :
Mengetahui Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah M Si.,Apt.
Pembimbing Utama
Pembimbing Pendamping
Drs. Zainul Kamal, Apt, APU.
Rima Munawaroh, S.Si, Apt.
Penguji : 1. Maryati, M.Si,.Apt.
_____________
2. Wahyu Utami, M.Si., Apt.
____________
3. Drs. Zainul Kamal, APT, APU.
_____________
4. Rima Munawaroh, S.Si, Apt.
____________
ii
Motto Selaraskan langkah, tindakan serta do’amu dengan hati nurani agar kau selalu tersenyum damai bagai bayi yang baru lahir (Al- Hikmah)
Saya memang seorang manusia, tapi saya punya kemampuan. Saya tidak bisa melakukan semua hal, tapi saya bisa melakukan sesuatu, Apa yang seharusnya saya lakukan dan saya mampu melakukannya. (Penulis)
iii
PERSEMBAHAN
Puji syukur ya Allah atas semua yang telah Kau berikan pada hamba; Kau sangat menyayangiku dan ampunilah jika hamba tidak pandai bersyukur. Sebuah persembahan terindah untuk Ibu’ dan Bapak tercinta sebagai ungkapan rasa baktiku, yang telah memberikan semua yang terbaik untukku, memberikan doa disetiap hembusan nafasku dan telah membanting tulang untuk menghidupi dan mendidik putri-putrinya. Ade’ku Nisa dan seluruh kerabatku yang telah mengisi hidupku dan menjadi keluarga terbaikku. Agusku terima kasih atas semuanya karena kau telah membirikanku pengertian, doa serta motivasi. Semua sahabat-sahabatku dimanapun engkau berada yang telah memberikan aku keceriaan dimanapun aku berada. Almamaterku yang memberiku masa depan cerah.
iv
DEKLARASI
Saya menyatakan bahwa penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri dan sepanjang pngetahuan saya tidak berisi materi yang dipublikasikan atau ditulis orang atau telah dipergunakan dan diterima sebagai persyaratan penyelesaian studi pada Universitas lain kecuali pada bagian-bagian tertentu yang telah dinyatakan dalam teks. Dan apabila penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini merupakan jiplakan dari penelitian/ karya ilmiah/ skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademik maupun hukum.
Surakarta, Oktober 2006 Penulis
(Erna Rachmawati)
v
KATA PENGANTAR
Assalammualaikum wr.wb. Segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini dengan lancar. Sholawat serta salam semoga senantiasa tercurahkan kepada nabi besar Muhammad SAW. Serta keluarga para sahabat dan pengikut setianya. Skripsi berjudul isolasi dan identifikasi flavonoid dari daun mindi (Melia azedarach L.) disusun untuk menyelesaikan program studi S-1 Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penelitian dan penyusunan laporan skripsi ini diperoleh bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Surakarta. 2. Bapak Zainul Kamal Apt, APU. Selaku pembimbing utama yang telah bersedia meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing dan mengarahkan penulisan laporan ini. 3. Ibu Rima munawaroh, S.Si, Apt. Selaku pembimbing pendamping yang telah bersedia meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing dan mengarahkan penulisan laporan ini.
vi
4. Ibu Maryati M.Si, Apt dan Ibu Wahyu, M. Si, Apt. Selaku penguji yang telah bersedia meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk menguji skripsi ini. 5. Bapak Peni Indrayuda S.Si, Apt. Selaku dosen pembimbing akademik. 6. Ibu, Bapak atas jerih payah, doa dan tetesan keringatmu serta cucuran kasih sayang dan perhatianmu. Dan adekku tercinta karena canda dan doamu, sehingga penulis mampu menyelesaikan penyusunan skripsi ini. 7. Seluruh dosen, staf pengajar dan karyawan di lingkungan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta yang membantu kelengkapan dan kelancaran pelaksanaan penyusunan skripsi. 8. Semua staf laboran yang telah membantu kelancaran penelitian, terima kasih atas waktu, tenaga, kesempatan, kebaikan dan doa yang diberikan kepada penulis. 9. Teman-teman seperjuangan Mira, Neneng, Yosi, Pagap, Ana, Sari, Marianah, terima kasih atas keceriaan, bantuan, motivasi dan kebersamaannya. 10. Agus, terima kasih atas pengertian, doa serta motivasinya. 11. Teman-teman kos mbak Lia, Umi, Ni2ek, Detong, Linthol, Arum, Jojom, Vika, Ellen, E2n dan anak-anak kos Lupuswati semua yang tidak bisa kusebut namanya satu persatu, terima kasih atas keceriaan dan kebersamaan selama ini, semoga ini takkan berakhir. 12. Ares Al Amin, terima kasih atas pinjeman komputernya selama pembuatan skripsi ini. 13. Teman-teman angkatan 2002 Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
vii
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan laporan skripsi ini tidak sempurna, oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun agar penulisan skripsi ini lebih sempurna. Akhir kata semoga laporan skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua. Wassalamu’alaikum wr.wb.
Surakarta,
Penulis
viii
2006
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN .........................................................................
ii
HALAMAN MOTTO ......................................................................................
iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................
iv
DEKLARASI ..................................................................................................
v
KATA PENGANTAR ....................................................................................
vi
DAFTAR ISI ...................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ...........................................................................................
xi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xii
INTISARI.........................................................................................................
xiii
BAB I
BAB II
PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah...........................................................
1
B. Perumusan Masalah .................................................................
2
C. Tujuan Penelitian .....................................................................
2
D. Tinjauan Pustaka ......................................................................
3
1. Tanaman Mindi ..................................................................
3
2. Uraian Mengenai Flavonoid...............................................
6
3. Macam-macam Penyarian..................................................
12
4. Kromatografi Lapis Tipis...................................................
13
5. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ..................................
16
6. Spektroskopi Ultraviolet ....................................................
17
E. Hipotesis...................................................................................
28
METODE PENELITIAN A. Kategori Penelitian ....................................................................
29
B. Bahan dan Alat ..........................................................................
29
C. Jalannya Penelitian ....................................................................
32
D. Cara Analisis .............................................................................
37
BAB III HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Determinasi Tanaman ..............................................................
39
B. Pengumpulan dan Penyiapan Bahan ........................................
39
C. Pengawalemakan, Ekstraksi dan Fraksinasi.............................
40
D. Pemeriksaan Kandungan Flavonoid Tiap Fraksi .....................
41
E. Isolasi Flavonoid dari Fraksi Etil Asetat..................................
43
F. Pemeriksaan Kemurnian Flavonoid Hasil Isolasi ....................
44
G. Identifikasi Flavonoid ..............................................................
45
H. Hidrolisis Isolat Flavonoid.......................................................
52
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan...............................................................................
55
B. Saran.........................................................................................
55
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
56
LAMPIRAN.....................................................................................................
58
DAFTAR TABEL
Tabel 1
Sifat Berbagai Golongan Flavonoid..............................................
7
Tabel 2
Penafsiran Bercak Dari Segi Struktur Flavonoid ..........................
11
Tabel 3
Rentangan Serapan Spektrum UV-Tampak Flavonoid.................
18
Tabel 4
Penafsiran Spektrum ’NaOAc’......................................................
25
Tabel 5
Penafsiran Spektrum ’NaOMe’.....................................................
26
Tabel 6
Penafsiran Spektrum ’NaOAc’/H3 BO3 ........................................
26
Tabel 7
Penafsiran Spektrum ’AlCl3’ dan ’AlCl3/HCL’ ............................
27
Tabel 8
Data Kromatogram Bercak Kromatografi LapisTipis Ekstrak Etanol, Fraksi Air, Fraksi Etil Asetat ............................................
43
Tabel 9
Data Spektra Ultraviolet Isolat Dalam Metanol............................
51
Tabel 10
Data Kromatogram Hasil Hidrolisis Menggunakan Fase Diam Selulosa, Fase Gerak Asam Asetat 15% .......................................
54
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1
Kerangka Dasar Flavonoid Beserta Penomorannya ..................
7
Gambar 2
Kerangka Dari Tipe-tipe Flavonoid...........................................
9
Gambar 3
Petunjuk Penyebaran Jenis Flavonoid Pada Kromatogram Yang Dikembangkan Dengan BAW (3:1:1)/HOAc 15% ...................
16
Gambar 4
Spektrum Serapan UV-Visual Jenis Flavonoid.........................
19
Gambar 5
Skema Kerja Isolasi Flavonoid Dari Daun Mindi (Melia Azedarach L.).................................................................
Gambar 6
Kromatogram KLT Ekstrak Etanol, Fraksi Air, Fraksi Etil Asetat Menggunakan Fase Diam Selulosa, Fase Gerak BAW .............
Gambar 7
38
42
Kromatografi Lapis Tipis Dua Dimensi Mengginakan Fase Diam Selulosa, Fase Gerak I BAW dan Fase Gerak II Asam Asetat..
45
Gambar 8
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut MeOH.............................
46
Gambar 9
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut NaOH .............................
47
Gambar 10
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut NaOH 5 menit ................
47
Gambar 11
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut AlCl3 ...............................
48
Gambar 12
Spektra UV Dalam Pelarut AlCl3/HCl ......................................
49
Gambar 13
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut NaOAc............................
50
Gambar 14
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut NaOAc 5 menit ..............
50
Gambar 15
Spektra UV Senyawa Dalam Pelarut NaOAc/H3BO3 ...............
51
Gambar 16
Struktur Parsial Isolat ................................................................
52
Gambar 17
Kromatogram KLT Hasil Hidrolisis Menggunakan Fase Diam Selulosa dan fase gerak asam asetat 15% dideteksi dengan UV 366nm
Sesudah Diuapi Amoniak..................................................
54
INTISARI
Mindi (Melia azedarach L.) merupakan salah satu tumbuhan obat asli Indonesia yang sering digunakan masyarakat sebagai obat peluruh kencing (diuretik), peluruh cacing, pencahar (laksatif), perangsang muntah, dan sebagainya sehingga perlu dilakukan penelitian tentang kandungan senyawa aktif terutama kandungan flavonoidnya. Flavonoid merupakan salah satu golongan fenol alam yang terbesar. Flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan hijau. Flavonoid banyak digunakan dalam pengobatan sebagai antioksida, antikangker, antivirus, diuretik, osmotik. Penelitian ini dilakukan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi flavonoid dari daun mindi (Melia azedarach L.) Kandungan flavanoid dalam ekstrak etanol, fraksi air, fraksi etil asetat, masing-masing diperiksa dengan menggunakan kromatografi lapis tipis (fase diam selulosa; fase gerak BAW(3:1:1v/v) dideteksi dengan UV366nm sebelum dan sesudah diuapi amoniak. Dipilih bercak yang paling baik dengan Rf 0,47 dari fraksi etil asetat. Bercak diisolasi dengan KLT preparatif dengan fase gerak BAW (3:1:1 v/v). Dari hasil KLT preparatif diambil bercak pita dengan Rf dan warna yang sama dengan deteksi awal, dikerok, disari dengan metanol untuk digunakan dalam uji KLT dua dimensi, spektrofotometri UV visibel dengan pereaksi diagnosik (MeOH, NaOH, AlCl3, AlCl3/HCL, NaOAc, NaOAc/H3BO3) dan hidrolisis isolat flavonoid. Berdasar hasil uji kromatografi dan analisis spektrofotometri UV visibel, didapat struktur parsial yang mengarah pada turunan 3, 5-dihidroksi flavonol dengan 7-O-monoglikosida. Kata kunci : mindi (Melia azedarach L.) flavonoid, kromatografi lapis tipis, spektrofotometri.
xiii
