GE Healthcare. BPG kolommen. Gebruiksaanwijzing

GE Healthcare

BPG kolommen Gebruiksaanwijzing

Belangrijke informatie voor de gebruiker Alle gebruikers moeten deze gehele handleiding lezen, om veilig gebruik van BPG kolommen volledig te begrijpen.

WAARSCHUWING Het waarschuwingsteken markeert de instructies die moeten worden opgevolgd om persoonlijke verwondingen te voorkomen. Het is belangrijk om niet verder te gaan tot aan alle aangegeven voorwaarden is voldaan en men ze duidelijk begrepen heeft.

LET OP! Het “Let op!” teken markeert de instructies die moeten worden opgevolgd om beschadiging aan het product of aan andere apparatuur te voorkomen. Het is belangrijk om niet verder te gaan tot aan alle aangegeven voorwaarden is voldaan en men ze duidelijk begrepen heeft.

Opmerking Het opmerkingsteken wordt gebruikt om belangrijke informatie aan te geven, zodat men het product probleemloos en optimaal kan gebruiken.

CE-certificering Dit product voldoet aan alle eisen van de vigerende CE richtlijnen. Een kopie van de corresponderende conformiteitsverklaring is op aanvraag verkrijgbaar. Het symbool CE en de betreffende conformiteitsverklaring is geldig voor het instrument wanneer dit: -

wordt gebruikt als een stand-alone unit, of

-

wordt aangesloten op andere CE-gemarkeerde instrumenten van GE Healthcare, of

-

wordt aangesloten op andere producten die in deze handleiding worden aanbevolen of beschreven, en

-

wordt gebruikt in dezelfde staat waarin het door GE Healthcare is geleverd, met uitzondering van de in deze handleiding beschreven wijzigingen.

Veiligheidsmaatregelen BELANGRIJK!Houd bij elk gebruik van de kolom altijd de gebruiksaanwijzing bij de hand.

BELANGRIJK!De eindgebruiker moet ervoor zorgen dat installatie, onderhoud, gebruik en inspectie worden uitgevoerd door bevoegd personeel dat de juiste opleiding heeft en de bedieningsinstructies begrijpt.

WAARSCHUWING! Draag altijd beschermende kleding die geschikt is voor de uit te voeren werkzaamheden om uw persoonlijke veiligheid tijdens deze werkzaamheden te waarborgen.

WAARSCHUWING! Wees extra voorzichtig wanneer u in de buurt van de kolom werkt.

WAARSCHUWING! De kolom mag NOOIT lucht of gas onder druk bevatten.

WAARSCHUWING! De werkdruk van de kolom mag nooit hoger zijn dan de ontwerpdruk, anders bestaat het risico van persoonlijk letsel en schade aan de kolom. Er moet een geschikt veiligheidsinstrument zijn aangebracht.

WAARSCHUWING! Het werktemperatuurbereik van de kolom mag nooit buiten het ontwerptemperatuurbereik vallen.

WAARSCHUWING! Gebruik geen andere chemicaliën dan die waarvan bewezen is dat ze niet schadelijk zijn voor bevochtigde delen van de kolom.

WAARSCHUWING! De wielen moeten tijdens bedrijf of opslag steeds vergrendeld zijn.

BPG kolommen Gebruiksaanwijzing 18-1170-70 AC

WAARSCHUWING! Wees extra voorzichtig bij het verplaatsen van de kolom om te voorkomen dat deze omkiept. OPGELET! Voor de kolom in gebruik wordt genomen dient u zeker te zijn dat de adaptor (de O-ringen in het bijzonder) geheel schoon zijn en vrij van stof of vaste deeltjes. Dergelijke deeltjes kunnen krassen op de buis veroorzaken.


Inhoudsopgave Veiligheidsmaatregelen ......................................................... 5 1

Inleiding ..................................................................................... 9 1.1 1.2 1.3

Algemeen .......................................................................................................... 9 De etikettering van de kolom ................................................................ 10 Veiligheid ........................................................................................................ 11

1.3.1 1.3.2 1.3.3 1.3.4 1.3.5 1.3.6

1.4 1.5

Algemeen.............................................................................................................11 Waarschuwingen.............................................................................................11 Aandachtspunten ............................................................................................11 Opmerkingen .....................................................................................................11 Chemische bestendigheid............................................................................11 Gebruik in een explosie gevaarlijke ruimten........................................11

Gekwalificeerde operators ..................................................................... 12 Opslag van BPG kolommen gepakt met media ........................... 12

1.5.1

1.6

Na gebruik schoonmaken met NaCl .......................................................13

Afvalafvoer en recycling ......................................................................... 13

1.6.1 1.6.2

1.7

2

Doel van deze handleiding ..................................................................... 14

De kolom uitpakken .............................................................. 15 2.1 2.2

3

Materialen en stoffen .....................................................................................13 BPG kolommen .................................................................................................14

Codenummers van kolombuizen en standaards ........................ 15 Geleverde componenten ........................................................................ 16

Installatie en lek test ............................................................. 17 3.1

Demontage en montage ......................................................................... 17

3.1.1 3.1.2 3.1.3

3.2 3.3 3.4

4

BPG 100, 140 en 200......................................................................................17 BPG 300 ...............................................................................................................22 BPG 450 ...............................................................................................................27

Aansluitingen ................................................................................................ 30 De kolom aarden ........................................................................................ 30 Lekkagetest ................................................................................................... 31

De BPG kolom ......................................................................... 33 4.1 4.2 4.3

Specificaties en eigenschappen .......................................................... 33 Kolommaterialen ........................................................................................ 34 Chemische bestendigheid ...................................................................... 34

4.3.1

4.4

Chemische bestendigheid tegen sodiumchloride..............................36

Druk-/flowcurve .......................................................................................... 36

4.4.1 4.4.2

5

Druk-/flowcurves voor lege kolommen..................................................38 Druk-/flowcurves voor gepakte kolommen .........................................39

Bediening ................................................................................ 41 5.1

De kolom van pakken ............................................................................... 41

5.1.1 5.1.2


Benodigde hoeveelheden medium per cm bedhoogte...................42 Aanbevolen net afmetingen........................................................................42

7

5.1.3 5.1.4 5.1.5

5.2 5.2.1 5.2.2 5.2.3

6

Bepaling optimaal pakking debiet ...........................................................43 Aanbevolen pakkingflow voor GE Healthcare media ......................49 Kolom-pakkingmethode ...............................................................................49

Kolom-evaluatie ..........................................................................................54 De keuze van testmonsters voor kolommen .......................................55 HETP-berekening .............................................................................................56 Berekening van de asymmetriefactor van de pieken......................57

Afkortingen .............................................................................59

Stikkordregister .............................................................................65

8


Inleiding 1

1

Inleiding 1.1

Algemeen

BPG kolommen zijn bedoeld voor industriële toepassingen waar een hoge graad van hygiëne vereist is. De kolommen zijn verkrijgbaar voor chromatografische scheidingsmedia in volumes tot 131 liter en kunnen met hoge flow worden gebruikt. Wanneer BPG kolommen worden gebruikt in combinatie met BioProcess Media, zoals Sepharose Fast Flow en Sephacryl High Resolution, kan aan de meest stringente eisen van de regelgeving worden voldaan. De materialen waaruit BPG kolommen worden vervaardigd, zijn zorgvuldig geselecteerd op hun bestendigheid tegen reagentia voor microbiële zuivering en reiniging, zoals natriumhydroxide en ethanol. De drukspecificaties en lage flowweerstand maken deze kolommen geschikt voor toepassing met BioProcess Media voor chromatografische ionenwisseling, hydrofobe interactie, affiniteit en gelfiltratie. Ontzouting met Sephadex G-25 Coarse, Medium, Fine en Superfine grades kunnen ook doeltreffend worden gebruikt. Het flowdistributiesysteem is ontwikkeld zodat deze past bij de hoge prestatie van GE Healthcare media. Alle BPG kolommen worden compleet met adapter geleverd. Voor toepassingen met verhoogde bedhoogtes zijn verlengbuizen verkrijgbaar voor het pakken van de kolom. In deze handleiding worden ook kolommontage- en pakkingprotocols voor BioProcess Media beschreven. In de Onderhoudshandleiding voor BPG kolommen (Hoofdstuk 1) is een afzonderlijk gedeelte gewijd aan de onderhoudsprotocollen die van toepassing zijn op individuele proces eisen. De drie hoofdconstructies van de kolom (adapter, kolomonderdelen en standaard) staan afgebeeld in de uitvouwbare uitvergrote constructietekeningen achter in deze handleiding. De basisonderdelen van de kolom zijn: •

Glazen buis

•

Flens

•

O-ringen

•

Filternetten

•

Draagnetten

•

Eindstuk

•

Staven


9

1 Inleiding 1.2 De etikettering van de kolom

De staven houden de flens en het eindstuk tegen de glazen buis, die wordt afgesloten met O-ringen. De O-ringen isoleren de glazen buis effectief tegen direct contact met de roestvrijstalen onderdelen. De bovenplaatconstructie en stelmoer van de adapter zijn met klemmen of bouten aan de kolomflens bevestigd. De stelmoer kan draaien in een busring op de bovenplaat, waardoor de hoogte van de adapter plaat in de kolombuis kan worden ingesteld. De O-ring van de adapter vormt een afdichting tussen de adapter en de glazen kolom wanneer de O-ring door de afdichtingseenheid wordt samengedrukt. Dit wordt geregeld met de afdichtingsverstelknop. De standaard is met bouten aan het eindstuk van de kolom gemonteerd en is voorzien van wielen met voetbediende remmen. Opmerking:

BPG 100 kolommen hebben verstelbare voeten. Wielen kunnen als optie worden besteld.

BPG kolommen mogen niet voor andere doeleinden te gebruiken, zoals: •

als opslagtank voor chemicaliën e.d.

•

als drukvat voor algemeen gebruik

•

als fermentatievat

•

voor gasopslag

1.2

De etikettering van de kolom

De CE-markering op het identificatie-etiket geeft aan dat de kolom voldoet aan de eisen van de Europese Richtlijn Druksystemen (PED) 97/23/EG en/of de Richtlijn voor Apparatuur en beschermingsmiddelen voor gebruik in een explosiegevaarlijke ruimten (ATEX100) 94/9/EG. Kolommen waarbij het product van volume en ontwerpdruk te gering is, hoeven krachtens de Richtlijn Druksystemen niet van een CE-markering worden voorzien. Apparatuur die buiten de Europese Unie wordt geleverd, is mogelijk niet van een CE-markering voorzien.

Fig 1-1. Een voorbeeld van een classificatiekenplaat van een BPG kolom.

10


Inleiding 1

1.3

Veiligheid

1.3.1

Algemeen

De informatie in deze gebruiksaanwijzing stelt een beste uitvoeringswijze voor maar dient op geen enkele wijze voorrang te krijgen op individuele verantwoordelijkheden of plaatselijke voorschriften. De verschillende onderdelen van de apparatuur zijn met zorg ontworpen en vervaardigd zodat de apparatuur voldoet aan alle van toepassing zijnde veiligheids-voorschriften voor dit type apparatuur. Tijdens het gebruik en tijdens ander werk met een drukvat is het altijd de verantwoordelijkheid van de gebruiker om rekening te houden met: •

De eigen veiligheid en die van anderen.

•

De veiligheid van de apparatuur door een juist gebruik volgens de beschrijvingen en aanwijzingen in deze gebruiksaanwijzing.

1.3.2

Waarschuwingen

WAARSCHUWING! Het waarschuwingssymbool markeert instructies die strikt moeten worden opgevolgd om letsel te vermijden. Gebruik de apparatuur niet voor u alle instructies begrijpt en aan alle vermelde voorwaarden is voldaan.

1.3.3

Aandachtspunten

OPGELET! Het Opgelet-symbool geeft instructies en voorwaarden aan waaraan u zich moet houden om schade aan het product of aan andere apparatuur te vermijden. Gebruik de apparatuur niet voor u alle instructies begrijpt en aan alle vermelde voorwaarden is voldaan.

1.3.4

Opmerkingen

Opmerking:

1.3.5

Het Opmerking-symbool wordt gebruikt om informatie aan te geven die belangrijk is voor een probleemloos en optimaal gebruik van het product.

Chemische bestendigheid

Specificaties, waaronder gegevens over chemische bestendigheid, zijn opgenomen in Hoofdstuk 3 van deze Gebruiksaanwijzingen.

1.3.6

Gebruik in een explosie gevaarlijke ruimten

BPG kolommen bevatten geen elektrische circuits. De volgende voorzorgen moeten echter altijd in acht worden genomen: •

Vermijdt ontlading van statische elektriciteit door de kolom te aarden. Gebruik een aardkabel die aangesloten is op het aardingsnetwerk van de werkruimte. Een aardingsset is als accessoire verkrijgbaar.

•

Voor bediening en onderhoud dient men uitsluitend gebruik te maken van gereedschappen die geschikt zijn voor gebruik in een explosie gevaarlijke ruimten.


11

1 Inleiding 1.4 Gekwalificeerde operators

•

Draag bij het werken in explosie gevaarlijke ruimten altijd daarvoor geschikte kleding.

EX-markering De EX-code op het identificatieplaatje geeft de klasse van explosiebescherming van de apparatuur weer. De EX-klasse van de apparatuur moet overeenstemmen met de beschermingsclassificatie van de ruimte waarin de apparatuur wordt gebruikt. EX II 3 G Apparatuur behorend tot deze categorie is zodanig ontworpen dat de apparatuur kan functioneren in overeenstemming met de door de fabrikant vastgestelde bedieningsparameters en bij handhaving van een normaal beschermingsniveau. Apparatuur van deze categorie is bestemd voor gebruik in ruimtes waar de waarschijnlijkheid van explosigevaar veroorzaakt door gassen, dampen en nevels gering is of waar zulke omstandigheden, indien zij voorkomen, onregelmatig en kortstondig van aard zijn.

1.4

Gekwalificeerde operators

Een BPG kolom is een apparaat dat vergelijkbaar is met een drukvat met variabel volume. Operators dienen ervaring te hebben met het werken met drukvaten en met drukmedia-apparatuur voor axiale-compressiepakking. Voor veilig en doelmatig gebruik van de kolom is het noodzakelijk dat de operator de Gebruiksaanwijzing in zijn geheel, en wel in het bijzonder de veiligheidsinstructies, heeft gelezen en begrepen en zich met de inhoud ervan volledig vertrouwd heeft gemaakt. Onoordeelkundige bediening van de kolom kan oorzaak zijn van beschadiging van objecten en van persoonlijk letsel.

1.5

Opslag van BPG kolommen gepakt met media

BPG kolommen gepakt met media worden opgeslagen in de bactereostatische oplossing aanbevolen voor de media. Voor het aanbrengen van de bactereostatische oplossing is het cruciaal dat de kolom is gereinigd, bijv. 0,5 NaOH of een andere CIP oplossing aanbevolen voor de media. Het is ook belangrijk dat alle chlorideionen van de kolom worden gespoeld. Na de CIP tenminste vijf kolomvolumes afspoelen met zuiver water. Pas de bactereostatische oplossing toe en de kolom is klaar om opgeslagen te worden. Aanwijzingen voor droge opslag

12

1

Demonteer de kolom

2

Maak alle onderdelen zorgvuldig droog

3

Verpak de kolom in plastic om blootstelling aan stof en andere door de lucht verspreide besmetters te voorkomen

4

Sla de kolom op bij een gecontroleerde omgevingstemperatuur in een schone en droge omgeving.


Inleiding 1

5

Vermijd opslagcondities die de kolom blootstellen aan extreme temperatuur sveranderingen.

6

Na gebruik schoonmaken met NaCl

Opmerking:

1.5.1

Vermijd opslagcondities waarbij de kolom wordt blootgesteld aan extremen temperatuursveranderingen.

Na gebruik schoonmaken met NaCl.

Als een proces het gebruik van NaCl oplossingen omvat, is het essentieel dat de kolom grondig afgespoeld wordt om resten van NaCl te verwijderen. Aanbevolen wordt om de kolom met tenminste vijf kolomvolumes water af te spoelen. Water heeft de voorkeur als spoeloplossing vanwege de oplosbaarheid eigenschappen van NaCl in water tegenover ander mogelijk spoeloplossingen zoals een ethanoloplossing. Bij het spoelen moeten tenminste vijf kolomvolumes zuiver water worden gebruikt om een optimale verwijdering van de achtergebleven chlorideionen te garanderen. Achtergebleven ionen kunnen het roestvrijstaal na verloop van tijd aantasten. Het ontwerp van BPG geeft buffer de mogelijkheid om tijdens het pakken bovenop de adapter te komen. Wanneer het pakken afgerond is en de o-ring afgedicht, is het essentieel dat al het buffer, inclusief chlorideionen van dat gebied verwijderd is om corrosie na verloop van tijd te voorkomen. Zie ook 4.3 chemische bestendigheid voor meer informatie over NaCl

1.6

Afvalafvoer en recycling

Wanneer de kolom het einde van zijn levensduur heeft bereikt, moet het toestel worden verwerkt in overeenstemming met de plaatselijk van kracht zijnde wetten en voorschriften met betrekking tot de milieuaspecten van recycling en afvoer van industriële apparatuur. Dit is de verantwoordelijkheid van de eindgebruiker of diens wettelijke vertegenwoordiger. Neem contact op met uw plaatselijke instanties als u vragen hebt over milieuaspecten of over de van kracht zijnde wetgeving met betrekking tot recycling of afvoer van industriële uitrusting van dit type.

1.6.1

Materialen en stoffen

Ten aanzien van verwerking als afval worden de gebruikte materialen over het algemeen onderverdeeld in de volgende categorieën: •

Brandbaar

•

Hout

•

Samengesteld (b.v. gecoat met plastic of metaalfolie)

•

Papier


13

1 Inleiding 1.7 Doel van deze handleiding

•

Niet brandbaar

•

Metaal

Opmerking:

Gevaarlijke metalen en metalen die gevaarlijke bestanddelen bevatten (b.v. lood, cadmium, kwik, enz.) moeten gescheiden worden behandeld en op een gereglementeerde wijze worden afgevoerd.

•

Kunststoffen, gescheiden in harde (verharde) en zachte (thermo-) plastics

•

Composterend materiaal (alle materialen die in de nabije toekomst in aarde worden omgezet)

•

Te deponeren materiaal (een gering aantal voor recycling ongeschikte materialen en stoffen moeten ter verwerking worden afgevoerd. Informatie over locaties voor afvoer kan men bij plaatselijke instanties opvragen.)

1.6.2

BPG kolommen

Voordat kolom apparatuur als afval wordt afgevoerd, moeten de volgende handelingen worden uitgevoerd: •

De kolom moet worden geledigd, gereinigd en gesteriliseerd.

•

Neem voor niet-brandbare metalen, zoals roestvrij staal, contact op met een erkend schrootverwerkingsbedrijf in uw regio.

1.7

Doel van deze handleiding

Deze handleiding is bedoeld als algemene inleiding tot en handleiding bij de bediening van de kolommen. Deze handleiding bevat de volgende hoofstukken: •

Inleiding (Hoofdstuk 1)

•

De kolom uitpakken (Hoofdstuk 2)

•

De BPG kolom (Hoofdstuk 3)

•

Installatie en lek test (Hoofdstuk 4)

•

Bediening (Hoofdstuk 5)

•

Afkortingen (Hoofdstuk 6)

De bijgevoegde handleiding, “Onderhoudshandleiding voor BPG kolommen”, bevat de volgende onderwerpen:

14

•

Onderhoud en service (Hoofdstuk 1)

•

Het oplossen van problemen (Hoofdstuk 2)

•

Bestelinformatie (Hoofdstuk 3)


De kolom uitpakken 2

2

De kolom uitpakken Neem de apparatuur voorzichtig uit de verpakking en controleer de apparatuur op eventuele tijdens het vervoer opgelopen beschadigingen.

2.1

Codenummers van kolombuizen en standaards

In de hieronder afgedrukte tabel 2-1 staan de codenummers vermeld van de kolombuizen en standaards voor de verschillende kolomdiameters – controleer de codenummers van de nieuwe apparatuur zodat u er zeker van bent dat deze overeenkomen. Tabel 2-1. Codenummers van kolombuizen en standaards.

Kolomdiameter (mm)

Buislengte kolom (mm) 500

750

950

100

18-1103-01

18-1103-02

18-1103-03

18-1031-10

140

18-1113-08

-

18-1113-09

18-1031-20

200

18-1103-11

18-1103-12

18-1103-13

18-1031-20

300

18-1103-21

18-1103-22

18-1103-23

-

450

18-1103-71

18-1103-72

18-1103-73*

-

Standaard

* De buishoogte van de BPG 450 kolom is 1000 mm.

Opmerking: Voor een complete kolomopstelling van de kolommen BPG 100, 140 en 200 moeten zowel de standaard als de kolom worden besteld.


15

2 De kolom uitpakken 2.2 Geleverde componenten

2.2

Geleverde componenten

Controleer of alle in de onderstaande tabel 2-2 opgesomde componenten aanwezig zijn. Tabel 2.2. Stuksaantallen van de componenten geleverd bij BPG kolommen.

Benaming

16

Aantal BPG 100

BPG 140

BPG 200

BPG 300

BPG 450

Blind flens met pakking, EPDM

2

2

2

2

2

Clamp 23 mm, 51 mm

2

2

2

2

2

Standaard

-

-

-

1

1

23 µm netten

2

2

2

2

2

Bouten voor bevestiging van de standaard aan de kolom

-

-

-

6

4

Gebruiks- en Onderhoudshandleiding (elk)

1

1

1

1

1


Installatie en lek test 3

3

Installatie en lek test Alle BPG kolommen beschikken over sanitaire klemfittingen als verbindingsstukken. Let op! Gebruik uitsluitend buizen en klemmen die zijn goedgekeurd voor de maximale druk van de kolom en die bestand zijn tegen de voor gebruik beoogde chemicaliën. Let op! Plaats de kolom uit de weg van looptrajecten, om te voorkomen dat de apparatuur onopzettelijk wordt bewogen of aangestoten. Wees voorzichtig dat u niet staat op of struikelt over slangen die op de vloer liggen.

3.1

Demontage en montage

Demonteer en monteer de kolommen en adapters volgens de instructies in de volgende paragrafen. Raadpleeg voor identificatie van de vermelde onderdelen en toebehoren de Tabellen A-1 t/m A-3 en Figuren A-1 t/m A-5 (deze tabellen en figuren zitten achter in deze handleiding). De tussen haakjes () geplaatste nummers in de onderstaande paragrafen verwijzen naar identificatienummers in de betreffende figuren en tabellen achter in deze handleiding.

WAARSCHUWING! Vergewis u er na het samenstellen van de kolom van dat deze goed gesloten is en niet lekt. 3.1.1

BPG 100, 140 en 200

De k20olom demonteren Raadpleeg voor demontage van de kolommen BPG 100, 140 en 200 Tabel A-1 en Figuren A-1 en A-2 achter in deze handleiding, en ga als volgt te werk: 1

Verwijder de moeren met bolle kop (18) en ringen die de adaptor op de flens (10) bevestigen.

WAARSCHUWING! Als de O-ring van de adapter droog is, kan de O-ring worden beschadigd door geforceerd bewegen van de adapter. Bevochtig de O-ring met water of 20% ethanoloplossing. Smeer de O-ring NIET met vet. 2

Schroef de afstelknop (17) enkele slagen los om de afdichting van de O-ring van de adapter (28/29) los te maken, en verwijder de adapter.

3

Gebruik een dopsleutel en verwijder in de volgorde aangegeven in Fig. 4-1, de moeren (8) en komveerringen (9) waarmee de draagstangen (2) aan de flens (10) zijn vastgemaakt.


17

3 Installatie en lek test 3.1 Demontage en montage

WAARSCHUWING! Draai niet elke individuele moer in één keer los. Draai de moeren beurtelings stap voor stap los in de volgorde aangegeven in Fig. 4-1. Drie tot vier slagen per moer is voldoende om de moeren correct los te draaien en te verwijderen. Gebruik een verstelbare meorsleutel op de afgeplatte delen van de stangen, om te voorkomen dat de stangen losdraaien.

1

3

4

2 47 46 45 44 43 42 41 40

Fig 3-1. Volgorde van los- en vastdraaien van de moeren.

WAARSCHUWING! Zodra de flens is verwijderd, is de kolombuis ongesteund. Wees voorzichtig om zeker te zijn dat de kolombuis niet omvalt. 4

Verwijder de flens (10) voorzichtig.

5

Draai met een verstelbare moersleutel de draagstangen (2) van het eindstuk (12) los.

6

Til de glasbuis (1) op. Plaats de glasbuis voorzichtig op een stabiel oppervlak. Indien de O-ring aan de glasbuis of het eindstuk blijft kleven: bevochtig de O-ring met 20% ethanol en maak de O-ring los.

7

Verwijder met een moersleutel de bouten (13) en sluitringen (14) waarmee het eindstuk (12) aan de standaard (15) is vastgemaakt. Maak het eindstuk en de standaard van elkaar los.

De kolom demonteren Raadpleeg voor het monteren van de kolommen BPG 100, 140 en 200 Tabel A-1 en Fig. A-2 achter in deze handleiding. Ga als volgt te werk: Opmerking: Bevochtig het net met 20% ethanol om ingevangen lucht te verwijderen.

18



1

Verzeker u, aan de hand van Fig. 4-2 hieronder, dat de volgende elementen op de juiste wijze in het eindstuk (12) zijn geplaatst:

•

Draagnet (5)

•

Filternet (4)

•

PTFE geleidering (3)

•

O-ring (6/7)

6/7 3 4

5

12

Fig 3-2. Positie van de onderdelen van het eindstuk bij kolommen BPG 100, 140 en 200.

2

Bevestig het eindstuk (12) aan de strandaard (15) met behulp van de bouten (13) en sluitringen (14).

3

Plaats de glasbuis (1) voorzichtig op de O-ring (6/7) in het eindstuk (12). Zorg dat de glasbuis geen roestvrijstalen delen raakt. Lijn de buis uit met het filternet (4).

4

Schroef de draagstangen (2) in het eindstuk (12).

5

Plaats de flens (10) zodanig dat de draagstangen (2) in de juiste gaten passen. Zorg dat de O-ring (6/7) op de flens precies past met de glasbuis. De glasbuis mag geen roestvrijstalen componenten raken: de glasbuis zou daardoor kunnen barsten.

6

Breng het inwendig oppervlak van de glasbuis in lijn met het inwendig oppervlak van de flens.

7

Monteer de komveerringen (9) en de moeren (8) op de draagstangen (2) en draai ze handvast.

8

Stel een momentsleutel in volgens de specificaties in onderstaande Tabel 4-1 en draai de moeren (8) en komveerringen (9) aan ter bevestiging van de draagstangen (2) aan de flens (10). Houd de volgorde aan zoals afgebeeld in Fig. 4-1 (d.w.z. draai de moeren vast in een diametraal tegenovergesteld patroon).


19


WAARSCHUWING! De glasbuis kan barsten wanneer er bij het vastdraaien van de vier moeren op de draagstangen (de stangen waarmee de flens en het eindstuk op de glazen kolom worden vastgezet) te veel kracht wordt uitgeoefend. Gebruik altijd een momentsleutel bij het vastdraaien van deze moeren. Tabel 3-1. Momentsleutelinstellingen voor de kolommen BPG 100, 140 en 200.

Adapter BPG kolom

Moment (Nm) 9

100

140

200

4

5

5

De kolom is nu gebruiksklaar en de adapter kan worden geplaatst.

De adapter demonteren Raadpleeg voor het demonteren van de kolommen BPG 100, 140 en 200 Tabel A-1 en Fig. A-1 en ga als volgt te werk: 1

Verwijder het filternet (36) door het voorzichtig te buigen. Verwijder het draagnet (35). Pas op dat u de adapter niet bekrast; daardoor kan lekkage ontstaan.

2

Verwijder de stopper (25) van de boven plaat (21) door de bouten (24) te verwijderen.

3

Maak de afdichteenheid (27) en de adapter-binnenbuis (30) los door de bouten (26) op de bovenring van de afdichtingsunit los te schroeven.

4

Verwijder de afstelknop (17) voorzichtig. Hierdoor vermindert de spanning op de veer (33) die zich onder de adapter-binnenbuis (30) bevindt.

5

Verwijder de bovenplaatconstructie (19–23) en neem deze los van de buitenste adapter (31) door deze rechtsom te draaien.

6

Verwijder de afdichteenheid (27) en de O-ring van de adapter (28/29).

7

Verwijder de adapter-buitenbuis (31), de adapter-binnenbuis (30) en de veer (33) door de schroeven (32) los te draaien.

8

De bovenplaatconstructie (19–23) kan worden uiteengenomen door de schroeven (23) los te draaien.

Met deze handeling is de demontageprocedure van de kolom voltooid. Adapter montage Raadpleeg voor de montage van de adapter op de kolommen BPG 100, 140 en 200 Fig. A-1 (en Tabel 4-1 voor de momentinstellingen) en ga als volgt te werk:

20

1

Plaats de busring (20) in de uitsparing in de bovenste schotel (21).

2

Bevestig, met behulp van de schroeven (23), het afstelmoer-inzetstuk (22) aan de knop van de afstelmoer (19), door de bovenplaat (21) heen, zodanig dat de knop van de afstelmoer op de busring (20) kan draaien.

3

Schuif de veer (33), de adapter-binnenbuis (30) en de adapter-buitenbuis (31) op de adapterplaat (34).

4

Maak de adapter-buitenbuis (31) met de schroeven (34) vast aan de adapterplaat (32).



5

Schuif de afdichteenheid (27) op de adapterbuis (31).

6

Schroef de bovenplaatconstructie (19-23), linksom draaiend, 5 cm op de adapterbuitenbuis (31).

7

Draai de afstelknop (17) rechtsom op de bovenkant van de adapter, totdat de gaten in de adapter-binnenbuis (30) en die in de adapter-buitenbuis (31) op gelijke hoogte zijn.

8

Draai de schroeven (26) handvast in de bovenste helft van de afdichtingsunit (27), zodanig dat zij op gelijke hoogte blijven, en goed uitgelijnd met de gaten, totdat er van de schroefdraden nog 1–2 mm zichtbaar is. Zet ten slotte de schroeven vast met een ringsleutel.

9

Monteer de stopper (25) met behulp van de schroeven (24) op de plaat (21).

10 Monteer de O-ring van de adapter (28/29) op de adapterplaat (34). 11 Bevochtig het filternet (36) met 20% ethanol. Bevestig het draagnet (35) en het filternet (36) op de adapterplaat (34). U kunt het bevestigen op de adapter vergemakkelijken door het filternet in water te verwarmen.

Hiermee is de montage van de adapter voltooid. Het plaatsen van een verlengbuis (pakking hulpstuk) De verlengbuis is gemonteerd tijdens levering. Demontage en montage van de verlengbuis worden op dezelfde wijze uitgevoerd als voor de kolom, met uitzondering van de aanwijzingen voor de standaard. Voor de montage van een verlengbuis gaat men als volgt te werk: 1

Verwijder de adapter van de kolom en plaats de verlengbuis op de bovenste flens (10), zodanig dat de kolomstangen in de open gaten in de flens op de pakkingbuis vallen (zie Fig. 4-3 hieronder). Zorg dat de dunne O-ring in de juiste positie in de flens is geplaatst.


21


Fig 3-3. Positionering van de componenten van de pakkingbuis.

2

Gebruik de sluitringen en kopmoeren van het kolomdeksel (adapter) om de verlengbuis aan de kolom te bevestigen.

De verlengde kolom is nu gereed voor de eerste pakking-stap in tweestaps pakkingprocedures. De bouten en sluitringen die met de verlengbuis worden geleverd worden gebruikt om de adaptor op de verlengbuis te monteren. Opmerking: Pak de kolom niet met grotere bedhoogten dan de lengte van de kolom, m.a.w. de adapter moet afdichten tegen de kolomwand en NIET tegen de wand van de verlengbuis. Wanneer de adaptor in de kolombuis wordt geplaatst is een buislengte van 10 cm benodigd als de verlengbuis verwijderd is.

3.1.2

BPG 300

De kolom demonteren Raadpleeg voor demontage van een BPG 300 kolom Tabel A-2 en Figuren A-3 en A-4 achter in deze handleiding, en ga als volgt te werk: 1

22

Draai een van de moeren (4) los die zich bevinden op de klem van de bovenste schotel (1) waarmee de adapterconstructie aan de flens (5) is bevestigd en verwijder de klem.




Draai de afdichtingsregelaar (23) enkele slagen los, voldoende om de adaptor O-ring(33/34) los te maken. Verwijder de adapter zonder met het roestvrij staal het glas te raken.

3

Verwijder met een moersleutel, in de volgorde aangegeven in Fig. 4-4, de moeren (2) en komveerringen (3) waarmee de draagstangen (8) aan de flens (5) zijn bevestigd.

Let op! Draai iedere moer nier in één keer los. Draai de moeren beurtelings stap voor stap los in de volgorde aangegeven in Fig. 4-4. Drie tot vier slagen per moer is voldoende om de moeren correct los te draaien en te verwijderen. Gebruik een verstelbare moersleutel op de afgeplatte delen van de stangen om te voorkomen dat de stangen losdraaien.

1

3

4

2

47 46 45 44 43 42 41 40 Fig 3-4. Volgorde van los- en vastdraaien van de moeren.

Let op! Wanneer de flens wordt verwijderd, verliest de kolombuis zijn ondersteuning. Vermijd dan zorgvuldig dat de kolombuis uit balans raakt of omvalt. 4

Verwijder de flens (5) voorzichtig.

5

Draai met een verstelbare moersleutel de draagstangen (8) van het eindstuk (14) los.

6

Til de glasbuis (9) op. Plaats de glasbuis voorzichtig op een stabiel oppervlak. Indien de O-ring aan de glasbuis of het eindstuk blijft kleven: bevochtig de O-ring met 20% ethanol en maak de O-ring dan los.


23


7

Verwijder met een ringsleutel de bouten (21) en sluitringen (20) waarmee het eindstuk (14) aan de standaard (19) is bevestigd. Maak het eindstuk en de standaard van elkaar los.

De kolom demonteren Raadpleeg voor het monteren van een BPG 300 kolom Fig. A-4 en ga als volgt te werk: Opmerking: Bevochtig het net met 20% ethanol om ingevangen lucht te verwijderen. 1

Vergelijk met Fig. 4-5 om u te verzekeren dat de volgende onderdelen op de juiste wijze in het eindstuk (14) zijn geplaatst:

•

Distributieplaat (13; de geprofileerde zijde moet tegen het eindstuk zijn geplaatst en de platte zijde tegen het draagnet)

•

Draagnet (12)

•

Net (10/11)

•

O-ring (6/7)

6/7 10/11 12 13 14 Fig 3-5. Eindstuk componenten positionering voor BPG 300 kolommen.

24

2

Bevestig het eindstuk (14) aan de standaard (19) met behulp van de bouten (21) en sluitringen (20).

3

Plaats de glasbuis (9) voorzichtig op de O-ring (6/7) in het eindstuk (14). Zorg dat de glasbuis geen roestvrijstalen delen raakt. Lijn de glasbuis uit met het onderste filternet (10/11).

4

Schroef de draagstangen (8) in het eindstuk (14).

5

Breng de flens (5) zodanig in positie dat de draagstangen (8) in de daarvoor bedoelde gaten passen. Zorg dat de O-ring (6/7) op de flens uitlijnt met de glas-



buis. De glasbuis mag geen roestvrijstalen componenten raken: de glasbuis zou daardoor kunnen barsten. 6

Breng het inwendig oppervlak van de glasbuis in lijn met het inwendig oppervlak van de flens.

WAARSCHUWING! De glasbuis kan barsten wanneer er te veel kracht wordt uitgeoefend bij het vastdraaien van de vier moeren op de draagstangen (de stangen waarmee de flens en het eindstuk op de glazen kolom worden vastgezet). Maak bij het vastdraaien van deze moeren altijd gebruik van een momentsleutel. Zie Tabel 4-2 voor de momentinstellingen. 7

Plaats de komveerringen (3) en de moeren (2) op de draagstangen (8) en draai de moeren handvast.

8

Stel de momentsleutel in overeenkomstig Tabel 4-2 hieronder en draai de moeren (2) vast in de volgorde aangegeven in Fig. 4-4. Draai de moeren stapsgewijs vast, zodat onevenredige mechanische druk op de glasbuis wordt vermeden. Drie tot vier slagen per moer wordt aanbevolen.

Tabel 3-2. Momentsleutelinstellingen voor BPG 300 kolommen.

Onderdeel (Zie Fig. A-4 voor locatie)

Momentsleutelinstelling

Momentsleutelinstelling Stangmoeren (2)

6 Nm

Moeren bovenplaatklem (4)

6,5 Nm

9

De kolom is nu gebruiksklaar en de adapter kan worden ingebracht.

De adapter demonteren Raadpleeg voor het demonteren van de adapter op een BPG 300 kolom Fig. A-3 en ga als volgt te werk: 1

Localiseer de smalle gleuf aan de voet van de filternetring. Verwijder het filternet (41/42) door met een spatel of een soortgelijk roestvrijstalen stomp bladinstrument in de gleuf te draaien. Verwijder het draagnet (40).

2

Verwijder de borgschroef (28) en de sluitmoer (27) van de bovenplaat (26).

3

Neem de afdichtingsunit (30) en de adapter-binnenbuis (35) af door de bouten (31) op de bovenring van de afdichtingsunit los te draaien.

4

Verwijder de afdichtingsregelaar (23) voorzichtig terwijl de spanning op de veer (38) die zich onder de adapter-binnenbuis (35) bevindt wordt weggenomen.

5

Verwijder de bovenplaatconstructie (24–26, 29 en 32) en scheid deze van de adapter-buitenbuis (36) door deze rechtsom te draaien.

6

Verwijder de afdichtingsunit (30) en de O-ring van de adapter (33/34).

7

Verwijder de adapter-buitenbuis (36), de adapter-binnenbuis (35) en de veer (38) van de adapterplaat (39) door de schroeven (37) te verwijderen.

8

De bovenplaatconstructie (24-26, 29 en 32) kan worden gedemonteerd door de schroeven (32) los te draaien.


25


Hiermee is de demontageprocedure van de kolom voltooid. Adapter montage Raadpleeg voor het monteren van de adapter op een BPG 300 kolom Fig. A-3 en ga als volgt te werk: 1

Plaats de busringen (25) in de bovenplaat (26).

2

Gebruik de schroeven (32), zet het regelmoer-inzetstuk (29) vast aan het adapterhoogteregelstuk (24), door de bovensplaat (26) heen zodat het adapterhoogteregelstuk op de busringen (25) kan draaien.

3

Schuif de veer (38), de adapter-binnenbuis (35) en de adapter-buitenbuis (36) op de adapterplaat (39).

4

Maak de adapter-buitenbuis (36) met de schroeven (39) vast aan de adapterplaat (37).

5

Schuif de afdichtingsunit (30) op de adapter-buitenbuis (36).

6

Schroef de bovenplaatconstructie (24–26, 29 en 32), linksom draaiend, ongeveer 5 cm op de adapter-buitenbuis (36).

7

Draai de afdichtingsafstelknop (23) rechtsom op de bovenkant van de adapter, totdat de gaten in de adapter-binnenbuis (35) en die in de adapter-buitenbuis (36) op gelijke hoogte zijn.

8

Draai de schroeven (31) handvast in de bovenste helft van de afdichtingsunit (30), zodat zij op gelijke hoogte blijven, en goed uitgelijnd met de gaten, totdat er van de schroefdraden nog 1–2 mm zichtbaar is. Zet ten slotte de schroeven vast met een ringsleutel.

9

Plaats de borgschroef (28) en de sluitmoer (27) in de bovenplaat (26). Draai de borgschroef totdat deze tussen de groef in de adapter-buitenbuis (36) zit. Hiermee wordt zijwaartse beweging van de buis onmogelijk gemaakt, zonder dat verticale beweging wordt belemmerd. Vergrendel de borgschroef (28) met de sluitmoer (27).

10 Monteer de O-ring van de adapter (33/34) op de adapterplaat (39). 11 Bevochtig het filternet (41/42) met 20% ethanol, om alle in het filternet gevangen luchtbelletjes te verwijderen. Verwarm het filternet in water van 40° C indien het net te krap is. 12 Bevestig de distributieplaat (13), het draagnet (40) en het filternet (41/42) op de adapterplaat (39).

Hiermee is de montage van de BPG 300 adapter voltooid.

26



Een verlengbuis installeren (pakking hulpstuk) De verleng buis wordt geassembleerd geleverd. Demontage/montage van de pakkingbuis worden op dezelfde wijze uitgevoerd als voor de kolom is beschreven, met uitzondering van de aanwijzingen die op de standaard betrekking hebben. Raadpleeg voor het monteren van een pakking hulpstuk op de BPG 300 kolom Fig. A-4 en ga als volgt te werk: 1

Verwijder de adapter van de kolom en plaats de pakkingbuis op de bovenste flens (5). Zorg dat de dunne O-ring in de juiste positie in de flens is geplaatst.

2

Zet de pakkingbuis vast op de kolom met de klem van de bovenplaat.

De verlengde kolom is nu gereed voor de eerste pakking-stap in tweestaps pakkingprocedures. De extra klem geleverd bij de verleng buis wordt gebruikt om de adaptor op de verlenging te monteren. Opmerking: Pak de kolom niet met grotere bedhoogten dan de lengte van de kolom, m.a.w. de adapter moet afdichten tegen de kolomwand en NIET tegen de wand van de verlengbuis. Bij het aanbrengen van de adapter in de kolombuis is een buislengte van 10 cm nodig, als de pakking verlengbuis wordt weggenomen.

3.1.3

BPG 450

De kolom demonteren Raadpleeg voor demontage van een BPG 450 kolom Tabel A-3 en Fig. A-5 achter in deze handleiding, en ga als volgt te werk: 1

Maak de afdichting van de adapter los door de hendel (24) te draaien.


Beweeg de adapter enkele millimeters naar beneden zodat de O-ring van de glazen wand loskomt. Beweeg de adapter vervolgens zo ver mogelijk naar boven.

3

Verwijder de bouten (26) en sluitringen (27). Maak het deksel (17) los en til de adapter uit de kolom.

Opmerking: De adapter van BPG 450 kolommen is zwaar. Met het oog op de veiligheid wordt aanbevolen dat de adapter wordt opgetild met een plafondtakel, bevestigd aan de oogbouten van het kolomdeksel. 1

Draai de bouten (44) los, om de kolombuis (12) [inclusief flenzen (3)] van het eindstuk (1) te scheiden. Til de kolombuis voorzichtig op. Als de O-ring aan de glasbuis of het eindstuk blijft kleven: bevochtig de O-ring met 20% ethanoloplossing en maak hem dan los.


27


2

Om de O-ringen van de boven- en onderflens te wisselen: draai de inbus bouten (7) los en til de bovenste flens voorzichtig op. Neem de glasbuis weg en vervang de onderste O-ring. Zet de glasbuis weer terug en breng de nieuwe bovenste O-ring aan. Zet ten slotte de bovenste flens weer terug. Let op dat de glasbuis goed met de flenzen uitlijnt.

Met deze handeling is de demontageprocedure van de kolom voltooid. De kolom monteren Raadpleeg voor het monteren van een BPG 450 kolom Fig. A-5 en Tabel A-3, en ga als volgt te werk: 1

Verzeker u, aan de hand van Fig. 4-6 hieronder, dat de volgende onderdelen op de juiste wijze in het eindstuk zijn geplaatst:

•

Distributieplaat (41)

•

Klikplug (36)

•

Draagnet (2)

•

Filternet (5)

•

U-vormige afdichting (4; gemonteerd op het filternet)

Opmerking: Bevochtig het filternet met 20% ethanol om ingevangen lucht te verwijderen.

4

5

2

36 41

Fig 3-6. Positionering van de onderdelen van het eindstuk bij BPG 450 kolommen.

2

28

Plaats de kolombuis (12) voorzichtig op de U-vormige afdichting (4). Zorg dat de flens (3) gecentreerd is ten opzichte van de U-vormige sluiting.



3

Zet de buis met behulp van de bouten (44) op het eindstuk vast. Draai de bouten aan, in kruislingse volgorde met de momentsleutel ingesteld op 8 Nm. Elke bout moet 3 maal worden aangedraaid.

WAARSCHUWING! De kolombuis kan barsten als er te veel kracht wordt uitgeoefend bij het vastdraaien van de bouten waarmee de flens (3) en de stangen (8) op de kolombuis worden vastgezet. Maak bij het vastdraaien van deze bouten altijd gebruik van een momentsleutel, ingesteld op 4 Nm. Zie Tabel 4-3 hieronder voor momentsleutelinstellingen voor de BPG 450 kolom.

Tabel 3-3. Momentsleutelinstellingen voor BPG 450 kolommen.

Onderdeel (zie Fig. A-5 voor locatie)

Momentsleutelinstelling

Bouten van deksel en eindstuk (26 & 27)

8 Nm

Glasbuis op flenzen (3) en stangen (8)

4 Nm

De adapter demonteren [ter vervanging O-ring (32)] Raadpleeg voor het vervangen van de O-ring op BPG 450 kolommen Tabel A-3 en Fig. A-5 en ga als volgt te werk (zie ook de momentinstellingen in Tabel 4-3): 1

Verwijder de schroefbouten van de adapter (39).

2

Til het deksel (17) en de adapterschroef (29) eraf. Let op dat u de inlaatleiding niet verbuigt (31).

3

Verwijder de veer (34).

4

Verwijder de schroeven (33) waarmee de inlaatleiding is bevestigd.

5

Verwijder de oude O-ring (32) en werp deze weg.

Hiermee is de demontage van de adapter voltooid. Adapter montage 1

Plaats de nieuwe, gesmeerde (20% ethanol) O-ring (32) tussen de inlaatleiding (31) en de adapter (38). Draai de inbus bouten (33) vast.

2

Schuif de veer (34) over de inlaatleiding.

3

Laat de adapterschroef (29) en het deksel (17) voorzichtig over de inlaatleiding zakken.

4

Schroef de bouten (39) in de adapter en draai ze vast.

De adapter is nu gemonteerd. Een verlengbuis installeren (pakking hulpstuk) Het pakking hulpstuk voor de BPG 450 is een roestvrijstalen verlengbuis. Ga voor het monteren van de verlengbuis op een BPG 450 kolom als volgt te werk: 1

Verwijder de adapter van de kolom en plaats de roestvrijstalen verlengbuis op de bovenflens. Zorg dat de O-ring in de juiste positie in de flens is geplaatst.


29

3 Installatie en lek test 3.2 Aansluitingen

2

Zet de verlengbuis vast op de kolom met behulp van de bij de verlengbuis geleverde bouten.

De verlengde kolom is nu gereed voor de eerste pakking-stap in tweestaps pakkingprocedures. Opmerking: Verwijder verlengbuis na de eerste sedimentatiestap. Breng de adapter in en continueer het pakken. Bij het aanbrengen van de adapter in de kolombuis is een buislengte van 15 cm nodig, als de pakking verlengbuis wordt weggenomen.

3.2

Aansluitingen

Er zijn verschillende connectors verkrijgbaar om BPG kolommen op verschillende types leiding en systemen aan te sluiten (zie Hoofdstuk 3 van de Onderhoudshandleiding voor BPG kolommen). De hygiënisch, sanitaire klemfittingen op BPG kolommen bieden de mogelijkheid voor “cleaning-in-place”. Andere aansluitingen zijn vervaardigd van polypropyleen, met een goede chemische bestendigheid. De uitwendige diameter van alle BPG klemfittingen is 25 mm. De manometersets en de veiligheidsklep worden met een 51 mm klem gebruikt.

3.3

De kolom aarden

Om ontlading van statische elektriciteit te voorkomen, kan de kolom worden geaard. Opmerking: Het apparaat moet dwingend noodzakelijk worden geaard als deze in explosie gevaarlijke ruimten wordt gebruikt. Voor dit doel is een passende aardingsset als accessoire verkrijgbaar en de kolomstandaard is voorzien van een aardaansluiting, zoals hieronder afgebeeld.

Aardaansluiting/-kabel op BPG 100, 140, 200 en 450 kolommen

Aardaansluiting/-kabel op BPG 300 kolommen

Fig 3-7. Aardaansluiting op de kolomstandaard.

30



De kolom aarden: sluit het ene uiteinde van de aardkabel aan op een aardaansluiting van het aardingsnetwerk van de werkruimte en het andere uiteinde op de aardaansluiting op de kolomstandaard. De kolom-aardaansluiting heeft een M6 schroefdraad.

3.4

Lekkagetest

Voordat u de adapter naar beneden beweegt, moet u ervoor zorgen dat de O-ring niet droog is. Gebruik bijvoorbeeld 20% ethanol. Test op lekkage rond de adapter: 1

Vul de kolom met water of sanetisatieoplossing en zet dan de adapter in de kolom op de hoogte waarop u de kolom wilt gebruiken.

2

Dicht de adapter af met de afdichtingsregelaar.

3

Verwijder de lucht uit de kolom.

4

Sluit de klep in de uitlaat van de kolom.

Klep kolomuitlaat Drukmeter Adapter

BPG kolom

Veiligheidsklep Klep kolominlaat

Fig 3-8. Schematisch overzicht van de kolom, de afsluiters en de pomp, voor lekkagetests.

5

Verhoog de druk tot de maximale werkdruk.

6

Wacht ongeveer 15 minuten totdat de druk zich heeft gestabiliseerd.

7

Controleer de drukdaling op de drukmeter. De drukdaling mag in 5 minuten niet meer zijn dan 0,1 bar. Nauwkeuriger meetwaarden zijn af te lezen van een recorder die met de drukregelaar is verbonden.

Hiermee is de lekkagetest voltooid.


31

3 Installatie en lek test 3.4 Lekkagetest

32


De BPG kolom 4

4

De BPG kolom Dit hoofdstuk verschaft algemene achtergrondinformatie over de specificaties en eigenschappen van BPG kolommen.

4.1

Specificaties en eigenschappen

Tabel 4-1. Voornaamste specificaties en eigenschappen van BPG kolommen Kolom- Doordiameter snede(mm) oppervlak (cm2))

Buishoogt e (cm)

100 100 100 140 140 140 200 200 200 296 296 296 446 446 446

50 75 95 50 75 95 50 75 95 50 75 95 50 75 100

1 2 3 4

78,5 78,5 78,5 154 154 154 314 314 314 688 688 688 1562 1562 1562

Bedhoogte1,3 (cm)

Max. Totaal Gewicht Bruto druk1 (bar) gewicht adapter afmetingen (kg) (kg) (cm) DxBxH

Bedvolume1,3 (liter)

Min

(1)

(2)

(3)

Min

(1)

(2)

(3)

(4)

0 25 45 0 25 45 0 25 45 0 25 45 11 36 61

26 41 54 26 41 54 26 41 54 26 41 54 22 38 64

34 55 72 34 55 72 34 55 72 34 55 72 30 51 72

45 65 78 45 65 78 45 65 78 45 65 78 45 62 78

0,0 2,0 3,5 0,0 3,9 6,9 0,0 7,8 14,1 0,0 17,2 31,0 17,2 56,2 95,3

2,0 3,2 4,2 4,0 6,3 8,3 8,2 12,9 17,0 17,9 28,2 37,2 34,4 59,4 100,0

2,7 4,3 5,7 5,2 8,5 11,1 10,7 17,3 22,6 23,4 37,8 49,5 46,9 79,7 112,5

3,5 5,1 6,1 6,9 10,0 12,0 14,1 20,4 24,5 31,0 44,7 53,7 70,3 96,8 121,8

8 8 8 6 6 6 6 6 6 4 4 4 2,5 2,5 2,5

15 16 17 25 26 27 34 36 39 68 73 78 200 215 230

7 7 7 11 11 11 13 13 13 29 29 29 100 100 100

48x48x127 48x48x152 48x48x172 59x59x127 59x59x152 59x59x172 59x59x127 59x59x152 59x59x172 69x69x133 69x69x158 69x69x178 80x80x140 80x80x165 80x80x190

De maximum-bedvolumes en -hoogtes zijn gebaseerd op een slurryconcentratie van 75% en een pakkingcompressie van 15%. De compressie is het verschil in volume tussen een gesedimenteerd bed en een bed onder druk. Gebruik een manometer om de druk te bewaken (zie voor bestelinformatie Hst. 3 van de BPG Onderhoudshand-leiding). De tussen haakjes vermelde waarden kunnen met behulp van een pak-verlengingsbuis worden gerealiseerd. De maximum-bedvolumes en -hoogtes zijn gebaseerd op een slurryconcentratie van 80% en een pakkingcompressie van 15%. De maximum-bedvolumes en -hoogtes zijn gebaseerd op een slurryconcentratie van 85% en een pakkingcompressie van 15%.

De gebruikstemperatuur van de BPG kolommen ligt tussen 4° C en +40° C.


33

4 De BPG kolom 4.2 Kolommaterialen

Tabel 4-2. Afmetingen van in- en uitlaatopeningen van BPG kolommen.

Kolomtype

Diameter I/U, mm

4.2

100

140

200

300

450

4

6

6

10

12

Kolommaterialen

De materialen die worden gebruikt voor de constructie van BPG kolommen, zijn zorgvuldig geselecteerd op hun compatibiliteit met de meest gebruikte oplosmiddelen bij de chromatografische scheiding van biomoleculen of het onderhouden en reinigen van de kolommen. Alle polymeer kunststoffen in de processstroom voldoen aan de eisen van USP Klasse VI.Biologische Reactiviteitstesten In Vivo De componenten van de kolom kunnen worden onderscheiden in “natte” onderdelen, die met procesvloeistoffen in aanraking komen, en “droge” onderdelen. Alle constructieonderdelen zijn vervaardigd van materialen van hoge kwaliteit, die voldoen aan de eisen van de industriële productieomgeving. De tabellen A-1, A-2 en A-3 in de Bijlage tonen de onderdelen van de kolommen en identificeren de materiaalsoort waarvan de “natte” en “droge” onderdelen zijn vervaardigd.

4.3

Chemische bestendigheid

Tabel 3-3 dient als leidraad voor de materiaal bestendigheid bij oplossingen voor gebruik in BPG kolommen. Deze informatie is samengesteld uit publicaties van diverse bronnen, niet uit individuele tests op de onderdelen van de kolom. De operator dient deze lijst daarom slechts te gebruiken als leidraad aangaande de mate van chemische bestendigheid van de efzonderlijke materialen. Opgemerkt dient te worden dat het effect van chemicalien sterker wordt bij hogere temperatuur en druk, en dat gecombineerde effecten niet in aanmerking zijn genomen. Als regel moet gebruik van de volgende chemicaliën in BPG kolommen worden vermeden:

34

•

Extreme oxidatoren (zoals peroxiden)

•

Gehalogeneerde verbindingen

•

Chloorhoudende oplossingen (zoals methyleenchloride)

•

Esters (zoals acetaten)

•

Aromatische koolwaterstoffen (zoals tolueen)

•

Geconcentreerde of sterke zuren


De BPG kolom 4

•

Chloroform

•

THF

•

Tolueen

•

Methyleendichloride

Opmerking:

Vermijdt zout in oplossingen met een pH lager dan 4-5. Was de kolom altijd met ten minste twee kolomvolumes pH-neutrale oplossing tussen het gebruik van zout en dat van buffers met lage pH.

Tabel 4-3. Tabel chemische bestendigheid van materialen in BPG kolommen.

1 2 3 4

Vloeistof

Volumeconcentratie

60–90 dagen1

Aceton

10%

OK

Acetonitril

5%

zie opmerking 2

Acetonitril

50%

zie opmerkingen 3, 4

Azijnzuur

10%

zie opmerking 7

Azijnzuur

25%

zie opmerking 7

Cyclohexaan

100%


Ethanol

100%

zie opmerking 2

Ethylacetaat

100%

zie opmerking 4

Ethyleenglycol

50%

OK

Glycerol

100%

OK

Hexaan

100%


Isopropylalcohol

100%

zie opmerking 2

Methanol

100%

OK

Natriumchloride

2M

zie opmerking 5

Natriumhydroxide

2M

OK

n-Propanol

100%

OK

Salpeterzuur

0,1 M

zie opmerking 7

Trifluorazijnzuur

0,1%


Triton

100%

OK

Tween/Tri-n-butylfosfaat

1% / 0,3%

OK

Ureum

8M

OK

Zoutzuur

0,1 M


®

X-100

De test heeft geen betrekking op PVC bebuizing. EPDM-rubber verandert van eigenschap. Gebruik voor herhaalde toepassing en langetermijntoepassing FEP/ PFR/PTFE O-ringen en afdichtingen. Gebruik FEP/PFR/PTFE O-ringen en afdichtingen. De bestendigheid van polypropyleenplastic is redelijk.


35

4 De BPG kolom 4.4 Druk-/flowcurve

5 6 7 8

Kan onder normale bedrijfsomstandigheden worden gebruikt. Gebruik geen NaCl in opslagoplossingen. Wees erop bedacht dat NaCl in zure oplossingen (pH lager dan 4,0) corrosie op roestvrij staal kan veroorzaken. Niet langer dan 4 uur. Niet aanbevolen voor gebruik met PA-netten. FEP verandert van eigenschap. Gebruik daarom EPDM-rubber.

4.3.1

Chemische bestendigheid tegen sodiumchloride

BPG kolommen zijn uitgerust met natte onderdelen van roestvrijstaal en moeten daarom goed worden onderhouden wanneer ze tijdens chromatografische processen aan NaCl worden blootgesteld. Als een proces het gebruik van NaCl oplossingen omvat, is het essentieel dat de kolom grondig afgespoeld wordt om resten NaCl te verwijderen. Aanbevolen wordt om de kolom met tenminste vijf kolomvolumes water af te spoelen.Water heeft de voorkeur als spoeloplossing vanwege de oplosbaarheid van NaCl in water tegenover andere mogelijke spoeloplossingen zoals een ethanoloplossing. Bij het spoelen moeten tenminste vijf kolomvolumes zuiver water worden gebruikt om een optimale verwijdering van de achtergebleven NaCl ionen te garanderen. Achtergebleven NaCl ionen kunnen het roestvrijstaal na verloop van tijd aantasten. Het ontwerp van BPG geeft buffer de mogelijkheid om tijdens het pakken bovenop de adapter te komen. Wanneer het pakken afgerond is en de o-ring afgedicht, is het essentieel dat al het buffer, inclusief chlorideionen van dat gebied verwijderd is om corrosie na verloop van tijd te voorkomen.

4.4

Druk-/flowcurve

In het algemeen zijn theoretische druk-/flowcurves zeer moeilijk te ontwikkelen. De meest nauwkeurige druk-/flowcurves worden experimenteel verkregen. Fig. 31 hieronder toont de typische opstelling zoals die in laboratoria van GE Healthcare wordt gebruikt voor het genereren van druk-/flowcurves

36


De BPG kolom 4

.

Manometer

Naar maatcilinder of flowmeter

Veiligheidsklep

Pomp Buffertank

Opmerkingen: 1. De maximaal toegestane lengte van de leiding tussen de manometer en de uitlaataansluiting is1,5m. 2. De leidingdiameter is 10 mm.

Fig 4-1. Typische opstelling voor het bepalen van druk-/flowcurves.

Opmerking:


De kolom bevat uitsluitend buffer. De uitlaataansluiting moet zich op dezelfde hoogte bevinden als de manometer.

37


4.4.1

Druk-/flowcurves voor lege kolommen

De figuren 3-2 en 3-3 tonen de druk-/flowcurves voor lege BPG kolommen, verkregen volgens de methode beschreven in paragraaf "Bepaling optimaal pakking debiet" van deze hand-leiding en met de hierboven getoonde opstelling.

3500

BPG 100

3000

BPG 140

Flow cm/u

2500 2000 1500 1000

BPG 200

500 0 0

0.2 0.4 0.6 0.8

1

1.2 1.4 1.6 1.8

2

2.2 2.4 2.6

2.8

3

Druk in bar

Fig 4-2. Voorbeelden van druk-/flowcurves voor lege kolommen BPG 100, 140 en 200.

Flow (cm/u) 1000

BPG 300

800

BPG 450

600 400

200

0 0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

0.35

0.4

0.45 0.5 Druk in bar

Fig 4-3. Druk-/flowcurves voor lege kolommen BPG 300 en 450.

38


De BPG kolom 4

4.4.2

Druk-/flowcurves voor gepakte kolommen

De figuren 3-4 en 3-6 tonen de druk-/flowcurves voor van gepakte BPG kolommen, verkregen volgens de methode beschreven in paragraaf "Kolompakkingmethode" en met de in Fig. 3-1 getoonde opstelling.

Flow cm/u

BPG 100

70 60

BPG 200

50

BPG 300

40 30 20 10 0 0.0

1.0

2.0

3.0

4.0

5.0

6.0 Druk in bar

Fig 4-4. Druk-/flowcurve voor Superdex 200 prep grade in BPG kolommen. Bedhoogte 60 cm.

Flow (cm/u) 300 250 200 150 100 50 0 0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5 4.0 Druk in bar

Fig 4-5. Druk-/flowcurve voor Q Sepharose High Performance in BPG 300/500. Bedhoogte 10 cm.


39


Flow cm/u 400

300

200

100

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

Druk in bar

Fig 4-6. Druk-/flowcurve voor een BPG 450 kolom met pakking Q Sepharose Fast Flow tot een bedhoogte van 15 cm.

40


Bediening 5

5

Bediening WAARSCHUWING! Behandel de kolom voorzichtig; de drukspecificaties zijn alleen geldig indien de glasbuis onbeschadigd en krasvrij is. Pomp nooit lucht of gas in de kolom. Opmerking: Voordat de kolom voor het eerst wordt gepakt, wordt aanbevolen de kolom en het leidingwerk te spoelen met een “CIP” reinigingsoplossing (CIP; cleaning-in-place), zoals NaOH., om zeker te stellen dat alle oppervlakken schoon zijn. Zie paragraaf 1.3 in de Onderhoudshandleiding voor BPG kolommen. Voor een optimale werking van BPG kolommen adviseren wij pak protocollen als in de volgende paragrafen beschreven. Voor de kolom in gebruik te nemen wordt aanbevolen dit gehele hoofdstuk te lezen.

5.1

De kolom van pakken

Er zijn veel verschillende pakmethoden, elk afhankelijk van het kolomtype en gebruikte mediumtype. Voor BPG kolommen adviseren wij de pakkingmethode die wordt beschreven in paragraaf 5.1.5. Het optimale pak debiet is afhankelijk van temperatuur, mediumtype, batch en hoeveelheid. Daarom moet het optimale debiet voor ieder systeem empirisch worden bepaald door een druk-/flowcurve te maken. De aanbevolen methoden hiervoor worden uitgebreid beschreven in de paragrafen 5.1.3 en 5.1.5.


41

5 Bediening 5.1 De kolom van pakken

5.1.1

Benodigde hoeveelheden medium per cm bedhoogte

De voor BPG kolommen benodigde hoeveelheden medium per cm bedhoogte worden hieronder vermeld. Tabel 5-1. Benodigde hoeveelheden medium voor BPG kolommen.

Media

Hoeveelheid Hoeveelheid medium per cm gepakt bed medium per liter BPG 100 BPG 140 BPG 200 BPG 300 BPG 450 gepakte kolom

DEAE Sepharose Fast Flow

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

Sepharose Fast Flow

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

CM Sepharose Fast Flow

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

S Sepharose Fast Flow

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

Phenyl Sepharose Fast Flow

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

Sephadex G-25 kwaliteiten C en M

250 g

19,6 g

38,2 g

78,5 g

176 g

394 g

Sephadex G-25 SF

280 g

22,0 g

42,9 g

88,0 g

198 g

443 g

Sepharose 4 en 6 Fast Flow

1,20 l

94 ml

183 ml

377 ml

847 ml

1,89 l

Sephacryl High Resolution

1,25 l

98 ml

192 ml

393 ml

882 ml

1,97 l

Superdex 75 en 200 prep grade

1,20 l

94 ml

183 ml

377 ml

847 ml

1,89 l

Q en SP Sepharose High Performance 1,20 l

94 ml

183 ml

377 ml

847 ml

1,89 l

Phenyl Sepharose High Performance

94 ml

183 ml

377 ml

847 ml

1,89 l

5.1.2

1,20 l

Aanbevolen net afmetingen

Het is van belang degeschikte adapters en eindstuknetten te kiezen. Netten zijn verkrijgbaar in porositeiten van 10, 12, 23 en 54 µm. Netten van de verkeerde maat kunnen problemen met tegendruk of mediumlekkage veroorzaken. De volgende netmaten worden aanbevolen: Tabel 5-2. Aanbevolen netmaten voor BPG kolommen.

42

Netmaat (µm)

Materiaal

Deeltjes grootte (µm)

10

PA1

30-70

12

PEEK2

30-70

23

PP3

FF-media

54

PP3

BB-media

1

Polyamide

2

Polyetheretherketon

3

Polypropyleen


Bediening 5

5.1.3

Bepaling optimaal pakking debiet

Ga als volgt te werk om het optimale pakking debiet voor BPG kolommen te bepalen:

STAP 1

Pomp

Afsluiter (Gesloten)

Fig 5-1. Bepaling optimale flow, stap 1.

WAARSCHUWING! Streef er altijd naar, gevaarlijke vloeistoffen in gesloten containers te bewaren om verdamping of morsen op de werkplaats te voorkomen. STAP 1 a. Bevochtig de kolomnetten met 20% ethanol om ingevangen lucht te verwijderen. b. Vul de kolom met 10–15 cm pakkingbuffer. c. Draineer de leidingen om alle luchtbellen te verwijderen. d. Sluit een slang aan op de zuigaansluiting van een pomp. e. Start de pomp, plaats de slang op het bodemnet en zuig eventuele onder het net overgebleven luchtbellen op.


43


STAP 2

= 2 tot 3 cm resterende buffer



STAP 2 a. Ga door met buffer (en lucht) pompen totdat er 2–3 cm buffer in de kolom resteert. b. Controleer met een waterpas of de kolom horizontaal staat. Corrigeer de stand, indien nodig, met de verstelbare voeten/wielen.

STAP 3


STAP 3 a. Meng de pakkingbuffer met het medium tot een 75% suspensie (slurry); d.w.z. gesedimenteerd volume totale slurryvolume = 0,75.

Opmerking: Deze slurryvolumeverhouding is geschikt BioProcess Media. Overleg over de aanbevolen slurryvolumeverhoudingen voor andere chromatografiemedia met uw leverancier.

44


Bediening 5

STAP 4



STAP 4 a. Schenk de homogene slurry voorzichtig in de kolom. Vergewis u ervan dat er geen luchtbelletjes in de slurry zijn gemengd.


45


STAP 5

Afsluiter (Gesloten) Fig 5-5. Bepaling optimale flow, stap 5.

STAP 5 Opmerking: Deze fase moet snel worden uitgevoerd, zodat het medium (de gel) niet volledig bezinkt. a. Breng de adapter in. b. Zet de kolomadapter vast met de vier bouten (BPG 100, 140 en 200) of met de adapterklem (BPG 300 en 450) van de bovenplaat. c. Plaats, met behulp van de hoogteregelaarhendel, de adapter op een positie 1–5 mm onder het vloeistofoppervlak.

46


Bediening 5

STAP 6

Afsluiter (Gesloten) Fig 5-6. Bepaling optimale flow, stap 6.

STAP 6 a. Dicht de O-ring van de adapter door de afdichtingsregelknop (BPG 100, 140 en 200) of de hendel (BPG 300 en 450) op de bovenkant van de adapter rechtsom te draaien. b. Laat de adapter zakken, met de O-ring afgedicht, en vul deze tegelijkertijd met buffer om eventuele lucht uit de adapterleiding te drijven. De adapterleiding is gevuld wanneer de buffer een bol oppervlak vertoont en er geen luchtbellen meer verschijnen.


47


STAP 7

Veiligheidsklep

Pomp

Manometer

Afsluiter


STAP 7 WAARSCHUWING! Gebruik altijd een veiligheidsklep die direct na de pomp is aangesloten. a. Start de pomp en verwijder de lucht uit de leidingen door met een lage snelheid te pompen. b. Sluit een manometer tussen de pomp en de kolom aan terwijl de pomp op lage flowsnelheid draait, en sluit vervolgens de leiding aan op de bovenkant van de kolom. c. Open de onderste afsluiter. d. Leg de basis voor een druk-/flowcurve door met een lage flowsnelheid te beginnen. Het medium zal beginnen te bezinken, waardoor een heldere ruimte ontstaat tussen het bed en de adapter. Verander de instellingen van de adapter NIET. e. Verhoog de druk langzaam, in stappen, en noteer de flow wanneer de druk is gestabiliseerd. De benodigde tijdsduur tot de druk stabiliseert is afhankelijk van het type medium en kan variëren van enkele minuten tot enkele uren. f.

Ga door met de drukverhogingen totdat een flowplafond is bereikt (drukverhoging geeft geen geen flowverhoging). Voor sommige harde gel media is er geen plafondwaarde. Gebruik in zulke gevallen de flow bij de maximaal toegestane druk van de kolom.

g. Wanneer de maximale druk is bereikt, moet de bepaling worden voltooid.

48


Bediening 5

STAP 8 Druk-/flowcurve

70%

Max. druk

Pakkingdruk

Flow

Pakking debiet

100%

Druk


STAP 8 a. Zet de druk uit tegen de flow, zoals aangegeven in bovenstaand voorbeeld. De optimale pakking-flowsnelheid bedraagt ongeveer 70% van de maximale flow. Voor sommige harde gel media is er geen plafondwaarde; gebruik in zulke gevallen de flow bij de maximaal toegestane druk van de kolom.

5.1.4

Aanbevolen pakkingflow voor GE Healthcare media

Elke levering van media gaat vergezeld van instructies, waaronder de aanbevolen pakkingflowwaarden. Voor een optimale pakking adviseren wij echter dat voor elke mediumzending, kolom of systeemconfiguratie een druk-/flowcurvebepaling wordt uitgevoerd, zoals beschreven in paragraaf 5.1.3.

5.1.5

Kolom-pakkingmethode

Deze pakkingmethode kan met BioProcess Media worden toegepast en is gebaseerd op toepassing van een constante flow in de kolom. Ter voorbereiding van de kolom pakking procedure gaat u als volgt te werk: WAARSCHUWING! Gebruik altijd een veiligheidsklep die direct na de pomp is aangesloten.


49


STAP 1. Verifieer of de optimale flow voor de combinatie van apparaten, kolom, mediumtype en -hoeveelheid is bepaald (zie paragraaf 5.1.3). STAP 2. Controleer of er voldoende pakkingbuffer beschikbaar is. Een gangbare pakkingbuffer is 0,1 M NaCl. Controleer echter altijd de aanwijzingen bij het medium (de gel) op aanbevolen pakkingbuffers. STAP 3. Bevochtig de netten met 20% ethanol om in de netten gevangen lucht te verwijderen. STAP 4. Stel de flow van de pomp in op de waarde van de pakking, zonder dat de kolom op de pomp is aangesloten. Noteer de pompsnelheid, zodat het pakken op de juiste flow begint. STAP 5. Als het medium al in de kolom is, haalt u de adapter omhoog, roert het medium voorzichtig en herhaalt u de stappen 5 en 6 zoals vermeld in paragraaf 5.1.3. Als het medium niet in de kolom zit, herhaalt u de stappen 1–6 van paragraaf 5.1.3.

STAP 6

Veiligheidsklep

Pomp

Manometer

Afsluiter

Fig 5-9. Kolom-pakkingmethode, stap 6.

50


Bediening 5

STAP 6 a. Start de pomp. b. Verwijder luchtbellen uit het leidingwerk van de pomp door met een lage snelheid te pompen. c. Sluit de manometer tussen de pomp en de kolom aan terwijl de pomp op lage snelheid draait, en sluit vervolgens de slang aan op de bovenkant van de kolom. d. Open de onderste afsluiter. e. Stel de flow in op de vooraf bepaalde waarde. f.

Meet de flow met regelmatige tussenpozen en stel deze, indien nodig, bij. Naarmate het middel pakt, verhoogt de tegendruk van het bed en neemt de flow af.

g. Zorg dat de druk, weergegeven door de manometer, de maximumdruk voor het medium niet overschrijdt (raadpleeg de gebruikershandleiding bij elk medium) of die van de kolom.

STAP 7

Veiligheidsklep

Pomp Manometer

Markering bovenkant bed

Afsluiter


STAP 7 a. Markeer de bovengrens van het bed wanneer het bed is gesedimenteerd. b. Schakel de pomp uit. c. Sluit de onderste afsluiter. d. Maak de afdichting van de O-ring van de adapter los door de afdichtingsregelknop (BPG 100, 140 en 200) of de afdichtingsregelhendel (BPG 300 en 450) op de bovenkant van de adapter linksom te draaien.


51


STAP 8 Veiligheidsklep

Pomp Manometer

Afsluiter (Gesloten) Fig 5-11. Kolom-pakkingmethode, stap 8.

STAP 8 a. Breng de adaptor snel omlaag door de hoogteregelhendel rechtsom te draaien. De buffer tussen het gesedimenteerde bed en de adapter stroomt tussen de O-ring van de adapter en de kolomwand door. Tijdens deze handeling begint het bed te stijgen. Stop de neerwaartse beweging van de adapter wanneer deze zich 0,5 tot 1 cm boven het bed bevindt.

52


Bediening 5

STAP 9

Veiligheidsklep

Pomp

Manomete

Afsluiter


STAP 9 a. Dicht de O-ring van de adapter af door de knop (BPG 100, 140 en 200) of de afdichtingsregelhendel (BPG 300 en 450) rechtsom te draaien. b. Open de onderste afsluiter. c. Start de pomp. d. Stel de flow in op de pakkingflowwaarde. Controleer op de manometer of de druk de maximumdruk voor het medium niet overschrijdt (raadpleeg de gebruikershandleiding bij elk middel). Het bed moet nu weer worden gecomprimeerd tot het niveau van de markering op de kolom (aangebracht in stap 7). e. Herhaal stappen 7 en 8 totdat de adapter de markering op de kolom bereikt.

Opmerking: Open de O-ring van de adapter niet wanneer er maximaal 1 cm vloeistof is overgebleven. Gebruik in dat geval de hoogteregelaarhendel om de adapter omlaag te schroeven tot de laatst overgebleven centimeter. Breng de adapter nooit meer dan maximaal 5 mm in het bed. Ontkoppel de slang op de bovenkant van de kolom zodat overtollige buffer via de bovenkant van de adapter kan worden verwijderd.


53

5 Bediening 5.2 Kolom-evaluatie

Hiermee is de pakprocedure van de kolom afgerond. Spoel restanten buffer of slurry van de bovenkant van de adapter. De ruimte tussen de adapterkop en de bovenkant van de kolom moet droog en schoon zijn, of gevuld met 20% ethanol, om bacteriegroei te voorkomen. Opmerking: Controleer vóór gebruik van de kolom altijd de specificaties van de gepakte kolom. Zie de aanwijzingen hiervoor in paragraaf 5.2 hieronder.

5.2

Kolom-evaluatie

De doelmatigheid van een kolom hangt af van de kwaliteit van de pakking. Een slecht gepakte kolom veroorzaakt een onevenredige flow, die weer resulteert in zoneverbreding en een verminderde resolutie. Het is belangrijk een methode te hanteren waarbij de kolom kan worden getest voordat deze in gebruik wordt genomen. Zo’n methode moet eenvoudig en kwantitatief zijn, en mag geen contaminerende materialen in het proces inbrengen. Ook levert het een voordeel op indien tijdens de gebruiksperiode van een kolom dezelfde methode voor werkingscontrole kan worden gebruikt, zodat gemakkelijk kan worden bepaald wanneer het medium opnieuw moet worden gepakt of moet worden vervangen. Methoden die gebruik maken van gekleurde stoffen, zoals Blue Dextran, moeten worden vermeden, aangezien deze niet voldoen aan de vorengenoemde criteria en niet kunnen worden toegepast bij media voor ionenwisseling en affiniteitschromatografie. De ervaring heeft geleerd dat de beste methode voor het uitdrukken van de werkzaamheid van een kolom bestaat in de formulering van het hoogteequivalent van een theoretische schotel, HETP, en de piek-asymmetriefactor As. Deze waarden kunnen eenvoudig worden vastgesteld door het opbrengen van een monster van een NaCl- of acetonoplossing op, bijvoorbeeld, de kolom. Het is van belang dat de kolom goed wordt geëquilibreerd voordat de pakking wordt geëvalueerd (2 kolomvolumes). Het verdient voorkeur, drie tests uit te voeren, zodat kan worden gecheckt of de testwaarden stabiel zijn. Als een slecht resultaat in de loop van de test verbetert, kan dat betekenen dat de kolom niet goed was geëquilibreerd. Om de stabiliteit van het bed te testen, zet de kolom 20 uur lang met een pakkingdruk van 70% in werking en test hem dan weer (bij voorkeur in drievoud). Houd in gedachten dat drukpieken een slechte pakking kunnen veroorzaken (barsten). Als dit gebeurt, zijn een lucht vanger en een veiligheidsklep tussen de pomp en de kolom noodzakelijk. De veiligheidsklep moet tussen de lucht vanger en de kolom worden geplaatst.

54


Bediening 5

5.2.1

De keuze van testmonsters voor kolommen

Het best geschikte materiaal voor het testen van kolommen is uiteraard het monster dat in de toepassing moet worden gebruikt. Dit is echter niet altijd praktisch of economisch haalbaar. Als alternatief kan een oplossing van NaCl of aceton worden gebruikt om een goede indicatie te geven van de kwaliteit van de kolompakking. Het eluaat wordt gecontroleerd door het meten van de conductiviteit of de UV-absorptie. Het daaruit voortkomend elutieprofiel wordt gebruikt om de HETP-waarde te berekenen. De voordelen van een NaCl-oplossing zijn dat het makkelijk verkrijgbaar is en dat het veilig kan worden gebruikt om alle soorten kolommen te testen. Een nadeel is dat NaCl interactie kan ondervinden met de mediummatrix, vooral bij ionenwisselingsmatrices, en daardoor onjuiste testresultaten oplevert. Aceton daarentegen reageert niet met de matrix en wordt door UV-absorptie gedetecteerd bij 280 nm. Als alternatief kan ook de gebruikelijke bufferconcentratie worden vertienvoudigd en als testoplossing worden gebruikt. Fig. 5-13 hieronder toont een UV-bepaling voor aceton in een typische BPG-kolom applicatie en geeft de berekende HETP- en As-waarden weer. Ve UV-absorptie

Kolom: BPG 300 Medium: Sepharose 6 Fast Flow Bedhoogte: 57,5 cm Bedvolume: 40,6 liter Eluaat: Gedestilleerd water Monster: 1,05 liter (1% aceton, 1% NaCl) Flow: 19 cm/u Ve = 18,8 Wh = 0,9 HETP = 0,024 cm a = 0,90 b = 0,85 b/a = 0,85/0,90 As = 0,94

Vh 50% a

b 10% Volume

Fig 5-13. Een testchromatogram met HETP- en As-berekeningen.


55


5.2.2

HETP-berekening

Het monster volume dient ongeveer 1% van het totale bedvolume te zijn met een 1,0% v/v NaCl concentratie of gelijkwaardig bij gebruik van een sterkere buffer. Ook kan 1,0% v/v aceton worden gebruikt. De lineaire flow moet 30 cm/u zijn voor 34 µm en 50 µm media en 20 cm/u voor 90 µm media. Om verdunning van het monster te vermijden, moet men het monster zo dicht mogelijk bij de kolominlaat aanbrengen. Als het systeem van een lucht vanger is voorzien, moet deze tijdens het aanbrengen van het monster worden gepasseerd, om terugmenging te voorkomen. Bereken de HETP-waarde van de conductiviteitscurve (of UV-curve) als volgt: HETP, in zijn meest eenvoudige vorm, wordt uitgedrukt als: HETP = L/N waarbij: L = bedhoogte (cm) N = schotelgetal N wordt bepaald door de vergelijking: N = 5,54 (Ve /Wh)2 waarbij: Ve = elutievolume (ml) Wh = piekbreedte op halve hoogte (ml) Ve wordt gemeten als het volume dat door de kolom is gegaan van het midden van de monsterapplicatie naar het piekmaximum. Wh wordt gemeten als de breedte op halve hoogte van de piek (tussen basis en top). Vanuit het voorbeeld in Fig. 5-13 kan de HETP-waarde van het chromatogram als volgt worden berekend: Tabel 5-3. HETP-berekeningen.

Aceton

Ve (ml)

Wh (ml)

N

N/m

HETP cm

18800

900

2417

4203

0,024

Goed gepakte kolommen hebben over het algemeen een lage HETP-waarde. Het is echter alleen mogelijk kolommen te vergelijken indien de pakking van hetzelfde mediumtype is en onder gelijke omstandigheden is getest. Als vuistregel kan men aanhouden dat een goede HETP-waarde gelijk is aan ongeveer twee tot vier maal de gemiddelde deeltjesgrootte van het gebruikte

56


Bediening 5

medium, vooropgesteld dat het monster en het medium geen onderlinge interactie hebben. In de praktijk kan de correlatie tussen de HETP-waarde en de werking van de kolom alleen worden bepaald door de interne specificaties van de klant. Als dit eenmaal is vastgesteld, kan een norm worden gesteld waarop de acceptatie van een kolompakking kan worden beoordeeld. Bijvoorbeeld, de gebruiker van de kolom kan vanuit de praktijkervaring weten dat een kolom gepakt met Sephadex G-25 medium met HETP-waarden boven 0,05 cm niet de gewenste scheiding oplevert. Als gevolg zal de gebruiker deze waarde aanhouden als de maximum toelaatbare, ofwel de minimaal acceptabele kwaliteit.

5.2.3

Berekening van de asymmetriefactor van de pieken

De vorm van de piek moet zo symmetrisch mogelijk zijn. Dit is gewoonlijk het geval bij gel-filtratiemedia, maar bij bepaalde ionenwisselings- en affiniteitsmedia kan de piek asymmetrisch zijn door interactie met de het medium. Een verandering in de piekvorm is veelal het eerste teken van verslechtering van de kolom. De asymmetriefactor moet zo dicht mogelijk bij waarde 1 liggen. De asymmetriefactor, As, wordt vanuit de grafiek in Fig. 5-13 als volgt berekend: As = b/a waarbij: a = afstand vanaf de top van de piek tot 10% van de piekhoogte op de oplopende zijde van de piek b = afstand vanaf de top van de piek tot 10% van de piekhoogte op de dalende zijde van de piek Opmerking: Het meten van HETP- en As-waarden is de beste methode om de conditie van de gepakte kolom te beoordelen. Een gepakte kolom kan er goed uitzien, maar kan voor een optimale werking toch een nieuwe pakking nodig hebben. Controleer de kolom altijd na het pakken en ook regelmatig tussen de runs. Zo waarborgt u een optimale werking van de kolom.


57


58


Afkortingen 6

6

Afkortingen De verklaring van de in deze handleiding gebruikte afkortingen zijn als volgt: As CIP EPDM FEP FF HETP HR ID IEX L N PA PEEK POM PP PTFE PVC THF UV Ve Wh PFR FPM

Piek-asymmetriefactor “cleaning in place” Ethyleen-propyleen-dieen-monomeer Fluoro-etheen-polymeer snelstromig (fast flow) Hoogte-equivalent van een theoretische schotel (height equivalent to a theoretical plate) Hoge resolutie Inwendige diameter Ionenwisselingschromatografie Bedhoogte Schotelgetal. Polyamide Polyetheretherketon Acetaal kunststof Polypropyleen polytetrafluorethyleen Polyvinylchloride Tetrahydrofuraan Ultraviolet Elutievolume Piekbreedte op halve piekhoogte Perfluor-rubber Fluorkool-rubber


59

6 Afkortingen

60


Tabel A-1: Componenten van de kolommen BPG 100, 140 en 200. De volgnummers verwijzen naar Fig. A-1 en A-2. Volgnr.

Omschrijving

Materiaal

Contact met procesvloeistoffen?

Hoev. p. pkt.

BPG 100 Codenr.

BPG 140 Codenr.

BPG 200 Codenr.

1

Kolombuis 500 Kolombuis 750 Kolombuis 950

Borosilicaatglas Borosilicaatglas Borosilicaatglas

X X X

1 1 1

18-0251-01 18-0251-02 18-0251-03

18-1112-95 18-1112-96

18-1152-01 18-1152-02 18-1152-03

2

Staaf voor buis 500 Staaf voor buis 750 Staaf voor buis 950

316 316 316

1 1 1

18-1105-80 18-1105-81 18-1105-82

18-1105-83 18-1105-85

18-1105-83 18-1105-84 18-1105-85

3

Geleidering

PTFE

1

18-0251-22

18-1112-97

18-0252-22

4

Net, 54 µm, eindstuk Net, 23 µm, eindstuk Net, 10 µm, eindstuk Net, 12 µm, eindstuk

PP PP PA PEEK

X X X X

2 2 2 2

18-1126-97 18-9252-01 18-0251-77 18-1148-38

18-1126-99 18-1113-00 18-1113-02 18-1148-40

18-1127-01 18-9254-01 18-0252-77 18-1148-42

5

Draagnet, eindstuk

PP

X

2

18-0251-55

18-1112-98

18-0252-55

6

Flens O-ring

EPDM

X

2

18-8494-01

18-1113-06

18-8489-01

7

Flens O-ring

FEP

X

1

18-0019-41

18-1113-07

18-0019-51

8

Moer, M6 Moer, M8

316 316

5 5

19-1582-01 -

19-0763-01

19-0763-01

9

Komveerring

316

4

18-8482-01

18-8482-01

18-8482-01

10

Flens

316

1

18-1134-21

18-1113-21

18-1134-22

11

Kolomcentreerpen

PTFE

8

18-1003-00

-

18-1003-00

12

Eindstuk

316L

13

Bout M8 x 12

316

X

1

18-1144-18

18-1113-20

18-1112-62

4

-

18-1113-28

18-1113-28

14

Sluitring

316

4

15

Standaard, compleet

316L

1

18-1143-26

18-1113-29

18-1113-29

18-1031-10

18-1031-20

16

Klem 25 mm

304

1

18-1001-31

18-1031-20

18-1001-31

18-1001-31

17

Instelknop

PEEK

1

18

Moer met bolle kop

316

4

18-1109-27

18-1109-27

18-1109-27

18-1143-25

18-1113-27

19

Instelmoer, romp

316

1

11-0003-01

18-1113-27

18-1113-26

18-1113-26

20

Busring

POM

2

18-0264-01

18-0267-01

18-0267-01

21

Bovenste schotel

316

1

18-1143-24

18-1113-24

-

22

Instelmoer, inzetstuk

PEEK

1

18-0251-20

18-0252-20

18-0252-20

23

Allen-schroef, M8 x 45

316

5

19-6375-01

19-6375-01

19-6375-01

24


316

5

19-6356-01

19-6356-01

19-6356-01

25

Borg

316

1

-

18-1113-25

18-1113-25

26

Adapterkopschroef

316

3

18-8457-01

18-8457-01

18-8457-01

27

Afdichtingsunit

316L

1

18-1147-47

18-1113-31

18-1147-48

28

Vuladapter-O-ring

EPDM

X

2

18-8475-01

18-1113-10

18-0275-01

29

Vuladapter-O-ring

FEP

X

1

18-0019-40

18-1113-11

18-0019-50

30

Vuladapter-binnenbuis

316

1

18-1113-23

18-1113-23

18-1113-23

31

Vuladapter-buitenbuis

316

1

18-1134-83

18-1134-83

18-1134-83

32

Schroef M6 x 12

316L/PTFE

3

18-1145-08

18-1145-08

18-1145-08

33

Veer

316/PTFE

1

18-8491-01

18-8491-01

18-8491-01

34

Adapterschotel**

S31803***

X

1

18-1112-80

18-1113-30

18-1112-81

35

Draagnet, adapter

PP

X

2

18-1103-04

18-1112-99

18-0252-56

36

Net, 54 µm adapter Net, 23 µm adapter Net, 10 µm adapter Net, 12 µm adapter

PP PP PA PEEK

X X X X

2 2 2 2

18-1126-96 18-1103-08 18-1103-05 18-1148-37

18-1126-98 18-1113-01 18-1113-03 18-1148-39

18-1127-00 18-9253-01 18-0252-76 18-1148-41

37

Afdichting 25 mm

EPDM

X

2

18-0019-27

18-0019-27

18-0019-27

38

Voet, standaard

316

1

18-1126-93

18-1126-93

18-1126-93

39

Wiel

-

3

18-1001-09

18-1001-09

18-1001-09

40

4-poorts-, 2-richtingsafsluiter

316L/PTFE

X

1

18-5757-01

18-5757-01

18-5757-01

41

Bebuizing*

-

X

1

-

-

-

42

Sluitring

PP

1

18-1142-79

NA

NA

43

Sluitring

PP

1

18-1142-80

18-1142-80

18-1142-80

* Zie Tabel 3-3 in de BPG Onderhoudshandleiding; ** Inw. diam. buis 4 mm (BPG 100), 6 mm (BPG 140 en 200) *** Vergelijkbaar met 316L

Tabel A-2: Componenten van kolom BPG 300. De volgnummers verwijzen naar figuren A-3 en A-4. Volgnr.

Omschrijving

Codenr.

Materiaal


Hoev. p. pkt.

1

Bovenste adapterschotel

18-1012-48

316

1

2

Moer, M12

18-1012-24

316

6

3

Komveerring

18-1012-25

316

6

4

Moer, M10

18-1012-44

316

5

5

Flens

6

O-ring 301 x 6 mm

18-1012-26

EPDM

X

7

O-ring 301 x 6 mm

18-1012-27

FEP

X

8

Staaf voor T300/500 Staaf voor T300/750 Staaf voor T300/950

18-1012-31 18-1012-32 18-1012-33

316 316 316

9

Kolombuis T300/500 Kolombuis T300/750 Kolombuis T300/950

18-1012-28 18-1012-29 18-1012-30


10

Net, 23 µm eindstuk

18-1012-34

PA

X

2

11

Net, 10 µm eindstuk Net, 12 µm eindstuk Net, 54 µm eindstuk

18-1012-35 18-1148-44 18-1127-03

PP PEEK PP

X X X

2 2 2

316 2 1 1 1 1 X X X

1 1 1

12

Draagnet, eindstuk

18-1012-36

PP

X

2

13

Distributieschotel

18-1012-37

PP

X

2

14

Eindstuk

18-1140-47

316L

X

15

Afdichting, 25 mm, inw. diam. 10 mm

18-0200-00

EPDM

X

5

16

Afdichting, 25 mm, inw. diam. 10 mm

18-1012-40

PTFE

X

5

17

Connector 25 mm/10 mm*

-

PP

X

2

18

4-poorts-, 2-richtings handbediende afsluiter

18-1012-56

316L/PTFE

X

1

19

Standaard, compleet

18-1012-38

316L

-

20

Sluitring

18-1012-61

316

6

21

Bout M12 x 25

18-1012-65

316

6

22

Wiel

18-1001-09

-

1

23

Sluitinginsteller

18-1012-41

PEEK

1

24

Adapterhoogte-insteller

18-1128-31

316

1

25

Busring

18-1012-42

POM

2

26

Bovenste adapterschotel

18-1129-06

316L

-

27

Moer, M10

18-1012-44

316

5

28

Borgschroef, compleet

18-1012-43

316/POM

1

29

Instelmoer, inzetstuk

18-1012-45

PEEK

1

30

Afdichtingsunit

18-1147-19

316L

-

31

Adapterkopschroef, M8

18-1012-46

316

3

32


18-1012-47

316

33

O-ring 274 x 8 mm

18-1012-51

EPDM

X

2

34

O-ring 274 x 8 mm

18-1012-52

FEP

X

1

35

Vuladapter-binnenbuis

18-1147-83

316

36

Vuladapter-buitenbuis

18-1142-93

316L

1

37

Schroef, M8 x 16

18-1145-10

316L/PTFE

5

5

38

Veer

18-1012-50

316/PTFE

39

Adapterschotel**

18-1112-82

S31803***

X

1

1

40

Draagnet, adapter

18-1012-53

PP

X

2

* Zie Tabel 3-4 in de BPG Onderhoudshandleiding; ** Inw. diam. buis 10 mm; *** Vergelijkbaar met 316L

Tabel A-3: Componenten van kolom BPG 450. De volgnummers verwijzen naar figuur A-5. Volgnr.

Omschrijving

1

Eindstuk

18-1109-67

316L

X

1

2

Draagnet, eindstuk

18-1104-35

PP

X

1

3

Flens

18-1109-68

PP/316

X

1

4

U-vormige sluiting

18-1104-40

EPDM

X

1

5

6

Codenr.

Materiaal


Hoev. p. pkt.

U-vormige sluiting

18-1117-55

PFR

X

1

Net, 54 µm eindstuk Net, 23 µm eindstuk Net, 10 µm eindstuk Net, 12 µm eindstuk

18-1127-05 18-1103-19 18-1103-18 18-1148-46

PP PP PA PEEK

X X X X

1 1 1 1

Flens O-ring 446 x 6

18-1105-33

EPDM

X

2

Flens O-ring 446 x 6

18-1117-67

FEP

X

1

7

Allen-schroef M8 x 50

18-1109-40

316

5

8

Staaf BPG 450/500 Staaf BPG 450/750 Staaf BPG 450/1000

18-1106-18 18-1103-09 18-1103-10

316 316 316

1 1 1

9

Afdichtingsunit

18-1109-69

316L

1

10

Penbout

18-3001-07

316

3

11

Borgschroef

19-4363-01

316

12

Glasbuis BPG 450/500 Glasbuis 450/750 Glasbuis 450/1000

18-1103-14 18-1103-15 18-1103-16


2 X X X

1 1 1

13

Draaibare borgdop

18-1107-43

POM

14

Draaibare stop

18-1109-41

316L

1

15

Schroef M8 x 50

18-1109-40

316

5

16

Afstandstuk

18-1109-42

316L

1

17

Deksel

18-1109-70

316

1

18

Busring

18-1109-43

PP

2

19

Adapterhoogte-insteller

18-1109-44

POM

1

20

Hendel

18-1109-45

316

1

21

Moerflens

18-1109-46

PEEK

1

23

Sluitinginsteller

18-1109-47

PEEK

1

24

Hendel

18-1109-48

316

1

25

Knop

18-1109-49

PP

1

26

Schroef M10 x 65

18-1109-50

316

2

27

Sluitring 10,5 x 20

18-1109-51

316

10

28

Moer M10 met bolle kop en sluitring

18-1103-20

316

1

29

Adapterschroef

18-1109-54

316L

1

30

Verstelbuis

18-1109-55

316

1

31

Inlaatbuis inw.diam. 12 mm

18-1109-53

316L

X

1

32

O-ring 12,3 x 2,4 O-ring 12,3 x 2,4

18-1103-70 18-1117-65

EPDM FEP

X X

2 1

33

Schroef M4 x 16

18-1109-56

316

2

34

Veer

18-1107-44

316/PTFE

1

*Vergelijkbaar met 316L. (wordt op de volgende pagina voortgezet)

1

Componenten van kolom BPG 450 (vervolg) Volgnr.

Omschrijving

Codenr.

Materiaal


42

Adapterdraagnet

18-1104-34

PP

X

1

43

Net 54 µm adapter Net 23 µm adapter Net 10 µm adapter Net 12 µm adapter

18-1127-04 18-1001-62 18-1017-46 18-1148-45

PP PP PA PEEK

X X X X

1 1 1 1

44

Schroef M10 x 80

18-1109-59

316

2

45

Schroef M10 x 16

18-1109-60

316

2

46

Beugel

18-1109-61

316

1

47

Schroef M5 x 16

18-1109-62

316

2

48

Inlaatbuis onder

18-1109-63

316L

50

Allen-schroef M10 x 40

18-1109-65

316

2

51

Poot

18-1109-66

316

1

52

Wieldrager

18-1107-46

POM/316

1

X

Hoev. p. pkt.

1

Stikkordregister A aanbevolen net afmetingen 42 pakkingflow 49 adapter montage kolom 300 26 kolom 450 29 kolommen 100, 140 en 200 20 B bepaling pakking debiet 43 C CE-markering 10 chemische bestendigheid 11, 34, 35 codenummers kolombuizen en standaards 15 connectors 30 D de adapter demonteren kolom 300 25 kolom 450 29 kolommen 100, 140 en 200 20 de kolom aarden 30 de kolom afvoeren als afval 13 de kolom demonteren kolom 300 22 kolom 450 27 kolommen 100, 140 en 200 17 de kolom installeren 17 de kolom monteren kolom 300 24 kolom 450 28 kolommen 100, 140 en 200 18 de kolom uitpakken 15 drukcurves 36 E een pakking hulpstuk installeren kolom 300 27 een verlengbuis monteren kolom 450 29 F flowcurves 36 G gekwalificeerde operators 12


H HETP-berekeningen 56 hoeveelheden medium 42 K kolom aanbevolen pakkingmethode 49 aarden 30 afvoeren als afval 13 basisonderdelen 9 codenummers buizen en standaards 15 demontage en montage 17 evaluatie 54 installatie 17 keuze van testmonster 55 lekkage 17 materialen 34 pakking 41 stuksaantallen van bijgeleverde componenten 16 testen op lekkage 17 uitpakken 15 werkingsprincipes 41 L lekkagetest 31 M momentsleutelinstellingen kolom 300 25 kolom 450 29 kolommen 100, 140 en 200 20 N notities aandachtspunten 11 opmerkingen 11 waarschuwingen 11 P pakking hulpstuk montage op BPG 300 kolommen 27 montage op BPG 450 kolommen 29 pakkingbuis positionering componenten 22 piek-asymmetrieberekeningen 57 plaatsing van een verlengbuis kolommen 100, 140 en 200 21 T testen op kolom lekkage 17

65

testmonster voor kolommen, keuze 55 V veiligheid 11 EX-markering 12 explosie gevaarlijke ruimten 11 verlengbuis installeren op kolommen 100, 140 en 200 21

66


42 41 30 16

37 31 17

25 19 20 18

32 43 24

14 33

21

22

25

26

27

23 34

28/29 35

36

Fig. A-1. Weergave kolomonderdelen kolommen BPG 100, 140 en 200.

8 9 10

11

6/7 3

6/7 4 5

12 2 1

40

14 13 38

39

Fig. A-2. Weergave kolomonderdelen kolommen BPG 100, 140 en 200 (vervolg).

15

43

44

15/16 23

36

24 37 25

35

26

38

29

28 31

32

30 39

33/34

13

40 27

41/42

28

Fig. A-3. Weergave kolomonderdelen kolom BPG 300.

2 3 1 6/7 4 5

10/11 12

6/7

13 8 14 44 15/16 9

17

18

19

20 45

21

22

Fig. A-4. Weergave kolomonderdelen kolom BPG 300 (vervolg).

25 24

23

25 20

3

19

26

28

18

27

6

17

18 16

12

8

21 13

14

15 30 6

34

11 10

28

3

9

29 54

4

35 39

5 31 2 33 32

36 40

41

38 1 50

41 36 44

51 52 53

32 33

48

42

46 47

45

Fig. A-5. Weergave kolomonderdelen kolom BPG 450

43

www.gelifesciences.com GE Healthcare Bio-Sciences AB Bjorkgatan 30 751 84 Uppsala Sweden

GE, imagination at work en GE monogram zijn handelsmerken van General Electric Company. BPG, Sepharose, Sephacryl, Sephadex, Superdex en Drop Design zijn handelsmerken van General Electric Company. Alle handelsmerken van derde partijen zijn eigendom van hun respectievelijke eigenaars. © 2007 General Electric Company - Alle rechten voorbehouden. Eerste publicatie februari 2003 Alle goederen en diensten binnen het bedrijf GE Healtchare, die de goederen levert, worden afhankelijk van de voorschriften en voorwaarden van verkoop verkocht. Een kopie van deze voorschriften en voorwaarden is op aanvraag verkrijgbaar. Voor de meest actuele informatie kunt u contact opnemen met uw lokale GE Healthcare vertegenwoordiger. GE Healthcare Europe GmbH Munzinger Strasse 5 D-79111 Freiburg Germany GE Healthcare UK Limited Amersham Place Little Chalfont Buckinghamshire, HP7 9NA UK GE Healthcare Bio-Sciences Corp. 800 Centennial Avenue P.O. Box 1327 Piscataway, NJ 08855-1327 USA GE Healthcare Bio-Sciences KK Sanken Bldg.3-25-1 Hyakunincho Shinjuku-ku Tokyo 169-0073

User Manual 18-1170-70 AC 03/2007

Elanders Östervåla 2007

Bezoek voor contactinformatie van uw lokale kantoor www.gelifesciences.com/contact

GE Healthcare. BPG kolommen. Gebruiksaanwijzing

Recommend Documents