Az újszülöttkori galactosaemia szűrés eredményei és differenciáldiagnosztikai lehetőségei Balázs Imre SZTE ÁOK Gyermekgyógyászati Klinika és Gyermekegészségügyi Centrum Anyagcsere-Szűrő Laboratórium Magyar Orvosi Laboratóriumi Szakdolgozók Egyesülete IX. Nagygyűlés; Bük, 2005. szeptember 29-30.
A kötelező egészségbiztosítás ellátásairól szóló 1997. évi LXXXIII. törvény 83.§ ( 3 ) bekezdésének a) és b) pontjában megfogalmazottak alapján Phenylketonuria Galactosaemia Hypothyreosis Biotinidase hiány betegségekre van kötelező szűrés.
Mire irányul? A veleszületett anyagcsere betegségek korai diagnosztizálására. Klasszikus angol meghatározása: Egy enzim vagy hormon aktivitásának monogenetikus működési zavara az intermedier anyagcsere folyamatban.
Országos szűrőcentrumok Országos szűrőcentrumok 1. Fővárosi Önkormányzat Budai Gyermekkórháza 1. SZTE Gyermekklinika 2. Fővárosi SZTE Gyermekklinika 2. Önkormányzat Budai Gyermekkórháza
Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya
Koraszülött: igen - nem Szül. Idő: Vérvétel ideje: Vérvétel helye: Anyja neve: Irányítószám: Lakcím:
Koraszülött: igen - nem Szül. Idő: Vérvétel ideje: Vérvétel helye: Anyja neve: Irányítószám: Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: Antibiotikum: Vércsere, transf.:
Tejtáplálás elkezdve: Antibiotikum: Vércsere, transf.:
NÉV:
NÉV:
igen - nem igen – nem igen – nem
NÉV:
NÉV:
igen - nem igen – nem igen – nem
Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya
Koraszülött: igen - nem Szül. Idő: Vérvétel ideje: Vérvétel helye: Anyja neve: Irányítószám: Lakcím:
Koraszülött: igen - nem Szül. Idő: Vérvétel ideje: Vérvétel helye: Anyja neve: Irányítószám: Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: Antibiotikum: Vércsere, transf.:
Tejtáplálás elkezdve: Antibiotikum: Vércsere, transf.:
NÉV:
NÉV:
igen - nem igen – nem igen – nem
NÉV:
NÉV:
igen - nem igen – nem igen – nem
Mi a galactosaémia? Enzimhiányon alapuló veleszületett anyagcsere betegség. / autoszomális, recesszív /
Tejcukor ( Laktóz ) ( diszaharid )
Vékonybél bolyhainak tövében laktáz enzim
•
Galaktóz monoszaharid
Glükóz monoszaharid
Szőlőcukor monoszaharid
Története: 1908 Von Ruess galactosaemia felfedezése / megfigyelés anyatej táplálásnál / 1917
Tejmentes diéta bevezetése
1935
Mason és Turner Leroir cukor metabolizmusának leírása / 1970 Nobel dij /
1956
Galactosaemia génjének felfedezése
1963
Guthrie és Paigen újszülöttkori szűrés bevezetése
1970
SZOTE szűrés megkezdése
1975
Kötelező szűrés bevezetése
ATP
galaktóz
aldózreduktáz NADPH + H
galaktitol
NADP
galaktokináz
ADP galaktóz-1-P UTP gal.-1-P uridil transzf.
P~P
Weidemann
UDP galaktóz UDP gal.-4-epimeráz
UDP glükóz UDPG pirofoszforiláz
glükóz-1-P
Beutler
- Galaktokináz enzimhiány: újszülöttkorban tünetmentes tejtáplálás után galactosaemia, cataracta felnőttkorban a galaktitól miatt vakság
-Galaktóz-1-PUT enzimhiány: / klasszikus galactosaemia /
hányás, hasmenés, elhúzódó sárgaság veseelégtelenség, máj megnagyobbodás fejlődési zavar, cataracta mentális retardáció -Duarte - galactosaemia
„ Mikrobiológiai „tömegszűrés” Galactosaemia újszülöttkori tömegszűrése Guthrie metabolitgátláson alapuló mikrobiológiai módszerével történik. Elve: galaktózra érzékeny mutáns E. coli baktérium-törzset tartalmazó agaróz táptalajra helyezzük fel a vérrel átitatott szűrőpapír korongokat
Zavaró tényezők: Ál-pozitív eredmény: 1. ha olyan antibiotikumot kapott az újszülött ami gátolja az E-coli növekedését 2. bármilyen szennyezés ami kioltási zónát ad Ál-negatív eredmény: 1. ha vérmintát a tejtáplálás megkezdése előtt vették le 2. ha a szűrőpapír nem volt megfelelően átitatva 3. ha az újszülött transzfúziót kapott
ATP
galaktóz
aldózreduktáz NADPH + H
galaktitol
NADP
galaktokináz
ADP galaktóz-1-P UTP gal.-1-P uridil transzf.
P~P
Weidemann
UDP galaktóz UDP gal.-4-epimeráz
UDP glükóz UDPG pirofoszforiláz
glükóz-1-P
Beutler
Weidemann teszt: galaktóz 30 mg % fölött Elve: A galaktóz – dehidrogenáz ( Gal-DH ) enzim a galaktózról a NAD-ra hidrogént visz át, fluoreszkáló NADH-t képezve. Kontroll (mg % ) 20
25
30
35
Minta 40
Beutler próba:
a galaktóz-1-foszfáturidil-transzferáz ( G-1-PUT ) enzim hiányának kimutatása a klasszikus galaktozémia diagnózisának megerősítésére
Minta: heparinnal levett teljes vér ( vérgázkapillárisban ) azonos körülmények között levett, tárolt és szállított egészséges kontroll minta
Elve:
G-1-PUT jelenlétében a NADP redukálódik fluoreszkáló NADPH-t képezve
Vér
+
galaktóz-1-foszfát 30‘
Kontroll: Minta:
60‘
90‘
+
NADP 120‘
Idő ( perc )
Kontroll Galactosaemia heterzygote
Galactosemic Duarte variant Duarte variant heterozygote
0
30
60
90
120
összgalaktóz — totál galaktóz mérése / galaktóz és galaktóz-1- foszfát / alkalikus foszfatáz
Galaktót –1- foszfát
Galaktóz
galaktóz dehidrogenáz
Galaktóz + NAD+H2O
Galaktono (1,4) lakton + NADH + H diaphorase
NADH + NBT ( sárga ) / nitroblu-terazolium /
NBT ( ibolya ) + NAD
Specifikus enzimvizsgálatok: galactokinase gal.-1-P uridil transzferase
Németország
A szűrésből kimaradó populációk pl.: roma török észak afrikai
1956 Galactosaemia génjének felfedezése Ma már több száz mutációt ismerünk Galactokinase:
P28T
G1PTU enzim:
Q188R K285N
Duarte:
G1391A N314D
THE END
Köszönöm a figyelmet!
