1
AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) TERHADAP BEBERAPA MIKROBA PATOGEN SECARA IN VITRO
TESIS
OLEH SELAMAT RIADI 117030022/BIO
PROGRAM MAGISTER BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
Universitas Sumatera Utara
2
AKTIVITAS ANTI MIKROBA EKSTRAK BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) TERHADAP BEBERAPA MIKROBA PATOGEN SECARA IN VITRO
TESIS
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Master Sains Pada Gelar Studi Magester Ilmu Biologi Pada Program Pascasarjana Fakultas MIPA, Universitas Sumatera Utara
Oleh
Selamat Riadi 117030022/BIO
PROGRAM PASCASARJANA BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
Universitas Sumatera Utara
3
PERSETUJUAN
Judul
: AKTIVITAS ANTI MIKROBA EKSTRAK BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill) TERHADAP BEBERAPA MIKROBA PATOGEN SECARA IN VITRO
Kategori Nama Nomor Induk Mahasiswa Program Studi Departemen Fakultas
: TESIS : SELAMAT RIADI : 117030022 : PASCASARJANA (S-2) BIOLOGI : BIOLOGI : MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM (FMIPA) UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Medan, Februari 2014
Komisi Pembimbing
:
Pembimbing 2
Pembimbing 1
Dr. It Jamilah, M.Sc NIP. 19631210 199103 2 003
Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc NIP. 19640409 199403 1 003
Ketua Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU
Dekan FMIPA USU
Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Boimed NIP. 19660209 199203 1 003
Dr. Sutarman, M.Sc NIP. 19631062 199103 1 001
Universitas Sumatera Utara
4
PERNYATAAN ORISINALITAS
AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill). TERHADAP BEBERAPA MIKROBA PATOGEN SECARA IN VITRO
TESIS
Dengan ini saya menyatakan bahwa saya mengakui semua karya tesis ini adalah hasil karya saya sendiri kecuali kutipan dan ringkasanyang tiap satunya telah dijelaskan sumbernya dengan benar.
Medan, Februari 2014
SELAMAT RIADI 117030022
Universitas Sumatera Utara
5
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Sebagai sivitas akademika Universitas Sumatera Utara, saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama NIM Program Studi Jenis Karya Ilmiah
: Selamat Riadi : 117030022 : Magister Biologi : Tesis
Demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada Universitas Sumatera Utara Hak Bebas Royalti Non-Eksklusif (Non-Exclusive Royalty Free Right) atas Tesis saya yang berjudul: Aktivitas Antimikroba Ekstrak Biji Alpukat (Persea americana Mill). Terhadap Beberapa Mikroba Patogen Secara In Vitro Beserta perangkat yang ada (jika diperlukan). Dengan hak bebas Royalti noneksklusif ini, Universitas Sumatera Utara berhak menyimpan, mengalih media, memformat, mengelola dalam bentuk data-base, merawat dan mempublikasikan tesis saya tanpa meminta izin dari saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis dan sebagai pemegang dan atau sebagai pemilik hak cipta. Demikian surat pernyataan ini dibuat dengan sebenarnya.
Medan, Februari 2014
Selamat Riadi
Universitas Sumatera Utara
6
Telah diuji pada Tanggal : 15 Februari 2014
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua
: Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc
Anggota
: 1. Dr. It Jamilah, M.Sc 2. Prof. Dr. Erman Munir, M.Sc 3. Dr. Saleha Hanum, M.Si
Lulus Pada Tanggal : 15 Februari 2014
Universitas Sumatera Utara
7
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
DATA PRIBADI Nama Lengkap Berikut Gelar
: Selamat Riadi, S.Si
Tempat dan Tanggal Lahir
: Medan, 30 Januari 1960
Alamat Rumah
: Jalan Pasar Baru No. 90 Dusun I Tembung Percut Sei Tuan Deli Serdang,Sumut.
Telepon/Faks/Hp
: 08126435083
Email
:
[email protected]
Instansi Tempat Bekerja
: Poltekkes Medan
Alamat Kantor
: Jalan William Iskandar Psr V No 6 Barat Medan Estate
Telepon
: (061) 6616982
DATA PENIDIKAN
SD
: SD Negeri No 2 Tembung
Tamat
: 1973
SMP
: SMP Yosua I Bersubsidi Medan
Tamat
: 1976
SPA
: Sekolah Pengatur Analisa Medan
Tamat
: 1986
DIII
: Akademi Analis Kesehatan Bandung
Tamat
: 1992
Tamat
: 1998
Strata-2 : Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU Tamat
: 2014
Strata-1 : Biologi, Universitas Medan Area
Universitas Sumatera Utara
8
KATA PENGANTAR Puji dan syukur penulis sampaikan kepada Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya serta beriring salawat dan salam kepada junjungan Nabi Muhammad SAW, sehingga penulis dapat menyelesaikan tesis dengan judul aktivitas antimikroba ekstrak biji alpukat (persea americana mill) terhadap beberapa mikroba patogen secara in vitro. Tesis ini sebagai salah satu syarat untuk meraih gelar Magister Sains Program Pascasarjana Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara. Proses penulisan ini tak terlepas dari bimbingan, bantuan, dukungan dan doa dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1.
2.
3.
4. 5.
6.
7.
8.
Bapak Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc sebagai Dosen Pembimbing 1 dan Ibu Dr. It Jamilah, M.Sc sebagai Dosen Pembimbing 2 yang telah banyak memberikan waktu, bimbingan, perhatian, saran dan kritiknya dengan penuh kesabaran dalam penyelesaiaan penelitian dan penulisan tesis ini. Bapak Prof. Dr. Erman Munir, M.Sc dan Ibu Dr. Saleha Hanum, M.Si selaku Dosen penguji yang telah banyak memberikan masukkan dalam penyelesaian dan penyusunan tesis ini. Bapak Prof. Syafruddin Ilyas, M.Boimed selaku Ketua Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU dan Ibu Dr. Suci Rahayu, M.Si selaku Sekretaris Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU. Terima kasih atas segala bantuan yang telah diberikan selama masa perkuliahan. Kepada seluruh staf pengajar dan pegawai Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU. Ibu Ir. Zuraidah Nst, M.Kes selaku Direktur Politeknik Kesehatan Medan. Yang telah memberikan kesempatan kepada penulis untuk melanjutkan Pendidikan Strata 2 di Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU. Nelma, S.Si, M.Si selaku Ketua Jurusan Analis Poltekkes Medan serta temanteman sejawat di Jurusan Analis Kesehatan Medan yang telah memberikan dukungan kepada penulis untuk melanjutkan Pendidikan pada Program Studi Pascasarjana Biologi FMIPA USU. Ayahanda Almarhum dan Ibunda Almarhumah, ananda mengucapkan terimakasih tak terhingga atas segala kasih sayangnya yang kadang tidak dapat diucapkan lewat kata-kata, semoga ilmu yang ananda dapatkan bermanfaat pada keluarga dan orang lain. Kepada Istriku tercinta Asrah Habibi Nst, Spd dan anak-anak tersayang Kak Kila, Bang Aban, adek Amalia Rahmah dan keluarga besar yang telah menambah semangat, pengertiannya, perhatiannya dan doanya yang selama 2 tahun ini banyak waktu bersama yang terlewatkan menjadi inspirasi kepada penulis untuk menyelesaikan pendidikan ini.
Universitas Sumatera Utara
9
9.
Kepada seluruh teman-teman Kuliah Biologi 2011, di Laboratorium Mikrobiologi Amy, Widya, Nikmah, Netti, Ummi, Nisa, Ika, Endang, Jane, Samirin, Siti. Terimakasih atas segala bantuannya, kalian adalah teman-temanku yang terbaik. 10. Terimakasih untuk semua pihak yang telah banyak membantu dan tidak dapat disebutkan namanya satu per satu, semoga Allah membalas segala kebaikan kalian.
Semoga tesis ini bermanfaat dan semoga Allah SWT memberikan balasan atas apa yang telah diberikan. Amin ya Rabbal Alamin.
Medan, Februari 2014
Penulis
Universitas Sumatera Utara
10
Aktivitas Antimikroba Ekstrak Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Beberapa Mikroba Patogen Secara In Vitro
ABSTRAK Penelitian aktivitas antimikroba ekstrak biji alpukat (Persea americana Mill.) terhadap beberapa mikroba patogen secara in vitro telah dilaksanakan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi antimikroba ekstrak biji alpukat terhadap beberapa mikroba patogen secara in vitro. Hasil uji aktivitas antimikroba berbagai pelarut ekstrak biji alpukat menunjukkan hambatan pertumbuhan terhadap Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Salmonella thypii. Zona hambat ekstrak biji alpukat berbagai pelarut yaitu Metanol, Etil asetat dan n-Heksana memiliki nilai yang hampir sama pada konsentrasi 5%, 10% 15% dan 20%. Uji Brine Shrimp Lethality Test menunjukkan ketiga ekstrak biji alpukat memiliki toksisitas yang sangat tinggi. Ekstrak etil asetat merupakan yang paling toksik. Hasil uji yang dilakukan didapatkan bahwa ekstrak metanol mengandung senyawa metabolit sekunder golongan alkaloid dan fenolik, ekstrak etil asetat mengandung senyawa metabolit sekunder golongan terpenoid dan ekstrak n-heksana mengandung senyawa metabolit sekunder golongan terpenoid dan fenolik.
Kata kunci: alpukat, Brine Shrimp Lethality Test, aktivitas antimikroba, Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella thypii
Universitas Sumatera Utara
11
Antimicrobial Activity of seed extracts of Avocado (Persea americana Mill.) to Several Microbial Pathogens In Vitro
ABSTRACT A antimicrobial of activity of avocado seed extracts (Persea americana Miill.) to several microbial pathogens in vitro had been conducted. This study aims to determine the antimicrobial potential of avocado seed extract towards several microbial pathogens in vitro. The results of antimicrobial activity of various solven extracts test showed that avocado (Persea americana Mill.) seed extract inhibit growth of Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella thypii. Inhibition zone of seed extract in varions solven, they are Metanol,Etil asetat and n-Heksan have similar value at concentration 5%, 10% 15% and 20%. The Brine Shrimp Lethality test showed avocado seed extract has a very high toxicity. Ethyl acetate extract was the most toxic. The result showed that the Metanol extract contains compounds secondary metabolites compounds alkaloid and phenolic. Ethyl acetat extract of secondary metabolit tontain alkaloids class and fenolik the ethyl acetate extract containing scondary metabolites and terpenoid class of n-hexana extract containing secondary metabolites terpenoids class and phenolic.compounds terpenoid and phenolic.
Key word: avocado, Brine Shrimp Lethality Test, antimicroba activity, Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella thypii
Universitas Sumatera Utara
12
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ABSTRAK ABSTRACT DAFTAR ISI DAFTAR GAMBAR DAFTAR TABEL DAFTAR LAMPIRAN BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar belakang 1.2 Permasalahan 1.3 Tujuan 1.4 Hipotesis 1.5 Manfaat Bab 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Pemanfaatan Tanaman Obat Tradisional 2.2 Deskripsi Alpukat (Persea americana Mill.) 2.3 Manfaat Alpukat (Persea americana Mill.) 2.4 Senyawa Antimikroba 2.5 Ekstrak 2.6 Candida albicans 2.7 Escherichia coli 2.8 Staphylococcus aureus 2.9 Salmonella typhii Bab 3 BAHAN DAN METODE 3.1 Waktu dan Tempat 3.2 Alat dan Bahan 3.3 Preparasi Ekstrak Biji Alpukat (Persea americana Mill.) 3.4 Skrining Fitokimia 3.4.1 Pemeriksaan Alkaloida 3.4.2 Pemeriksaan Flavonoida 3.4.3 Pemeriksaan Fenolat 3.4.4 Pemeriksaan Saponin 3.4.5 Pemeriksaan Steroida/triterpenoida 3.5 Uji Daya Hambat Ekstrak Berbagai Pelarut Terhadap Mikroba Patogen dengan Metode Kirby-Bauer 3.6 Uji Toksisitas dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test Bab 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Skrining fitokimia 4.2 Aktivitas Antimikroba Ekstrak Biji Alpukat Terhadap Beberapa Mikroba Patogen Secara In Vitro 4.3 Uji Toksisitas dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test
Halaman 8 10 11 12 13 14 15 16 16 18 18 18 18 19 19 20 22 22 25 26 26 27 27 28 28 28 29 29 30 30 30 31 31 31 33 33 33 34 40
Bab 5 KESIMPULAN DAN SARAN
42
DAFTAR PUSTAKA
43
Universitas Sumatera Utara
13
DAFTAR GAMBAR
Gambar 4.2.1
Uji antagonis antara ekstrak metanol alpukat
Gambar 4.2.2
Besarnya zona hambat yang dibentuk oleh antibiotik nistatin dan kloramfenikol
Halaman 35 39
Universitas Sumatera Utara
14
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 4.1.1
Hasil Skrining Fitokimia Masing-Masing Ekstrak Biji Alpukat
33
Tabel 4.2.1
Besar zona hambat (mm) yang dibentuk oleh masing-masing ekstrak metanol, etil asetat dan n-heksana biji alpukat
36
Tabel 4.3.1
Nilai LC50 (ppm) Ekstrak Biji Alpukat
41
Universitas Sumatera Utara
15
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Lampiran 2. Lampiran 3. Lampiran 4. Lampiran 5. Lampiran 6.
Halaman Alur kerja ekstraksi biji alpukat (Persea Americana Mill.) 47 menggunakan pelarut metanol, n-heksanaa dan etil asetat Alur kerja pembuatan larutan standar McFarland 108 48 CFU/ml Skrining fitokimia 49 Uji toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test) 53 Alur kerja daya hambat ekstrak biji alpukat (Persea 54 Americana Mill.) terhadap bakteri patogen Hasil uji toksisitas ekstrak biji alpukat 55
Universitas Sumatera Utara