UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK METANOL BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) PADA MENCIT BETINA TERINDUKSI ASAM ASETAT SKRIPSI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK METANOL BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) PADA MENCIT BETINA TERINDUKSI ASAM ASETAT

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh: Ni Kadek Pramita Anggara Dewi NIM : 138114110

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016 i


ii


UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK METANOL BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) PADA MENCIT BETINA TERINDUKSI ASAM ASETAT

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh: Ni Kadek Pramita Anggara Dewi NIM : 138114110

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016 i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Cogito ergo sum, aku berpikir maka aku ada -Rene Descrates

Kupersembahkan karya ini untuk: Ida Sang Hyang Widhi Wasa sebagai sumber kehidupanku, Ibu dan Bapak serta Kakakku yang senantiasa mendoakan, mendukung, dan mengasihiku, Sahabat dan teman-temanku, Almamaterku Universitas Sanata Dharma

iv


PRAKATA Puji syukur kepada Ida Sang Hyang Widi Wasa penulis panjatkan atas segala perlindungan, penyertaan, dan berkat yang telah diberikanNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat (Persea americana Mill.) pada Mencit Betina yang Terinduksi Asam Asetat” dengan baik sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari dukungan dan bantuan berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis hendak mengucapkan terima kasih kepada: 1.

Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

2.

Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku dosen pembimbing atas kesabaran untuk membimbing, mendukung, dan memotivasi penulis dalam penyusunan proposal skripsi, penelitian, hingga penyusunan skripsi ini.

3.

Ibu Damiana Sapta Candrasari, S.Si., M.Sc. dan Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji skripsi yang telah memberikan ide, saran, dan masukan yang membangun untuk penelitian ini.

4.

Ibu Dita Maria Virginia, M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbing akademik penulis yang telah memberikan pendampingan, pengarahan, dan dukungan kepada penulis selama ini.

5.

Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt., selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan izin dalam penggunaan fasilitas laboratorium untuk kepentingan skripsi ini.

6.

Bapak Heru, Bapak Parjiman, dan Bapak Wagiran, selaku Laboran Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma atas bantuan dan dukungannya selama proses pengerjaan skripsi. v


7.

Keluarga tercinta, bapak, ibu, dan Kak Agus yang selalu mendoakan, mendukung, dan memberikan semangat serta kasih sayang.

8.

Sahabat seperjuangan, Fransisca Puspa Jelita, Caecilia Desi Kristanti, dan Skolastika Venita Tianri, terima kasih atas kerjasama, dukungan, saran, dan bantuannya selama penelitian hingga penyusunan skripsi ini.

9.

Teman-teman terkasih, Bella, Clara, Kak Le, Kak Trisna, dan Kak Boni terima kasih atas semangat dan dukungannya.

10. Teman-teman FKK B 2013, FSM C 2013, atas kebersamaan dan dukungannya. Penulis menyadari bahwa dalam naskah skripsi ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis berharap agar skripsi ini dapat bermanfaat dalam perkembangan ilmu pengetahuan farmasi.

Yogyakarta, 3 Oktober 2016

Penulis

vi


vii


viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL.............................................................................................. i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... iv PRAKATA ............................................................................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ........................................................... vii PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................................ viii DAFTAR ISI ........................................................................................................ ix DAFTAR TABEL ................................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xii DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xiii ABSTRAK ......................................................................................................... xiv ABSTRACT ........................................................................................................ xv PENDAHULUAN ................................................................................................ 1 METODE PENELITIAN ...................................................................................... 2 Bahan..................................................................................................................... 2 Alat ........................................................................................................................ 2 Metode................................................................................................................... 2 Determinasi dan Pengumpulan Biji Alpukat ............................................... 2 Penetapan Kadar Air Serbuk Biji Alpukat................................................... 3 Pembuatan Ekstrak dan Pembuatan Larutan Ekstrak Metanol Biji Alpukat ........................................................................................................ 3 Uji Penetapan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat 1% ......................... 3 Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat ............................... 3 Analisis Statistika ........................................................................................ 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................................. 4 Hasil Determinasi dan Pengumpulan Biji Alpukat ............................................... 4 ix


Penetapan Kadar Air pada Serbuk Biji Alpukat ................................................... 5 Pembuatan Ekstrak dan Pembuatan Larutan Ekstrak Metanol Biji Alpukat ........ 5 Penetapan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat 1% ......................................... 5 Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat ........................................ 7 Kelompok Kontrol Negatif .......................................................................... 9 Kelompok Kontrol Positif............................................................................ 9 Kelompok Perlakuan Ekstrak Metanol Biji Alpukat dosis 0,83 g/kgBB ................................................................................................. 9 Kelompok Perlakuan Ekstrak Metanol Biji Alpukat dosis 1,67 g/kgBB ............................................................................................... 10 Kelompok Perlakuan Ekstrak Metanol Biji Alpukat dosis 3,33 g/kgBB ............................................................................................... 11 Perbandingan antarkelompok Perlakuan Ekstrak Metanol Biji Alpukat Dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB ............................................................ 12 KESIMPULAN ................................................................................................... 13 DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 13 LAMPIRAN ........................................................................................................ 16 BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................ 47

x


DAFTAR TABEL Tabel I. Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat dan Hasil Uji Post Hoc Mann-Whitney ............. 6 Tabel II. Hasil rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi....................................................................... 8 Tabel III. Hasil uji Post Hoc Bonferroni untuk kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi ................................................................ 8

xi


DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Biji Alpukat. ...................................................................................... 20 Gambar 2. Ekstrak Metanol Biji Alpukat ........................................................... 20 Gambar 3. Injeksi Intraperitoneal ....................................................................... 21 Gambar 4. Injeksi Peroral ................................................................................... 21 Gambar 5. Geliat Mencit yang Memenuhi Syarat .............................................. 22

xii


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Surat Pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC). ...................................................................... 17 Lampiran 2. Surat Pengesahan Determinasi Biji Alpukat (Persea americana Mill) .................................................................. 18 Lampiran 3.Surat Legalitas Penggunaan SPSS ................................................... 19 Lampiran 4. Biji Alpukat dan Ekstrak Metanol Biji Alpukat ............................. 20 Lampiran 5. Injeksi Intraperitoneal dan Peroral ................................................. 21 Lampiran 6. Proses Pengamatan Uji Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat . 22 Lampiran 7. Perhitungan Dosis ........................................................................... 23 Lampiran 8. Analisis Statistika Penetapan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat .................................................................................. 25 Lampiran 9. Analisis Statistika Geliat Mencit .................................................... 30 Lampiran 10. Analisis Statistika Persen Proteksi ............................................... 35 Lampiran 11. Analisis Statistika Perubahan Persen Proteksi ............................. 41

xiii


ABSTRAK Nyeri merupakan perasaan sensoris yang tidak menyenangkan yang bisa dihilangkan dengan analgesik. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni yang bertujuan untuk mengetahui aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi ekstrak metanol biji alpukat. Sebanyak 25 ekor mencit berumur 2-3 bulan dan berat badan 20-30 gram dibagi secara acak menjadi 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif CMC Na, kelompok kontrol positif asetosal dosis 91 mg/kgBB, dan kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dengan 3 peringkat dosis yaitu 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB. CMC Na, asetosal, dan ekstrak metanol biji alpukat diberikan secara per oral, 10 menit kemudian diberikan asam asetat 1% secara intraperitoneal dengan dosis 50 mg/kgBB. Pengamatan dilakukan dengan mengamati geliat setiap 5 menit selama 1 jam. Hasil geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk, dilanjutkan uji One Way ANOVA dan uji post hoc Bonferroni dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol biji alpukat memiliki kemampuan untuk menurunkan geliat pada dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB dengan persen proteksi secara berturut-turut 37,6 ± 2,0; 73,2 ± 1,4; dan 68,2 ± 0,9 serta perubahan persen proteksi berurutan adalah -48,7 ± 2,8; 0,0 ± 2,0; dan -6,3 ± 1,2. Kata Kunci: Analgesik; Biji alpukat; Ekstrak metanol

xiv


ABSTRACT Pain is defined as an unpleasant sensory and emotional experience associated with tissue damage which can be cured with analgesic. This research is purely experimental which is aimed to know analgesic activity of methanol extract of avocado seeds, to know protection percentage, and changing of protection percentage in acetic acid induced female mice. Twenty-five Swiss strain mice aged 2-3 months and 20-30 grams were divided into five groups, namely the negative control group CMC-Na, positive control group acetosal 91 mg/kg, and the groups of methanol extracts of avocado seeds with 3 doses ranked namely 3.33; 1.67; and 3.33 g/kgBW. Observations were made by observing the writhing every 5 minutes for 1 hour. The result of writhing, protection percentage, and the changing of protection percentage were analyzed with the Shapiro-Wilk test, followed by One Way ANOVA test and Bonferroni post hoc test with 95% significancy level. The results showed that the methanol extract of avocado seed has the ability to lowering the writhing at dose 0.83; 1.67; and 3.33 g/kgBW with protection percentage respectively 37.6 ± 2.0; 73.2 ± 1.4; and 68.2 ± 0.9, and the changing of protection percentage respectively -48.7 ± 2.8; 0.0 ± 2,0; and -6.3 ± 1.2. Keywords: Analgesic; Avocado seeds; Methanolic extract

xv


PENDAHULUAN The International Association for the Study of Pain (2011) mendefinisikan nyeri sebagai rasa sensoris dan emosional yang tidak menyenangkan yang muncul akibat rusaknya jaringan. Nyeri timbul dari stimulasi yang disebabkan oleh mediator-mediator inflamasi, seperti histamin, serotonin, asetilkolin, bradikinin, dan prostaglandin yang dapat mengaktivasi saraf untuk penghantaran stimulus nyeri (DiPiro dkk., 2008). Mediatormediator inflamasi dihasilkan ketika terjadi kerusakan pada jaringan yang disebabkan oleh radikal bebas (Sanchez dkk., 2015). Rasa nyeri dapat dihilangkan dengan mengkonsumsi analgesik. Asetosal merupakan analgesik sintetis dengan mekanisme yaitu menghambat enzim cyclooxygenase yang bertanggung jawab mengubah asam arakidonat menjadi prostaglandin, sehingga sintesis prostaglandin menjadi terhambat (Ritu dkk., 2012). Selama ini biji alpukat belum dimanfaatkan dan hanya terbuang begitu saja padahal biji alpukat mengandung zat kimia yang bermanfaat untuk tubuh, salah satunya dapat dimanfaatkan sebagai analgesik. Menurut penelitian yang dilakukan oleh Josephine dan Ngozi (2013) serta Kyakulaga dkk. (2012) secara berturut-turut dapat disimpulkan bahwa ekstrak air biji alpukat serta ekstrak etanol biji alpukat memiliki aktivitas analgesik. Berdasarkan penelitian Gomez dkk. (2014) menyebutkan bahwa senyawa polifenol seperti flavonoid paling banyak terkandung pada ekstrak etanol biji alpukat dibandingkan kandungan polifenol pada ekstrak etanol daun serta buah alpukat. Kandungan senyawa flavonoid di dalam ekstrak etanol biji alpukat dilaporkan berperan dalam menimbulkan efek analgesik karena dapat menghambat produksi prostaglandin yang dapat mengaktivasi saraf untuk penghantaran stimulus nyeri (Kyakulaga dkk., 2012). Flavonoid yang terkandung pada tumbuhan memiliki aktivitas sebagai antioksidan. Aktivitas antioksidan dari senyawa flavonoid dapat mencegah kerusakan jaringan akibat radikal bebas (Prochazkova dkk., 2011). Penangkapan radikal bebas mampu menghambat pembentukan mediator inflamasi seperti histamin, bradikinin, asetilkolin, leukotriene, dan prostaglandin. Terhambatnya pembentukan mediator inflamasi tersebut menyebabkan aktivasi reseptor nyeri tidak terjadi sehingga tidak terjadi stimulasi nyeri (DiPiro dkk., 2008). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat, persen proteksi geliat, dan perubahan persen proteksi geliat dari ekstrak metanol 1


biji alpukat pada mencit yang terinduksi asam asetat. Pada penelitian ini peneliti menggunakan pelarut metanol dalam proses ekstraksi karena metanol diduga mampu melarutkan hampir semua komponen, baik yang bersifat polar, semi polar, maupun non polar (Al-Ash’ary dkk., 2010). Metanol juga sudah sering digunakan untuk mengekstraksi senyawa fenolik seperti flavonoid (Carpena dkk., 2011). Metode rangsang nyeri yang digunakan pada penelitian ini dengan menggunakan asam asetat 1%. METODE PENELITIAN Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah yang telah mendapatkan persetujuan Ethical Clearance dengan nomor KE/FK/964/EC/2016 dari Medical and Health Research Ethics Committee Fakultas Kedokteran UGM. Bahan Biji alpukat yang dikumpulkan dari Depot Es Teler 77 Galeria Mall Yogyakarta, mencit betina galur Swiss berumur 2-3 bulan dan berat badan 20-30 gram yang diperoleh dari Laboratorium Imono Universitas Sanata Dharma, asetosal (Merck), asam asetat glasial (Merck), CMC-Na (Dai-Ichi Seiyaku Co), aquadest, dan metanol (Merck). Alat Oven (Memmert), mesin penyerbuk, ayakan (no. 40 dan 50 mesh), glass equipments, cawan porselen, corong Buchner, pompa vakum, shaker (Innova 2100), vacuum rotary evaporator (Buchi R-201/215), labu alas bulat, waterbath, timbangan analitik (Mettler Toledo), spuit, jarum per oral, jarum intraperitoneal, stopwatch, moisture balance (Halogen Moisture Analyzer HG53), dan kotak kaca tempat pengamatan geliat. Metode Determinasi dan pengumpulan biji alpukat Determinasi buah alpukat dilakukan dengan menggunakan acuan dari Agriculture & Natural Resources University of California dan dilanjutkan dengan melakukan konfirmasi kepada ahli botani. Kriteria biji yang dipilih untuk penelitian adalah biji yang masih segar dan berbentuk bulat dengan ukuran setiap biji yang hampir sama.

2


Penetapan kadar air serbuk biji alpukat Lima gram serbuk biji alpukat dimasukkan ke dalam alat moisture balance. Alat moisture balance diatur pada suhu 1050C dan waktu 15 menit. Persyaratan serbuk yang baik yaitu serbuk dengan kadar air yang kurang dari 10% (Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). Pembuatan ekstrak dan pembuatan larutan ekstrak metanol biji alpukat Serbuk biji alpukat sebanyak 200 g dibagi rata ke dalam 8 erlenmeyer 500 mL. Serbuk pada setiap erlenmeyer dimaserasi dengan metanol 90% sebanyak 200 mL selama 72 jam. Hasil maserasi disaring dengan kertas saring dibantu corong Buchner dan pompa vacuum, kemudian serbuk diremaserasi dengan 100 mL metanol 90% selama 48 jam. Maserat dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 600 C. Ekstrak cair ditimbang massanya, kemudian diletakkan di waterbath untuk menguapkan pelarut yang tertinggal. Ekstrak yang telah diuapkan, kemudian dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 500 C hingga mencapai bobot tetap dan membentuk ekstrak kental. Ekstrak metanol biji alpukat yang sudah kental dilarutkan dengan larutan CMC-Na 1% sehingga menghasilkan larutan dengan kosentrasi 10% dan siap diuji aktivitas analgesiknya. Uji penetapan selang waktu pemberian asam asetat 1% Sebanyak 9 ekor mencit dibagi secara acak menjadi 3 kelompok (kelompok 1: kontrol negatif CMC-Na, kelompok 2: selang waktu 10 menit, dan kelompok 3: selang waktu 15 menit). Masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor mencit betina berumur 2-3 bulan dengan berat 20-30 gram yang telah dipuasakan selama 15 jam. Semua mencit tersebut diberikan asetosal dengan dosis 91 mg/kgBB secara peroral. Setelah 10 menit dari pemberian asetosal, mencit kelompok 1diinjeksikan CMC-Na dan kelompok 2 diinjeksikan asam asetat 1% secara intraperitoneal. Sedangkan untuk kelompok 3, diberikan asam asetat 1% setelah 15 menit pemberian asetosal. Respon geliat diamati setiap 5 menit selama 1 jam. Selanjutnya dihitung rata-rata jumlah geliat setelah pemberian asetosal setiap kelompok. Selang waktu dengan jumlah geliat yang lebih sedikit dipilih sebagai selang waktu pemberian asam asetat 1%. Uji aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini ialah 25 ekor mencit betina galur Swiss berumur 2-3 bulan dengan berat badan 20-30 gram. Hewan uji dipelihara di kandang 3


dan diadaptasi di lingkungan tempat penelitian selama 3 hari, diberi makan pelet AD2 dan minum. Sebelum diberi perlakuan, hewan uji dipuasakan selama 15 jam dan hanya diberikan air minum saja. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 5 kelompok. Kelompok I sebagai kelompok kontrol negatif diberikan CMC-Na, kelompok II sebagai kelompok kontrol positif diberikan asetosal dengan dosis 91 mg/kgBB, kelompok III, IV, dan V sebagai kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak metanol biji alpukat dengan dosis berturut-turut 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB. Mencit diberikan CMC-Na, asetosal, dan ekstrak metanol biji alpukat secara per oral. Sepuluh menit setelah pemberian CMC-Na, asetosal, dan ekstrak metanol biji alpukat, setiap hewan uji dari masing-masing kelompok diberikan asam asetat 1% dengan dosis 50 mg/kgBB secara intraperitoneal. Respon geliat diamati dan dicatat setiap 5 menit selama 1 jam, kemudian dihitung persen proteksi dan perubahan persen proteksinya. Analisis Statistika Pada uji pendahuluan penetapan selang waktu pemberian asam asetat 1%, data kumulatif geliat dari kelompok kontrol negatif CMC-Na, kelompok asetosal selang waktu 10 menit, dan kelompok asetosal selang waktu 15 menit distribusi datanya dianalisis dengan uji Shapiro Wilk. Analisis dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis dan analisis post hoc Mann-Whitney. Pada uji aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat, data kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi dianalisis distribusi datanya dengan uji Shapiro Wilk. Analisis dilanjutkan dengan uji Levene untuk mengetahui homogenitas variansi data antar kelompok dilanjutkan dengan uji One Way ANOVA untuk mengetahui perbedaan kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi antar kelompok. HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Determinasi dan Pengumpulan Biji Alpukat Hasi determinasi menyatakan bahwa biji alpukat yang digunakan dalam penelitian ini benar dari spesies Persea americana Mill. Pemilihan biji yang memiliki ukuran yang hampir sama merupakan upaya untuk menyeragamkan jenis kandungan dan jumlah senyawa metabolit antarbiji satu dengan biji lainnya. 4


Penetapan Kadar Air pada Serbuk Biji Alpukat Penetapan kadar air serbuk biji alpukat dilakukan di Laboratorum Kimia Analisis Universitas Sanata Dharma dengan 3 kali replikasi. Rata-rata kadar air yang diperoleh adalah 8,17% b/b yang menunjukkan bahwa serbuk biji alpukat telah memenuhi persyaratan kadar air dalam serbuk yang baik. Persyaratan serbuk yang baik yaitu serbuk dengan kadar air yang kurang dari 10%. Kadar air yang kurang dari 10% pada serbuk mampu menghentikan reaksi enzimatik dalam sel sehingga kandungan metabolitnya tidak berubah akibat adanya reaksi enzimatik (International Tropical Timber Organisation, 2005). Pembuatan Ekstrak dan Pembuatan Larutan Ekstrak Metanol Biji Alpukat Pelarut yang digunakan dalam penelitian ini adalah metanol 90% karena menurut penelitian Khoddami dkk. (2013), metanol efektif untuk menyari senyawa seperti flavonoid yang terdapat pada serbuk biji alpukat. Metanol diduga mampu melarutkan hampir semua komponen yang bersifat polar, semi polar, maupun non polar (Al-Ash’ary dkk., 2010). Massa ekstrak kental yang diperoleh ialah 39,2 g dengan persen rendemen yang didapatkan yaitu 19,6 % b/b. Ekstrak kental yang sudah jadi dibuat menjadi larutan dengan konsentrasi 10% dengan melarutkan ekstrak kental ke dalam CMC-Na 1%. Penetapan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat 1% Selang waktu pemberian asam asetat merupakan jarak waktu antara pemberian zat uji dengan pemberian asam asetat 1% sebagai penginduksi nyeri. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat bertujuan untuk mengetahui waktu yang tepat bagi zat uji untuk terabsorpsi dengan baik sehingga dapat memberikan efek analgesik ketika asam asetat 1% diinjeksikan secara intraperitoneal. Pengujian dilakukan dengan memberikan suspensi asetosal 1% sebagai kontrol positif dengan selang waktu 10 dan 15 menit. Dosis asetosal yang digunakan adalah 91 mg/kgBB. Larutan CMC-Na 1% digunakan sebagai pembanding pada uji pendahuluan penetapan selang waktu pemberian asam asetat 1% bertujuan untuk memastikan bahwa suspensi asetosal 1% dengan dosis 91 mg/kgBB benar-benar memiliki efek analgesik dengan memberikan respon geliat yang lebih sedikit dibandingkan pada kelompok kontrol negatif CMC-Na.

5


Dari pengujian selang waktu pemberian asam asetat didapatkan rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil uji post hoc Mann-Whitney pada kelompok kontrol negatif CMC-Na, kelompok asetosal selang waktu 10 dan 15 menit yang disajikan pada tabel I. Tabel I. Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat 1% dan Hasil Uji Post Hoc Mann-Whitney Kelompok

Kumulatif Geliat (Mean±SE)

Hasil Uji Post Hoc Mann-Whitney Kontrol Asetosal Asetosal negatif CMCselang 10 selang 15 Na menit menit BB BB

Kontrol negatif CMC-Na

74,7± 0,3

Asetosal selang 10 menit

19,7 ± 0,3

BB

-

BB

Asetosal selang 15 menit

70,7 ± 0,7

BB

BB

-

Keterangan: Mean = rata-rata kumulatif geliat SE = Standard error Hasil uji post hoc Mann Whitney menunjukkan bahwa antara kelompok kontrol negatif CMC-Na dengan kelompok asetosal 10 menit memiliki perbedaan rata-rata kumulatif geliat yang berbeda bermakna. CMC-Na sebagai kontrol negatif tidak memiliki efek analgesik sehingga memiliki kumulatif geliat yang banyak. Perbedaan yang bermakna pada rata-rata kumulatif geliat antara kelompok CMC-Na dan kelompok asetosal 10 menit menunjukkan asetosal sebagai kontrol positif memiliki aktivitas analgesik dengan rata-rata kumulatif geliat yang lebih sedikit dibandingkan dengan rata-rata kumulatif geliat pada kelompok CMC-Na. Hasil uji post hoc Mann Whitney menunjukkan bahwa antara kelompok asetosal selang waktu 10 menit dengan kelompok asetosal selang 15 menit memiliki perbedaan rata-rata kumulatif geliat yang berbeda bermakna. Rata-rata jumlah geliat pada kelompok asetosal selang waktu 10 menit lebih sedikit dibandingkan dengan kelompok asetosal selang 15 menit, sehingga dipilih selang waktu pemberian asam asetat 1% yaitu 10 menit.

6


Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat Aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat dapat diketahui dengan mengukur persen proteksi dan perubahan persen proteksinya. Nilai persen proteksi yang diperoleh dapat dijadikan parameter apakah suatu zat uji memiliki aktivitas sebagai analgesik. Menurut Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica (1991), suatu zat uji dapat dikatakan memiliki efek analgesik jika zat uji tersebut mampu mengurangi ≥50% dari jumlah geliat pada perlakuan kontrol negatif. Uji aktivitas analgesik pada penelitian ini menggunakan metode rangsang kimia. Senyawa yang digunakan sebagai penginduksi nyeri adalah asam asetat 1% dengan dosis 50 mg/kgBB. Asam asetat memicu pelepasan asam arakidonat dari jaringan fosfolipid. Enzim COX akan mengubah asam arakidonat menjadi prostaglandin yang menimbulkan inflamasi dan nyeri, respon nyeri pada mencit ditandai dengan geliat (Muhammad, 2014). Pada pengujian aktivitas analgesik ekstrak metanol biji alpukat ini, digunakan CMC-Na 1% yang merupakan pelarut dari ekstrak metanol biji alpukat sebagai kontrol negatif. Sebagai kontrol positif digunakan asetosal dengan dosis 91 mg/kgBB. Ekstrak metanol biji alpukat yang digunakan terdiri dari 3 peringkat dosis yaitu 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB. Sesuai dengan hasil penetapan selang waktu pemberian, maka 10 menit setelah pemberian CMC-Na, asetosal, dan ekstrak metanol biji alpukat secara peroral, asam asetat 1% diinjeksikan secara intraperitoneal. Pengamatan dilakukan dengan mengamati respon geliat mencit setiap 5 menit selama 1 jam. Jumlah geliat digunakan untuk menghitung persen proteksi dari zat uji. Persen proteksi merupakan kemampuan senyawa uji dalam mengatasi nyeri. Hasil rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi pada tiap kelompok uji disajikan dalam tabel II. Data kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi kemudian dianalisis secara statistik yang diawali uji normalitas dengan uji Shapiro-Wilk untuk mengetahui distribusi data masingmasing kelompok. Hasil uji Saphiro-Wilk menunjukkan nilai p>0,05, sehingga dapat disimpulkan data pada masing-masing kelompok terdistribusi normal. Analisis statistik dilanjutkan dengan menguji homogenitas variansi data antar kelompok dengan menggunakan uji Levene. Hasil uji Levene menunjukkan nilai p>0,05 yang berarti data memiliki variansi yang homogen (Dahlan, 2014). 7


Tabel II. Hasil rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi Kelompok

Kontrol negatif Kontrol positif EMBA 0,83 g/kgBB EMBA 1,67 g/kgBB EMBA 3,33 g/kgBB

Rata-rata Kum. Geliat (Mean ± SE)

p

0,119

Rata-rata Persen Proteksi (Mean ± SE) 0,0 ± 0,6

74,0 ± 0,5 19,8 ± 0,4

0,314

46,2 ± 1,5

p

0,119

Rata-rata Perubahan Persen Poteksi (Mean ± SE) -100,0 ± 0,8

p

0,119

73,2 ± 0,5

0,314

0,0 ± 0,7

0,314

0,616

37,6 ± 2,0

0,616

-48,7 ± 2,8

0,616

19,8 ± 1,1

0,899

73,2 ± 1,4

0,899

0,0 ± 2,0

0,899

23,2 ± 0,7

0,777

68,2 ± 0,9

0,777

-6,3 ±1,2

0,777

Dilakukan uji One Way ANOVA untuk mengetahui perbedaan kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi antar kelompok perlakuan. Hasil uji One Way ANOVA untuk kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi yaitu nilai p<0,05 yang berarti paling tidak terdapat perbedaan yang bermakna antar dua kelompok. Uji post hoc Bonferroni dilakukan untuk mengetahui kelompok mana yang memiliki perbedaan kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi yang bermakna (Dahlan, 2014). Hasil uji post hoc Bonferroni untuk jumlah geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi disajikan dalam tabel III. Tabel III. Hasil uji post hoc Bonferroni untuk kumulatif geliat, persen proteksi, dan perubahan persen proteksi Kontrol (-) BB BB BB BB

Kontrol (+) BB BB BTB BTB

EMBA 0,83 g/kgBB BB BB BB BB

EMBA 1,67 g/kgBB BB BTB BB BTB

EMBA 3,33 g/kgBB BB BTB BB BTB -

Kontrol (-) Kontrol (+) EMBA 0,83 g/kgBB EMBA 1,67 g/kgBB EMBA 3,33 g/kgBB Keterangan: BB = Berbeda bermakna (p<0,05) BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05) EMBA = Ekstrak Metanol Biji Alpukat

8


Kelompok kontrol negatif Pada tabel II menunjukkan rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok kontrol negatif CMC-Na secara berturutturut yaitu 74,0 ± 0,5; 0,0 ± 0,6; -100,0 ± 0,8. Rata-rata kumulatif geliat pada kelompok negatif CMC-Na paling besar, sedangkan rata-rata persen proteksi kelompok negatif paling kecil dibandingkan dengan kelompok kontrol positif dan ketiga kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni (Tabel III), menunjukkan bahwa rata-rata persen proteksi geliat pada kelompok kontrol negatif CMC-Na berbeda bermakna dengan kelompok kontrol positif asetosal. Rata-rata kumulatif geliat yang paling besar dan rata-rata persen proteksi yang bernilai 0,0 ± 0,6, menunjukkan bahwa CMC-Na sebagai kontrol negatif, tidak memiliki kemampuan dalam memproteksi nyeri. Rata-rata perubahan persen peroteksi CMC-Na yang bernilai negatif menunjukkan bahwa dengan CMC-Na tidak terjadi penghambatan rangsang nyeri. CMC-Na tidak memberikan efek analgesik juga telah dibuktikan dalam penelitian yang dilakukan oleh Sinaga (2013), Susanti (2015), dan Irawati (2015). Kelompok kontrol positif Rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok kontrol positif asetosal secara berturut-turut yaitu 19,8 ± 0,4; 73,2 ± 0,5; dan 0,0 ± 0,7. Rata-rata kumulatif geliat pada kelompok kontrol positif asetosal lebih kecil dibandingkan kelompok kontrol negatif CMC-Na. Sedangkan rata-rata persen proteksi kelompok kontrol positif asetosal lebih besar dibandingkan kelompok kontrol negatif CMC-Na. Hal tersebut menunjukkan bahwa kelompok kontrol positif asetosal mampu memberikan proteksi geliat dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif CMCNa. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni (Tabel III), menunjukkan bahwa rata-rata persen proteksi geliat pada kelompok kontrol positif asetosal berbeda bermakna dengan kelompok kontrol negatif CMC-Na. Hal ini dapat disimpulkan bahwa asetosal sebagai kontrol positif terbukti memiliki aktivitas analgesik sehingga dapat menghambat terjadinya rasa nyeri. Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB Rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB secara berturut-turut yaitu 46,2 ± 1,5; 37,6 ± 2,0; dan -48,7 ± 2,8 (Tabel II). Dibandingkan dengan 9


kelompok kontrol negatif CMC-Na, rata-rata kumulatif geliat kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB lebih kecil, namun rata-rata persen proteksinya lebih besar dan perubahan persen proteksinya sebesar -48,7 ± 2,8. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni (Tabel III), rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan ratarata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB memiliki perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif CMC-Na. Hal ini berarti ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB memiliki kemampuan untuk memproteksi nyeri jika dibandingkan dengan CMC-Na. Apabila dibandingkan dengan kelompok kontrol postitif asetosal, rata-rata kumulatif geliat kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB lebih besar, namun rata-rata persen proteksinya lebih kecil, yaitu 37,6 ± 2,0, dan rata-rata perubahan persen proteksi sebesar -48,7 ± 2,8. Setelah dianalisis dengan uji post hoc Bonferroni, didapatkan hasil rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi dan ratarata perubahan persen proteksi yang berbeda bermakna terhadap kelompok kontrol postif asetosal. Hal ini berarti ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB memiliki kemampuan untuk memproteksi nyeri yang lebih kecil dibandingkan dengan kelompok kontrol positif asetosal. Nilai rata-rata persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB adalah 37,6 ± 2,0, hal ini menunjukkan bahwa pada dosis ini ekstrak metanol biji alpukat memiliki kemampuan untuk memproteksi nyeri namun tidak memiliki aktivitas sebagai analgesik. Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB Rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB secara berturut-turut yaitu 19,8 ± 1,1; 73,2 ± 1,4; dan 0,0 ± 2,0. Berdasarkan tabel II, rata-rata kumulatif geliat kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB lebih kecil jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif CMC-Na, namun rata-rata persen proteksinya lebih besar, yaitu 73,2 ± 1,4. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni, rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi geliat, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB memiliki perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif CMC-Na. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 10


g/kgBB memiliki kemampuan dalam memproteksi nyeri jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif CMC-Na. Rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB sama dengan rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok kontrol positif asetosal. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni, rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi geliat, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ini memiliki perbedaan tidak bermakna terhadap kelompok kontrol positif asetosal. Hal ini berarti ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB memiliki kemampuan dalam memproteksi nyeri yang sebanding dengan asetosal sebagai kontrol positif. Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB Rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB secara berturut-turut yaitu 23,2 ± 0,7; 68,2 ± 0,9; dan -6,3 ± 1,2. Rata-rata kumulatif geliat kelompok perlakuan ini lebih kecil jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif CMC-Na, namun rata-rata persen proteksinya lebih besar. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni, rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi geliat, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB memiliki perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif CMC-Na. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB memiliki kemampuan dalam memproteksi nyeri jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif CMC-Na. Jika dibandingkan dengan kelompok kontrol positif asetosal, maka rata-rata geliat kelompok perlakuan ini lebih besar dan rata-rata persen proteksi geliatnya lebih kecil. Berdasarkan uji post hoc Bonferroni, rata-rata kumulatif geliat, rata-rata persen proteksi geliat, dan rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ini memiliki perbedaan tidak bermakna terhadap kelompok kontrol positif asetosal. Hal ini berarti ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB memiliki kemampuan dalam memproteksi nyeri yang sebanding dengan kontrol positif asetosal.

11


Perbandingan antarkelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB Rata-rata kumulatif geliat kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB merupakan rata-rata kumulatif geliat yang paling kecil di antara ketiga dosis tersebut. Rata-rata persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB secara berturut-turut adalah 37,6 ± 2,0; 73,2 ± 1,4; dan 68,2 ± 0,9. Rata-rata perubahan persen proteksi kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kgBB secara berturut-turut adalah -48,7 ± 2,8; 0,0 ± 2,0; dan 6,3 ± 1,2. Menurut Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica (1991), suatu zat uji dapat dikatakan memiliki efek analgesik jika zat uji tersebut mampu mengurangi ≥50% dari jumlah geliat pada perlakuan kontrol negatif. Hal ini berarti ekstrak metanol biji alpukat pada dosis 1,67 dan 3,33 g/kgBB memiliki kemampuan untuk memproteksi geliat dan juga memiliki aktivitas analgesik, sedangkan pada dosis 0,83 g/kgBB ekstrak metanol biji alpukat hanya mampu memproteksi geliat. Perbandingan persen proteksi antara kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB dengan dosis 1,67 g/kgBB berdasarkan uji post hoc Bonferroni menunjukkan perbedaan bermakna. Perbedaan yang bermakna tersebut menunjukkan kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB dalam menghambat geliat tidak sebanding dengan kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB. Berdasarkan tabel II, maka kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB lebih kecil dibandingkan dosis 1,67 g/kgBB. Perbandingan persen proteksi antara kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB dengan dosis 3,33 g/kgBB berdasarkan uji post hoc Bonferroni menunjukkan

perbedaan

bermakna.

Perbedaan

bermakna

tersebut

menunjukkan

kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB dalam menghambat geliat tidak sebanding dengan kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB. Berdasarkan tabel II, kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 0,83 g/kgBB lebih kecil dibandingkan dosis 3,33 g/kgBB. Perbandingan persen proteksi antara kelompok perlakuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB dengan dosis 3,33 g/kgBB berdasarkan uji post hoc Bonferroni menunjukkan perbedaan tidak bermakna. Perbedaan tidak bermakna tersebut menunjukkan

12


kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 1,67 g/kgBB dalam menghambat geliat sebanding dengan kemampuan ekstrak metanol biji alpukat dosis 3,33 g/kgBB. Menurut penelitian Kyakulaga dkk. (2012), kandungan senyawa flavonoid di dalam ekstrak etanol biji alpukat dilaporkan berperan dalam menimbulkan efek analgesik karena dapat menghambat produksi prostaglandin yang merupakan mediator inflamasi dan dapat mengaktifkan saraf dalam penghantaran nyeri. Menurut Prochazkova dkk. (2011), flavonoid yang terkandung pada tumbuhan memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang dapat mencegah kerusakan jaringan akibat radikal bebas. Flavonoid mampu menangkap radikal bebas dengan mendonasikan atom hidrogen sehingga radikal bebas menjadi tidak aktif. Menurut Swiboda dkk. (2013), ketika terjadi kerusakan jaringan, senyawa yang dapat memodulasi transmisi nyeri antara lain histamin, bradikinin, asetilkolin, leukotriene, dan prostaglandin dikeluarkan ke jaringan ekstraselular. Penangkapan radikal bebas mampu menghambat pembentukan mediator inflamasi seperti histamin, bradikinin, asetilkolin, leukotriene, dan prostaglandin. Menurut DiPiro dkk. (2008), terhambatnya pembentukan mediator inflamasi tersebut menyebabkan aktivasi reseptor nyeri tidak terjadi sehingga tidak terjadi stimulasi nyeri. KESIMPULAN Ekstrak metanol biji alpukat memiliki aktivitas analgesik pada dosis 1,67 dan 3,33 g/kgBB dengan persen proteksinya berturut-turut adalah 73,24 ± 1,4 dan 68,16 ± 0,9 % serta perubahan persen proteksinya berturut-turut adalah 0,0 ± 2,0 dan -6,3 ± 1,2 %. DAFTAR PUSTAKA Agriculture & Natural Resources University of California, 2016, Avocado Varieties, http://ucavo.ucr.edu/avocadovarieties/varietyframe.html, diakses pada tanggal 25 Mei 2016. Al-Ash’ary, M.N., Supriyanti, T.E.M., dan Zackiyah, 2010, Penentuan Pelarut Terbaik dalam Mengekstraksi

Senyawa Bioaktif dari Kulit Batang

Artocarpus

heterophyllus, Jurnal Sains dan Teknologi Kimia, 1(2), 150-158. Andini, A.P., 2010, Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. pada Mencit Betina , Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Carpena, J.M.R., Morcuende, D., Andrade, M.J., Kylli, P., and Estevez, M., 2011, Avocado (Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and 13


Antimicrobial Activities, and Inhibition of Lipid and Protein Oxidation in Porcine Patties, Journal of Agricultureal and Food Chemistry, 59, 5625-5635. Dahlan, M.S., 2014, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi 6, Salemba Medika, Jakarta, hal. 7,12-14, 92-98, 110-116. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 46. DiPiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Wells, B.G., and Posey, L.M., 2008, Pharmacotherapy: A Pathophysiologic Approach, 7th Ed., Mc Graw Hill, New York, 990. Gomez, F.S., Sanchez, S.P., Iradi, M.G.G., Azman, N.A.M., and Almajano, M.P., 2014, Avocado Seeds: Extraction Optimization and Possible Use as Antioxidant in Food, Antioxidants, 3, 439-454. International Association for the Study of Pain, 2011, What Is Pain, http://www.iasppain.org/Taxonomy, diakses pada tanggal 4 Januari 2016. International Tropical Timber Organisation, 2005, Promoting Selected Non-Timber Forest Products Based on Community Participation Approach to Support Sustainable Forest

Management

in

East

Kalimantan,

http://www.itto.int/files/itto_project_db_input/2534/Technical/Technical%20Repo rt%20Vol%201.pdf, diakses pada tanggal 11 September 2016. Irawati, K., 2015, Uji Analgesik Dekokta Daun Macaranga tanarius L. Pada Mencit Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Joshepine, O.O., and Ngozi, A.O., 2013, Analgesic effect of The Aqueous Extract of Persea americana Mill (Lauraceae), Journal of Pharmaceutical and Allied Sciences, 10(3), 1887-1897. Khoddami, A., Wilkers, M.A., and Roberts, T.H., 2013, Techniques for Analysis of Plant Phenolic Compounds, Molecules, 18, 2328-2375. Kyakulaga, AI.,H., Ogwang, P.E., Nannyonga, S., Nyafuono, J., and Tumuslime, R., 2012, Antipyretic and Analgesics Activities of Ethanolic Extract of Persea americana Mill. Seeds in Wistar Albino Rats, Africa Journal of Animal and Biomedical Sciences, 7(1), 19-23. Muhammad, N., 2014, In Vivo Models for Management of Pain, Scientific Research, 5(1), 92-96. 14


Prochazkova, D., Bousova, I., and Wilhelmova, N., 2011, Antioxidant and Prooxidant Properties of Flavonoids, Fitoterapia, 82(2011), 513-523. Ritu, N., Asheesh, S., and Dinesh, B., 2012, Aspirin: An Overview of Randomized Controlled Trials, International Journal of Research in Pharmacy and Science, 2(1), 53-57. Sanchez, A., Calpena, A.C., and Clares, 2015, Evaluating the Oxidative Stress in Inflammation: Role of Melatonin, International Journal of Molecular Sciences, 2015(16), 16981-17004. Sinaga, F., 2013, Efek Analgesik dari Infusa Bunga Telang (Clitoria ternatea) dengan Metode Rangsang Kimia pada Mencit Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Susanti, S.D.P., 2015, Uji Analgesik Fraksi Etanol-Heksan Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. Dengan Metode Geliat Pada Mencit, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Swiboda, P., Filip, R., Prystupa, A., and Drozd, M., 2013, Assessment of Pain: Type, Mechanism, and Treatment, Ann Agric Environ Med, 2013(1), 2-7. Wulandari, D., 2010, Efek Analgesik Infusa Daun Macaranga tanarius L. Pada Mencit Betina , Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Phytomedica, 1991, Penapisan Farmakologi Pengujian Fitokimia dari Pengujian Klinik, Jakarta, 49.

15


LAMPIRAN

16


Lampiran 1. Surat Pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC)

17


Lampiran 2. Surat Pengesahan Determinasi Biji Alpukat (Persea americana Mill.)

18


Lampiran 3. Surat Legalitas Penggunaan SPSS

19


Lampiran 4. Biji Alpukat dan Ekstrak Metanol Biji Alpukat

Gambar 1. Biji Alpukat

Gambar 2. Ekstrak Metanol Biji Alpukat

20


Lampiran 5. Injeksi Intraperitoneal dan Peroral

Gambar 3. Injeksi Intraperitoneal

Gambar 4. Injeksi Peroral

21


Lampiran 6. Proses Pengamatan Uji Analgesik Ekstrak Metanol Biji Alpukat

Gambar 5. Geliat Mencit yang Memenuhi Syarat

22


Lampiran 7. Perhitungan Dosis dan Persen Rendemen Ekstrak Metanol Biji Alpukat a. Dosis Asam Asetat Dosis asam asetat yang digunakan dalam penelitian ini mengacu pada penelitian yang dilakukan oleh Wulandari (2010) dan Andini (2010). Hasil penelitian tersebut mendapatkan bahwa dosis 50 mg/kgBB berbeda tidak bermakna dengan dosis 75 mg/kgBB dalam menimbulkan geliat. Berdasarkan hasil tersebut, dosis asam asetat yang digunakan dalam penelitian ini adalah dosis 50 mg/kgBB . b. Dosis Asetosal Berdasarkan penelitian Wulandari (2010), potensi asetosal yang digunakan adalah 500 mg yang digunakan pada manusia dengan berat badan 50 kg. Apabila dikonversikan pada manusia dengan berat badan 70 kg, maka potensinya adalah 700 mg. Angka konversi dosis dari manusia 70 kg ke mencit dengan berat badan 20 g adalah 0,0026. Perhitungannya adalah sebagai berikut: Asetosal 500 mg  untuk manusia 50 kg. Asetosal untuk manusia 70 kg  Konversi dosis manusia 70 kg ke mencit 20 g (angka konversi= 0,0026) Dosis

= 700 mg × 0,0026 = 1,82 mg / 20 gBB = 0,091 mg/gBB = 91 mg/kgBB

c. Dosis Ekstrak Metanol Biji Alpukat Dasar penentuan peringkat dosis: 

Bobot tertinggi mencit = 30 gram



Volume maksimal pemberian secara peroral untuk mencit = 1 mL



Konsentrasi ekstrak metanol biji alpukat = 10%

D × BB = C × V 23


D × 30 g = (10 g/100 mL) × 1 mL D = 0,003333 g/gBB = 3,33 g/kgBB  untuk peringkat dosis tertinggi Peringkat dosis tengah= 3,33 g/kgBB : 2= 1,67 g/kgBB Peringkat dosis terendah= 1,67 g/kgBB : 2= 0,83 g/kgBB d. Konversi dosis tertinggi untuk manusia 70 kg (angka konversi dari mencit 20 g  manusia 70 kg = 387,9) 

Dosis tertinggi untuk mencit = 0,003333 g/gBB



Dosis untuk mencit 20 gram = 0,06666 g/ 20 gBB



Dosis untuk manusia 70 kg

= 387,9 × 0,06666 g = 25,86 g/ 70 kgBB = 0,369 g/kgBB e. Perhitungan Rendemen Ekstrak Metanol Biji Alpukat Persen Rendemen = Persen Rendemen =

24


Lampiran 8. Analisis Statistika Penetapan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat a. Uji normalitas kontrol negatif CMC-Na, asetosal 10 menit, dan asetosal 15 menit Descriptives Kelompok

Statistic

Std. Error

Mean

74.6667 Lower

95% Confidence Interval for

Bound

Mean

Upper

.33333

73.2324

76.1009

Bound 5% Trimmed Mean

.

Median Kontrol negatif CMC Na

75.0000

Variance

.333

Std. Deviation

.57735

Minimum

74.00

Maximum

75.00

Range

1.00

Interquartile Range

.

Skewness

-1.732

1.225

.

.

19.6667

.33333

Geliat Kurtosis Mean Lower 95% Confidence Interval for

Bound

Mean

Upper

18.2324

21.1009

Bound 5% Trimmed Mean asetosal 10 menit

Median

. 20.0000

Variance

.333

Std. Deviation

.57735

Minimum

19.00

Maximum

20.00

Range

1.00

Interquartile Range

25

.


Skewness

-1.732

1.225

.

.

70.6667

.66667

Kurtosis Mean Lower 95% Confidence Interval for

Bound

Mean

Upper

67.7982

73.5351


.

Median

70.0000

Variance

asetosal 15 menit

1.333

Std. Deviation

1.15470

Minimum

70.00

Maximum

72.00

Range

2.00

Interquartile Range

.

Skewness

1.732

1.225

.

.

Kurtosis

Tests of Normality a

Kelompok

Kolmogorov-Smirnov Statistic

Kontrol negatif CMC

df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

Df

Sig.

.385

3

.

.750

3

.000

asetosal 10 menit

.385

3

.

.750

3

.000

asetosal 15 menit

.385

3

.

.750

3

.000

Na Geliat

a. Lilliefors Significance Correction

Pada uji normalitas, diperoleh nilai p yaitu 0,000 (p<0,05) untuk semua kelompok perlakuan. Karena nilai p<0,05 maka bisa disimpulkan bahwa data geliat pada masing-masing kelompok tidak terdistribusi normal. Uji dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis. b. Uji Kruskal-Wallis

Kruskal-Wallis Test Ranks

26


Kelompok

N

Mean Rank

Kontrol negatif CMC Na

3

8.00

asetosal 10 menit

3

2.00

asetosal 15 menit

3

5.00

Total

9

Geliat

Test Statistics

a,b

Geliat Chi-Square

7.385

Df

2

Asymp. Sig.

.025

a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Kelompok

Dengan uji Kruskal-Wallis diperoleh nilai p=0,025. Oleh karena nilai p<0,05 berarti paling tidak terdapat perbedaan geliat antara dua kelompok. Uji dilanjutkan dengan analisis post hoc Mann-Whitney. c. Uji Post Hoc Mann-Whitney

Mann-Whitney Test Ranks Kelompok

Geliat

N

Mean Rank

Sum of Ranks


3

5.00

15.00

asetosal 10 menit

3

2.00

6.00

Total Test Statistics

6 a

Geliat Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.000 6.000 -2.023 .043 .100

b

a. Grouping Variable: Kelompok b. Not corrected for ties.

Dari analisis post hoc Mann-Whitney antara kelompok kontrol negatif CMC-Na dengan kelompok yang diberikan asetosal dengan selang waktu 10 menit 27


didapatkan bahwa nilai p<0,043 (p<0,05). Secara statistik berarti terdapat perbedaan geliat antara kelompok tersebut.


Geliat

N

Mean Rank

Sum of Ranks


3

5.00

15.00

asetosal 15 menit

3

2.00

6.00

Total Test Statistics

6 a

Geliat Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

6.000

Z

-2.023

Asymp. Sig. (2-tailed)

.043

Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.100

b


Dari analisis post hoc Mann-Whitney antara kelompok kontrol negatif CMC-Na dengan kelompok yang diberikan asetosal dengan selang waktu 15 menit, didapatkan bahwa nilai p=0,043 (p<0,05). Secara statistik berarti terdapat perbedaan geliat antara kelompok tersebut.


Geliat

N

Mean Rank

asetosal 10 menit

3

2.00

6.00

asetosal 15 menit

3

5.00

15.00

Total

6

Test Statistics

a

Geliat Mann-Whitney U Wilcoxon W Z

Sum of Ranks

.000 6.000 -2.023

28


Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.043 .100

b


Dari analisis post hoc Mann-Whitney antara kelompok yang diberikan asetosal selang waktu 10 menit dengan kelompok yang diberikan asetosal selang waktu 15 menit, didapatkan bahwa nilai p=0,043 (p<0,05). Secara statistik berarti terdapat perbedaan geliat antara kelompok tersebut.

29


Lampiran 9. Analisis Statistika Geliat Mencit Descriptives Kelompok

Statistic Mean

74.0000 Lower

Std. Error .44721

72.7583

95% Confidence Interval Bound for Mean

Upper

75.2417


74.0000

Median

74.0000

Kontrol Negatif CMC Na Variance

1.000

Std. Deviation

1.00000

Minimum

73.00

Maximum

75.00

Range

2.00

Interquartile Range

2.00

Skewness

.000

.913

-3.000

2.000

19.8000

.37417

Kurtosis Mean Geliat

Lower

18.7611


Upper

20.8389

Bound

Kontrol Positif Asetosal

5% Trimmed Mean

19.7778

Median

20.0000

Variance

.700

Std. Deviation

.83666

Minimum

19.00

Maximum

21.00

Range

2.00

Interquartile Range

1.50

Skewness

.512

.913

-.612

2.000

Mean

46.2000

1.49666

95% Confidence Interval Lower

42.0446

Kurtosis Perlakuan EMBA 0,83 g/kgBB

for Mean

Bound

30


Upper

50.3554


46.2778

Median

46.0000

Variance

11.200

Std. Deviation

3.34664

Minimum

41.00

Maximum

50.00

Range

9.00

Interquartile Range

5.50

Skewness

-.888

.913

Kurtosis

1.468

2.000

19.8000

1.06771

Mean Lower

16.8356


Upper

22.7644

Bound

Perlakuan EMBA 1,67 g/kgBB

5% Trimmed Mean

19.7778

Median

20.0000

Variance

5.700

Std. Deviation

2.38747

Minimum

17.00

Maximum

23.00

Range

6.00

Interquartile Range

4.50

Skewness

.206

.913

-1.117

2.000

23.2000

.66332

Kurtosis Mean Lower 95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper

Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB

21.3583

25.0417


23.2222

Median

23.0000

Variance

2.200

Std. Deviation

31

1.48324


Minimum

21.00

Maximum

25.00

Range

4.00

Interquartile Range

2.50

Skewness Kurtosis

-.552

.913

.868

2.000

Tests of Normality a

Kelompok

Kolmogorov-Smirnov Statistic

Kontrol Negatif CMC

Df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

Df

Sig.

.241

5

.200

*

.231

5

.200

*

.881

5

.314

.933

5

.616

.821

5

.119

Na Kontrol Positif Asetosal Perlakuan EMBA 0,83 Geliat

.276

5

.200

*

.175

5

.200

*

.974

5

.899

.246

5

.200

*

.956

5

.777

g/kgBB Perlakuan EMBA 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB

*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction

Dari tes normalitas terlihat bahwa nilai p untuk masing-masing kelompok >0,05 yang menandakan data kelima kelompok terdistribusi normal. Uji statistic dilanjutkan dengan uji varian dan one way ANOVA.

Oneway Test of Homogeneity of Variances Geliat Levene Statistic 1.579

df1

df2 4

Sig. 20

32

.219


ANOVA Geliat Sum of Squares Between Groups

Mean Square

11174.800

4

2793.700

83.200

20

4.160

11258.000

24

Within Groups Total

Df

F

Sig.

671.563

.000

Dari uji homogenitas variansi, didapatkan p>0,05 sehingga dapat dikatakan bahwa varian sama. Dari uji ANOVA didapatkan p<0,05 yang berarti paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata geliat yang berbeda bermakna. Uji dilanjutkan dengan uji post hoc Bonferroni.

Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: Geliat Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok

Mean

Std. Error Sig.

Difference (I-

Interval

J)

Kontrol Positif

95% Confidence

Lower

Upper

Bound

Bound

54.20000

*

1.28996

.000

50.1322

58.2678

27.80000

*

1.28996

.000

23.7322

31.8678

54.20000

*

1.28996

.000

50.1322

58.2678

50.80000

*

1.28996

.000

46.7322

54.8678

-54.20000

*

1.28996

.000 -58.2678

-50.1322

-26.40000

*

1.28996

.000 -30.4678

-22.3322

Asetosal Perlakuan EMBA Kontrol Negatif

0,83 g/kgBB

CMC Na

Perlakuan EMBA 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na Perlakuan EMBA

Kontrol Positif

0,83 g/kgBB

Asetosal

Perlakuan EMBA

.00000

1.28996 1.000

-4.0678

4.0678

-3.40000

1.28996

.159

-7.4678

.6678

*

1.28996

.000 -31.8678

-23.7322

1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB Perlakuan EMBA

Kontrol Negatif CMC

0,83 g/kgBB

Na

-27.80000

33


Kontrol Positif

26.40000

*

1.28996

.000

22.3322

30.4678

26.40000

*

1.28996

.000

22.3322

30.4678

23.00000

*

1.28996

.000

18.9322

27.0678

-54.20000

*

1.28996

.000 -58.2678

-50.1322

Asetosal Perlakuan EMBA 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na Kontrol Positif Perlakuan EMBA

Asetosal

1,67 g/kgBB

Perlakuan EMBA

.00000

1.28996 1.000

-4.0678

4.0678

-22.3322

*

1.28996

.000 -30.4678

-3.40000

1.28996

.159

-7.4678

.6678

*

1.28996

.000 -54.8678

-46.7322

3.40000

1.28996

.159

-.6678

7.4678

*

1.28996

.000 -27.0678

-18.9322

3.40000

1.28996

.159

-26.40000

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC

-50.80000

Na Kontrol Positif Perlakuan EMBA

Asetosal

3,33 g/kgBB

Perlakuan EMBA

-23.00000

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA 1,67 g/kgBB *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

34

-.6678

7.4678


Lampiran 10. Analisis Statistika Persen Proteksi Case Processing Summary Kelompok

Cases Valid N

Percent

Missing N

Total

Percent

N

Percent

Kontrol Negatif CMC Na

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%


5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

Perlakuan EMBA dosis

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

PersenPr 0,83 g/kgBB oteksi

Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB

Descriptives Kelompok

Statistic Mean

.00000

95% Confidence

Lower Bound

-1.67749

Interval for Mean

Upper Bound

1.67749

5% Trimmed Mean

.00000

Median

.00000

Variance Kontrol Negatif CMC Na

PersenPr oteksi

Std. Error .604186

1.825

Std. Deviation

1.351000

Minimum

-1.351

Maximum

1.351

Range

2.702

Interquartile Range

2.702

Skewness Kurtosis Mean

.000

.913

-3.000

2.000

73.24320

.505498

95% Confidence

Lower Bound

71.83971

Kontrol Positif

Interval for Mean

Upper Bound

74.64669

Asetosal

5% Trimmed Mean

73.27322

Median

72.97300

Variance

1.278

35


Std. Deviation

1.130328

Minimum

71.622

Maximum

74.324

Range

2.702

Interquartile Range

2.027

Skewness

-.512

.913

Kurtosis

-.612

2.000

37.56760

2.022653

Mean

L 31.95181 o w e r

B o u n d 95% Confidence Interval for Mean U 43.18339 p p

Perlakuan EMBA

e

dosis 0,83 g/kgBB

r

B o u n d 5% Trimmed Mean

37.46250

Median

37.83800

Variance

20.456

Std. Deviation

4.522790

Minimum

32.432

Maximum

44.595

Range

12.163

36


Interquartile Range

7.433

Skewness Kurtosis Mean

dosis 1,67 g/kgBB

2.000

73.24340

1.442839

69.23744

Interval for Mean

Upper Bound

77.24936

5% Trimmed Mean

73.27344

Median

72.97300 10.409

Std. Deviation

3.226285

Minimum

68.919

Maximum

77.027

Range

8.108

Interquartile Range

6.081

Skewness

-.206

.913

-1.117

2.000

68.64880

.896454

Mean 95% Confidence

Lower Bound

66.15985

Interval for Mean

Upper Bound

71.13775

5% Trimmed Mean

68.61878

Median

68.91900

Variance dosis 3,33 g/kgBB

1.468

Lower Bound

Kurtosis

Perlakuan EMBA

.913

95% Confidence

Variance Perlakuan EMBA

.888

4.018

Std. Deviation

2.004531

Minimum

66.216

Maximum

71.622

Range

5.406

Interquartile Range

3.379

Skewness

.552

.913

Kurtosis

.868

2.000

Tests of Normality Kelompok

a

Kolmogorov-Smirnov Statisti

Df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statisti

c PersenProteks Kontrol Negatif CMC i

Df

Sig.

c

.241

5 .200

Na

37

*

.821

5

.119


Kontrol Positif

.231

5 .200

*

.881

5

.314

.276

5 .200

*

.933

5

.616

.175

5 .200

*

.974

5

.899

.246

5 .200

*

.956

5

.777

Asetosal Perlakuan EMBA dosis 0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB *. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction

Dari uji normalitas didapatkan nilai p untuk semua kelompok yaitu >0,05, maka data terdistribusi normal. Uji dilanjutkan dengan uji one way ANOVA.

Oneway Test of Homogeneity of Variances PersenProteksi Levene Statistic

df1

1.579

df2

Sig.

4

20

.219

ANOVA PersenProteksi Sum of Squares Between

Df

Mean Square

F

20406.915

4

5101.729

151.942

20

7.597

20558.857

24

Sig.

671.536

.000

Groups Within Groups Total

Dari uji homogenitas variansi, didapatkan p>0,05 sehingga dapat dikatakan bahwa varian sama. Dari uji ANOVA didapatkan p<0,05 yang berarti paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata persen proteksi yang berbeda bermakna. Uji dilanjutkan dengan uji post hoc Bonferroni.

Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: PersenProteksi Bonferroni (I) Kelompok (J) Kelompok

Mean Difference (I-

38

Std. Error

Sig.

95% Confidence Interval


J)

Lower

Upper

Bound

Bound

-73.243200

*

1.743228

.000 -78.74029 -67.74611

-37.567600

*

1.743228

.000 -43.06469 -32.07051

-73.243400

*

1.743228

.000 -78.74049 -67.74631

-68.648800

*

1.743228

.000 -74.14589 -63.15171

73.243200

*

1.743228

.000

67.74611

78.74029

35.675600

*

1.743228

.000

30.17851

41.17269

-.000200

1.743228 1.000

-5.49729

5.49689

4.594400

1.743228

.159

-.90269

10.09149

37.567600

*

1.743228

.000

32.07051

43.06469

-35.675600

*

1.743228

.000 -41.17269 -30.17851

-35.675800

*

1.743228

.000 -41.17289 -30.17871

-31.081200

*

1.743228

.000 -36.57829 -25.58411

73.243400

*

1.743228

.000

67.74631

78.74049



Perlakuan EMBA dosis 0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na


Perlakuan EMBA dosis 0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na

Perlakuan EMBA dosis 0,83 g/kgBB

Kontrol Positif Asetosal Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na

Perlakuan


.000200

1.743228 1.000

-5.49689

5.49729

Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB 0,83 g/kgBB

35.675800

*

1.743228

.000

30.17871

41.17289


4.594600

1.743228

.159

-.90249

10.09169

*

1.743228

.000

63.15171

74.14589

-4.594400

1.743228

.159 -10.09149

.90269

EMBA dosis

3,33 g/kgBB Perlakuan

Kontrol Negatif CMC

68.648800

EMBA dosis Na 3,33 g/kgBB


39



*

1.743228

.000

25.58411

36.57829

-4.594600

1.743228

.159 -10.09169

.90249

31.081200

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Lampiran 11. Analisis Statistika Perubahan Persen Proteksi 40


Case Processing Summary Kelompok

Cases Valid N

Kontrol Negatif CMC

Missing

Percent

N

Total

Percent

N

Percent

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%


5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%


5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

5

100.0%

0

0.0%

5

100.0%

Na

PerubahanPers enProteksi

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB

Descriptives Kelompok

Statistic Mean

Std. Error

-100.00000 .825109 Lower

95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper

-102.29087

-97.70913

Bound


5% Trimmed Mean

-100.00000

Median

-100.00000

Variance

3.404

Std. Deviation

1.845000

PerubahanPer

Minimum

-101.845

senProteksi

Maximum

-98.155

Range

3.690

Interquartile Range

3.690

Skewness

.000 .913

Kurtosis

-3.000 2.000

Mean

.00020 .690175 Lower


95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper Bound

41

-1.91603

1.91643


5% Trimmed Mean

.04117

Median

-.36900

Variance

2.382

Std. Deviation

1.543279

Minimum

-2.213

Maximum

1.476

Range

3.689

Interquartile Range

2.767

Skewness

-.512 .913

Kurtosis

-.614 2.000

Mean

-48.70820 2.761470 Lower

95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper

-56.37527

-41.04113

Bound


5% Trimmed Mean

-48.85167

Median

-48.33900

Variance

38.129

Std. Deviation

6.174835

Minimum

-55.720

Maximum

-39.114

Range

16.606

Interquartile Range

10.148

Skewness

.888 .913

Kurtosis

1.468 2.000

Mean

.00040 1.969949 Lower

95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper

-5.46906

5.46986

Bound Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB

5% Trimmed Mean Median

.04144 -.36900

Variance

19.403

Std. Deviation

4.404940

Minimum

-5.904

Maximum

5.166

42


Range

11.070

Interquartile Range

8.303

Skewness

-.206 .913

Kurtosis

-1.117 2.000

Mean

-6.27260 1.223940 Lower

95% Confidence

Bound

Interval for Mean

Upper

-9.67080

-2.87440

Bound


5% Trimmed Mean

-6.31361

Median

-5.90400

Variance

7.490

Std. Deviation

2.736813

Minimum

-9.594

Maximum

-2.213

Range

7.381

Interquartile Range

4.613

Skewness

.552 .913

Kurtosis

.869 2.000

Tests of Normality Kelompok

a

Kolmogorov-Smirnov Statist

df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statisti

ic Kontrol Negatif CMC

df

Sig.

c

.241

5

.200

*

.231

5

.200

*

.881

5

.314

.933

5

.616

.821

5

.119

Na Kontrol Positif Asetosal PerubahanPersenProt eksi


.276

5

.200

*

.175

5

.200

*

.974

5

.899

.246

5

.200

*

.956

5

.777

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB

*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction

43


Dari uji normalitas didapatkan nilai p untuk semua kelompok yaitu >0,05 sehingga data terdistribusi normal. Uji dilanjutkan dengan uji one way ANOVA.

Oneway Test of Homogeneity of Variances PerubahanPersenProteksi Levene Statistic

df1

df2

1.579

Sig.

4

20

.219

ANOVA PerubahanPersenProteksi Sum of Squares Between Groups

Mean Square

38040.309

4

9510.077

283.232

20

14.162

38323.541

24

Within Groups Total

Df

F 671.540

Sig. .000

Dari uji homogenitas variansi didapatkan nilai p>0,05 sehingga varian sama. Hasil ANOVA menunjukkan p<0,05 yang berarti paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata perubahan persen proteksi yang berbeda bermakna. Uji dilanjutkan dengan uji post hoc Bonferroni.

Post Hoc Tests Multiple Comparisons

Dependent Variable: PerubahanPersenProteksi Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok

Mean

Std. Error

Sig.

95% Confidence Interval

Difference (IJ) Kontrol Positif

-100.000200

Lower

Upper

Bound

Bound

*

2.380050

.000

-107.50545 -92.49495

*

2.380050

.000

-58.79705 -43.78655

*

2.380050

.000

-107.50565 -92.49515

Asetosal Perlakuan Kontrol Negatif

EMBA dosis

CMC Na

0,83 g/kgBB Perlakuan

-51.291800

-100.000400

EMBA dosis 1,67 g/kgBB

44


Perlakuan

*

2.380050

.000

-101.23265 -86.22215

*

2.380050

.000

92.49495 107.50545

*

2.380050

.000

41.20315

56.21365

-.000200

2.380050 1.000

-7.50545

7.50505

6.272800

2.380050

.159

-1.23245

13.77805

51.291800

*

2.380050

.000

43.78655

58.79705

-48.708400

*

2.380050

.000

-56.21365 -41.20315

-48.708600

*

2.380050

.000

-56.21385 -41.20335

-42.435600

*

2.380050

.000

-49.94085 -34.93035

*

2.380050

.000

92.49515 107.50565

-93.727400

EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif

100.000200

CMC Na Perlakuan

48.708400

EMBA dosis Kontrol Positif Asetosal

0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif CMC Na Kontrol Positif Asetosal

Perlakuan EMBA Perlakuan dosis 0,83 g/kgBB EMBA dosis 1,67 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif

100.000400

CMC Na Kontrol Positif

.000200

2.380050 1.000

-7.50505

7.50545

*

2.380050

.000

41.20335

56.21385

6.273000

2.380050

.159

-1.23225

13.77825

*

2.380050

.000

86.22215 101.23265

-6.272800

2.380050

.159

Asetosal Perlakuan EMBA Perlakuan

48.708600

dosis 1,67 g/kgBB EMBA dosis 0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Negatif

93.727400

Perlakuan EMBA CMC Na dosis 3,33 g/kgBB Kontrol Positif Asetosal

45

-13.77805

1.23245


Perlakuan

*

2.380050

.000

34.93035

49.94085

-6.273000

2.380050

.159

-13.77825

1.23225

42.435600

EMBA dosis 0,83 g/kgBB Perlakuan EMBA dosis 1,67 g/kgBB . The mean difference is significant at the 0.05 level.

46


BIOGRAFI PENULIS Penulis bernama lengkap Ni Kadek Pramita Anggara Dewi ini merupakan anak kedua dari Bapak I Ketut Madia dan Ibu Ni Ketut Sulati. Lahir di Denpasar pada 17 Januari 1995. Lahir dan tumbuh di Denpasar, Bali sehingga mengenyam pendidikan di luar Pulau Bali merupakan salah satu cita-cita penulis. Penulis berkesempatan untuk melanjutkan

pendidikan

sarjana

di

Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma pada tahun 2013. Ketika masa kuliah, penulis aktif mengikuti beberapa kepanitiaan, seperti Pelepasan Wisuda (2014), Student Exchange Programme (2015), PPRtoS (2015). Penulis juga aktif mengembangkan diri dengan menjadi Asisten Praktikum Anatomi Fisiologi dan Farmakologi Toksikologi (2016).

47

UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK METANOL BIJI ALPUKAT (Persea americana Mill.) PADA MENCIT BETINA TERINDUKSI ASAM ASETAT SKRIPSI

Recommend Documents