Diagnosztikumok bősége. Mikor, milyen teszttel mit lehet kimutatni?
Dr Ujhelyi Eszter Fővárosi Önkormányzat Egyesített Szent István és Szent László Kórház és Rendelőintézet Immunológiai Labor MOLSZE X. Nagygyűlés 2007 Budapest
Ellenanyag, illetve antigén kimutatáson alapuló szerológiai diagnosztikumok z
Hagyományos „szendvics „ és kompetíciós ELISA tesztek
z
antigén, ellenanyag, konjugát, szubsztrát
z
Leolvasás színreakcióval BioMerieux, Biotest, BioRad, BioProbes
z
Immunfluoreszcencián alapuló tesztek z VIDAS z Kemilumineszcencán alapuló tesztek z ABBOTT, VITROS
z
Minek alapján döntjük el, hogy milyen tesztet használunk. 1. 2.
Van-e CE jelzése Mennyi egy vizsgálat ára ( belefér-e az OEP pontba)
3.
Egyszerre hány mintát kell feltenni (üres lyukak!)
4. 5. 6. 7.
Egyszerre hány minta futtatható Mennyire automatizált a rendszer Egyedi minták mérhetők-e Mennyi idő alatt van eredmény
Mit nem veszünk figyelembe a teszt vásárláskor? 1. 2.
Specificitás (fals pozitivitás aránya) Szenzitivitás (minél korábbi fertőzés kimutatása)
Reprodukálhatóság Elfogadjuk a CE jelzést, és az irodalmi hivatkozásokat Valóban minden kereskedelmi forgalomban lévő szerológiai diagnosztikai teszttel minden fertőzés kimutatható? 3.
A korai fertőzésre jellemző vírusmarkerek megjelenése
A HIV fertőzés diagnosztikai lehetőségei a fertőzést követő különböző időpontokban z z z z z z z z z z z z z z z
Első generációs tesztek HIV IgG típusú ellenanyag (kb 2 hónapos fertőzés) Második generációs tesztek HIV IgG típusú ellenanyag ( kb 2 hónapos fertőzés) Harmadik generációs tesztek HIV IgM és IgG típusú ellenanyag ( 3-4 hetes fertőzés) Negydik generációs tesztek HIV antigén és IgG típusú ellenanyag (2-3 hetes fertőzés) Ötödik generációs tesztek HIV antigén és IgM+IgG típusú ellenanyag külön kimutatható (2-3 hetes fertőzés)
Ablak periódus csökkenése a tesztek szenzitivitásának növelésével
Konfirmálás golden standardje: WB
Korai szerokonverzió kimutatásának lehetőségei Vérvétel dátum
Fertőződés től eltelt idő
Uniform (Ag+Ab)
INSTI IgG
VIDAS Ag
Vidas iGm+iGg
Wb
2006 09 07
4 hét
Pozitív S/Co:4,7
Negatív
Pozitív S/Co:11,98
Negatív
Nincs csík
3.610.000
2006 09 14
5 hét
Pozitív S/Co: 3,1
Pozitív
Pozitív S/Co:3,12
Negatív
P17;p24; (((gp160)))
1.630.000
2006 09 18
6 hét
Pozitív S/Co:4,3
Pozitív
Negatív
Pozitív S/Co:4,83
P17;p24 (((gp 160)))
153.000
2006 09 26
7 hét
Pozitív S/Co9,8
Pozitív
Negatív
Pozitív
P17;p24 (gp160)
Pozitív S/Co:14,6
Pozitív
Pozitív S/Co:18,46
Pozitív
2006 10 03
2006 10 24
2006 11 06
8 hét 11 hét 13 hét
S/Co:12,47
Negatív
Pozitív S/Co:12,35
Negatív
Pozitív S/Co:16,32
Pozitív
Negatív
Pozitív S/Co:18,51
Szabad vírusIU/ml
P17;p24; ((((gp120))) gp160
MHA
P17,p24, (((p66))) (gp120)) gp160
20.300
P17,p24,(p66)) Gp120,gp160
Mit jelent a konfirmálás z z
z z z z z z
A konfirmálás = megerősítés HIV pozitív szűrővizsgálat esetén el kell dönteni, hogy valódi, vagy álpozitív az eredmény A konfirmálásnak szigorú algoritmusa van szűrővizsgálat megismétlése a szűrőteszttel, majd más típusú teszttel, Western blottal, korai fertőzés bizonyítására p24 antigén teszttel, vagy qualitatív PCR-rel)
Szabad vírusmennyiség a korai szerokonverzió konfirmálására
Anoním szűrés SZIGET 2005
HCV ellenanyag kimutatására alkalmas diagnosztikumok z
Jogtiszta IgG HCV kitek (drágák)
z
(Ortho, Vitros, Roche, Abbott, BioRad) Nem jogtiszta IgG HCV kitek (olcsóbbak) (Bioprobes, Bioelisa, Innogenetic) Jogtiszta IgM HCV kit ( olcsóbb) (Bioprobes) Jogtiszta Antigén és IgG HCV kit (drága) (BioRad) Kromatográfián alapuló gyorstesztek
z z z z z z z
HCV verifikálásra alkalmas diagnosztikumok 1. 2. 3. 4.
RIBA HCV IgM kit PCR ( qualitatív és quantitatív) RIBA like Bioprobes ELISA
Melyek HCV konfirmálásra alkalmas specifikus ellenanyagok z z z z z z
Bioprobes confirmációra alkalmas ELISA Kimutatja : Core ellenanyag NS3 ellenanyag NS4 ellenanyag NS5 ellenanyag
Ellentmondásos HCV eredmények Melyik teszt melyik ellenanyagot mutatja ki? Beteg
Biopr Core
Biopr NS3
Biopr NS4
Biopr NS5
Bipr IgM
Biopr IgG
Bioelisa
Ortho
Gy.teszt
1. 2.a
Poz Poz
Poz Poz
Poz
Poz Poz Poz Indet Neg GyP Poz
Poz Poz
Poz Poz
Poz Poz
2.b
Poz
Poz
Neg
Neg Poz
Poz
Neg
Poz
Poz
3.
Neg
Poz
Indet
Neg Neg
Poz
Indet
Poz
Neg
4.
Indet
Poz
GyP Neg Neg
Poz
GyP Poz
Neg
5.
Poz
Poz
Poz
Neg Poz
Poz
Poz
Poz
Poz
6.
Neg
Poz
Poz
Neg Poz
Poz
Poz
Poz
Neg
7.
Neg
Poz
Poz
Neg GyP Poz
Poz
Poz
Gy P
Következtetések z z
1./ Nem mindig a legolcsóbb teszt a legkevésbé érzékeny, de az érzékeny tesztek drágák 2./ Nem megfelelő teszttel egyaránt kaphatunk fals negatív és fals pozitív eredményt. ( A fertőzöttnél milyen ellenanyag alakul ki, és az adott teszt mire érzékeny)
z z z
3./ Bizonytalan eredmény esetén konfirmálás nélkül nem lehet eredményt kiadni 4./ A szűrő tesztek gyakran érzékenyebbek a konfirmáló teszteknél 5./ A HIV konfirmáláshoz hasonlóan HCV konfirmáló központokat is ki kellene alakítani
