A humorális ellenanyagok tanulmányozása nyulakban kísérletileg létesített Cysticercus pisiformis (Bloch, 1780)-fertőzöttség esetén

Parasit. Hunç. 5. 135-158. 1972.

A humorális ellenanyagok tanulmányozása nyulakban kísérletileg létesített Cysticercus pisiformis (Bloch, 1780)-fertőzöttség esetén IV. A specifikus ellenanyagok izolálása

Dr. NÉMETH István A Magyar Tudományos Akadémia Állategészségügyi Kutató Intézete, Budapest

A Taenia

1

p i s i f o r m i s / B l o c h , 1780/ Gmelin ,

i d a e / oncosphaeráival galandférgek lenanyagok

j e l e n n e k meg.

tációs próbával sphaerák

fertőzött

v a g y lárvaformák

nyulak

1790 / C e s t o d a :

vérsavójában

antigénkomponensei

Ezek az e l l e n a n y a g o k

/ 1 4 , 7 7 / , mesterségesen

felhasználásával

kifejlett

ellen

ható e l ­

gyürüs-precipi-

keltetett

végzett i n v i t r o

a

Taeni-

aktiv

onco-

lárvaprecipitációs

próbával / 7 0 , 7 1 / , agargéldiffuziós-precipitációs

próbával / 5 1 ,

5 3 , 5 4 / , komplementumkötési

indirekt

próbával / 7 7 / , v a l a m i n t

agglutinációs próbával / 5 1 , 7 7 /

Korábbi' vizsgálatok

eredményei a z t mutatták, hogy a T

mi s-on c o s p h a e rákkal történő lakban zita

kialakuló humorális

tartozó

56/.

Ezeket

az

a

során megkíséreltük

az

formában k i n y e r n i

a reinfekció

ellenanyagokat

vizsgálatokat

foglalja

ellenanyagokat

T. pisiformis-petékkel

nem

után

tartalmaztak

i s sikerült

e l l e n a n y a g o k a t e d d i g még

Ez a d o l g o z a t a z o k a t

nyu­

elsősorban I g G i m m u n g l o b u l i n ­ termelődnek,

a m e l y e k magasabb t i t e r b e n

e l l e n a n y a g o k a t , IgM t i p u s u

pisi for-

T

fertőzés hatására a

ellenanyagválasz heterogén. E p a r a ­

ellenanyagok

a z o n b a n a vérsavókban,

/55,

kisérleti

támadásával szemben u g y a n i s

osztályba

hem-

kimutathatók.

kimutatni izolálták.

össze,

amelyek

immunkémiailag

tiszta

mesterségesen

fertő­

zött állatok vérsavójából s p e c i f i k u s i m m u n a d s z o r b e n s segítségé­ vel.

Anyagok

és módszerek

An t i gé ne k

Az i m m u n a d s z o r b e n s

preparálásához és az

agargéldiffuziós-pre­

cipitációs próbában antigénként a n y e r s állapotban fertőzőképes oldódó

cysticercusokból készitett

frakcióját használtuk

FIELD / 4 1 / eljárása s z e r i n t

homogenizált

kivonat

savban

/53,54/.

Az i n d i r e k t hemagglutinációs

leirt

teljes

próbában használt T. pisiformisból

antigén LANCE-

készült a korábban

módosítással / 5 1 / .

An t i s e rumok

A nyul-serumfehérjéket serum,

az a n t i - n y u l

specifikus

anti-nyul

precipitálo p o l i s p e c i f i k u s

I g G és I g M j u h i m m u n s e r u m , IgG juhserum,

előállitása a korábban l e i r t

Taenia

pisiformis-petékkel

fertőzött n y u l a k

Húsz 5-6 h e t e s korú,

IgM

juhserum

történt / 5 5 , 5 6 / .

mesterségesen

700-900 g s u l y u ,

közvetlenül a g y o m o r b a . tyákból spontán ürülő

a. c a r o t i s o n

és az a n t i - n y u l

vérsavója

állatonként 500 petét a d t u n k

zoláltuk / 5 2 / .

módon

kecskeimmun-

továbbá a mono-

be

fehér uj-zélandi

fecskendőre s z e r e l t

A petéket mesterségesen gravid

fertőzött k u ­

izekből a korábban l e i r t

A fertőzést követő 4 0 . napon a n y u l a k

keresztül elvéreztettük, a másik

napon 10 000 petével ismét fertőztük, pon véreztettük e l .

nyúlnak

szondán át

módon i felét

az

felét p e d i g a 6 0 .

és az e z t követő 4 0 . n a ­

Az agargéldiffuziós-precipitációs

próbában

precipitálo vérsavókat kiválogattuk, m a j d az i n d i r e k t h e m a g g l u ­ tinációs próbában / I H A / közel a z o n o s t i t e r b e n kevertük. I l y e n módon az e l l e n a n y a g o k rumkeveréket állítottunk elő:

reagálókat

össze­

izolálásához négyféle s e -

a z I . és

I I . keverék,

amelyek

HA-titere 40.

1:640,

napon v e t t

i l l e t v e 1:160 v o l t ,

vérsavókból,

a III.

a z első fertőzést és

1 : 1 5 3 6 , i l l e t v e 1 : 4 0 9 6 / p e d i g a második pon

vett

vérsavókból készült,

kül - 2 0 °C-on m e g f a g y a s z t v a

Az i m m u n a d s z o r b e n s

a z antigénoldatban

polimerizálásával állitottuk

keveréket többször váltott

M acetát-pufferrel /pH 5 , 0 /

+ +

adtunk

szobahőn h a g y t u k

állni.

pontosan

+

ad­

beállítottuk, m a j d

oldatban,

keve­

és ha szükséges

volt, minden

15 mg glutáraldehi-

és a keveréket

másnapig

A keverékben a fehérjék végső

koncent­

rációja a glutáraldehid hozzáadása után 20 mg/ml képződött

tartalmazó

acetát-pufférrel / 0 , 2 M

állandó keverés m e l l e t t

2,5 % - o s v i z e s

végzett

f o l y a m a t o s mágneses

Ezután a p H - t ellenőriztük,

mg fehérjéhez

nél­

fehérjéknek AVRA-

2 0 0 mg b o v i n s e r u m a l b u m i n t

pH 5 , 0 / szemben 6 órán át dializáltuk

det

lévő

glutáraldehiddel

e l ő . S z á z mg fehérjét

antigénoldathoz vivőfehérjeként

100

konzervélószer

felhasználásukig.

előállítása

Az i m m u n a d s z o r b e n s t

rés m e l l e t t .

követő

/HA-titer

feotőzés után a 4 0 , n a ­

A vérsavókat

tároltuk

MEAS és TERNYNCK / 3 / eljárása s z e r i n t

t u n k , és a

I V , keverék

gél további kezelése

körül v o l t . A

mindenben azonos v o l t

AVRAMEAS

és TERNYNCK / 3 / által leírtakkal.

Az e l l e n a n y a g o k

adszorbeálása és eluálása

Az e l l e n a n y a g o k

izolálása a fertőzött

MEAS és TERNYNCK / 3 / által l e i r t történt.

Az előzetesen

mennyiségű

zsirtalanitott

immunadszorbenst

szuszpenziót 30 p e r c i g fordulattal

15 p e r c i g

n y u l a k vérsavójából AVRA­

"batchwise

adtunk

szobahőn,

+4 °C-on.

tánsban IHA-próbával e l l e n a n y a g o k a t l e h e t e t t letet

+

+ +

ujabb

adag

Budapest

majd

Ha a

kimutatni,

a d s z o r b e n s s e l megismételtük.

P h y l a x i a Oltóanyag- és Tápszertermelő Reanal,

szerint

megfelelő

centrifugacsövekben,

l a s s a n kevergettük centrifugáltuk

procedure"

vérsavókhoz

és a 3000

szupernaa müve­

Az i m m u n a d s z o r -

Vállalat, B u d a p e s t

bens-ellenanyag datban

komplexet

ezután 1 0 0 m l izotóniás

szuszpenzálva m o s t u k ,

centrifugáltuk. folytattuk, 0,02 l e t t .

a felüluszó

A mosófolyadékot

koncentráltuk,

majd 3000 f o r d u l a t t a l

A centrifugálással

amig

konyhasóol­

egybekötött

15

percig

mosást

fényadszorbciója

addig

280 myu/-nál k b .

összegyűjtöttük, ultraszüréssel b e ­

és IHA-próbával

ellenanyagok

jelenlétére meg­

vizsgáltuk .

Az adszorbeált

fehérjék eluálását 0 , 1 M

/pH 2 , 8 / , i l l e t v e

glikokoll-HCl-pufférrel

0,05 M T r i s - H C l - p u f f e r b e n /pH 7,5/ o l d o t t

2,5

M és 5,0 M g C l - o l d a t t a l végeztük. 2

Az előbbi e s e t b e n szuszpendálva fordulattal szer

a

immunadszorbenst

kevertük szobahőn,majd

4 ml

eluensben

15 p e r c i g

10 0 0 0

centrifugáltuk +4 ° C - o n , és az egész müveletet

két­

megismételtük.

Az utóbbi e s e t b e n egyszer nos

mosott

10 p e r c i g

az eluálás kétszer

20 m l 5,0 M M g C l - o l d a t t a l 2

2 0 - 2 0 m l 2,5 M MgCl,.,- és

történt az előbbiekkel

azo­

módon.

A centrifugálás után a z eluátumokat összekevertük,

azbesztlapon

szűrtük,

dializáltuk,

sürün váltott izotóniás konyhasóoldattal

ultraszüréssel koncentráltuk,

és végül 0 , 0 1 % mertiolátot

talmazó P B S - o l d a t / 0 , 0 4 M pH 7,3/ e l l e n i on

tároltuk.

Az e l l e n a n y a g o k

kimutatása

A vérsavókban és a z IHA-próbával és tuk

tar­

dializálás után +4 °C-

ellenanyag-preparátumokban

az

agargéldiffuziós-precipitációs

k i a korábban l e i r t a k s z e r i n t

antitesteket

próbával

mutat­

/51,53,54,56/,

Az e l l e n a n y a g - t a r t a l o m meghatározása A különböző nyulvérsavók cipitációs

ellenanyag-tartalmát

módszerrel állapítottuk meg,

kvantitativ

pre­

a m i t a szokásos módon

1. táblázat Table 1.

Az ellenanyag-kinyerés a fertőzött n y u l a k vérsavójából az e l l e n ­ anyagoknak az immunadszorbensre történt adszorbeálása és eluálása után Y i e l d of a n t i b o d i e s e l u t e d a f t e r a b s o r p t i o n of d i f f e r e n t f r o m i n f e c t e d r a b b i t s on the immunoadsorbent

Az
Az immunadszorbensről eluált anyag glikokoll-HCl-puffer

jel­ zése

I. II. III. IV.

ellen­ anyagfehér j e A g /ml

480 250 820 900

HAtiter

térfo­ gata (ml)

0,1 M

20 20 20 20

2,5 és 5,0 M M g C l

pH 2,8

2

0,05M

T r i s - H C l - p u f f e r b e n pH 7,5

Összes eluált fehérje (mg) 1:640 1:160 1:1536 1:4096

sera

8,0 ( 8 3 , 3 % ) * 4,4 ( 8 8 , 0 % ) 15,8 (96,3%) 17,2 (90,6%)

HAtiter * 3 0

1:512

1:128 1:128 0 1:3072

Összes eluált fehérje (mg) 6,2 3,2 9,0 11,0

(64,6%) (64,0%) (54,9%) (61,1%)

HAtit er

ï 3 f

1:384 1:96 1:768 1:2048

A zárójelben feltüntetett számok az ellenanyag-kinyerést tüntetik f e l , az immunadszorbensről eluált fehérjék mennyiségét a t e l j e s vérsavó ellenanyagfehérje-tartalmának %-ában k i ­ f e j ezve. (Numbers i n b r a c k e t s express t h e y i e l d i n a n t i b o d y } c a l c u l a t e d f r o m a n t i b o d y p r o t e i n con­ t e n t o f whole serum v e r s u s e l u t e d p r o t e i n ) ^ A z eluált anyag még t e l j e s hemagglutinációt eredményező legnagyobb higitása, ha az eluátumok 20 ml-re v o l t a k koncentrálva. (The h i g h e s t d i l u t i o n of the e l u t e d m a t e r i a l s t i l l g i v i n g f u l l h a e m a g g l u t i o n a t l o n when the e l u a t e s were c o n c e n t r a t e d t o 20 m l )

hajtottunk

végre / 2 4 / , a F o l i n - C i o c a l t e u reakciót a l k a l m a z v a

immunprecipitátum kat

fehérjetartalmának

2 m l vérsavóból 3 p a r a l e l l e l

Az I g G - és I g M - g l o b u l i n o k

Az e l u a t u m o k

gével FAHEY és lis

mérésére. A meghatározáso­

végeztük.

kvantitatív

a z I g G és az I g M

n y u l I g G juhvérsavó,

illetve

meghatározása

mennyiségét m o n o s p e c i f i k u s anti-nyul

már l e i r t

a z ultraszürést és a

módon végeztük

anti-

I g M juhvérsavó segítsé­

McKELVEY / 2 6 / módszere s z e r i n t

immundiffúzióval határoztuk meg.

analíziseket,

az

közvetlen

radiá­

Az i m m u n e l e k t r o f o r e t i k u s

vérsavók zsirtalanitását a

/55,56/.

Eredmények

Az inszolubilizált savókban

antigénnel történt adszorbeálás után

ellenanyagokat

precipitációs próbával bens-ellenanyag

sem a z I H A ,

sem a z

nem l e h e t e t t k i m u t a t n i .

k o m p l e x mosófolyadékában

a vér­

agargéldiffuziósAz i m m u n a d s z o r ­

sem v o l t a k

ellenanya­

gok.

Az i m m u n a d s z o r b e n s h e z venssel 1.

végzett

kapcsolódott

táblázat tünteti f e l . Az e g y e s

immunadszorbensről v i s s z a n y e r t

a MgCl -oldattal

tette

k i a vérsavók

alkalmával a z

összmennyisége a 0 , 1 M

végzett eluálás esetén 8 3 - 9 6 %-

történt eluálás esetén p e d i g

2

5 4 - 6 4 %-át

ellenanyagfehérje-tartalmának.

A bekoncentrált e l u a t u m o k / 1 - 4 mg fehérje/ml/ géldiffuziós lizise

monospecifikus

anti-nyul

valamint

polispecifikus

mutatott

k i a z immunadszorbensről

nyag

anti-nyul

fehérjeösszetételében,

a vérsavókból m i n d i g

szol­

k a p o t t eredményeket a z

preparálások

fehérjék

pH 2,8 glikokoll-HCl-pufférrel át,

fehérjéknek a kétféle

eluciójára vonatkozóan

noha

IgG-,

illetve

anti-nyul

immunvérsavóval

az e l l e n a n y a g o k

IgM,

különbségeket

a kétféle e l u e n s s e l

ugyanabból a tételből v e t t

ana­

n y e r t a-

adszorbeálása friss

immunad-

szorbenssel oldattal IgG-t

történt.

Amig u g y a n i s a z immunadszorbensről

eluált a n y a g v a l a m e n n y i

tartalmazott,

vérsavók

/ I I I .

addig a

vérsavókeverék

ráfertőzés után a

és I V . keverék/ nyert

IgM-t

m u t a t n i . Az e g y s z e r

i s k i lehetett

azonban

szintén

serumkeverék/

től eltérő t i p u s u

nalizissel

kivül

fertőzött állatok vér­ anyag

t a r t a l m a z o t t . Az IgG-től és az I g M -

lehetett

a

polispecifikus

egyetlen

anti-nyul

ellenanyag-prepará­

immunelektroforétikus vizsgálata a géldiffuziós a-

kapottakkal

megegyező

vizsgálat eredményét

setében k i a l a k u l t ,

megfelelő i v e t

esetében az

glikokoll-sósav-pufférrel

I I I .

adszorbensről 0,1 M pH

2,8

eluált a n y a g o k vizsgálatakor az a l k a l m a z o t t

a n t i - n y u l kecskevérsavó nem m u t a t o t t

rátumban sem, noha

antigenitásu s e r u m k o m p o n e n s s e l

A különböző vérsavókeverékekből nyiségét a 2. táblázat

k i egyetlen

prepa­

tünteti

legalább

18-22

nyert immunglobulinok f e l . A közvetlen

összfehérje-mennyiségével.Az

összmeny-

radiális immun-

összmennyisége megközelí­

Folin-Ciocalteu-fenol-reagenssel

össze 8,1-9,4 %-át t e t t e

különböző

reagált.

diffuzióval meghatározott I g G és I g M a

lehetett polispe-

e z az immunserum a normál nyulvérsavó immun­

e l e k t roforézises a n a l i z i s e folyamán

tően a z o n o s v o l t

pedig

e-

csak a

m e g f i g y e l n i . Más t i p u s u se rumfehérjéket cifikus

Egyik IgG-nek

v a l a m e n n y i ellenanyag-preparátum

az I g M - n e k

és I V . vérsavókeverék

eredményekre v e z e t e t t .

reprezentálja a z 1 . ábra. Az

megfelelő precipitációs i v

tott

az I g G - g l o b u l i n o n

sem k i m u t a t n i .

Az e l u a t u m o k

ilyen

vett

gliko-

ez utóbbi módon n y e r t

serumfehérjéket

k e c s k e immunsavóval nem tumban

eluátumokban

csak IgG-t

4 0 . napon

esetében a 0 , 1 M pH 2,8

koll-sósav-pufférrel

savójából / I . és I I .

MgC^-

esetében c s a k

IgM-globulin

k i az e l u a t u m o k

megállapí­

mennyisége m i n d ­

összimmunglobulin-tar-

talmának •

Az immunadszorbensről

eluált

fehérjék

ellenanyag-aktivitását

géldiffuziós-precipitációs

és IHA-próbával m u t a t t u k

géldif fuziós-precipitációs

próbában v a l a m e n n y i vérsavó

tációt h o z o t t

létre az antigénoldattal. A legerősebb

ciós sáv a serumtartály

közelében helyeződött.

ki.Az

agar­

precipi­

precipitá­

Ezen a v o n a l o n

2. táblázat Table 2. Az intmunadszorbensről eluált IgG- és qsszmennyiség e

IgM-immunglobulinok

T o t a l q u a n t i t i e s o f IgG and IgM i m m u n g l o b u l i n s e l u t e d f r o m •the immunoadsorbent

Az adszorbeált vérsavók

j elzése

térfogata (ml)

Glikokoll-HCl-puffer 0,1 M Ph 2,8

IgG mg

IgM mg

2,5 és 5, 0 M

MgCl

2

0,5 M

pH 7,5 Tris-HCl -pufferben IgM mg

IgG mg

—

I.

20

8,4

II. III. IV.

20

4,8

20

14,8

20

15,8

0 0 1,3 1,64

6,4 3,6

:

.

0,

9,2

0 0

11,2

0

kivül, a m e l y m i n d e n vérsavókeverék

vérsavó esetében megtalálható v o l t ,

még e g y ,

a I I I .

é s I V , vérsavókeverék

gyengébb, az előbbitől az antigéntartály pitációs

csikót

i s kialakitott.

szintén precipitálták vonalak

teljes

jegyezni, mok

felé

reakciót

preci­

adtak

az

precipitációs v o n a l a k k a l

precipitációs

eredeti

vérsavók

/ 2 . ábra/. Meg k e l l

h o g y a különböző vérsavók és a z ellenanyag-preparátu-

esetében a z

e g y e s precipitációs sávok más és más

koncentrációnál a l a k u l t a k

Az IHA-próbával

ugyanazon a napon

végzett vizsgálatok

eredményeit

azonos

nével a z o n o s

2,8 glikokoll-HCl-pufférrel

által a d o t t reakció

történt

MgCl ~oldatot

alkalmazva

savók e r e d e t i

hemagglutinációs

eluensként

eluáláskor pedig

titerének.

luátumok u g y v o l t a k

koncentrálva, h o g y az e r e d e t i

vérsavók

talmával, az ellenanyag-preparátumok

és u g y a n a b b a

tite-

adtak

reakciót,

7 5 - 8 3 % - a , az

50-60 % - a v o l t

a vér­

A m i k o r a z o n b a n az e-

fehérjetartalmuk

megkö­

ellenanyagfehérje-tar­

és a t e l j e s

vérsavók

közel

A különböző preparátumokban a

minimális ellenanyagfehérje-mennyiség, glutinációt

lát­

koncentrálva, a 0 , 1 M pH

zelítően a z o n o s v o l t

azonos t i t e r b e n

vörösvérsejt-adaggal

a preparáláshoz felhasznált vérsavó v o l u m e ­

térfogatra / 2 0 m l / v o l t a k

2

pre­

demonstrálni.

feltüntető 1 . táblázatból

ható, h o g y . a z ellenanyag-preparátumok ha az e l u a t u m o k

antigén­

k i optimálisan, ezért v a l a m e n n y i

cipitációs v o n a l a t nehéz e g y e t l e n l e m e z e n

re,

helyeződő

ellenanyag-preparátumok

az antigént, és a k i a l a k u l t

azonossági

által létesitett

Az

az I .

p e d i g két

a m e l y még t e l j e s

hemag-

eredményezett, 0,27 és 1,72 yag/ml között i n g a d o z o t t , a nagyságrendbe

tartozott,

mint

az e r e d e t i

vók esetében még t e l j e s

reakciót adó l e g k i s e b b

je-mennyiség / 0 , 1 7 - 1 , 5 6

uo,/ml/.

vérsa­

ellenanyagfehér­

Megbeszélés

AVRAMEAS és

TERNYNCK / 3 / i r t a

glutáraldehidet oldhatatlan hid

az egyes

adunk,

le,

az o l d o t t

hogy

állapotban

származékok k e l e t k e z n e k fehérjemolekulák

keresztül k o v a l e n s

között

keresztkötéseket

ha

fehérjeoldatokhoz lévő

fehérjékből

azáltal, h o g y a glutáraldeszabad

aminocsoportjaikon

létesit. Különféle

protein-

1 . ábra Az immunadszorbensről eluált fehérjék immunelektroforézises ana­ lizise . 1 és 3. Az I . , i l l e t v e a I I . serumkeverékből izolált a n y a g / e luálás 0,1 M pH 2,8 glikokoll-HCl-pufférrel/; 2. Normál nyul­ vérsavó; 4 és 5. A I I I . serumkeverékből izolált a n y a g , eluálás M M g C l - o l d a t t a l , i l l e t v e 0 , 1 M pH 2,8 g l i k o k o l l - H C l - p u f f e r r e l ; 2

A. Nyul-serumfehérjéket precipitálo kecskeimmunsavó; B. A n t i - n y u l I g G és I g M juhvérsavó; C. A n t i - n y u l I g M juhvérsavó. Fig. 1. I m m u n e l e c t r o p h o r e t i c a n a l y s i s o f p r o t e i n s e l u t e d from the immunadso r b e n t . 1 and 3. M a t e r i a l i s o l a t e d f r o m serum p o o l I . and I I . , respec­ t i v e l y / e l u t e d w i t h 0 , 1 M pH 2,8 g l y c i n e - H C l - b u f f e r / ; 2. N o r m a l r a b b i t s e r u m ; 4 a n d 5. M a t e r i a l i s o l a t e d f r o m serum p o o l I V . / e l u t e d w i t h M g C l s o l u t i o n and 0 , 1 M pH 2,8 glycine-HCl—buffer, respectively/; 2

A. Goat a n t i - w h o l e r a b b i t s e r u m ; B. Sheep a n t i - r a b b i t I g G and I g M immune serum ; C. Sheep a n t i - r a b b i t I g M immune s e r u m .

2. ábra A fertőzött n y u l a k t e l j e s vérsavójában és az immunadszorbensről eluált a n y a g b a n lévő precipitálo e l l e n a n y a g o k vizsgálata agargéldiffuziós-precipitációs próbában. A rezervoárok a következő r e a g e n s e k e t tartalmazták: 1 . I . serumkeverék ; 2. Az I . serumkeverékből izolált a n y a g /két különböző preparálás/; 3. I I . serumkeverék; 4. A I I . s e r u m k e v e ­ rékből izolált a n y a g /három különböző preparálás/; 5. A I I I . s e ru-mkeverékből izolált a n y a g ; 6. I I I . serumkeverék; 7. Normál nyulvérsavó; 8. A I V . serumkeverékből izolált a n y a g ; 9. I V . s e ­ rumkeverék; 1 0 . PBS / 0 , 0 1 M pH 7 , 1 / ; 1 1 , 1 2 , 1 3 , 14 és 1 5 . An­ tigénoldat 4, 8, 1 2 , 6 i l l e t v e 3 mg fehérje/ml. Fig.

2.

Gel d i f f u s i o n a n a l y s i s o f p r e c i p i t a t i n g a n t i b o d i e s i n w h o l e s e ­ rum o f i n f e c t e d r a b b i t s and i n m a t e r i a l e l u t e d f r o m i m m u n a d s o r bent . W e l l s w e r e f i l l e d as f o l l o w s : 1 . Serum p o o l I ; 2. I s o l a t e d ma­ t e r i a l f r o m serum p o o l I . ; /Two d i f f e r e n t p r e p a r a t i o n s / ; 3. Se­ rum p o o l I I . ; 4. M a t e r i a l i s o l a t e d f r o m s e r u m p o o l I I . /Three d i f f e r e n t p r e p a r a t i o n s / ; 5. M a t e r i a l i s o l a t e d f r o m serum pool, I I I . ; 6. Serum p o o l I I I . ; 7. N o r m a l r a b b i t s e r u m ; 8. Material i s o l a t e d f r o m serum p o o l I V . ; 9. Serum p o o l I V . ; 1 0 . PBS / 0 , 0 1 M pH 7 , 1 / ; 1 1 , 1 2 , 1 3 , 14 and 1 5 . A n t i g e n s o l u t i o n s containing 4, 8, 1 2 , 6 and 3 mg/ml p r o t e i n , r e s p e c t i v e l y . c

antigén - a n t i - p r o t e i n lataikban

ellenanyag

megállapították,

fehérjeantigének

r e n d s z e r e k k e l végzett

h o g y az i l y e n

specifikus

és s t a b i l

módon

immunadszorbensként

nálhatók, és segítségükkel a humorális e l l e n a n y a g o k ilag

hasz­

immunkémia-

tisztán kinyerhetők a vérsavókból.

A féregantigének

hatására

a módszert először

képződött a n t i t e s t e k

ként,

tiszta

anyagokat egyének

formában t u d t a

használva

fertőzött, i l l e t v e

echinococcosis

pisiformis-petékkel

kialakuló humorális

történő

ellen

cercosis

lefolyása során

k i s részben p e d i g

antitestek

az e l l e n a n y a g o k a t

sikerült

a fertőzött

anyag-preparátumok

ugyanis

globulinból álltak,

az e s e t e k

formában n y e r n i

vérsavójából.

magasabb v o l t

össze 9 - 1 0

%-a

-

előállitott

alacsony

volt

fertőzés után v e t t

az

IgG-ellenanyagok

a

Mennyiségük

mind­

mennyiségének. Az első

vérsavókból I g M t i p u s u

ellenanyagokat

mert i l y e n e k e t

csak o l y a n a l a c s o n y

talmaztak,

maradt a

ami a l a t t a

csak

ellenanyag-

preparátumok t a r t a l m a z t a k ,

talán nem, v a g y p e d i g

szerek

ellen­

többségében kizárólag I g G -

koncentrációban.

hetően azért nem sikerült k i n y e r n i ,

indu­

ezeket

Az

ellenanyag-fehérjéket

kétszer fertőzött állatok vérsavójából - a m e l y e k n e k

de e z e k i s csupán

részben

termelődését

a glutáraldehid-immun-

tiszta

nyulak

IgM t i p u s u

túlnyomó

cysti-

erősitik meg e b b e n a d o l g o ­

közölt vizsgálatok i s , a m e l y e k b e n

a d s z o r b e n s segítségével

a nyu­

tanulmányozása ér­

kiderítették, h o g y a

a parazitaantigének

IgM t i p u s u

kálják / 5 5 , 5 6 / . E z t a megállapítást

titere

immunizált

fertőzések nyomán

ellenanyagválasz

dekében korábban végzett kisérletek

zatban

immunadszorbens­

előállitani a z e c h i n o c o c c u s - e l l e n -

vérsavójából.

A Taenia lakban

a

izolálására e z t

ESANDI / 2 5 / a l k a l m a z t a , a k i inszolubilizált

juh-echinococcushólyag-folyadékot

IgG,

vizsgá­

inszolubilizált

felte­

v a g y egyál­

koncentrációban

tar­

kimutatásukra a l k a l m a z o t t mód­

érzékenységének.

M i n d e n e g y e s preparátum ellenanyagokat,

immunkémiailag

tisztán

t a r t a l m a z t a az

m i v e l az I g G - és IgM-globulinoktói

rum fehé r j éket egyáltalán

nem

lehetett

bennük

-

eltérő s e ­

legalábbis az

alkalmazott

polivalens

anti-nyul

immunsavó

segitségével - az

immunelektroforézises és géldiffuziós analízisek során k i m u t a t ­ ni .

A tisztán

kinyert

ellenanyag-fehérjék

zott,

a m i m e g f e l e l más

kapott

ellenanyag-kinyerésnek

a megkötött voltak

tént.

antigén-ellenanyag

ellenanyagok

eluálva,

nyerni,

mint

0,1 M pH 2,8

glikokoll-sósav-pufferrel

ellenanyagot lehetett

szolvens

t u l /3/,

hatásmechanizmusában

fellelhető

két körülmény magyarázza. Az

inszolubi­

nehezen

s ezért m i n d e n

2

egy

ülepedett a koncentrált

centrifugálás alkalmával

része és v e l e együtt

i s elvesztek.

a még nem

Másfelől az eluált

talmazó oldatból a M g C l ~ t kidializáIva, rősen megnövekedett, keletkezett

az e z t

közismerten a m a k r o g l o b u l i n o k lódásra,

végzett

2

IgM-ellenanyagokat

lehetett

lizált antigén e z e k e t

során

csapadék.

noha

pedig Mivel

elsősorban az aggregáaz oka annak i s ,

eluálással egyáltalán nem

visszanyerni,

tar­

térfogata e-

koncentrálás

oldhatatlan

hajlamosak

ez a csapadékképződés

az M g C l ~ o l d a t o k k a l

sik

követő

több-kevesebb

az

eluálódott

fehérjéket

az o l d a t

2

mindig

vissza­

2

MgCl ~oldatokban,

ellenanyagok

esetében

Ha az immunadszorbensről

lizált antigén egyfelől n a g y o n

immunadszorbens

rendszerek

ingado­

az eluálás 2,5 és 5,0 M M g C l - o l d a t t a l tör­

E z t , a kétféle

különbségeken

eredeti

között

/3,25/.

lényegesen több

amikor

mennyisége az 54-96 %-a

vérsavók ellenanyagfehérje-tartalmának

hogy

lehetett

az a l k a l m a z o t t i n s z o l u b i ­

i s kétségtelenül adszorbeálta, a m i t a má­

s z o l v e n s s e l történt eluáláskor k a p o t t eredmények

bizonyíta­

nak .

Az inszolubilizált

antigének

fehérjék megőrizték

az

pességüket, a m i t a z i n d i r e k t fuziós-precipitációs Az

ban.

alacsonyabb

kapott

eredmények

az e r e d e t i

titerben

Ez a titercsökkenés a z o n b a n

készségének

adtak

ellenanyag­ kötődési ké­

nem

ellenanyag-preparátumban

bizonyítanak.

vérsavókhoz

viszonyitva

reakciót az IHA-próbáaz e l l e n a n y a g o k

csökkenésére, hanem a p r o c e d u r a

tényleges ellenanyagfehérje-veszteségre g y a n i s az

kinyert

hemagglutinációs és az agargéldif-

próbával

ellenanyag-preparátumok

rendszerint

segitségével

antigénhez való s p e c i f i k u s

alatt

kötődési

bekövetkezett

vezethető v i s s z a . Ha u-

a fehérjék

koncentrációja

kb. azonos v o l t val, a

akkor

az

eredeti

vérsavó

a HA-titerek i s

HA-próbában még

teljes

hemagglutinációt

s e b b ellenanyagfehérje-mennyiség lenanyag-készitmények

ellenanyagfehérje-tartalmá-

közel egyformák v o l t a k .

az

eredményező

eredeti

esetében egyaránt

Másfelől legki­

vérsavók és a z e l -

azonos

nagyságrendbe

tartozót t •

Az e l l e n a n y a g o k

izolálásához felhasznált

k o m p l e x antigenitásu:

a géldiffuziós a n a l i z i s s z e r i n t

három eltérő antigénkomponensből á l l . ós-precipitációs kat

a

s a v b a n oldódó

precipitációs v o n a l a k a t alakították

megtartották nensekkel,

utal,

amelyekkel

k i ,

mint

h o g y a tisztán előállított

reagálóképességüket

mindazokkal

az e r e d e t i

legalább

M i v e l az agargéldiffuzi­

próbában az ellenanyag-preparátumok

vérsavók, ez a r r a

frakció

az

ugyanazo­ a

teljes

ellenanyagok antigénkompo­

vérsavók e l l e n a n y a g a i reagál­

tak.

Számos i r o d a l m i sphaerák anyagok

adat

utal arra,

támadásának termelődnek

kitett

/4,14,38,43,44,72/.

fertőzött n y u l a k vérsavójával savót kellő a d a g b a n jezett

hogy a Taenia

nyulakban

passzive

Ezek

szimultán a l k a l m a z z u k

inváziójával s z e m b e n .

rábbi vizsgálatok i s / 5 2 / . ellenanyagok

az e l l e n a n y a g o k

a fertőzéssel,

bizonyítékokra

zatban

közölt vizsgálatok

jából

az e l l e n a n y a g o k

humorális

antigéneket a z o n b a n

miailag

tisztán és akár

támaszkodhatunk.

szerint

viszonylag

ma még feltevé­

Mivel e dolgo­

a fertőzött állatok vérsavó­ egyszerű módszerrel immunké-

n a g y o b b mennyiségben i s

ez jó lehetőséget nyújt a r r a ,

kife­

fogékony állatokban

nem ismerjük, és természetükre vonatkozóan c s a k inkább s e k r e , mintsem

a

E z t erősítették meg saját k o ­

A p r o t e k t i v tulajdonságú

termelődését indukáló

ellen­

átvihetők, és ha a vér­

p a s s z i v védelmet képesek kialakítani

e parazita

pisiformis-onco-

p r o t e k t i v hatású

1

izolálhatóak , védő

hatását

p a s s z i v immunizálási kísérletekben más serumfaktoroktól

h o g y az e l l e n a n y a g o k

függet­

lenül vizsgálhassuk, s i g y talán közelebb j u t h a t u n k tektiv

ellenanyagok

termelődéséért

tigének megismeréséhez i s .

végső s o r o n

majd a p r o ­

felelős féregan­

össze foglalás

Taenia

i

pisiformis-petékkel

savójából

mesterségesen

sikerült immunkémiailag

az i n d i r e k t

formában

amely a

fertőzőképes

s a v b a n oldódó frakciójában

olyan

vér­

előállitani

hemagglutinációs és géldiffuziós-precipitációs

bával kimutatható e l l e n a n y a g o k a t gével,

fertőzött n y u l a k

tiszta

pró­

i m m u n a d s z o r b e n s segitsé­

cysticercusok

nyers

lévő antigéneknek

kivonatának

glutáraldehiddel

végzett inszolubilizálásával készült. Az e l l e n a n y a g o k vérsavójából lett

zöme

IgG-globulin.

Az

előállitott ellenanyag-preparátumok

I g M - g l o b u l i n t i s t a r t a l m a z t a k . Más

livalens

anti-nyul

forézises,

ujrafertőzött

állatok

azonban e m e l ­

serumkomponenseket po-

immunsavó segitségével sem a z i m m u n e l e k t r o -

sem a z immundiffuziós a n a l i z i s e k során nem

lehetett

kimutatni.

A különböző preparálások során a z ellenanyag-kinyerés a z e r e d e ­ ti

vérsavók

gadozott.

ellenanyagfehérje-tartalmának

54-96 %-a között i n ­

Az agargéldiffuziós-precipitációs és a z i n d i r e k t

agglutinációs

próbával végzett

a vérsavókból tisztán

kinyert

hem­

vizsgálatok a z t mutatták, h o g y ellenanyagok

megtartották a z a n ­

tigénekhez való s p e c i f i k u s kötődési képességüket.

NÉMETH, I . : Studies on Humoral Antibodies in Experimental Infections of Rabbits with Cysticercus pisiformis (Bloch, 1780) I V . Isolation of Specific Antibodies Antibodies fusion bits

by i n d i r e c t test

immunoadsorbent

soluble

fraction

hemagglutination

were i s o l a t e d

experimentally infected with

a specific acid

detectable

precipitation

from

and g e l d i f ­

t h e serum o f

Taenia p i s i f o r m i s

prepared

of Cysticercus

eggs

rab­ using

by p o l y m e r i z a t i o n

of the

crude e x t r a c t w i t h

glutar-

aldehyde. Most i s o l a t e d dy

antibodies

preparations

from

sera

belonged

t o t h e IgG c l a s s , b u t a n t i b o ­

of r e i n f e c t e d rabbits contained

also

IgM

antibodies.

No o t h e r

various antibody munodiffusion rabbit

The

yield

o f thed i f f e r e n t

The i s o l a t e d

activity rect

using

a polyvalent

anti-

p r e p a r a t i o n s v a r i e d between

content

antibodies

of

retained

as shown b y a g a r g e l d i f f u s i o n

hemagglutination

the original their

serum

sam­

antigen

combining

precipitation

and i n d i ­

tests.

Köszönetnyilvá n i tá s. A szerző hálás köszönetét Ilona

i n the and i m ­

serum.

54 a n d 9 6 % o f t h e a n t i b o d y ple.

components were d e t e c t e d by i m m u n o e l e c t r o p h o r e t i c

a n a l y s i s i n agar g e l

immune

antibody

serum

preparations

laboratóriumi a s s z i s z t e n s n e k

fejezi

a vizsgálatok

k i HALASI

során

nyújtott

értékes t e c h n i k a i segítségéért.

Irodalom

1 . ALTEMEIER, W.A. studies se

- ROBBINS, 3.B. - SMITH, R.T.: Q u a n t i t a t i v e

of theimmunoglobulin

of therabbit

124.

t o a somatic

sequence i n t h e respon­ antigen. - 0.

Exp.Med.,

443. 1966.

2. ARMSTRONG, A.S. - SWORRD, O.P.: A n t i b o d y rimental

infections

with Listeria

responses i n expe­ m o n o c y t o g e n e s . - 3.

Immunol., 9 8 . 510. 1967. 3. AVRAMEAS, S. - TERNYNCK, T.: with

glutaraldehyde

and

The c r o s s - l i n k i n g

of i m m u n o a d s o r b e n t s. - Immunochemist r y , 4 . BACHMANN, P.A.:

6_. 5 3 . 1 9 5 9 .

Versuche z u r Immunisierung von

gegen C y s t i c e r c u s 5. BACKHAUSZ, R.:

of proteins

i t s use f o r t h e p r e p a r a t i o n

pisiformis.

Immunodiffusion

- Thesis.

und

Kaninchen

B e r l i n , 1964.

Immunoelektrophorese.

- A k a d . Kiadó, B u d a p e s t , 1 9 6 7 . 6. BAISDEN, L.A. - TROMBA, F.G.: worm

Separation

/Stephanurus dentatus/

barrier

antigens

o f swine by

kidney

zone and b y

e l e c t r o p h o r e s i s . - 3 . P a r a s i t . , 53_. 1 0 0 . 1 9 6 7 .

7. BAUER, D.C. - STAVITSKY, A.B.: forms o f early

antibody

response

cellular

On t h e d i f f e r e n t

synthesized

to a single

by

molecular

rabbits

injection

during the

o f p r o t e i n and

a n t i g e n s . - P r o c , N a t . A c a d . S e i . , 4J7. 1 6 6 7 . ,

1961. 8. BAUER, D.C. - MATHIES, M.3. - STAVITSKY, A.B.: s y n t h e s i s o f gamma-1 m a c r o g l o b u l i n lin to

a n d gamma-2 g l o b u ­

a n t i b o d i e s d u r i n g p r i m a r y and secondary proteins,

salmonella

Med. , 1 1 7 . 8 8 9 . 9. BENEDICT, A.A.: for

Sequence o f

antigens

responses

and phage. - 3, Exp.

1963.

Sensitivity

of

passive

haemagglutination

a s s a y o f 7S a n d 19S a n t i b o d i e s i n p r i m a r y

anti-bovine

serum

albumin

sera. -

Nature,

rabbit-

206. 1368.

1965. 10.

BENEDICT, A.A. - BROWN, R.3. - AYENGAR, R.: perties

of

monstrated

antibody

to

bovine

Physical

serum a l b u m i n

by h a e m a g g l u t i n a t i o n .

pro­

as d e ­

- 3 . E x p . Med., 1 1 5 .

195. 1 9 6 2 . 11.

BIGUET, 3. - TRAN VAN KY, P. - MOSCHETTO, Y.

C o n t r i b u t i o n a l'étude de l a s t r u c t u r e

genique

des l a r v e s

preeipitines 11. 12.

- GNAMEY-KOF-

FY, D, :

de T r i c h i n e l l a

spiralis

expérimentales du l a p i n .

anti-

e t des

- Wiad.Parazyt.

299. 1965.

BOREL, Y. - FAUCONNET, M. - MIESCHER, P. A.: anamnestic

response i n r a b b i t s .

7S v e r s u s

- Proc.Soc.

19S

Exp.Biol.

Med., 1 1 7 . 6 0 3 . 1 9 6 4 . 13.

CAMPBELL, D. H.: saccharide minths.

14.

antibodies

The s p e c i f i c against

C. p i s i f o r m i s

ficially

from

specificity

some common

of

a poly­

parasitic

hel­

- 3, P a r a s i t . , 2 3 . 3 4 8 . 1 9 3 7 .

CAMPBELL, D, H.:

and

The i m m u n o l o g i c a l fraction

absorbability

Cysticercus

i n rabbits

immunized animals.

from - J.

of

protective

crassicollis infected Immunol.,

i n rat

and a r t i ­ 35_. 2 0 5 .

1938. 1 5 . CARTER, B.G. - HARRIS, T.N.: N o n - p r e c i p i t a t i n g r a b b i t body t o h a p t e n : nology,

Purification

12. 75. 1967.

and p r o p e r t i e s .

-

anti­ Immu­

16.

CEBRA, 3 . 0. - ROBBINS, 3. B.:

17.

CHASE, M.W.

rabbit

in

Gamma A - i m m u n o g l o b u l i n

from

c o l o s t r u m . - 3. I m m u n o l . , 9 7 . 1 2 . 1 9 6 6 , - WILLIAMS, C.A.: P r o t e i n a n a l y s i s . I n : M e t h o d s

Immunology and I m m u n o c h e m i s t r y . V o l . I I ,

Williams

a n d M. W. C h a s e , A c a d . P r e s s ,

E d , C.A.

New Y o r k / L o n ­

don, 1 9 6 8 . 18.

COHEN, S. - PORTER, R.R.: S t r u c t u r e a n d b i o l o g i c a l

19.

COHEN, S. - M I L S T E I N , C.:

of

immunoglobulins.

ties 20.

-

Adv. Immunol., 4, 287. 1964.

S t r u c t u r e and b i o l o g i c a l

o f immunoglobulins.

CRAIG, L . C.:

Dialysis

Immunology and Williams

proper­

- A d v . I m m u n o l . , 7. 1 . 1 9 6 7 .

and u l t r a f i l t r a t i o n .

Immunochemistry.

a n d M.W.

activity

I n : Methods i n

Vol.I I . ,

Chase, Acad. Press,

E d . C. A.

New Y o r k / L o n d o n

1968. 21.

CRANDALL, R.B. - CEBRA, 3 . 3 . - CRANDALL, C.A.: The r e l a t i v e proportions rabbit

o f I g G - , I g A - and I g M - c o n t a i n i n g

tissues during experimental

cells i n

trichinosis.

- Im­

CRANDALL, R.B. - MOORE, L . L . A . , 3 r . : The m a c r o g l o b u l i n

anti­

m u n o l o g y , _12. 1 4 7 . 1 9 6 7 . 22.

body r e s p o n s e i n e x p e r i m e n t a l Dis. 23.

118. 377. 1968.

from

sera

granulosus.

serum

125 600. 1957. 1

Aminosavak, p e p t i d e k ,

fehérjék.

Budapest. 1963.

ESANDI, M.V.P.: I s o l a t i o n es

26.

- Science,

DÉVÉNYI, T. - GERGELY, 3 . : - Medicina,

25.

- 3. I n f .

DEUTSCH, H. F. - MORTON, 3 . I . : D i s s o c i a t i o n o f human macroglobulins.

24.

trichinosis.

and c h a r a c t e r i z a t i o n

o f humans

infected

with

of antibodi­ Echinococcus

- 3. P a r a s i t . , 56_. 3 3 6 . 1 9 7 0 .

FAHEY, 3 . L . - McKELVEY, E.M.: Q u a n t i t a t i v e d e t e r m i n a t i o n o f serum I m m u n g l o b u l i n s

i n antibody-agar

plates.

-

3.

Immunol., 9 4 . 8 4 . 1965. 27.

28.

FREEMAN, M.3. - STAVITSKY, A.B.: tic

study

the

primary

GEYER, E,: sis

29.

of

rabbit

response.

Pathologie

Radio-immunoelectrophore-

anti-protein -

antibodies

u n d Immunität b e i d e r S t r o n g y l o i d i a ­

d e s K a n i n c h e n s , - Z. P a r a s i t e n k d e ,

25_, 2 4 0 , 1 9 6 5 ,

GREENBURY, C.L. - MOORE, D.H. - NUNN, L.A.C.: 7S a n d 19S

during

3. I m m u n o l . , 95_. 9 8 1 , 1 9 6 5 ,

c o m p o n e n t s o f immune r a b b i t

Reaction

of

antisera with

human G r o u p A a n d AB* r e d c e l l s .

- I m m u n o l o g y , 6. 4 1 2 .

1963. 30.

GREY, H.M.: S t u d i e s on c h a n g e s i n t h e q u a l i t y vine

serum

albumin

antibody

following

o f r a b b i t bo­

immunization. -

I m m u n o l o g y , 7. 8 2 . 1 9 6 4 . 31.

GUNDLACH, 3 . L . : A s t u d y o f t h e phenomena o f i m m u n i t y course

o f experimental

fasciolosis

i n the

i n rabbits.

- Acta

P a r a s i t . P o l . , 19. 285. 1971. 32.

HILLYER, G.V. - FRICK, L.P.:

Immunoprecipitins i n Schisto­

soma m a n s o n i i n f e c t i o n s . Parasit., 33.

I . Mouse i n f e c t i o n s .

- Exp.

20. 3 2 1 . 1967.

HILLYER, G.V. - H I T C H I E , L . b . : I m m u n o p r e c i p i t i n s i n S c h i s ­ tosoma mansoni i n f e c t i o n s .

I I .

Cercopithecus

a n d Macaca m u l a t t a m o n k e y s . - E x p . P a r a s i t . ,

sabaeus 20. 326.

1967. 34.

HILLYER, G.V. - FRICK, L.P.:

Immunoprecipitins i nSchisto­

soma m a n s o n i i n f e c t i o n s .

I I I .

Cercopithecus

sabaeus

a n d Macaca m u l a t t a m o n k e y s e x p o s e d t o i r r a d i a t e d c e r cariae 29. 35.

and s u b s e q u e n t l y

challenged. -

Exp. P a r a s i t . ,

53. 1971.

HILLYER, G.V.: I m m u n o p r e c i p i t i n s fections.

i n Schistosoma mansoni i n ­

I V , Human i n f e c t i o n s .

-

Exp. P a r a s i t . , 25.

376. 1969. 36.

HOCKER, N.D. - BAUER, D.C.: hesized flexa.

37.

The n a t u r e o f a n t i b o d i e s s y n t ­

d u r i n g t h e immune

response

to Leptospira b i -

- 3. Immunol., 9 5 . 8 8 7 . 1 9 6 5 .

KERR, K, B.: I m m u n i t y

i n rabbits

a g a i n s t one o f i t s C e s t o d e

parasite, Cysticercus pisiformis.

-

3, P a r a s i t . , 2 0 ,

328. 1934, / S u p p l . / 38.

KERR, K. B.: I m m u n i t y cus

39.

pisiformis,

KÜHN, 0.:

Methode

Logaritmen. 40.

LANCEFIELD,

derTiterberechnung

spiralis:

mit Hilfe

duadischer

I g M and I g G and i n f e c t i -

f o r mice. - Exp. P a r a s i t . , R. C.:

parasite, Cysticer­

- Z. I m m u n f , E x p . T h e r . , 1 1 6 . 4 2 9 . 1 9 5 9 .

KWAN, C. K.: T r i c h i n e l l a vity

41.

against a cestode

- Am. 3. H y g . , 22, 1 6 9 . 1 9 3 5 .

30. 82. 1971.

The a n t i g e n i c c o m p l e x o f

haemolyticus . I . A-l-type-speci fic

Streptococcus

substance

i n ex-

tract

o f S t r e p t o c o c c u s h a e m o l y t i c u s • - 3 .Exp.Med.,47.

91. 1928. 42.

LE3KINA, E.Sz. - BALLAD, N.E.: I z u c s e n i j e nija

i tipov

antitel

u teljat,

zsennüh c i s z t i c e r k a m i zit. 43.

Parazit.

Bol.,

pisiformis

nakople-

iszkusztvenno

zara-

C y s t i c e r c u s b o v i s . - Med. P a r a 39. 429. 1970.

LEONARD, A.B.: The a c c e l e r a t e d cus

dinamiki

tissue

response

i n p a s s i v e l y immunized

to Cysticer-

rabbits.

- Am.

3. H y g . , 3 2 . 1 1 7 . 1 9 4 0 . 44.

LEONARD, A.B. - LEONARD, A.E.: resistance formis.

45.

of rabbits

- 3. P a r a s i t . ,

LIEBMANN, H. - BOCH, 3.: si formis-befallenen

The i n t e s t i n a l

phase o f t h e

to the larvae o f

Taenia

pisi-

27. 375. 1941.

U n t e r s u c h u n g e n an C y s t i c e r c u s Kaninchen.

-

B e r l . Münch.

pi-

Tier-

àrztl. W s c h r . , 7 3 . 1 2 3 . 1 9 6 0 . 46.

LINDQVTST,

K. - BAUER, D. C.: P r e c i p i t i n a c t i v i t y

macroglobulin

antibody.

-

of rabbit

I m m u n o c h e m i s t r y , 3. 3 7 3 . ,

1966. 47.

LUPASCO, G. - HACIG, A. - SOLOMON, P. - IANCO, L . : ches s u r l a

constitution

e t l a spécificité

gènes de T r i c h i n e l l a s p i r a l i s . Exp. 48.

Microbiol.,

MAUSS, E.A.: The serum /Trichinella 3. H y g .

49.

f

fraction with

spiralis/

which

anti-trichinella

antibody i sassociated,

specific

- 3. C l i n .

studies

of

febrile

a n t i b o d y evoked by Invest.,

eksztraktov

bacterial

and l e v e l s endotoxins.

44. 920. 1965.

i z szkolekszov

i

zsidkoszti,

germinativnüh

larvocisztü e h i n o k o k k a . - Med. P a r a z i t .

51.

LANDY, M.:

tolerance

MUNT3AN, N.A.: Antigennüj s z o s z t a v g i d a t i d o z n o j

40.

- /Am.

34. 73. 1941.

Quantitative

50.

- A r c h . Roumain. P a t h .

23. 877. 1964.

MULHOLLAND, 3.H. - WOLF, S.M. - 3ACKS0N, A . L . -

of

Recher-

des a n t i -

obolocsek

Parazit. Bol.

528. 1 9 7 1 .

NÉMETH, I . : I m m u n o l o g i c a l s t u d y o f r a b b i t

cysticercosis.

The

suitability

and

i n d i r e c t h a e m a g g l u t i n a t i o n t e s t s . - Z. Immun. A l -

lergieforsch.,

o f agar g e l d i f f u s i o n

I .

128. 468. 1965.

precipitation

52.

NÉMETH, I . :

Immunological

study of rabbit

cysticercosis.il.

to Cysticercus

pisiformis/Bloch,

Transfer o f immunity 1780/ w i t h lymphoid

parenterally

cells.

- Acta

a d m i n i s t e r e d immune

serum o r

V e t . Acad. Sei.Hung., 20. 69.

1970. 53.

NÉMETH, I . :

Immunological

III.The tion

precipitin

with

study

of rabbit

response t o

cysticercosis.

experimental

C y s t i c e r c u s pisiformis /Bloch,

infec­

1780/. - Ac­

t a V e t . A c a d . S e i . Hung., 2 1 . 3 1 9 . 1 9 7 1 . 54.

NÉMETH, I . : ban

A humorális e l l e n a n y a g o k kísérletileg

/Bloch,

létesített

l780/-fertőzöttség

tanulmányozása

nyulak­

Cysticercus

pisiformis

esetén. I . A

precipitin-

válasz általános jellemzése. - P a r a s i t .

H u n g . , 4. 2 3 -

46. 1 9 7 1 . 55.

NÉMETH, I . :

Immunological

- Acta 56.

NÉMETH, I . :

Immunological

- Acta 57.

study of rabbit

cysticercosis IV.

V e t . A c a d . S e i . Hung., /közlés

study of rabbit c y s t i c e r c o s i s .

V e t . A c a d . S e i . Hung, / k ö z l é s

ONOUE, K. - Y A G I , Y„ - PRESSMAN, D.: body p r o t e i n s

alatt/

i n rabbit

V.

alatt/

Multiplicity

of anti­

anti-p-azobenzenearsenate

se­

r a . - 3. I m m u n o l . , 92. 1 7 3 . 1 9 6 4 . 58.

ONOUE, K, - T A N I G A K I , N. - Y A G I , Y. - PRESSMAN, D.: I g M a n d IgG

anti-hapten antibody: Hemolitic,

and p r e c i p i t a t i n g a c t i v i t y .

hemagglutinating

- Proc.Soc.Exp.Biol.Med.,

120. 340. 1965. 59.

ONOUE, K. - Y A G I , Y. - PRESSMAN, D.: IgA

Isolation

of

a n t i - p r o t e i n a n t i b o d y and d e m o n s t r a t i o n

sensitizing

activity

i n homologous

rabbit

of skin-

s k i n . - 3.Exp.Med.

123. 173. 1 9 6 6 . 60.

OSLER, A. G. - MULLIGAN, 3 . 3. 3 r . - RODRIQUEZ, E.: estimates of rabbit

a n t i h u m a n serum

antigen-binding

and

precipitin

hemagglutinating

activities

albumin

analysis:

Weight

b a s e d on Specific

o f 7S a n d 19S c o m p o n e n t s .

- 3. I m m u n o l . , 96_. 3 3 4 . 1 9 6 6 . 61.

PIKE.R.M.: A n t i b o d y - Bact.

62.

heterogenety

Rev., 3 1 .

and s e r o l o g i c a l

reactions.

157. 1967.

P I K E , R.M. - SCHULZE, M.L. - CHANDLER, C H . :

Agglutinating

and

precipitating

typhosa ged 63.

B. - KENNY, K. - SUTER, E. :

biological

activities

anti-Salmonella 122. 64.

of rabbit

prolon­

The i s o l a t i o n

and

typhimurium

a n t i b o d i e s . - 3.Exp,Med.,

385. 1 9 6 5 .

Homologous

fluorescent with

during

o f r a b b i t gamma-M a n d gamma-G-

SADUN, E.H. - DUXBURY, R.E. - GORE, R.W. 3.:

anti-Salmonella

- 3 . B a c t . , 92!. 8 8 0 . 1 9 6 6 .

immunization.

ROBBINS, 3 .

capacity

gamma-G a n d gamma-M a n t i b o d i e s

passive

antibody

reactions

a n a p h y l a c t i c and

i n rabbits

uniformis. - 3.

Dirofilaria

- STECHSCHULTE, D.

cutaneous

infected

I n f . Dis.,

117. 317.

1967. 65.

SADUN, E.H. - MOTA, I . - GORE, R.W.: cytotropic infected

Demonstration

reaginlike antibodies

with Trichinella

i n mice

spiralis.

o f homo-

and r a b b i t s

- O.Parasit., 54.

814. 1968. 66.

SAMLOFF, I . M. - BARNETT, E.V.; H e t e r o g e n e c i t y of

appearance o f

factor. 67.

- 3.

rabbit antibodies

and sequence

t o hog

intrinsic

I m m u n o l . , 9_8. 5 5 8 . 1 9 6 7 ,

SANDBERG, A. L. - STOLLAR, B. D,: A 19S a n a m n e s t i c to

DNA-methylated bovine

serum a l b u m i n

response

complexes, -

I m m u n o l o g y , 11^, 5 4 7 . 1 9 6 6 . 68.

SCHONBERG, M. D. - STAVITSKY, A.B. - MOORE, R.D. - FREEMAN, M, 3 . :

Cellular sites

globulins

during

id-Freund's adjuvant. 69.

of synthesis

primary

response

- 3.

o f r a b b i t immuno­

to diphtheria

Exp.Med., 1 2 1 .

SHULMAN, S. - HUBLER, L. - WITEBSKY, E.: to

immunization

by d i f f e r e n t

toxo-

577. 1965.

Antibody

response

routes. - Science,

145.

815. 1 9 6 4 . 70.

SILVERMAN, P. H.: A t e c h n i q u e fect

for studying

o f serum on a c t i v a t e d t a e n i i d

- Nature,

hexacanth

embryos.

176. 598. 1955.

7 1 . SILVERMAN, P. H.: reactions

thei n v i t r o e f ­

S p e c i f i c and n o n - s p e c i f i c to

active

taeniid

i nvitro

hexacanth

serum

embryos. -

T r a n s . R. S o c . T r o p . Med. H y g . , 5 0 . 8. 1 9 5 6 . 72.

SIMA, I . : A T a e n i a és C y s t i c e r c u s tás.

pisiformis elleni

- Á o . L a p o k , 6 0 . 1-4. 1 9 3 7 .

immuni­

73.

S I N C L A I R , I . 3.: The r e l a t i o n s h i p b o d i e s and i m m u n i t y

between c i r c u l a t i n g

to helminthic infections.

anti­ - Adv.

P a r a s i t . , 8. 9 7 . 1 9 7 0 . 74.

STANWORTH, D. R, - PARDOE, D. I . :

of theimmunoglobulins.

of

Immunology /Ed.

Experimental

STELOS, P.:

Inf.

antigens. Dis.,

STELOS, P.; S a l t tal

I n ; Handbook

D.M. W e i r / ,

Blackwell

Oxford/Edinburgh, 1967.

Comparative

rious

76.

and b i o l o g i c a l

characteristics

Sei. Publ., 75.

Structural

study

o f rabbit

I . Hemolysins

102.

hemolysins

t o beef

t o va­

redc e l l s .

- 3.

103. 1 9 5 8 .

f r a c t i o n a t i o n . I n : Handbook o f

I m m u n o l o g y / E d . D^M. W e i r / , B l a c k w e l l

Experimen­ Sei.

Publ.,

Oxford/Edinburgh, 1967. 77.

SUL'C, R. S z . - ISZMAGILOVA, R. G.: I z u c s e n y i j e cseszkih

reakcij

ciszticerk loveka 78.

immunologi-

modeli

krolik-

p i z i f o r m n ü j . I n : Parazitü i parazitozü cse-

i z s i v o t n i i h , Kiev. 1965,

SVEHAG, S.E. - MANDEL, B : The p r o d u c t i o n

and p r o p e r t i e s o f

#

poliovirus Virology, 79.

na e k s z p e r i m e n t a l ' n o j

neutralizing

antibody

of rabbit

origin. -

18_. 5 0 8 . 1 9 6 2 .

SVEHAG, S.E. - MANDEL, B.: The f o r m a t i o n a n d p r o p e r t i e s poliovirus

neutralizing

antibody.

body f o r m a t i o n :

Differences

dose r e q u i r e m e n t

for induction.

of

I . 19S a n d 7S a n t i ­

i nkinetics

and

antigen

- 3.Exp.Med., 1 1 9 . 1 .

1964. 80.

SVEHAG, S.E. - MANDEL, B.: poliovirus

The f o r m a t i o n

neutralizing

antibody.II.

body f o r m a t i o n : D i f f e r e n c e s ment ty

for sustained

antibody:

lectrophoretic thesized 3. 32.

Exp.

-

mobility

by r a b b i t s Med., 1 1 9 .

and p r o p e r t i e s o f I I I .

require­

poliovirus

S e q u e n c i a l changes

o f 19S a n d 7S a n t i b o d i e s

after a single

virus

i n esyn­

infection. -

225. 1 9 6 4 .

TADA, T. - I S H I Z A K A , K.: A r t h u s bit

dose

3 . E x p . Med., 1 1 9 . 2 1 . 1 9 6 4 .

The f o r m a t i o n

neutralizing

19S a n d 7S a n t i ­

i n antigen

s y n t h e s i s , a n a m n e s i s and s e n s i t i v i ­

to X-irradiation.

8 1 . SVEHAG, S. E,:

and p r o p e r t i e s o f

gamma-M a n t i b o d y .

-

type

inflammation

3. I m m u n o l . , 96_.

with

rab­

112, 1966,

83.

- i nu'iMijfc, D.W.:

TALIAFERRO, W.H. corporation od.

84.

into

Absence o f amino a c i d i n ­

antibody during theinduction

peri­

- 3. I n f . D i s . , 9 7 . 8 8 . 1 9 5 5 .

TRAWINSKI, A,:

Über A n w e n d u n g

d e r Präcipitinreaktion

Nachweis d e r S c h w e i n z y s t i c e r k o s e .

- Z b l . Bakt.,

zum 136.

116. 1 9 3 6 . 85.

UHR, 3.W.

- F I N K E L S T E I N , M.S.: A n t i b o d y

mation and

W E I , M.M.

87.

and s l o w l y memory

Med., 1 1 7 . 4 5 7 .

t o bacteriophage

Molecular

WEIDANZ, W.P.

- I m m u n o l o g y , 12, 4 3 1 .

somatic

B i o l . Med., 1 1 6 . 8 3 2 . W I L L I A M S , 3. C :

89.

Ancylostome

thecanine

0 X 1 7 4 . - 3.

o f r a b b i t an­

response

t o hu­

1967.

- 3ACKS0N, A . L . - LANDY, M.:

the a n t i b o d y response o f r a b b i t s

of

forms

synthesized during theprimary

albumin.

enterobacterial

88.

f o r m a t i o n . I V . For­

sedimenting antibodies

1963.

- STAVITSKY, A.B.:

tibody man

rapidly

immunological

Exp. 86.

of

Some a s p e c t s o f

t o immunization

antigens.

with

- Proc.Soc. Exp.

1964. caninum: A n a l y s i s o f a n t i g e n s

hookworm. - E x p . P a r a s i t . , 2 8 . 226.1970.

W I L L I A M S , 3.F. - SOULSBY, E.3.L.: A n t i g e n i c a n a l y s i s o f d e ­ velopmental eggs,

stages

o f A s c a r i s suum. I . C o m p a r i s o n o f

l a r v a e and a d u l t s .

-

Exp. P a r a s i t . ,

27.

150.

1970. 90.

WRIGHT, G.G. - OLIVER-GONZALEZ, 3.: E l e c t r o p h o r e t i c on

antibodies to Trichinella

- 3. I n f . D i s . , 7 2 . 2 4 2 .

spiralis

studies

i n the

rabbit.

1943.

9 1 . Z V A I F L E R , N. 3 . - SADUN, E. H. - BECKER, E.L. - SCHOENBECHLER, M.3.: D e m o n s t r a t i o n antibody ni.

i n

rabbits

- Exp. P a r a s i t . ,

Érkezett: 1 9 7 2 . I I .

10.

o f a homologous a n a p h y l a c t i c

infected 20. 278.

with

Schistosoma

manso­

1967.

D r . NÉMETH

István

MTA Állategészségügyi

Kutató

Intézete B u d a p e s t , X I V . Hungária

krt.2l.