ISSN 2337-3776
UJI EFEKTIVITAS LARVASIDA EKSTRAK DAUN LEGUNDI (Vitex trifolia) TERHADAP LARVA Aedes aegypti Eka Cania B1), Endah Setyanimgrum2) Email :
[email protected] 1)
Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Lampung, 2)Staf Pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Lampung ABSTRAK
Latar belakang : Upaya pengendalian demam berdarah dengue (DBD) yang populer dilakukan secara kimiawi (insektisida sintetik) dapat mengakibatkan keracunan pada manusia sehingga perlu insektisida botanis yang lebih aman seperti senyawa yang berasal dari tumbuhan legundi. Kandungan fitokimia ekstrak daun legundi meliputi saponin, flavonoid, dan alkaloid, dapat berperan sebagai racun perut serta racun pernapasan sehingga mengakibatkan kematian larva. Penelitian ini bertujuan untuk menyelidiki efektivitas larvasida ekstrak daun legundi (Vitex trifolia L.) terhadap larva Aedes aegypti instar III. Penelitian dilakukan di Laboratorium Zoologi, Jurusan Biologi dan Laboratorium Kimia, Jurusan Kimia FMIPA Universitas Lampung pada bulan November sampai dengan Desember 2012. Metode : Penelitian menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 6 kelompok perlakuan yang tiap kelompok berisi 25 larva Aedes aegypti instar III dan 4 kali pengulangan yaitu konsentrasi ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) sebesar 0%, 0,25%, 0,5%, 0,75% dan 1% dengan abate 1% sebagai kontrol positif. Data yang didapatkan lalu diuji menggunakan uji Kruskall-Wallis dan uji post hoc MannWhitney untuk mengetahui adanya perbedaan pada tiap konsentrasi. Hasil :Pada konsentrasi 1% kematian larva uji mencapai 95% di menit ke 4320. Didapatkan pada uji Mann-Whitney efektifitas ekstrak daun legundi 1% dengan abate tidak memiliki perbedaan (p>0,05). Nilai LC50 menunjukkan penurunan nilai konsentrasi seiring peningkatan waktu (menit 480-2880) yaitu 0,837% sampai dengan 0,346%. Sedangkan nilai LT50 menunjukkan penurunan waktu yang dibutuhkan seiring peningkatan konsentrasi (0,5%-1%) yaitu dari 2233,197 menit sampai 321,181 menit. Hasil tersebut menunjukkan bahwa ekstrak daun legundi mempunyai efektivitas larvasida terhadap larva Aedes aegypti. Kata kunci : Vitex trifolia, ekstrak daun legundi, Aedes aegypti, larvasida
Larvacide Effectiveness Test of the Legundi’s Leaf (Vitex trifolia) Extract for Larvae of Aedes aegypti Eka Cania B 1), Endah Setyanimgrum 2) 1)
Medical Faculty Student of Lampung University, 2) Medical Faculty Lecturer of Lampung University ABSTRACT
Backgroud : Popular control efforts of Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) that is conducted with chemical control (synthetic insecticides) can cause poisoning in humans so we need safer botanical insecticides such as compounds derived from plants legundi(Vitex trifolia). Phytochemical content of legundi’s leaf extract include saponins, flavonoids, and alkaloids that can act as stomach poisons also fumigans that resulting in the death of the larvae. This study aims to investigate the larvacidal effectiveness of legundi’s leaf extract (Vitex trifolia L.) against third instar larvae of Aedes aegypti. The research was conducted at the Laboratory of Zoology, Department of Biology and Chemistry Laboratory, Department of Chemistry, FMIPA Lampung University in
52 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776 November to December 2012. Methods :This research uses Completely Randomized Design (CRD) with 6 treatment groups, each group containing 25- third instar larvae of Aedes aegypti and 4 times repetitions and then the concentrations of legundi’s leaf extract (Vitex trifolia) are 0%, 0.25%, 0 , 5%, 0.75% and 1% also abate 1% as a positive control. Data were obtained and tested using Kruskall-Wallis test and post hoc test of MannWhitney to find out the differences at each concentration. Result : At concentrations of 1%, the test larvae mortality reached 95% in 4320 minutes. Found in Mann-Whitney test, effectiveness of legundi leaf extract 1% to abate no differences (p> 0.05). LC50 values shows a decreasing in concentration with increasing time value (480-2880 minutes) is 0.837% to 0.346%. While the LT50 values shows increasing in the time required concentration (0.5% -1%), from 2233.197 to 321.181 minutes. The results showed that the legundi’s leaf extract has larvacidal effectiveness for larvae of Aedes aegypti. Keywords: Vitex trifolia, legundi’s leaf extract, Aedes aegypti, larvacide
I.
PENDAHULUAN Demam Berdarah Dengue (DBD) merupakan penyakit infeksi yang umum di daerah
tropis termasuk Bandar Lampung. Menurut Dinas Kesehatan Provinsi Lampung, angka kejadian DBD di Bandar Lampung selalu tinggi dalam tiga tahun terakhir (763 kasus pada 2010 ; 413 kasus pada 2011 dan 1111 kasus pada 2012) menjadikannya sebagai daerah endemis DBD. Pada DBD terjadi demam tinggi dan bisa disertai dengan perdarahan dan syok dan dapat berakibat kematian sehingga perlu dilakukan pencegahan. Program pencegahan dan pemberantasan DBD belum berhasil menurunkan angka kesakitan DBD cenderung meningkat dengan penyebaran penyakit semakin luas.
Pengendalian kimiawi menggunakan
insektisida/larvasida sintetik terbukti dapat mengakibatkan keracunan pada manusia, polusi lingkungan bahkan resistensi serangga target sehingga perlu insektisida/larvasida yang lebih aman dengan insektisida/larvasida botanis yang dihasilkan oleh tanaman. Tanaman legundi dapat menjadi alternatif larvasida. Legundi memiliki senyawa bioaktif seperti saponin, flavonoid, alkaloid dan miyak atsiri yang dapat membasmi jentik nyamuk dengan cara kerja mirip bubuk Abate (Syamsuhidayat dan Hutapea, 1991). Pada beberapa penelitian yang telah dilakukan, saponin dan alkaloid memiliki cara kerja sebagai racun perut dan menghambat kerja enzim kolinesterase pada larva sedangkan flavonoid dan minyak atsiri berperan sebagai racun pernapasan sehingga menyebabkan kematian larva. Berdasarkan latar belakang tersebut, maka rumusan masalah dalam penelitian ini yaitu: Apakah ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) memiliki efektivitas larvasida terhadap larva Aedes aegypti instar III?
53 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
II. METODE PENELITIAN Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah eksperimental dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan perlakuan yang terdiri dari 6 konsentrasi (0% ; 0,25% ; 0,5% ; 0,75% ; 1% ; dan abate 1%) dengan 4 kali pengulangan. Penelitian dilaksanakan di dua tempat berbeda, yaitu di Laboratorium Kimia Organik Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung untuk pembuatan ekstrak dan Laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung untuk uji efektivitas, pada bulan Desember 2012. Populasi yang digunakan adalah larva instar III Aedes aegypti yang diperoleh dari rearing telur Aedes aegypti dari Loka Litbang P2B2 Ciamis. Berdasarkan acuan WHO tahun 2005, sampel yang digunakan adalah 25 ekor larva per ulangan, dengan banyaknya pengulangan 4 kali, dengan 5 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol positif (Abate 1%), maka pada penelitian ini membutuhkan total larva sebanyak 600 larva. Pembuatan larutan uji yang berupa ekstrak ini menggunakan daun legundi (Vitex trifolia) serta pelarut dalam pembuatan larutan uji ini berupa etanol 96% lalu ekstraksi dengan cara maserasi sampai mendapatkan konsentrasi 100%. Kemudian ekstrak daun legundi ini diencerkan dengan mengguanakan aquades sehingga mendapatkan konsentrasi ekstrak sebesar 0%, 0,25%, 0,5%, 0,75% dan 1% dalam volume 200 ml.. Telur Aedes aegypti diletakkan di dalam nampan plastik yang berisi air untuk pemeliharaan larva. Telur akan menetas menjadi larva dalam waktu 1-2 hari. Larva akan berkembang dari stadium I sampai stadium III selama 3-5 hari. Dalam masa perkembangannya larva diberi makan berupa pelet ikan. Pada saat larva sudah mencapai instar III, larva tersebut dipindahkan ke dalam gelas plastik yang berisi ekstrak daun legundi dengan berbagai konsentrasi dan abate 1% dengan menggunakan pipet larva. Kemudian dilakukan uji efektivitas untuk menentukan dosis efektif, LC50 dan LT50. Untuk menghitung data yang diperoleh dari penelitian ini menggunakan analisis One Way Anova atau Kruskal-Wallis. Bila pada uji One Way Anova atau uji Kruskal-Wallis diperoleh hasil yang bermakna, maka setelah itu dilakukan analisis post-hoc untuk mengetahui kelompok mana yang bermakna. Analisis post-hoc untuk mengetahui One Way Anova adalah Bonferroni sedangkan untuk uji Kruskal-Wallis adalah Mann-Whitney. Untuk LC50 dan LT50 menggunakan uji probit.
54 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
III. HASIL DAN PEMBAHASAN Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan didapatkan persentase rerata kematian nyamuk Aedes aegypti instar III seperti yang terlihat pada Tabel 1. Tabel 1. Persentase rata-rata kematian larva Aedes aegypti pada berbagai konsentrasi ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) dalam 4320 Menit (72 Jam). Konsentrasi (%) 5
Persentase Rata-rata Kematian Larva (%) pada menit ke10 20 40 60 120 240 480 1440 2880 4320
0 (kontrol -) 0,25
0 0
0 0
0 0
0 0
0 0
0 1
0 1
0 1
0 1
0 12
0 59
0,5 0,75 1 Abate 1% (kontrol +)
0 0 0 0
1 0 0 0
1 0 0 0
1 0 0 2
1 0 6 7
4 6 42 93
18 19 52 97
28 30 58 100
33 49 83 100
55 86 94 100
65 90 95 100
Data yang telah diperoleh dari hasil penelitian dihitung menggunakan analisis statistik untuk mengetahui adanya perbedaan pengaruh dari masing-masing konsentrasi. Analisis pertama yang dilakukan ialah menghitung distribusi data dari jumlah larva uji yang mati. Hasil yang diperoleh berupa nilai p = 0,036 (p < 0,05) yang berarti bahwa distribusi data tidak normal. Hasil tersebut menyebabkan tidak dapat dilakukannya uji One way Anova karena tidak terpenuhinya syarat uji parametrik yaitu distribusi data yang normal dan varian yang sama. Selanjutnya sebagai alternatif digunakan uji Kruskal-Wallis, dari uji hipotesis ini diketahui nilai p = 0,001 , oleh karena nilai p < 0,05 maka itu berarti terdapat perbedaan bermakna jumlah larva yang mati antar dua konsentrasi. Lalu dilanjutkan uji post-hoc MannWhitney untuk mengetahui konsentrasi mana yang paling bermakna dalam menyebabkan kematian larva (p < 0,05). Data dari hasil uji post-hoc Man-Whitney disajikan dalam Tabel 2 berikut ini: Tabel 2. Uji Statistik Perbandingan Antar Kelompok (Analisis Post-hoc Mann-Whitney). (% ) 0 0,25 0 0,25 0,013* 0,013* 0,237 0,5 0,75 0,013* 0,019* 0,013* 0,019* 1 Abate 0,008* 0,013* (*) beda nyata pada taraf 5% (0.05).
0,5
0,75
1
Abate 1%
0,019* 0,019* 0,013*
0,225 0,046*
0,131
-
55 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
Lethal concentration 50 merupakan konsentrasi yang mampu membunuh 50% dari total jumlah larva uji. Berdasarkan penelitian yang dilakukan, didapatkan nilai LC50 yang didapatkan dari analisis Probit: Tabel 3. Nilai LC50 larva Aedes aegypti pada berbagai waktu pengamatan No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Waktu (menit) 5 10 20 40 60 120 240 480 1440 2880 4320
Nilai LC50 (%) 3,325 1,226 1,025 0,837 0,600 0,346 0,000
Pada tabel 3 didapatkan nilai LC50 dari menit awal hingga menit akhir mengalami penurunan nilai. Hal ini juga dapat dilihat pada grafik berikut:
Konsentrasi (%)
3 ,5 3 LC50 (% )
2 ,5 2
K o n se n tr asi 1%
1 ,5 1 0 ,5 0 5
10
20
40
60
120
240
480 1440 2880 4320
Waktu (menit)
Grafik 1. Nilai LC50 dari menit ke-60 sampai menit ke-4320. Lethal Time 50 merupakan waktu yang dibutuhkan untuk membunuh 50% larva uji pada konsentrasi tertentu. LT50 dihitung dengan menggunakan analisis probit dengan hasil:
56 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
Tabel 4. Nilai LT50 larva Aedes aegypti pada berbagai konsentrasi No. 1 2 3 4
Konsentrasi (%) 0,25 0,5 0,75 1
Nilai LT50 (menit) 5745,63 2233,197 965,781 321,181
Nilai LT50 yang didapatkan semakin menurun pada setiap konsentrasi yang diberikan semakin tinggi, seperti yang terlihat pada Grafik berikut:
5000
Waktu (menit)
4500 4000 3500 3000
L T 5 0 ( m e n it)
2500 2000
M e n it k e - 4 3 2 0
1500 1000 500 0 0 ,2 5 %
0 ,5 0 %
0 ,7 5 %
1%
Konsentrasi (%)
Grafik 2. Nilai LT50 pada tiap konsentrasi. Dalam penelitian ini digunakan berbagai konsentrasi dari ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) yang telah diuji pada masing-masing kelompok larva. Kematian larva uji bertambah seiring dengan bertambahnya konsentrasi dan waktu. Hal ini membuktikan bahwa semakin tinggi konsentrasi dan semakin lama pajanan waktu maka semakin tinggi juga kematian larva sesuai dengan teori menurut Hoedojo dan Zulhasril (2004) bahwa khasiat insektisida untuk membunuh serangga sangat bergantung pada bentuk, cara masuk ke dalam tubuh serangga, macam bahan kimia, konsentrasi dan jumlah (dosis) insektisida. Pada konsentrasi 1% dari ekstrak daun legundi didapatkan 95% kematian pada larva uji di menit ke-4320, jumlah yang paling mendekati kematian larva pada kelompok abate 1% dengan besar kematian 100%. Menurut Komisi Pestisida (1995) penggunaan larvasida dikatakan efektif apabila dapat mematikan 90-100% larva uji. Selain itu menurut WHO
57 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
(2005) konsentrasi larvasida dianggap efektif apabila dapat menyebabkan kematian larva uji antara 10-95% yang nantinya digunakan untuk mencari nilai lethal concentration. Pada uji Post hoc menggunakan Mann- Whitney antara kontrol positif (abate) dengan konsentrasi tertinggi ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) yaitu 1%, menunjukkan nilai p = 0,131 (p>0,05) yang berarti konsentrasi 1% dibandingkan dengan abate (kontrol positif) secara statistik tidak memiliki perbedaan yang bermakna, sehingga dapat dikatakan bahwa perlakuan dengan konsentrasi tertinggi yaitu 1%, tidak berbeda efeknya dalam membunuh larva jika dibandingkan dengan kontrol positif yaitu abate 1%. Hal tersebut menunjukkan bahwa ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) dapat membunuh larva uji nyamuk Aedes aegypty dan memiliki efektivitas larvasida pada larva Aedes aegypti. Penelitian ini menggunakan ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) yang merupakan bahan insektisida alami dan diduga bahwa pada daun legundi mengandung senyawa saponin, flavonoid, dan alkaloid yang merupakan zat toksik bagi larva sehingga menyebabkan kematian larva uji. Hal ini sesuai dengan yang diungkapkan Sprag,dkk (2004) bahwa saponin memiliki aksi sebagai insektisida dan larvasida, serta menurut Aminah,dkk (2001) bahwa saponin dapat menurunkan tegangan permukaan selaput mukosa traktus digestivus larva sehingga dinding traktus digestivus larva menjadi korosif, dan menurut Dinata (2009) bahwa senyawa flavonoid bersifat menghambat makan serangga dan juga bersifat toksis. Pembuatan ekstrak dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol yang bersifat non polar diduga dapat mengikat senyawa-senyawa metabolit sekunder terutama flavonoid pada daun legundi sehingga dapat membunuh larva uji. Flavonoid bekerja sebagai inhibitor kuat pernapasan atau sebagai racun pernapasan. Flavonoid mempunyai cara kerja yaitu dengan masuk ke dalam tubuh larva melalui sistem pernapasan yang kemudian akan menimbulkan kelayuan pada syaraf serta kerusakan pada sistem pernapasan dan mengakibatkan larva tidak bisa bernapas dan akhirnya mati. Posisi tubuh larva yang berubah dari normal bisa juga disebabkan oleh senyawa flavonoid akibat cara masuknya yang melalui siphon sehingga mengakibatkan kerusakan sehingga larva harus mensejajarkan posisinya dengan permukaan air untuk mempermudah dalam mengambil oksigen. Selain itu terdapat pula kandungan saponin dan alkaloid yang bertindak sebagai racun perut. Alkaloid berupa garam sehingga dapat mendegradasi membran sel untuk masuk ke dalam dan merusak sel dan juga dapat mengganggu sistem kerja syaraf larva dengan menghambat kerja enzim asetilkolinesterase. Terjadinya perubahan warna pada tubuh larva menjadi lebih transparan dan gerakan tubuh larva yang melambat bila dirangsang sentuhan serta selalu membengkokkan badan disebabkan oleh senyawa alkaloid. 58 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Dari penelitian yang telah dilakukan, didapatkan kesimpulan sebagai berikut: 1. Ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) memiliki efektivitas larvasida terhadap larva Aedes aegypti instar III . 2. Konsentrasi ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) yang paling efektif dalam membunuh larva Aedes aegypti instar III adalah konsentrasi 1%. 3. Nilai LC50 dari ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) sebagai larvasida terhadap larva Aedes aegypti instar III sesuai standar konsentrasi tertinggi menurut WHO yaitu 1% adalah 0,837% di menit ke-480; 0,600% di menit ke-1440; dan 0,346% di menit ke2880. 4. Nilai LT50 dari ekstrak daun legundi (Vitex trifolia) sebagai larvasida terhadap larva Aedes aegypti instar III adalah 2233,197 menit pada konsentrasi 0,5% ; 965,781 menit pada konsentrasi 0,75% dan 321,181 menit pada konsentrasi 1%. B. Saran Dari hasil penelitian peneliti menyarankan agar: 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek senyawa yang terkandung bagian tumbuhan lainnya seperti bunga, batang dan akar yang nantinya diharapkan dapat berfungsi sebagai larvasida. 2. Penelitian lebih lanjut dapat dilakukan mengenai senyawa-senyawa yang terkandung dalam daun legundi selain dari flavovoid, saponin dan alkaloid yang berfungsi sebagai larvasida. DAFTAR PUSTAKA Aminah N.S., Sigit S., Partosoedjono S. dan Chairul. 2001. S. lerak, D. metel dan E. prostata Sebagai Larvasida Aedes aegypti. Cermin Dunia Kedokteran No. 131. Grup PT Kalbe Farma. Jakarta. Depkes RI. 2012. Laporan Kasus Demam Berdarah Dengue. Subdit Arbovirosis, Ditjen Pemberantasan Penyakit Menular dan Penyehatan Lingkungan. Jakarta. Depkes RI. 2011. Survei Entomologi DBD. Ditjen P3M dan PLP Depkes RI.
59 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
ISSN 2337-3776
Depkes RI. 2011. Informasi Umum DBD 2011. Subdirektorat Pengendalian Arbovirus, Ditjen Pemberantasan Penyakit Menular dan Penyehatan Lingkungan. Jakarta. Dinata, A. 2009. Mengatasi DBD dengan Kulit Jengkol. www.miqraindonesia.blo gspot.com. Diakses tanggal 1 November 2012 Direktorat Jenderal Perkebunan. 2006. Daftar Komoditi Binaan Direktorat Jenderal Perkebunan
Berdasarkan
keputusan
Menteri
Pertanian
Nomor
511/Kpts/Pd.310/9/2006. Jakarta Fitriani, F. 2004. Pengaruh Ekstrak Daun Legundi (Vitex trifolia L.) dalam Kosentrasi yang Sangat Rendah Terhadap Stadium Pradewasa Nyamuk (Culex quinquefasciatus). Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hoedojo, R. dan S. Sungkar. 2008. Morfologi, Daur Hidup dan Perilaku Nyamuk : Parasitologi Kedokteran Edisi Ke-4. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. 383 hlm. Kemenkes RI. 2010. Demam Berdarah Dengue. Pusat Data dan Surveilan Epidemiologi. Jakarta. Komisi Pestisida. Metode Standar Pengujian Efikasi Pestisida. Bandung: Komisi Pestisida Bandung. 1995 Ramadhaniah, V. 2004. Pengaruh Ekstrak Daun Legundi (Vitex trifolia) terhadap Perkembangan Pradewasa Nyamuk Aedes albopictus. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan IPB. Bogor. Syamsuhidayat S.S. dan Hutapea J.R. 1991. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Edisi I. Badan Penelitian Dan Pengembangan Kesehatan Depkes RI. Jakarta. Syuifri. 2010. Uji Ekstrak Metanol Bagian Tumbuhan Legundi (Vitex trifolia) terhadap larva Crocidolomia pavonana. Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Andalas. Padang. Wardani, R.S., Mifbakhuddin, K. Yokorinanti. 2010. Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Daun Tembelekan (Lantana camara) terhadap Kematian Larva Aedes aegypti. Jurnal Kesehatan Masyarakat Indonesia. 6(2): 30-38. Warta. 2010. Pemanfaatan Legundi sebagai Tanaman Obat. Bogor. World Health Organization. 2005. Guidelines for Laboratory and Field Testing of Mosquito Larvicides. Geneva. World Health Organization. 2011. Comperhensive Guidelines for Prevention and Control of Dengue and Dengue Haemorrhagiz Fever. World Health Organization, Regional Office for South-East Asia. 67 hlm.
60 | Medical Journal of Lampung University Volume 2 No 4 Februari 2013
