Uji Efek Anti Aterosklerosis dari Jus Nanas (Ananas comosus (L.) Merr) terhadap Burung Puyuh Jantan

Pros id ing Sem in ar Nas iona l & W ork s hop “Pe rk e mbangan T e rk ini Sa ins F a rmas i & K li nik 5 ” | Pa d ang, 6 -7 Nov e m ber 2015

Uji Efek Anti Aterosklerosis dari Jus Nanas (Ananas comosus (L.) Merr) terhadap Burung Puyuh Jantan (Antiatherosclerotic Effect of Pineapple (Ananas comosus(L.)) Juice on Male Quail) Suhatri1; Ifora2*; Humaira Fadhilah2; Wila Elvi Dwi Paramitha2 1Fakultas

Farmasi Universitas Andalas (UNAND) Padang Ilmu Farmasi (STIFARM) Jl. Tamansiswa No. 9 Padang

2SekolahTinggi

Corresponding email: [email protected] ABSTRAK Nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) varietas Queen yang kerap dikonsumsi mengandung antioksidan alami dengan kandungan vitamin C 24 mg dalam setiap 100 gram nanas. Penelitian ini dilakukan untuk melihat efek anti aterosklerosis dari jus nanas terhadap burung puyuh jantan dengan metoda histopatologi. Parameter yang diamati adalah jumlah aorta yang mengalami aterosklerosis. Penelitian dilakukan dengan memberikan jus nanas secara oral dengan dosis 0,9 mL/200g BB, 1,8 mL/200g BB dan 3,6 mL/200g BB selama 2 bulan. Dari hasil penelitian terlihat pemberian jus nanas dengan berbagai dosis dapat berpengaruh terhadap pencegahan aterosklerosis pada burung puyuh jantan yang diinduksi makanan lemak tinggi dan prophyltiourasil dengan signifikansi (P<0,05). Dosis 0,9 mL /200g BB menunjukan efek pencegahan aterosklerosis yang paling bagus. Kata Kunci: nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) varietas Queen, aterosklerosis, Burung puyuh jantan PENDAHULUAN Penyakit penyakit

yang

Oleh karena timbunan lemak (plak) aterosklerosis

plak ini dapat menyebabkan lumen pembuluh

patogenesisnya, dinding pembuluh darah arteri

darah menjadi sempit sehingga aliran darah

terpajan oleh berbagai iritan yang dapat

kurang lancar, plak pada dinding pembuluh

menyebabkan cedera pada lapisan tunika intima

darah bersifat rapuh dan mudah pecah dan

khususnya lapisan endotel yang merupakan

meninggalkan

awal terjadinya proses inflamasi kronis dinding

pembuluh darah yang dapat memudahkan

arteri dan mengakibatkan timbulnya ateroma

pembentukan bekuan darah. Bekuan darah ini

atau plak ateromatosa. Plak ateromatosa ini

akan menyumbat pembuluh darah secara total

terdiri dari tiga komponen utama, yaitu sel (otot

dan akan menyebabkan infark miokardium dan

polos,

stroke (Price & Lorraine, 1995).

dan

berbahaya.

didalam lapisan tunika intima pembuluh darah,

Dalam

makrofag

sangat

merupakan

leukosit),

matriks

ekstraseluler (termasuk kolagen, serat elastik

Prinsip

bekas

luka

utama

pada

dinding

pengobatan

dan proteoglikan) dan lemak (intrasel dan

aterosklerosis adalah dengan pengaturan diet

ekstrasel) (Brown, 2005; Schoen & Cotran,

rendah kolesterol dan pemberian obat-obatan

2007).

hipolipidemia.

Karena

pengobatan

untuk

173


mencegah oksidasi LDL belum dikenal luas,

intima serta perubahan struktur histologis pada

maka senyawa antioksidan pencegah oksidasi

aorta.

LDL merupakan target utama pencarian obat antiaterosklerotik (Libby, 2002a). Salah satu

METODE PENELITIAN

sumber senyawa antioksidan adalah obat herbal

Waktu dan Tempat Penelitian

dengan kandungan senyawa polifenol yang tinggi.

Konsumsi

senyawa

secara

bulan Mei 2014 sampai dengan Desember 2014

epidemiologi terbukti memiliki hubungan yang

di Laboratorium Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi

terbalik

Padang.

dengan

angka

fenolik

Penelitian ini telah dilaksanakan pada

morbiditas

dan

mortalitas akibat PJK (Hertog, et al.,1993, Knekt,

Alat

et al.,1996). Konsumsi minuman kaya polifenol

Alat-alat yang digunakan adalah juicer

oleh subyek sehat dalam waktu singkat akan

(Philips), alat-alat

meningkatkan status antioksidan serum dan

kapas), Vacum Desicator, piknometer (Iwaki),

kemampuan

inkubator

akumulasi 2010).

serum

untuk

kolesterol

Polifenol

aterosklerosis menurunkan

makrofag

juga

pada NO,

mencit

dan

(Rosenblat,

meringankan

inflamasi,

ketersediaan

melemahkan

dengan

(Momen),

refraktometer

ABBE

rotary (Davago),

pH

(Archevo), mikroskop olympus (BX53).

cara

Bahan

heme

oxygenase-1 (Loke, et al., 2010)

meter

Bahan yang digunakan adalah buah nanas segar varietas Queen, Natrium benzoat (Honne),

Nanas (Ananas comosus (L.) Merr.)

pinset,

micromotom,

plak

meningkatkan

menginduksi

bedah (gunting,

aquadest

karboksimetil

selulosa

(Brataco), (Brataco),

natrium natrium

varietas Queen yang kerap dikonsumsi sebagai

klorida fisiologis 0,9 % (Otsuka), makanan

buah segar merupakan suku Bromeliaceae. Buah

standar burung puyuh (Malindo Feedmill),

nanas mengandung antioksidan alami dengan

makanan lemak tinggi (MLT), propylthiourasil

kandungan vitamin C 24 mg dalam setiap 100

(PTU)(Dexa), tembaga (II) Sulfat anhidrat dan

gram

polifenol

kalium hidroksida (Biomedika), phenolpthalein

(Larrauri,1997), Eugenol, dan vanilin (Wu,

(Merck), natrium hidroksida kristal (Merck),

2012). Nenas juga mengandung ezim proteolitik

kalsium

bromelain yang memiliki banyak aktivitas

hidroksida (Merck), kalium permanganat kristal

farmakologi (Taussig & Batkin, 1988).

(Merck), asam sulfat (Merck), natrium oksalat

nanas

(Samadi,

2014),

Berdasarkan uraian dan pemaparan sebelumnya,

maka

dilakukan

penelitian

karbonat

(Brataco),

amonium

(Merck), formalin (Merck), zat warna HE (Haematoxyllin

Eosin)

(Biomedika),

xylol

pemberian jus nanas (Ananas comosus (L.)

(Biomedika), Mayer’s albumin (putih telur dan

Merr.) untuk membuktikan apakah pemberian

gliserin) (Meridian Bioscience), aseton (Merck),

jus

anti

paraffin cair (Brataco), paraffin keras (murni)

aterosklerosis terhadap burung puyuh jantan

(Biomedika) dan perekat entellan (putih telur

dengan metoda hispatologi dan parameter yang

dan gliserin) (Merck).

nanas

dapat

memberikan

efek

diamati adalah jumlah aorta yang terdapat aterosklerosis yang ditandai dengan adanya plak ateroma, endapan lipid dan penebalan pada 174


Hewan Percobaan Hewan

burung puyuh jantan dengan berat 100 – 150

percobaan

yang

digunakan

gram yang berumur 2 – 3 bulan, sehat dan tidak

adalah burung puyuh jantan yang berumur 2-3

mengalami penurunan berat badan lebih dari 10

bulan dengan berat 100-150 gram sebanyak 25

%.

ekor.

Perencanaan Dosis Dosis jus nanas yang diberikan kepada

Prosedur Kerja

hewan percobaan secara per oral adalah 0,9 ml/

Pengambilan sampel buah nanas

200g BB ; 1,8 ml/ 200g BB ; 3,6 ml/ 200g BB.

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah buah nanas (Ananas comosus (L.)

Pembuatan Jus Nanas

Merr.) varietas Queen segar yang diperoleh dari Pasar Raya Padang Sumatra Barat.

Buah nanas segar, dikupas. Dibersihkan dari pengotor. Timbang sebanyak 1 kg. Potong kecil, lalu di juicer. Kemudian ukur volume jus

Identifikasi Tumbuhan Identifikasi

dilakukan

yang didapat dengan gelas ukur. Jus segar dapat di

Herbarium

diawetkan dengan penambahan asam benzoat

Universitas Andalas (ANDA) Jurusan Biologi

0,1 % dan didiamkan pada suhu kamar selama

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

beberapa hari sampai pektin yang terdapat

Alam Universitas Andalas Kampus Limau Manih

didalam jus secara alami dihancurkan oleh

Padang Sumbar.

enzim. Hasil akhir yang jelas akan terlihat dengan penambahan alkohol yang jika dibiarkan

Persiapan Hewan percobaan

maka akan terdapat endapan pektin (Martin &

Hewan uji (burung puyuh jantan) dibagi

Cook, 1961).

atas 5 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 5 ekor. Sebelum perlakuan, hewan percobaan

Uji Aterosklerosis Pada Aorta Burung Puyuh

terlebih dahulu di aklimatisasi selama 1 minggu

Jantan

dengan diberi makan dan minum yang cukup. Hewan percobaan dalam penelitian ini adalah

Pengelompokan

burung

puyuh

berdasarkan perlakuan yang diberikan:

Kelompok

Perlakuan

Kontrol negatif

Makanan standar

Kontrol positif

MLT + PTU

Hewan uji I

MLT + PTU + Jus nanas dengan dosis 0,9 ml/ 200g BB

Hewan uji II


Hewan Uji III


175


Pemberian jus nanas pada burung puyuh

Kemudian diberi skor sesuai dengan tingkat

diberikan secara oral setiap hari selama 60 hari.

keparahannya.

Setelah perlakuan selama 60 hari, hewan

a.

Skor 1 untuk tingkat keparahan kecil (sel

percobaan dikorbankan dengan cara di dislokasi

endotelia sedikit mengalami

lehernya kemudian lakukan operasi sayatan

tapi masih tetap teratur).

memanjang pada bagian garis tengah perut

b.

kerusakan,

Skor 2 untuk tingkat keparahan sedang (sel

sampai dada, lalu isi rongga perut dipindahkan

endotelia mengalami kerusakan, bentuknya

ke

tidak

bagian

kanan

dengan

menggunakan

teratur

dan

mulai

terjadi

segumpal kapas sehingga jantung dapat terlihat

penumpukan lemak serta terjadi poliferasi

jelas,

dari sel otot polos).

kemudian

dipisahkan

organ

dari

jantung

jaringan

dipotong,

ikat

dengan

c.

Skor 3 untuk tingkat keparahan besar

menggunakan pinset lalu ditimbang. Organ

(terjadi kerusakan sel endotelia, bentuknya

jantung

tidak teratur, terjadi penumpukan lemak

yang

diambil

gunakan

untuk

pemeriksaan lesi aterosklerosis.

serta terjadi proliferasi dari sel otot polos). Kemudian hitung rata-ratanya pada tiap

Pemeriksaan Lesi Aterosklerosis pada Aorta Jantung Burung Puyuh 1. 2.

Pembuatan

perlakuan. Analisa Data

Preparat

Histopatologi

Data Hasil penelitian dianalisa dengan ANOVA 1

(Leeson, et al., 1989; Kiernan, 1990)

Arah dan dilanjutkan dengan uji DUNCAN pada

Pewarnaan Preparat dengan zat warna

P<0,05 (Jhones, 2010).

Haematoxyllin-Eosin (Leeson, et al., 1989 ; Kiernan, 1990) 3.

HASIL DAN DISKUSI

Pemeriksaan Lesi Aterosklerosis

Pada

a. Tebal Dinding Aorta

penelitian

ini

sampel

yang

digunakan adalah buah nanas segar (Ananas

Tebal dinding aorta diukur pada 6

comosus (L.) Merr) varietas Queen sebanyak 2,5

titik

tebal

kg. Buah nanas segar dibuat menjadi jus

dinding aorta secara keseluruhan

dilakukan dengan alat juicer, ini dilakukan untuk

kemudian di rata-ratakan.

mendapatkan sari buah nanas secara langsung.

yang

dapat

mewakili

b. Pemeriksaan diameter lumen aorta

Jus nanas diawetkan dengan penambahan

Diameter aorta diukur pada 3 titik

natrium benzoat dan didiamkan pada suhu

yang dapat mewakili diameter aorta

kamar selama beberapa hari sampai pektin yang

secara keseluruhan kemudian dirata-

terdapat didalam jus secara alami dihancurkan

ratakan.

oleh enzim. Dari 1 kg buah nanas (Ananas

c. Penilaian

tingkat

kerusakan

Sel

Endotelia Aorta

comosus

L.

Merr)

setelah

dilakukan

pengendapan dan penyaringan maka didapat jus murni 275 ml.

Penilaian

dilakukan

dengan

mengamati

Jus nanas diberikan dengan 3 variasi

kerusakan pada sel endotelia dan terjadi atau

dosis, yaitu 0,9 ml/200g BB; 1,8 ml/200g BB

tidaknya proliferasi sel otot polos aorta.

dan 3,6 ml/200g BB. Adanya varian dosis diberikan bertujuan untuk melihat pengaruh 176


pemberian peningkatan efek jus terhadap aterosklerosis burung puyuh jika di berikan

Gambar 1. Gambar pembuluh darah aorta burung puyuh kontrol negatif dengan 10x pembesaran

dengan peningkatan dosis apakah efek akan

1

meningkat atau menurun. Metoda pemeriksaan

yang

lesi

digunakan

aterosklerosis

2

pada

dilakukan

4

secara mikroskopis dengan membuat preparat histologisnya menggunakan metoda paraffin

3

dan pewarnaan haematoxyllin-eosin, lalu dilihat kerusakan yang terjadi pada aorta tersebut. Metoda ini paling banyak digunakan karena hampir semua jaringan dapat dipotong dengan baik dan pewarnaan dapat dilakukan dengan mudah dan cepat (Kiernan, 1990). Parameter yang diukur pada penelitian ini antara lain tebal

Keterangan : 1.Tunica Adventisia 2.Tunica Media 3.Tunica Intima, terlihat lapisan sel endotel tidak terputus-putus 4.Lumen.

Gambar 2. Gambar pembuluh darah aorta burung puyuh kontrol positif dengan 10x pembesaran

dinding pembuluh aorta, diameter lumen aorta, dan tingkat kerusakan sel endotelia dan sel otot 1

polos pembuluh darah akibat aterosklerosis dan pemberian jus nanas. Hasil pengukuran tebal dinding aorta hewan kontrol positif ; negatif ; dosis 0,9

4

3 2

mg/200g BB ; dosis 1,8 mg/200g BB ; dan dosis 3,6 mg/200g BB secara berturut-turut adalah : 4,79 µm; 3,10 µm; 3,38 µm; 3,93 µm ; 3,86 µm. Tebal dinding aorta kelompok variasi dosis 0,9 mg/200g BB ; dosis 1,8 mg/200g BB ; dan dosis

Keterangan : 1.Tunica Adventisia 2.Tunica Media 3.Tunica Intima, terlihat lapisan sel endotel yang terputus-putus 4.Lumen terdapat bekuan darah

3,6 mg/200g BB hampir mendekati tebal dinding kontrol negatif yang artinya kelompok

Pada hewan kontrol positif dinding

proteksi

intima yang menebal secara difus terdiri dari

terhadap pembuluh darah aorta burung puyuh

matriks protein, collagen, glycosaminoglican dan

terutama terhadap tebal dinding aorta. Tebal

sel otot polos vaskuler (VSMCs). Otot polos

dinding aorta hewan uji kelompok kontrol

vaskuler di tunika intima yang menebal diduga

positif lebih tebal dari pada hewan uji kelompok

berasal dari tunika media yang kemudian

kontrol negatif.

bermigrasi ke intima, terjadi peningkatan dari

variasi

dosis

memberikan

efek

pemeriksaan

molekul-molekul adhesi yang dilapisan intima

histopatologis dapat dilihat pada gambar 1 dan

dan peningkatan adherence dari monocyt ke

gambar 2.

permukaan sel endotel. Kerusakan pada tunika

Hasil

gambar

media mengakibatkan terbentuknya aneurisma aterosklerosis

yang

merupakan

penggelembungan dinding aorta yang lemah.

177


Pemberian

bersamaan

antara kelompok hewan kontrol negatif dengan

memperbaiki

kontrol positif. Pemberian jus nanas dosis 0,9

dinding pembuluh dan mengurangi kerusakan

ml/200g BB tidak berbeda nyata dengan kontrol

yang terjadi pada pada dinding pembuluh aorta,

negatif pada (p>0,05). Sedangkan Pemberian

sehingga bisa mempertahankan tebal pembuluh

jus nanas dengan dosis dosis 1,8 mg/200g BB ;

aorta mendekati tebal pembuluh aorta hewan

dan dosis 3,6 mg/200g BB berbeda nyata

uji kontrol negatif. Hal ini mungkin disebabkan

dengan kontrol negatif (p>0,05) yang artinya

karena pada jus nanas mengandung vitamin C

kelompok dosis

yang berperan sebagai antioksidan. Vitamin C

paling efektif memberikan proteksi atau efek

dapat mencegah terjadinya reaksi oksidasi dari

anti aterosklerosis terhadap pembuluh aorta

LDL (Winarsi, 2007) dan enzim bromelin

terutama terhadap tebal dinding aorta.

makanan

lemak

jus tinggi

nanas bisa

tidak

Hasil uji lanjut posthoc test dengan uji

langsung dapat memproteksi kerusakan dari

duncan terhadap tebal dinding aorta dapat

dinding pembuluh aorta.

dilihat pada Tabel. 1.

(Dalimartha,

2000).

Sehingga

secara

0.9 ml/200g BB inilah yang

Hasil analisa statistik Anova satu arah yang dilanjutkan dengan uji duncan dari tebal dinding aorta telihat perbedaan yang nyata Tabel 1. Uji Duncan Tebal Dinding Aorta Duncana Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

2

kontrol negatif

3

3.1667

dosis 0.9 ml/200g BB

3

3.3800

dosis 3,6 ml/200g BB

3


3

kontrol positif

3

Sig.

3

4

3.3800 3.8567

3.8567 3.9333 4.7900

.355

.055

.735

1.000

Hasil pengukuran diameter lumen pembuluh

kontrol negatif. Namun, secara statistik dosis 0,9

darah aorta hewan kontrol positif, kontrol

ml/200g BB, 1,8 ml/200g BB dan 3,6 ml/200g

negatif, kelompok variasi dosis 0,9 ml/200g BB,

BB berbeda nyata dengan kontrol positif pada

1,8 ml/ 200g BB dan 3,6 ml/200g BB secara

(p>0,05) artinya pemberian jus nenas dosis 0,9

berturut – turut adalah : 8,12 µm ; 10,67 µm ;

ml/200g BB dapat mempengaruhi diameter

9,62 µm ; 9,40 µm ; 8,82 µm. Kelompok variasi

lumen dan memberikan proteksi terhadap

dosis sama-sama memberikan efek

aterosklerosis.

proteksi

atau efek anti aterosklerosis yang dapat dilihat

Hasil uji lanjut posthoc test dengan uji

dari ukuran diameter dari kelompok variasi

duncan terhadap diameter lumen aorta dapat

dosis yang mendekati ukuran diameter pada

dilihat pada Tabel 2.

178


Tabel 2. Uji Duncan Diameter Lumen Aorta Duncana Subset for alpha = 0.05 Perlakuan

N

1

kontrol positif

3

8.1233

dosis 3.6ml /200g BB

3

8.8233


3

9.4033

dosis 0.9 ml200g BB

3

9.6233

kontrol negatif

3

Sig.

2

3

8.8233

10.7767 .103

.078

1.000

Hasil Skor tingkat kerusakan sel endotel

sama dengan kontrol negatif yakni 1,00, namun

pada kelompok kontrol negatif ; kontrol positif ;

berbeda dengan kelompok dosis 1,8 ml/200g BB;

0,9 ml/200g BB ; 1,8 ml/200g BB ; dan 3,6

3,6 ml/200g BB dan kontrol positif. Pemberian

ml/200g BB terletak pada nilai secara berturut

dosis 0,9 ml/200g BB dan 1,8 ml/200g BB

turut adlah : 1,00 ; 3,00 ; 1,00; 1,30; 1,60.

memberikan hasil yang lebih baik dari dosis 3,6 ml

Hasil

Penilaian tingkat kerusakan

endotel dapat dilihat pada Tabel 3.

/200g BB karena memberikan hasil yang lebih mendekati kontrol negatif Pada pembuluh darah hewan kontrol

Perlakuan

Tabel 3. Hasil Skor Kerusakan Endotel

positif terjadi kerusakan sel endotelia dan

Dosis I

Dosis II

Dosis III

proliferasi otot polos aorta yang lebih tinggi. Hal

(0.9

(1,8

(3,6

ml/200

ml/200g

ml/200g

g BB)

BB)

BB)

Kontrol

Kontrol

Negatif

Positif

ini disebabkan oleh LDL yang teroksidasi difagosit oleh makrofag menghasilkan faktor pertumbuhan,

sehingga

menyebabkan

proliferasi otot polos. Sel otot polos mensintesa 1

1

3

1

1

2

2

1

3

1

2

2

3

1

3

1

1

1

Jumlah

3

9

3

4

5

kolagen dan proteinglikon dalam jumlah besar sehingga memperparah plak ateroma yang sudah terbentuk. Keadaan ini menyebabkan kerusakan endotelia (Price & Lorraine, 1995). Adanya kandungan antioksidan dalam jus nanas yang dapat bekerja menangkap radikal

bebas

memperbaiki Skor tingkat kerusakan sel endotel pada kelompok kontrol negatif terletak pada nilai 1,00 dan kontrol positif yang lebih berat pada nilai 3,00.

endotel

dapat

atau

pembuluh

digunakan

untuk

mengembalikan

fungsi

darah.

Namun

pada

percobaan ini terlihat dosis 0,9 ml/ 200g BB lebih efektif dari dosis 3,6 ml/200g BB, hal ini

Pada dosis 0,9 ml/200g BB memiliki nilai yang

179


dikarenakan pada dosis tinggi yang melebihi

menunjukan adanya perbaikan tetapi tidak

dosis normal nya antioksidan akan berubah

sebaik dosis 0,9 ml/200g BB yang mendekati

menjadi oksidan (radikal bebas) sehingga

kontrol negatif (Effendi, 2013).

pemberian jus nanas dosis 3,6 ml/200g BB

1.

KESIMPULAN

terlihat dari adanya perbaikan tebal lapisan sel

Dari penelitian yang telah dilakukan dapat

endotel dinding pembuluh aorta, diameter

disimpulkan bahwa :

pembuluh aorta serta dari skor kerusakan

Pemberian jus nanas dosis 0,9 ml/200g BB, 1,8

endotel.

ml/200g BB, 3,6 ml/200g BB dapat mencegah

2.

Pemberian jus nanas dengan dosis 0,9 ml/200g

terjadinya aterosklerosis yang diinduksi dengan

BB memberikan efek yang paling baik untuk

makanan lemak tinggi dan propylthiourasil,

mencegah terjadinya aterosklerosis.

DAFTAR PUSTAKA Brown, C. T. (2005). Penyakit aterosklerotik koroner. Dalam: Price SA, Wilson LM. Patofisiologi konsep klinis proses-proses penyakit. Edisi ke – 6. Jakarta: ECG; hal 576-612 Effendi, Y. H. (2013). Patofisiologi Gizi: Regulasi makan gangguan homeostatis energi peran zat gizi pada pertumbuhan dan perkembangan otak. Bogor: IPB Press Hertog, M.G.L., P.C.H. Hollman, M.B. Katan, and D. Kromhout. (1993). Intake of potentially anticarcinogenic flavonoids and their determinants in adults in the Netherlands. Nutr. Cancer. 20:21– 29. Jhones, D. S. (2010). Statistik farmasi. Penerjemah: Harrizul Rivai. Jakarta: Buku Kedokteran ECG Kiernan, J. A. (1990). Farmakologi dan histochemical methods: Theory and practice. New York: Pergamon press, oxford. Knekt, P, Jevinen R, Reunazen A, Maatela J. (1996). Flavonoid Intake and Coronary Mortality in Finland: A Cohort Study. BMJ: 312;478-81 Larrauri, J.A., P. Ruperez and F. Saura-Calixto, 1997. Pineapple shell as a source of dietary fiber with associated polyphenols. Journal of Agricultural and Food Chamistry. 45(10). 4028-4031 Leeson, C. R., Leeson, T. S. & Paparo, A. A. (1989). Buku ajar histologi. (Edisi V). Penerjemah: Staf ahli Histologi FKUI. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran.

Libby P. (2005). Current Concept of The Pathogenesis of The Acute Coronary Syndrome. Circulation. 104;365-72 McPhee, S. J., Vishwanatah, R. L., William, F. G. & Jack, D. L. (1997). Pathophysiology of disease an introduction to clinical medicine. (3rd ed). Lange Meical Books Price, A. S. & Lorraine, M. W. (1995). Patofisiologi konsep klinis proses proses penyakit. (Edisi 4). Penerjemah: H. M. Djauhari. Jakarta: Buku Samadi, B. (2014). Panen untung dari budidaya nanas sistem organik. Yogyakarta: Lily Publisher Schoen, F. J. & Cotran, R. S. (2007). Pembuluh darah. Dalam: Kumar V, Cotran RS, Robbins SI. Robbins Buku ajar patologi. Edisi ke – 7. Pendit BU, Alih Bahasa. Hartanto H, Darmaniah N, Wulandari N, Editor Edisi Bahasa Indonesia. Jakarta: ECG; Hal 365-404 Taussig, S. J., and Batkin, S., 1988. “Bromelain, the enzyme complex of pineapple (Ananas comosus) and its clinical application: an update,” Journal of Ethnopharmacology, vol. 22, no. 2, pp. 191–203. Winarsi, H. (2007). Antioksidan alami dan radikal bebas, potensi dan aplikasinya dalam kesehatan. Yogyakarta: PT. Kanisius. Wu, S., Y., Hu, W., Zhang, B,. Liu, S., Wang, S. and Wang, A. M., 2012 .“Bromelain ameliorates the wound microenvironment and improves the healing of firearm wounds,” Journal of Surgical Research, vol. 176, pp. 503–509.

180

Uji Efek Anti Aterosklerosis dari Jus Nanas (Ananas comosus (L.) Merr) terhadap Burung Puyuh Jantan

Recommend Documents