UŢIVATELSKÁ PŘÍRUČKA EFFIVALIDATION 3. EffiChem. Lesní 593, Lysice

1999-2011

UŢIVATELSKÁ PŘÍRUČKA EFFIVALIDATION 3

EffiChem your validation software

Lesní 593, 679 71 Lysice http://www.effichem.com

2/106

EffiChem můţe vlastnit patenty, podané ţádosti o patenty, ochranné známky, autorská práva a další práva týkající se duševního vlastnictví, kterému podléhají informace v tomto dokumentu. Není-li výslovně uvedeno jinak v písemné licenční smlouvě, neposkytuje vám tento dokument ţádnou licenci na uvedené patenty, ochranné známky, autorská práva nebo jiná práva týkající se duševního vlastnictví. Copyright 2011 EffiChem. Všechna práva vyhrazena.

Uţivatelská příručka EffiValidation 3.0

3/106

Obsah: PŘEDMLUVA ....................................................................................................................................................... 7 OBECNÉ INFORMACE ...................................................................................................................................... 8 1.1 KONTAKTNÍ INFORMACE ................................................................................................................................ 8 1.2 URČENÍ PROGRAMU........................................................................................................................................ 8 1.3 POŢADAVKY ISO/IEC 17 025:2001 ............................................................................................................... 9 1.3.1 Validace metod ....................................................................................................................................... 9 1.3.2 Odhadování Nejistot ............................................................................................................................. 10 1.3.3 Validace software ................................................................................................................................ 10 1.3.4 Měřidla v laboratoři ............................................................................................................................. 10 1.4 POŢADAVKY LÉKOPISU, SÚKL A FDA ....................................................................................................... 11 1.4.1 Validace metod .................................................................................................................................... 11 1.4.2 Validace software ................................................................................................................................ 12 1.4.3 Elektronické záznamy a podpisy.......................................................................................................... 12 VYBAVENÍ, DODÁVKA, INSTALACE, ......................................................................................................... 14 SPUŠTĚNÍ, PŘÍSTUPOVÉ OPRÁVNĚNÍ ...................................................................................................... 14 2.1 POTŘEBNÉ VYBAVENÍ................................................................................................................................... 14 2.2 DODÁVKA A INSTALACE PROGRAMU ............................................................................................................ 14 2.3. SPUŠTĚNÍ PROGRAMU .................................................................................................................................. 15 2.4. PŘÍSTUPOVÉ OPRÁVNĚNÍ ............................................................................................................................. 16 2.5. 21 CFR PART 11 ......................................................................................................................................... 16 OVLÁDÁNÍ PROGRAMU, MENU A IKONY................................................................................................ 18 3.1 OVLÁDÁNÍ PROGRAMU................................................................................................................................. 18 3.2 HLAVNÍ PROGRAMOVÉ OKNO ....................................................................................................................... 18 3.3 MENU, IKONY A INFORMAČNÍ PANEL ........................................................................................................... 19 ANALYTICKÉ METODY ................................................................................................................................. 20 4.1 DATABÁZE ANALYTICKÝCH METOD ............................................................................................................. 20 4.2 NOVÁ METODA............................................................................................................................................. 20 4.2.1 Validovaná vlastnost ............................................................................................................................ 21 4.2.2 Přílohy .................................................................................................................................................. 22 4.3 SEZNAM METOD ........................................................................................................................................... 22 4.3.1 Tisk ....................................................................................................................................................... 23 4.3.2 Historie................................................................................................................................................. 23 4.3.3 Práva (k metodě) .................................................................................................................................. 24 4.3.4 Export ................................................................................................................................................... 24 4.4 UKONČENÍ PRÁCE S METODOU A S PROGRAMEM ......................................................................................... 25 VALIDACE ......................................................................................................................................................... 26 5.1 DRUH VALIDACE .......................................................................................................................................... 26 5.1.1 Výběr vyhodnocovací metody (validačního parametru) ....................................................................... 26 5.1.2 Poznámka ............................................................................................................................................. 28 5.1.3 Souhrnný tisk ........................................................................................................................................ 28 5.2 TABULKA DAT .............................................................................................................................................. 29 5.2.1 Menu v okně Tabulka dat ..................................................................................................................... 30 5.2.2 Vlastní Tabulka dat ............................................................................................................................ 32 5.2.3 Vyhodnocení Tabulky dat .................................................................................................................... 35 5.2.4 Tisk Tabulky dat ................................................................................................................................. 37 5.3 VALIDAČNÍ PARAMETRY .............................................................................................................................. 39 5.3.1 OPAKOVATELNOST ........................................................................................................................... 39 5.3.1.1 Po úrovních z vícenásobného měření ............................................................................................ 39 5.3.1.2 Z paralelních měření ...................................................................................................................... 39 5.3.2 STŘEDNÍ PŘESNOST .......................................................................................................................... 40 5.3.3 REPRODUKOVATELNOST ................................................................................................................ 40 5.3.3.1 Data k dispozici ............................................................................................................................. 40 5.3.3.2 Výsledky k dispozici .................................................................................................................... 40 5.3.4 ROBUSTNOST ..................................................................................................................................... 40 5.3.4.1 Dongův algoritmus ........................................................................................................................ 40 5.3.4.2 AOAC s vyhodnocením ................................................................................................................ 41 5.3.5 SPRÁVNOST ........................................................................................................................................ 41 5.3.5.1 Omezený koncentrační rozsah - rekonstituce vzorku moţná ........................................................ 41


4/106 5.3.5.2 Omezený koncentrační rozsah – referenční materiál k dispozici .................................................. 42 5.3.5.3 Velký koncentrační rozsah – slepý pokus k dispozici: t-test ......................................................... 42 5.3.5.4 Velký koncentrační rozsah – slepý pokus k dispozici: regresně ................................................... 43 5.3.5.5 Velký koncentrační rozsah – slepý pokus není k dispozici: t-test ................................................. 43 5.3.5.6 Velký koncentrační rozsah – slepý pokus není k dispozici : regresně ........................................... 44 5.3.5.7 Porovnání 2 metod / laboratoří: t-testem po úrovních ................................................................... 44 5.3.5.8 Porovnání 2 metod / laboratoří: t-testem na rozdíl výsledků ......................................................... 45 5.3.6 SELEKTIVITA ...................................................................................................................................... 45 5.3.6.1 Porovnáním kalibračních přímek .................................................................................................. 45 5.3.6.2 Porovnáním výsledků se standardem ............................................................................................ 46 5.3.6.3 Porovnáním výsledků s měřením bez interferentu ........................................................................ 46 5.3.7 CITLIVOST .......................................................................................................................................... 47 5.3.7.1 Z kalibrační přímky ....................................................................................................................... 47 5.3.7.2 Nejmenší stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti ................................................................. 47 5.3.8 LINEARITA .......................................................................................................................................... 47 5.3.8.1 Korelační a QC koeficient ............................................................................................................. 48 5.3.8.2 ANOVA na těsnost proloţení ........................................................................................................ 48 5.3.8.3 Významnost kvadratického členu.................................................................................................. 48 5.3.8.4 Znaménkový test ........................................................................................................................... 49 5.3.9 ROZSAH ............................................................................................................................................... 49 5.3.10 MEZ DETEKCE A STANOVITELNOSTI ........................................................................................... 49 5.3.10.1 3s - IUPAC ................................................................................................................................ 50 5.3.10.2 3s – korekce na slepý pokus ...................................................................................................... 50 5.3.10.3 3s – kontinuálně měřený slepý pokus ........................................................................................ 50 5.3.10.4 Z kalibrační přímky .................................................................................................................... 51 5.3.10.5 Ze signálu slepého pokusu v chromatografii .............................................................................. 51 5.3.11 SLEPÝ POKUS................................................................................................................................... 52 5.3.12 Opakovatelnost nástřiku dle FDA ..................................................................................................... 52 5.3.13 KAPACITNÍ FAKTOR dle FDA ........................................................................................................ 52 5.3.14 ROZLIŠENÍ dle FDA ......................................................................................................................... 53 5.3.15 CHVOSTOVÁNÍ dle FDA ................................................................................................................. 53 5.3.16 Počet teoretických pater dle FDA ..................................................................................................... 53 5.3.17 Počet teoretických pater dle Ph.Eur. ................................................................................................. 54 5.3.18 ROZLIŠENÍ dle Ph.Eur. .................................................................................................................... 54 5.3.19 FAKTOR SYMETRIE dle Ph.Eur ...................................................................................................... 54 5.4 VOLBA VYHODNOCOVACÍ METODY .............................................................................................................. 55 5.4.1 OPAKOVATELNOST ........................................................................................................................... 55 5.4.2 SPRÁVNOST ........................................................................................................................................ 55 5.4.3 SELEKTIVITA ...................................................................................................................................... 56 5.4.4 LINEARITA .......................................................................................................................................... 56 5.4.5 MEZ DETEKCE A STANOVITELNOSTI ............................................................................................. 57 5.4.6 CITLIVOST .......................................................................................................................................... 57 5.4.7 REPRODUKOVATELNOST ................................................................................................................ 58 5.4.8 CHROMATOGRAFICKÉ CHARAKTERISTIKY .................................................................................. 58 5.5 ROZSAH VYHODNOCENÍ VALIDAČNÍCH PARAMETRŮ .................................................................................... 58 MEZILABORATORNÍ POROVNÁNÍ ............................................................................................................ 59 6.1 MANDELOVA STATISTIKA H ......................................................................................................................... 59 6.2 MANDELOVA STATISTIKA K ......................................................................................................................... 59 6.3 KOLABORATIVNÍ STUDIE .............................................................................................................................. 60 QC NÁSTROJE .................................................................................................................................................. 61 7.1 REGULAČNÍ DIAGRAMY ................................................................................................................................ 61 7.1.1 INDIVIDUÁLNÍ HODNOTY – CHARAKTERISTIKY REGULACE STANOVENY .............................. 61 7.1.2 INDIVIDUÁLNÍ HODNOTY – CHARAKTERISTIKY REGULACE NESTANOVENY ........................ 62 7.1.3 OPAKOVANÁ MĚŘENÍ – CHARAKTERISTIKY REGULACE STANOVENY ..................................... 62 7.1.4 OPAKOVANÁ MĚŘENÍ – CHARAKTERISTIKY REGULACE NESTANOVENY................................ 63 7.1.5 X-DIAGRAM (REGULAČNÍ DIAGRAM PRO PRUMĚR).................................................................. 63 7.1.6 R-DIAGRAM (DIGRAM PRO ROZPĚTÍ) ........................................................................................... 64 7.1.7 PRAVIDLA PRO VYHODNOCOVÁNÍ DIAGRAMU (WESTERN-ELECTRIC RULES) ..................... 64 7.2 KALIBRACE .................................................................................................................................................. 64 7.2.1 TABULKA DAT .................................................................................................................................... 65


5/106 7.2.2 Okno VYHODNOCENÍ ........................................................................................................................ 65 7.2.3 GRAF ................................................................................................................................................... 66 7.3 NEJISTOTY ................................................................................................................................................... 66 7.3.1 Z DAT PRO VYHODNOCENÍ PŘESNOSTI – VÍCENÁSOBNÁ MĚŘENÍ ......................................... 66 7.3.2 Z DAT PRO VYHODNOCENÍ PŘESNOSTI – PARALELNÍ MĚŘENÍ ................................................ 66 7.3.3 Z REGULAČNÍHO DIAGRAMU – INDIVIDUÁLNÍ MĚŘENÍ ............................................................ 67 7.3.4 Z REGULAČNÍHO DIAGRAMU – VÍCENÁSOBNÁ MĚŘENÍ............................................................ 67 7.3.5 EXPERTNÍ ODHAD ........................................................................................................................... 68 7.3.6 Z PARCIÁLNÍCH NEJISTOT .............................................................................................................. 68 EVIDENČNÍ KNIHY ......................................................................................................................................... 69 8.1 KNIHA VZORKŮ ............................................................................................................................................ 69 8.1.1 Jednoduchá kniha vzorků ..................................................................................................................... 69 8.1.2 Rozšířená kniha vzorků ........................................................................................................................ 71 8.2 KNIHA SPECIFIKACÍ ...................................................................................................................................... 72 8.3 KNIHA MĚŘIDEL ........................................................................................................................................... 73 8.3.1 Jednoduchá kniha měřidel ................................................................................................................... 74 8.3.2 Rozšířená kniha měřidel ....................................................................................................................... 75 8.4 KNIHA DOKUMENTŮ ..................................................................................................................................... 77 8.5 KNIHA ODCHYLEK A REKLAMACÍ ................................................................................................................. 78 8.6 KNIHA KONTAKTŮ ....................................................................................................................................... 79 8.7 KNIHA REFERENČNÍCH STANDARDŮ ............................................................................................................. 80 8.8 KNIHA CHEMIKÁLIÍ ...................................................................................................................................... 81 8.9 KNIHA ODMĚRNÝCH ROZTOKŮ ..................................................................................................................... 82 NÁSTROJE ......................................................................................................................................................... 84 9.1 STATISTICKÉ TABULKY ................................................................................................................................ 84 9.2 INSTALAČNÍ KVALIFIKACE (IQ) .................................................................................................................... 84 9.3 OPERAČNÍ KVALIFIKACE (OQ) ..................................................................................................................... 85 9.4 OBECNÉ NASTAVENÍ .................................................................................................................................... 88 9.5 DATA A VÝPOČTY ........................................................................................................................................ 88 9.6 KRITERIA PRO HODNOCENÍ (DODAVATELŮ) ................................................................................................. 89 9.7 SEZNAM UŢIVATELŮ .................................................................................................................................... 90 9.7.1 Nový uživatel ........................................................................................................................................ 90 9.7.2 Změna Hesla ........................................................................................................................................ 91 9.7.3 Změna statutu uživatele ........................................................................................................................ 92 9.8 SEZNAM ANALYTIKŮ ................................................................................................................................... 92 9.8.1 Nový analytik........................................................................................................................................ 92 9.9 POLITIKA HESEL A ELEKTRONICKÝ PODPIS .................................................................................................. 93 9.10 DATABÁZE ................................................................................................................................................. 94 9.11 MANAŢER DATABÁZE ................................................................................................................................ 95 9.11.1 Seznam databází ................................................................................................................................. 95 9.11.2 Nová databáze .................................................................................................................................... 95 9.11.3 Přidat databázi ................................................................................................................................... 96 9.11.4 Opravit databázi................................................................................................................................. 96 9.12 SOUHRNNÉ REVIZNÍ STOPY ......................................................................................................................... 97 9.12.1 Filtr Revizních stop ............................................................................................................................ 97 9.12.2 Nastavení revizních stop a historie záznamů...................................................................................... 98 9.12.3 Zobrazení záznamu z revizních stop ................................................................................................... 98 NÁPOVĚDA ........................................................................................................................................................ 99 10.1 NÁPOVĚDA K PROGRAMU ........................................................................................................................... 99 10.2 OBSAH A REJSTŘÍK ..................................................................................................................................... 99 10.3 TIPY DNE .................................................................................................................................................... 99 10.4 HOTLINE E-MAIL ........................................................................................................................................ 99 10.5 O PROGRAMU ............................................................................................................................................. 99 ZÁVĚR – PODPORA UŢIVATELŮ .............................................................................................................. 100 11.1 TIŠTĚNÉ DOKUMENTY .............................................................................................................................. 100 11.2 ELEKTRONICKÁ PODPORA ........................................................................................................................ 100 TUTORIÁL ....................................................................................................................................................... 101 12.1 SPUŠTĚNÍ PROGRAMU ............................................................................................................................... 101 12.2 VYTVOŘENÍ NOVÉ METODY .................................................................................................................... 102 12.3 VYHODNOCENÍ VALIDAČNÍCH DAT .......................................................................................................... 103


6/106

12.3.1 Opakovatelnost ................................................................................................................................. 103 12.4 POUŢITÍ EVIDENČNÍCH KNIH .................................................................................................................... 105


7/106

PŘEDMLUVA Software EffiValidation 3.0 byl navrţen a vyvinut s cílem splnit poţadavky zkušebních a kalibračních laboratoří akreditovaných dle EN ISO/IEC 17 025:2001 a poţadavky laboratoří kontroly kvality podléhající reţimu správné výrobní praxe v oblasti výroby léčiv. Software je určen k plánování a vyhodnocování validací chemických a mikrobiologických metod, vyhodnocování mezi-laboratorních porovnání, vytváření a pouţívání kalibračních modelů, vytváření a pouţívání regulačních diagramů, k odhadování nejistot analytických výsledků a vedení elektronických záznamů laboratoře (kniha vzorků, kniha specifikací, kniha měřidel, kniha dokumentů, kniha odchylek, kniha kontaktů, kniha referenčních standardů, kniha chemikálií a kniha odměrných roztoků) v souladu s poţadavky směrnice amerického Úřadu pro léčiva (FDA) 21 CFR Part 11. EffiValidation 3.0 nabízí vysokou úroveň validace a zabezpečení software, jelikoţ byl navrţen a vyvinut v souladu s poţadavky na ţivotní cyklus software (General Principles of Software Validation, Final Guidance; GAMP 4: Guide for Validation of Automated Systems). Software obsahuje nástroje, dovolující splnit poţadavky na elektronické záznamy a podpisy (21 CFR Part 11 FDA), včetně automaticky generovaných revizních stop. Program je dodáván se související dokumentací, coţ je Funkční specifikace počítačového systému, na kterém má být program nainstalován, dokumenty a postupy Instalační kvalifikace (IQ) a Operační kvalifikace (OQ) jako základ pro průběţně probíhající proces kvalifikace software a Příručku řešených příkladů v elektronické podobě (dodává se na instalačním CD se software). Následující normy a směrnice jsou hlavní dokumenty které byly pouţity při tvorbě a vývoji software EffiValidation 3.0: - validace analytických (mikrobiologických) metod: EN ISO/IEC 17 025:2001, poţadavky Státního Ústavu pro Kontrolu Léčiv (Věstník SÚKL 1994), ICH, USP, FDA a směrnice Eurachem - mezilaboratorní porovnání: ISO 5725 - regulační diagramy: ISO 8252 - kalibrace: ISO 8466-1,-2 - nejistoty analytických výsledků: směrnice Eurachem/CITAC - elektronické podpisy a záznamy: 21 CFR Part 11, EN ISO/IEC 17 025:2001 - validace software: General Principles of Software Validation, FDA – CDRH; GAMP 4: Guide for Validation of Automated Systems, ISPE; Good Practices for Computerized Systems in Regulated “GXP” Environments: PIC/S. Uţivatelská příručka popisuje postupy, jak program pouţívat a ovládat, tj. jak vytvořit databázi analytických (zkušebních a kalibračních) metod, vloţit data, vyhodnotit výsledky, pracovat s grafy, vytisknout a vyexportovat data, výsledky a grafy, apod.. Účelem příručky není vysvětlit fungování statistických metod aplikovaných v software. Statistickou teorii pouţitou v software lze čerpat z odborné literatury a směrnic (viz výše), vydávaných organizacemi jako je AOAC, ICH, FDA, EPA, IUPAC, ISO, Eurachem, apod. Pro snazší orientaci v příručce jsou termíny odpovídající příkazům v programu (menu a tlačítka) vyznačeny kurzívou, názvy oken podtrţeny a poloţky v oknech vyznačeny tučně. Autorský kolektiv prohlašuje, ţe nepřebírá zodpovědnost za případné škody vzniklé v důsledku chybného pouţívání programu ani za interpretaci prezentovaných výsledků. Za závěry, které uţivatel vyvodí na základě programu, je sám plně zodpovědný. Autorský kolektiv vám přeje mnoho úspěchů při pouţívání software, co nejvíce kvalitně zvalidovaných metod, vyhodnocených mezilaboratorních porovnání, sestrojených kalibračních modelů a regulačních diagramů, odhadnutých nejistot a spokojenost při vedení laboratorní evidence. Výsledkem implementace software v laboratoři by měla být niţší pravděpodobnost neúspěchu laboratoře při akreditaci nebo inspekci správné výrobní praxe, zlepšená efektivita práce v laboratoři a sníţené náklady. Vaše případné připomínky rádi zohledníme v některém upgrade či vyšší verzi programu resp. dalším vydání této Uţivatelské příručky. Ing. Vítězslav Centner, PhD / EffiChem http://www.effichem.cz nebo http://www.effichem.com


V Lysicích 1.2. 2011

8/106

KAPITOLA

1 OBECNÉ INFORMACE Tato kapitola obsahuje:    

kontaktní informace popis určení programu souhrn poţadavků normy ISO/IEC 17 025:2001: „Obecné poţadavky na způsobilost zkušebních a kalibračních laboratoří“ na validace metod, odhadování nejistot a validaci software souhrn poţadavků Českého Lékopisu 2002 a Státního Ústavu pro Kontrolu Léčiv na validace analytických metod a poţadavky Food and Drug Administration na validaci software.

Poţadavky na hardware, detaily o dodávce, instalaci a spuštění programu jsou uvedeny v Kapitole 2. Upozornění: obsah této Uživatelské příručky se obsahově překrývá s obsahem Nápovědy a Instrukcí k programu. 1.1 KONTAKTNÍ INFORMACE Poštovní adresa:

EffiChem Lesní 593 679 91 Lysice

Telefon: Fax: Mobil:

516 473 304 516 472 108 606 714 974

E-mail:

[email protected] [email protected] [email protected]

Webové stránky:

http://www.effichem.cz nebo http://www.effichem.com

1.2 URČENÍ PROGRAMU EffiValidation 3.0 je databázový program určený k (a) plánování a vyhodnocování validací analytických (chemických a mikrobiologických) metod a k archivaci dat a validačních výsledků (v souladu s ČSN EN ISO/IEC 17 025:2001, ICH, USP, FDA, směrnicemi Eurachem a D.L. Massart et al., Handbook of Chemometrics and Qualimetrics, Part A, Elsevier, Amsterdam, 1997) (b) tvorbě a pouţívání kalibračních modelů (dle ISO 8466:1 a 2) (c) tvorbě a pouţívání regulačních diagramů (ČSN ISO 8258:1991) (d) odhadování nejistot analytických výsledků (např. EURACHEM/CITAC Guide) (e) vyhodnocování mezi-laboratorních studií (ČSN ISO 5725-2, 1997) (f) vedení evidence v laboratoře včetně elektronických záznamů a podpisů (21 CFR Part 11; vzorky, výsledky, specifikace, měřidla, dokumenty, odchylky a reklamace, kontakty, referenční standardy, chemikálie a odměrné roztoky) Software dovoluje oddělené vyhodnocování (i) průzkumové (ii) plné a (iii) retrospektivní validace a vyhodnocení dat při (iv) kontrole způsobilosti systému a při (v) převodu metody z vývojové do přijímající laboratoře nebo z normy do přijímající laboratoře.


9/106 Dle poţadavků Českého Lékopisu 2002, Ph.Eur. a Food and Drug Administration software EffiValidation 3.0 umoţňuje také oddělené vyhodnocování validací metod na stanovení (j) hlavní látky, (jj) nečistot, (jjj) fyzikálně chemických parametrů a vyhodnocování charakteristik HPLC metod (kontrola vhodnosti systému). Volba typu validace závisí na tom, zda se jedná o normalizovanou, nenormalizovanou či modifikovanou normalizovanou metodu, na pouţití a rozsahu metody, na cílech validace, apod. Moţnosti vyhodnocování validačních dat doplňuje modul mezi-laboratorní porovnání. Základem software EffiValidation 3.0 je databáze analytických metod, které jsou předmětem validace, mezilaboratorního porovnání, kalibrace, sledování formou regulačních diagramů a odhadování nejistot. Databázi vytváří uţivatel a je v ní garantována 100% dohledatelnost veškerých dat a výsledků pro uţivatele i posuzovatele při akreditaci resp. inspektora při inspekci. Záznamy v databázi lze společně s grafy tisknout na libovolné tiskárně nebo exportovat do jiných aplikací podporovaných systémem Microsoft Windows. Přístup do programu a do databáze je řízen systémem přístupových jmen a hesel, které uděluje Administrátor (správce) programu, přičemţ tento systém vyhovuje poţadavkům směrnice 21 CFR Part 11 pro elektronické podpis y záznamy. Veškeré činnosti provedené programem jsou průběţně zaznamenávány formou globálních revizních stop a formou Historie, takţe Administrátor programu můţe následně dohledat, kdo, kdy a co v software/databázi prováděl. Software se dodává ve dvou jazykových verzích: české a anglické. Je doplněn systémem Instrukcí a Nápovědy, Uţivatelskou příručkou, Příručkou řešených příkladů a Funkční specifikací poţadovaného počítačového systému. 1.3 POŢADAVKY ISO/IEC 17 025:2001 1.3.1 VALIDACE METOD Dle ISO/IEC 17 025:2001 je validace definována jako „Potvrzení zkoumáním a poskytnutí objektivního důkazu, že jsou jednotlivé požadavky pro zamýšlené použití splněny“. Norma dále uvádí, ţe v důsledku potřeby potvrzení vhodnosti metod pro zamýšlené pouţití musí laboratoř validovat nenormalizované metody, laboratoří navrţené/vyvinuté metody, normalizované metody pouţívané mimo zamýšlený rozsah a normalizované metody rozšířené anebo modifikované. Rozsah validace je dán nezbytností splnění potřeb týkajících se daného pouţití nebo oblasti pouţití. Laboratoř musí zaznamenat získané výsledky, postup pouţití pro validaci a prohlášení, zda metoda vyhovuje zamýšlenému pouţití. Validace můţe zahrnovat postupy vzorkování, manipulaci a přepravu. Techniky pouţívané pro stanovení způsobilosti metody mají dle potřeby zahrnovat všechny nebo některé z následujících postupů: - kalibrace s pouţitím referenčních etalonů nebo referenčních materiálů - srovnání dosahovaných výsledků s ostatními metodami - mezi-laboratorní porovnání - systematické posouzení faktorů ovlivňujících výsledky - posouzení nejistoty výsledků na základě vědecké znalosti teoretických principů metody a praktických zkušeností Pokud jsou provedeny nějaké změny ve validovaných nenormalizovaných metodách, pak vliv těchto změn má být dokumentován a má být provedena nová validace. Rozsah a přesnost hodnot, které lze získat z validovaných metod (např. nejistota výsledků, mez detekce, selektivita metody, linearita, meze opakovatelnosti a reprodukovatelnosti, robustnost vůči vnějším vlivům nebo koeficienty citlivosti vůči ovlivnění způsobenému matricí poloţek zkoušení) tak, jak byly posouzeny pro zamýšlené pouţití, musí odpovídat potřebám zákazníků. Validace zahrnuje specifikaci poţadavků, stanovení charakteristik metod, kontrolu, ţe poţadavky mohou být splněny pouţitím metody a prohlášení o platnosti. S vývojem metody mají být postupně prováděna řádná přezkoumání za účelem ověření, ţe potřeby zákazníka jsou stále splněny. Mají být schváleny a potvrzeny změnové poţadavky vyţadující modifikaci plánu vývoje. Validace je dána vţdy rovnováhou mezi náklady a technickými moţnostmi. Je mnoho případů, kdy rozsah validace a nejistota určitých hodnot (např. přesnosti, meze detekce, selektivity, linearity, opakovatelnosti,


10/106 reprodukovatelnosti, robustnost a koeficienty citlivosti) můţe být dána pouze zjednodušeným způsobem z důvodu nedostatku informací. 1.3.2 ODHADOVÁNÍ NEJISTOT K odhadování nejistot norma ISO/IEC 17 025:2001 uvádí, ţe kalibrační laboratoř nebo zkušební laboratoř provádějící vlastní kalibrace musí mít a pouţívat pro všechny tyto kalibrace postup pro odhad nejistoty měření. Zkušební laboratoře musí mít a pouţívat postupy pro odhad nejistoty měření. V určitých případech můţe povaha zkušební metody vylučovat přesné, metrologicky a statisticky oprávněné výpočty nejistoty měření. V těchto případech se musí laboratoř přinejmenším pokusit identifikovat všechny sloţky nejistoty a udělat přiměřený odhad nejistoty a zajistit, aby forma uvádění výsledků nevzbuzovala nesprávnou představu o hodnotě nejistoty. Přiměřený odhad musí být zaloţen na znalosti provedení metody a na rozsahu měření a musí vyuţívat např. údajů o validaci a předchozích zkušeností. Stupeň důslednosti potřebný pro odhad nejistoty měření záleţí na faktorech jako jsou: - poţadavky na zkušební metody - poţadavky zákazníka - existence úzkého rozmezí, na němţ je zaloţeno rozhodování o shodě se specifikací. Laboratoř musí zváţit, zda naplnila poţadavky normy tím, ţe se drţela uznávané zkušební metody a instrukcí týkajících se uvádění výsledků v případech, kdy jsou v této metodě stanoveny meze hlavních zdrojů nejistot měření a forma uvádění vypočtených výsledků. Při odhadování nejistoty měření musí být za pouţití příslušných metod analýzy vzaty v úvahu všechny sloţky nejistoty, které jsou v dané situaci důleţité. Zdroje podílející se na nejistotách zahrnují pouţívané referenční etalony a referenční materiály, pouţívané metody a zařízení, podmínky prostředí, vlastnosti a stav poloţek, které jsou kalibrovány, a osobu zkoušku nebo kalibraci provádějící (nejsou však pouze na výčet omezeny). Při odhadu nejistoty měření zpravidla není brána v úvahu předpověď dlouhodobého chování poloţky zkoušky nebo kalibrace. Další informace viz. ISO 5725 a Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement. 1.3.3 VALIDACE SOFTWARE Norma ISO/IEC 17 025:2001 uvádí, ţe jsou-li pro získávání, zpracování, zaznamenávání, vydávání, ukládání nebo vyhledávání údajů o zkouškách a kalibracích pouţívány počítače nebo automatizovaná zařízení, pak laboratoře musí zajistit, aby: a) softwarové vybavení vyvinuté uţivatelem bylo dostatečně podrobně zdokumentováno, vhodně validováno a vhodné k pouţití b) byly stanoveny a zavedeny postupy pro ochranu dat; takové postupy musí zahrnovat věrohodnost a důvěryhodnost vstupních údajů nebo jejich sběr, ukládání údajů a jejich zpracování (ale neomezují se na tento výčet) c) počítače a automatizovaná zařízení byla udrţována za účelem zajištění řádné funkce a byly zajištěny pracovní podmínky a podmínky prostředí nezbytné k udrţení věrohodnosti zkušebních a kalibračních údajů. Pozn.: komerční software (jako jsou např. textové editory, databáze a statistické programy), který je v rámci stanoveného rozsahu pouţití, můţe být povaţován za dostatečně validovaný. Nicméně konfigurace a modifikace software mají být validovány. Detailní informace k validaci software lze najít v: - GAMP 4: Guide for Validation of Automated Systems, ISPE, prosinec 2001 - General Principles of Software Validation; Final Guidance for Industry and FDA Staff: FDA – CDRH, 11.1. 2002 - Good Practices for Computerized Systems in Regulated “GXP” Environments: PIC/S, Draft, 14.1. 2002. 1.3.4 MĚŘIDLA V LABORATOŘI Laboratoř musí být vybavena všemi prostředky pro vzorkování, měřicím a zkušebním zařízením poţadovaným pro správné provádění zkoušek nebo kalibrací (včetně vzorkování, přípravy poloţek zkoušení nebo kalibrace, zpracování a analýzu údajů ze zkoušení nebo kalibrací). Kdyţ laboratoř potřebuje pouţít zařízení, které je mimo její stálou správu, pak musí zajistit, aby toto zařízení splňovalo poţadavky normy ISO/IEC 17 025.


11/106

Zařízení a jeho softwarové vybavení pouţívané při zkoušení, kalibracích a vzorkování musí být schopno dosahovat poţadované přesnosti a musí být ve shodě se specifikacemi, které se vztahují k příslušným zkouškám nebo kalibracím. Pro klíčové veličiny nebo hodnoty přístrojů musí být tam, kde mají tyto parametry významný vliv na výsledky, zavedeny kalibrační programy. Před uvedením do provozu musí být zařízení, včetně zařízení pouţívaného pro vzorkování, zkalibrováno a zkontrolováno, aby bylo zajištěno, ţe splňuje laboratoří stanovené poţadavky a vyhovuje příslušným normativním specifikacím. Zařízení musí být obsluhováno způsobilými pracovníky a k tomu oprávněnými pracovníky. Aktuální návody k pouţití a údrţbě zařízení musí být příslušným pracovníkům dostupné. Kaţdá poloţka zařízení (včetně k ní příslušejícího software, který je pouţíván při zkoušení a kalibracích), která je významná pro výsledek, musí být, je-li to moţné, jednoznačně identifikovatelná. O kaţdé poloţce zařízení, která je významná pro provádění zkoušek nebo kalibrací, musí být vedeny záznamy. Záznamy musí přinejmenším obsahovat následující informace: a) identifikace poloţky zařízení a příslušného software b) název výrobce, identifikace typu a sériové číslo nebo jinou jednoznačnou identifikaci c) kontroly, ţe zařízení je ve shodě se specifikacemi d) současné umístění, je-li to vhodné e) návody výrobce, pokud jsou k dispozici, a odkaz na jejich umístění f) údaje, výsledky a kopie kalibračních listů a záznamů tykajících se všech kalibrací, seřízení, kriterií pro přejímání a datum další kalibrace g) tam, kde je to vhodné, plán údrţby a záznamy o provedené údrţbě h) záznamy o poškození, špatné funkci, modifikacích nebo opravách zařízení 1.4 POŢADAVKY LÉKOPISU, SÚKL A FDA 1.4.1 VALIDACE METOD Český (ČL 2002), evropský (Ph.Eur.) i americký lékopis (USP) uvádí poţadavky na validaci metod. Navíc jsou poţadavky uvedeny i v:  ICH-Q2A “Text on Validation of Analytical Procedure:(1994)  ICH-Q2B “Validation on Analytical Procedures: Methodology: (1995)  CDER “Reviewer Guidance: Validation of Chromatographic Method” (1994)  CDER “Submitting Samples and Analytical Data for Method Validations” (1987)  CDER Draft “Analytical Procedures and Method Validation” (2000)  CDER “Bio-analytical Method Validation for Human Studies” (1999) Kaţdá analytická metoda pouţitá v rámci procesu registrace léčiva musí být validována a validace doloţena výsledky. Pro chromatografické metody musí být navíc vyvinuty i testy způsobilosti systému. Podobně musí být validovány i metody pouţívané na kontrolu validace čištění, na kontrolu disolučního testování a na testování stability léčiv. Validace metody je procedura, která následuje po vývoji a optimalizaci zkušební metody. Je to potvrzení a zdokumentování, ţe metoda je spolehlivá a vhodná k zamýšlenému pouţití. Typické validační charakteristiky jsou: přesnost (opakovatelnost, střední přesnost, reprodukovatelnost), správnost, selektivita/specificita, mez detekce a stanovitelnosti, linearita a rozsah, robustnost. U jednotlivých typů analytických metod (stanovení obsahu hlavní látky, stanovení nečistot, potvrzení identity, stanovení fyzikálně chemických parametrů) se doporučuje tyto charakteristiky vyhodnocovat dle následujícího schématu:


12/106

Validační parametr

Obsah hlavní látky + +

Kategorie Nečistoty Kvant. analýza Limitní testy + * + *

Fyzikální parametry + *

Přesnost Správnost Selektivita / + + + * Specificita Mez detekce + * Mez + * stanovitelnosti Linearita + + * Rozsah + + * * Robustnost + + + + Parametry označené + jsou poţadovány, parametry označené * mohou být poţadovány.

Identita + -

1.4.2 VALIDACE SOFTWARE Poţadavky na validaci software ve farmaceutickém průmyslu jsou nejvíce propracovány ve směrnici Food and Drug Administration (FDA): „General Principles of Software Validation; Final Guidance for Industry and FDA Staff”, FDA – CDRH, 11.1. 2002. Směrnice uvádí, ţe: Jakýkoliv software použitý na automatizaci jakékoliv části výrobního zařízení nebo jakoukoliv část systému řízení jakosti musí být validována pro zamýšlené použití. Validace software je potvrzení zkoumáním a poskytnutá objektivního důkazu že specifikace software vyhovuje uživateli a zamýšlenému použití, a že konkrétní požadavky implementované v software jsou splněny. Validace typicky je potvrzení, ţe všechny poţadavky byly správně a úplně implementovány a jsou v porovnání se systémovými poţadavky dohledatelné. Software se má validovat dle modelu ţivotního cyklu software, který typicky zahrnuje následující aktivity (General Principles of Software Validation; FDA):  plánování jakosti (management)  definice systémových poţadavků  detailní specifikace poţadavků na software  specifikace návrhu software (budoucí struktura)  vývoj a kódování (implementace poţadavků do zdrojového kódu)  testování (integrace a testování s cílem potvrdit shodu výsledku se specifikací)  instalace (testování instalované verze v prostředí konečného uţivatele)  pouţívání a podpora  údrţba (aktualizace, náhrada komponent, apod.)  doslouţení software Verifikace, testování a další úkoly, které podporují validační aktivity, se vyskytují v kaţdé ze zmíněných fází. 1.4.3 ELEKTRONICKÉ ZÁZNAMY A PODPISY Poţadavky na elektronické podpisy a záznamy jsou shrnuty ve Final Rule 21 CFR Part 11 amerického Úřadu pro potraviny a léčiva (FDA). V předpisu jsou shrnuta kriteria, při jejichţ splnění FDA povaţuje elektronické záznamy za ekvivalentní papírovým záznamům a elektronické podpisy ekvivalentní tradičním rukou psaným podpisům. Jelikoţ autorům software není známo, ţe originální text byl oficiálně přeloţen do češtiny, níţe je uveden text v originále The final rule provides criteria under which FDA will consider electronic records to be equivalent to paper records, and electronic signatures equivalent to traditional handwritten signatures. Part 11 (21 CFR part 11) applies to any paper records required by statute or agency regulations and supersedes any existing paper record requirements by providing that electronic records may be used in lieu of paper records. Electronic signatures which meet the requirements of the rule will be considered to be equivalent to full handwritten signatures, initials, and other general signings required by agency regulations. Section 11.2 provides that records may be maintained in electronic form and electronic signatures may be used in lieu of traditional signatures. Records and signatures submitted to the agency may be presented in an electronic form provided the


13/106

requirements of part 11 are met and the records have been identified in a public docket as the type of submission the agency accepts in an electronic form. Unless records are identified in this docket as appropriate for electronic submission, only paper records will be regarded as official submissions. Section 11.3 defines terms used in part 11, including the terms: Biometrics, closed system, open system, digital signature, electronic record, electronic signature, and handwritten signature. Section 11.10 describes controls for closed systems, systems to which access is controlled by persons responsible for the content of electronic records on that system. These controls include measures designed to ensure the integrity of system operations and information stored in the system. Such measures include: (1) Validation; (2) the ability to generate accurate and complete copies of records; (3) archival protection of records; (4) use of computer-generated, time-stamped audit trails; (5) use of appropriate controls over systems documentation; and (6) a determination that persons who develop, maintain, or use electronic records and signature systems have the education, training, and experience to perform their assigned tasks. Section 11.10 also addresses the security of closed systems and requires that: (1) System access be limited to authorized individuals; (2) operational system checks be used to enforce permitted sequencing of steps and events as appropriate; (3) authority checks be used to ensure that only authorized individuals can use the system, electronically sign a record, access the operation or computer system input or output device, alter a record, or perform operations; (4) device (e.g., terminal) checks be used to determine the validity of the source of data input or operation instruction; and (5) written policies be established and adhered to holding individuals accountable and responsible for actions initiated under their electronic signatures, so as to deter record and signature falsification. Section 11.30 sets forth controls for open systems, including the controls required for closed systems in § 11.10 and additional measures such as document encryption and use of appropriate digital signature standards to ensure record authenticity, integrity, and confidentiality. Section 11.50 requires signature manifestations to contain information associated with the signing of electronic records. This information must include the printed name of the signer, the date and time when the signature was executed, and the meaning (such as review, approval, responsibility, and authorship) associated with the signature. In addition, this information is subject to the same controls as for electronic records and must be included in any human readable forms of the electronic record (such as electronic display or printout). Under § 11.70, electronic signatures and handwritten signatures executed to electronic records must be linked to their respective records so that signatures cannot be excised, copied, or otherwise transferred to falsify an electronic record by ordinary means. Under the general requirements for electronic signatures, at § 11.100, each electronic signature must be unique to one individual and must not be reused by, or reassigned to, anyone else. Before an organization establishes, assigns, certifies, or otherwise sanctions an individual’s electronic signature, the organization shall verify the identity of the individual. Section 11.200 provides that electronic signatures not based on biometrics must employ at least two distinct identification components such as an identification code and password. In addition, when an individual executes a series of signings during a single period of controlled system access, the first signing must be executed using all electronic signature components and the subsequent signings must be executed using at least one component designed to be used only by that individual. When an individual executes one or more signings not performed during a single period of controlled system access, each signing must be executed using all of the electronic signature components. Electronic signatures not based on biometrics are also required to be used only by their genuine owners and administered and executed to ensure that attempted use of an individual’s electronic signature by anyone else requires the collaboration of two or more individuals. This would make it more difficult for anyone to forge an electronic signature. Electronic signatures based upon biometrics must be designed to ensure that such signatures cannot be used by anyone other than the genuine owners. Under § 11.300, electronic signatures based upon use of identification codes in combination with passwords must employ controls to ensure security and integrity. The controls must include the following provisions: (1) The uniqueness of each combined identification code and password must be maintained in such a way that no two individuals have the same combination of identification code and password; (2) persons using identification codes and/or passwords must ensure that they are periodically recalled or revised; (3) loss management procedures must be followed to de-authorize lost, stolen, missing, or otherwise potentially compromised tokens, cards, and other devices that bear or generate identification codes or password information; (4) transaction safeguards must be used to prevent unauthorized use of passwords and/or identification codes, and to detect and report any attempt to misuse such codes; (5) devices that bear or generate identification codes or password information, such as tokens or cards, must be tested initially and periodically to ensure that they function properly and have not been altered in an unauthorized manner.


14/106

KAPITOLA

2 VYBAVENÍ, DODÁVKA, INSTALACE, SPUŠTĚNÍ, PŘÍSTUPOVÉ OPRÁVNĚNÍ Tato kapitola obsahuje:    

souhrn poţadavků na potřebné vybavení hardware a software informace o dodávce a instalaci software popis spuštění programu popis ověření uţivatele - přístupové oprávnění a heslo

2.1 POTŘEBNÉ VYBAVENÍ Procesor: RAM paměť: Volná paměť na HD: Rozlišení obrazovky: Operační systém: Paralelní port: Nainstalovaný protokol:

Pentium 200 (minimálně), Pentium 400 a vyšší (doporučeno) 32 MB (minimálně), 128 MB (doporučeno) 28 MB na software, cca +100 MB na databázi 800 x 600 pixelů (minimálně) Windows 98, ME, NT (se Service Pack 5), 2000 nebo XP obousměrný TCP/IP

2.2 DODÁVKA A INSTALACE PROGRAMU Program se dodává na instalačním CD a je chráněn proti nelegálnímu kopírování softwarovým (SW) nebo hardwarovým (HW) klíčem. Součástí dodávky je tato Uživatelská příručka s Tutoriálem a Příručka řešených příkladů. Potřebné instalační komponenty: Plná jednouţivatelská verze: - Programové soubory - Nápověda - Firebird server - Firebird client - Database Síťová instalace – server (obr. Obr. 2.1) - Programové soubory - Nápověda - Firebird server - Database Síťová instalace – klient (obr. Obr. 2.1) - Programové soubory - Nápověda - Firebird client Pozor: soubory Database se nesmí při “Síťové instalaci – klient” instalovat!

Obr. 2.1: Instalační komponenty

Detailní informace o Firebird database engine včetně licenčního ujednání jsou k dispozici na www.ibphoenix.com


15/106 Postup při instalaci programu: - vloţte instalační CD do CD mechaniky, případně pouţijte staţenou z internetu - z instalačního CD se spustí auto-start, jinak spusťte soubor Setup.exe. Otevře se úvodní instalační okno, kde je moţno zvolit jazyk: anglicky nebo česky a poţadovanou akci: instalaci, otevření okna dokumentace nebo kontakt, nebo zavření instalačního okna. Zvolte Czech a kliknete na Instalace. Otevře se záloţka instalace s doporučením ukončit veškeré běţící aplikace a úvodní informací. Klikněte na tlačítko Instalace EffiValidation, které otevře okno Setup – EffiValidation. Průvodce Vás provede celou instalací. Postup je následující  v okně Setup – EffiValidation klikněte na Další (Next)  čtěte pozorně podmínky Licenčního ujednání Licence Agreement. Vyberte “Souhlasím s podmínkami ujednání (I accept the agreement)” a klikněte na Další (Next) pokud souhlasíte s licenčními podmínkami. Jinak vyberte “Nesouhlaím s licenčními podmínkami (I do not accept the agreement)” a ukončete instalaci.  Zvolte cílový adresář (Select Destination Directory) kam chcete software EffiValidation nainstalovat. Defaultně C:\Program files\EffiValidation 3.0. Potom klikněte na Další (Next)  Vyberte komponenty (Select Components) které se mají nainstalovat. Nejprve vyberte mezi: Plná (jednouţivatelská) instalace, Serverová instalace, Klientská instalace (databáze na serveru) a Uţivatelská instalace. Pokud je to nutné, upravte výběr komponent které se mají instalovat. Pokud jste připraveni k instalaci, klikněte na Další (Next).  okno start adresáře (Start Menu Folder), default EffiValidation 3.0  ostatní úkoly (Select Additional Tasks), další ikony a HW klíč  otevře se okno Připraven k instalaci (Ready to Install) shrnující vloţené informace. Pro pokračování instalace klikněte na Instalovat (Install).  Software je nainstalován.  otevře se okno Dokončení instalace. Musíte restartovat počítač. Vyberte Ano a restartujte okamţitě, nebo Ne a restartu je později. Po instalaci software EffiValidation 3.0 se vytvoří programová skupina, obsahující následující poloţky: EffiValidation 3.0, EffiValidation na Webu, Nápověda a Odinstalování. 2.3. SPUŠTĚNÍ PROGRAMU Kliknutím na ikonu EffiValidation 3.0 na Ploše, nebo postupným kliknutím na Start > Programy > EffiValidation 3.0 a ikonu EffiValidation 3.0 se spustí program. Otevře se okno Ověření uţivatele (viz. Kap. 2.4). V tomto okně uţivatel musí zadat Uţivatelské jméno a Heslo. Výchozí Uţivatelské jméno a Heslo je admin a admin a můţe být kdykoliv změněno z menu Nástroje > Seznam uţivatelů programu. Pokud jsou vloţené údaje správné, otevře se hlavní programové okno EffiValidation 3.0, následované oknem Tiky a triky. Menu v okně EffiValidation 3.0 umoţňuje pracovat s analytickými metodami v databázi, vkládat data, vyhodnocovat výsledky a zobrazovat a tisknout výsledky a grafy. Uţivatel také můţe vkládat a editovat záznamy v elektronických knihách (Knize vzorků, specifikací, měřidel, dokumentů, odchylek a reklamací, kontaktů, referenčních standardů, chemikálií a odměrných roztoků). Pokud se spuštění programů nezdaří, protoţe nelze navázat připojení k databázi, objeví se následující chybové hlášení: „Chyba při připojování k databázi. I/O error for file C:\Program files\EffiValidation 3.0\EV.GDB. Error while trying to open file. Systém nemůţe nalést uvedený soubor” Chybné připojení můţe být způsobeno dvěma důvody: (a) databáze není k dispozici, protoţe daná instalace je Serverová – klient instalace. V daném případě je třeba do otevřeného okna Nastavení připojení zadat: * Jméno serveru - jméno nebo IP adresa serveru, kde je umístěna databáze, ke které se chce připojit * Databáze - cesta k databázi na serveru, napr. C:\Program files\EffiValidation 3.0\Ev.gdb * Protokol - název protokolu který má být pouţit, např. TC/IP Klikněte na Uložit. (b) na serveru neběţí správně databázový Firebird Guardian. V tomto případě musí být spustěn přes „Tento počítač > Panel nástrojů > Firebird Servis Manager, kde musí být zaškrtnuty všechny checkboxy: * Autostart Firebird Server in Windows startup * Run Firebird as service * Use Firebird Guardian


16/106

Obr. 2.2: okno Firebird Service Manager

2.4. PŘÍSTUPOVÉ OPRÁVNĚNÍ EffiValidation 3.0 je chráněn proti neoprávněnému pouţití systémem přístupových oprávnění, tj. Jménem uţivatele a Heslem Program o čtyřech úrovních: SYSTÉMOVÝ ADMINISTRÁTOR: odpovídá za instalaci a konfiguraci software. Je to jediný uţivatel s přístupem do okna Manaţer databází a Politika hesel a elektronického podpisu. SOFTWAROVÝ ADMINISTRÁTOR: můţe editovat a prohlíţet veškerá data a povolovat/zamezovat přístup jednotlivých uţivatelů k Analytickým metodám (Seznam metod > Práva) a ostatním funkcím software. Softwarový administrátor také má přístup do Seznamu uţivatelů (Nástroje > Seznam uživatelů programu) coţ mu dovoluje definovat uţivatelská jména a hesla. Dále má přístup do okna Databáze (Nástroje > Databáze), kde můţe Zálohovat a Obnovovat data. Administrátor je obvykle vedoucí laboratoře, pracovní skupiny nebo manaţer jakosti. UŢIVATEL: můţe editovat data u Analytických metod, které pod daným uţivatelským Jménem a Heslem vytvořil a u metod, ke kterým má Administrátorem povolen přístup. HOST: můţe prohlíţet ta data, ke kterým má Administrátorem povolen přístup. Při kaţdém spuštění programu se otevře okno Ověření uţivatele. Pokud je zadané Uţivatelské jméno a Helso správné, spustí se software EffiValidation 3.0. Jinak dojde k ukončení programu.

Obr. 2.3: okno Ověření uţivatele Software EffiValidation 3.0 je dodávám s před-definovaným výchozím administrátorským jménem a heslem. Jména a Hesla dalších uţivatelů lze definovat z menu Nástroje > Seznam uživatelů programu > Nový.

2.5. 21 CFR PART 11 Program EffiValidation 3.0 je vybaven nástroji, umoţňujícími splnit poţadavky 21 CFR Part 11: - přístupová práva (viz. 2.4) - automaticky generované globální revizní stopy a historie elektronických záznamů (viz. 9.12) - jedinečné bezpečné elektronické podpisy (viz. 9.9) - schopnost zobrazení smazané záznamy, tj. koš záznamů (viz. 4.3)


17/106 Globální revizní stopy a Historie konzistentně zaznamenávají Jméno uţivatele, Název počítače, Datum a Čas vloţení dat, editace dat a provádění operací se software. Veškerá data vloţená a uloţená v software jsou uskladněna v databázi, záznamy o pouţití software jsou uloţeny v Historii, bez jakékoliv moţnosti změnit, přepsat, nebo smazat zaznamenané informace. Data smazaná pomocí příkazu Vyjmout jsou uloţena v koši, odkud mohou být zobrazena a obnovena. Okno Historie můţe být kdekoliv v software (v okně Seznam metod, Tabulce dat, elektronických knihách, atd.) otevřeno kliknutím na tlačítko Historie. Vzhled okna otevřeného z okna Historie je stejný jako v čase vytvoření záznamu.


18/106

KAPITOLA

3 OVLÁDÁNÍ PROGRAMU, MENU A IKONY Tato kapitola obsahuje:   

základní popis ovládání programu EffiValidation 3.0 popis hlavního programového okna EffiValidation 3.0 informace o menu a ikonách a jejich základní výčet

3.1 OVLÁDÁNÍ PROGRAMU Program se ovládá podobně jako ostatní programy v prostředí Windows. Základním prvkem jsou okna, která se liší určením a moţnostmi. Kaţdé okno obsahuje v levém horním rohu ikonu programu a název okna, v pravém rohu minimalizační tlačítko, maximalizační tlačítko a tlačítko k uzavření okna bez varování. Pro rychlou práci s okny lze vyuţít kombinace kláves standardně pouţívaných ve Windows: + přepínání mezi okny všech spuštěných aplikací a + - uzavření aktuálního okna bez varování. 3.2 HLAVNÍ PROGRAMOVÉ OKNO Po zadání Jména uţivatele a Hesla v okně Ověření uţivatele (viz. 2.4) se otevře hlavní programové okno EffiValidation 3.0:

Obr. 3.1: hlavní programové okno EffiValidation 3.0 Toto okno od shora dolů ukazuje: ikonu a název programu, hlavní menu, Aktuální analytickou metodu, panel ikon (v levé části okna), informační panel (v pravé části okna) a stavový řádek programu. Aktuální analytická metoda ukazuje klíč Analytické metody (viz 4.2), která se aktuálně vyhodnocuje. Na pravé straně stejného řádku je zobrazena ikona Nastavení klíče metody, která otevírá okno Nastavení klíče metody.


19/106

Obr. 3.2: okno Nastavení klíče metody Ikony vlevo pod Aktuální analytickou metodou umoţňují uţivateli pouţít některé funkce programu bez nutnosti otevření hlavního menu (viz. 3.3). Informační panel obsahuje záloţky Vítejte v EffiValidation 3.0, Kontakt v nesnázích, Nástěnka, Validační zpráva (zpráva z Operační kvalifikace instalované verze). Stavový řádek v dolní části okna EffiValidation 3.0 zobrazuje verzi software (build), datum, Jméno uţivatele aktuálně pouţívajícího software a číslo HW klíče. 3.3 MENU, IKONY A INFORMAČNÍ PANEL Hlavní programové okno EffiValidation 3.0 obsahuje následující menu: Analytické metody

Validace

Mezilaboratorní porovnání

QC nástroje

Evidenční knihy

Nástroje

Nápověda

Jednotlivé poloţky menu jsou detailně popsány v následujících kapitolách Uţivatelské příručky. Základem software je databáze analytických metod, které se validují, vyhodnocují se pro ně mezilaboratorní testy, vytvářejí kalibrační modely, vedou regulační diagramy a odhadují nejistoty. Proto je poloţka Analytické metody první v hlavním menu. Validace, Mezilaboratorní porovnání a QC nástroje jsou poloţky, pomocí kterých lze provádět veškeré výpočty. Evidenční knihy jsou určeny k vedení laboratorní evidence (Kniha vzorků, Kniha měřidel, Kniha dokumentů, atd.). Poloţky menu Nástroje dovolují provádět IQ/OQ, nastavit uţivatelsky definovatelné parametry pro Data a Výpočty, řídit Seznam uţivatelů a Databázi, a nastavit politiku hesel. Menu uzavírá Nápověda. Na panelu ikon, tj. v levé části hlavního okna EffiValidation 3.0 jsou umístěny následující ikony, umoţňující přímo spustit klíčové funkce software (čímţ se eliminuje nutnost pouţívat hlavní menu): Seznam metod Průzkumová validace Plná validace HPLC – FDA HPLC – PhEur Regulační diagramy Kalibrace Nejistoty Operační kvalifikace Kniha vzorků Kniha měřidel Kniha dokumentů Funkce reprezentované uvedenými ikonami mohou být spuštěny dvojím kliknutím na danou ikonu. Na Informačním panelu, tj. na pravé straně hlavní okna EffiValidation 3.0 jsou obsaţeny následující záloţky: Vítejte v EffiValidation 3.0 (viz Obr. 3.1) Kontakt v nesnázích Nástěnka Validační zpráva (zpráva z OQ software, viz. kap. 9.2)


20/106

KAPITOLA

4 ANALYTICKÉ METODY Tato kapitola obsahuje témata:     

menu Analytické metody v hlavním programovém okně EffiValidation 3.0 okno Nová metoda okno Seznam metod ukončení práce s Aktuální analytickou metodou ukončení práce s programem EffiValidation 3.0

4.1 DATABÁZE ANALYTICKÝCH METOD Základem programu EffiValidation 3.0 je databáze analytických metod, které se validují, vyhodnocují se pro ně mezilaboratorní testy, vytvářejí a pouţívají kalibrační modely, vedou regulační diagramy a odhadují nejistoty. Jelikoţ analytická metoda je základem celého programu, je poloţka Analytické metody první poloţkou v menu. Zahrnuje následující moţnosti: Nová metoda - definice nové Analytické metody (viz. obr. níţe) Seznam metod - práce se Seznamem metod v databázi (viz. kap. 4.3) Zavřít metodu - zavře Aktuální analytickou metodu pro daného uţivatele Konec programu - ukončí program EffiValidation 3.0 (návrat do Windows)

4.2 NOVÁ METODA Kliknutím na poloţku Nová metoda se otevře okno Nová metoda. Kaţdá metoda v databázi EffiValidation 3.0 je charakterizována jedinečným KLÍČem, sloţeným z 6 poloţek: Materiál (matrice) – Projekt - Pouţitá metoda Série – Datum – Číslo m.

Obr. 4.1: okno Nová metoda


21/106 Poloţky KLÍČE charakterizují danou metodu a mají následující význam: Materiál - název materiálu nebo matrice, v němţ se Validovaná vlastnost Pouţitou metodou stanovuje. Příklad: Pitná voda Projekt - název projektu. Příklady: Amphetaminy a Metabolity, Dusicnany a dusitany, apod. Pouţitá metoda - typ pouţité analytické metody. Příklad: GC, HPLC, UV, atd. Série - pomocné číslo (1 aţ 9) určené k třídění Metod v Seznamu metod. Příklad: 1. Číslo m. - identifikační číslo, které má metoda přiděleno v laboratorní evidenci. Příklad: M.0025, CH.0003, apod. Datum - datum charakteristické pro danou metodu. Standardně Datum vloţení Metody do databáze. Příklad: 5.5. 2003. Uţivatel můţe zadat údaje do tří doplňkových poloţek Verze - verze metody. Příklad: 1.0 nebo 1979 Norma - odkaz na normu, pokud jde o normovanou metodu. Příklad: ČSN ISO 4182:1979. Analytik - jméno a příjmení analytika. Příklad: Jan Novák 4.2.1 VALIDOVANÁ VLASTNOST Pod poloţkami metody je zobrazen seznam Validovaných vlastností: Validovaná vlastnost - Validovaná vlastnost popsána níţe. Například: 4-hydroxyamphetamine nebo NO3-, apod. Vkládání a editace Validované vlastnosti se provádí s pomocí tlačítek Nová, Opravit, Vyjmout a Uložit je popsáno níţe Poznámka - uţivatelská poznámka k dané Validované vlastnosti Vloţení Nové a Oprava údajů u existující Validované vlastnosti se provádí v okně Validovaná vlastnost. Uţivatel můţe zadat název Validované vlastnosti (analytu) a Poznámku (v záloţce Obecné, viz obr. 4.2.a), např. 4-hydroxyamphetamine:

Obr. 4.2.a: okno Validovaná vlastnost, záloţka Obecné Uţivatel můţe také specifikovat, ve kterých výpočetních algoritmech bude daná Validovaná vlastnost zobrazena a ve kterých nebude. Toto se specifikuje v záloţce Zobrazit v algoritmech, viz. Obr. 4.2.b. Defalutně je Validovaná vlastnost zobrazena ve všech algoritmech:

Obr. 4.2.b: okno Validovaná vlastnost, záloţka Zobrazit v algoritmech Po zadání veškerých dat pro novou Validovanou vlastnost (viz. obr. 4.2) klikněte na tlačítko Uložit, čímţ se uloţí data pro zadanou Validovanou vlastnost, okno Validovaná vlastnost se zavře a uţivatele se vrátí do okna Nová metoda. Kliknutím na Vyjmout je daná Validovaná vlastnost smazána a přenesena do koše (Validovaných vlastností. Kliknutím na tlačítko Historie se otevře okno Historie s veškerými časovými údaji týkajícími se dané Validované vlastnosti.


22/106

Obr. 4.3: okno Historie Validované vlastnosti Kliknutím na Zobrazit se otevře okno Historie Validované vlastnosti, zobrazující okno Validované vlastnosti tak, jak bylo uloţeno k danému datu a času.

Obr. 4.4: zobrazený záznam z Historie Validované vlastnosti 4.2.2 PŘÍLOHY Na záloţce Přílohy můţe uţivatel zadat Novou, Opravit stávající, Vyjmout nebo Otevřít existující Přílohu.

Obr. 4.5: okno Karta přílohy Popis Cesta

- popis přílohy, např. SOP pro metodu CH.0003 - cesta k souboru na disku, dovolující Otevřít přílohu z prostředí programu

Jakmile je validace metody dokončena a jsou dosaţeny uspokojivé výsledky, je moţno zapsat k metodě Prohlášení k metodě potvrzující, ţe metoda je vhodná k zamýšlenému pouţití, případně Poznámku, týkající se metody. 4.3 SEZNAM METOD V okně Seznam metod lze s metodami pracovat:

Obr. 4.6: okno Seznam metod


23/106 Radiobuttony Vše, Tento měsíc, Tento týden, Dnes, Období od.....do...... umoţňují filtrovat a zobrazovat Analytické metody ze Seznamu metod podle časového období Checkbox „Zobrazit koš“ v levé horní části okna Seznam metod zobrazí Seznam metod, které byly z aktuálního Seznamu metod odstraněny a jsou umístěny v koši. Tlačítka na pravé straně okna Seznam metod mají následující význam: Zavřít - zavření okna Seznam metod Nová - otevření okna Nová metoda a zadání údajů pro novou metodu (viz 4.2) Opravit - editace údajů pro zvolenou metodu, vybranou v Seznamu metod kurzorem Vyjmout - vratné vyjmutí zvolené metody ze Seznamu metod do koše. Po odpovědi „Ano“ na dialogovou otázku „Opravdu chcete vyjmou tuto metodu“ je metoda přemístěna z aktuálního Seznamu metod do koše, odkud můţe být opět Obnovena Aktualizovat - aktualizace Seznamu metod, tj. zobrazení všech metod, včetně vloţených v mezičase jinými uţivateli při provozu software v síti Použít - výběr označené metody ze Seznamu metod jako Aktuálně vyhodnocované metody, tj. metody která je statisticky vyhodnocována Práva - udělení přístupových práv k jednotlivým Analytickým metodám v databázi (viz. 4.3.3.) Tisk - tisk vybrané Analytické metody nebo Seznamu metod, zobrazení Náhledu, nebo Úprava tiskového formuláře pro tisk Metody/Seznamu metod (viz. 4.3.1) Historie - zobrazení Historie dané Metody (viz 4.2) Export - export Seznamu metod a Uložení jako souboru TXT, CSV nebo XLS Legenda - checkbox umoţňující zobrazit/skrýt Legendu v okně Seznam metod Legenda a záznamy v Seznamu metod jsou odlišeny barevně: černě jsou zobrazeny metody vytvořené uţivatelem s aktuálně pouţívaným uţivatelským jménem, červeně jsou zobrazeny sdílené metody, tj. metody přístupné aktuálnímu uţivateli, ale vytvořené jinými uţivateli a šedě jsou zobrazeny metody nepřístupné pro daného uţivatele Záznamy lze Třídit a Vyhledávat podle kterékoliv poloţky Klíče metody: třídit (vzestupně nebo sestupně) lze kliknutím na záhlaví daného sloupce (např. Číslo m., viz. obr. 4.6, kde směr třídění je označen šipkou nahoru nebo dolů); vyhledávat lze kliknutím na záhlaví daného sloupce a zápisem řetězce hledaných znaků z klávesnice např. kliknutím na záhlaví sloupce Pouţitá metoda a zápisem HPLC. Data pro vyhodnocení validačních parametrů se vkládají z menu Validace. Data pro vyhodnocování mezilaboratorních porovnání z menu Mezilaboratorní porovnání a data pro Kalibrace, Regulační diagramy a Nejistoty z menu QC nástroje. 4.3.1 TISK Tisk metody Tisk seznamu metod Náhled Upravit formulář

- tisk informací k Metodě (viz 4.2) zvolené v Seznamu metod - tisk Seznamu metod viz. kap. 4.3 a obr. 4.6 - Náhled pře tiskem Metody nebo Seznamu metod - editace tiskového formuláře pro tisk Metody nebo Seznamu metod (detaily týkající se úprav tiskových formulářů jsou uvedeny v kap. 5.2.4.)

4.3.2 HISTORIE Pro kaţdou Analytickou metodu se zaznamenává historie. Okno Historie zobrazuje Datum záznamu, Čas záznamu, Číslo metody, název Projektu, kdo Vytvořil resp. změnil záznam, El. podpis a jeho důvod a Název počítače, kde byl záznam vytvořen.

Obr. 4.7: okno Historie Analytické metody


24/106 Kliknutím na Zobrazit v okně Historie se otevře okno analytické metody, tak jak bylo vyplněno v době daného historického záznamu

Obr. 4.8: okno Historie analytické metody 4.3.3 PRÁVA (K METODĚ) Všichni administrátoři (viz. 2.4 a 9.5) mají automaticky přístup ke všem metodám zobrazeným v Seznamu metod. Přístupová práva Uţivatelů a Hostů k jednotlivým metodám jsou řízena z okna Definice práv k metodě. V tomto okně administrátor můţe zaškrtnutím checkboxu před jménem daného Uţivatele nebo Hosta definovat, zda metoda má (pak je zobrazena červěně), nebo nemá (pak je zobrazena šedě) být danému uţivateli přístupná.

Obr. 4.9: okno Definice práv k metodě 4.3.4 EXPORT Export metod ze Seznamu metod to TXT, CSV nebo XLS formátu:

Obr. 4.10: okno Export z okna Seznam metod


25/106 Uloţit do Název souboru Uloţit jako typ

- název cílového adresáře, kam se vyexportovaný soubor uloţí - název souboru s vyexportovaným seznamem metod - typ vyexportovaného souboru, tj. TXT, CSV nebo XLS

4.4 UKONČENÍ PRÁCE S METODOU A S PROGRAMEM Kliknutím na Zavřít aktuální metodu v menu Analytické metody se ukončí vyhodnocování Aktuální analytické metody daným uţivatelem. Kliknutím na Konec programu se ukončí program EffiValidation 3.0.


26/106

KAPITOLA

5 VALIDACE Tato kapitola popisuje:    

druhy validací uvaţované v EffiValidation vkládání a manipulaci s daty v Tabulce dat metody a postupy vyhodnocení jednotlivých validačních parametrů obvyklý rozsah vyhodnocení validačních parametrů

5.1 DRUH VALIDACE 5.1.1 VÝBĚR VYHODNOCOVACÍ METODY (VALIDAČNÍHO PARAMETRU) Pro zvolenou Analytickou metodu se poţadovaný druh validace vybere z menu Validace nebo kliknutím na odpovídající ikonu z Hlavního programového okna EffiValidation. V takto otevřeném okně se vybere poţadovaný validační parametr, resp. konkrétní algoritmus Průzkumová

Plná

Kontrola způsobilosti systému

Převod metody

Retrospektivní

- předběţná validace Analytické metody, která je kandidátem na Plnou validaci. Vyhodnocení parametrů, které mohou validaci metody nejpravděpodobněji ohrozit, tj.: - Selektivita - Robustnost - Opakovatelnost - kompletní validace metody spočívající ve vyhodnocení všech validačních parametrů na reprezentativním počtu vzorků o dostatečném počtu měření - Opakovatelnost - Reprodukovatelnost - Robustnost - Správnost - Selektivita - Citlivost - Linearita - Meze detekce a stanovitelnosti - Rozsah Plná validace se buď provádí po úspěšném ukončení průzkumové validace nebo se bere jako standardní volba - kontrola, ţe dříve „Plně“ zvalidovaná metoda nadále poskytuje výsledky srovnatelné s výsledky z plné validace. Běţně vyhodnocované parametry: - Linearita (ověření linearity detektoru) - Citlivost (ověření kalibrační přímky) - Slepý pokus (ověření odezvy slepého pokusu) - typ validace, při které se ověřuje buď (1) shoda výsledků získaných ve vývojové a přijímací laboratoři při transferu metody, nebo (2) shoda výsledků dané laboratoře s normou, přičemţ v normě jsou uvedena kriteria na opakovatelnost, linearitu, mez detekce a stanovitelnosti, apod. Minimálně vyhodnocované parametry při převodu metody: - Správnost - Reprodukovatelnost - Opakovatelnost - validace metody na základě analýzy historických dat. Obvykle zahrnuje pouze vyhodnocení


27/106

- Opakovatelnosti - Střední přesnosti - Reprodukovatelnosti Data pro vyhodnocení ostatních parametrů většinou nejsou k dispozici Stanovení hlavní látky - validace metody na stanovení hlavní látky tak, jak se doporučuje ve farmacii (ČL97, Ph.Eur., FDA). Zahrnuje vyhodnocení: - Opakovatelnosti - Správnosti - Selektivity - Linearity - Rozsahu - Robustnosti Stanovení nečistot – kvantitativně - validace metody na stanovení hlavní látky tak, jak se doporučuje ve farmacii (ČL97, Ph.Eur., FDA). Zahrnuje vyhodnocení: - Opakovatelnosti - Správnosti - Selektivity - Meze stanovitelnosti - Linearity - Rozsahu - Robustnosti Stanovení nečistot – kvalitativně - validace metody na stanovení hlavní látky tak, jak se doporučuje ve farmacii (ČL97, Ph.Eur., FDA). Zahrnuje vyhodnocení: - Selektivity - Meze detekce - Robustnosti (- Opakovatelnosti, Správnosti, Rozsahu) HPLC – kontrola způsob. – FDA. - vyhodnocení chromatografických charakteristik při validaci HPLC metody dle poţadavků FDA: - Opakovatelnost nástřiku - Kapacitní faktor - Rozlišení - Chvostování - Počet teoretických pater HPLC – kontrola způsob. – PhEur - vyhodnocení chromatografických charakteristik při validaci HPLC metody dle poţadavků Ph.Eur.: - Počet teoretických pater - Rozlišení - Faktor symetrie Kliknutím na vyhodnocovaný druh validace, např. Plná validace, se otevře okno Plná validace, obsahující seznam parametrů a výběr metod vyhodnocení, pro plnou validaci: Opakovatelnost, Správnost, Linearita, Reprodukovatelnost, Selektivita, Meze detekce a stanovitelnosti, Robustnost, Citlivost a Rozsah:

Obr. 5.1: okno Plná validace – záloţka Výběr algoritmu


28/106 Validační parametry, resp. názvy algoritmů zobrazené tučně označují, ţe v databázi jsou vloţena data (zobrazení tučně je nastavitelné v menu Nástroje > Obecné nastavení > Při naplnění daty zobrazit parametr/metodu tučně). Kliknutím na název parametru, resp. metody (např. Opakovatelnost – Po úrovních z vícenásobného měření) se otevře okno Tabulka dat – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření, v němţ se data zadávají a vyhodnocují (viz. kap. 5.2). Kliknutím na záloţku Poznámka v okně Plná validace se otevře okno pro zápis poznámky k dané validaci. Kliknutím na záloţku Souhrnný tisk se otevře záloţka s moţností definování souhrnného tisku tiskových sestav z tiskového archívu. Pozn.: Data vloţená v rámci jednoho typu validace (např. Průzkumová) nelze nijak automaticky převést do jiné validace (např. Plné). Pokud je třeba, je nutno data mezi různými typy přenést kopírováním (Ctrl-C, Ctrl-V). 5.1.2 POZNÁMKA Tato záloţka umoţňuje zapsat poznámku týkající se (postupu) dané validace:

Obr. 5.2: okno Plná validace – záloţka Poznámka 5.1.3 SOUHRNNÝ TISK Tato funkce uţivateli dovoluje vytisknout všechny tiskové reporty uloţené pro daný validační parametr v tiskovém archivu

Obr. 5.3: okno Plná validace – záloţka Souhrnný tisk Vyberte jeden z radiobuttonů pod názvem okna, který bude definovat z čeho se bude Souhrnný tisk skládat. Moţnosti jsou: Data - vytiskne obsah oken Tabulka dat u vybraných parametrů/metod Data a vyhodnocení - vytiskne obsah oken Tabulka dat a Vyhodnocení vybraných parametrů/metod Data a graf - vytiskne obsah oken Tabulka dat a Graf vybraných parametrů/metod Vše - vytiskne obsah oken Tabulka dat, Vyhodnocení a Graf vybraných parametrů/metod


29/106 Názvy validačních parametrů/metod, pro které je v tiskovém archívu nějaký report (viz. 5.2) jsou označeny checkboxem před názvem metody. Pokud chcete obsah vybraných repotů vytisknout, zaškrtněte odpovídající checkboxy. V uvedeném případě Opakovatelnosti např.: □ Po úrovních z vícenásobného měření – 2003-9-10 Z důvodu lepší orientace v záznamech v archivu je vţdy uveden datum a čas vzniku reportu v archivu. Pozn.: tlačítko Tisk v záloţce Souhrnný tisk je nepřístupné, pokud není zaškrtnut ţádný checkbox a tudíţ není co tisknout .

5.2 TABULKA DAT Okno Tabulka dat slouţí ke vkládání a editaci dat při vyhodnocování validací (mezilaboratorních porovnání, regulačních diagramů, kalibrací a nejistot). Tabulka dat se otevírá z okna Validace (např. Plná), Mezilaboratorní porovnání, Regulační diagramy, Kalibrace nebo Nejistoty kliknutím na tlačítko s názvem zvoleného parametru/metody. Např. kliknutím na Opakovatelnost – Po úrovních z vícenásobného měření se otevře okno:

Obr. 5.4: okno Tabulka dat     

v záhlaví je název okna: Tabulka dat – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření pod záhlavím je Menu a Ikony (s plovoucí nápovědou) pod menu jsou Jednotky pro validovanou vlastnost, resp. měření. Jednotky se buď vybírají ze seznamu nebo je moţné je zapsat z klávesnice vedle jednotek jsou Doplňkové parametry (referenční přesnost, směrnice kalibrační přímky, apod.), pokud jsou pro daný validační parametr, regulační diagram či odhad nejistot potřeba (coţ není případ Opakovatelnosti) hlavní část okna tvoří vlastní tabulka. Řádky v ní odpovídají jednotlivým Úrovním validované vlastnosti (např. koncentrace = 5, 25, 50 mg/l), sloupce opakovaným Měřením na dané úrovni (např. na úrovni 5 mg/l jsou výsledky měření: 5.31, 5.01, 4.97 mg/l, atd.). Na kaţdý řádek je moţno doplnit Popis, tj. poznámku pro uţivatele, např. Odběr č., Standard č., Datum, atd. Část tabulky, která velikostí odpovídá minimálnímu, resp. doporučenému rozsahu validačního experimentu je orámována červeně/zeleně. U Opakovatelnosti: Po úrovnícz z vícenásobného měření je min. počet úrovní 1 a minimální počet opakování 2. Doporučený počet úrovní a měření je 3 a 6. Bez zadání minimálního počtu dat nelze spustit Výpočet. Velikost doporučeného rozsahu experimentu lze měnit v menu Nástroje > Data a výpočty. U některých parametrů (např. u Správnosti, Linearity, apod.) je tabulka rozšířena o sloupec Referenčních hodnot (např. Předloţeno), umístěný mezi sloupec Úroveň a Měření 1. Význam


30/106 referenčních hodnot pro jednotlivé validační parametry je uveden v Nápovědě, Instrukcích a v této Uživatelské příručce (viz. kap. 6) Podobně jako v Microsoft Excel můţe být okno Tabulka dat sloţeno z několika Listů pro jednotlivé Validované vlastnosti. Ty se definují buď v okně Seznam metod (viz. kap. 4.1) nebo z menu List (viz. kap. 5.2.1) okna Tabulka dat. Pozn.: Data vloţená v rámci jednoho typu validace (např. Průzkumová) nelze nijak automaticky převést do jiné validace (např. Plné). Pokud je třeba, je nutno data mezi různými typy přenést kopírováním (Ctrl-C, Ctrl-V). 

pod vlastní tabulkou jsou tzv. Instrukce, které slouţí jako permanentně zobrazená nápověda pro daný validační parametr/metodu. 5.2.1 MENU V OKNĚ TABULKA DAT

Menu v okně Tabulka dat obsahuje následující poloţky: List Nový list Otevřít Uloţit list Uloţit vše Uloţit jako Zavřít list Vlastnosti listu Tisk Náhled Upravit formulář Tisk do archívu Zavřít

Ctrl+N Ctrl+O Ctrl+S Ctrl+A

Úpravy Kopírovat Vloţit Vloţit úroveň Vymazat úroveň Zrušit měření

Ctrl+C Ctrl+V Ins Ctrl+Del

Transformace dat Log 2 Log 10 1/x 1/X^2 X^2 Zpět

Vyhodnocení Výpočet F5 Graf

Ctrl+P Ctrl+U

Menu List Nový list Otevřít

- otevře nový list s pořadovým číslem N+1, kde N = číslo posledního existující listu v dané metodě. Název listu lze změnit v okně Vlastnosti listu (viz. níţe v této kapitole) z menu nebo kliknutím pravým tlačítkem myši na název listu - buď vyhlásí: „Jiţ máte otevřené všechny Listy“ nebo otevře okno Otevřít list se seznamem existujících neotevřených listů k dané metodě. Z něj lze poţadovaný List vybrat kliknutím a potvrzením OK

Obr. 5.5: okno Otevřít list Uložit list Uložit vše Uložit jako Zavřít list

- po dialogové otázce: „Mají se změny provedené v Listu „název“ uložit?“ a po potvrzení „Ano“ se uloţí všechna aktuální data v daném Listu - po dialogové otázce: „Mají se změny provedené v Listu „název“ uložit?“ a po potvrzení „Ano“ se uloţí všechny otevřené listy, ve kterých došlo ke změnám dat - uloţí data do specifikovaného adresáře pod specifikovaným názvem ve formátu .TXT (oddělovač tabulátor nebo středník), .CSV nebo .XLS - zavře aktuální List. Ten lze z menu List opět otevřít kliknutím na List > Otevřít


31/106

Vlastnosti listu

- otevře okno Vlastnosti listu. V něm lze v záloţce Obecné změnit název Validované vlastnosti pro daný List, zjistit kdo a kdy List Zaloţil a kdy byla provedena jeho Poslední změna, případně zapsat Poznámku:

Obr. 5.6: okno Vlastnosti listu - záloţka Obecné V záloţce Historie měření lze Zobrazit data tak, jak jsou uloţena v Tabulce dat k určitému datu a času záznamu. Záznam do Historie se ukládá s kaţdým Uložením v okně Tabulka dat:

Obr. 5.7: okno Vlastnosti listu - záloţka Historie meření Kliknutím na tlačítko Zobrazit se otevře okno Tabulka dat – HISTORIE, ve kterém lze v záloţce s Názvem listu a v záloţce Historie porovnávat stará a aktuální data. Rozdíly (změněné buňky) oproti aktuálnímu stavu jsou v záloţce Historie označeny červeně

Obr. 5.8: okno Tabulka dat - HISTORIE Ikona „Výpočet“ (F5) v okně Tabulka dat - HISTORIE spouští výpočet s historickými daty, provedený např. z důvodu porovnání starých a aktuálních výsledků.


32/106 - aktivuje tisk obsahu aktuálně otevřeného okna. Pokud je otevřeno pouze okno Tabulka dat, tiskne se pouze obsah tohoto okna. Pokud je otevřeno také okno Výsledky a/nebo Graf, je obsah všech těchto oken zkombinován do jedné tiskové sestavy v pořadí: Data, Výsledky, Graf. Tiskovou sestavu lze vytisknout jedině kliknutím na List – Tisk z okna Tabulka dat. Tlačítka Tisk v okně Graf a Vyhodnocení umoţňují pouze tisk samotného Grafu, resp. samotných Výsledků. Detailní informace jak editovat a kombinovat tiskové sestavy jsou uvedeny v kap. 5.2.4. Náhled - zobrazí tiskový Náhled pro daný List, tj. Tabulku dat, případně Graf nebo Výsledky Upravit formulář - otevře okno s moţností editace tiskového formuláře (ReportBuilder), viz. 5.2.4. Formulář se skládá z několika sub-reportů (záloţek), dávajících dohromady výsledný formulář. Je moţno editovat umístění tiskových poloţek na stránce, typy písma, velikosti, barvy, tzn. vytvářet tzv. uţivatelské tiskové sestavy. Ke kaţdé výpočtové metodě je s programem dodán jeden standardní tiskový formulář pro tisk: Data, Vyhodnocení, Graf a kombinace Data + Graf, Data + Výsledky, Data + Výsledky + Graf Tisk do archívu - vytiskne tiskovou sestavu pro jeden validační parametr (výpočetní algoritmus) do Archívu přesně v podobě, jak je zobrazena v Náhledu. Z Archivu ji pak lze vytisknout jako část Souhrnného tisku (viz. 5.1.3) Zavřít - zavře okno Tabulka dat pro vyhodnocení daného parametru/algoritmu Tisk

Hlavní poloţky z menu List lze aktivovat také kliknutím pravým tlačítkem myši na záloţku s názvem Listu:

Menu Úpravy Kopírovat (Ctrl-C) - zkopírování označené části okna Tabulka dat do dočasné paměti, odkud je moţno ji vloţit kamkoliv (ekvivalent Ctrl-C) v aplikacích Microsoft Windows. Poţadovanou část tabulky lze označit buď z klávesnice nebo myší podobně jako např. v Microsoft Excel Vložit (Ctrl-V) - vloţení dat dříve nakopírovaných do dočasné paměti pomocí příkazu Kopírovat (Ctrl-V) na místo, kde je aktuálně umístěn kursor Vložit úroveň - vloţení prázdné úrovně v místě kursoru (včetně přečíslování úrovní). Ekvivalent Insert z klávesnice Vymazat úroveň - nevratné smazání řádku, kde je aktuálně umístěn kursor Zrušit měření - nevratné smazání sloupce, kde je aktuálně umístěn kursor a posun všech dalších sloupců o jeden sloupec vlevo Menu Transformace dat - vypočte přirozený logaritmus ze všech hodnot Měření v okně Tabulka dat - vypočte dekadický logaritmus ze všech hodnot Měření v okně Tabulka dat - vypočte převrácené hodnoty ze všech hodnot Měření v okně Tabulka dat - vypočte převrácené hodnoty kvadrátů ze všech hodnot Měření v okně Tabulka dat dat - vypočte kvadráty ze všech hodnot Měření v okně Tabulka dat - vrátí transformovaná data v okně Tabulka dat do stavu před transformací

Log 2 Log 10 1/x 1/x^2 x^2 Zpět

Menu Vyhodnocení Výpočet (F5) Graf

- provede výpočet a zobrazí okno Vyhodnocení s Výsledky - provede výpočet a zobrazí Graf pro data z zapsaná v okně Tabulka dat

5.2.2 VLASTNÍ TABULKA DAT S Tabulkou dat se pracuje obdobně jako s tabulkou u datových procesorů, např. Microsoft Excel. Základní funkce jsou následující: - tabulka můţe obsahovat více listů (max. 256), kaţdý pro jednu Validovanou vlastnost. Popis práce s Listem z menu Tabulky dat je popsána v kap. 5.2.1. - kursorem nebo myší se lze v tabulce pohybovat libovolným směrem


33/106

-

stisknutím klávesy Delete se smaţe aktuální buňka okna Tabulka dat, kde je umístěn kursor stisknutím klávesy Insert se v místě kursoru přidá řádek (úroveň) do okna Tabulka dat, a to v místě kursoru po přidání nebo vymazání úrovně se čísla úrovní automaticky aktualizují (přečíslují) při pohybu kursorem směrem dolů se v okně Tabulka dat automaticky začnou přidávat prázdné řádky na kopírování, vkládání a přenos dat mezi tabulkami lze pouţít klávesové zkratky Ctrl-C a Ctrl-V. Označování části tabulky pro kopírování je moţné stisknutím Ctrl a šipek, nebo myší. data v okně Tabulka dat lze matematicky transformovat s pomocí funkcí z menu Transformace dat (kap. 5.2.1) pouţití všech dalších funkcí na Úpravu Tabulky dat je popsáno v kap. 5.2.1

Pro jednotlivou buňku, sloupec nebo označenou část Tabulky dat lze kliknutím na pravé tlačítko myši aktivovat následující menu (funkce jsou popsány v kap. 5.2.1 – menu Úpravy):

Obr. 5.9: okno Tabulka dat – menu buňky Kopírovat

Vložit Vymazat Komentář

- zkopíruje obsah buňky, sloupec nebo označenou část tabulky do dočasné paměti (ekvivalent Ctrl-C). Následným kliknutím na Vložit nebo stisknutím Ctrl-V se obsah paměti vloţí v místě kursoru. Platí pro Tabulku dat EffiValidation i další aplikace v prostředí Microsoft Windows, tj. Poznámkový blok, Word, Excel, apod. - vloţí dříve nakopírovaný obsah (přes Kopírovat nebo Ctrl-C) uloţený v dočasné paměti v místě kursoru (ekvivalent Ctrl-V) - vymaţe označenou část Tabulky dat (ekvivalent Del) - umoţňuje vloţit nebo upravit komentář k jednotlivé buňce. Otevře dialogové okno, do kterého stačí komentář zapsat a kliknout na Uložit

Obr. 5.10: okno Komentář všechny buňky obsahující komentář jsou z důvodu snazšího dohledání označeny červeným roţkem v pravém horním rohu buňky. Jakmile se kursorem najede na buňku s komentářem, zobrazí se tento Komentář jako v Excel Odstranit komentář - odstraní existující Komentář k buňce. Označení červeným pravým horním roţkem buňky zmizí


34/106 Historie komentáře - otevře okno Historie komentáře

Obr. 5.11: okno Historie komentáře Historie ukazuje Datum a Čas záznamu do historie, kdo záznam Vytvořil resp. Změnil a Název počítače kde k vytvoření záznamu došlo. Přílohy

- umoţňuje vytvořit odkaz na libovolný soubor na disku, ve kterém je uloţena Příloha pro danou buňku (tj. obdoba Příloh v Seznamu metod Hlavního programového okna). Přílohou typicky můţe být chromatogram, spektrum, nebo jiný primární datový soubor, Word nebo Excel soubor, apod. V okně Přílohy lze přílohy Přidat, Opravit, Vyjmout, Otevřít (pouze spustitelné soubory) a Uložit

Obr. 5.12: okno Přílohy všechny buňky obsahující přílohy jsou z důvodu snazšího dohledání označeny zeleným roţkem v pravém dolním rohu buňky Odstranit přílohy - odstraní všechny existující přílohy k buňce. Označení červeným pravým horním roţkem buňky zmizí Historie přílohy - otevře okno Historie příloh

Obr. 5.13: okno Historie příloh Historie přílohy zobrazuje Datum a Čas, kdo záznam Vytvořil nebo změnil a na kterém počítači (jeho název). V dolní polovině okna ukazuje ikonu příslušející dané příloze, poloţku Popis a Cestu k Příloze na disku.


35/106

Vlastnosti sloupce - otevře okno pro definici vlastností sloupce:

Obr. 5.14: okno Vlastnosti sloupce Název sloupce Maska pro zobrazení

Příklad

- název sloupce, např. Měření 1 - maska desetinného formátu, ve kterém se mají zobrazovat data z daného sloupce. Příklady: #.#### - na 4 des. místa – pokud je na 4. desetinném místě čísla nula, zobrazí se číslo pouze 3 desetinná místa 0.000 0 - na 4 des. místa – i kdyţ je na 4. desetinném místě čísla nula, zobrazí se číslo vţdy 4 desetinná místa Pozn.: desetinný oddělovač je třeba vždy zadat jako tečku. - příklad zobrazení Čísla v zadaném formátu Masky pro zobrazení

5.2.3 VYHODNOCENÍ TABULKY DAT Postup vyhodnocení dat v okně Tabulka dat je níţe popsán na příkladu Opakovatelnosti. Nejprve je třeba zadat data v potřebném počtu pro daný validační parametr/metodu. Minimální počet dat v Tabulce dat je označen červeně, doporučený počet zeleně. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet, který probíhá následovně: - spustí se tzv. kontroly na minimální rozsah dat, chybějící hodnoty, prázdné úrovně, úrovně s nulovou směrodatnou odchylkou, apod. Pokud je při některé kontrole pro daný parametr/metodu zjištěna závada, otevře se v dolní polovině okna Tabulka dat (na místě Instrukcí) okno Seznam kontrol dat s nevyhovujícím výsledkem:

Obr. 5.15: Seznam chyb kontrol vstupních dat (1) v okně Tabulka dat Dokud nalezené chyby ve vstupních datech nejsou odstraněny, nelze spustit Výpočet. Kliknutím na jednotlivou chybu v Seznamu chyb kontrol vstupních dat se kursor v Tabulce dat posune na místo chyby. -

spustí se statistické testy na detekci Odlehlých bodů a testování Normality - Cochranův test: detekce úrovně se statisticky významně větším rozptylem něţ na ostatních úrovních - Dixonův test: detekce jednotlivých Odlehlých bodů na úrovni Dixonovým testem - Grubbsův test: detekce jednotlivých Odlehlých bodů na úrovni Grubbsovým jednoduchým testem - Grubbsův párový test: detekce dvojice Odlehlých bodů na úrovni (2 min. nebo 2 max. hodnoty) a testování normality: - Komolgovov-Smirnovův test: testování Normality dat na úrovni Software vţdy spouští pouze ty testy, které lze se zadaným počtem Měření provést, pro 4 a více Měření se spouští všechny testy. Výsledky vyhodnocení testů jsou zobrazeny v jednotlivých záloţkách okna Vyhodnocení (viz. níţe)

-

spustí se výpočet pro zadaný parametr a/nebo metodu otevře se okno Vyhodnocení a Graf s výsledky v numerické a grafické podobě. V horní polovině okna Vyhodnocení jsou uvedeny detailní výsledky formou tabulky (Průměr, Opakovatelnost, Relativní


36/106 opakovatelnost a n – počet měření), v dolní polovině okna je Závěr, platný pro celý vyhodnocovaný rozsah (Závěr: Opakovatelnost analytické metody je #,##### jednotek, tj. #,##%):

Obr. 5.16: okno Vyhodnocení

Obr. 5.17: okno Graf V okně Graf lze dělat výřezy, a to kliknutím levým tlačítkem myši na levý horní roh výřezu a tahem do dolního pravého roku. Kliknutím na tlačítko Nastavení se otevře okno Nastavení grafu, kde lze provést kompletní nastavení grafu včetně definice Sérií, Obecného nastavení, nastavení Os grafu, Názvu grafu, Legendy, atd.

Obr. 5.18: okno Nastavení grafu V okně Vyhodnocení jsou na jednotlivých záloţkách zobrazeny výsledky detekce odlehlých bodů a testování. Záloţky jsou označeny Cochran, Grubbs, Grubbs párový, Dixon a Normalita. Např. pro Dixonův a Grubbsův test vypadají záloţky s výsledky následovně:


37/106

Obr. 5.19: okno Dixonův test – detekce odlehlých bodů

Obr. 5.20: okno Grubbsův test – detekce odlehlých bodů Ve výše uvedeném případě se s pouţitím obou testů zjistila přítomnost jednoho odlehlého bodu, konkrétně bodu na Úrovni 2, Měření 5, jehoţ hodnota je 28. Vypočtená hodnota Dixonova kriteria je 0.8232, coţ je hodnota vyšší neţ Krit. hodnota = 0.628 z tabulek. Podobně hodnota Grubbsova kriteria 2.0093 je vyšší neţ Krit. hodnota = 1.887 z tabulek na uvaţované hladině významnosti. Numerické výsledky z okna Vyhodnocení mohou být vyexportovány do specifikovaného .txt, .csv nebo .xls souboru. Grafické výsledky z okna Graf lze uloţit kliknutím na Uložit jako do souboru .bmp, .gif, .jpg, .wmf, nebo html. V obou případech uţivatel musí cílový adresář do kterého se má soubor uloţit, tj. Uloţit do:, Název souboru: a zadat typ souboru Uloţit jako typ: Po kliknutí na Uložit jsou Výsledky/Graf uloţeny ve zvoleném formátu do zvoleného adresáře a souboru. Data, Výsledky a Graf lze tisknout formou uţivatelských tiskových sestav, popsaných níţe. Obdobným postupem jako Opakovatelnost se vyhodnocují všechny validační parametry (Správnost, Linearita, atd.), mezi-laboratorní porovnání, kalibrace, regulační diagramy a nejistoty. Základní postup je následující: (a) vloţení dat, (b) výpočet, (c) vyhodnocení grafu, (d) tisk. Detailní informace jsou uvedeny v kapitole 5.3 a Příručce řešených příkladů EffiValidation 3.0. 5.2.4 TISK TABULKY DAT Moţnosti tisku implementované v EffiValidation 3.0 jsou zaloţeny na tiskových formulářích, resp. uţivatelských tiskových sestavách. Pro kaţdý validační parametr/algoritmus je se software dodán jeden tiskový formulář, který ale uţivatel můţe editovat, tzn. měnit pozici poloţek na tiskové stránce, fonty, apod. Tisk z okna Tabulka dat se aktivuje kliknutím na ikonu Tisk. S pouţitím standardní tiskové sestavy dodané tvůrcem programu se vytiskne datová tabulka standardního vzhledu. V případě, ţe chcete tiskový formulář změnit, klikněte na List – Upravit formulář, čímţ se otevře okno ReportBuilder pro danou parametr/algoritmus, umoţňující provedení veškerých změn. POZOR! Doporučuje se provádět změny tiskových formulářů pouze v případě, ţe jste zkušenými uţivateli software EffiValidation 3.0, nebo jiného software, který pouţívá obdobný ReportBuilder. Jinak můţete tiskové formuláře poškodit dodávané se software, coţ můţe vést aţ k nutnosti reinstalace programu.


38/106 V okně ReportBuilder, záloţka Hlavní: HLAVICKA se definují jednotlivé SubReporty:

Obr. 5.21: okno ReportBuilder – záloţka Hlavní - HLAVICKA V jednotlivých záloţkách (SubReportech) ReportBuilderu se tisková sestava definuje, např v. Data1_UD.RTM se definuje pořadí sloupců na stránce, text hlaviček sloupců, apod.

Obr. 5.22: okno ReportBuilder – záloţka DSR: DATA1_UD.RTM Během editace formuláře lze rozloţení údajů na stránce kontrolovat pomocí Náhledu. V kombinovaných tiskových sestavách jsou ještě pouţity SubReporty pro Graf, Vyhodnocení, případně statistiku (u kalibrací).


39/106

5.3 VALIDAČNÍ PARAMETRY 5.3.1 OPAKOVATELNOST Opakovatelnost charakterizuje rozptýlení validované vlastnosti kolem střední hodnoty zapříčiněné působením náhodných chyb. Data pro vyhodnocení opakovatelnosti musí být naměřena za podmínek měření opakovatelnosti, tj. v jedné laboratoři, stejným analytikem, na stejném přístroji, v co nejkratším čase. K vyhodnocení Opakovatelnosti lze pouţít 2 přístupů: o Po úrovních z vícenásobného měření o Z paralelních měření Volba metody na vyhodnocení Opakovatelnosti je popsána v kapitole 5.4. 5.3.1.1 PO ÚROVNÍCH Z VÍCENÁSOBNÉHO MĚŘENÍ Výběrem Opakovatelnost – Po úrovních z vícenásobného měření z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření.. Řádky v okně Tabulka dat odpovídají jednotlivým úrovním validované vlastnosti (koncentrace), sloupce opakovaným Měřením (1-30) validované vlastnosti na úrovni. Minimální počet měření na úrovni je 2, doporučený 6. Minimální počet úrovní je 1, doporučený 3 (na dolní mezi rozsahu, ve středu a na horní mezi rozsahu). Data v tabulce lze editovat pomocí menu a pomocí kláves Delete a Insert a klávesových zkratek Ctrl-C a Ctrl-V. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření. Pro kaţdou vyhodnocovanou úroveň validované vlastnosti je v něm uvedeno:  Úroveň - pořadové číslo úrovně  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Průměr měření - průměr měření na úrovni (řádkový průměr)  Opakovatelnost - směrodatná odchylka měření na úrovni (na řádku)  Rel.(ativní) Opakovatelnost - relativní Opakovatelnost (= 100*Opakovatelnost/Průměr měření)  n - počet měření na úrovni Závěr: uvádí půlovanou hodnotu Opakovatelnosti a Relativní opakovatelnosti, vypočtené průměrováním hodnot Opakovatelností na všech úrovních s ohledem na Počet měření. Automaticky otevřený graf zobrazuje rozptýlení dat kolem průměru na úrovni. Graf lze uloţit v .bmp. jpg., gif, wmf, neho html formátu. Z okna Tabulka dat lze buď spustit Tisk, nebo zobrazit tiskový Náhled či Upravit formulář pro tisk. Obdobně z okna Vyhodnocení a Graf. Tiskové sestavy pro Data, Výsledky a Graf lze také kombinovat do jediné tiskové sestavy, podle toho, co je v dané chvíli k dispozici (pokud např. není otevřené okno Vyhodnocení, nelze tisknout Výsledky). Editace dat, zobrazování Grafu a uţívání tisku je u všech parametrů/metod shodné. 5.3.1.2 Z PARALELNÍCH MĚŘENÍ Výběrem Opakovatelnost – Z paralelních měření a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Opakovatelnost: z paralelních měření. Řádky v okně Tabulka dat odpovídají jednotlivým úrovním validované vlastnosti (koncentrace), sloupce Měření 1 a 2 paralelním měřením validované vlastnosti na úrovni. Minimální počet úrovní je 1, doporučený 6 (rozloţené rovnoměrně přes celý rozsah validované vlastnosti ). Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Opakovatelnost: z paralelních měření. Pro kaţdou vyhodnocovanou úroveň validované vlastnosti je v něm uvedeno:  Průměr měření - průměr všech měření  Opakovatelnost - směrodatná odchylka vypočtená z měření na všech úrovních  Rel.(ativní) Opakovatelnost - relativní Opakovatelnost (=100*Opakovatelnost/Průměr)  n - počet měření na úrovni Závěr: uvádí hodnoty Opakovatelnosti a Relativní opakovatelnosti, vypočtené z měření v celém rozsahu. Automaticky otevřený graf zobrazuje symetrické rozptýlení paralelních měření kolem průměru na úrovni.


40/106

5.3.2 STŘEDNÍ PŘESNOST Otevře okno Tabulka dat pro vyhodnocení validačního parametru Střední přesnost. Ta charakterizuje rozptýlení validované vlastnosti kolem průměru, zapříčiněné působením náhodných chyb. Data pro vyhodnocení Střední přesnosti musí být naměřena za podmínek mezi podmínkami pro měření Opakovatelnosti a Reprodukovatelnosti, např. různými analytiky, na stejném přístroji, ve střednědobém časovém horizontu. Manipulace s daty a postup vyhodnocení Střední přesnosti je stejný jako u Opakovatelnosti (viz 5.3.1). 5.3.3 REPRODUKOVATELNOST 5.3.3.1 DATA K DISPOZICI Výběrem Reprodukovatelnost – Data k dispozici a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Reprodukovatelnost: data k dispozici. Reprodukovatelnost charakterizuje rozptýlení hodnot validované vlastnosti kolem průměru, zapříčiněné působením náhodných chyb. Data pro vyhodnocení Reprodukovatelnosti musí být naměřena za podmínek měření Reprodukovatelnosti, tj. různými analytiky, na různých přístrojích, v dlouhém časovém intervalu. Reprodukovatelnost se obvykle vyhodnocuje v kruhovém testu. Manipulace s daty a postup vyhodnocení Reprodukovatelnosti je stejný jako u Opakovatelnosti (viz 5.3.1). Do řádků se pro daný vzorek zadávají výsledky měření validované vlastnosti v jednotlivých laboratořích. 5.3.3.2 VÝSLEDKY K DISPOZICI Výběrem Reprodukovatelnost – Výsledky k dispozici a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Reprodukovatelnost: výsledky k dispozici. Zadejte hodnotu Reprodukovatelnosti a klikněte na Uložit. Tím se zadaná hodnota zanese do databáze. K ţádnému výpočtu nedochází, hodnota se zadává pouze kvůli archivaci 5.3.4 ROBUSTNOST Robustnost charakterizuje odolnost validované metody vůči malým změnám v nastavení experimentálních podmínek (např. změnám v nastavení pH mobilní fáze u HPLC metody, teploty detektoru u GC, apod.). Robustnost se vyhodnocuje metodou plánovaných pokusů. K vyhodnocení Robustnosti lze pouţít 2 postupů: o Donův algoritmus o AOAC algoritmus s vyhodnocením Rozdíly v obou postupech jsou pouze pouţité statistice. Filozofie vyhodnocení je shodná. 5.3.4.1 DONGŮV ALGORITMUS Výběrem Robustnost – Dongův algoritmus z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Robustnost. Zadejte Počet faktorů, vůči kterým chcete Robustnost metody testovat. Počet musí být min. 3, max. 19. Program automaticky ihned vygeneruje tabulku tzv. plánovaného pokusu, který je popsán níţe. Podle ní je třeba pokusy provést a výsledky zadat do sloupce Výsledek. Hodnoty v tomto sloupci nesmějí mít nulový rozptyl, jinak vyhodnocení nemá smysl. Symboly +1 a -1 pouţité v tabulce značí, ţe testovaný faktor má být při daném experimentu nastaven na nominální, resp. extrémní testovanou úroveň (např. pH = 4.2 a pH = 3.8). Sloupce označené Dummy1, Dummy2, atd. značí tzv. umělé faktory, které jsou doplněny z důvodu matematického vyhodnocení. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení Robustnosti. Objeví se dialogová otázka: „Zahrnou Dummy faktory do výpočtu?“. Odpovězte ANO pokud chcete, aby algoritmus uvaţoval při vyhodnocení kritického efektu i efekty Dummy faktorů (standardní varianta). Odpovězte NE pokud Dummy faktory uvaţovat nechcete. V tomto případě však musí být Počet faktorů min. 4, jinak by kritický efekt e-krit byl 0 a vyhodnocení by nemělo smysl. Otevře se okno Vyhodnocení - Robustnost. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Faktor - pořadové číslo testovaného faktoru  Efekt - efekt faktoru při změně z nominální na extrémní úroveň  Kritický efekt - kritický efekt pro testování významnosti efektu jednotlivých faktorů  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o Robustnosti metody vůči danému faktoru. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy, ţe metoda je robustní vůči všem vyhodnocovaným faktorům.


41/106

Pokud je výsledkem vyhodnocení Robustnosti zjištění, ţe metoda není robustní vůči některému faktoru, pak je třeba pro tento faktor extrémní testovanou úroveň přiblíţit nominální úrovni (např. pH z hodnoty 3.8 na hodnotu 4.1), zopakovat plánovaný pokus a vyhodnocení Robustnosti. Pokud pak faktor (pH) přestane být významným, je třeba v laboratoři zajistit regulaci faktoru v daných uţších mezích (do pH = 4.1). Automaticky otevřený graf zobrazuje sloupcový graf efektů. Výška sloupců v grafu je úměrná vlivu jednotlivých faktorů. tj. jejich efektům. Čím je sloupec větší, tím je metoda vůči faktoru méně robustní. 5.3.4.2 AOAC S VYHODNOCENÍM Výběrem Robustnost – AOAC s vyhodnocením z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Robustnost. Zadejte Počet faktorů, vůči kterým chcete Robustnost metody testovat. Počet musí být min. 3, max. 7. Program automaticky ihned vygeneruje tabulku tzv. plánovaného pokusu, který je popsán níţe. Podle ní je třeba pokusy provést a výsledky zadat do sloupce Výsledek. Hodnoty v tomto sloupci nesmějí mít nulový rozptyl, jinak vyhodnocení nemá smysl. Symboly +1 a -1 pouţité v tabulce značí, ţe testovaný faktor má být při daném experimentu nastaven na nominální, resp. extrémní testovanou úroveň (např. pH = 4.2 a pH = 3.8). Sloupce označené Dummy1, Dummy2, atd. značí tzv. umělé faktory, které jsou doplněny z důvodu matematického vyhodnocení. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení Robustnosti. Objeví se dialogová otázka: „Zahrnou Dummy faktory do výpočtu?“. Odpovězte ANO pokud chcete, aby algoritmus uvaţoval při vyhodnocení kritického efektu i efekty Dummy faktorů (standardní varianta). Odpovězte NE pokud Dummy faktory uvaţovat nechcete. V tomto případě však musí být Počet faktorů min. 4, jinak by kritický efekt e-krit byl 0 a vyhodnocení by nemělo smysl. Otevře se okno Vyhodnocení - Robustnost. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Faktor - pořadové číslo testovaného faktoru  Efekt - efekt faktoru při změně z nominální na extrémní úroveň  Kritický efekt - kritický efekt pro testování významnosti efektu jednotlivých faktorů  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o Robustnosti metody vůči danému faktoru. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy, ţe metoda je robustní vůči všem vyhodnocovaným faktorům. Pokud je výsledkem vyhodnocení Robustnosti zjištění, ţe metoda není robustní vůči některému faktoru, pak je třeba pro tento faktor extrémní testovanou úroveň přiblíţit nominální úrovni (např. pH z hodnoty 3.8 na hodnotu 4.1), zopakovat plánovaný pokus a vyhodnocení Robustnosti. Pokud pak faktor (pH) přestane být významným, je třeba v laboratoři zajistit regulaci faktoru v daných uţších mezích (do pH = 4.1). Automaticky otevřený graf zobrazuje sloupcový graf efektů. Výška sloupců v grafu je úměrná vlivu jednotlivých faktorů. tj. jejich efektům. Čím je sloupec větší, tím je metoda vůči faktoru méně robustní. 5.3.5 SPRÁVNOST Správnost charakterizuje shodnost výsledků měření validované vlastnosti s akceptovanou nebo deklarovanou referenční nebo vztaţnou hodnotou. Pokud je shodnost výsledků statistickým testováním potvrzena, metoda poskytuje správné výsledky. Pokud potvrzena není, metoda poskytuje vychýlené výsledky (tj. výsledky zatíţené systematickou chybou). K vyhodnocení Správnosti lze pouţít několika metod: o Malý koncentrační rozsah - rekonstituce vzorku možná (t-test) o Malý koncentrační rozsah - referenční materiál k dispozici (t-test) o Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: t-test nebo regresně o Velký koncentrační rozsah - slepý pokus není dispozici: t-test nebo regresně o Srovnání 2 metod / laboratoří: t-test po úrovních nebo t-test na rozdíl výsledků Volba metody na vyhodnocení Správnosti je popsána v kapitole 5.4. 5.3.5.1 OMEZENÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH - REKONSTITUCE VZORKU MOŢNÁ Výběrem Správnost - Omezený koncentrační rozsah – rekonstituce vzorku moţná z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Správnost: Omezený koncentrační rozsah – rekonstituce


42/106 vzorku moţná. Minimální počet měření na úrovni je 2, doporučený 6. Minimální počet úrovní je 1, doporučený 3. Do sloupce Předloţeno zadejte hodnoty validované vlastnosti v kalibračních standardech, připravených s pouţitím (certifikovaných) referenčních materiálů a slepého pokusu. Do sloupců Měření 1-30 zadejte výsledky stanovení validované vlastnosti v těchto standardech validovanou metodou. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Správnost: Omezený koncentrační rozsah – rekonstituce vzorku moţná. Pro kaţdou úroveň je v něm uvedeno:  Úroveň - pořadové číslo úrovně validované vlastnosti  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Předloţeno - kopie hodnoty Předloţeno z okna Tabulka dat  Naměřeno - průměr hodnot měření z Tabulky dat  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100*Naměřeno/Předloţeno)  Přesnost - směrodatná odchylka hodnot měření z Tabulky dat  n - četnost měření  t - vypočtená hodnota t pro Studentův t-test  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o Správnosti metody na dané úrovni. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody na všech úrovních validované vlastnosti. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření a Předloţeno. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně správné metodě. 5.3.5.2 OMEZENÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH – REFERENČNÍ MATERIÁL K DISPOZICI Výběrem Správnost - Omezený koncentrační rozsah – referenční materiál k dispozici z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Správnost: Omezený koncentrační rozsah – referenční materiál k dispozici. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 1. Minimální, resp. doporučený počet měření na úrovni je 2, resp. 6. Nad tabulkou zadejte hodnotu dodatkového parametru Referenční přesnost, coţ je přesnost stanovené hodnoty validované vlastnosti referenčního materiálu deklarovaná na certifikátu k referenčnímu materiálu. Do sloupce Referenční hodnota zadejte referenční hodnotu validované vlastnosti v daném referenčním materiálu (z certifikátu dodavatele), do sloupců Měření 1-30 zadejte výsledky stanovení validované vlastnosti v referenčním materiálu získané validovanou metodou. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Správnost: Omezený koncentrační rozsah - referenční materiál k dispozici. Pro kaţdou úroveň (referenční materiál) je v něm uvedeno:  Úroveň - pořadové číslo referenčního materiálu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Referenční hodnota - kopie Referenční hodnoty z Tabulky dat  Naměřeno - vypočtený průměr měření  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100*Naměřeno/Referenční hodnota)  Referenční přesnost - kopie hodnoty Referenční přesnosti z Tabulky dat  Přesnost - směrodatná odchylka hodnot Měření z Tabulky dat  n - četnost Měření  Hypotéza o přesnosti - výsledek testování hypotézy o shodě naměřené Přesnosti s deklarovanou referenční přesností (přijata/zamítnuta)  Hypotéza o správnosti - výsledek testování hypotézy o shodě naměřené hodnoty validované vlastnosti s deklarovanou Referenční hodnotou (přijata/zamítnuta) Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody pro všechny testované referenční materiály. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření a Referenční hodnota. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně správné metodě. 5.3.5.3 VELKÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH – SLEPÝ POKUS K DISPOZICI: t-test Výběrem Správnost - Velký koncentrační rozsah – slepý pokus k dispozici - t-test z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Správnost: Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: t-test. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 1 a 3. Minimální, resp. doporučený počet měření na úrovni je 2, resp. 6.


43/106 Do sloupce Předloţeno zadejte hodnoty validované vlastnosti v kalibračních standardech, připravených s pouţitím (certifikovaných) referenčních materiálů a slepého pokusu. Do sloupců Měření 1-30 zadejte výsledky stanovení validované vlastnosti v těchto standardech validovanou metodou. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Správnost: Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: t-test. Pro kaţdou úroveň jsou v něm uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo úrovně validované vlastnosti  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Předloţeno - kopie hodnoty Předloţeno z okna Tabulka dat  Naměřeno - průměr hodnot měření z Tabulky dat  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100*Naměřeno/Předloţeno)  Přesnost - směrodatná odchylka hodnot měření z Tabulky dat  n - četnost měření  t - vypočtená hodnota t pro Studentův t-test  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o Správnosti metody na dané úrovni. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody na všech úrovních validované vlastnosti. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření a Předloţeno. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně správné metodě. 5.3.5.4 VELKÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH – SLEPÝ POKUS K DISPOZICI: REGRESNĚ Výběrem Správnost - Velký koncentrační rozsah – slepý pokus k dispozici - regresně z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Správnost: Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: regresně. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 4 a 6. Minimální, resp. doporučený počet měření na úrovni je 1. Do sloupce Předloţeno zadejte hodnoty validované vlastnosti předloţené do vzorku, do sloupců Měření 1-30 výsledky stanovení hodnoty validované vlastnosti naměřené validovanou metodou. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení - Správnost: Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: regresně. V něm je pro oba parametry regresní přímky (směrnice a úsek) uvedeno:  Parametr - jméno parametru (úsek/směrnice)  Teoreticky - teoretická hodnota parametru (úsek = 0, směrnice = 1) pro ideálně správnou metodu  Naměřeno - hodnota parametru vypočtená z průměrných Měření na všech úrovních  Přesnost - směrodatná odchylka hodnoty parametru  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100*Naměřeno/Teoreticky)  Int. spolehlivosti - vypočtený interval spolehlivosti, potřebný k testování hypotézy o shodě naměřeného úseku s nulovou hodnotou, resp. hypotézy o shodě naměřené směrnice s hodnotou 1  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o shodě naměřeného úseku s hodnotou 0 a směrnice s hodnotou 1 (přijata/zamítnuta). Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody v celém rozsahu. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření a Předloţeno. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně správné metodě (přímka s jednotkovou směrnicí a nulovým úsekem). 5.3.5.5 VELKÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH – SLEPÝ POKUS NENÍ K DISPOZICI: t-test Výběrem Správnost - Velký koncentrační rozsah - slepý pokus není dispozici: t-test z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus není dispozici: t-test. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 2 a 4. Minimální, resp. doporučený počet měření na úrovni je 2, resp. 6. Do sloupce Přídavek zadejte hodnotu standardního přídavku do výchozího vzorku, do sloupců Měření 1-30 zadejte výsledky stanovení validované vlastnosti naměřené validovanou metodou. Na úrovni 1 musí být zadány výsledky Měření pro výchozí vzorek s nízkou koncentrací, kde hodnota standardního přídavku je nulová ! Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení t-testem a otevře se okno Vyhodnocení - Správnost. Pro kaţdou úroveň je v něm uvedeno:


44/106   

Úroveň Popis Přídavek

- pořadové číslo úrovně validované vlastnosti - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat - hodnota standardního přídavku k výchozímu vzorku – kopie stejného sloupce z Tabulky dat  Naměřeno - vypočtený průměr Měření validované vlastnosti z Tabulky dat, korigovaný na průměr měření validované vlastnosti ve výchozím vzorku (Úroveň 1)  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100*Naměřeno/Přídavek)  Přesnost - směrodatná odchylka měření z Tabulky dat  Interval spol. - interval spolehlivosti průměru měření korigovaný na průměr měření výchozího vzorku (Úroveň 1)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o správnosti metody na Úrovni. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody na všech úrovních validované vlastnosti. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření (korigovaného na průměr Měření ve výchozím vzorku) a Přídavek. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně správné metodě. 5.3.5.6 VELKÝ KONCENTRAČNÍ ROZSAH – SLEPÝ POKUS NENÍ K DISPOZICI : REGRESNĚ Výběrem Správnost - Velký koncentrační rozsah - slepý pokus není dispozici: regresně z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus není dispozici: regresně. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 4 a 6. Minimální i doporučený počet měření na úrovni je 4. Do sloupce Předloţeno zadejte hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) předloţené do vodných (inertních) roztoků kalibračních standardů, do sloupce Měření 1 hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) naměřené validovanou metodou. Do sloupce Standardní přídavek zadejte hodnoty standardního přídavku, přidané k alikvótu materiálu (matrice), který se analyzuje. Do sloupce Měření 2 zadejte hodnoty naměřené koncentrace (validované vlastnosti) ve vzorcích se standardním přídavkem. Pokud počet vyplněných řádků ve sloupci Předloţeno/Měření 1 není stejný jako ve sloupci Standardní přídavek/Měření 2, doplňte dvojici sloupců na konci tabulky hodnotami -1. To je symbol pro prázdný řádek, který program nebere do výpočtu (výsledek měření není k dispozici např. proto, ţe se vzorek vysráţel a nelze ho měřit). Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení - Správnost: velký koncentrační rozsah slepý pokus není k dispozici: regresně. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Parametr - název parametru porovnávaných přímek - Směrnice  Kalibrace - hodnota směrnice kalibrační přímky ve vodných (inertních) roztocích  Standardní přídavek - hodnota směrnice kalibrační přímky se standardním přídavkem  Výtěţnost - výtěţnost metody (= 100* Standardní přídavek /Kalibrace)  t - vypočtená hodnota t pro Studentův t-test na testování shody směrnic obou přímek  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o shodě obou směrnic Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o správnosti metody v celém testovaném rozsahu. Automaticky otevřený graf zobrazuje dvě přímky: kalibrační přímku ve vodných (inertních) roztocích a přímku standardních přídavků. Pokud je správnost metody dobrá, obě přímky jsou rovnoběţné. 5.3.5.7 POROVNÁNÍ 2 METOD / LABORATOŘÍ: t-testem PO ÚROVNÍCH Výběrem Správnost – Srovnání 2 metod/laboratoří – t-test po úrovních z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Správnost - Srovnání 2 metod / laboratoří - t-test po úrovních. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 1 a 3. Minimální i doporučený počet měření na úrovni je 3 metodou/laboratoří 1 a 3 metodou/laboratoří 2. Do sloupce Metoda 1_1 aţ Metoda 1_3 na dané úrovni zadejte výsledky 3x měřené validované vlastnosti Metodou 1, do sloupce Metoda 2_1 aţ Metoda 2_3 výsledky 3x měřené validované vlastnosti Metodou 2. Všechny sloupce na daném řádku musí být vyplněny, jinak Výpočet nelze provést! Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Správnost: Srovnáním 2 metod / laboratoří t-testem po úrovních. V něm je pro kaţdou úroveň uvedeno:


45/106        

Úroveň Popis Naměřeno 1 Naměřeno 2 Výtěţnost Přesnost 1 Přesnost2 t

- pořadové číslo úrovně validované vlastnosti - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat - průměr hodnot měření Metodou 1 z Tabulky dat - průměr hodnot měření Metodou 2 z Tabulky dat - výtěţnost metody (= 100* Naměřeno 2 / Naměřeno 1) - směrodatná odchylka hodnot měření metodou 1 z Tabulky dat - směrodatná odchylka hodnot měření metodou 2 z Tabulky dat - hodnota t pro Studentův t-test vypočtená pro testování shody výsledků obou metod/laboratoří  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o shodě metod / laboratoří na úrovni. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o shodě obou metod/laboratoří na všech úrovních, tj. výsledek testování hypotézy o Správnosti metody. Automaticky otevřený graf zobrazuje body, jejichţ souřadnice odpovídají hodnotám Metoda 1, resp. Metoda 2. Přímka na úhlopříčce odpovídá stavu při ideální shodě obou metod/laboratoří. 5.3.5.8 POROVNÁNÍ 2 METOD / LABORATOŘÍ: t-testem NA ROZDÍL VÝSLEDKŮ Výběrem Správnost – Srovnání 2 metod/laboratoří – t-test na rozdíl výsledků z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Správnost - Srovnání 2 metod/laboratoří - t-test na rozdíl výsledků. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 3 a 6. Minimální i doporučený počet měření na úrovni je 1. Do sloupce Metoda 1 zadejte hodnoty validované vlastnosti naměřené metodou / laboratoří 1, do sloupce Metoda 2 hodnoty naměřené metodou/laboratoří 2. Počet vyplněných řádků v obou sloupcích musí být stejný, jinak nelze Výpočet provést ! Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Správnost: Srovnání 2 metod/laboratoří t-testem na rozdíl výsledků. V něm je uveden:  Průměrný rozdíl - průměrný rozdíl mezi výsledky obou metod/laboratoří  Přesnost rozdílu - směrodatná odchylka rozdílů mezi výsledky obou metod / laboratoří  Interval spolehlivosti - interval spolehlivosti kolem hodnoty průměrného rozdílu výsledků obou metod /laboratoří  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o shodě obou metod / laboratoří . Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o shodě obou metod/laboratoří, tj. výsledek testování hypotézy o Správnosti metody vhledem k referenční metodě. Automaticky otevřený graf zobrazuje diagram s body, jejichţ souřadnice odpovídají hodnotám měření Metodou 1 a Metodou 2. Přímka na úhlopříčce odpovídá stavu při ideální shodě obou metod / laboratoří. 5.3.6 SELEKTIVITA Selektivita charakterizuje schopnost metody selektivně měřit validovanou vlastnost. Pokud metoda je selektivní, je vliv potenciálních interferentů (matrice) na výsledek stanovení nevýznamný. Pokud metoda selektivní není, vliv interferentů je významný. K vyhodnocení Selektivity lze pouţít několika metod: o Porovnáním kalibračních přímek o Porovnáním výsledků se standardem o Porovnáním výsledků s měřením bez interferentu 5.3.6.1 POROVNÁNÍM KALIBRAČNÍCH PŘÍMEK Výběrem Selektivita – Porovnání kalibračních přímek z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Selektivita – Porovnáním kalibračních přímek. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 3 a 6. Počet interferentů, jejichţ vliv se sleduje, musí být v rozmezí 1 aţ 9. Do prvních dvou sloupců v Tabulce dat se zadávají hodnoty odpovídající kalibrační přímce bez interferentů: Validovaná vlastnost 0 a Měření 0. Do kaţdé následující dvojice sloupců se zadávají kalibrační data naměřená v přítomnosti jednoho interferentu: Validovaná vlastnost 1 a Měření 1 pro Interferent 1, Validovaná vlastnost 2 a Měření 2 pro Interferent 2, apod. Počet proměřovaných kalibračních vzorků nemusí být v praxi pro všechny


46/106 interferenty stejný (např. proto, ţe se vzorek vysráţel a nelze ho změřit). Prázdná políčka (pro ktera nejsou výsledky měření) na konci tabulky je v takovém případě třeba vyplnit hodnotami –1, coţ je symbol pro prázdný řádek. Program takový řádek nebere do výpočtu. Kliknutím na Výpočet po ukončení vkládání dat proběhne vyhodnocení Selektivity a otevře se výsledkové okno. V něm je pro kalibraci bez interferentu a pro kalibraci pro kaţdý interferent uvedeno:  Závislost - název kalibrační závislosti (Bez interferentu, S interferent 1, ...)  Směrnice - numerická hodnota směrnice pro danou kalibrační závislost  t - vypočtená hodnota t pro Studentův t-test k testování shody směrnice kalibrační přímky s interferentem a bez něj  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o selektivitě metody vůči danému interferentu Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy, ţe metoda je selektivní vůči všem testovaným interferentům. Automaticky otevřený graf zobrazuje jednu přímku pro kalibraci bez interferentů a jednu přímku pro kaţdý testovaný interferent. Shodná směrnice u všech přímek značí dobrou selektivitu metody vůči všem testovaným interferentům. 5.3.6.2 POROVNÁNÍM VÝSLEDKŮ SE STANDARDEM Výběrem Selektivita – Porovnáním výsledků se standardem z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Selektivita – Porovnáním výsledků se standardem. Minimální, resp. doporučený počet úrovní validované vlastnosti je 1 a 3. Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 resp. 6. Do sloupce Předloţeno zadejte hodnoty validované vlastnosti (koncentraci analytu) přítomné ve vzorku před přidáním testovaného potenciálního interferentu. Do sloupců Měření 1-30 zadejte výsledky stanovení validované vlastnosti po přidání testovaného mnoţství interferentu ke vzorku. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Správnost: Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: t-test. Pro kaţdou úroveň jsou v něm uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo úrovně  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Předloţeno - kopie hodnoty Předloţeno z okna Tabulka dat  Naměřeno - průměr hodnot naměřených v přítomnosti interferentu z Tabulky dat  Přesnost - směrodatná odchylka hodnot Měření z Tabulky dat  n - četnost Měření  t - vypočtená hodnota t pro Studentův t-test  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o Správnosti metody (přijata/zamítnuta). Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o selektivitě metody na všech úrovních. Automaticky otevřený graf zobrazuje body o souřadnicích Měření a Předloţeno. Přímka na úhlopříčce odpovídá ideálně selektivní metodě. 5.3.6.3 POROVNÁNÍM VÝSLEDKŮ S MĚŘENÍM BEZ INTERFERENTU Výběrem Selektivita – Porovnáním výsledků s měřením bez interferentu z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Selektivita – Porovnáním výsledků s měřením bez interferentu. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 1 a 3. Počet měření bez interferentu i s interferentem musí být 3. Jinak výpočet nelze provést ! Do sloupce Bez interferentu 1-3 zadejte hodnoty validované vlastnosti (koncentraci analytu) naměřené ve vzorku před přidáním testovaného potenciálního interferentu. Do sloupců S interferentem 1-3 zadejte hodnoty validované vlastnosti po přidání testovaného mnoţství interferentu ke vzorku. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Selektivita: Porovnáním výsledků s měřením bez interferentu. V něm je pro kaţdou úroveň uvedeno:  Úroveň - pořadové číslo úrovně validované vlastnosti  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Bez interferentu - průměr hodnot měření Bez interferentu z Tabulky dat


47/106  S interferentem - průměr hodnot měření S interferentem z Tabulky dat  t - hodnota t pro Studentův t-test  t_krit - kritická hodnota t pro Studentův t-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o selektivitě metody vůči danému interferentu. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o selektivitě metody vůči všem testovaným interferetům. Automaticky otevřený graf zobrazuje diagram s body, jejichţ souřadnice odpovídají hodnotám Bez interferentu, resp. S interferentem. Přímka na úhlopříčce odpovídá stavu při ideální selektivitě metody. 5.3.7 CITLIVOST Citlivost je dle IUPAC dána změnou signálu, vyvolanou jednotkovou změnou validované vlastnosti (tj. směrnicí kalibrační přímky). Někdy se citlivost vyhodnocuje také jako minimální rozdíl v hodnotě validované vlastnosti 2 vzorků, který lze s danou metodou věrohodně odlišit. K vyhodnocení Citlivosti lze pouţít: o Kalibrační přímku o Minimální stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti 5.3.7.1 Z KALIBRAČNÍ PŘÍMKY Výběrem Citlivost – Z kalibrační přímky z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Citlivost – Z kalibrační přímky. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 3 a 6. Minimální a doporučený počet měření je 1. Zadejte kalibrační data: do sloupce Validovaná vlastnost hodnotu validované vlastnosti (koncentrace) a do sloupce Měření 1 (aţ 30) hodnotu signálu naměřenou v daném kalibračním standardu. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Citlivost: Z kalibrační přímky. V něm je uvedena numerická hodnota Citlivosti, daná směrnicí sestrojené kalibrační přímky. Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. 5.3.7.2 NEJMENŠÍ STANOVITELNÝ ROZDÍL VE VALIDOVANÉ VLASTNOSTI Výběrem Citlivost – Nejmenší stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Citlivost – Nejmenší stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti. V okně se zadávají následující data: Opakovatelnost - Opakovatelnost validované vlastnosti vyhodnocená programem EffiValidation Počet měření - počet měření pouţitý při vyhodnocení Opakovatelnosti Hladina významnosti (1-alfa)*100 - hladina významnosti (1-alfa)*100, tj. 95 nebo 99 % Hladina významnosti (1-alfa)*100 - hladina významnosti (1-beta)*100, tj. 95 nebo 99 % Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Citlivost: Minimální rozdíl ve validované vlastnosti s číselnou hodnotou nejmenšího stanovitelného rozdílu. Kliknutím na Tisk lze data a výsledky buď přímo vytisknou na tiskárnu nebo si prohlédnout Náhled. 5.3.8 LINEARITA Linearita popisuje míru lineární závislosti mezi validovanou vlastností a měřením. Na vyhodnocení lze pouţít některou z následujících metod: o Korelační a QC koeficient o ANOVA (analýza rozptylu) na těsnost proložení o Významnost kvadratického členu o Znaménkový test Volba metody na vyhodnocení Linearity je popsána v kapitole 5.4.


48/106

5.3.8.1 KORELAČNÍ A QC KOEFICIENT Výběrem Linearita – Korelační a QC koeficient z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Linearita – Korelační a QC koeficient. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 3 a 6. Minimální a doporučený počet měření je 1. Do sloupce Validovaná vlastnost zadejte hodnotu koncentrace (validované vlastnosti) v jednotlivých standardech, do sloupců Měření 1-30 naměřené hodnoty signálu (absorbance, plocha píku, apod.). Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení - Linearita. V něm jsou uvedeny následující hodnoty:  Vypočtený R - hodnota korelačního koeficientu vypočtená z dat  R k testování - hodnota, jejíţ dosaţení se povaţuje za důkaz o linearitě (např.0.99) Hodnota se zadává v menu Nástroje – data a vyhodnocení  Vypočtený QC - hodnota QC koeficientu vypočtená z dat  QC k testování - hodnota referenčního QC koeficientu, jejíţ dosaţení se povaţuje za důkaz o Linearitě (např. 5%). Hodnota se zadává v menu Nástroje – data a vyhodnocení.  Hypotéza - pokud je vypočtený korelační koeficient > korelační koeficient k testování a současně QC koeficient < QC koeficient k testování, je metoda vzhledem k poţadavkům povaţována za lineární. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o Linearitě metody vzhledem k referenčnímu korelačnímu a QC koeficientu. Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. 5.3.8.2 ANOVA NA TĚSNOST PROLOŢENÍ Výběrem Linearita – ANOVA na těsnost proloţení z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Linearita – ANOVA na těsnost proloţení. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 4 a 6. Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 a 3. Do sloupce Validovaná vlastnost zadejte hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) a do sloupců Měření 130 hodnoty naměřeného signálu (absorbance) v kalibračních standardech. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Linearita: ANOVA na těsnost proloţení. V něm jsou pro 2 zdroje rozptylu měření kolem kalibrační přímky, tj. opakování a těsnost proloţení, uvedeny následující údaje:  Zdroj - název zdroje rozptylu  Suma čtverců - suma čtverců reziduí pocházející z daného zdroje rozptylu  Počet stupňů volnosti - počet stupňů volnosti  Průměrná suma čtverců - průměrná suma čtverců, tj. podíl Suma čtverců/Počet stupňů volnosti  F - vypočtená hodnota F pro testování těsnosti proloţení F-testem  F_krit - kritická hodnota F pro Fischerův F-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy, ţe těsnost proloţení kalibračních dat přímkou je dobrá (přijata/zamítnuta). Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o linearitě vzhledem k těsnosti proloţení dat přímkou. Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. 5.3.8.3 VÝZNAMNOST KVADRATICKÉHO ČLENU Výběrem Linearita – Významnost kvadratického členu – F-test z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Linearita – Významnost kvadratického členu - F-test. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 4 a 8. Minimální i doporučený počet měření je 1. Do sloupce Validovaná vlastnost zadejte hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) a do sloupce Měření 130 hodnoty signálu (absorbance) naměřené v kalibračních standardech. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Linearita: Významnost kvadratického členu – F-test. V něm jsou uvedeny následující údaje:


49/106   

- reziduální suma čtverců pro lineární model - reziduální suma čtverců pro kvadratický model - vypočtená hodnota F pro Fischerův F-test k testování významnosti kvadratického členu  F_krit - kritická hodnota F pro Fischerův F-test (z tabulek)  Hypotéza - výsledek testování hypotézy, ţe kvadratický člen je nevýznamný (přijata/zamítnuta). Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o linearitě metody vzhledem k (ne)významnosti kvadratického členu. RSC l RSC k F

Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. 5.3.8.4 ZNAMÉNKOVÝ TEST Výběrem Linearita – Znaménkový test z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Linearita – Znaménkový test. Minimální i doporučený počet úrovní je 15 (jinak počet reziduí s kladným a záporným znaménkem nemá dostatečnou četnost ke statistickému vyhodnocení). Minimální i doporučený počet měření je 1. Do sloupce Validovaná vlastnost zadejte hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) a do sloupců Měření 130 naměřené hodnoty signálu (absorbance) v kalibračních standardech Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Linearita: Znaménkový test. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Počet kladných reziduálů - počet reziduálů, které mají při proloţení přímkou kladné znaménko  Počet záporných reziduálů - počet reziduálů, které mají proloţením přímkou záporné znaménko  Počet změn znaménka - počet změn znaménka při proloţení dat přímkou  Kritická hodnota - kritický počet změn znaménka pro vyhodnocení linearity znaménkovým testem (z tabulek).  Hypotéza - výsledek testování hypotézy o dostatečné frekvenci střídání znaménka u reziduálů. Závěr: uvádí výsledek testování hypotézy o linearitě znaménkovým testem. Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. 5.3.9 ROZSAH Výběrem Rozsah z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Rozsah. Rozsah charakterizuje rozmezí hodnot validované vlastnosti, v němţ platí vyhodnocené validační parametry jako je Opakovatelnost, Správnost, Linearita, apod. V okně zadejte data následovně: Dolní validovaná mez pro validovanou vlastnost - dolní mez, na níţ je metoda validována Horní validovaná mez pro validovanou vlastnost - horní mez, na níţ je metoda validována Kliknutím na Uložit proběhne uloţení dat do databáze a otevře se okno Vyhodnocení - Rozsah. Z okna si lze po kliknutí na Tisk prohlédnout Náhled nebo spustit tisk na tiskárnu. 5.3.10 MEZ DETEKCE A STANOVITELNOSTI Mez detekce je úroveň, nad kterou lze odezvu vzorku věrohodně odlišit od odezvy slepého pokusu, tzn. ţe nad ní lze provést kvalitativní stanovení. Mez stanovitelnosti je úroveň, nad kterou lze věrohodně provést kvantitativní stanovení. Meze se stanovují buď jako násobek směrodatné odchylky odezvy slepého pokusu nebo z kalibrační přímky. K vyhodnocení mezí lze pouţít metody: o 3 s - IUPAC o 3 s - každý vzorek korigován na slepý pokus o 3 s - kontinuálně měřený slepý pokus o Z kalibrační přímky o Ze signálu slepého pokusu v chromatografii Volba metody na vyhodnocení Mezí je popsána v kapitole 5.4.


50/106

5.3.10.1 3S - IUPAC Výběrem Meze – 3 s - IUPAC z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat Meze: 3 s - IUPAC. Jedině moţný počet úrovní je 1 (nulová koncentrace – slepý pokus). Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 a 6. Nad tabulkou zadejte Směrnici kalibrační přímky Validovaná vlastnost - Měření, stanovenou např. v okně Kalibrace nebo Citlivost - Z kalibrační přímky. Tato hodnota je třeba pro přepočet mezí v jednotkách měření na meze v jednotkách validované vlastnosti. Pokud hodnota směrnice není v daný moment k dispozici, zadejte hodnotu 1. Jinak výpočet nelze provést! Do sloupců Měření 1-30 zadejte naměřené hodnoty signálu (absorbance) slepého pokusu. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Meze: 3s - IUPAC. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Měření na mezi detekce - hodnota signálu na Mezi detekce  Měření na mezi stanovitelnosti - hodnota signálu na Mezi stanovitelnosti  Validovaná vlastnost na mezi detekce - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi detekce (vypočtená z Měření na mezi detekce a ze směrnice)  Validovaná vlastnost na mezi stanoviteln. - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi stanovitelnosti (vypočtená z Měření na Mezi stanovitelnosti a ze směrnice) Závěr: uvádí numerické hodnoty signálu / validované vlastnosti na mezi detekce a mezi stanovitelnosti. Automaticky otevřený graf ukazuje distribuci naměřených hodnot slepého pokusu, odpovídající krabicový graf pro slepý pokus a dvě přímky rovnoběţné s osou x: dolní zobrazuje úroveň meze detekce, horní úroveň meze stanovitelnosti. 5.3.10.2 3S – KOREKCE NA SLEPÝ POKUS Výběrem Meze – 3 s – korekce na slepý pokus z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Meze: 3 s – korekce na slepý pokus. Jedině moţný počet úrovní je 1 (nulová koncentrace – slepý pokus). Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 a 6. Nad tabulkou zadejte Směrnici kalibrační přímky „Validovaná vlastnost – Měření“, stanovenou např. v okně Kalibrace nebo Citlivost - Z kalibrační přímky. Tato hodnota je třeba pro přepočet mezí v jednotkách měření na meze v jednotkách validované vlastnosti. Pokud hodnota směrnice není v daný moment k dispozici, zadejte hodnotu 1. Jinak výpočet nelze provést ! Do sloupců Měření 1-30 zadejte naměřené hodnoty signálu (absorbance) slepého pokusu. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Meze: 3s - IUPAC. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Měření na mezi detekce - hodnota signálu na Mezi detekce  Měření na mezi stanovitelnosti - hodnota signálu na Mezi stanovitelnosti  Validovaná vlastnost na mezi detekce - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi detekce (vypočtená z Měření na mezi detekce a ze směrnice)  Validovaná vlastnost na mezi stanoviteln. - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi stanovitelnosti (vypočtená z Měření na Mezi stanovitelnosti a ze směrnice) Závěr: uvádí numerické hodnoty signálu / validované vlastnosti na mezi detekce a mezi stanovitelnosti. Automaticky otevřený graf ukazuje distribuci naměřených hodnot slepého pokusu, odpovídající krabicový graf pro slepý pokus a dvě přímky rovnoběţné s osou x: dolní zobrazuje úroveň meze detekce, horní úroveň meze stanovitelnosti. Pozn.: Pokud se při validaci metody zvolí varianta vyhodnocení mezí 3s – korekce na slepý pokus, pak je třeba při rutinním nasazení metody měřit s kaţdým vzorkem slepý pokus a odezvu vzorku na něj korigovat. Jinak zvolený postup hodnocení mezí nemá smysl. 5.3.10.3 3S – KONTINUÁLNĚ MĚŘENÝ SLEPÝ POKUS Výběrem Meze – 3 s – kontinuálně měřený slepý pokus z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Meze: 3 s – korekce na slepý pokus. Jedině moţný počet úrovní je 1 (nulová koncentrace – slepý pokus). Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 a 6.


51/106 Nad tabulkou zadejte Směrnici kalibrační přímky Validovaná vlastnost - Měření, stanovenou např. v okně Kalibrace nebo Citlivost - Z kalibrační přímky. Tato hodnota je třeba pro přepočet mezí v jednotkách měření na meze v jednotkách validované vlastnosti. Pokud hodnota směrnice není v daný moment k dispozici, zadejte hodnotu 1. Jinak výpočet nelze provést ! Do sloupců Měření 1-30 zadejte naměřené hodnoty signálu (absorbance) slepého pokusu. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře okno Vyhodnocení – Meze: 3s - IUPAC. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Měření na mezi detekce - hodnota signálu na Mezi detekce  Měření na mezi stanovitelnosti - hodnota signálu na Mezi stanovitelnosti  Validovaná vlastnost na mezi detekce - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi detekce (vypočtená z Měření na mezi detekce a ze směrnice)  Validovaná vlastnost na mezi stanoviteln. - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi stanovitelnosti (vypočtená z Měření na Mezi stanovitelnosti a ze směrnice) Závěr: uvádí numerické hodnoty signálu / validované vlastnosti na mezi detekce a mezi stanovitelnosti. Automaticky otevřený graf ukazuje distribuci naměřených hodnot slepého pokusu, odpovídající krabicový graf pro slepý pokus a dvě přímky rovnoběţné s osou x: dolní zobrazuje úroveň meze detekce, horní úroveň meze stanovitelnosti. Pozn.: Pokud se při validaci metody zvolí varianta vyhodnocení mezí 3s – kontinuálně měřený slepý pokus, pak je třeba při rutinním nasazení metody měřit pravidelně slepý pokus a odezvu vzorku na něj korigovat. Jinak zvolený postup hodnocení mezí nemá smysl. 5.3.10.4 Z KALIBRAČNÍ PŘÍMKY Výběrem Meze – Z kalibrační přímky z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Meze: Z kalibrační přímky. Minimální, resp. doporučený počet úrovní je 3 a 6. Minimální i doporučený počet měření je 1. Do sloupce Validovaná vlastnost zadejte hodnoty koncentrace (validované vlastnosti) a do sloupců Měření 130 naměřené hodnoty signálu (absorbance, plocha píku, apod.) pro jednotlivé kalibrační standardy. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Meze: Z kalibrační přímky. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Měření na mezi detekce - hodnota signálu na mezi detekce  Měření na mezi stanovitelnosti - hodnota signálu na Mezi stanovitelnosti  Validovaná vlastnost na mezi det. - vypočtená hodnota validované vlastnosti na mezi detekce  Validovaná vl. na mezi stanovitelnosti - vypočtená hodnota validované vlastnosti na mezi stanovitelnosti Závěr: uvádí numerické hodnoty signálu / validované vlastnosti na mezi detekce a mezi stanovitelnosti. Automaticky otevřený graf zobrazuje kalibrační přímku, tj. body o souřadnicích Validovaná vlastnost a Měření proloţené přímkovou závislostí. Kromě toho je v grafu vyznačena mez detekce a mez stanovitelnosti. Pozn.: Pokud se při validaci metody zvolí varianta vyhodnocení mezí – Z kalibrační přímky, pak při rutinním nasazení metody je nutno tuto kalibraci skutečně pouţívat. Není dovoleno vyhodnocovat Meze např. z 15-ti bodové kalibrace a později rutinně pouţívat 5-ti bodovou kalibraci (hodnoty mezí vypočtené z 15-ti bodové kalibrace by totiţ byly nerealisticky nízké). 5.3.10.5 ZE SIGNÁLU SLEPÉHO POKUSU V CHROMATOGRAFII Výběrem Meze – Ze signálu slepého pokusu v chromatografii z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat - Meze: Ze slepého pokusu v chromatografii. V okně zadejte následující hodnoty: Maximální kolísání základní linie

Směrnice kalibrační přímky

- hodnota max. kolísání základní linie (v [mV]) odečtená na chromatogramu slepého pokusu v oblasti dané 20-ti násobkem pološířky píku sledovaného analytu (např. v oblasti od 3 do 15 min.) - směrnice kalib. přímky „Výška píku – Koncentrace“ v jednotkách slučitelných s jednotkami pro maximální kolísání základní linie.


52/106

Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Meze: Ze signálu slepého pokusu v chromatografii. V něm jsou uvedeny následující hodnoty:  Měření na mezi detekce - hodnota signálu na mezi detekce  Validovaná vlastnost na mezi detekce - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi detekce  Měření na mezi stanovitelnosti - hodnota signálu na Mezi stanovitelnosti  Validovaná vl. na mezi stanovitelnosti - vypočtená hodnota validované vlastnosti na Mezi stanovitelnosti Závěr: uvádí numerické hodnoty signálu / validované vlastnosti na mezi detekce a mezi stanovitelnosti. Z okna Tabulka dat a Vyhodnocení si po kliknutí na Tisk lze prohlédnout Náhled nebo spustit tisk na tiskárnu. 5.3.11 SLEPÝ POKUS Výběrem Slepý pokus z okna Validace (např. Plná) a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Slepý pokus. Jedině moţný počet úrovní je 1 (nulová koncentrace – slepý pokus). Minimální, resp. doporučený počet měření je 2 a 6. Do sloupců Měření 1-30 zadejte naměřené hodnoty signálu (např. absorbance) slepého pokusu. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Slepý pokus. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Průměrný slepý pokus - průměrný slepý pokus vypočtený ze zadaných hodnot Měření  Směrodatná odchylka - směrodatná odchylka ze zadaných hodnot Měření  Rel. směrodatná odchylka - relativní směrodatná odchylka (= 100*Směrodatná odchylka / Průměrný slepý pokus) Závěr: uvádí numerické hodnoty Průměrného slepého pokusu u Směrodatné odchylky slepého pokusu Automaticky otevřený graf ukazuje distribuci naměřených hodnot slepého pokusu a odpovídající krabicový graf. 5.3.12 OPAKOVATELNOST NÁSTŘIKU DLE FDA Výběrem Opakovatelnost nástřiku z okna HPLC – FDA a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Opakovatelnost nástřiku dle FDA. Řádky v okně Tabulka dat odpovídají jednotlivým analyzovaným vzorkům, sloupce opakovaným Měřením 1-30 (plochám z jednotlivých nástřiků). Minimální počet vzorků je 1, doporučený 3. Minimální počet nástřiků je 2, doporučený 6. Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a kaţdý vzorek je v něm uvedeno:  Úroveň  Popis  Průměr  Opakovatelnost

otevře se okno Vyhodnocení – Opakovatelnost nástřiku dle FDA. Pro

- pořadové číslo vzorku - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat - průměr ploch z nástřiků daného vzorku (řádkový průměr) - opakovatelnost nástřiku - směrodatná odchylka naměřených ploch pro daný vzorek  Rel.(ativní) Opakovatelnost - relativní opakovatelnost nástřiku v procentech = 100*Opakovatelnost/Průměr (%)  n - počet nástřiků daného vzorku Závěr: uvádí půlovanou hodnotu Opakovatelnosti nástřiku v jednotkách měření a v procentech a porovnává ji s obecným poţadavkem na opakovatelnost nástřiku (max. 1%). Automaticky otevřený graf zobrazuje rozptýlení dat kolem průměru při stanovení opakovatelnosti nástřiku. 5.3.13 KAPACITNÍ FAKTOR DLE FDA Kapacitní faktor charakterizuje pouţitý chromatografický systém vzhledem v jeho mrtvému objemu. Výběrem Kapacitní faktor z okna HPLC – kontroly způsobilosti dle FDA a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Kapacitní faktor dle FDA. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Rozlišení je 1, doporučený 3.


53/106 V otevřeném okně zadejte data následovně: Retenční čas - retenční čas sledovaného píku v [min.] Mrtvý objem - mrtvý objem v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Kapacitní faktor dle FDA. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Kapacitní faktor - vypočtená hodnota Kapacitního faktoru dle FDA Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Kapacitního faktoru a porovnává ji s obecným poţadavkem na Kapacitní faktor min. 2. 5.3.14 ROZLIŠENÍ DLE FDA Rozlišení charakterizuje stupeň separace sousedních píků v chromatografii. Výběrem Rozlišení z okna HPLC – kontroly způsobilosti – FDA a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Rozlišení píků dle FDA. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Rozlišení je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Retenční čas 1 - retenční čas píku č. 1 v [min.] pro nějţ se počítá rozlišení Retenční čas 2 - retenční čas píku č. 2 v [min.] Pološířka 1 - pološířka píku č. 1 v [min.] Pološířka 2 - pološířka píku č. 2 v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Rozlišení píků dle FDA. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Rozlišení - vypočtená hodnota Rozlišení vypočtená metodikou FDA. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Rozlišení a porovnává ji s obecným poţadavkem na Rozlišení min. 1.5. 5.3.15 CHVOSTOVÁNÍ DLE FDA Faktor chvostování charakterizuje stupeň chvostování píků v chromatografii. Výběrem Chvostování z okna HPLC – kontroly způsobilosti – FDA a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Chvostování dle FDA. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Chvostování je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Šířka píku v 5% - šířka píku v 5% výšky v [min.] Rozdíl max. a začátek - rozdíl mezi časem odpovídajícím maximu píku a časem začátku píku Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Chvostování dle FDA. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Chvostování - hodnota Chvostování vypočtená metodikou dle FDA. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Chvostování a porovnává ji s obecným poţadavkem na Chvostování max. 2. 5.3.16 POČET TEORETICKÝCH PATER DLE FDA Počet teoretických pater charakterizuje separační schopnost pouţité chromatografické kolony. Výběrem Počet teoretických pater z okna HPLC – kontroly způsobilosti – FDA a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Počet teoretických pater dle FDA. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Počtu teoretických pater je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Retenční čas - retenční čas píku pro vyhodnocení počtu teoretických pater v [min.] Šířka píku na baseline - šířka píku na základní linii v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Počet teoretických pater dle FDA. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat


54/106  Počet teoretických pater - vypočtená hodnota počtu teoretických pater vypočtená metodikou FDA. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Rozlišení a porovnává ji s obecným poţadavkem na Počet teoretických pater min. 2000. 5.3.17 POČET TEORETICKÝCH PATER DLE PH.EUR. Počet teoretických pater charakterizuje separační schopnost pouţité chromatografické kolony. Výběrem Počet teoretických pater z okna HPLC – kontroly způsobilosti – Ph.Eur. a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Počet teoretických pater dle Ph.Eur. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Počtu teoretických pater je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Retenční čas - retenční čas píku pro vyhodnocení počtu teoretických pater v [min.] Pološířka píku - pološířka píku, tj. šířka píku v polovině výšky v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Počet teoretických pater dle Ph.Eur.. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Počet teoretických pater - vypočtená hodnota počtu teoretických pater vypočtená metodikou Ph.Eur. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Rozlišení a porovnává ji s obecným poţadavkem na Počet teoretických pater min. 2000. 5.3.18 ROZLIŠENÍ DLE PH.EUR. Rozlišení charakterizuje stupeň separace sousedních píků v chromatografii. Výběrem Rozlišení z okna HPLC – kontroly způsobilosti – Ph.Eur. a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Rozlišení píků dle Ph.Eur. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Rozlišení je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Retenční čas 1 - retenční čas píku č. 1 v [min.] pro nějţ se počítá rozlišení Retenční čas 2 - retenční čas píku č. 2 v [min.] Pološířka 1 - pološířka píku č. 1 v [min.] Pološířka 2 - pološířka píku č. 2 v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – Rozlišení píků dle Ph.Eur. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Rozlišení - vypočtená hodnota Rozlišení vypočtená metodikou Ph.Eur. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Rozlišení a porovnává ji s obecným poţadavkem na Rozlišení min. 1. 5.3.19 FAKTOR SYMETRIE DLE PH.EUR Faktor symetrie charakterizuje symetrie sledovaného píku v chromatografii. Výběrem Faktor symetrie z okna HPLC – kontroly způsobilosti – Ph.Eur. a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Faktor symetrie dle Ph.Eur. Minimální počet pokusů pro vyhodnocení Faktoru symetrie je 1, doporučený 3. V otevřeném okně zadejte data následovně: Šířka píku v 5% výšky - šířka píku v 5% výšky v [min.] Vzdálenost - vzdálenost mezi vrcholem píku a kolmicí spuštěnou ve dvacetině výšky píku na náběhové straně píku v [min.] Kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se okno Vyhodnocení – FAKTOR SYMETRIE dle Ph.Eur. V něm jsou pro jednotlivé pokusy uvedeny následující údaje:  Úroveň - pořadové číslo pokusu  Popis - kopie textu Popisu z okna Tabulka dat  Faktor symetrie - vypočtená hodnota Faktoru symetrie vypočtená metodikou Ph.Eur. Závěr: uvádí průměrnou hodnotu Faktoru symetrie.


55/106

5.4 VOLBA VYHODNOCOVACÍ METODY Validační parametry Správnost, Linearita, Mez detekce/stanovitelnosti, Citlivost a Reprodukovatelnost lze vyhodnocovat různými způsoby. Volba vyhodnocovací metody závisí na poţadavcích zadavatele analýz, na typu validované Analytické metody, na situaci, na cílech validace a na rozsahu dat, která jsou k dispozici, resp. budou naměřena. 5.4.1 OPAKOVATELNOST (a) Po úrovních z vícenásobného měření: Oblast pouţití: vţdy kdyţ jsou dosaţitelné výsledky z vícenásobného měření. Postup: vzorky nebo standardy (obvykle 3) opakovaně proměřit (např. 6 krát) a výsledky vyhodnotit Statistická metoda vyhodnocení dat: výpočet směrodatné odchylky a relativní směrodatné odchylky. (b) Z paralelních měření: Oblast pouţití: kdyţ jsou k dispozici pouze výsledky paralelních měření. Postup: velkou řadu vzorků nebo standardů (min. 6) paralelně proměřit (2 krát) a výsledky vyhodnotit 5.4.2 SPRÁVNOST (a) Omezený koncentrační rozsah - rekonstituce vzorku moţná: Oblast pouţití: farmacie (chemie) - validace analytické metody na stanovení obsahu hlavní látky v relativně úzkém koncentračním rozsahu (např. 80-120 %). Podmínka pro pouţití: standard stanovované látky o známé čistotě je k dispozici. Postup: připravit řadu standardů o známé koncentraci (např. 3), kaţdý standard opakovaně proměřit (např. 6 krát) a výsledky vyhodnotit. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test po úrovních (b) Omezený koncentrační rozsah - referenční materiál k dispozici: Oblast pouţití: analytické metody, u nichţ jsou referenční materiály k dispozici (např. v metalurgii). Podmínka pro pouţití: referenční materiál (materiály) s deklarovanými hodnotami validované vlastnosti a deklarovanou přesností je k dispozici. Postup: opakovaně analyzovat (např. 6 krát) dostupné referenční materiály a vyhodnotit výsledky. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test pro kaţdý referenční materiál. Upozornění: validace analytické metody na referenční standard platí pouze pro danou matrici a pouze pro danou úroveň validované vlastnosti (jednu koncentraci). (c) Velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: Oblast pouţití: chemie, farmacie, ţivotní prostředí, medicína. Podmínka pro pouţití: materiál s nulovou hodnotou validované vlastnosti, tj. slepý pokus je k dispozici (např. vzorek krve s nulovou koncentrací stanovovaného farmaka). Standard stanovované látky je k dispozici. Postup: známé mnoţství stanovované látky se přidá ke slepému pokusu. Takto se připraví řada (3 aţ 8) standardů pokrývající celý poţadovaný koncentrační rozsah. Ty se (opakovaně) analyzují a výsledky se vyhodnotí. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test: pro řady max. 5 standardů s větším počtem opakovaných měření (více neţ 3) regrese: pro řadu min. 5 standardů s menším počtem opakovaných měření (1-3). (d) Velký koncentrační rozsah - slepý pokus není k dispozici: Oblast pouţití: ţivotní prostředí, medicína, analýza biologických a ţivočišných materiálů, kdy slepý pokus není k dispozici (např. při stanovení ţeleza v krvi). Podmínka pro pouţití: standard stanovované látky je k dispozici. Postup: známé mnoţství stanovované látky se přidává k výchozímu vzorku s nízkou koncentrací této látky. Takto se připraví řada (3 aţ 8) standardů, pokrývající celý poţadovaný koncentrační rozsah. Ty se (opakovaně) analyzují validovanou metodou a výsledky se vyhodnotí. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test: pro řady max. 5 standardů s větším počtem opakovaných měření (více neţ 3) regrese: pro řadu min. 5 standardů s menším počtem opakovaných měření (1-3). Navíc musí být k dispozici i kalibrace ve vodných roztocích (resp. v rozpouštědle). (e) Srovnání 2 metod/laboratoří: Oblast pouţití: kdyţ jsou k dispozici výsledky měření ze 2 metod nebo laboratoří, nebo kdyţ nelze pouţít jinou metodu vyhodnocení správnosti. Podmínky pro pouţití: je k dispozici řada výsledků vyhodnocení validované vlastnosti 2 metodami/laboratořemi (zvalidovanou a nově validovanou metodou). Postup: analyzuje se (opakovaně) řada standardů 2 metodami a jejich výsledky se porovnávají.


56/106 Statistická metoda hodnocení: t-test po úrovních: pro řady max. 5 standardů s 2-3 opakovanými měřeními. t-testem na rozdíl výsledků: pro řady min. 5 standardů bez opakovaných měření. 5.4.3 SELEKTIVITA (a) Porovnáním kalibračních přímek: Oblast pouţití: kdyţ je moţno proměřit celou kalibrační závislost bez přítomnosti interferentů a s jednotlivými interferenty. Podmínka pro pouţití: kalibrační standardy bez interferentu a s interferenty jsou k dispozici. Postup: proměří se kalibrační přímky bez interferentů a s interferenty (mnoţství interferentu přidávané ke kalibračním standardům bez interferentu vytypuje analytik) a ty se porovnávají. Statistická metoda vyhodnocení dat: porovnání směrnic kalibračních přímek. (b) Porovnáním výsledků se standardem: Oblast pouţití: kdyţ je k dispozici pouze jeden koncentrační standard, na kterém se vyhodnocuje vliv interferentů. Podmínka pro pouţití: je k dispozici koncentrační standard bez interferentu a interferent. Postup: ke standardu sledovaného analytu o známé koncentraci se přidá testované mnoţství interferentu (vytypuje analytik) a tento vzorek se opakovaně proměří. Vyhodnocuje se, zda-li přídavek interferentu má vliv na stanovenou hodnotu koncentrace. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test. (c) Porovnání výsledků s měřením bez interferentu: Oblast pouţití: kdyţ je k dispozici pouze několik málo (3) koncentračních standardů, na kterých se vyhodnocuje vliv interferentů. Podmínka pro pouţití: je k dispozici řada několika standardů o známé hodnotě validované vlastnosti a jsou k dispozici potenciální interferenty. Postup: opakovaně se analyzuje řada standardů bez přítomnosti interferentu a po přídavku interferentu (mnoţství interferentu vytypuje analytik) a výsledky se porovnávají. Statistická metoda vyhodnocení dat: t-test. 5.4.4 LINEARITA (a) Korelační a QC koeficient: Oblast pouţití: kde je to předepsáno, nebo kde nelze pouţít jinou metodu hodnocení Linearity. Podmínka pro pouţití: k dispozici je řada minimálně 6 standardů se známou hodnotou validované vlastnosti a min. 1 výsledek měření odezvy. Postup: analyzuje se řada standardů o známých hodnotách validované vlastnosti a vypočte se korelační a QC koeficient. (b) ANOVA na těsnost proloţení: Oblast pouţití: kde je to předepsáno (v kombinaci s korelačním a QC koeficientem). Podmínka pro pouţití: je k dispozici řada 4-7 standardů se známou hodnotou validované vlastnosti a 2-3 násobným opakováním měření odezvy. Postup: min. 2-krát se analyzuje řada 4-7 standardů o známé hodnotě validované vlastnosti. Aplikuje se statistická metoda „analýza rozptylu na těsnost proloţení“. (c) Významnost kvadratického členu: Oblast pouţití: kde je to předepsáno, zejména při podezření na nelinearitu kvadratického typu (v kombinaci s korelačním a QC koeficientem). Podmínka pro pouţití: je k dispozici řada min. 8 standardů o známé hodnotě validované vlastnosti s 1 měřením odezvy. Postup: analyzuje se řada min. 8 standardů o známé hodnotě validované vlastnosti a aplikuje se t-test na významnost kvadratického členu. (d) Znaménkový test: Oblast pouţití: kde je to předepsáno (v kombinaci s korelačním a QC koeficientem). Podmínka pro pouţití: je k dispozici řada min. 15 standardů o známé hodnotě validované vlastnosti a s 1 měřením odezvy. Postup: analyzuje se řada min 15 standardů o známé hodnotě validované vlastnosti a aplikuje se znaménkový test na vyhodnocení.


57/106

5.4.5 MEZ DETEKCE A STANOVITELNOSTI (a) 3 s - IUPAC: Oblast pouţití: tam, kde je to předepsáno, typicky u AAS a postupů doporučených IUPAC. Podmínka pro pouţití: výsledky 6-8 násobného měření odezvy slepého pokusu jsou k dispozici. Postup: 6-8 krát se analyzuje slepý pokus a z výsledků se vypočte Mez detekce a Mez stanovitelnosti. (b) 3 s - korekce na slepý pokus: Oblast pouţití: tam, kde je to předepsáno, typicky u AAS kdyţ se s kaţdým vzorkem proměřuje slepý pokus a signál vzorku se na něj individuálně koriguje. Podmínka pro pouţití: slepý pokus se proměřuje s kaţdým vzorkem. Postup: s kaţdým vzorkem se analyzuje slepý pokus. Signál vzorku se na něj koriguje a slepý pokus se pouţije na výpočet Meze detekce a Meze stanovitelnosti. (c) 3 s - kontinuálně měřený slepý pokus: Oblast pouţití: tam, kde je to předepsáno, typicky u AAS, kdyţ se kontinuálně proměřuje slepý pokus. Podmínka pro pouţití: kontinuálně měřený slepý pokus je k dispozici. Postup: kontinuálně se měří slepý pokus a ten se pouţije na výpočet Meze detekce a Meze stanovitelnosti. (d) Z kalibrační přímky: Oblast pouţití: tam, kde je to předepsáno (a nejedná se o chromatografické stanovení). Podmínka pro pouţití: slepý pokus nebo vzorek s velmi nízkou hodnotou validované vlastnosti je k dispozici. Postup: připraví se řada kalibračních standardů s nízkými hodnotami validované vlastnosti (co nejblíţe předpokládané meze detekce), ty se proměří a výsledky se pouţijí na vyhodnocení Meze detekce a Meze stanovitelnosti z kalibrační přímky. (e) Ze signálu slepého pokusu v chromatografii: Oblast pouţití: chromatografie (a další separační metody). Podmínka pro pouţití: chromatogram slepého pokusu a směrnice kalibrační přímky „výška píku – koncentrace“ je k dispozici. Postup: z chromatogramu slepého pokusu se stanoví maximální kolísání základní linie v oblasti dané 20-ti násobkem pološířky píku stanovovaného analytu. Vypočte se Mez detekce a Mez stanovitelnosti. 5.4.6 CITLIVOST (a) Z kalibrační přímky: Oblast pouţití: tam, kde není předepsáno jinak (IUPAC standard). Podmínka pro pouţití: dostupnost standardů pro konstrukci kalibrační přímky. Postup: analyzují se standardy pro konstrukci kalibrační přímky a vypočte se Citlivost metody. (b) Nejmenší rozdíl ve validované vlastnosti: Oblast pouţití: tam, kde je to předepsáno. Podmínka pro pouţití: hodnoty opakovatelnosti, počtu měření pro vyhodnocení opakovatelnosti, směrnice kalibrační přímky a hodnoty povoleného alfa a beta rizika (5%) jsou k dispozici. Postup: stanoví se opakovatelnost a směrnice kalibrační přímky. Vypočítá se citlivost metody.


58/106

5.4.7 REPRODUKOVATELNOST (a) Data k dispozici: Oblast pouţití: kdyţ jsou k dispozici data z kruhového testu pro danou metodu. Podmínka pro pouţití: data pro vyhodnocení Reprodukovatelnosti všech zúčastněných laboratoří jsou k dispozici. Aplikovaná metoda musí být ve všech zúčastněných laboratořích stejná! Postup: data se zadají do Tabulky dat a vyhodnotí se stejně jako u Opakovatelnosti. (b) Výsledek k dispozici: Oblast pouţití: kdyţ laboratoř je účastníkem kruhového testu pro danou metodu, ale nejsou jí k dispozici data naměřená ve všech zúčastněných laboratořích. Podmínka pro pouţití: účast v kruhovém testu. Postup: výsledek obdrţený od organizátora kruhového testu se zadá do software k archivaci. 5.4.8 CHROMATOGRAFICKÉ CHARAKTERISTIKY (a) Dle Ph.Eur.: Oblast pouţití: tam, kde se dodrţuje evropský lékopis. (b) Dle FDA: Oblast pouţití: tam, kde se dodrţuje americký lékopis.

5.5 ROZSAH VYHODNOCENÍ VALIDAČNÍCH PARAMETRŮ Podle zvoleného typu validace (Průzkumová, Plná, atd.) okno Validace obsahuje moţnosti vyhodnocení pro různé validační parametry tak, jak se doporučují. Kromě toho udává vodítko, které parametry vyhodnocovat v jaké situaci český, evropský a americký lékopis: Kategorie Nečistoty Hlavní sloţky kvant. analýza limitní testy Přesnost + + * Správnost + + * Selektivita + + + Mez detekce + Mez stanovitelnosti + Linearita + + Rozsah + + * Robustnost + + + Parametry označené + jsou poţadovány, parametry označené * mohou být poţadovány. Validační parametr


Fyzikálně chemické vl. + * * * * * * +

59/106

KAPITOLA

6 MEZILABORATORNÍ POROVNÁNÍ Tato kapitola obsahuje: 

popis metod vyhodnocení mezilaboratorních porovnání o Mandelova statistika h o Mandelova statistika k o Kolaborativní studie – vyhodnocení Opakovatelnosti a Reprodukovatelnosti

6.1 MANDELOVA STATISTIKA H Mandelova statistika h charakterizuje stupeň shody výsledků dané laboratoře pro daný vzorek (koncentrační úroveň) s ostatními laboratořemi zúčastněnými v mezilaboratorním porovnání. To znamená, ţe charakterizuje správnost výsledků dané laboratoře vzhledem k ostatním účastníkům porovnání. Postup pouţití Mandelovy statistiky h je popsán v normě ISO 5725. Výběrem Mandelova statistika h z menu Mezilaboratorní porovnání se otevře okno Tabulka dat – Mandelova statistika h. V něm řádky odpovídají jednotlivým laboratořím, do dvojic sloupců Měření x_1 a Měření x_2 se zadávají výsledky paralelních měření pro jednotlivé vzorky (koncentrační úrovně) pouţité pro porovnání. Minimální, resp. doporučený počet laboratoří je 2, resp. 4 a více. Minimální, resp. doporučený počet vzorků (koncentračních úrovní) je 1, resp. 2 a více. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení Mandelovy statistky. Otevře se okno Vyhodnocení – Mandelova statistika h. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Úroveň - číslo úrovně (vzorku) z Tabulky dat  Laboratoř - číslo laboratoře z Tabulky dat  h - vypočtená hodnota Mandelovy statistiky h  h-krit - kritická hodnota h pro Mandelův test Závěr: uvádí celkový počet případů (laboratoří pro daný vzorek/úroveň), kdy došlo k překročení indikátoru Mandelovy statistiky h. Automaticky otevřený sloupcový graf zobrazuje vypočtené Mandelovo kriterium h pro jednotlivé laboratoře a vzorky/úrovně. Čím je sloupec vyšší, tím je výsledek laboratoře pro danou úroveň/vzorek vzdálenější od průměru. V grafu je na x-ové ose vţdy skupina hodnot h pro všechny vzorky/úrovně laboratoře 1, pak 2, atd.. Dvě meze vodorovné s osou x označují kritickou úroveň. Pokud je výsledek laboratoře mimo meze, nelze ho povaţovat za vyhovující. 6.2 MANDELOVA STATISTIKA K Mandelova statistka k charakterizuje stupeň rozptýlení výsledků dané laboratoře pro daný vzorek (koncentrační úroveň) ve srovnání s ostatními laboratořemi zúčastněnými v mezilaboratorním porovnání. To znamená, ţe charakterizuje přesnost výsledků dané laboratoře vzhledem k ostatním účastníkům porovnání. Postup pouţití Mandelovy statistiky k je popsán v normě ISO 5725. Výběrem Mandelova statistika k z menu Mezilaboratorní porovnání se otevře okno Tabulka dat – Mandelova statistika k. V něm řádky odpovídají jednotlivým laboratořím, do dvojic sloupců Měření x_1 a Měření x_2 se zadávají výsledky paralelních měření pro jednotlivé vzorky (koncentrační úrovně) pouţité pro porovnání. Minimální, resp. doporučený počet laboratoří je 2, resp. 4 a více. Minimální, resp. doporučený počet vzorků (koncentračních úrovní) je 1, resp. 2 a více.


60/106 Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení Mandelovy k statistky. Otevře se okno Vyhodnocení – Mandelova statistika k. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Úroveň - číslo úrovně (vzorku) z Tabulky dat  Laboratoř - číslo laboratoře z Tabulky dat  k - vypočtená hodnota Mandelovy statistiky k  k-krit - kritická hodnota k pro Mandelův test Závěr: uvádí celkový počet případů (laboratoří pro daný vzorek/úroveň), kdy došlo k překročení indikátoru Mandelovy statistiky k. Automaticky otevřený sloupcový graf zobrazuje vypočtené Mandelovo kriterium k pro jednotlivé laboratoře a vzorky/úrovně. Čím je sloupec vyšší, tím jsou výsledky laboratoře pro danou úroveň/vzorek rozptýlenější (méně přesné). V grafu je na x-ové ose vţdy skupina hodnot k pro všechny vzorky/úrovně laboratoře 1, pak 2, atd.. Mez vodorovná s osou x označuje kritickou úroveň. Pokud je výsledek laboratoře pro daný vzorek/úroveň mimo meze, musí se povaţovat za méně přesný neţ výsledky z ostatních laboratoří. 6.3 KOLABORATIVNÍ STUDIE Kolaborativní studie dovolují odhadnout Opakovatelnost a Reprodukovatelnost metody z mezilaboratorního porovnání. Postup pouţití je popsán v normě ISO 5725. Výběrem Kolaborativní studie z menu Mezilaboratorní porovnání se otevře okno Tabulka dat – Reprodukovatelnost a opakovatelnost. V něm řádky odpovídají jednotlivým laboratořím, do dvojic sloupců Měření x_1 a Měření x_2 se zadávají výsledky paralelních měření pro jednotlivé vzorky (koncentrační úrovně) pouţité pro vyhodnocení reprodukovatelnosti a opakovatelnosti. Minimální, resp. doporučený počet laboratoří je 2, resp. 4 a více. Minimální, resp. doporučený počet vzorků (koncentračních úrovní) je 1, resp. 2 a více. Kliknutím na Výpočet se spustí vyhodnocení. Otevře se okno Vyhodnocení – Mezilaboratorní porovnání – Reprodukovatelnost a opakovatelnost. V něm jsou uvedeny následující údaje:  Úroveň - číslo vzorku/úrovně z Tabulky dat  Průměr na úrovni - průměr výsledků měření pro daný vzorek/úroveň  Opakovatelnost (r) - Opakovatelnost vyčíslená z mezilaboratorního porovnání  Rel. opakovatelnost (%) - Relativní opakovatelnost (= 100*Opakovatelnost/Průměr na úrovni)  Reprodukovatelnost (R) - Reprodukovatelnost vyčíslená z mezilaboratorního porovnání  Rel. reprodukovateln. (%) - Relativní reprodukovatelnost (= 100*Reprodukovatelnost/Průměr na úrovni) Závěr: uvádí odkaz na hodnoty reprodukovatelnosti a opakovatelnosti v tabulce. Automaticky otevřený sloupcový graf zobrazuje pro jednotlivé vzorky/úrovně dvojici sloupců odpovídající Opakovatelnosti a Reprodukovatelnosti metody.


61/106

KAPITOLA

7 QC NÁSTROJE Tato kapitola obsahuje: 

popis QC nástrojů uvaţovaných v programu o Regulační diagramy o Kalibrace o Nejistoty

Vedení regulačních diagramů, vytváření kalibračních modelů a odhadování nejistot jsou činnosti, které akreditovaná laboratoř musí provádět a úzce souvisí s validací: - fungování metody v čase se monitoruje vedením regulačních diagramů - validační parametr Citlivost je dle IUPAC dán směrnicí kalibrační přímky. Linearitu, Mez detekce a Mez stanovitelnosti lze vyhodnotit z kalibrační přímky. - validační výsledky mohou být pouţity při odhadování Nejistot a analytických výsledků 7.1 REGULAČNÍ DIAGRAMY Regulační diagramy umoţňují kontrolovat fungování analytické metody v čase na základě opakovaných analýz referenčních materiálů nebo laboratorních standardů. Dle ČSN ISO 8258 lze rozlišit 4 typy regulačních diagramů:  Individuální měření - charakteristiky regulace stanoveny  Individuální měření - charakteristiky regulace nestanoveny  Opakované měření - charakteristiky regulace stanoveny  Opakované měření - charakteristiky regulace nestanoveny Diagramy pro Opakovaná měření lze pouţít pouze v případě, ţe jsou pro kaţdý bod (měření v čase) k dispozici výsledky opakovaných měření standardu. Pokud tomu tak není, je nutno pouţít diagram pro Individuální měření. Diagramy s označením Charakteristiky regulace stanoveny se pouţívají v případě, kdy cílové hodnoty regulace a rozptyl měření jsou předem stanoveny. Pokud tyto stanoveny nejsou, je nutno pouţít diagramy s označením Charakteristiky regulace nestanoveny. Kromě uvedených typů regulačních diagramů je v EffiValidation moţnost pouţít:  Hotelling T2 vícerozměrný diagram S ním lze vyhodnocovat vícerozměrná regulační data. 7.1.1 INDIVIDUÁLNÍ HODNOTY – CHARAKTERISTIKY REGULACE STANOVENY Výběrem Individuální hodnoty – charakteristiky regulace stanoveny z okna Regulační diagramy a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace stanoveny. V okně je třeba data zadat následovně: Centrální linie - cílová hodnota, na kterou je metoda regulována Směrodatná odchylka - charakteristika rozptylu měření, na kterou je metoda regulována (podmiňuje polohu regulačních mezí) Popis - pomocný text pro uţivatele, např. datum 1.4. 2001, atd. Měření 1 - vlastní hodnoty měření k regulaci. Minimální počet měření je 5


62/106 Kliknutím na ikonu Pravidla nebo z menu Vyhodnocení – Pravidla lze otevřít okno pro zadání (checkboxy) 8 pravidel, která se budou, resp. nebudou při vyhodnocení regulačního diagramu aplikovat. Kliknutím na ikonu X(R)-diagram nebo z menu Vyhodnocení – X(R)-diagram se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace stanoveny. V něm jsou uvedeny hodnoty vypočtených regulačních mezí pro X (R) diagram:  Horní kontrolní mez - horní kontrolní mez regulačního diagramu (UCL)  Horní výstraţná mez - horní výstraţná mez regulačního diagramu (UWL)  Mez +1s - mez +1s regulačního diagramu  Centrální linie - centrální linie – cílová hodnota regulace zadaná v datech  Mez –1s - mez -1s regulačního diagramu  Dolní výstraţná mez - dolní výstraţná mez regulačního diagramu (LWL)  Dolní kontrolní mez - dolní kontrolní mez regulačního diagramu (LCL) Automaticky otevřený graf zobrazuje regulační diagram s body, odpovídajícími hodnotám Měření. Přímky v grafu, rovnoběţné s osou x, jsou regulační meze. V záloţce okna Vyhodnocení a Graf je Statistika, uvádějící numerické hodnoty mezí a výsledky vyhodnocení regulačního diagramu pomocí Pravidel. Pod nadpisem: „Výsledky pouţití Western Electric pravidel“ jsou uvedeny případy, kdy byl zjištěn stav regulace mimo kontrolu, např.: „Pravidlo 1 - jeden bod je mimo UCL nebo LCL: Bod: 2“. Tzn., ţe bod číslo 2 je dle prvního pravidla mimo kontrolní meze. 7.1.2 INDIVIDUÁLNÍ HODNOTY – CHARAKTERISTIKY REGULACE NESTANOVENY Výběrem Individuální hodnoty – charakteristiky regulace nestanoveny z okna Regulační diagramy a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace nestanoveny. V okně je třeba data zadat následovně: Popis - pomocný text pro uţivatele, např. datum 1.4. 2001 Měření 1 - vlastní hodnoty měření k regulaci. Minimální počet měření je 20. Jinak nemohou být sestrojeny věrohodné regulační meze. Kliknutím na ikonu Pravidla nebo z menu Vyhodnocení – Pravidla se otevře okno pro výběr vyhodnocovacích pravidel. Kliknutím na ikonu X(R)-diagram nebo z menu Vyhodnocení – X(R)-diagram se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace nestanoveny. V něm jsou uvedeny hodnoty vypočtených regulačních mezí pro X (R) diagram:  Horní kontrolní mez - horní kontrolní mez regulačního diagramu (UCL)  Horní výstraţná mez - horní výstraţná mez regulačního diagramu (UWL)  Mez +1s - mez +1s regulačního diagramu  Centrální linie - centrální linie – cílová hodnota regulace zadaná v datech  Mez –1s - mez -1s regulačního diagramu  Dolní výstraţná mez - dolní výstraţná mez regulačního diagramu (LWL)  Dolní kontrolní mez - dolní kontrolní mez regulačního diagramu (LCL) Automaticky otevřený graf zobrazuje regulační diagram. V záloţce Statistika jsou výsledky vyhodnocení regulačního diagramu pomocí Pravidel. 7.1.3 OPAKOVANÁ MĚŘENÍ – CHARAKTERISTIKY REGULACE STANOVENY Výběrem Opakovaná měření– charakteristiky regulace stanoveny z okna Regulační diagramy a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Regulační diagramy: opakovaná měření – charakteristiky regulace stanoveny. V okně je třeba data zadat následovně: Centrální linie - cílová hodnota, na kterou je metoda regulována Směrodatná odchylka - charakteristika rozptylu měření, na kterou je metoda regulována (podmiňuje polohu regulačních mezí) Popis - pomocný text pro uţivatele, např. datum 1.4. 2001 Měření 1-30 - hodnoty opakovaných měření k regulaci. Minimální počet měření na řádku (pro daný čas) je 2. Minimální počet řádků (měření v čase) je 5.


63/106 Kliknutím na ikonu Pravidla nebo z menu Vyhodnocení – Pravidla se otevře okno pro výběr vyhodnocovacích pravidel. Kliknutím na ikonu X(R)-diagram nebo z menu Vyhodnocení – X(R)-diagram se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace stanoveny. V něm jsou uvedeny hodnoty vypočtených regulačních mezí pro X (R) diagram:  Horní kontrolní mez - horní kontrolní mez regulačního diagramu (UCL)  Horní výstraţná mez - horní výstraţná mez regulačního diagramu (UWL)  Mez +1s - mez +1s regulačního diagramu  Centrální linie - centrální linie – cílová hodnota regulace zadaná v datech  Mez –1s - mez -1s regulačního diagramu  Dolní výstraţná mez - dolní výstraţná mez regulačního diagramu (LWL)  Dolní kontrolní mez - dolní kontrolní mez regulačního diagramu (LCL) Automaticky otevřený graf zobrazuje regulační diagram. V záloţce Statistika jsou výsledky vyhodnocení regulačního diagramu pomocí Pravidel. 7.1.4 OPAKOVANÁ MĚŘENÍ – CHARAKTERISTIKY REGULACE NESTANOVENY Výběrem Opakovaná měření– charakteristiky regulace nestanoveny z okna Regulační diagramy a kliknutím na OK se otevře okno Tabulka dat – Regulační diagramy: opakovaná měření – charakteristiky regulace nestanoveny. V okně je třeba data zadat následovně: Popis - pomocný text pro uţivatele, např. datum 1.4. 2001 Měření 1-30 - hodnoty opakovaných měření k regulaci. Minimální počet měření na řádku (pro daný čas) je 2. Minimální počet řádků (měření v čase) je 20. Jinak nemohou být sestrojeny věrohodné regulační meze. Kliknutím na ikonu Pravidla nebo z menu Vyhodnocení – Pravidla se otevře okno pro výběr vyhodnocovacích pravidel. Kliknutím na ikonu X(R)-diagram nebo z menu Vyhodnocení – X(R)-diagram se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Regulační diagramy: individuální měření – charakteristiky regulace stanoveny. V něm jsou uvedeny hodnoty vypočtených regulačních mezí pro X (R) diagram:  Horní kontrolní mez - horní kontrolní mez regulačního diagramu (UCL)  Horní výstraţná mez - horní výstraţná mez regulačního diagramu (UWL)  Mez +1s - mez +1s regulačního diagramu  Centrální linie - centrální linie – cílová hodnota regulace zadaná v datech  Mez –1s - mez -1s regulačního diagramu  Dolní výstraţná mez - dolní výstraţná mez regulačního diagramu (LWL)  Dolní kontrolní mez - dolní kontrolní mez regulačního diagramu (LCL) Automaticky otevřený graf zobrazuje regulační diagram. V záloţce Statistika jsou výsledky vyhodnocení regulačního diagramu pomocí Pravidel. 7.1.5 X-DIAGRAM (REGULAČNÍ DIAGRAM PRO PRUMĚR) Regulační diagram pro průměr se sestrojuje buď na základě individuálních hodnot nebo na základě průměrů opakovaných měření. Cílová hodnota regulace ve středu grafu je Centrální linie odpovídající - u diagramů, kde jsou Charakteristiky stanoveny - zadané hodnotě polohy centrální linie, nebo - u diagramů, kde jsou Charakteristiky nestanoveny průměru dat vloţených do tabulky. UCL a LCL: horní a dolní kontrolní limit, vypočtený buď ze zadané hodnoty směrodatné odchylky měření kolem Centrální linie (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny) nebo z rozptylu Měření (u diagramů kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny). UWL a LWL: horní a dolní výstraţný limit, vypočtený buď ze zadané hodnoty Směrodatné odchylky Měření kolem Centrální linie (u diagramů kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny) nebo z rozptylu Měření (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny).


64/106 1s a -1s: meze, dané zadanou hodnotou Směrodatné odchylky Měření kolem Centrální linie (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny), nebo rozptylem hodnot Měření v Tabulce dat (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny). UCL, LCL, UWL, LWL, 1s a -1s se zakreslují z důvodu vyhodnocení regulačních diagramů pomocí (WesternElectric) pravidel, jejichţ pouţití lze definovat v okně Pravidla po kliknutí na tlačítko Pravidla z Tabulky dat. Z grafu je moţné udělat výřez (zoom) kliknutím levým tlačítkem myši a tahem z levého horního poţadované rohu do levého dolního poţadovaného rohu grafu. V záloţce Statistika okna Graf jsou uvedeny jednak numerické hodnoty regulačních mezí: Horní a Dolní kontrolní/výstraţná mez a Meze +1s a –1s, jednak výsledky vyhodnocení regulačních diagramů podle (WesternElectric) pravidel. 7.1.6 R-DIAGRAM (DIGRAM PRO ROZPĚTÍ) Regulační diagram pro rozpětí se sestrojuje buď na základě rozpětí opakovaných měření nebo na základě klouzavého rozpětí, tj. rozdílů mezi po sobě jdoucími individuálními měřeními. Přímka označená Centrální linie odpovídá - u diagramů kde jsou Charakteristiky stanoveny - zadané hodnotě polohy centrální linie, nebo - u diagramů kde jsou Charakteristiky nestanoveny - průměru dat vloţených do tabulky. UCL a LCL: horní a dolní kontrolní limit, vypočtený buď ze zadané hodnoty Směrodatné odchylky Měření kolem Centrální linie (u diagramů kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny) nebo z rozptylu Měření (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny). UWL a LWL: horní a dolní výstraţný limit, vypočtený buď ze zadané hodnoty Směrodatné odchylky Měření kolem Centrální linie (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny) nebo z rozptylu Měření (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny). 1s a -1s: meze, dané zadanou hodnotou Směrodatné odchylky Měření kolem Centrální linie (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace stanoveny), nebo rozptylem hodnot Měření v Tabulce dat (u diagramů, kde jsou Charakteristiky regulace nestanoveny). UCL, LCL, UWL, LWL, 1s a -1s se zakreslují z důvodu vyhodnocení regulačních diagramů pomocí (WesternElectric) pravidel, jejichţ pouţití lze definovat v okně Pravidla po kliknutí na tlačítko Pravidla z Tabulky dat. Z grafu je moţné udělat výřez (zoom) kliknutím levým tlačítkem myši a tahem z levého horního poţadovaného rohu do levého dolního poţadovaného rohu grafu. V záloţce Statistika okna Graf jsou jednak uvedeny numerické hodnoty regulačních mezí: Horní a Dolní kontrolní/výstraţná mez a Meze +1s a –1s, jednak výsledky vyhodnocení regulačních diagramů podle (WesternElectric) pravidel. 7.1.7 PRAVIDLA PRO VYHODNOCOVÁNÍ DIAGRAMU (WESTERN-ELECTRIC RULES) Volba konkrétních (Western Electric) pravidel pro vyhodnocování Regulačních diagramů (X-diagram a Rdiagram) je moţná z okna Tabulka dat – Regulační diagram kliknutím na ikonu Pravidla nebo z menu Vyhodnocení - Pravidla. V otevřeném okně Pravidla je moţné pomocí checkboxů vybrat ta pravidla, která se mají aplikovat. Podle nich je metoda povaţována „mimo statistickou kontrolu", pokud nastane alespoň jeden z následujících případů: 1. jeden bod je mimo UCL nebo LCL 2. 9 bodů v řadě je na jedné straně CL 3. 6 bodů v řadě za sebou je stoupajících nebo klesajících 4. 14 bodů za sebou se střídá nahoru dolů 5. 2 ze 3 bodů jsou mimo UWL nebo LWL 6. 4 z 5 bodů jsou mimo 1*s na stejné straně CL 7. 15 bodů v řadě je v intervalu od -1*s do + 1*s 8. 8 bodů v řadě je za jedním z 1*s limitů. Výsledek vyhodnocení regulačního diagramu pomocí pravidel je k dispozici v záloţce Statistika okna Vyhodnocení nebo okna Graf. 7.2 KALIBRACE Přestoţe kalibrace není implicitně předepsanou součástí validace, úzce s ní souvisí: (1.) validační parametr citlivost je dle IUPAC dán směrnicí kalibrační přímky (2.) linearitu a mez detekce/stanovitelnosti je moţno vyhodnocovat z kalibrační přímky. Implementované algoritmy jsou ve shodě s ČSN ISO 8466 – část 1 a 2.


65/106 Okno Kalibrace se otevírá z menu QC nástroje v Hlavním programovém okně, podobně jako Regulační diagramy a Nejistoty. V okně se zadávají nebo tisknou data, spouští se z něj Výpočet nebo zobrazuje Graf. 7.2.1 TABULKA DAT Kliknutím na ikonu Kalibrace v Hlavním programovém okně nebo výběrem z menu QC nástroje – Kalibrace se otevře okno Tabulka dat – Kalibrace – Model: Lineární nebo Kvadratický. Pod menu a sadou ikon, které jsou kromě ikon a poloţky Model stejné jako v Tabulce dat pro validační parametry, se v horní tabulce zadávají data naměřená pro Kalibrační standardy určené k tvorbě modelu. V dolní tabulce jsou data naměřená pro Neznámé vzorky, u nichţ se odhaduje hodnota Validované vlastnosti ze zadaných hodnot Měření. Tabulka Kalibračních standardů: Popis - pomocný text pro uţivatele, např. datum 1.4. 2001 Validovaná vlastnost - hodnota validované vlastnosti, např. koncentrace, v kalibračním standardu na dané úrovni, např. 5, 10, 20, 40, 60, …. mg Měření 1-30 - hodnoty měření daného standardu, např. absorbance (plochy píku) Tabulka Neznámé vzorky: Popis Validovaná vlastnost Měření 1-30

- pomocný text pro uţivatele, např. vzorek XY - odhadnutá hodnota validované vlastnosti v neznámém vzorku - naměřené hodnoty Měření pro neznámý vzorek.

Kliknutím na ikonu Výpočet z okna Tabulka dat – Kalibrace – Model: Lineární nebo Kvadratický se spustí vyhodnocení a otevře se okno Vyhodnocení – Kalibrace. 7.2.2 OKNO VYHODNOCENÍ V okně Vyhodnocení – Kalibrace jsou uvedeny následující údaje:  Validovaná vlastnost - odhadnutá hodnota validované vlastnosti v neznámém vzorku  +- odhadnutý +- interval pro neznámý vzorek, slouţící jako základ pro výpočet konstrukci intervalu spolehlivosti  Interval spolehlivosti - interval spolehlivosti odhadnuté hodnoty validované vlastnosti neznámého vzorku. Pokud je pro lineární model tato hodnota pod Mezí detekce, vypíše se ve sloupci Interval spolehlivosti: Nedetekováno. Pokud je nad Mezí detekce, ale pod Mezí stanovitelnosti, vypíše se Nestanoveno. Charakteristiky kalibračního modelu, proloţení dat a hodnoty mezí jsou uvedeny v záloţce Statistika: 1. Kalibrační model: ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Úsek (odhad): - úsek kalibrační závislosti odhadnutý z Tabulky dat (z dat) Směrnice (odhad) - směrnice kalibrační závislosti odhadnutá z dat Směrodatná odchylka úseku (odhad) - směrodatné odchylky úseku odhadnutá z dat Směrodatná odchylka směrnice (odhad) - směrodatná odchylka směrnice odhadnutá z dat Interval spolehlivosti pro úsek - interval spolehlivosti sestrojený pro úsek na základě dat Interval spolehlivosti pro směrnici - interval spolehlivosti sestrojený pro směrnici na základě dat 2. Kvalita proloţení dat: -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------Reziduální rozptyl (odhad) - residuálního rozptyl odhadnutý z Tabulky dat Směrodatná odchylka reziduí - směrodatná odchylka reziduí odhadnutá z dat Korelační koeficient - korelační koeficient odhadnutý z dat QC koeficient - QC koeficient odhadnutý z dat 3. Kalibrační meze: -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------Signál na mezi detekce - odhadnutý signál na mezi detekce Koncentrace na mezi detekce - odhadnutá koncentrace (val. vl.) na mezi detekce Signál na mezi stanovitelnosti - odhadnutý signál na mezi stanovitelnosti Koncentrace na mezi stanovitelnosti - odhadnutá koncentrace (val. vl.) na mezi stanovitelnosti


66/106

7.2.3 GRAF Okno Graf - Kalibrace se otevře po kliknutí na Graf v okně Tabulka dat - Kalibrace nebo Vyhodnocení Kalibrace. V grafu označují body jednotlivé kalibrační standardy, přímka vypočtenou kalibrační závislost a úsečky rovnoběţné s osou x, resp. y mez detekce a mez stanovitelnosti. Z grafu je moţné udělat výřez (zoom) kliknutím levým tlačítkem myši a tahem z levého horního poţadované rohu do levého dolního poţadovaného rohu grafu. 7.3 NEJISTOTY Okno Nejistoty se otevírá z menu QC nástroje – nejistoty nebo kliknutím na ikonu Nejistoty v Hlavním programovém okně. Otevře se okno: Nejistoty. V něm se vybere z následujících moţností ta, která bude aplikována:  Z dat pro vyhodnocení přesnosti– vícenásobná měření k dispozici  Z dat pro vyhodnocení přesnosti – paralelní měření k dispozici  Z regulačního diagramu – individuální měření k dispozici  Z regulačního diagramu – opakovaná měření k dispozici  Expertní odhad  Z parciálních nejistot – dle Eurachem (EURACHEM/CITAC Guide, Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement, Second Edition, June 1999). Stanovení nejistoty z dat pro hodnocení přesnosti (reprodukovatelnosti) nebo z regulačního diagramu předpokládá, ţe všechny uvaţované zdroje nejistot jsou reprezentativně zastoupeny v datech, čemuţ je třeba přizpůsobit měření. Expertní odhad slouţí k archivaci zadané hodnoty nejistoty. Při stanovení nejistot z parciálních nejistot dle Eurachem se nejprve definuje funkční závislost mezi proměnnými a stanovovanou nejistotou výsledku, odhadnou se nejistoty pro jednotlivé zdroje a výpočtem dle závislosti. 7.3.1 Z DAT PRO VYHODNOCENÍ PŘESNOSTI – VÍCENÁSOBNÁ MĚŘENÍ Okno Tabulka dat – Nejistoty: z přesnosti – vícenásobná měření: Faktor pokrytí - faktor pro výpočet rozšířené nejistoty ze standardní nejistoty, obvykle 1.96 (tj. Studentovo t pro nekonečný počet měření), zaokrouhleno na 2 Ost. nejistoty (%) - nejistota (relativní), která není zahrnuta v datech pro vyhodnocení přesnosti a přesto je třeba, aby se s ní počítalo. Ost. nejistoty jsou při výpočtu zkombinovány s nejistotou dat vyhodnocení přesnosti a společně dávají hodnotu St. nejistoty Měření 1-30 - naměřená data z vyhodnocení přesnosti. Řádky v Tabulce dat odpovídají jednotlivým vzorkům analyzovaným v rámci vyhodnocení Přesnosti. Sloupce opakovaným měřením daného vzorku Kliknutím na Výpočet se otevře výsledkové okno s následujícími údaji: Vypočtená hodnota - průměrná hodnota Měření vypočtená z dat Standardní nejistota - standardní nejistota vypočtená z dat Rel. st. nejistota - relativní standardní nejistota vypočtená jako podíl Standardní nejistoty a Vypočtené hodnoty Faktor pokrytí - faktor pokrytí zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí Rel. rozšířená nejistota - součin rel. standardní nejistoty a faktoru pokrytí Závěr: shrnuje vyhodnocení Nejistot, tzn. hodnotu Rozšířené st. nejistoty a Relativní rozšířené nejistoty. Automaticky otevřený graf ukazuje rozptýlení (nejistotu) hodnot Měření na jednotlivých úrovních (pro jednotlivé vzorky). 7.3.2 Z DAT PRO VYHODNOCENÍ PŘESNOSTI – PARALELNÍ MĚŘENÍ Okno Tabulka dat – Nejistoty: z přesnosti – paralelní měření: Faktor pokrytí - faktor pro výpočet rozšířené nejistoty ze standardní nejistoty, obvykle 1.96 (tj. Studentovo t pro nekonečný počet měření), zaokrouhleno na 2 Ost. nejistoty (%) - nejistota (relativní), která není zahrnuta v datech pro vyhodnocení přesnosti a přesto


67/106

Měření 1-2

je třeba, aby se s ní počítalo. Ost. nejistoty jsou při výpočtu zkombinovány s nejistotou dat vyhodnocení přesnosti a společně dávají hodnotu Standardní nejistoty - paralelní výsledky naměřené při vyhodnocení přesnosti. Řádky v Tabulce dat odpovídají jednotlivým vzorkům analyzovaným v rámci vyhodnocení Přesnosti. Sloupce paralelní měřením daného vzorku

Kliknutím na Výpočet se otevře výsledkové okno s následujícími údaji: Vypočtená hodnota - průměrná hodnota Měření vypočtená z dat Standardní nejistota - standardní nejistota vypočtená z dat Rel. st. nejistota - relativní standardní nejistota vypočtená jako podíl Standardní nejistoty a Vypočtené hodnoty Faktor pokrytí - faktor zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí Rel. rozšířená nejistota - součin rel. standardní nejistoty a faktoru pokrytí Závěr: shrnuje vyhodnocení Nejistot, tzn. hodnotu Rozšířené st. nejistoty a Relativní rozšířené nejistoty. Automaticky otevřený graf ukazuje rozptýlení (nejistotu) hodnot Měření na jednotlivých úrovních (pro jednotlivé vzorky). 7.3.3 Z REGULAČNÍHO DIAGRAMU – INDIVIDUÁLNÍ MĚŘENÍ Popis okna Tabulka dat – Nejistoty: Z regulačního diagramu – individuální měření: Faktor pokrytí - faktor pro výpočet rozšířené nejistoty ze standardní nejistoty, obvykle 1.96 (tj. Studentovo t pro nekonečný počet měření), zaokrouhleno na 2 Ost. nejistoty (%) - nejistota (relativní), která není zahrnuta v datech pro sestrojení regulačního diagramu a přesto je třeba, aby se s ní počítalo. Ost. nejistoty jsou při výpočtu zkombinovány s nejistotou dat vyhodnocení regulačního diagramu a společně dávají hodnotu St. nejistoty Měření 1 - výsledky individuálních měření pouţité k sestrojení regulačního diagramu Kliknutím na Výpočet se otevře výsledkové okno s následujícími údaji: Vypočtená hodnota - průměrná hodnota Měření vypočtená z dat Standardní nejistota - standardní nejistota vypočtená z dat Rel. st. nejistota - relativní standardní nejistota vypočtená jako podíl Standardní nejistoty a Vypočtené hodnoty Faktor pokrytí - faktor pokrytí zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí Rel. rozšířená nejistota - součin rel. standardní nejistoty a faktoru pokrytí Závěr: shrnuje vyhodnocení Nejistot, tzn. hodnotu Rozšířené st. nejistoty a Relativní rozšířené nejistoty. Automaticky otevřený graf ukazuje regulační diagram, ze kterého je nejistota odhadnuta. 7.3.4 Z REGULAČNÍHO DIAGRAMU – VÍCENÁSOBNÁ MĚŘENÍ Popis okna Tabulka dat – Nejistoty: Z regulačního diagramu – opakovaná měření: Faktor pokrytí - faktor pro výpočet rozšířené nejistoty ze standardní nejistoty, obvykle 1.96 (tj. Studentovo t pro nekonečný počet měření), zaokrouhleno na 2 Ost. nejistoty (%) - nejistota (relativní), která není zahrnuta v datech pro vyhodnocení regulačního diagramu a přesto je třeba, aby se s ní počítalo. Ost. nejistoty jsou při výpočtu zkombinovány s nejistotou z regulačního diagramu a společně dávají hodnotu Standardní nejistoty Měření 1-30 - výsledky opakovaných měření pouţité k sestrojení regulačního diagramu Kliknutím na Výpočet se otevře výsledkové okno s následujícími údaji: Vypočtená hodnota - průměrná hodnota Měření vypočtená z dat Standardní nejistota - standardní nejistota vypočtená z dat Rel. st. nejistota - relativní standardní nejistota vypočtená jako podíl Standardní nejistoty a Vypočtené hodnoty Faktor pokrytí - faktor pokrytí zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí Rel. rozšířená nejistota - součin rel. standardní nejistoty a faktoru pokrytí


68/106 Závěr: shrnuje vyhodnocení Nejistot, tzn. hodnotu Rozšířené st. nejistoty a Relativní rozšířené nejistoty. Automaticky otevřený graf ukazuje regulační diagram, ze kterého je Nejistota odhadnuta. 7.3.5 EXPERTNÍ ODHAD Do okna Tabulka dat – Nejistoty: Expertní odhad zadejte následující hodnoty: St. nejistota - standardní nejistota odhadnutá expertem Faktor pokrytí - faktor zadaný pro výpočet Rozšířené nejistoty Kliknutím na Uložit se data uloţí, kliknutím na Výpočet se spustí výpočet a otevře se výsledkové okno s následujícími údaji: St. nejistota - standardní nejistota regulované veličiny vypočtená z dat Faktor pokrytí - faktor pokrytí zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí 7.3.6 Z PARCIÁLNÍCH NEJISTOT Parciální nejistoty jsou nejistoty proměnných, přispívajících do celkové nejistoty výsledku. Výpočet je prováděn dle směrnice EURACHEM/CITAC Guide, Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement, Second Edition, June 1999. Okno Tabulka dat – Nejistoty: Z parciálních nejistot: Faktor pokrytí - faktor pro výpočet rozšířené nejistoty ze standardní nejistoty, obvykle 1.96 (tj. Studentovo t pro nekonečný počet měření), zaokrouhleno na 2 Vzorec - matematická funkce popisující vztah mezi jednotlivými zdroji nejistot xi (x1, x2, x3) a výsledkem Ve vzorci mohou být pouţity základní matematické operátory: +, -, *, /, konstanty a následující funkce: ABS - absolutní hodnota SIN - sinus COS - cosinus TAN - tangens ARCTAN - arcus tangens EXP - exponent LN - přirozený logaritmus PI - Ludolfovo číslo SQR - druhá mocnina SQRT - druhá odmocnina Kombinovaná nejistota se vypočte ze zadaných hodnot xi a jejich nejistot. Je třeba je zadat: Zdroj - matematický symbol pro daný zdroj nejistoty: x1, x2, … Hodnota - absolutní uvaţovaná hodnota xi, např. x1 = 5 St. nejistota - odhadnutá standardní nejistota z daného zdroje nejistoty, např. 0.02 Kliknutím na Výpočet se otevře výsledkové okno s následujícími údaji: Vypočtená hodnota - hodnota odhadované veličiny y Standardní nejistota - standardní nejistota y vypočtená z dat Rel. st. nejistota - relativní standardní nejistota y vypočtená jako podíl Standardní nejistoty a Vypočtené hodnoty Faktor pokrytí - faktor zadaný v datech Rozšířená nejistota - součin standardní nejistoty a faktoru pokrytí Rel. rozšířená nejistota - součin rel. standardní nejistoty a faktoru pokrytí Závěr: shrnuje vyhodnocení Nejistot, tzn. hodnotu Rozšířené st. nejistoty a Relativní rozšířené nejistoty. Automaticky otevřený graf ukazuje sloupcový diagram relativních nejistot z jednotlivých zdrojů a porovnává se s relativní nejistotou výsledku – v grafu zcela vpravo. Metodika popsaná v této kapitole vychází z EURACHEM/CITAC Guide, Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement, Second Edition, June 1999.


69/106

KAPITOLA

8 EVIDENČNÍ KNIHY Tato kapitola obsahuje popis evidenčních knih software EffiValidation: o o o o o o o o o

Kniha vzorků (jednoduchá a rozšířená) Kniha specifikací Kniha měřidel (jednoduchá a rozšířená) Kniha dokumentů Kniha odchylek a reklamací Kniha kontaktů Kniha referenčních standardů Kniha chemikálií Kniha odměrných roztoků

Vedení záznamové dokumentace je jedním ze základních poţadavků systému jakosti kalibračních, zkušebních a kontrolních (GxP) laboratoří. 8.1 KNIHA VZORKŮ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha vzorků se otevře okno Kniha vzorků. Podle toho, jaký typ knihy je zvolen v okně Nastavení programu (definuje se z menu Nástroje – Nastavení obecné – záloţka Knihy) je toto buď Kniha vzorků jednoduchá nebo rozšířená 8.1.1 JEDNODUCHÁ KNIHA VZORKŮ Do horní poloviny okna Knihy vzorků se zadávají veškeré popisné údaje vzorku. V dolní polovině okna je uveden přehled výsledků získaných pro tyto vzorky:

Obr. 8.1: okno Kniha vzorků Popisné poloţky mohou být vloţeny nebo opraveny na tlačítka Přidat/Opravit: Číslo vzorku Zadavatel Objednávka Datum příjmu

- číslo, pod kterým je vzorek veden v evidenci laboratoře - název zadavatele analýzy - číslo objednávky zadavatele - datum, kdy byl vzorek přijat


70/106 Čas příjmu Datum odběru Čas odběru Popis Přijal Název Matrice Specifikace Zapsal Hodnocení Termín ukončení Datum uzavření Poznámka:

- čas, kdy byl vzorek přijat - datum, kdy byl vzorek vzorkován - čas, kdy byl vzorek odebrán - popis vzorku - jméno osoby, která vzorek převzala od dodavatele/vzorkaře - název vzorku - materiál nebo matrice charakterizující analyzovaný materiál - odkaz na specifikaci, pokud existuje - jméno pracovníka, který údaje zapsal - výsledek hodnocení (vyhovuje/nevyhovuje), vzhledem ke specifikaci (pokud existuje) - datum, kdy má být analýza dokončena - datum uzavření analýzy daného vzorku (stanoven poslední parametr) - libovolný text - poznámka ke vzorku

Obr. 8.2: okno Opravit vzorek Záznamy mohou být kopírovány kliknutím na Kopírovat a smazány kliknutím na Vyjmout. Aktualizovat umoţňuje aktualizovat záznamy v okně Knihy vzorků při práci v síti, Tisk dovoluje tisknout celou Knihu vzorků a Export knihu nebo jednotlivé záznamy exportovat. Historie ukazuje historii vývoje záznamů v knize.

Obr. 8.3: okno Historie vzorku Dolní polovina okna Knihy vzorků dovoluje zadávat výsledky stanovení kvalitativních parametrů vzorku: Parametr Jednotka Specifikace Odkaz Naměřeno Hodnocení Analyzoval Schválil Poznámka

- název stanovovaného parametru - měrná jednotka pro daný parametr - specifikace pro daný parametr a matrici - odkaz na dokument, pokud je třeba (pokud dokument existuje) - naměřená hodnota (výsledek stanovení) - výsledek vzhledem ke specifikaci - jméno pracovníka, který vzorek analyzoval - jméno pracovníka, který výsledek analýzy schválil (pokud je třeba) - libovolný test jako Poznámka


71/106

Obr. 8.4: okno Historie vzorku V jednoduché knize vzorků se parametry vzorků neukládají do společné tabulky, ale ukládají se samostatně. 8.1.2 ROZŠÍŘENÁ KNIHA VZORKŮ Knihy vzorků – rozšířená se otevře otevře kliknutím na Evidenční knihy – Knihy vzorků:

Obr. 8.5: okno Knihy vzorků rozšířená Kliknutím na Přidat nebo Opravit se otevře okno pro zadání/změnu všech popisných údajů vzorku:

Obr. 8.6: okno Nový/Opravit vzorek


72/106 Číslo vzorku Zadavatel Projekt Datum odběru Čas odběru Datum příjmu Čas příjmu Přijal Zapsal Odebral Název Matrice Parametry Poznámka Termín ukončení Datum uzavření

- číslo, pod kterým je vzorek veden v evidenci a navázané dokumentaci - název zadavatele - název projektu, v rámci kterého je vzorek analyzován - datum, kdy byl vzorek vzorkován - čas, kdy byl vzorek odebrán - datum, kdy byl vzorek přijat - čas, kdy byl vzorek přijat - jméno osoby, která vzorek převzala od dodavatele/vzorkaře - jméno pracovníka, který zapsal údaje - jméno pracovníka, který vzorek odebral - název vzorku - materiál nebo matrice charakterizující analyzovaný materiál - parametry, které se mají u daného vzorku analyzovat - libovolný text - poznámka ke vzorku - datum, kdy má být analýza dokončena - datum uzavření analýzy daného vzorku (stanoven poslední parametr)

Kromě toho je moţno v okně Nový/Opravit vzorek definovat skupinu parametrů, jejíţ stanovení bude pro daný vzorek vyţadováno. Kliknutím na tlačítko Parametry se otevře okno Parametry vzorků. Na rozdíl od Knihy vzorků jednoduché se v něm pro všechny vzorky (v řádcích) ukládají výsledky pro všechny parametry (ve sloupcích) do společné tabulky:

Obr. 8.7: okno Parametry vzorku Vyuţití takto strukturované tabulky výsledků můţe být výhodné zvláště pro laboratoře, ve kterých se opakovaně stanovují stále stejné parametry. Tabulka je vzhledem k paměťovým nárokům omezena na 250 sloupců (parametrů). V Rozšířené knize vzorků lze vzorky Filtrovat a to podle Datumu příjmu nebo odběru, Čísla vzorku, Zadavatele nebo Projektu:

Obr. 8.8: okno Parametry vzorku 8.2 KNIHA SPECIFIKACÍ Kniha specifikací je propojena s Knihou vzorků jednoduchou. Pro kaţdý vzorek je moţno vybrat jednu ze specifikací uvedenou v Knize specifikací.


73/106 Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha specifikací se otevře okno Kniha specifikací:

Obr. 8.9: okno Parametry vzorku V horní polovině okna je seznam specifikací vedených v knize: Popis - název nebo popis dané specifikace Poznámka - poznámka ke specifikace – libovolný text V dolní polovině okna Knihy specifikací jsou Listy specifikace zahrnující následující údaje: Parametr - označení parametru ve specifikaci (např. koncentrace X) Odkaz - odkaz na dokument, který se k danému parametru váţe (analytická metoda) Specifikace - poţadovaná hodnota parametru ve vzorku, aby tento byl povaţován za vyhovující (např. max. 0.1% u nečistot, apod.)

Obr. 8.10: okno Opravit specifikaci Další specifikace se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Aktualizovat. Seznam specifikací a jednotlivou Specifikaci lze vytisknout. Pomocí Historie lze ukázat jednotlivé záznamy v čase. 8.3 KNIHA MĚŘIDEL Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha měřidel se otevře okno Kniha měřidel. Obdobně jako u Knihy vzorků se podle toho, jaký typ knihy je zvolen v okně Nastavení programu (definuje se z menu Nástroje – Obecné nastavení– záloţka Knihy) otevře daná kniha, a to buď kniha měřidel Jednoduchá nebo Rozšířená


74/106

8.3.1 JEDNODUCHÁ KNIHA MĚŘIDEL V horní polovině okna Kniha měřidel - jednoduchá je seznam měřidel s popisnými údaji:

Obr. 8.11: okno Kniha měřidel

Obr. 8.12: okno Kniha měřidel Název měřidla Datum zprovoznění Umístění Evidenční číslo Odpovídá Výrobní číslo Servis Odkaz Poznámka

- název, pod kterým je měřidlo vedeno - datum, kdy bylo uvedeno do provozu - název laboratoře nebo místa, kde se nachází - číslo, pod kterým je měřidlo vedeno - jméno pracovníka, který za měřidlo odpovídá - výrobní číslo přidělené výrobcem - kontakt na servisní organizaci - odkaz na dokument, vztahující se k měřidlu - libovolný text jako poznámka

V dolní polovině okna je List měřidla se seznamem akcí a kalibrací provedených s daným měřidlem: Datum Akce

- datum akce/kalibrace - popis akce


75/106

Provedl Výsledek Ověřil Poznámka

- jméno osoby, která akci provedla - výsledek provedené akce - jméno osoby, která výsledek ověřila - libovolný text jako poznámka

Obr. 8.13: okno Opravit list měřidla Další měřidla se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. Záznamy v Knize lez také Tisknout, Exportovat a zobrazovat jejich Historii. 8.3.2 ROZŠÍŘENÁ KNIHA MĚŘIDEL Okno Kniha měřidel – rozšířená má 2 záloţky: „Všechna měřidla“ a „Podle kategorií“. Podle kategorií se všechna měřidla dělí do 3 skupin:  měřidla s platnou kalibrací  měřidla s neplatnou kalibrací  měřidla mimo evidenci

Obr. 8.14: okno Kniha měřidel - rozšířená Přidat a editovat měřidlo je moţné pomocí tlačítek Přidat, Opravit, Vyjmout a Kopírovat. V okně Nové/Opravit měřidlo se zadávají údaje pro jednotlivé měřidlo:


76/106

Obr. 8.15: okno Nové/Opravit měřidlo Checkboxy: Mimo evidenci Trvale vyřazeno

- zařazení/vyřazení měřidla do/ze skupiny „Mimo evidenci“ - přiřazení atributu „Trvale vyřazeno“ k měřidlu „Měřidla mimo evidenci“

Záloţka Hlavní: Název měřidla Typ měřidla Kategorie měřidla Popis měřidla Přiřazení k jinému měřidlu Identifikační číslo Inventární číslo Výrobní číslo Rozsah měření Třída přes./nejistota měření Úsek Oddělení Místnost číslo Pověřený pracovník Uţivatel Rok výroby Datum zprovoznění Stav při zprovoznění Výrobce Dodavatel Servis Odkaz Omezení pouţívání Poznámka

- název, pod kterým je měřidlo vedeno - typ měřidla - kategorie měřidla - popis měřidla - údaj o přiřazení měřidla (např. teploměru) k jinému měřidlu - identifikační číslo - inventární číslo - výrobní číslo - rozsah měření, pro který je měřidlo vedeno - třída přesnosti event. nejistota měření - úsek - název oddělení - číslo místnosti - pověřený pracovník - uţivatel - rok výroby - datum zprovoznění - stav při zprovoznění - výrobce - dodavatel - servis - odkaz na dokument, vztahující se k měřidlu - omezení pouţívání měřidla - libovolný text jako poznámka

Záloţka Kalibrace: Datum poslední kalibrace Výsledek Interval kalibrace (Bez omezení) Datum příští kalibrace Datum hlášení konce kalib.

- datum poslední provedené kalibrace - výsledek kalibrace - interval kalibrace - alternativa k intervalu kalibrace –kalibrace měřidla platná doţivotně - datum, kdy se musí měřidlo nejpozději opět kalibrovat - datum, od kterého se měřidlo označí červeně, indikující blízký konec platnosti kalibrace


77/106

Kontakt Kontaktní osoba Zkušebna číslo Kalibrační protokol Kalibrační postup Poznámka

- kontaktní údaje - jméno kontaktní osoby - číslo zkušebny - odkaz na číslo kalibračního protokolu - odkaz na kalibrační postup - poznámka ke kalibraci

Obr. 8.16: okno Opravit kalibraci Záloţka Ostatní: Datum Akce Provedl Výsledek Ověřil Poznámka

- datum akce (instalace, validace, oprava, preventivní údrţba, apod.) - popis akce - jméno osoby, která akci provedla - výsledek provedené akce - jméno osoby, která výsledek ověřila - libovolný text jako poznámka

8.4 KNIHA DOKUMENTŮ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha dokumentů se otevře okno Kniha dokumentů:

Obr. 8.17: okno Kniha dokumentů V knize jsou uvedeny následující údaje: Název dokumentu - název dokumentu Označení dokumentu - označení dokumentu podle zásad číslování dokumentace v dané laboratoři Odkaz - odkaz na dokument, pokud je třeba


78/106

Verze Autor dokumentu Datum vydání Datum účinnosti Počet výtisků Schválil Rozdělovník Poznámka

- číslo verze dokumentu - jméno autora dokumentu - datum vydání - datum, od kterého dokument nabývá na účinnosti - počet vytištěných výtisků - jména osob, které dokument schválili - jména drţitelů dokumentu - libovolný text jako poznámka

Obr. 8.18: okno Kniha dokumentů Další dokumenty se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. Vyjmutím dokumentu z knihy se dokument dostává do Koše, odkud ho lze Obnovit (přes zobrazit koš). Dokumenty mohou být také Vytištěny, Exportovány nebo Otevřeny. 8.5 KNIHA ODCHYLEK A REKLAMACÍ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha odchylek a reklamací se otevře okno Kniha odchylek a reklamací:

Obr. 8.19: okno Kniha odchylek a reklamací V knize jsou uvedeny následující údaje: Reklamace číslo Předmět reklamace Datum reklamace

- číslo, pod kterým je reklamace vedena - předmět reklamace - datum vzniku reklamace


79/106 Materiál / analýza Reklamující Vyřizuje Výsledek reklamace Datum ukončení řízení Poznámka

- označení, co je předmětem reklamace (nevyhovující kvalita materiálu, nebo výsledek analýzy) - jméno osoby, která reklamuje - jméno osoby, která reklamaci vyřizuje (provádí nápravná opatření) - výsledek jakým byla reklamace ukončena - datum ukončení reklamačního řízení - libovolný text jako poznámka

Obr. 8.20: okno Opravit odchylku Další záznamy se do knihy se přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. Vyjmutím dokumentu z knihy se dokument dostává do Koše, odkud ho lze Obnovit (přes zobrazit koš). Záznamy mohou být také Vytištěny nebo Exportovány. 8.6 KNIHA KONTAKTŮ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha kontaktů se otevře okno Kniha kontaktů. V knize je Adresář s moţností definování Skupin, Poloţek a jednotlivých Kontaktních osob. Navíc je pro jednotlivé kontakty zadávat a vyhodnocovat kriteria pro hodnocení dodavatelů kliknutím na tlačítko Hodnocení (viz také kap. 9.6.).

Obr. 8.21: okno Adresář Popis Skupiny: Popis Poznámka

- popis skupiny, např. dodavatelé, smluvní laboratoře, apod. - libovolný text jako poznámka


80/106

Poloţka (např. firma, do které patří veškeří pracovníci vedení v dané poloţce) je definována: - Adresou Název firmy Ulice Město Zkratka Účet Banka IČO/RČ DIČ Splatnost Zpráva Způsob úhrady Poznámka - Spojením: Tel. 1 Tel. 2, Tel. 3, Tel. 4 FAX Mobil E-mail WWW

- název firmy - ulice, kde má firma sídlo - město - zkratka firmy, pokud existuje - bankovní spojení - název banky - identifikační číslo nebo rodné číslo charakterizující firmu - daňové identifikační číslo - splatnost faktur - údaj o firmě - způsob úhrady, který se pouţívá - libovolný text jako poznámka - telefonní čísla - faxové číslo - číslo na mobilní telefon - emailová adresa - odkaz na webové stránky

- Kontaktními osobami: Příjmení - příjmení kontaktní osoby Jméno - jméno kontaktní osoby Jednatel - údaj o jednateli Funkce - funkce osoby v organizaci RČ - rodné číslo Ulice - kontaktní adresa PSČ, Město Tel. 1, Tel. 2 - telefonní spojení Mobil E-mail Poznámka - libovolný text jako poznámka Další záznamy se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. 8.7 KNIHA REFERENČNÍCH STANDARDŮ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha referenčních standardů se otevře okno Kniha referenčních standardů:

Obr. 8.22: okno Kniha referenčních standardů V horní polovině okna jsou údaje týkající se standardu: Název - název standardu Označení - označení standardu (kód)


81/106

Dodavatel Datum přijetí Mnoţství Jednotky Exspirace Poznámka

- název dodavatele standardu - datum, kdy byl standard přijat - dodané mnoţství - jednotky, ve kterých je uvedeno mnoţství - datum exspirace - libovolný text jako poznámka

Obr. 8.23: okno Kniha referenčních standardů V dolní polovině okna je Seznam záznamů o standardu s údaji o spotřebovávání standardu: Datum - datum odběru standardu Mnoţství - odebrané mnoţství Akce - odběr Provedl - jméno pracovníka Konečné mnoţství - konečné mnoţství po odběru Poznámka - libovolný text jako poznámka Další záznamy se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. 8.8 KNIHA CHEMIKÁLIÍ Kliknutím na Evidenční knihy – Kniha chemikálií se otevře okno Kniha chemikálií:

Obr. 8.24: okno Kniha chemikálií V knize jsou vedeny údaje o chemikálii: Název - název (obchodní či chemický – dle potřeb) Vzorec - sumární vzorec CAS n. - CAS číslo


82/106 Datum dodání Vypotřebováno Mnoţství Jednotky Dodavatel Odkaz R-S věty Poznámka

- datum dodání chemikálie - datum, kde došlo k vypotřebovaní chemikálie, pokud jiţ k němu došlo - dodané mnoţství chemikálie - jednotky pro mnoţství - označení dodavatele - odkaz, je-li třeba - výčet RS vět, vyţadovaný ze zákona - libovolný text jako poznámka

Obr. 8.25: okno Kniha chemikálií Další záznamy se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat. 8.9 KNIHA ODMĚRNÝCH ROZTOKŮ Kliknutím na Evidenční knihy – Odměrné roztoky se otevře okno Kniha odměrných roztoků:

Obr. 8.26: okno Kniha odměrných roztoků V knize mohou být vedeny údaje o odměrných roztocích: Název - označení odměrného roztoku Koncentrace - připravená koncentrace Připravil - jméno pracovníka, který roztok připravil Připraven dne - datum přípravy roztoku Stanoven dne - datum stanovení faktoru roztoku Exspirace - datum exspirace Faktor - faktor Poznámka - libovolný text jako poznámka


83/106

Obr. 8.27: okno Upravit roztok Další záznamy se do knihy přidávají a editují pomocí Přidat, Opravit, Vyjmout, Uložit, Zpět a Aktualizovat.


84/106

KAPITOLA

9 NÁSTROJE Tato kapitola popisuje uţivatelské a administrátorské funkce implementované v software o o o o o o o o o o

Statistické tabulky Instalační a operační kvalifikace Obecné nastavení Data a výpočty Seznam uţivatelů Seznam analytiků Politiku hesel a elektronického podpisu Databázi – zálohování a obnovu Manaţer databáze Globální revizní stopy

9.1 STATISTICKÉ TABULKY Program má v sobě vestavěné statistické tabulky, které umoţňují automatické vyhodnocení všech potřebných statistických hypotéz. Tabulky se otevírají přes Nástroje – Statistické tabulky. Pro kontrolu má uţivatel moţnost si tabulky prohlédnout v jednotlivých záloţkách a porovnat je s literárními údaji. Např. kliknutím na Studentovo t se otevře záloţka s kritickými hodnotami t pro oboustranný Studentův t-test v rozsahu stupňů volnosti n od 1 do 120, na hladinách významnosti 95 a 99%, tj. pro alfa riziko 5, resp. 1%:

Obr. 9.1: okno Statistické tabulky

9.2 INSTALAČNÍ KVALIFIKACE (IQ) V hlavním programové menu EffiValidation 3.0 se kliknutím na Nástroje – Instalační kvalifikace otevře okno Instalační kvalifikace. V něm jsou uvedeny základní informace týkající se pouţitých souborů potřebných pro správnou funkci software:


85/106

Obr. 9.2: okno Instalační kvalifikace     

Soubor Verze Velikost Datum Výsledek



Popis

- název souboru - verze souboru - velikost souboru - datum vzniku nebo poslední změny souboru - potvrzení nebo zamítnutí hypotézy o shodě zjištěných údajů s referenčními údaji v paměti. Pokud je pro všechny soubory OK, Instalační kvalifikace je úspěšně dokončena - popis souboru (jeho funkce v programu)

Výsledek Instalační kvalifikace ve formě zprávy je moţno vytisknout, doporučuje se podepsat a archivovat. Tím je kvalifikaci moţno povaţovat za ukončenou. V případně potřeby je záznam z instalační kvalifikace moţno předloţit inspekčnímu orgánu. 9.3 OPERAČNÍ KVALIFIKACE (OQ) Kliknutím na Nástroje – Operační kvalifikace se otevře okno Operační kvalifikace

Obr. 9.3: okno Operační kvalifikace Kliknutím na Spustit se spustí Operační kvalifikace. Pro kaţdou výpočetní metodu (viz. seznam níţe) se načtou data pro operační kvalifikaci, provede se výpočet s aktuálně nainstalovanou verzí EffiValidation, výsledky se porovnání s údaji v referenčním souboru a zobrazí se výsledek. Ten vypadá následovně:


86/106 OPERAČNÍ KVALIFIKACE -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Datum: 2003-9-14 23:45:43 EffiValidation 3.0 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1. INSTALOVANÁ VERZE -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------EffiValidation 3.0, build 3.0.2399 ADRESÁŘ S INSTALOVANÝM SOFTWARE -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------C:\Program Files\EffiValidation 3.0\ ADRESÁŘ S REFERENČNÍMI ÚDAJI ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------C:\Program Files\EffiValidation 3.0\OQ 2. PŘEHLED DÍLČÍCH VÝSLEDKŮ OPERAČNÍ KVALIFIKACE ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Vyhovuje - Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření Vyhovuje - Opakovatelnost: z paralelních měření Vyhovuje - Mezilehlá (střední) přesnost Vyhovuje - Reprodukovatelnost: data k dispozici Vyhovuje - Správnost: Omezený koncentrační rozsah - rekonstituce moţná Vyhovuje - Správnost: Omezený koncentrační rozsah - referenční materiál k dispozici Vyhovuje - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: t-test Vyhovuje - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus k dispozici: regresně Vyhovuje - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus není k dispozici: t-test Vyhovuje - Správnost: velký koncentrační rozsah - slepý pokus není k dispozici: regresně Vyhovuje - Správnost: srovnání 2 metod/laboratoří: t-test po úrovních Vyhovuje - Správnost: srovnání 2 metod/laboratoří: t-test na rozdíl výsledků Vyhovuje - Linearita: korelační a QC koeficient Vyhovuje - Linearita: ANOVA na těsnost proloţení Vyhovuje - Linearita: Významnost kvadratického členu - F-test Vyhovuje - Linearita: znaménkový test Vyhovuje - Meze: 3s - IUPAC Vyhovuje - Meze: 3s - kaţdý vzorek korigován na slepý pokus Vyhovuje - Meze: 3s - kontinuálně měřený slepý pokus Vyhovuje - Meze: z kalibrační přímky Vyhovuje - Meze: ze signálu slepého pokusu v chromatografii Vyhovuje - Selektivita: porovnání kalibračních přímek Vyhovuje - Selektivita: porovnání výsledků se standardem Vyhovuje - Selektivita: porovnání výsledků s měřením bez interferentu Vyhovuje - Robustnost Vyhovuje - Citlivost: z kalibrační přímky Vyhovuje - Citlivost: minimální stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti Vyhovuje - Slepý pokus Vyhovuje - Kalibrace: kalibrační standardy Vyhovuje - Regulační diagramy: individuální měření - charakteristiky regulace stanoveny Vyhovuje - Regulační diagramy: individuální měření - charakteristiky regulace nestanoveny Vyhovuje - Regulační diagramy: opakovaná měření - charakteristiky regulace stanoveny Vyhovuje - Regulační diagramy: opakovaná měření - charakteristiky regulace nestanoveny Vyhovuje - Hotelling T2 vícerozměrný regulační diagram Vyhovuje - Nejistoty: z přesnosti - vícenásobná měření k dispozici Vyhovuje - Nejistoty: z přesnosti - paralelní měření k dispozici Vyhovuje - Nejistoty: z regulačního diagramu - individuální měření Vyhovuje - Nejistoty: z regulačního diagramu - opakovaná měření Vyhovuje - Nejistoty: z parciálních nejistot Vyhovuje - Nejistoty: expertni odhad Vyhovuje - Mandelova statistika h Vyhovuje - Mandelova statistika k Vyhovuje - Mezilaboratorní porovnání - Reprodukovatelnost a opakovatelnost Vyhovuje - Opakovatelnost nástřiku dle FDA Vyhovuje - Kapacitní faktor dle FDA Vyhovuje - Rozlišení píků dle FDA Vyhovuje - Faktor chvostování dle FDA


87/106 Vyhovuje - Počet teoretických pater dle FDA Vyhovuje - Rozlišení píků dle Ph.Eur. Vyhovuje - Počet teoretických pater dle Ph. Eur. Vyhovuje - Faktor symetrie dle Ph. Eur. 3. VÝSLEDEK OPERAČNÍ KVALIFIKACE -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Operační kvalifikace byla úspěšně dokončena. Všechny algoritmy EffiValidation dosáhly s daty pro operační kvalifikaci očekáváný výsledek.

Výsledek Operační kvalifikace ve formě zprávy je moţno Tisknout, a doporučuje se ověřit výtisk podpisem a zaarchivovat. Tím je operační kvalifikaci moţno povaţovat za ukončenou. V případě, ţe by u některé z metod byl zjištěn nevyhovující výsledek OQ, je třeba ověřit nainstalovanou verzi, tj. provést IQ. Pokud IQ vyhovuje a OQ nevyhovuje, je třeba kontaktovat dodavatele programu. Zpráva z Operační kvalifikace je nakopírována do Informačního panelu okna EffiValidation 3.0

Obr. 9.4: okno EffiValidation 3.0 – záloţka Validační zpráva a uloţena na databáze EffiValidation 3.0. Všechny zprávy z OQ mohou zobrazeny ze záloţky Seznam zpráv OQ z okna Operační kvalifikace

. Obr. 9.5: okno Operační kvalifikace – záloţka Seznam zpráv OQ


88/106

Kde ● ●

Datum Název počítače

● ●

Datum tisku Vytvořil - změnil

Zpráva

- datum provedení OQ - název počítače, na němţ byla OQ provedena. Toto umoţňuje rozeznat OQ na jednotlivých počítačích v síti - datum vytistění Zprávy OQ - jméno uţivatele, který záznam o OQ vytvořil (OQ provedl) - kopie celé zprávy z OQ tak jak byla vytvořena OQ procedurou

Pokud výsledek Operační kvalifikace nevyhovuje, zkontrolujte, zda instalovaná verze odpovídá dokumentace a dodávce. Kontrolu lze provést pomocí Instalační kvalifikace (viz. 9.2). Pokud výsledek Operační kvalifikace je nevyhovující, kontaktujte dodavatele resp. technickou podporu [email protected] . 9.4 OBECNÉ NASTAVENÍ Kliknutím na Nástroje – Obecné nastavení se otevře okno Nastavení programu. V něm systémový administrátor můţe nastavit následující: V záloţka Obecné:

Obr. 9.6: okno Nastavení programu – záloţka Obecné Při spuštění programu pouţít naposledy pouţitou metodu Při naplnění daty zobrazit parametr/metodu tučně Stínované menu V reg. diagramech zobrazovat okno vyhodnocení

- automaticky pouţije poslední analytickou metodu

Jazyk

- přepíná mezi Českou a Anglickou verzí programu

Záloţka Knihy: Kniha vzorků Kniha měřidel

- zobrazit parametr tučně v okně Plná (Průzkum.) validace - přepíná mezi stínovaným a obyčejným menu - zapíná/vypíná zobrazení Vyhodnocení u Regulačních diagramů

- dovoluje přepínat mezi Jednoduchou / Rozšířenou knihou vzorků - dovoluje přepínat mezi Jednoduchou / Rozšířenou knihou měřidel

9.5 DATA A VÝPOČTY Kliknutím na Nástroje – Data a výpočty se otevře okno Data a výpočty. V něm systémový administrátor můţe nastavit doporučený počet Úrovní a doporučený počet Měření pro daný parametr/metodu. Tyto počty se budou v okně Tabulka dat zobrazovat zeleným rámečkem. Navíc je moţno nastavit poţadavky na jednotlivé parametry jako je poţadavek na korelační a QC koeficient pro vyhodnocení Linearity, apod.


89/106

Obr. 9.7: okno Data a výpočty Linearita: Korelační a QC koeficient - Korelační koeficient: hodnota korelačního koeficientu, jejíţ dosaţení je povaţováno za důkaz o linearitě (viz. 5.3.8.1). Standardní hodnota: min. 0.99 - QC koeficient: hodnota QC koeficientu, jejíţ dosaţení je povaţováno za důkaz o linearitě (viz. 5.3.8.1). Standardní hodnota: max. 5% Meze: - konstanta pouţitá při výpočtu Meze detekce. Standardně: 3 - konstanta pouţitá při výpočtu Meze stanovitelnosti. Standardně: 10 HPLC dle FDA: - Opakovatelnost nástřiku: hodnota pouţitá na testování hypotézy a dostatečné Opakovatelnosti nástřiku (viz. 5.3.12). Standardní hodnota: 1% - Kapacitní faktor: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Kapacitního faktoru (viz. 5.3.13). Standardní hodnota: 2 - Rozlišení: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Rozlišení (viz. 5.3.14). Standardní hodnota: 1.5 - Chvostování: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Chvostování (viz. 5.3.15). Standardní hodnota: 2 - Počet teoretických pater: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Počtu teoretických pater (viz. 5.3.16). Standardní hodnota: 2 000. HPLC dle PhEur: - Rozlišení: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Rozlišení (viz. 5.3.17). Standardní hodnota: 1 - Počet teoretických pater: hodnota pouţitá na testování hypotézy o vyhovující hodnotě Počtu teoretických pater (viz. 5.3.18). Standardní hodnota: 2 000. Ostatní parametry: - Hladina významnosti (1-alfa)*100: hladina významnosti pro chybu 1. řádu, která ovlivňuje kritické hodnoty t, F, C, Q a G při aplikaci statistických hypotéz. Moţnosti: 95 a 99%. - Hladina významnosti (1-beta)*100: hladina významnosti pro chybu 2. řádu, která ovlivňuje kritickou hodnotu t při vyhodnocení Citlivosti - Nejmenší stanovitelný rozdíl ve validované vlastnosti. Moţnosti 95 a 99%.

9.6 KRITERIA PRO HODNOCENÍ (DODAVATELŮ) Systémový administrátor můţe kliknutím na Nástroje – Kriteria pro hodnocení (dodavetelů) otevřít okno Kriteria pro hodnocení:


90/106

Obr. 9.8: okno Kriteria pro hodnocení V něm je moţné pomocí tlačítek Přidat, Opravit a Vyjmout editovat obsah. Kliknutím na Přidat se otevře okno Nové kriterium:

Obr. 9.9: okno Nové kriterium Zde se obecně zadávají kriteria pro hodnocení dodavatelů (např. cena, dodací lhůty, servis, pruţnost, kvalita, atd.), která budou pouţita pro hodnocení jednotlivých dodavatelů v Knize kontaktů.

9.7 SEZNAM UŢIVATELŮ Systémový administrátor můţe kliknutím na Nástroje – Seznam uživatelů otevřít okno Seznam uţivatelů:

Obr. 9.10: okno Seznam uţivatelů Kde    

Jméno a příjmení Skupina Přihlašovací jméno Status uţivatele

- plné jméno a příjmení uţivatele (ne přihlašovací jméno) - skupina do které uţivatel patří z hlediska přístupového oprávnění - jméno pouţívané na přihlášení do programu EffiValidation 3.0 - aktuální statut uţivatele, tj. Aktivní, Deaktivovaný a Odstraněný. Detaily viz. níţe

V okně Seznam uţivatelů systémový administrátor můţe definovat Přidat nové uţivatele, Upravit stávající a Kopírovat existující uţivatele, Změnit heslo a změnit statut uţivatele: Akt/NeA/Ods. 9.7.1 NOVÝ UŢIVATEL Kliknutím na Přidat se otevře okno Nový uţivatel:


91/106

Obr. 9.11: okno Nový uţivatel Zadejte: Jméno a příjmení Přihlašovací jméno Skupina Heslo Potvrzení hesla Uţivatelská práva

- jméno a příjmení uţivatele (ne uţivatelské jméno na přihlášení do programu), slouţící k identifikaci uţivatele. Toto jméno bude zobrazeno v Seznamu uţivatelů a ve stavovém řádku okna EffiValidation 3.0 - jméno pouţívané na přihlášení uţivatele do software - skupina do které uţivatel patří: Administrátor, Uţivatel, Host (viz. kap. 2.4) - heslo pouţívané na přihlášení uţivatele do software. Pokud jsou pouţívány elektronické záznamy a elektronický podpis, heslo musí vyhovovat pravidlům popsaným v kap. 9.9. - ověření, ţe uvaţované heslo bylo správně zadáno - checkboxy umoţňující definovat přístupová práva uţivatelů k jednotlivým funkcím programu. Tlačítko Označit vše můţe být pouţito k označení všech checkboxům. Tlačítko Zrušit vše ke zrušení všech zvolených checkboxů.

Pouze v případě ţe zadané Heslo a Potvrzení hesla jsou stejná a uvaţovaná pravidla pro aplikaci elektronických záznamů a podpisů jsou splněna (viz 9.9) je zpřístupněno tlačítko Uložit. Kliknutím na Upravit nebo Kopírovat v okně Seznam uţivatelů se systémovému administrátorovi otevře okno Uţivatel (obdoba Obr. 9.10), v němţ můţe upravit vloţené údaje, včetně hesla a uloţit je jak je popsáno výše. 9.7.2 ZMĚNA HESLA Systémový administrátor můţe uţivateli změnit heslo kliknutím na Změnit heslo v okně Seznam uţivatelů (viz. 9.7), čímţ se otevře okno Změnit heslo:

Obr. 9.12: okno Změnit heslo


92/106 V okně je třeba zadat Nové heslo

Potvrdit heslo

- nové heslo (nahrazující aktuální heslo) pouţívané na přihlášení uţivatele do software. Pokud se aplikuj politika elektronických záznamů a elektronických podpisů, Heslo musí vyhovovat pravidlům popsaným v kap. 9.8. - potvrzení, ţe uvaţované nové heslo bylo zadáno správně

Pouze v případě ţe zadané Heslo a Potvrzení hesla jsou stejná a uvaţovaná pravidla pro aplikaci elektronických záznamů a podpisů jsou splněna (viz 9.9) je zpřístupněno tlačítko Uložit. 9.7.3 ZMĚNA STATUTU UŢIVATELE V okně Seznam uţivatelů můţe systémový administrátor nastavit statut uţivatele opakovaným kliknutím na tlačítko Akt/DeA/Ods následovně: Akt - aktivní uţivatel který se můţe přihlásit do software EffiValidation 3.0 pouţitím svého Uţivatelského jména a Hesla DeA - deaktivovaný uţivatel má deaktivované uţivatelské jméno a heslo. To můţe být díky vypršením doby platnosti Hesla, překročením počtu neúspěšných přihlášení do EffiValidation 3.0 nebo protoţe systémový administrátor deaktivoval danému uţivateli uţivatelské oprávnění (detaily jsou uvedeny v kap. 9.9) Ods - odstraněný uţivatel měl v minulosti zadané uţivatelské jméno a heslo, ale to bylo zablokováno a nemůţe být znovu aktivováno (poţadavek 21 CFR Part 11, viz. také kap. 9.9). Typickým důvodem k odstranění jména uţivatele jeho opuštění laboratoře.

9.8 SEZNAM ANALYTIKŮ Kliknutím na Nástroje – Seznam analytiků se otevře okno Seznam analytiků. V tomto okně lze zadat uţivatelské jméno nového uţivatele, nebo změnit či smazat existující jméno:

Obr. 9.13: okno Seznam analytiků Tlačítka na pravé straně okna mají následující význam: Zavřít - zavřít okno Seznam uţivatelů Přidat - vytvoření nového uţivatele (viz. kap. 9.8.2) Opravit - oprava údajů u existující analytika (viz. kap. 9.8.2) Vyjmout - vratné smazání zvoleného analytika z aktuálního Seznamu analytiků do koše. Smazaný analytik můţe být z koše obnoven kliknutím na Obnovit 9.8.1 NOVÝ ANALYTIK Kliknutím na Seznam analytiků - Přidat se otevře okno Analytik. V tomto okně lze zadat jméno nového analytika:

Obr. 9.14: okno Analytik


93/106

Jméno Příjmení

- jméno nového analytika - příjmení nového analytika

9.9 POLITIKA HESEL A ELEKTRONICKÝ PODPIS Politika hesel a elektronického podpisu umoţňuje omezit přístup uţivatelů k programu a zamezit neoprávněné editaci dat. Další moţnost jak omezit přístup uţivatelů k jednotlivým funkcím programu je od-označit odpovídající checkboxy v okně nový Uţivatel (viz. kap. 9.6.1). Navíc můţe být omezen přístup uţivatelů k jednotlivým Analytickým metodám v okně Definice práv k metodě (viz. kap. 4.3.3). Systémový administrátor můţe kliknutím na Nástroje – Politika hesel a elektronického podpisu otevřít okno Politika hesel a elektronického podpisu. V tomto okně administrátor můţe nastavit pravidla pro aplikaci elektronických záznamů a podpisu. V případě ţe Systémový administrátor chce nastavit pravidla tak, aby vyhovovala 21 CFR Part 11 (Final Rule), doporučuje se zaškrtnout první checkbox: Vyţadovat elektronický podpis. Následkem toho se zaškrtnou všechny checkboxy (aplikují všechny pravidla pro elektronický podpis). Pokud Systémový administrátor nechce nastavit aplikaci pravidel dle 21 CFR Part 11, můţe přesto vybrat jakoukoliv kombinaci checkboxů/pravidel, takţe se politika hesel aplikuje částečně. „ES‟ jsou označena pravidla, která jsou poţadována pro elektronický podpis, „ER‟ jsou označena pravidla pro aplikaci elektronických záznamů: Poţadovat elektronický podpis

- elektronické záznamy a podpisy jsou aplikovány v souladu s 21 CFR Part 11 Poţadovat dva identifikátory při prvním podpisu - pro první pouţití elektronického podpisu se vyţadují oba identifikátory (Uţivatelské jméno a Heslo Vyţadovat jeden identifikátor při dalších podpisech - pro další podpisy se vyţaduje pouze jeden identifikátor (Heslo) Akceptovatelná doba nečinnosti (standardně 10 min.) - přijatelná doba nečinnosti během podepisování. Pokud je překročena, musí být identifikátory zadány znovu Přihlašovací jména se nesmí opakovat - vyţadují se jedinečná přihlašovací jména do programu Hesla se nesmí opakovat - vyţadují se jedinečná hesla do programu Maximální doba platnosti hesla (standardně 365 dní) - maximální doba platnosti hesla zajišťující, ţe hesla jsou měněna v pravidelných časových intervalech Minimální délka hesla (standardně 6 znaků) - minimální délka hesla, která je povaţována za dostatečnou z hlediska zabezpečení Heslo musí obsahovat číslice - poţadavek, aby heslo obsahovalo číslici z důvodu většího zabezpečení hesla Heslo musí obsahovat velká a malá písmena - poţadavek, aby heslo obsahovalo malá a velká písmena z důvodu většího zabezpečení Maximální počet neúspěšných přihlášení - tolerovaný počet neúspěšných pokusů o přihlášení, jeţ má zabránit neautorizovanému pouţití software


94/106

Obr. 9.15: okno Politika hesel a elektronického podpisu Pokud některý z poţadavků na zabezpečení heslem nebyl splněn, např. vypršela maximální doba platnosti hesla, musí uţivatel heslo změnit:

Obr. 9.16: okno Změnit heslo 9.10 DATABÁZE Kliknutím na Nástroje – Databáze se otevře okno s Databáze – Zálohování. V okně lze provádět následující operace: Spusť zálohování - spustí zálohování dat v databázi, tak jak bylo definováno v Manaţeru databází (viz. 9.10) Obnovit ze zálohy - spustí obnovu dat ze zálohy Zavřít - zavře okno Zálohování

Obr. 9.17: okno Zálohování


95/106

9.11 MANAŢER DATABÁZE 9.11.1 SEZNAM DATABÁZÍ Systémový administrátor můţe kliknutím na Nástroje – Manažer databází otevřít okno Seznam databází. Z tohoto okna mohou být databáze ovládány:

Obr. 9.18: okno Seznam databází Tlačítka na pravé straně okna mají následující význam: Zavřít - zavření okna Seznam databází Vytvořit - vytvoření nové databáze (viz. kap. 9.11.2) Přidat - připojení k existující databázi (viz. kap. 9.11.3) Opravit - editace nastavení připojení k existující databázi (viz kap. 9.11.2) Vyjmout Standardní

- nevratné smazání zvolené databáze z okna Seznam databází.. Databáze ale zůstává uloţena ve svém původním úloţišti - zvolení vybrané databáze jako výchozí

9.11.2 NOVÁ DATABÁZE Systémový administrátor můţe kliknutím na Vytvořit v okně Seznam databází (Obr. 9.18) vytvořit novou databázi pro software EffiValidation 3.0:

Obr. 9.19: okno Nová databáze Název databáze Server Protokol Primární databázový soubor Soubor zálohy -

název nové databáze která se má vytvořit název serveru, na kterém bude databáze umístěna typ protokolu, který bude pouţit (obvykle TCP/IP) - cesta a název souboru, do kterého se vytvoří a uloţí nová databáze cesta a název souboru, kam se bude ukládat záloha databáze při zálohování


96/106 Velikost stránky Znaková sada Collation

- 1024, 2048, 4096, 8192 nebo 16384. Obvykle 4096 - ţádná, ISO 8859_1, ISO 8859_2, WIN1250, WIN1251, WIN1252, WIN1253 nebo WIN1254. Obvykle WIN1250 - PXW_CSY, PXW_HUN, PXW_HUNDC, PXW_PLK, PXW_SLOV, WIN1250. Obvykle WIN1250

9.11.3 PŘIDAT DATABÁZI Systémový administrátor můţe kliknutím na Přidat v okně Seznam databází (Obr. 9.18) přidat existující databázi (např. od jiného uţivatele software EffiValidation) do Seznamu databází:

Obr. 9.20: okno Přidat databázi Název databáze Server Protokol Soubor zálohy Primární databázový soubor Znaková sada Collation

název existující databáze která se má přidat do Seznamu databází název serveru, na kterém bude databáze umístěna typ protokolu, který bude pouţit (obvykle TCP/IP) cesta a název souboru, kam se bude ukládat záloha databáze při zálohování - cesta a název souboru, ve kterém je uloţena přidávaná databáze ţádná, ISO 8859_1, ISO 8859_2, WIN1250, WIN1251, WIN1252, WIN1253 nebo WIN1254. Obvykle WIN1250 - PXW_CSY, PXW_HUN, PXW_HUNDC, PXW_PLK, PXW_SLOV, WIN1250. Obvykle WIN1250

9.11.4 OPRAVIT DATABÁZI Systémový administrátor můţe kliknutím na Opravit v okně Seznam databází (obr. 9.18) otevřít okno Opravit databázi a upravit aktuální nastavení pro zvolenou databázi ze seznamu databází:

Obr. 9.21: okno Opravit databázi Název databáze Server Protokol Soubor zálohy

-

název editované databáze ze Seznamu databází název serveru, na kterém je databáze umístěna typ protokolu, který je pouţit (obvykle TCP/IP) cesta a název souboru, kam se ukládá záloha databáze při zálohování


97/106 Primární databázový soubor - cesta a název souboru, ve kterém je uloţena databáze Znaková sada - ţádná, ISO 8859_1, ISO 8859_2, WIN1250, WIN1251, WIN1252, WIN1253 nebo WIN1254. Obvykle WIN1250 Collation - PXW_CSY, PXW_HUN, PXW_HUNDC, PXW_PLK, PXW_SLOV, WIN1250. Obvykle WIN1250

9.12 SOUHRNNÉ REVIZNÍ STOPY Systémový administrátor můţe kliknutím na Nástroje – Souhrnné revizní stopy otevřít okno Souhrnné revizní stopy. Informace obsaţená v tomto okně shrnuje, kdo (který uţivatel) provedl jakou akci v programu (zobrazení dat/editace), kde (ve kterém okně software) a kdy:

Obr. 9.22: okno Souhrnné revizní stopy ID číslo Datum Čas Název počítač Vytvořil – změnil Strávený čas Popis Transakce

- pořadové číslo akce v okně Souhrnné revizní stopy, umoţňující chronologické třídění - datum akce - čas zahájení akce - název počítače, na kterém se akce provádí - jméno uţivatele, který záznam vytvořil nebo změnil - čas, který v daném okně programu uţivatel strávil - název okna, ve kterém byla akce provedena - typ transakce: Zobrazení záznamu, editace, pouţití

Tlačítka (funkce) v pravé straně okna Souhrnné revizní stopy mají následující význam: Filtr Nastavení Zobrazit

- filtr revizních stop, viz. 9.12.1 - nastavení revizních stop a historie elektronických záznamů, viz. 9.12.2 - zobrazení detailu záznamu v revizní stopě, pokud existuje, viz. 9.12.3

9.12.1 FILTR REVIZNÍCH STOP Systémový administrátor můţe kliknutím na Souhrné revizní stopy - Filtr otevřít okno Filtr revizních stop. V tomto okně mohou být záznamy Souhrných revizních stop filtrovány podle datumu nebo casu záznamu, jména počítače , jména uţivatele, výpočetní metody nebo uvaţované validace:


98/106

Obr. 9.23: okno Filtr revizních stop Pro třídění dle datumu nebo času uţivatel můţe nastavit intervaly od: do: pro odfiltrování záznamů z tohoto období. V ostatních případech můţe vybrat z předdefinovaných skupin, ţe chce zobrazit záznamy pouze odpovídající zvolené skupině. 9.12.2 NASTAVENÍ REVIZNÍCH STOP A HISTORIE ZÁZNAMŮ Systémový administrátor můţe kliknutím na Souhrnné revizní stopy – Nastavení otevřít okno Nastavení revizních stop a historie záznamů. V tomto okně lze nastavit, zda se mají zaznamenávat Revizní stopy a/nebo Historie záznamů:

Obr. 9.24: okno Nastavení revizních stop a historie záznamů Historie záznamů Souhrnné revizní stopy

- zapínání/vypínání zaznamenávání Historie - zapínání/vypínání zaznamenávání revizních stop

9.12.3 ZOBRAZENÍ ZÁZNAMU Z REVIZNÍCH STOP Systémový administrátor můţe kliknutím na Souhrnné revizní stopy – Zobrazit (pokud je tlačítko aktivní) otevřít okno se záznamem ve formě, ve které byl záznam k danému data a času vytvořen

Obr. 9.25: okno Historie (měřidla) otevřené z okna Souhrnných revizních stop


99/106

KAPITOLA

10 NÁPOVĚDA Tato kapitola obsahuje popis: o

menu Nápověda EffiValidation

10.1 NÁPOVĚDA K PROGRAMU Kliknutím na Nápověda – Nápověda k programu se otevře okno s Nápověda k programu se základními informacemi. 10.2 OBSAH A REJSTŘÍK Kliknutím na Nápověda – Obsah a rejstřík se otevře okno Obsah a rejstřík. V rejstříku lze vyhledávat témata zapsáním hledaného řetězce znaků, v obsahu lze listovat po kapitolách jako v Uţivatelské příručce. 10.3 TIPY DNE Kliknutím na Nápověda – Tip dne se otevře okno Tipy a triky. V okně lze listovat kliknutím na Další nebo okno Zavřít.

Obr. 10.1: okno Tipy a triky

10.4 HOTLINE E-MAIL Kliknutím na Nápověda – Hotline emailem se otevře okno pro vytvoření e-mailové zprávy, ve kterém se zpráva napíše. Následně je moţné ji odeslat na adresu [email protected]. 10.5 O PROGRAMU Kliknutím na Nápověda – O programu se otevře okno O Programu. V okně jsou uvedeny základní kontaktní údaje o tvůrci programu.


100/106

KAPITOLA

11 ZÁVĚR – PODPORA UŢIVATELŮ Tato kapitola obsahuje:  

informace o podpoře uţivatelů tištěnými dokumenty popis elektronické podpory uţivatelů EffiValidation

11.1 TIŠTĚNÉ DOKUMENTY Software EffiValidation je doplněn doprovodnou dokumentací v tištěné podobě, kterou je moţno obdrţet od dodavatele programu buď poštou nebo staţením z internetu na adresách www.effichem.cz nebo www.effichem.com.

11.2 ELEKTRONICKÁ PODPORA Na internetových stránkách www.effichem.cz nebo www.effichem.com jsou ke staţení : Instalační soubor: - instalační soubor programu a DEMO verze EffiValidation 3.0, s uvedením tzv. „Build“ čísla (čísla pod-verze), např. EffiValidation 3.0.2420 Dokumentace - Uţivatelská příručka EffiValidation 3.0 (včetně Tutoriálu) - Příručka řešených příkladů EffiValidation 3.0 Kromě toho lze EffiChem elektronicky kontaktovat s jakýmikoliv dotazy a připomínkami, týkajícími se EffiValidation, validací a jištění jakosti v analytických laboratořích obecně. Pokud máte potíţe s programem, uveďte kromě popisu vlastního problému minimálně následující informace: - pouţívaný operační systém - verzi programu, včetně čísla buildu, např. EffiValidation 3.0.2420 - k emailu přiloţte soubor Error.log z adresáře, ve kterém je software (soubor EffiValidation3.exe) nainstalován


101/106

KAPITOLA

12 TUTORIÁL Tato kapitola obsahuje tutoriál k software EffiValidation 3.0, popisující:    

jak spustit software vytvořit novou analytickou metodu vyhodnotit validační data pouţívat elektronické evidenční knihy laboratoře

12.1 SPUŠTĚNÍ PROGRAMU Spusťte program kliknutím na Start – Programy - EffiValidation 3.0 a EffiValidation 3.0. Otevře se okno Ověření uţivatele. Zadejte Přihlašovací jméno a heslo a klikněte na OK:

Obr. 12.1: okno Ověření uţivatele Otevře se hlavní programové okno EffiValidation 3.0:

Obr. 12.2: hlavní programové okno EffiValidation 3.0


102/106 V záhlaví okna je název programu s ikonou EffiValidation 3.0, níţe menu ze kterého se program ovládá, níţe označení Aktuální analytické metody, v levé polovině hlavního okna Panel ikon pro zrychlenou práci a v pravé polovině okna tzv. Informační panel. V dolní části okna je údaj o verzi (build 3.0.2420), datum (28.12 2006), datum poslední operační kvalifikace (14.12. 2006) a označení aktuálního uţivatele (Administrátor). 12.2 VYTVOŘENÍ NOVÉ METODY V menu hlavního programového okna EffiValidation 3.0 klikněte na Analytické metody > Nová metoda. Otevře se okno Nová metoda:

Obr. 12.3: okno Nová metoda Postupně zadejte následující údaje: Materiál Pitná voda Série 1 Projekt N03- a NO2- Číslo m. CH.0003 Pouţitá metoda UV Datum 5. 5. 2003 Verze 1.01 Norma ISO 4182:1979 Analytik Ing. Jan Novák (klikněte na ikonu vpravo, Přidat a v otevřeném okně Analytik zadejte Jméno: Jan, Příjmení: Novák a klikněte na Uložit). V rámci tohoto projektu zadejte jednotlivé validované vlastnosti (analyty) - klikněte na Nová. V otevřeném okně Validované vlastnosti zadejte NO3- a klikněte na Uložit. Znovu klikněte na Nová a zadejte NO2- a klikněte na Uložit. Takto zaloţenou Novou metodu (projekt s Validovanou vlastností NO3- a NO2-) uloţte kliknutím na Uložit. Databáze Analytických metod je tím rozšířena o metodu: "Pitná voda – CH.0003 - UV – 5.5. 2003 – NO3- a NO2- - 1". Můţete to zkontrolovat kliknutím na Seznam metod z menu Analytické metody a Aktualizovat V Seznamu metod jsou kromě nově zadané metody všechny předcházející metody (DEMO project). V Seznamu lze: (a) třídit podle kterékoliv poloţky klíče, a to kliknutím na záhlaví daného sloupce (např. Materiál) a (b) vyhledávat zadaný řetězec znaků zapsaný z klávesnice (např. „Pitná voda“). Klikněte na metodu: Pitná voda – CH.0003 - UV – 5.5. 2003 – NO3- a NO2- - 1 a na Použít. Tak se metoda vybere jako Aktuálně vyhodnocovaná a její název se objeví v Hlavním programovém okně.


103/106

12.3 VYHODNOCENÍ VALIDAČNÍCH DAT Z menu hlavního programového okna EffiValidation 3.0 klikněte na Validace a Plná validace. Otevře se okno Plná validace. V něm vyberte parametr, který chcete vyhodnocovat: Opakovatelnost, resp. konkrétní vyhodnocovaní metodu: Po úrovních z vícenásobného měření. 12.3.1 OPAKOVATELNOST Kliknutím na Opakovatelnost - Po úrovních z vícenásobného měření z okna Plná validace se otevře okno Tabulka dat - Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření. Zadejte data pro vyhodnocení opakovatelnosti: Úroveň 5 Úroveň 25 Úroveň 50

5,31 25,02 49,81

5,01 24,95 50,45

4,97 24,86 50,35

5,33 24,38 50,11

5,08 28 49,68

5,01 24,95 50,45

řádky tabulky odpovídají jednotlivým koncentračním úrovním (5, 25 a 50), sloupce výsledkům opakovaných měření na úrovni (5.31, 5.01, 4.97, ...). Zadejte Jednotky, ve kterých jsou zadána data: mg/l. Červeně orámována část Tabulky dat odpovídá rozsahu dat, který je pro výpočet minimálně potřeba, jinak výpočet nelze spustit (1 úroveň - řádek, 2 opakovaná měření - sloupce). Zeleně orámovaná část tabulky odpovídá rozsahu dat, který se pro vyhodnocení Opakovatelnosti doporučuje (3 úrovně – řádky, 6 měření - sloupců):

Obr. 12.4: Tabulka dat – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření Čím je rozsah dat větší, tím je odhad hodnoty Opakovatelnosti přesnější. Pod tabulkou jsou Instrukce, popisující jak data zadávat a vyhodnocovat (je to druh nápovědy). Pokud chcete data v tabulce editovat, pouţijte příkazy z menu Úpravy: Vložit úroveň (nebo Insert z klávesnice), Vymazat úroveň (nebo Ctrl-Del), Zrušit měření, Kopírovat (Ctrl-C), Vložit (Ctrl-V), případně šipky z klávesnice nebo Delete. Po zadání dat klikněte na ikonu Uložit a na Vyhodnocení – Výpočet nebo přímo na ikonu Vyhodnocení (F5). Otevře se okno Graf - Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření:


104/106

Obr. 12.5: okno Graf – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření V tomto okně jsou pro kaţdou úroveň (osa x) zobrazeny odchylky opakovaných naměřených hodnot od průměru na úrovni (osa y), které podmiňují hodnotu Opakovatelnosti. Kromě okna Graf se automaticky otevře také okno Vyhodnocení - Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření:

Obr. 12.6: okno Vyhodnocení – Opakovatelnost: po úrovních z vícenásobného měření V něm jsou pro kaţdou úroveň uvedeny hodnoty Průměru (5.1183, ...) měření, Opakovatelnost (0.1603, ...), Rel.(ativní) opakovatelnost (3.13%, ...) v % a Počet měření n (6). Pod tabulkou v Závěru je uvedena půlovaná hodnota Opakovatelnosti (0,788 mg/l) a Relativní opakovatelnosti (3,52%) určená v celém testovaném rozsahu. Kliknutím na List – Tisk lze celou sestavu DATA – VYHODNOCENI – GRAF vytisknout. V okně Vyhodnocení jsou navíc na záloţkách Cochran, Grubbs, Grubbs párový, Dixon a Normalita uvedeny výsledky testování odlehlých bodů a normality. Např. při pouţití Grubbsova testu a testování Normality byly v daném případě nalezeny následující výsledky:

Obr. 12.7: okno Grubbsův test – detekce odlehlých bodů Měření č. 5 na úrovni 2 je odlehlé, neboť vypočtená hodnota statistického kriteria C = 2.0093 je vyšší neţ kritická hodnota Ccrit z tabulek = 1.887.


105/106

Obr. 12.8: okno Komolgovov-Smirnov test – testování normality Odlehlost tohoto bodu způsobuje to, ţe data na úrovni 2 nejsou normálně Gaussovsky rozloţena, coţ je potvrzeno Komolgov-Smirnovým testem na normalitu, kde vypočtená hodnota 0, 4358 je vyšší neţ kritická hodnota 0,323 z tabulek. Jelikoţ statistické testování prokázalo, ţe měření 5 na úrovni 2 s hodnotou 28 je odlehlé, je toto měření eliminováno (Delete) a výpočet Opakovatelnosti zopakován kliknutím na Výpočet. Po eliminaci jsou vypočteny půlované hodnoty Opakovatelnost: 0,26 mg/l a Relativní opakovatelnost: 1,99%. Klikněte na Zavřít a Zavřít, čímţ se vrátíte do okna Tabulka dat - Opakovatelnost. Označte všechny hodnoty v okně Tabulka dat pomocí klávesy Shift a šipek. Klikněte z menu na Úpravy - Kopírovat, nebo Ctrl-C. Tím se data z okna Tabulka dat - Opakovatelnost nakopírují do dočasné paměti. Tato data budou pouţita pro vyhodnocení Správnosti. Klikněte na Zpět. Vrátíte se do okna Plná validace. Obdobným postupem lze vyhodnotit všechny ostatní validační parametry, mezi-laboratorní porovnání, kalibrace, regulační diagramy a nejistoty.

12.4 POUŢITÍ EVIDENČNÍCH KNIH Z hlavního programového okna EffiValidation 3.0 klikněte na Evidenční knihy a Knihy referenčních standardů. Otevře se okno Knihy referenčních standardů. V horní polovině okna je uveden seznam všech evidovaných referenčních standardů. V dolní polovině jsou zobrazeny záznamy pro jednotlivý standard:

Obr. 12.9: okno Knihy referenčních standardů Kliknutím na Opravit se otevře okno Opravit standard. V tomto okně uţivatel můţe zadat nebo opravit veškeré informace o standardu, např. Název, Označení, atd.:


106/106

Obr. 12.10: okno Opravit standard Podobným způsobem můţe být do knihy přidán další referenční standard. Kliknutím na Opravit v okně Opravit standard se otevře okno Opravit list standardu. V něm lze zaznamenat veškeré činnosti provedené se standardem, např. příjem, spotřebu, atd..:

Obr. 12.11: okno Opravit list standardu Opravte poţadovaná data a klikněte na Uložit. Tím se okno zavře. Kliknutím na Zavřít se vrátíte do okna Kniha referenčních standardů. Klikněte na Zavřít. Vrátíte se do hlavního programového okna EffiValidation 3.0.

Obdobně jako Knihu referenčních standardů lze pouţívat i všechny ostatní evidenční knihy EffiValidation 3.0. Kliknutím na Analytické metody a Konec programu se program EffiValidation 3.0 zavře.


UŢIVATELSKÁ PŘÍRUČKA EFFIVALIDATION 3. EffiChem. Lesní 593, Lysice

Recommend Documents