SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK ETANOL BUAH TERONG BELANDA (Solanum betaceum Cav.) SKRIPSI

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK ETANOL BUAH TERONG BELANDA (Solanum betaceum Cav.)

SKRIPSI

OLEH: IRMA L. H. SINAGA 040804062

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2009 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK ETANOL BUAH TERONG BELANDA (Solanum betaceum Cav.)

SKRIPSI

Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Oleh:

IRMA L. H. SINAGA NIM 040804062

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2009 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

KATA PENGANTAR

Segala puji, hormat serta syukur penulis persembahkan kepada Allah yang hidup di dalam nama Yesus Kristus, Tuhan dan Juru Selamat Yang Mulia atas segala kemurahan-Nya penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi ini yang dibuat untuk memenuhi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi USU Medan. Ucapan terima kasih tak terhingga buat seorang wanita yang luar biasa tangguh yang terus berjuang memberi yang terbaik kepada penulis, my lovely mom Jenny Dermi Gultom. Pernyataan maaf penuh penyesalan juga penulis sampaikan untuk ayahanda tercinta Alm. Kaman Sinaga, karena tak mampu penuhi segala mimpi dan harapan yang telah dipercayakan kepada penulis. Juga ucapan terima kasih buat abang Renhard ( my king dragon), adik Ani (my sweet honey), adik Beatrich (my sweet princess) dan adik Fransiskus (my youngest dragon) atas segala doa, dukungan dan kasih sayang kepada penulis sehingga penulis tetap semangat dan termotivasi dalam menyelesaikan penelitian hingga penyelesaian skripsi ini. Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. sebagai Dosen Pembimbing I yang telah sabar membimbing dan menghadapi penulis terkhusus selama penelitian juga untuk waktu yang telah diberikan kepada penulis, dan kepada Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. sebagai Dosen Pembimbing II atas semua waktu dan bimbingan kepada penulis dan secara khusus penulis berterimakasih karena Anda telah menggantikan posisi Ayahanda tercinta menjadi inspirasi penulis untuk menyelesaikan penelitian dan bahkan untuk berprestasi kembali. Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. sebagai Dekan Fakultas Farmasi, Ibu Dra. Siti Aman, M.Si., Apt. sebagai Dosen Wali beserta seluruh staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik penulis. 2. Bapak dan Ibu Dosen Penguji atas kritik dan saran kepada penulis. 3. Teman-teman Farmasi 2004 khususnya anak-anak ”CaBe LoTiSS”, kalian adalah hadiah terindah dari Tuhan bagiku selama di Farmasi yang terus mendukung aku di dalam tangis dan juga tawaku, Jose & Dika, Eka Yana dan seluruh anak-anak KMKS serta semua pihak yang selalu setia memberikan dukungan kepada penulis. Akhir kata penulis memohon maaf atas segala keterbatasan dan kekurangan penulis dalam penulisan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat menjadi sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan.

Medan, Maret 2009 Penulis,

(Irma Lastiur Hilmasari Sinaga)

Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

ABSTRAK

Dalam rangka meningkatkan pemanfaatan antioksidan alami dari makanan, telah dilakukan penelitian uji aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) yang diekstraksi secara maserasi. Selanjutnya ekstrak dipekatkan dengan alat rotary evaporator dan dikeringkan dengan freeze dryer. Ekstrak diuji terhadap DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrilhydrazil) sebagai radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 494 nm, 514 nm dan 534 nm pada menit ke-18 dan menit ke-36 sesuai hasil pengukuran

operating

time,

menggunakan

spektrofotometer

uv-visibel.

Kemampuan antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah penambahan ekstrak. Hasil pengujian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki kemampuan antioksidan yang sangat lemah dalam meredam radikal bebas DPPH. Dalam penelitian ini juga digunakan vitamin C sebagai pembanding (kontrol positif). Dari hasil pengujian juga menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki IC50 sebesar 606.228 ppm pada menit ke-18 dan sebesar 536.132 ppm pada menit ke-36. Sementara vitamin C memiliki IC50 sebesar 28.489 ppm pada menit ke-18 dan sebesar 24.103 ppm pada menit ke-36.


ABSTRACT

In order to increase the usage of natural antioxidant from food, it had been tested the antioxidant activity from ethanol extracts of the fresh fruit of tree tomato (Solanum betaceum Cav.) which extracted by maceration. The extract was concentrated using rotary evaporator and then dried by freeze dryer. Extracs were tested by DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrilhydrazil) as free radical where the. absorbance of DPPH was measured at 494 nm, 514 nm and 534 nm in 18th and 36th minutes by used uv-visible spectrophotometer. Antioxidant ability was measured as the decrease in absorbance of DPPH solutions after the additions of the extract. The result show that the ethanol extracts of the fresh fruit of terong belanda (Solanum betaceum Cav.) were found to have a very weak antioxidant activities, as evaluated by DPPH free radical scavenging. In this research also used ascorbic acid such as references (control positive). And showed that IC50 ethanol extract of tree tomato (Solanum betaceum Cav.) was 606.228 ppm in 18th minutes and was 536.132 ppm in 36th minutes.While that of ascorbic acid was 28.489 ppm in 18th minutes and was 24.103 ppm in 36th minutes.


DAFTAR ISI

Halaman JUDUL ......................................................................................................... .......i LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................................ii KATA PENGANTAR ..........................................................................................iii ABSTRAK. .............................................................................................................v ABSTRACT ...........................................................................................................vi DAFTAR ISI .........................................................................................................vii DAFTAR TABEL ...................................................................................... .......xi DAFTAR GAMBAR ............................................................................................xii DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................xiii BAB I. PENDAHULUAN .....................................................................................1 1.1 Latar Belakang .......................................................................................1 1.2 Perumusan Masalah ...............................................................................3 1.3 Hipotesis ................................................................................................4 1.4 Tujuan ....................................................................................................4 1.5 Manfaat ..................................................................................................4 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................................5 2.1 Uraian Tumbuhan ..................................................................................5 2.1.1 Daerah Tumbuh . ...........................................................................5 2.1.2 Nama Daerah ................................................................................6 2.1.3 Nama Asing ..................................................................................6 2.1.4 Sistematika Tumbuhan. .................................................................6 2.1.5 Sinonim Tumbuhan. ......................................................................7 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

2.1.6 Morfologi Tumbuhan ....................................................................7 2.1.7 Kandungan Kimia ............................................................... .......8 2.1.8 Kegunaan ............................................................................ .......9 2.2 Ekstraksi...................................................................................... .....10 2.3 Radikal Bebas .............................................................................. .....12 2.4 Antioksidan ................................................................................. .....13 2.4.1 Antioksidan Alami .............................................................. .....14 2.4.2 Vitamin C ........................................................................... .....14 2.5 Penentuan Aktivitas Antioksidan ................................................. .....15 2.6 Spektrofotometri UV-Visibel ....................................................... .....17 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ................................................. .....18 3.1 Alat-Alat .................................................................................... ......18 3.2 Bahan-Bahan ............................................................................... .....18 3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi ........................................................ .....19 3.3.1 Larutan Pereaksi Bouchardat ............................................... .....19 3.3.2 Larutan Pereaksi Mayer ...................................................... .....19 3.3.3 Larutan Pereaksi Dragendorff ............................................. .....19 3.3.4 Larutan Pereaksi Molish ..................................................... .....19 3.3.5 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2 N ...........................................20 3.3.6 Larutan Pereaksi Asam Sulfat 2 N ..............................................20 3.3.7 Larutan Pereaksi Asam Nitrat 0,5 N .................................... .....20 3.3.8 Larutan Pereaksi Timbal(II) Asetat 0,4 M ..................................20 3.3.9 Larutan Pereaksi Besi (III) Klorida 1 % .....................................20 3.3.10 Larutan Pereaksi DPPH 0,5 mM ..............................................20 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

3.4 Pengambilan dan Pengolahan Sampel .................................................20 3.4.1 Pengambilan Sampel. ..................................................................20 3.4.2 Identifikasi Tumbuhan . ...............................................................21 3.4.3 Pengolahan Sampel . ....................................................................21 3.5 Skrining Fitokimia ...............................................................................21 3.5.1 Pemeriksaan Alkaloida ...............................................................22 3.5.2 Pemeriksaan Glikosida . ...............................................................22 3.5.3 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida ...........................................23 3.5.4 Pemeriksaan Flavonoida .............................................................23 3.5.5 Pemeriksaan Tanin ......................................................................23 3.5.6 Pemeriksaan Saponin ..................................................................24 3.5.7 Pemeriksaan Antrakinon .............................................................24 3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda ...............................24 3.7 Pengujian Kemampuan Antioksidan Sampel Uji Dengan Spektrofotometrei Visibe ............................................................. ......25 3.7.1 Prinsip Metode DPPH ......................................................... ......25 3.7.2 Pembuatan Larutan Blanko ................................................. ......25 3.7.3 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum dan Operating time Larutan DPPH dalam Metanol .................... ......25 3.7.4 Pembuatan Larutan Induk ................................................... ......26 3.7.5 Pembuatan Larutan Uji ....................................................... .....26 3.7.6 Penentuan Persen Peredaman .............................................. ......26 3.7.7 Penentuan Nilai IC50 ........................................................... ......27 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................28 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan . ...............................................................28 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

4.2 Hasil Skrining Fitokimia ......................................................................28 4.3 Hasil Penentuan Serapan Maksimum ..................................................29 4.4 Hasil Penentuan Operating Time Larutan DPPH Dalam Metanol ......30 4.5 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji ...............................30 4.6 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas DPPH Oleh Sampel Uji ....33 4.7 Analisis Nilai IC50 (Inhibitory Concentration) Sampel Uji .................36 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................................38 5.1 Kesimpulan ..........................................................................................38 5.2 Saran ....................................................................................................38 DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................39 LAMPIRAN .........................................................................................................41


DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 1. Kandungan Nutrisi Dalam 100 g Terong Belanda ................................ 9 Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Buah Terong Belanda (Solanum betaceumCav.) .................................................................... 28 Tabel 3. Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Ekstrak Etanol Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) ......................................... 33 Tabel 4. Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Vitamin C .................. 34 Tabel 5. Nilai IC50 ekstrak etanol terong belanda dan vitamin C ....................... 36


DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Kurva Serapan Maksimum Larutan DPPH 40 ppm Dalam Metanol Secara Spektrofotometri Visibel...........................................29 Gambar 2. Kurva Absorbansi Operating Time Larutan DPPH Dalam Metanol ............................................................................ ......30 Gambar 3. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) Pada Menit ke-18 ............31 Gambar 4. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) pada menit ke-36 . ............31 Gambar 5. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Vitamin C Pada Menit ke-18 .................................................................................32 Gambar 6. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Vitamin C Pada Menit ke-36 .................................................................................32 Gambar 7. Hubungan Konsentrasi Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) dengan persen peredaman pada menit ke-18 dan menit ke-36 .........................................................................35 Gambar 8. Hubungan konsentrasi vitamin C (ppm) dengan persen Peredaman Pada Menit ke-18 dan menit ke-36. ...................................35 Gambar 9. Tumbuhan Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) ......................42 Gambar 10. Bunga Terong Belanda (Betacei flos.) ...............................................42 Gambar 11. Buah Terong Belanda (Betacei fructus) .............................................43 Gambar 12. Buah Terong Belanda yang dibelah dua ............................................43 Gambar 13. Spektrofotometer UV-Visibel (Shimadzu mini 1240) .......................44


DAFTAR LAMPIRAN

Halaman Lampiran 1. Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan ............................................... 41 Lampiran 2. Tumbuhan Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) ................. 42 Lampiran 3. Gambar Alat................................................................................. 44 Lampiran 4. Bagan Ekstraksi Bahan Segar Secara Maserasi ............................. 45 Lampiran 5. Data Absorbansi Operating Time Larutan DPPH Dalam Metanol. 46 Lampiran 6. Perhitungan .................................................................................. 47


BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Kondisi lingkungan yang semakin memburuk dan berlubangnya lapisan ozon menyebabkan makin mudahnya terbentuk zat-zat radikal baik dalam bentuk logam dan nonlogam, yang mau tidak mau akan mencemari pangan yang kita konsumsi (Kumalaningsih, 2001). Radikal bebas adalah molekul yang kehilangan elektron, sehingga molekul tersebut menjadi tidak stabil dan selalu berusaha mengambil elektron dari molekul atau sel lain. Radikal bebas diproduksi secara alami oleh tubuh dalam jumlah kecil, tetapi akan timbul masalah bila diproduksi terlalu banyak (Kramer P., 2004). Buah-buahan memegang peranan penting dalam menunjang kesehatan dan kebugaran tubuh. Sebab dalam buah-buahan terkandung berbagai macam vitamin, mineral, serat pangan dan komponen antioksidan (Anonim, 2008). Antioksidan adalah zat yang dapat menetralisir radikal bebas sehingga atom

dengan elektron yang tidak berpasangan mendapat pasangan elektron

sehingga tidak liar lagi (Kosasih, 2004). Antioksidan merupakan suatu sistem pertahanan dalam tubuh yang berguna untuk menangkal kerusakan sel tubuh yang disebabkan oleh radikal bebas, yaitu jika jumlah radikal bebas lebih tinggi dari antioksidan alamiah, saat itulah tubuh memerlukan tambahan antioksidan dari luar yaitu dari bahan makanan tertentu (Anonim, 2008 ). Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Banyak sekali ragam antioksidan alami, tetapi jarang yang memiliki komponen kimia yang lengkap. Terong belanda termasuk keluarga Solanaceae yang berasal dari Peru dan masuk ke Indonesia dikembangkan antara lain di Bali, Jawa Barat dan Tanah Karo Sumatera Utara. Terong belanda mempunyai macammacam antioksidan yang lengkap baik dalam bentuk vitamin dan yang bukan, seperti vitamin A, vitamin C, vitamin B6, senyawa karotenoid, anthosianin dan serat. Lengkapnya antioksidan alami dalam buah terong belanda memungkinkan pemanfaatannya sebagai bahan baku pembuatan antioksidan (Kumalaningsih, 2001). Terong belanda selain kaya akan air juga mengandung provitamin A yang bagus untuk kesehatan mata dan vitamin C untuk mengobati sariawan dan meningkatkan daya tahan tubuh. Serat yang tinggi di dalam terong belanda bermanfaat untuk mencegah kanker dan sembelit/konstipasi. Mineral penting seperti potasium, fosfor dan magnesium mampu menjaga dan memelihara kesehatan tubuh (Anonim, 2008). Vitamin C (L-Asam askorbat) merupakan suatu antioksidan penting yang larut dalam air. Vitamin C menangkap secara efektif radikal-radikal O2-, OH-, peroksil dan oksigen singlet (Duthie dan Brown, 1994). Vitamin C dapat juga bekerja sebagai suatu koantioksidan dengan membentuk kembali (regenerasi) α-tokoferol dari bentuk radikal α-tokoferol. Fungsi ini sangat penting karena pada percobaan in-vitro diketahui bahwa αtokoferol dapat bekerja sebagai prooksidan jika tidak ada koantioksidan seperti vitamin C (Carr dan Frei, 1999).


Vitamin C termasuk golongan antioksidan karena sangat mudah teroksidasi oleh panas, cahaya dan logam. Oleh karena itu penggunaan vitamin C sebagai antioksidan semakin sering dijumpai (Anonim, 2008). Menurut Santosa et al. (1998) dan Okawa et al. (2001), metode aktivitas antiradikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)

merupakan metode

terpilih untuk menapis aktivitas antioksidan bahan alam (Amrun dan Ummayah, 2007). Metode analisa ini telah digunakan luas untuk menguji kemampuan dari suatu senyawa atau komponen untuk bereaksi sebagai penangkap radikal bebas atau donor hidrogen. Metode ini mengukur aktivitas dari antioksidan dalam melawan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) dan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan dari makanan (Anonim, 2001). Pengungkapan potensi terong belanda (Solanum betaceum Cav.) sebagai sumber antioksidan berkaitan dengan senyawa kimia yang terdapat di dalamnya. Oleh sebab itu dalam penelitian ini dilakukan skrining fitokimia terlebih dahulu, dan uji aktivitas antioksidannya menggunakan metode DPPH dengan vitamin C sebagai kontrol positif. 1.2 Perumusan Masalah a. Senyawa kimia golongan apa saja yang terkandung dalam buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) b. Apakah ekstrak etanol dari buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki aktivitas sebagai antioksidan untuk meredam radikal bebas


c. Berapakah kekuatan antioksidan dari ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dibandingkan dengan vitamin C sebagai kontrol positif. 1.3 Hipotesis a. Buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) mengandung golongan senyawa kimia flavonoid yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan. b. Ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) mempunyai aktivitas antioksidan. c. Ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki aktivitas antioksidan yang kuat. 1.4 Tujuan a. Untuk mengetahui golongan senyawa kimia yang terdapat dalam buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.). b. Untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.). c. Untuk mengetahui besar kekuatan antioksidan ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dibandingkan dengan vitamin C sebagai kontrol positif. 1.5 Manfaat a. Sebagai informasi golongan senyawa-senyawa kimia yang terkandung dalam buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.). b. Sebagai informasi tentang aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.)


BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan Uraian tumbuhan meliputi daerah tumbuh (habitat), nama daerah, nama asing, morfologi tumbuhan, sistematika tumbuhan, kandungan kimia dan kegunaan dari tumbuhan. 2.1.1 Daerah Tumbuh Terong belanda dapat bertahan hidup pada ketinggian 1000 m dpl atau lebih dan masih dapat hidup di atas 2000 m dpl, jika suhu bulanan rata-ratanya tetap di atas 10° C. Di dataran rendah, pohon terong belanda tidak mampu berbunga, sedangkan udara sejuk (khususnya malam yang sejuk) dapat mendorong pembungaan. Oleh karena itu, tanaman ini berbuah matang pada musim dingin di daerah subtropik, dan jika ditanam di daerah tropik buah matang sesudah terjadi udara dingin. Rasa buah akan menjadi lebih baik pada hari-hari cerah yang panas dan malam-malam yang dingin pada musim kemarau di daerah tropik daripada selama musim dingin di dataran tinggi. Terong belanda tumbuh baik di tanah yang baik drainasenya dengan bahan organik dan kelembapan sedang, namun tidak tahan terhadap genangan, walaupun hanya untuk 1-2 hari. Tanaman ini berakar dangkal, karenanya mudah roboh, juga cabang-cabangnya yang rapuh itu mudah sekali patah jika sedang berbuah lebat. Jadi, lokasi yang ternaung hendaknya dipilih atau diadakan pohon penahan angin (Anonim, 2005).


2.1.2 Nama Daerah Batak

: tiung (Toba), trung jepan (Karo)

Jawa Tengah

: terong mandras

Melayu

: terong belanda

Sunda

: terong menen

(Departemen Kesehatan dan Kesehatan Sosial, 2001). 2.1.3 Nama Asing Inggris

: tree tomato

Brazil

: tomate de arvore

Ekuador

: tomate dulce

Guatemala

: tomate, tomate extranjero, tomate de arbol, tomate granadilla, granadilla, pix, caxlan pix

Kolombia

: pepino de arbol

Kostarika

: tomate cimarron

New Zealand

: tamarillo

Venezuella

: tomate frances (Anonim, 2005).

2.1.4 Sistematika Tumbuhan Kingdom

: Plantae

Divisi

: Spermatophyta

Sub divisi

: Angiospermae

Klass

: Dicotyledoneae

Ordo

: Solanales

Famili

: Solanaceae

Genus

: Solanum


Spesies

: Solanum betaceum Cav.

(Departemen Kesehatan dan Kesehatan Sosial, 2001). 2.1.5 Sinonim Tunbuhan Sinonim

: Cyphomandra botacea Sendt. Cyphomandra crassicaulis – (Ortega.)Kuntze Cyphomandra hartwegi Sendt. (Anonim, 2001).

2.1.6 Morfologi Tumbuhan Tanaman ini memiliki daun yang berbulu berbentuk hati besar dan berwarna hijau. Daun yang hijau ini akan mudah sekali dirusak oleh terpaan angin yang kencang (Kumalaningsih, 2006). Bunga tamarillo akan muncul pada akhir musim gugur sampai pada awal musim semi. Warnanya pink dan terletak pada ujung cabang batang serta biasanya berkelompok. Tanaman ini memiliki benang sari dan putik serta kelopak bunga yang berwarna ungu hijau. Tanaman ini melakukan penyerbukan sendiri tetapi terkadang juga dibantu lebah dan angin meskipun sangat kecil kemungkinannya (Kumalaningsih, 2006). Tanaman ini memiliki tangkai panjang, satu dengan lainnya tumbuh sendirian atau ada yang berkelompok sebanyak 3-12. Buahnya berbentuk seperti telur dengan ukuran panjang antara 5-6 cm dan lebarnya di atas 5 cm. Warna kulitnya ada yang ungu gelap, merah darah, oranye atau kuning dan ada yang masih memiliki garis memanjang yang tidak jelas. Terong belanda yang masih mentah berwarna hijau agak abu-abu. Warna ini akan berubah menjadi merah kecoklatan apabila buah sudah matang. Di dalam buah ini terdapat daging buah yang tebal brwarna kekuningan dibungkus oleh selaput tipis yang mudah Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

dikelupas. Rasa buah ini seperti tomat dan teksturnya seperti buah plum dengan kandungan gizi yang relatif tinggi karena banyak mengandung vitamin A, C dan serat. Lapisan luar dari daging buah banyak mengandung air, sedikit kasar dan sedikit mengandung rasa manis (Kumalaningsih, 2006). Biji buah ini keras, berwarna coklat muda sampai hitam. Bentuk biji agak tumpul, bulat dan kecil, tetapi lebih besar daripada biji tomat yang sebenarnya (Kumalaningsih, 2006). 2.1.7 Kandungan Kimia Terong belanda adalah buah yang mempunyai kandungan nutrisi yang sangat baik, berisi beberapa kandungan vitamin yang sangat penting serta kaya akan besi dan potasium, kandungan sodium yang rendah dan berisi kurang dari 40 kalori (kurang lebih 160 kJ). Oleh karena kelengkapan dari kandungan gizi pada tamarillo, maka di Amerika Serikat buah terong belanda terkenal sebagai buah yang mengandung rendah kalori, sumber serat, bebas lemak (jenis reds) atau rendah lemak (jenis golden), bebas kolesterol dan sodium dan sumber vitamin C dan E yang sempurna (Kumalaningsih, 2006). Buah terong belanda juga mengandung senyawa-senyawa seperti beta karoten, antosianin dan serat. Di antara senyawa antioksidan yang dikandungnya, beta karoten mempunyai peranan yang sangat penting karena paling tahan terhadap serangan radikal bebas. Di dalam buah terong belanda terdapat 50 mg tiap 100 g bahan. Beta karoten merupakan salah satu jenis karotenoid yang banyak terdapat pada buah-buahan. Senyawa ini akan dikonversikan menjadi vitamin A (retinol) di dalam tubuh sehingga sering juga disebut sebagai provitamin A (Kumalaningsih, 2006). Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Menurut Kumalaningsih (2006), hasil analisis lengkap kandungan gizi buah terong belanda dapat dilihat pada tabel 1 berikut ini: Tabel 1. Kandungan Nutrisi Dalam 100 g Terong Belanda Kandungan Terong Belanda (tiap 100g) Nutrisi Vitamin A

540-5600 µg

Vitamin B1

0.03-0.14 mg

Vitamin B2

0.01-0.05 mg

Vitamin B6

0.01-0.05 mg

Vitamin C

15-42 mg

Vitamin E

2 mg

Niasin

0.3-1.4 mg

Potasium 0.28-0.38 g (Kalium) Kalsium

6-18 mg

Fosfor

22-65 mg

Magnesium

16-25 mg

Besi

0.3-0.9 mg

Seng

0.1-0.2 mg

Protein

1.4-2 g

Lemak

0.1-0.6 g

Serat

1.4-4.7 g

Kadar air

80-90 g

2.1.8 Kegunaan


Buah terong belanda berkhasiat sebagai obat tekanan darah tinggi dan penyegar badan. Untuk obat tekanan darah tinggi dipakai ± 3 buah terong belanda yang sudah masak, dikupas untuk sekali makan (Departemen Kesehatan dan Kesehatan Sosial, 2001). Kandungan antosianin, vitamin-vitamin serta zat-zat gizi lainnya di dalam buah terong belanda bekerja sinergis untuk: 1. Mencegah kerusakan sel-sel jaringan tubuh penyebab berbagai penyakit (kanker, tumor dan lain-lain). 2. Melancarkan penyumbatan pembuluh darah (arterisklorosis) sehingga mencegah penyakit jantung & stroke serta menormalkan tekanan darah.. 3. Menurunkan kadar kolesterol dan mengikat zat-zat racun dalam tubuh. 4. Meningkatkan stamina, daya tahan tubuh dan vitalitas. 5. Membantu mempercepat proses penyembuhan (Anonim, 2009). 2.2 Ekstraksi Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan maupun hewan. Sebelum ekstraksi dilakukan biasanya bahan – bahan dikeringkan terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu (Harborne, 1987). Menurut Departemen Kesehatan RI (2000), beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut yaitu: A.Cara dingin 1. Maserasi Maserasi adalah proses penyarian simplisia dengan cara perendaman menggunakan pelarut dengan sesekali pengadukan pada temperatur kamar. Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Maserasi yang dilakukan pengadukan secara terus menerus disebut maserasi kinetik sedangkan yang dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan terhadap maserat pertama dan seterusnya disebut remaserasi. 2. Perkolasi Perkolasi adalah proses penyarian simpilisia dengan pelarut yang selalu baru sampai terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pelembaban bahan, tahap perendaman antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) terus menerus sampai diperoleh perkolat yang jumlahnya 1-5 kali bahan. B. Cara panas 1. Refluks Refluks adalah proses penyarian simpilisia dengan menggunakan alat pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. 2. Digesti Digesti adalah proses penyarian dengan pengadukan kontinu pada temperatur lebih tinggi dari temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40 – 500 C. 3. Sokletasi Sokletasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut yang selalu baru, dilakukan menggunakan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan pelarut relatife konstan dengan adanya pendingin balik. 4. Infundasi Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperature 900 C selama 15 menit. 5. Dekoktasi Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperature 900 C selama 30 menit. 2.3 Radikal Bebas Radikal bebas adalah molekul yang kehilangan elektron, sehingga molekul tersebut menjadi tidak stabil dan selalu berusaha mengambil elektron dari molekul atau sel lain. Zat ini dapat dihasilkan dari hasil metabolisme tubuh dan faktor eksternal seperti asap rokok, hasil penyinaran ultra violet, zat kimiawi dalam makanan dan polutan lain (Anomin, 2007). Radikal bebas sangat reaktif dan dengan mudah menjurus ke reaksi yang tidak terkontrol, menghasilkan ikatan silang (cross-link) pada DNA, protein, lipida, atau kerusakan oksidatif pada gugus fungsional yang penting pada biomolekul ini. Perubahan ini akan menyebabkan proses penuaan. Radikal bebas juga terlibat dan berperan dalam patologi dari berbagai penyakit degeneratif, yakni kanker, aterosklerosis, rematik, jantung koroner, katarak (Silalahi, 2006). Radikal bebas yang sangat berbahaya dalam makhluk hidup antara lain adalah golongan hidroksil (OH-), seperoksida (O-2), nitrogen monooksida (NO), dan peroksidal (RO-2), peroksinitrit (ONOO-), asam hipoklorit (HOCL), hydrogen peroksida (H2O2) (Silalahi, 2006). Sebenarnya radikal bebas penting artinya bagi kesehatan dan fungsi tubuh yang

normal

yaitu

mengurangi

peradangan,

membunuh

bakteri

dan

mengendalikan tonus otot polos pembuluh darah dan organ – organ dalam tubuh. Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Namun bila dihasilkan melebihi batas kemampuan proteksi antioksidan selular, maka dia akan menyerang sel itu sendiri. Struktur sel yang berubah turut merubah fungsinya, yang akan mengarah pada proses munculnya penyakit (Suariasari, 2006). 2.4 Antioksidan Antioksidan adalah senyawa yang mempunyai struktur molekul yang dapat memberikan elektron dengan cuma – cuma kepada molekul radikal bebas tanpa terganggu sama sekali dan dapat memutuskan reaksi berantai dari radikal bebas (Kumalaningsih, 2006). Antioksidan yang ada di alam ini dibagi atas tiga macam yaitu : (1) Antioksidan yang dibuat oleh tubuh kita sendiri yang berupa enzim antara lain superoksidadismutase, glutathinoneperoxidase, peroxidase dan katalase (2) Antioksidan alami yang dapat diperoleh dari tanaman atau hewan, yaitu tokoferol, vitamin C, betakaroten, flavonoid dan senyawa fenolik (3) Antioksidan sintetik dibuat dari bahan-bahan kimia yaitu Butylated hidroxy-anisole (BHA), Butylated Hydroxy-toluene (BHT), Propylgallate (PG), yang ditambah dalam makanan untuk mencegah kerusakan lemak (Kumalaningsih, 2006). Antioksidan di dalam tubuh dibedakan atas tiga kelompok, yaitu (1) Antioksidan primer yang bekerja dengan cara mencegah terbentuknya radikal bebas yang baru dan mengubah radikal bebas menjadi molekul yang tidak merugikan, misalnya glutationperoksidase. (2) Antioksidan sekunder yang berfungsi untuk menangkap radikal bebas dan menghalangi terjadinya reaksi berantai, misalnya vitamin C, vitamin E, dan β-karoten. (3) Antioksidan tertier


yang bermanfaat untuk memperbaiki kerusakan biomolekular yang disebabkan oleh radikal bebas, misalnya DNA repair enzyme ( Silalahi, 2006).

2.4.1 Antioksidan Alami Hasil penelitian menunjukkan bahwa buah-buahan, sayuran dan biji-bijian adalah sumber antioksidan yang baik dan bisa meredam reaksi berantai radikal bebas dalam tubuh, yang pada akhirnya dapat menekan proses penuaan dini (Kosasih, 2004). Khasiat antioksidan untuk mencegah berbagai penyakit dan akan lebih efektif jika kita mengkonsumsi sayur-sayuran dan buah-buahan yang kaya akan antioksidan dari berbagai jenis daripada menggunakan antioksidan tunggal. Efek antioksidan dari sayur-sayuran dan buah-buahan lebih efektif daripada suplemen antioksidan yang diisolasi (Silalahi, 2006). 2.4.2 Vitamin C Vitamin adalah senyawa organik kompleks yang essensial untuk pertumbuhan dan fungsi biologis yang lain bagi mahluk hidup. Berhubung vitamin tidak disintesa dalam tubuh kecuali vitamin K, maka vitamin harus ada dalam makanan yang dikonsumsi. Vitamin tidak dapat disimpan dalam tubuh, oleh karenanya harus selalu ada dalam bahan makanan yang dikonsumsi. Bahan makanan yang kaya akan vitamin adalah sayur-sayuran dan buah-buahan (Sudarmadji, 1989). Vitamin C (asam askorbat) adalah suatu turunan heksosa dan diklasifikasikan sebagai karbohidrat yang merupakan monosakarida. Vitamin C dapat disintesis dari glukosa dan galaktosa dalam tumbuh- tumbuhan dan sebagian Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

besar hewan yang dapat mensintesis vitamin C. Di alam vitamin C terdapat dalam dua bentuk, yaitu L- asam askorbat ( bentuk tereduksi) dan L- dehidroasam askorbat ( bentuk teroksidasi). 2.5 Penentuan Aktivitas Antioksidan Bermacam-macam metode pengukuran aktivitas antioksidan telah digunakan untuk memantau dan membandingkan aktivitas antioksidan pada makanan memberikan hasil yang beragam tergantung pada spesifitas dari radikal bebas yang digunakan sebagai reaktan (Anonim, 2001). Sebuah metode yang cepat, sederhana dan murah untuk mengukur aktivitas antioksidan dari makanan yaitu dengan melibatkan penggunaan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). DPPH digunakan luas untuk menguji kemampuan dari suatu senyawa atau komponen untuk bereaksi sebagai penangkap radikal bebas atau donor hidrogen dan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan dari makanan. DPPH juga digunakan untuk menentukan antioksidan dalam kompleks biologi dalam beberapa tahun terakhir. Metode DPPH dapat digunakan untuk sampel padat ataupun cair dan telah digunakan untuk mengukur kadar antioksidan pada sampel (Anonim, 2001).


Gambar 1 : Rumus bangun DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)


N

N

N

N o

-

N

N o

-

N o

o

o N

-

N

-

o

-

o

o

N

o

-

o

o

o

Gambar Resonansi dari DPPH ( 1.1-diphenyl-2- picrylhydrazyl)

OH

o

HO

N

-2H

.

OH

+ N OH

o

-

o

N

N o

OH

-

o N -

o

o

N

O

o

HO

O

+

NH o

-

o

N

OH

N o

-

OH

o N o

-

o

Gambar reaksi antara DPPH dengan atom H netral yang berasal dari antioksidan Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

2.6 Spektrofotometri UV-Visibel Ahli kimia telah lama menggunakan warna sebagai bantuan dalam mengenali zat-zat kimia. Spektrofotometri dapat dianggap sebagai perluasan suatu pemeriksaan visual, yaitu dengan menggunakan alat untuk mengukur absorpsi energi radiasi macam-macam zat kimia dan memungkinkan dilakukannya pengukuran kualitatif dan kuantitatif dari suatu zat dengan ketelitian yang lebih besar (Day, 1994). Spektrofotometri serapan adalah pengukuran serapan radiasi elektromagnit panjang gelombang tertentu yang sempit, mendekati monokromatik, yang diserap zat. Pengukuran serapan dapat dilakukan pada daerah ultraviolet (panjang gelombang 190–380 nm) atau pada daerah cahaya tampak (panjang gelombang 380–780 nm) (Depkes, 1979). Spektrofotometer pada dasarnya terdiri atas sumber sinar monokromotor, tempat sel untuk zat yang diperiksa, detektor, penguat arus dan alat ukur atau pencatat (Departemen Kesehatan RI, 1979). Spektrofotometri yang sering digunakan dalam dunia industri farmasi salah satu adalah spektofotometri ultraviolet dan visibel (cahaya tampak). Spektrum UV-Visibel mempunyai spektrum yang lebar dan hanya sedikit informasi tentang struktur yang bisa didapatkan dari spektrum ini. Tetapi spektrum ini sangat berguna untuk pengukuran secara kuantitatif (Dachriyanus, 2004).


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium Kimia Farmasi Kwantitatif, Fakulatas Farmasi, Universitas Sumatera Utara. Metodologi penelitian meliputi pengumpulan dan pengolahan sampel, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak dan pengujian kemampuan antioksidan secara spektrofotometri visibel. 3.1 Alat-alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah uv mini 1240spektrofotometer uv-visibel (Shimadzu), penguap vakum putar (Heidolph VV 2000), frezee dryer (Modulyo/Edwards), neraca kasar (Ohaus), neraca analitik (Vibra), pisau dan sendok stainless steel, water bath, eksikator, krus porselin dan alat-alat gelas laboratorium. 3.2 Bahan-bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) yang sudah matang berwarna merah tua sampai merah keunguan, kertas saring. Semua bahan-bahan kimia yang digunakan, kecuali dinyatakan lain adalah berkualitas pro analisis produksi Sigma: 1,1diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH); produksi E. Merck: etanol, metanol, kloroform, isopropanol (2-propanol), eter, benzena, asam asetat anhidrat, natrium hidroksida, alfa naftol, asam nitrat pekat, asam sulfat pekat, asam klorida pekat,


toluena, kloralhidrat, iodium, raksa (II) klorida, timbal (II) asetat, kalium iodida, bismut (III) nitrat, besi (III) klorida dan amil alkohol. 3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi Pembuatan larutan pereaksi dilakukan menurut Departemen Kesehatan RI tahun 1978 dan tahun 1979. 3.3.1 Larutan Pereaksi Bouchardat Sebanyak 4 g kalium iodida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling, ditambahkan iodium sebanyak 2 g dan dicukupkan dengan air suling hingga 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.3.2 Larutan Pereaksi Mayer Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida, kemudian dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml. Pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10 ml air suling. Kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.3.3 Larutan Pereaksi Dragendorff Sebanyak 8 g bismut (III) nitrat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat. Pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 50 ml air suling. Kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.3.4 Larutan Pereaksi Molish Sebanyak 3 g alfa-naftol ditimbang, kemudian dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1978).


3.3.5 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2 N Sebanyak 17 ml asam klorida pekat dilarutkan dalam air suling hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979).

3.3.6 Larutan Pereaksi Asam Sulfat 2 N Sebanyak 5,5 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979). 3.3.7 Larutan Pereaksi Asam Nitrat 0,5 N Sebanyak 3,4 ml asam nitrat pekat diencerkan dengan air suling hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979). 3.3.8 Larutan Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M Sebanyak 15,17 g timbal asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling bebas karbondioksida hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979). 3.3.9 Larutan Pereaksi Besi (III) Klorida 1% b/v Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979). 3.3.10 Larutan Pereaksi DPPH 0,5 mM Sebanyak 19,7 mg DPPH ditimbang, kemudian dilarutkan dalam metanol hingga volume 100 ml (Departemen Kesehatan RI, 1979). 3.4 Pengambilan Dan Pengolahan Sampel 3.4.1 Pengambilan Sampel Sampel yang digunakan diperoleh dari Pasar Sore, Padang Bulan, Medan, Propinsi Sumatera Utara. Metode pengambilan sampel dilakukan secara acak, yaitu dengan teknik probability sampling (Simple Random Sampling). Proses Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

pengambilan sampel dilakukan dengan memberi kesempatan yang sama pada setiap anggota populasi untuk menjadi anggota sampel (Anonim, 2003). 3.4.2 Identifikasi Tumbuhan Identifikasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium Taksonomi Tumbuhan, Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara. 3.4.3 Pengolahan Sampel Pengolahan buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dilakukan terhadap sampel segar, berwarna merah tua sampai merah keunguan sebanyak 500 g. Proses pencucian dilakukan untuk menghilangkan kotoran yang menempel pada saat pemanenan atau pada saat penyimpanan. Pada tahap ini dilakukan juga pemisahan tangkai buah dari buahnya. Buah yang sudah dicuci bersih kemudian dilap menggunakan tisu bersih, lalu dilakukan pembelahan secara melintang menggunakan pisau stainless steel, dengan tujuan agar memudahkan dalam proses pemisahan antara kulit buah dengan bagian dalam buah (daging dan biji). Proses selanjutnya adalah pemisahan daging buah serta bijinya dengan kulit buahnya menggunakan bantuan sendok. Kemudian daging buah dan biji dihaluskan dengan cara menekan (kneading), diperoleh bubur buah sebanyak 350 g, dimasukkan ke dalam wadah lalu ditutup. 3.5 Skrining Fitokimia Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa kimia dalam buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) secara kualitatif. Skrining ini dilakukan terhadap sampel segar yang telah dihaluskan dan selalu dibuat baru yang digunakan dalam penelitian meliputi pemeriksaan senyawa Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

kimia golongan alkaloida, glikosida, steroida/triterpenoida, flavonoida, saponin, tanin dan antrakinon. 3.5.1 Pemeriksaan Alkaloida Sebanyak 0,5 g buah segar yang telah dihaluskan, ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat dipakai untuk uji alkaloida sebagai berikut : a. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Bouchardat, akan terbentuk endapan berwarna coklat sampai kehitaman c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Dragendorff, akan terbentuk endapan merah atau jingga Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.5.2 Pemeriksaan Glikosida Sebanyak 3 g buah segar yang telah dihaluskan, disari dengan cara refluks menggunakan 30 ml campuran etanol 95% dengan air suling (7:3) selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), dilakukan berulang sebanyak 3 kali. Kumpulan sari air tambahkan natrium sulfat anhidrat, saring dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50 oC, sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sari air dalam metanol dimasukkan ke dalam tabung reaksi selanjutnya diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

dan 5 tetes larutan pereaksi Molish. Tambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya glikosida (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.5.3 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida Sebanyak 1 g buah segar yang telah dihaluskan, dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, disaring, filtrat diuapkan dalam cawan penguap dan pada sisanya ditambahkan 20 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat (pereaksi Liebermann-Burchard). Apabila terbentuk warna ungu atau merah yang berubah menjadi biru hijau menunjukkan adanya steroida/triterpenoida (Harborne, 1987). 3.5.4 Pemeriksaan Flavonoida Sebanyak 10 g buah segar yang telah dihaluskan, ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Fransworth, 1996). 3.5.5 Pemeriksaan Tanin Sebanyak 0,5 g buah segar yang telah dihaluskan, disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Departemen Kesehatan RI, 1978).


3.5.6 Pemeriksaan Saponin Sebanyak 0,5 g buah segar yang telah dihaluskan, dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok kuatkuat selama 10 detik, jika terbentuk buih yang mantap setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.5.7 Pemeriksaan Antrakinon Sebanyak 0,2 g buah segar yang telah dihaluskan, ditambah 5 ml asam sulfat 2 N, dipanaskan sebentar, setelah dingin ditambahkan 10 ml benzena, dikocok dan didiamkan. Lapisan benzena dipisahkan dan disaring. Lapisan benzena dikocok dengan 2 ml natrium hidroksida 2 N, didiamkan. Lapisan air berwarna merah dan lapisan benzena tidak berwarna menunjukkan adanya antrakinon (Departemen Kesehatan RI, 1978). 3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda Pembuatan ekstrak dilakukan secara maserasi menggunakan pelarut etanol (Departemen Kesehatan RI, 1979). Caranya : Sebanyak 200 g (10 bagian terhadap pelarut) simplisia (bahan segar yang telah dihaluskan) dimasukkan ke dalam sebuah wadah, dituangi dengan 1500 ml (75 bagian) etanol 96%, ditutup, dibiarkan selama 3 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk, diserkai. Ampas dicuci dengan etanol 96% secukupnya hingga diperoleh 2000 ml (100 bagian). Pindahkan ke dalam wadah tertutup, dibiarkan di tempat sejuk terlindung dari cahaya, selama 2 hari. Enap tuangkan Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

atau disaring. Filtrat yang diperoleh digabung dengan filtrat yang telah diperoleh sebelumnya. Pemekatan ekstrak dilakukan dengan alat rotary evaporator kemudian ekstrak dikeringkan dengan teknik freeze dryer. 3.7

Pengujian

Kemampuan

Antioksidan

Sampel

Uji

Dengan

Spektrofotometri Visibel 3.7.1

Prinsip Metode DPPH DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) sebagai radikal bebas dalam

larutan etanol/metanol digunakan untuk menentukan aktivitas antioksidan sampel uji, yaitu kemampuan sampel uji dalam meredam

proses oksidasi DPPH

(peredaman warna ungu DPPH) dengan IC50 (konsentrasi sampel uji yang mampu meredam radikal bebas sebesar 50%) sebagai parameternya. 3.7.2

Pembuatan Larutan Blanko Larutan DPPH 0,5 mM dipipet sebanyak 5 ml, kemudian dimasukkan ke

dalam labu tentukur 25 ml, dicukupkan volumenya dengan metanol sampai garis tanda (konsentrasi 40 ppm). 3.7.3 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum dan Operating Time Larutan DPPH dalam Metanol Larutan blanko dihomogenkan dan diukur serapannya pada panjang gelombang 400-800 nm dan diperoleh λmaks= 514 nm. Pengukuran dilanjutkan untuk menentukan operating time larutan DPPH dalam metanol sampai menit ke60 (selama 1 jam).


3.7.4 Pembuatan Larutan Induk Sebanyak 25 mg sampel uji ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu tentukur 25 ml dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda (konsentrasi 1000 ppm). 3.7.5 Pembuatan Larutan Uji Larutan induk dipipet sebanyak 1 ml; 2 ml; 3 ml dan 4 ml kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml (untuk mendapatkan konsentrasi 40 ppm, 80 ppm, 120 ppm dan 160 ppm), kemudian ke dalam masing-masing labu tentukur ditambahkan 5 ml larutan DPPH 0,5 mM (C = 40 ppm) lalu volume dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda. 3.7.6

Penentuan Persen Peredaman Menurut Santosa et al (1998) dalam Amrun dan Umayah (2007),

absorbansi DPPH diukur pada panjang gelombang 494 nm, 514 nm dan 534 nm pada menit ke-18 dan sekali lagi pada menit ke-36. Kemampuan antioksidan diukur sebagai penurunan serapan larutan DPPH (peredaman warna ungu DPPH) akibat adanya penambahan sampel uji. Nilai serapan larutan DPPH sebelum dan sesudah penambahan sampel uji tersebut dihitung sebagai persen peredaman. Perhitungan kapasitas antiradikal bebas DPPH sebagai persen peredaman absorban pada puncak 514 nm menggunakan perhitungan sebagai berikut:

% peredaman = 1 −

(

AHitung AHitung

bahan uji

)

x 100 %

DPPH

Dimana, absorban hitung λ 514 nm:

AHitung =

A514 −

(

A494 + A534 2

)

x 100%


3.7.7

Penentuan Nilai IC50 Nilai IC50 merupakan bilangan yang menunjukkan konsentrasi sampel uji

(µg/ml)

yang

memberikan

peredaman

DPPH

sebesar

50%

(mampu

menghambat/meredam proses oksidasi sebesar 50 %). Nilai 0% berarti tidak mempunyai aktivitas antiradikal bebas atau antioksidan, sedangkan nilai 100% berarti peredaman total dan pengujian perlu dilanjutkan dengan pengenceran larutan uji untuk melihat batas konsentrasi aktivitasnya. Selanjutnya dibuat kurva linear antara konsentrasi larutan uji dengan % peredaman dan ditentukan harga IC50 , yaitu dengan memasukkan nilai dari konsentrasi larutan uji (µg/ml) sebagai absis (sumbu X) dan nilai persen peredaman (%) sebagai ordinat (sumbu Y) ke dalam persamaan garis linier. Secara spesifik, suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC50 kurang dari 50 µg/ml, kuat untuk IC50 bernilai 50-100 µg/ml, sedang jika IC50 bernilai 100-150 µg/ml, dan lemah jika IC50 bernilai 151-200 µg/ml (Anonim, 2005).


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Laboratorium Taksonomi Tumbuhan, Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara menunjukkan bahwa sampel termasuk suku Solanaceae, jenis Solanum betaceum Cav. 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Dari 200 g sampel segar buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) yang diekstraksi secara maserasi menggunakan pelarut etanol diperoleh ekstrak kental sebanyak 19,047 g (9,52 % b/b) yang berwarna ungu tua. Hasil skrining fitokimia yang dilakukan selama 2 hari terhadap buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) mengandung senyawa-senyawa kimia seperti yang terlihat pada tabel 1 berikut ini: Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) No. PEMERIKSAAN Hasil 1

Alkaloida

+

2

Flavonoida

+

3

Tanin

+

4

Saponin

+

5

Glikosida

+

6

Antrakuinon

__

7

Steroida/Triterpenoida

+


Hasil di atas menunjukkan bahwa buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki aktivitas sebagai antioksidan, yaitu dengan adanya senyawa kimia golongan flavonoida. Senyawa flavonoida secara umum bertindak sebagai antioksidan yaitu sebagai penangkap radikal bebas karena mengandung gugus hidroksil. Flavonoida bersifat sebagai reduktor sehingga dapat bertindak sebagai donor hidrogen terhadap radikal bebas (Silalahi, J. 2006). 4.3 Hasil Penentuan Serapan Maksimum Dari hasil pengukuran serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis diperoleh serapan maksimum pada panjang gelombang 514 nm. Hasil pengukuran serapan maksimum ini tidak jauh berbeda dari hasil pengukuran yang diperoleh oleh peneliti-peneliti sebelumnya. Data hasil pengukuran dapat dilihat pada gambar 1 berikut ini:

Gambar 1. Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol secara spektrofotometri visibel


4.4 Hasil Penentuan Operating Time Larutan DPPH dalam Metanol Penentuan operating time larutan DPPH 40 ppm dalam metanol dilakukan dengan waktu preparasi selama 6 menit dan dari hasil pengukuran diperoleh waktu kerja yang terbaik (stabil) selama 18 menit yaitu pada menit ke-18 sampai menit ke-36 setelah penambahan pelarut metanol. Kurva serapan untuk operating time larutan DPPH dalam metanol dapat dilihat pada gambar 2 berikut ini (data terlampir):

0.355 0.35

Absorbansi

0.345 0.34 0.335 0.33 0.325 0.32 0.315 0

10

20

30

40

50

60

70

t (menit)

Gambar 2. Kurva Absorbansi Operating Time Larutan DPPH dalam Metanol 4.5 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji Berdasarkan data hasil pengukuran absorbansi DPPH pada menit ke-18 dan menit ke-36 dengan adanya penambahan larutan uji ekstrak etanol buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dan vitamin C dengan konsentrasi 40 ppm, 80 ppm, 120 ppm dan 160 ppm yang dibandingkan terhadap kontrol DPPH (tanpa penambahan sampel/larutan uji) dapat dianalisis aktivitas antioksidan sampel uji. Untuk melihat hubungan absorbansi DPPH terhadap penambahan Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

konsentrasi sampel uji dalam menganalisis aktivitas antioksidannya dapat dilihat dari kurva pada gambar 3 dan 4 untuk ekstrak etanol buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dan gambar 5 dan 6 untuk vitamin C berikut ini:

1.3 Absorbansi

1.2 A 514 1.1

A 534

1

A 494

0.9 0.8 0

50 100 150 Konsentrasi (ppm)

200

Gambar 3. Hasil analisis aktivitas antioksidan sampel ekstrak etanol buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) pada menit ke-18

1.3

Absorbansi

1.2 A 514

1.1

A 534

1

A 494

0.9 0.8 0

50 100 150 Konsentrasi (ppm )

200

Gambar 4. Hasil analisis aktivitas antioksidan sampel ekstrak etanol buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) pada menit ke-36


1

Absorbansi

0.8 0.6

A 494 A 514

0.4

A 534 0.2 0 0

50

100

150

200

-0.2 Konsentrasi (ppm)

Gambar 5. Hasil analisis aktivitas antioksidan vitamin C pada menit ke-18

1.2 1

Absorbansi

0.8 A 494

0.6

A 514 0.4

A 534

0.2 0 -0.2

0

50

100

150

200

Konsentrasi (ppm)

Gambar 6. Hasil analisis aktivitas antioksidan vitamin C pada menit ke-36

Dari gambar 3 dan 4 (ekstrak etanol terong belanda) serta gambar 5 dan 6 (vitamin C) dapat dilihat adanya penurunan nilai absorbansi DPPH yang diberi sampel uji terhadap kontrol pada setiap kenaikan konsentrasi. Penurunan nilai absorbansi

DPPH

ini

mempunyai

arti

bahwa

telah

terjadi

penangkapan/peredamam radikal bebas DPPH oleh sampel uji. Dan penurunan nilai absorbansi DPPH ini menunjukkan adanya aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dan vitamin C. Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

4.6 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas DPPH Oleh Sampel Uji Analisis peredaman radikal bebas DPPH oleh sampel uji dapat diperoleh dengan terlebih dahulu menghitung nilai AHitung (absorbansi hitung) dari data hasil pengukuran absorbansi pada panjang gelombang 494 nm, 514 nm dan 534 nm pada menit ke-18 dan menit ke-36. Dari analisis yang telah dilakukan, diperoleh nilai persen peredaman pada setiap kenaikan konsentrasi sampel uji seperti yang terlihat pada tabel berikut ini (perhitungan terlampir):

Tabel 3. Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Ekstrak Etanol Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.) Menit ke-

18

36

Sampel DPPH

A494 1.0644

A514 1.2604

A534 1.1223

AHitung 0.1671

%peredaman __

40

0.9859

1.1769

1.0394

0.1643

1.68

80

0.9636

1.1464

1.0153

0.1570

6.04

120

0.9066

1.0785

0.9498

0.1503

10.05

160

0.8693

1.0365

0.9113

0.1462

12.51

DPPH

1.0668

1.2601

1.1212

0.1661

__

40

0.9734

1.1572

1.0236

0.1587

4.45

80

0.9509

1.1306

0.9988

0.1558

6.26

120

0.8986

1.0728

0.9473

0.1499

9.75

160

0.8536

1.0122

0.8920

0.1394

16.07

Keterangan: Data merupakan hasil dari 3 kali pengukuran


Tabel 4. Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Vitamin C Menit ke-

18

36

Sampel A494

A514

A534

AHitung

% peredaman

DPPH

0.8436

1.0129

0.8843

0.1490

__

40

0.0879

0.0408

0.0246

0.0155

89.60

80

0.0694

0.0390

0.0201

0.0058

96.10

120

0.0681

0.0373

0.0190

0.0063

95.77

160

0.0642

0.0333

0.0158

0.0067

95.50

DPPH

0.8582

1.0840

0.9002

0.2048

__

40

0.0935

0.0511

0.0262

0.0088

95.70

80

0.0696

0.0379

0.0198

0.0068

96.68

120

0.0684

0.0367

0.0184

0.0067

96.73

160

0.0646

0.0332

0.0157

0.0070

96.58

(ppm)

Keterangan: Data merupakan hasil dari 3 kali pengukuran

Dari tabel 1 (ekstrak terong belanda) dan tabel 2 (vitamin C) di atas dapat dilihat bahwa setiap kenaikan konsentrasi dan dengan bertambahnya waktu menunjukkan peningkatan peredaman radikal bebas DPPH oleh sampel uji. Untuk melihat kurva hubungan konsentrasi sampel uji (ppm) dengan persen peredaman radikal bebas DPPH dapat diperoleh dengan memplot nilai dari persen peredaman dan konsentrasi sampel uji yang dapat dilihat pada gambar 7 untuk ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dan gambar 8 untuk vitamin C berikut ini:


18 16

% peredaman

14 12 10 8

t = 36' t = 18'

6 4 2 0 0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

konsentrasi (ppm)

Gambar 7. Hubungan konsentrasi ekstrak etanol buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) dengan persen peredaman pada menit ke-18 dan menit ke-36

120

100

% peredaman

80

60 t = 36' t = 18'

40

20

0 0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

konsentrasi (ppm)

Gambar 8. Hubungan konsentrasi vitamin C (ppm) dengan persen pada menit ke-18 dan menit ke-36

peredaman


4.7 Analisis Nilai IC50 (inhibitory concentration) Sampel uji Analisis nilai IC50 dihitung berdasarkan persamaan regresi linier yang didapatkan dengan cara memplot konsentrasi larutan uji dan persen peredaman DPPH sebagai parameter aktivitas antioksidan, dimana konsentrasi larutan uji (ppm) sebagai absis dan nilai persen peredaman sebagai ordinat. Hasil persamaan regresi linier yang diperoleh untuk ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.) adalah y = 0,0835X – 0,62 pada menit ke-18 dan y = 0,0936X – 0,182 pada menit ke-36 dan untuk vitamin C adalah y = 0,4929X + 35,958 pada menit ke-18 dan y = 0,4855X + 38,298 pada menit ke-36. Hasil analisis nilai IC50 yang diperoleh berdasarkan perhitungan persamaan regresi yang telah dilakukan dapat dilihat pada tabel berikut ini: Tabel 5. Nilai IC50 ekstrak etanol terong belanda dan vitamin C Menit IC 50 SAMPEL ke(ppm) Ekstrak etanol terong belanda

606.228

Vitamin C

28.489

Ekstrak etanol terong belanda

536.132

Vitamin C

24.103

18

36

Dari tabel di atas menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki aktivitas antioksidan yang sangat lemah dibandingkan dengan vitamin C sebagai kontrol positif yang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat. Hal ini dikarenakan aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) hanya ditentukan oleh senyawa-senyawa antioksidan yang dapat larut (terekstraksi)_ Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

dalam etanol (pelarut polar) seperti senyawa golongan polifenol (senyawa flavonoida, antosianin), vitamin A dan sebagian vitamin C. Seperti diketahui bahwa vitamin C mudah larut di dalam air namun agak sukar larut dalam etanol. Vitamin ini sangat peka, mudah rusak kalau kena cahaya, panas, udara dan oksigen Sedangkan senyawa-senyawa lain yang memiliki aktivitas antioksidan yang terdapat dalam buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) seperti beta karoten dan vitamin E kemungkinan tidak ikut terekstraksi dalam ekstrak etanol. Senyawa-senyawa ini memiliki sifat larut dalam lemak atau pelarut organik (nonpolar) dan tidak larut dalam pelarut polar seperti etanol. (Kumalaningsih, 2006).


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 KESIMPULAN •

Buah terong belanda (Solanum betaceum Cav.) mengandung senyawa kimia golongan alkaloida, tanin, saponin, glikosida, steroida/triterpenoida dan flavonoida yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan.

•

Hasil pemeriksaan aktivitas antioksidan yang dilakukan terhadap ekstrak etanol buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) menggunakan spektrofotometer UV-visibel pada panjang gelombang 494 nm, 514 nm dan 534 nm pada menit ke-18 dan menit ke-36 menunjukkan adanya aktivitas antioksidan dengan nilai IC

50

sebesar 609,073 ppm pada menit

ke-18 dan 534,989 ppm pada menit ke-36. Perlakuan yang sama juga dilakukan terhadap vitamin C sebagai kontrol positif dan diperoleh nilai IC50 sebesar 28,991 ppm pada menit ke-18 dan 24,077 ppm pada menit ke36. Dengan demikian hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari buah segar terong belanda (Solanum betaceum Cav.) memiliki aktivitas antioksidan yang sangat lemah dibandingkan dengan vitamin C sebagai kontrol positif. 5.2 SARAN •

Disarankan kepada peneliti selanjutnya agar melakukan uji aktivitas antioksidan buah terong belanda menggunakan ekstrak hasil penyarian dengan pelarut lain seperti air atau pelarut nonpolar.


DAFTAR PUSTAKA

Amrun dan Umiyah. (2007). Uji Aktivitas Ekstrak Air dan Ekstrak Metanol Beberapa Varian Buah Kenitu (Chrysphyllum cainito L.) Dari Daerah Jember. Bagian Biologi Farmasi, Program Studi Farmasi Universitas Jember. Hal. 45-50 Anonim. Online 2001. Uji Aktivitas Antioksidan. http://karieeen.wordpress.com/2001/uji aktivitas antioksidan/ Anonim. Online 2003.Metode Sampling.USU digital Library. Anonim. Online 2004. Antioksidan, Resep Sehat dan Umur Panjang http://www.Gizi.Net/pengumuman/index,shtml/ Anonim. Online 2005,Tanaman Obat Indonesia. http://www.iptek.go.id Anonim.Online 2008.Panjang Umur dengan Antioksidan. http://www . hersmagz.com/hers_magazine/view_catagory. Anonim. Online 2008.Rujak Makanan Masa Depan. http://www.keluarga sehat.com Anonim. Online 2009. Sari Buah Tamarillo. http://www.kotadaengnet.infokotamakassar_herbalif_saribuahtamarillo .com Cahyana, A.H. dan Taufik, M. (2005). Isolasi Senyawa Antioksidan Kulit Batang Kayu Manis (Cinnamomum burmanii Nees ex Blume). Prosiding Simposium Nasional Kimia Bahan Alam XV. Departemen Kimia FMIPA. IPB. Bogor. Hal. 95-100 Coronel.R.E. and Verheij.E.W.M. (1992). Prosea Foundation Plant Resources of South-East Asia no 12.Vegetable.Bogor-Indonesia. Dachriyanus. (2004). Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi. Padang: Andalas University Press. Hal. 1-7. Day, R.A. dan Underwood, A.L. (1986). Analisis Kimia Kuatitatif. Edisi Ke-6. Terjemahan Iis Sopyan. Jakarta: Erlangga. Hal. 382. Departemen Kesehatan RI. (1978). Materia Medika Indonesia. Jilid II. Jakarta: Depkes RI. Hal.150-156, 165-167.


Departemen Kesehatan RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Depkes RI. Hal. 29-31 33, 649, 748. Departemen Kesehatan dan Kesehatan Sosial RI. (2001). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Cetakan pertama. Jilid kedua, Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Hal. 17-18 Fransworth, N.R. (1996). Biological And Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Science. Volume 55 No. 3. Chicago: Reheis Chemical Company. Pages: 257-259, 263. Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. terjemahan K. Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB Press. Hal. 6, 71, 76, 84-85, 94-97. Kosasih, dkk. (2004). Peranan Antioksidan Pada Lanjut Usia. Jakarta: Pusat Kajian Nasional Masalah Lanjut Usia. Hal. 48-49, 56-69. Kumalaningsih. (2006). Antioksidan Alami. Surabaya: Trubus Agrisarana. Hal.16. Kumalaningsih. (2006). Antioksidan Alami Terong Belanda (Tamarillo). Surabaya: Trubus Agrisarana. Hal.16. Molyneux, P. (2004). The Use Of The Stable Free Radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) For Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 26(2): 211-9. Silalahi, J. (2006). Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius. Hal. 41-49, 54-55.


Lampiran 1. Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan


Lampiran 2. Tumbuhan Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.)

Gambar 9. Tunbuhan Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.)


Gambar 10. Bunga Terong Belanda (Betacei flos) Lampiran 2 (Lanjutan)

Gambar 11. Buah Terong Belanda (Betacei fructus)

Gambar 12. Buah Terong Belanda yang dipotong dua


Lampiran 3. Gambar Alat Spektrofotometer

Gambar 13. Spektrofotometer UV-Visibel (Shimadzu mini 1240)


Lampiran 4. Bagan Ekstraksi Bahan Segar Secara Maserasi

200 g bahan segar yang telah dihaluskan

dimasukkan ke dalam sebuah bejana dituangi dengan 1500 ml etanol ditutup dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk diserkai, diperas

Maserat

Ampas dicuci dengan etanol 96% secukupnya hingga diperoleh 2000 ml dipindahkan ke dalam bejana tertutup dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya, selama 2 hari dienap-tuangkan dan disaring

Maserat

Ampas

digabung dipekatkan dengan alat rotary evaporator

Ekstrak cair dikeringkan dengan alat Freeze dryer Ekstrak kasar


Lampiran 5. Data Absorbansi Operating Time Larutan DPPH Dalam Metanol


Lampiran 6. Perhitungan Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Tabel

3. Analisis Peredaman Radikal Bebas Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.)

Menit ke-

Oleh

Ekstrak

Etanol

Sampel

A494

A514

A534

AHitung

%peredaman

DPPH

1.0644

1.2604

1.1223

0.1671

__

40

0.9859

1.1769

1.0394

0.1643

1.68

80

0.9636

1.1464

1.0153

0.1570

6.04

120

0.9066

1.0785

0.9498

0.1503

10.05

160

0.8693

1.0365

0.9113

0.1462

12.51

DPPH

1.0668

1.2601

1.1212

0.1661

__

40

0.9734

1.1572

1.0236

0.1587

4.45

80

0.9509

1.1306

0.9988

0.1558

6.26

120

0.8986

1.0728

0.9473

0.1499

9.75

160

0.8536

1.0122

0.8920

0.1394

16.07

18

36

Keterangan: Data merupakan hasil dari 3 kali pengukuran AHitung : Absorbansi hitung (nm) A494

: Absorbansi pada panjang gelombang 494 nm

A514


A534


AHitung =

A514 −

(

A494 + A534 2

% peredaman = 1 −

(

)

AHitung AHitung

x 100%

bahan uji

)

x 100 %

DPPH

 Perhitungan AHitung ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.) Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

AHitung =

A514 −

(

A494 + A534 2

)

x 100%

Pada menit ke-18 :

AHitung DPPH = 1.2604 −

(

1.0644 + 1.1223 2

)

x 100%

= 0.1671 - Pada menit ke-18 konsentrasi 40 ppm :

AHitung = 1.1769 − =

(

0.9859 + 1.0394 2

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

0.1643

- Pada menit ke-18 konsentrasi 80 ppm :

AHitung = 1.1464 − =

(

0.9636 + 1.0153 2

0.1570


AHitung = 1.0785 − =

(

0.9066 + 0.9498 2

0.1503


AHitung = 1.0365 − =

(

0.8693 + 0.9113 2

0.1462

Pada menit ke-36 :


(

1.0668 + 1.1212 2

)

x 100%


=

0.1661


AHitung = 1.1572 −

(

0.9734 + 1.0236 2

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%


AHitung = 1.1306 −

(

0.9509 + 0.9988 2


AHitung = 1.0728 −

(

0.8986 + 0.9473 2


AHitung = 1.0122 −

(

0.8536 + 0.8920 2

= 0.1394

 Perhitungan persen peredaman ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.)


% peredaman = 1 −

AHitung

(

bahan uji

AHitung

)

x 100 %

DPPH

Pada menit ke-18 : - Persen peredaman pada menit ke-18 konsentrasi 40 ppm:

% peredaman = 1 −

(

0.1643 0.1671

)

x 100 %

= 1.68 % - Persen peredaman pada menit ke-18 konsentrasi 80 ppm:

% peredaman = 1 −

(

0.1570 0.1671

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.1503 0.1671

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.1462 0.1671

)

x 100 %

= 12.51 %

Pada menit ke-36 : - Persen peredaman pada menit ke-36 konsentrasi 40 ppm: Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

% peredaman = 1 −

(

0.1587 0.1661

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.1558 0.1661

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.1499 0.1661

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.1394 0.1661

)

x 100 %

= 16.07 %

Tabel 3. Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Vitamin C


Menit

Sampel

ke-

A494

A514

A534

AHitung

% peredaman

DPPH

0.8436

1.0129

0.8843

0.1490

__

40

0.0879

0.0408

0.0246

0.0155

89.60

80

0.0694

0.0390

0.0201

0.0058

96.10

120

0.0681

0.0373

0.0190

0.0063

95.77

160

0.0642

0.0333

0.0158

0.0067

95.50

DPPH

0.8582

1.0840

0.9002

0.2048

__

40

0.0935

0.0511

0.0262

0.0088

95.70

80

0.0696

0.0379

0.0198

0.0068

96.68

120

0.0684

0.0367

0.0184

0.0067

96.73

160

0.0646

0.0332

0.0157

0.0070

96.58

(ppm)

18

36

Keterangan: Data merupakan hasil dari 3 kali pengukuran AHitung : Absorbansi hitung (nm) A494


A514


A534


AHitung =

A514 −

(

A494 + A534 2

% peredaman = 1 −

(

)

AHitung AHitung

x 100%

bahan uji

)

x 100 %

DPPH

 Perhitungan AHitung Vitamin C Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

AHitung =

A514 −

(

A494 + A534 2

)

x 100%

Pada menit ke-18 :

(


0.8436 + 0.8843 2

)

x 100%


AHitung = 0.0408 − =

(

0.0879 + 0.0246 2

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

0.0155


AHitung = 0.0390 − =

(

0.0694 + 0.0201 2

0.0058


AHitung = 1.0785 − =

(

0.9066 + 0.9498 2

0.1503


AHitung = 0.0373 − =

(

0.0681 + 0.0190 2

0.0063

Pada menit ke-36 : Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

AHitung DPPH = 1.0840 − =

(

0.8582 + 0.9002 2

)

x 100%

0.2048


AHitung = 0.0511 −

(

0.0935 + 0.0262 2

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%

)

x 100%


AHitung = 0.0379 −

(

0.0696 + 0.0198 2


AHitung = 0.0367 −

(

0.0684 + 0.0184 2


AHitung = 0.0332 −

(

0.0646 + 0.0157 2

= 0.0070

 Perhitungan Persen Peredaman Vitamin C Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

% peredaman = 1 −

AHitung

(

bahan uji

AHitung

)

x 100 %

DPPH

Pada menit ke-18 : - Persen peredaman pada menit ke-18 konsentrasi 40 ppm:

% peredaman = 1 −

(

0.0155 0.1490

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0058 0.1490

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0063 0.1490

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0067 0.1490

)

x 100 %

= 95.50 %

Pada menit ke-36 : Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

- Persen peredaman pada menit ke-36 konsentrasi 40 ppm:

% peredaman = 1 −

(

0.0088 0.2048

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0068 0.2048

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0067 0.2048

)

x 100 %


% peredaman = 1 −

(

0.0070 0.2048

)

x 100 %

= 96.58 %

 Perhitungan nilai IC50 ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.) pada menit ke-18 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

X

Y

XY

X2

0

0

0

0

40

1.68

66.8

1600

80

6.04

483.2

6400

120

10.05

1200

14400

160

12.51

1992

25600

∑X= 400

∑Y = 30.28

∑XY= 3758

∑X2 = 48000

X = konsentrasi (ppm) Y = % peredaman

a=

(ΣXY ) − (ΣX )(ΣY )

(ΣX ) − (ΣX ) 2

=

n

2

n

3758 − (400 )(30.28) 48000 − (400 )

5

2

5

= 0.0835 −

−

b = y− a x = 6.06 – (0,0835) (80) = -0.62 Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0835 X – 0.62 Nilai IC50 :

Y = 0,0835 X – 0.62 50 = 0,0835 X – 0.62 X = 606.228 ppm

 Perhitungan nilai IC50 ekstrak etanol terong belanda (Solanum betaceum Cav.) pada menit ke-36 Irma l. H. Sinaga : Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Buah Terong Belanda (Solanum betaceum Cav.), 2009.

Y

XY

X2

0

0

0

40

4.45

178

1600

80

6.26

500.8

6400

120

9.75

1170

14400

160

16.07

2571.2

25600

X

∑X= 400

a=

∑Y = 36.53

(ΣXY ) − (ΣX )(ΣY )

(ΣX ) − (ΣX ) 2

=

∑XY= 4420

∑X2 = 48000

n

2

n

4420 − (400 )(36.53) 48000 − (400 )

5

2

5

= 0.0936 −

−

b= y − ax = 7.306 – (0.0936)(80) = -0.182

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0.0936 X – 0.182

Nilai IC50 :

Y = 0.0936 X – 0.182 50 = 0.0936 X – 0.182 X = 536.132 ppm

 Perhitungan nilai IC50 vitamin C pada menit ke-18 X

Y

XY

X2


0

0

0

0

40

89.60

3584

1600

80

96.10

7688

6400

120

95.77

11492.4

14400

160

95.50

15280

25600

∑XY= 38044.4

∑X2 = 48000

∑X= 400

a=

∑Y = 376.97

(ΣXY ) − (ΣX )(ΣY )

(ΣX ) − (ΣX ) 2

=

38044.4 −

n

2

n

(400)(376.97 )

48000 − (400 )

5

2

5

= 0.4929 −

−

b= y − ax = 75.39 – (0.4929)(80) = 35.958 Jadi, persamaan garis regresi Y = 0.4929 X + 35.958

Nilai IC50 : Y = 0.4929 X + 35.958 50 = 0.4929 X + 35.958 X = 28.489 ppm  Perhitungan nilai IC50 vitamin C pada menit ke-36 X

Y

XY

X2


a=

0

0

0

0

40

95.70

3828

1600

80

96.68

7734.4

6400

120

96.73

11607.6

14400

160

96.58

15452.8

25600

∑X = 400

∑Y = 385.69

∑XY= 38622.8

∑X2 = 48000

(ΣXY ) − (ΣX )(ΣY )

(ΣX ) − (ΣX ) 2

=

38622.8 −

n

2

n

(400)(385.69)

48000 − (400 )

5

2

5

= 0.4855 −

−

b= y − ax = 77.138 – (0.4855)(80) = 38.298

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0.4855 X + 38.298 Nilai IC50 : Y = 0.4855 X + 38.298 50 = 0.4855 X + 38.298 X = 24.103 ppm


SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK ETANOL BUAH TERONG BELANDA (Solanum betaceum Cav.) SKRIPSI

Recommend Documents