Orvosi Mikrobiológiai intézet, Semmelweis Egyetem, Budapest
RETROVÍRUSOK, AIDS VIRÁLIS TUMORIGENESIS TUMORVÍRUSOK HEPATITIS VÍRUSOK Dr. Nagy Károly egyetemi tanár
VÍRUSOK ÉS A DAGANATKÉPZÉS
A SEJTEK KORLÁTLAN SZAPORODÁSA TUMOR TUMORVÍRUSOK: olyan DNS vagy RNS vírusok, amelyek megfelelő állatban daganatot indukálnak, vagy in vitro transzformációra képesek
VÍRUSOK ÉS EMBERI DAGANATOK
Új transzformáló gének bevitele (virális onkogének) Korábban ott lévő celluláris onkogének aktiválása Carcinogén ágensek (kemikáliák, sugárzás, stb.)
RETROVÍRUSOK
ONKOGÉN RETROVÍRUSOK 1910. Rous, avian sarcomavírus
Nóbel-díj 1955
1950. Gross, egér, csirke és más retrovírusok 1960. Jarrett, FeLV (macska leukémia és immundeficiencia) 1980. Gallo, HTLV-I (leukémia: endémiás USA-ban, Japánban, Afrika egyes területein, fertőzött vérrel és anyatejjel is terjed) 1982. Gallo, HTLV-II (hajas-sejtes leukémia) 1984. L.Montagnier/R.Gallo: HIV (AIDS)
Nóbel-díj 2008
HUMÁN T-SEJTES LEUKEMIA/LYMPHOMA VÍRUS, HTLV
A HTLV FERTŐZÉS JELLEGZETESSÉGEI Szoros, hosszantartó személyes kontaktus A vírussal fertőzött T-sejtek közvetlen átvitele A fertőzés élethosszig tart, incubációs idő: 10 – 40 év! Szexuális átadódás: férjről feleségre (> 10 év) 60 %, feleségről férjre 1% szexuális partnerek halmozása: fokozott kockázat Vertikális transzmisszió: szoptatás: anyáról csecsemőre ( 20%), kozkázat fokozódik a > 6 hónapos szoptatással perinatális fertőzés Parenterális transzmisszó: vér, vérkészítmények szövetek, transzplantátumok közös fecskendő i.v. drogosoknál
A HTLV-VEL ÖSSZEFÜGGÉSBE HOZHATÓ BETEGSÉGEK
HTLV-1 Felnőttkori T-sejtes leukémia/lymphoma (ATLL) érett T-sejtes proliferáció lympadenopathiával
HTLV-vel társult myelopathia (HAM, TSP) krónikus progresszív demyelinizációval járó autimmun neurológiai betegség
Cutan lymphoma, CD30+ T-sejtes non-Hodgkin lymphoma Sezary syndroma Mycosis fungoides T-prolymphocytás leukémia Kis-sejtes carcinoma Nagy granulumos lymphocytás leukémia HTLV-2 Atipusos hajas sejtes leukémia lymphocytás proliferáció Mycosis fungoides A HTLV fertőzés a perifériás vér T-sejtjeinek proliferációját, immortalizációját hozza létre. A HTLV-1 A CD4+ sejteket, a HTLV-2 a CD8 lymphocytákat fertőzi. A HTLV sejtreceptora nem ismert.
HTLV INDUKÁLT MALIGITÁSOK: ATLL, MF, CUTAN LYMPHOMA
A HTLV FERTŐZÉS SZEROLÓGIAI KIMUTATÁSA IF
WB
HIV/AIDS 2013* HIV/AIDS esetek 2013 végéig Új esetek 2013-ban AIDS halálesetek 2013-ban Összes AIDS haláleset
36 M ~6 M 3.6 M 28 M
1.2 M 570000 700000
980 000 550000 440000
6M
29.4 M
1.5 M
*Becslések
HIV PREVALENCIA NÖVEKEDÉS ORSZÁGONKÉNT
A HIV VIRION SZERKEZETE RNS genom
Burok fehérjék
Dr.Nagy Károly
A HIV életciklusa az új vírusok bimbózással hagyják el a sejtet
kötődés a sejtfelszínhez a vírus-mag a sejtbe lép, a vRNS DNS-sé íródik át (RT)
az új vírus komponensek a sejthártyánál koncentrálódnak
sejtmag
új vírus RNS
új vírusproteinek
új vRNS kópiák készülnek, elhagyják a sejtmagot
a vírus-DNS integrációja a gazdasejt DNS-be (provírus)
A HIV fertőzés és az AIDS kialakulását kísérő események
HIV fertőzés detektálása immunofluorescence assayvel
Western blot eljárás HIV ellenanyagok kimutatására
HIV ellenanyagok kimutatása Western-blot reakcióval
ELISA reakció HIV ellenanyag kimutatására
Polymeráz láncreakció (PCR)
HIV nukleinsav detektálása T sejtek DNS-ében
HIV izolálás biohazard fülkében
PRIMER HIV FERTŐZÉS
•Non-Hodgkin’s lymphomák immunoblastic lymphomák diffuse large cell lymphomák
•Kaposi’s sarcoma •Primary effusion lymphomák •Castleman’s disease •Hodgkin’s lymphomák •Squamous cell carcinoma
• Egyéb (ritka)
AIDS-hez társult Kaposi sarcoma
HIV fertőzött és AIDS esetek évenkénti megoszlása 90
80
HIV+ 70
AIDS
60
50
40
30
20
10
0 1985
1986
1987
1988
1989
1990
1991
1992
1993
1994
1995
1996
1997
1998
1999
2000
2001
2002
2003
AIDS death in Hungary
1994-2010
35
30
Mortality
individuals
25
20
15
10
5
0 1994
1995
1996
1997
1998
1999
2000
2001
2002
2003
204
2005
Dr. Károly Nagy
2006
2007
2008
2009
2010
HIV/AIDS GYÓGYSZEREK NRT inhibitors
NNRT inhibitors
1
PR inhibitors
Retrovir (zidovudin,AZT)
Viramun (navirapine)
Fortovase (saquinavir)
Epivir (lamivudine,3TC)
Rescriptor (delaviridine)
Invirase (saquinavir)
Combivir (AZT+3TC)
Sustiva (efavirenz)
Norvir (ritonavir)
Hivid (zalcitabine,ddC)
Capravirine (AG1549)
Crixivan (indinavir)
Videx (didanosine,ddI)
Emivirine (MKC442)
Viracept (nelfinavir)
Zerit (stavudine,d4T)
Calanolide A
Agenerase (amprenavir)
Ziagen (abacavir)
GW420867
Trizivir(abacavir,AZT,3TC)
Kaletra (lopinavir+ritonavir) Tipranavir (non-peptidic)
Coviracil ( emtricitabine)
DMP-450
Viread T (DAPD)
BMS-232632
Tenofovir (PMPA)
MK-944 A
HIV/AIDS GYÓGYSZEREK
CCR5 antagonists
CXCR4 antagonists
2
Fusion inhibitors
TAK 779
AMD 3100
T20
Schering C
ALX- LIO-4C
T21
Schering D
T22
T1249 5-Helix
Integrase inhibitors ? Ceramid inhibitors ? ? 2001.09
Fauci 2001
DNS TUMORVÍRUSOK Epstein-Barr vírus (EBV): Burkitt lymphoma (kofaktor: malária) Nasopharyngealis carcinoma (nitrozaminok) Hajas-sejtes leukoplakia Hodgkin kór
Humán Papillomavírus (HPV): cervix carcinoma (cigaretta?, HHV-2?) bőr (UV sugárzás)
Herpes simplex vírus 2 (HHV-2): cervix carcinoma
Hepatitis B vírus (HBV): hepatocelluláris carcinoma (aflatoxin?)
EPSTEIN-BARR VIRUS (EBV), HHV-4 Human herpesvirus 4
• 1958- első leírás mint gyemekkori daganat, Dr. Burkitt Burkitt lymphoma • 1964- a vírus felismerése ( Epstein and Barr : EM) • a felnőttek 90-95%-a szeropozitív EBV-re • Latens B sejtekben Fertőző Mononucleosis (IM) • “Csók betegség ” – a nyál és orrváladék fertőzött sejtjei terjesztik
EBV (Epstein-Barr Virus,HHV-4) INDUKÁLTA TUMOROK BURKITT’S LYMPHOMA
HAJAS SEJTES LEUKOPLAKIA
NASOPHARYNGEALIS CARCINOMA
PAPILLOMA VÍRUSOK (PAPILLOMAVIRIDAE)
Virion: ikozahedrális, ferde Nukleinsav:ds cirkuláris DNS PAPILLOMAVÍRUSOK (több, mint 140 szerotípus) jó és rosszindulatú daganatok Verruca vulgaris (V. plana, bőr) Epithelialis hyperplasia (száj) Condyloma accuminatum (genitáliák) Papillomatosis (gége carcinoma)
Cervix carcinoma HPV6,11,16, 18, 31
HPV indukálta benignus tumorok
VERRUCA ( közönséges szemölcs)
CONDYLOMA ACCUMINATUM
HPV
Labia major
Penis
HPV PAPILLOMÁK
Merck/MSD: SILGARD/GARDASIL (Sanofi-Pasteur) (HPV 16,18,6,11) Glaxo-Smith-Klein (GSK Plc.): „Cervarix”
HPV 16,18
POLYOMA VÍRUSOK BK: vese transzplantáció JC, PML: lassú vírusok SV40 (majom vírus): VACCINÁK!
A: Aragóniai Mária (1503-68) múmiája, a bal comb szifiliszes gumma miatt jelentősen nagyobb átmérőjű, B: elágazó szélű bőrdaganat, C: papilloma metszete, D: a múmiából izolált HPV nukleinsav PCR vizsgálata(The Lancet, 2003. Oct. 3.)
Hepatitis A (HAV) Picornaviridae (1973) Hepatitis B (HBV) Hepadnaviridae (1970)
Hepatitis C (HCV) Flaviviridae (1988) Hepatitis D (HDV) ? (1977) Hepatitis E (HEV) (Caliciviridae) (1983), Hepeviridae
Hepatitis G (HGV) Flaviviridae (1995) SEN (1997) TT (2000)
Hepatitis: különböző víruseredetű fertőzéses májgyulladás
(tünetek: fáradtság, izületi - és hasi fájdalmak,hányás, étvágytalanság, hepatomegalia) Icterus: sárgaság (bőr, sclera, nyálkahártyák, oka az emelkedett bilirubin szint, bilirubinuria: sötét vizelet, a széklet világos)
széklet
ENTERÁLISAN TERJEDŐ HEPATITIS VÍRUSOK
Hepatitis A vírus Hepatitis E vírus
Hepatitis A vírus Picornaviridae
• faecalis-oralis terjedés ( kéz, élelmiszer, víz, „tenger gyümölcsei”)
Fertőzött víz
hepatitis vírus a székletben
Szaporodás: hepatocyta (focalis necrosis) Lappangás: viszonylag rövid (10- 45 nap) Tünetmentes, vagy tünetes icterussal vagy anélkül Icterus: 6 év alatt < 10 %, 14 év fölött 70%, láz gyakori, émelygés, hányás A májkárosodás általában kisfokú, gyógyulás után regenerálódás Szövődmény: ritka
HEPATITIS A VÍRUS ELTERJEDTSÉGE
Diagnózis: HAV specifikus IgM, vagy antigén kimutatás (IEM, vírus a székletben)
Anti-HAV IgG t i t r e
Hepatitis virus
2
Anti-HAV IgM
4
6 months
MEGELŐZÉS
Endémiás területeken: forralt víz fogyasztása, kézmosás, jégkockát, nyers zöldséget, halat, kagylót ne fogyasszunk! Védőoltás a szeronegatív személyeknek (fertőzött területekre utazóknak, természeti katasztrófák /árvíz/ után , inaktivált vírus i.m.) Passzív immunizálás (HAIG): a beteg közvetlen környezetében élőket
Magyarország 30 ezer diagnosztikus és szűrővizsgálat 7,7 % pozitív
Hepatitis E vírus (Caliciviridae) Hepeviridae, Hepevirus genus
33 nm, ikozahedrális, (ss + RNS, genom: rubeolavirushoz hasonló (Togaviridae)
Faecalis-oralis terjedés (víz!) nagy járványok (Kina, India), hő- és saválló, zoonózis! (sertés 1997, kutya, csirke, patkány) transzfúzió ritka Lappangás: 15-60 nap Tünetek, mint a HAV- nál (általában enyhe lefolyás, krónikussá válás, vírushordozás nem alakul ki), magától gyógyul Európában sporadikus előfordulás Szövődmény: terheseknél 25% a mortalitás!!! (DIC)
Magyarország: 3600 vizsgálat 3, 3% pozitív
HEPATITIS E VÍRUS ELTERJEDTSÉGE
PARENTERÁLISAN TERJEDŐ HEPATITISVÍRUSOK
Hepatitis B vírus Hepatitis C vírus Hepatitis D vírus (Delta ágens) Hepatitis G vírus …….
HEPATITIS B VÍRUS (HBV) HEPADNAVIRIDAE ORTHOHEPADNAVIRUS AVIHEPADNAVIRUS VIRION: kubikális, peplonos Dane partikula, 42 nm fertőző Au-antigén (HBsAg), antigén determinánsok: a: csoport spec., d/y és w/r: subdetermináns (adw,ayw, adr,ayr fenotípusok) 22 nm HBc és HBe antigének (core)
NUKLEINSAV: ds (részlegesen: teljes (-), rövidebb (+) szál) DNS, cirkuláris polimeráz: DNS-ről és RNS-ről is képes átírni)
Au antigén, Nobel díj 1976, “a fertőző betegségek eredetének és a terjedés új mechanizmusainak felfedezéséért”
B. Blumberg
HBV hepatitis terjedése Parenterális: i.v. drog használók, véletlen tűszúrás Hemodialízis Transzplacentáris (fertőző anya) Szexuális (sperma, közepes koncentráció) Magas víruskoncentráció: vér, szérum, sebváladék Ellenálló vírus: felületeken 1 hétig! **** Lappangás: 45-180 nap Tünetek: az esetek 25%-ában! Icterus: 5 év fölött 30-50% Akut halálozás: 0,5- 1 % Krónikus fertőzés: 5 év alatt 30-90% , 5 év fölött 2-10%
HBV FERTŐZÉS LEHETSÉGES KIMETELE Felnőtt és idősebb gyermek: 90-99% Újszülött és fiatal gyermek: 1-10%
AKUT FERTŐZÉS Tünetmentes (gyerekek) Hepatitis icterussal (felnőttek)
Felnőtt és idősebb gyermek: 5-10% Újszülött és fiatal gyermek: 90-95 %
KRÓNIKUS FERTŐZÉS
Fulmináns Krónikus perzisztens hepatitis Tünetmentes hepatitis Krónikus aktív hepatitis Cirrhosis
Extrahepatikus kórképek: arthritis, glomerulonephritis, polyarthritis
Hepatocelluláris carcinoma
AKUT HEPATITIS B VÍRUSFERTŐZÉS Sárgaság
Anti -HBs
AntiHBc
ALT
HBsAg HBeAg
0
1
2
3
Anti-HBe
4
5
6
12
Markerek: antigének (HBsAg, HBeAg), ellenanyagok (anti- HBs, -HBc, -Hbe)
24 hó
KRÓNIKUS HEPATITIS B VÍRUSFERTŐZÉS tünetek
Anti-HBc
ALT
HBsAg Anti-HBe
HBeAg
1
2
3
4
5
6 hó
2
4
6
8
10 év
Krónikus perzisztens hepatitis B vírusfertőzés: HBsAg, anti-HBc Krónikus aktív hepatitis B: HBeAg, HBV polimeráz, Dane partikula, anti-HBe
HBsAg PREVALENCIA
TÚLÉLÉS KRÓNIKUS HEPATITIS B VÍRUSFERTŐZÉSBEN 10 0
Krónikus perzisztáló hepatitis Krónikus aktív hepatitis
8060
40
Krónikus aktív hepatitis cirrhosissal
20
5
10
Kimenetel függ: vírus replikáció időtartama, májkárosodás súlyossága (alkohol, gyógyszerek), HDV fertőzés
15
20 év
HBV hordozók: kb 300 millió (ebből kb. 40 % cirrhosis, carcinoma és 6 millió halál/év, 120 millió újszülött/év (krónikus hordozás)
MEGELŐZÉS Rekombináns DNS technológiával előállított HBsAg (korábban: HBsAg hordozók szérumából tisztított antigén)
Hepatitis B vakcina kötelező védőoltás (általános iskola VIII. osztály) és HBsAg pozitív anyák újszülöttjei születés után azonnal Hepatitis B vakcina alkalmazása ajánlott: (rizikó csoportok) HBV hordozók szexuális és egyéb kontaktjainak, HBV hordozók vérével történő véletlen érintkezés után, parenterális drug használóknál, homoszexuális férfiaknál, heteroszexuális promiszkuitásban élőknél (prostituáltak) hemophiliásoknál, hemodializált betegeknél humán vérrel való expozíciónak kitett embereknél, immunszuppresszált vagy daganatos betegeknél
Kombinált HAV és HBV (Havrix+Engerix-B) = TWINRIX
HEPATITIS D VÍRUS (HDV, DELTA ÁGENS) VIRION: gömb alakú, 36-38 nm, HBV kapszid, HDV nukleoprotein
NUKLEINSAV: (-) ss RNS, cirkuláris
Szatellita vírus : csak HBV jelenlétében tud szaporodni
HEPATITIS C VÍRUS VIRION: gömb alakú, ss (+) RNS, Flaviviridae
a korábban NANB-nak identifikált esetek kb. 50 %-a HCV (poszttranszfúziós hepatitisek) •
inkubációs idő: 2-26 hét
•
icterus: 30-40 %, krónikus hepatitis: 70%
•
a megbetegedés sok esetben szubklinikai, de az esetek mintegy felében krónikus hepatitis alakul ki ( cirrhosis)
HCV és hepatocelluláris carcinoma (HCC) kapcsolata: (anti-HCV vagy HCV RNS mutatható ki a szérumban, DélEurópában és Japánban a HCC betegek 50-75 %-ban korábbi HCV fertőzés)
A HEPATIRIS C (HCV) ELŐFORDULÁSA
HBV és HCV terjedési lehetőségeinek összehasonlítása
A HCV FERTŐZÉS SAJÁTOSSÁGAI Akut HCV fertőzés 15-30%
70-85 %
Gyógyul
Krónikussá válik Krónikus hepatitis C középsúlyos
enyhe
súlyos
májcirrhosis Hepatocelluláris carcinoma HALÁL HCC (HIV pozitív betegben)
Végstádiumú májbetegség
májtranszplantáció
AKUT HCV FERTŐZÉS GYÓGYULÁSSAL (kb. 30 %)
KRÓNIKUS HCV FERTŐZÉS
Diagnózis
• anti-HCV Ig (ELISA, Western blot) • HCV core ag (ELISA) • HCV RNS kimutatás (RT-PCR), terápia követés • 4-6 hét „ablak” szakasz
SZŰRÉS!!
HCV FERTŐZÉS TERÁPIÁJA
• interferon • ribavirin (javulás az •esetek 30-70 %-ban •(genotípus függő) • máj transzplantáció • rekombináns vaccina
(fejlesztés alatt)
HBV, HCV és HDV krónikussá válásának okai
• a károsodás foka és a kimenetel az immunreakció függvénye: jó immunválasz esetén a vírusszaporodás megszűnik • a krónikussá válás okai
újszülöttek: éretlen T citotoxikus rendszer, a placentán átjutó ellenanyagok ADCC reakciót indukálnak
felnőttek: szteroid kezelés (visszaszorítja a T citotoxikus aktivitást), AIDS: reguláló T-helper sejtek elpusztulnak
T-citotoxikus aktivitás gyógyulás
ADCC krónikus
HEPATITIS G VÍRUS
FLAVIRUS: morfológia, genom hasonló rizikócsoportokban akut, krónikus és fulmináns hepatítisek átvitel: vérrel (anya-csecsemő átvitel) előfordulás legmagasabb a HCV fertőzöttekben
TT VÍRUS - 1997. Japán (TT beteg nevének kezdőbetűi), Magyarországon az ismeretlen eredetű hepatitises betegek felében megtalálható - cirkuláris ss DNS, peplon nincs, 40 genotípus-ból 2 hozható összefüggésbe hepatitissel, feltételezett rendszertani hely: CIRCOVIRIDAE (esetleg egy új genus a Parvoviridae családban) - előfordulás: szérum, széklet, májsejtek szaporodás (terjedés: enterális és parenterális
SEN VÍRUS - 2000 Olaszország (ismeretlen eredetű hepatitis) - genomja hasonló a TT vírus genomjához, 8 genotípus
LATENS FERTŐZÉS
PRODUKTÍV FERTŐZÉS
Immunválasz Regresszió
HPV a p53hez és a pRbhez kötődik
MALIGNUS SEJT
HPV DNS INTEGRÁCIÓJA kofaktorok: STD, dohányzás, immunszuppresszió
