POLYMERASE GENE MUTATION PATTERN IN PATIENTS OF CHRONIC HEPATITIS B PRETREATMENT RSU WAHIDIN SUDIROHUSODO

Norma Tiku Kambuno, M. Nasrum Massi, David Handojo Muljono, 520 Polymerase Gene Mutation Pattern in Patients Chronic Hepatitis B. Pretreatment RSU Wahdin Sudirohusodo

POLYMERASE GENE MUTATION PATTERN IN PATIENTS OF CHRONIC HEPATITIS B PRETREATMENT RSU WAHIDIN SUDIROHUSODO

Norma Tiku Kambuno1, M Nasrum Massi1, David Handojo Muljono1,2,3 1Fakultas

Kedokteran, Universitas Hasanuddin, Makassar, 2Lembaga Biologi Molekul Eijkman, Jakarta, Indonesia, 3Sydney Medical School, University of Sydney, Sydney, Australia

Abstract Hepatitis B is caused by infection with hepatitis B virus (HBV) is a health problem in the world including in Indonesia, the emergence of mutations in the polymerase gene (P gene) HBV can lead to viral resistance to antiviral drugs such as analog nukleos(t)ide. This study aimed to determine the pattern of mutations in the P gene on Pre-treatment of chronic hepatitis B patients. HBV genomes isolated from 72 patients Sudirohusodo Wahidin Hospital, Makassar. HBV DNA is used for detection, amplification and sequencing P gene. P gene amplification was successfully performed on 23 patients (45%), and 19 (82.6%) of them had a mutation in the P gene. Found 1 mutation pattern in 1 patient that can lead to viral resistance to antiviral namely V207M pattern. In addition the most pattern of amino acid substitutions found in P genes is rtL269I P (52.63%), rtT332N (52.63%), rtQ238H (47.36%), and rtM145L (42.10%). Concluded that the pattern of mutations causing resistance to antiviral can be found in 1 patient Pre-treatment while the other patient who are not found show that the treatment can be started. Keywords : Gen P, chronic hepatitis B, Pre-treatment

PENDAHULUAN

penyakit tersebut. Lebih penting

Hepatitis B adalah penyebab utama

penyakit

dunia.

Di

hati

di

seluruh

seluruh

diperkirakan

sekitar

2

lagi 75% dari pengidap tersebut tinggal

didaerah

dunia

belahan

bumi

milyar

berada

Asia

Pasifik,

dimana

Indonesia

(Lavanchy.,

2004).

penduduknya telah terinfeksi oleh

Kementerian

virus hepatitis B dan lebih dari 240

hasil risetnya pada tahun 2008

juta mengidap penyakit infeksi hati

menunjukkan

kronis.

600.000

memiliki prevalensi HBsAg 9,4%

setiap

dan prevalensi anti-HBc 32,8%. Hal

dari

ini bermakna hampir sepertiga dari

Sekitar

penderitanya tahun

akibat

meninggal konsekuensi

*) Dosen Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Kupang

Kesehatan bahwa

melalui Indonesia


penduduk

indonesia

terinfeksi

hepatitis

berdasarkan

pernah

replikasinya

terjadi

dan

intermediat

yang

B

klasifikasi

WHO,

melalui

RNA

memerlukan

enzim reverse trancriptase. Hal ini

Indonesia masuk dalam kategori

menyebabkan

endemis

kecepatan mutasi 10 kali lipat lebih

tinggi

(Kemenkes

RI.,

2008).

besar

Penyebab hepatitis B adalah

VHB

dibandingkan

lainnya,

yaitu

memiliki virus

DNA 2x10-

sekitar

virus hepatitis B (VHB), suatu virus

5/nukleotida/tahun

yang

dan

Muljono., 2011; Fung., 2004; JP.V.,

organisasi genetik yang tersusun

2005; Lai CL., 2003). Mutasi pada

dengan

VHB

VHB merupakan masalah utama

yang

dalam penanganan hepatitis B baik

memiliki

struktur

kompak.

merupakan

Genom

genom

kecil

berupa sepasang rantai DNA yang

pada

berbentuk lingkaran dan beruntai

saat

ganda, untai luar berupa lingkaran

berlangsung. Dampak dari adanya

penuh disebut untai negatif dan

mutasi

untai dalam berupa lingkaran tidak

virulensi,

lengkap

disebut

(Coleman.,

2006; RNA

bermutasi

pra-terapi

proses

ditunjukkan

Dandri.,

2012;

kenaikan

sedang

kenaikan

yang

positif

maupun

terapi

adalah

untai

Danny., 2007; Fattovich., 2008). Virus

kondisi

(Muljono., 2009;

tingkat

antara

lain

dengan

tingkat

kegagalan

adanya

replikasi

virus,

deteksi

lebih

mudah

pemeriksaan

dibandingkan

dengan

adanya

pada

laboratorium

resistensi

dan

terhadap

virus DNA karena pada replikasi

antivirus

RNA terjadi proses transkripsi balik

(Hadziyannis.,

dimana sering terjadi penempatan

2004; Dienstag., 2005; Lok., 2003;

nukleotida yang salah dan tidak

Heathcote.,

ada

terjadi pada kondisi prapengobatan

mekanisme

untuk

yang 2003;

2003).

membetulkan kesalahan tersebut

juga

(proofreading).

untuk

pemilihan

yang

tepat

merupakan

Meskipun

virus

DNA,

VHB proses

digunakan

menjadi

Handojo Mutasi

masalah terapi

berikutnya

I.,

yang

penting antivirus setelah

515 JURNAL INFO KESEHATAN, VOL. 12, NOMOR 1 JUNI 2014

klinisi memutuskan bahwa pasien

melaporkan

berada pada kondisi membutuhkan

resistensi lamivudin pada 5 dari 18

terapi (Heo., 2004; Dienstag., 2005;

(28%) pasien yang belum diobati.

Lok., 2003).

Sejauh

Resistensi terlihat

lamivudin

pada

pasien

asimtomatik

tanpa

atau

hepatitis

pasien

juga karier

pengobatan B

kronis

adanya

ini

belum

tingkat

ada

data

penelitian mengenai pola mutasi gen

P

pasien

hepatitis

B

prapengobatan pada RSU Wahidin Sudirohusodo.

Hal

itulah

yang

(Huang., 2005; Matsuda., 2004).

mendorong kami untuk melakukan

Resistensi ini berhubungan dengan

penelitian ini dengan tujuan untuk

perubahan struktural pada gen dari

memperoleh informasi bagi para

enzim

klinisi dan sebagai bahan evaluasi

polimerase.

Resistensi

lamivudin juga dapat meningkatkan

pasien

potensi resistensi silang terhadap

menunjukkan adanya mutasi pada

nukleosida analog lainnya sehingga

gen

membatasi

pengobatan yang sesuai sehingga

pilihan

pengobatan

hepatitis P

B

dan

kronis

yang

perencanaan

(Locarnini, 2003). Pengujian untuk

dapat

mengetahui

mutasi

resistensi dan dapat meningkatkan

pada

pasien

efektivitas pengobatan.

berguna

untuk

BAHAN DAN METODE

resistensi tertentu

adanya obat

akan

penentuan terapi obat alternatif. Telah banyak hasil penelitian yang

mengusulkan

mutasi

resistensi

pemberian untuk

pemeriksaan

mencegah

Lokasi

dan

Penelitian

sebelum

Laboratorium

pengobatan

antiviral

Eijkman

ini

dilakukan

Hepatitis,

Jakarta

Pusat

di

Lembaga selama

virus

Maret – Juni 2013. Jenis penelitian

yang dominan yang sesuai dengan

yang digunakan adalah eksperimen

pemilihan

terapi

Locarnini.,

2006).

Kobayashi,

2003

peneliti

dari

spesies

Rancangan

penelitian

obat

menyeleksi

komplikasi

(Fung.,

2004;

dengan menggunakan desain cross

Fung,

2004,

sectional study.

dan

beberapa

Jepang

telah

Populasi dan sampel


Populasi

penelitian

adalah

dan serum. Bagian plasma dibuang

pasien hepatitis B kronis rawat inap

dan serum disimpan pada suhu -

dan rawat jalan yang berkunjung ke

200C

bagian

selanjutnya.

Gastro

RS

Wahidin

Sudirohusodo, positif HBsAg atau

untuk

pemeriksaan

Analisis VHB DNA

DNA VHB selama 6 bulan berturut-

Analisis molekuler VHB DNA

turut dan belum pernah mendapat

dilakukan

dengan

mengekstraksi

pengobatan antivirus dalam bentuk

140

serum

menggunakan

apapun dan bersedia ikut dalam

prosedur QIAGEN QIAamp Viral Mini

penelitian dengan menandatangani

kit,

informed

telah

Fragment DNA dari gen polimerase

dikeluarkan Komisi Etik Fakultas

diamplifikasi dengan nested PCR

Kedokteran Universitas Hasanuddin.

menggunakan

Pasien

C,

yang spesifik S2-1 (nt 455-474,

dengan

sens 5’-CAA GGT ATG TTG CCC GTT

penyakit lain tidak diikutkan dalam

TG-3’ dan HS4-2 (nt 1175-1194,

penelitian ini. Sampel penelitian ini

antsisens 5’-GCC AAG TGT TTG CTG

adalah

pasien

ACG CA-3’ sebagai primer luar dan

Hepatitis B kronis sebanyak 5 cc

S88 (nt 462-481), sens; 5’-TGT TGC

untuk setiap pasien dan disimpan

CCG TTT GTC CTC TA-3’ dan HS4-2

pada suhu -20oC.

(970-989),

Metode pengumpulan data

GAT TGG AAG GTG TG-3’ sebagai

consent

dengan

hepatoma dan

darah

yang

hepatitis koinfeksi

vena

23

Pengumpulan sampel darah vena

dilakukan

oleh

petugas

µl

(Qiagen,

valencia,

pasangan

antisens;

CA,USA).

primer

5’-CCT

ATT

primer dalam. Produk hasil PCR dipurifikasi menggunakan metode

kesehatan terlatih, menggunakan

columns

PCR

(QIAGEN

jarum suntik steril. Darah vena

PCR Purification kit, dan dilanjutkan

sebanyak 5 cc dikumpulkan dalam

dengan

tabung dengan antikoagulan EDTA

menggunakan

setelah itu disentrifuge selama 1

ABI

menit, dipisahkan antara plasma

Biosystem,USA). Hasil sekuen DNA

direct mesin

3130x1

QIAquick

sequencing sekuensing (applied


dianalisis

menggunakan

BioEdit

Distribusi usia, jenis kelamin,

dan Finch TV

genotipe dan subtipe digambarkan

untuk melihat adanya

dalam Tabel 1. Pada penelitian

software v7.0.5.2 versi 1.4.0. mutasi

pada

gen

mensejajarkannya

P

dengan wild

adr sebanyak 8 orang dan ayw

didapatkan

sebanyak 3 orang. Hasil analisis

dari GenBank sebagai konsensus.

filogenetik pada fragmen gen P dari

Penentuan

23 sampel menunjukkan genotipe B

type

(M54923)

dengan

subtipe adw sebanyak 12 orang,

yang

genotype

menggunakan

ditentukan

Phylip

v3.695

berdasarkan

sekuens

dengan

software kedekatan

referensi

yang

sebanyak

16

(69,56%)

dan

genotipe C sebanyak 7 (30,43%). Rentang

usia

subjek

pada

telah diketahui.

penelitian ini adalah 14 hingga 68

HASIL

tahun

Karakteristik sampel

tahun.

dengan

Tabel 1 Demografi dan karakteristik virologi Karakteristik Usia (median,min;max) (+SD) Pria,n Wanita,n Genotipe B,n C,n Subtipe adw,n adr,n ayw,n

n=45 39 (14;68) (14,9) 31 14 33 12 30 8 4

Analisis sekuens gen P Tabel 2. Pola substitusi asam amino pada gen polimerase No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Substitusi Aasam Amino L269I T332N Q238H M145L Y151F N226H A222T Y221F P348S N130D Q238N V271I

Jumlah subjek 10 10 9 8 8 6 6 6 5 5 5 4

rata-rata

39,22

Norma Tiku Kambuno, M. Nasrum Massi, David Handojo Muljono, 518 Polymerase Gene Mutation Pattern in Patients Chronic Hepatitis B. Pretreatment RSU Wahdin Sudirohusodo 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40

S213T N248H V267Q T332R Y141F V266I Q238T V224I S135F I163V T332K T332R R127G H126Q D134E R153Q T129L N139K L220V T225A T240K L247F T259S V267H P325Q N338P Q238K V207M

3 3 3 3 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

Tabel 2 menunjukkan 40 pola substitusi

asam

amino

yang

Q238H

dan

T332N

adalah

pola

substitusi asam amino yang paling

ditemukan, pada 19 (82,6%) dari

banyak

23 sampel yang diteliti. Ke-40 pola

menunjukkan

subtitusi

berdasarkan posisi substitusi asam

asam

amino

tersebut

didapatkan dalam bentuk tunggal atau ganda. Pola substitusi L269I, Gambar 1

muncul.

Gambar

jumlah

amino yang muncul.

1

sampel


Gambar 1 Jumlah sampel yang mengalami substitusi asam amino pada polimerase

Gambar

2

menunjukkan

baru

yang

ditemukan

dalam

posisi substitusi asam amino yang

penelitian ini termasuk diantaranya

berkaitan

pola rtV207M.

dengan

resistensi

antivirus NA dan bentuk varian Gambar 2 Termin al protein

I(

POL/RT RNaseH 349(rt 1)

183

1

I

Spacer

II(F)

A

692(rt

B

LAM Resisten rtV207M LdT Resisten ADV Resisten rtN236T ETV Resisten rtS202I ADV+LAM Resisten TDF Resisten

845a a

C

rtL80V/I

D

E

rtV173L/rtL180M

rtV84M

rtA181T/V

rtM204V/I/S rtM204I rtQ215S rtS184G/A/T/C/I

rtL180M + rtA181V rtA194T rtS202I/C/G

Penelitian ini rtN139K rtV207M

rtQ130E rtS213T

rtS135F

rtY141F

Gambar 2. Mutasi gen P yang berkaitan dengan resistensi antivirus. Pada penelitian ini mutasi pada gen P yakni Q130E, Y141F,S135F, N139K, V207M, S213T.

PEMBAHASAN Penelitian

Perencanaan ini

memberikan

efektif

dapat

pengobatan dilakukan

yang dengan

informasi kepada para klinisi bahwa

lebih baik jika mengacu pada pola

mutasi pada gen P yang terkait

mutasi

dengan

demikian

antivirus pasien

resistensi dapat

terhadap

ditemukan

pada

prapengobatan.

yang

terapi

‘personalized disesuaikan

ditemukan akan

medicine’ dengan

dengan bersifat yang

kebutuhan


pasien

yang

akan

mencegah

komplikasi resistensi.

dilaporkan

resisten

lamivudin,

Penelitian ini menemukan 40

dan

entecavir,

adefovir

seperti telbivudine,

memiliki

pola substitusi asam amino, pada

substitusi

19 (91,1%) dari 23 sampel yang

Pola subtitusi asam amino tersebut

diteliti. Ke-40 pola subtitusi asam

umumnya ditemukan pada pasien

amino tersebut didapatkan dalam

yang telah menerima pengobatan

bentuk tunggal atau ganda, dengan

selama lebih dari 6 bulan. Seiring

distribusi sebagai berikut: 2 sampel

dengan

dengan 1 pola substitusi; 3 sampel

pengobatan maka tingkat resistensi


juga semakin meningkat. (Huang.,


2005; Matsuda., 2004; Dienstag.,

dengan 4 pola substitusi, 5 dengan

2005;

5 pola substitusi, 1 sampel dengan

demikian, telah dilaporkan bahwa

6 pola substitusi, dan 1 sampel

substitusi yang terkait resistensi

menunjukkan 7 pola substitusi; 1

terhadap NA dapat ditemukan pada

sampel

subjek yang belum mendapatkan

menunjukkan

substitusi

substitusi,

menunjukkan

10

8 1

sampel

amino

tertentu.

berjalannya

Liaw.,

2005).

pengobatan

masa

Meskipun

(Fung.,

2004;

substitusi

Locarnini., 2004; Locarnini., 2006).

dan 2 sampel menunjukkan 12 pola

Hal ini dapat diterangkan karena

substitusi dan 2 sampel dengan 13

mutasi pada genom VHB terjadi

pola substitusi.

secara

Mutasi

pola

pola

asam

pola

yang

umumnya

acak,

dan

membawa mutasi

varian

yang

tertentu akan

ditemukan pada gen P khususnya

tetap bertahan hidup pada saat

regio

pengobatan

reverse

dilaporkan resistensi golongan Liaw.,2005; Beberapa

transcriptase

berkaitan terhadap NA

dan

dengan

berkembang menjadi populasi yang

antivirus

dominan (Zoulim., 2009; Coleman.,

(Dienstag., Locarnini.,

antivirus

diberikan,

yang

2005;

2006;

2003).

2009).

telah

Sharma.,

2005;

Sudoyo.,


Pada

penelitian

ini

pola

berkaitan

substitusi asam amino yang telah

antivirus.

dilaporkan

dengan

tersebut masih dapat menerima

resistensi ditemukan pada 1 pasien

pengobatan antivirus golongan NA

yakni pola mutasi V207M. Pada

yang

tahun 2010, Schildgen dkk dari

resistensi timbul setelah beberapa

Jerman pertama kali melaporkan

waktu pemberian antivirus, maka

pola mutasi ini yang ditemukan

pengobatan tersebut perlu diikuti

pada

secara berkala untuk mendeteksi

berkaitan

seorang

anak

berumur

9

dengan Hal

ada.

ini

terjadinya

selama

mengkarakterisasi

tahun

dan

telah

menerima antivirus dalam 5 tahun gagal

diterapi

dengan

yang

resistensi

biasanya

membawa

pada

resisten

genotype

kejadian

dan

jenis

mutasi

Pola substitusi asam amino

interferron (hepon) dan lamivudin, pemeriksaan

subjek

yang ada.

terakhir. Pasien tersebut diketahui telah

berarti

Mengingat

tahun penderita hepatitis B kronis 6

resistensi

dilaporkan

mutasi terhadap

yang

penyebab NA

berpola

ditemukan pola rtL180M, rtV207M,

perubahan dari methionin menjadi

rtM204V (YVDD), rtM204K (YKDD)

valin, isoleusin atau dari bentuk

dimana

valin menjadi leusin, leusin menjadi

pola-pola

diketahui resistensi Tidak

tersebut

berkaitan terhadap

ditemukan

dengan lamivudin.

adanya

pola

metionon.

Pola

yang

ditemukan

dalam penelitian ini adalah pola yang

tidak

lasim,

diantaranya

mutasi yang berhubungan dengan

aspartat menjadi timin, glutamin

adefovir akan tetapi penggantian

menjadi

asam

terapi

menjadi

lisin,

dengan

adefovir

tidak

memberikan keuntungan hilangnya

glutamin,

pola mutasi penyebab resistensi

phenilalanin.

dan juga penurunan yang berarti

dampak

dari viremia.

amino

Pada 18 pasien lainnya tidak ditemukan

pola

mutasi

yang

histidin Belum

dari

sifatnya

menjadi

menjadi jelas

perubahan

tersebut non

timin

menjadi

serin

perubahan polar

glutamat,

apa asam

meskipun dari polar

gugus dan


kehilangan

sifat

hidrofilisitasnya

menjadi hidrofobik. Terjadinya asam

antivirus,

perubahan

amino

mengkonfirmasi resistensi terhadap

pada

sifat

gen

mengakibatkan

P

penurunan

karena

hampir

semua

kasus resistensi terhadap NA pada awalnya

diidentifikasi

oleh

kenaikan berkelanjutan dari viral

kemampuan virus untuk bereplikasi

load

mengakibatkan kadar virus dalam

pengobatan

serum

tidak

Matsuda., 2004; Millich D., 2003).

terdeteksi (Thedja., 2002; Scalm.,

Namun, kenaikan viral load tidak

2009;

Sharma.,

hanya berkaitan dengan resistensi

2009).

Selanjutnya

rendah

membuktikan diperlukan

sehingga 2005;

Sudoyo.,

untuk

hal

dapat

tersebut

suatu

penelitian

molekuler invitro tersendiri. gen

NA,

yang

karena

disebabkan pasien

terjadi

(Marcellin.,

hal oleh

dalam

antivirus

pada

tersebut

masa 2004;

dapat

ketidakpatuhan mengkonsumsi

dan/atau

faktor

Perubahan asam amino pada

farmakogenomik. Oleh karenanya,

P

berdampak

indikasi adanya resistensi terhadap

Perkembangan

NA harus dipastikan dengan uji

secara

dapat

juga

klinis.

resistensi

obat

dimulai

dengan

genotip dan fenotip ( Zoulim., 2009;

mutasi pada gen polimerase, diikuti

Lim

oleh peningkatan viral load (viral

Locarnini., 2004).

breakthrough), peningkatan kadar ALT

(alanin

2006;

Lok

As.,

2003;

Untuk dapat mengidentifikasi

aminotransferase)

gen yang memiliki sifat resisten

breakthrough)

yang tinggi, sekuen asam amino

(biochemical beberapa

CK.,

bulan

dari VHB polimerase pasien yang

kemudian

mengalami virologic breakthrough

diikuti oleh perkembangan penyakit

seharusnya dibandingkan dengan

hati (clinical breakthrough) (Zoulim.,

sekuen yang diisolasi dari masa

2009; Thedja M., 2010).

prapengobatan pasien yang sama

setelah

minggu

atau

pengobatan

Pengukuran viral load sangat diperlukan untuk memantau dan

(Liaw

YF,2009;

Locarnini,

2003;

Locarnini, 2006). Direct sekuensing


dapat mendeteksi adanya mutan

Sebagai kelanjutan dari penelitian

jika jumlah mutan yang ada lebih

ini

dari 20% dari total quasispecies.

kloning varian yang ditemukan.

Metode

kloning

bisa

mengatasi

ini,

namun

permasalahan

membutuhkan analisis hasil kloning dalam jumlah besar (Zoulim., 2009; Liaw YF., 2004; Marcellin., 2004; Liaw YF., 2005). Dalam penelitian ini, metode kloning tidak dilakukan, yang

seharusnya

memastikan

bahwa

dapat ada

mutan

penyandi resisten didalam populasi virus (Heo., 2004; Tuncbiek., 2008; Sharifi Z., 2012; Wright TL., 2004). KESIMPULAN DAN SARAN Kami menyimpulkan bahwa mutasi terkait dengan resistensi terhadap NA dapat ditemukan pada pasien

hepatitis

belum

B

kronis

pernah

pengobatan

yang

mendapat

antivirus.

Tidak

ditemukannya mutasi gen P yang terkait dengan resistensi terhadap antivirus pada pasien yang lain menunjukkan

bahwa

pengobatan

NA dapat diberikan dan mutasi terbanyak yang ditemukan pada polimerase adalah rtL269I (39,02%), rtQ238H

(34,14%),

rtT332N

(24,39%), dan rtM145L (21,95%).

disarankan

untuk

melakukan

DAFTAR PUSTAKA Alavian SM., Carman WF. & Jazayeri SM. (2013). HBsAg variants; Diagnostic-escape and diagnostic dilemma. Journal of Clinical virology, 57:201-208 Carman WF., Jazayeri M., Basuni A. & Thomas HC. (2005). Hepatitis B surface antigen (HBsAg) variants. In: Thomas HC, lemon S and Zuckerman AJ editors. Viral Hepatitis. Third edition. USA; Blackwell Publishing. p 225-241 Chu CM. L.Y. (2007) . Chronic hepatitis B virus infection acquired in Childhood: Special emphasis on prognostic and therapeutic implication of delayed HBeAg seroconversion . Journal Viral Hepatology, 14: 147-152). Coleman .P. F. (2006) . Detecting Hepatitis B Surface Antigen Mutans. Journal Emerging Infectious Diseases, 12, No. 2, February http://www.cdc.gov/eid Dandri M. & Locarnini S. (2012). New insight in the pathobiology of hepatitis B virus infection. Journal Viral Hepatology, 15:147152. Danny KW., Tanaka Y., Lai CL., dkk. (2007). in Hepatitis B Virus CoreRelated Antigens as Markers for Monitoring Chronic Hepatitis B Infection. Journal of Clinical Microbiology, Dec. 2007: 394247. Dienstag JL. & Isselbacher KJ. (2005). Acute Viral Hepatitis. In


Kasper DL,Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL and Jameson JL,Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16 th ed. Mc Graw-Hill, 1822-1838. Fattovich G.B.F. & Donato F. (2008). Natural history of chronic hepatitis B: special emphasis on disease progression and prognostic factors. Journal of Hepatology 2 Feb; 48:335-352. Fattovich G. & Zagni I. (2004). Natural History of Hepatitis B and Prognostic factors of Disease progression. Management of patients with viral hepatitis. Journal of Hepatology 2 Feb; 48:203- 220 Fung.S.K. & Lok A.S. (2004). Management of hepatitis B patients with antiviral resistance. International medical press. Antiviral therapy Journal of Hepatology, 9:1013-1026 Hadziyannis SJ. (2003). Treatment of HBeAg-negative chronic hepatitis B. Semin Liver Dis Journal of Hepatology, 23:81-8. Handojo I. (2004). Imunoassai Terapan pada beberapa penyakit Infeksi. Surabaya. Airlangga university press. Heathcote J. (2003). Treatment of HBe antigen-positive chronic hepatitis B. Seminar Liver Disease Journal of Hepatology, 23: 69-80. Heo J. & Cho M. (2004). Detection of YMDD Motif Mutants by Oligonucleotide Chips In Lamivudine Untreated Patients with Chronic Hepatitis B Virus Infection, Journal Korean medical Science, 19: 541-6

Huang ZM., Huang QW.& Qin YQ. (2005). YMDD mutations inpatients with chronic hepatitis B untreated with antiviral medicines. World Journal Gastroenterology, 11:867-70. JP. V. (2005). The Natural History of Chronic Hepatitis B Virus Infection Journal of Clinical Viral, 34: S139-S1142. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Badan Litbang Kesehatan. Laporan Riskesdas Biomedis. (2008). http://perpustakaan .litbang.depk es.go.ig/otomasi//index.php. (diakses 6 juni 2013) Kobayashi S., Ide T. & Sata M. (2003). Detection of YMDD motif mutations in some lamivudineuntreated asymptomatic hepatitis B virus carriers. Journal of Hepatology, 34:584-6 Lavanchy D. (2004). Hepatitis B virus epidemiology, disease burden, tratment and current and emerging prevention and control measeures. Journal Viral hepatology, 11: 97-107. Lai CL., Dienstag J., Schiff E., dkk. (2003). Prevalence and clinical correlates of YMDD variants during lamivudine therapy for patients with chronic hepatitis B. Journal Clinical Infection Disease, 36: 687-96. Liaw YF., Sung JJ., Chow WC., dkk. (2004). Lamivudine for patients with chronic hepatitis B and advanced liver disease. National English Journal Medical, 351:1521-31. Liaw YF. (2005). The current management of HBV drug


resistance.Journal Clin ical Virology, 34 (Suppl 1):143-6. Liaw. Fan. Y. (2009). Hepatitis B virus Infection. www.thelancet.com. Journal of Hepatology Vol 373 February 14. Lim CK., Tan JTM., Khoo JBS., Ravichandran., dkk. (2006). Correlations of HBV genotypes mutations affecting HBeAg expressin and HBeAg. anti Hbe status in HBV carriers International Journal medical. Science, 3:14-20 Locarnini S. (2003). Molecular virology and the development of resistant mutants: implications for therapy. Seminar Liver Disease; Journal of Hepatology, 25 (Suppl 1): 9-19. Locarnini S. & Mason, W.S. (2006). Celluler and virolgical mechanism of HBV drug resistance. Journal hepatology, 44:422-431 Locarnini S. (2004) Molecular virology of hepatitis B virus. Seminar in Liver Diseases, Journal of Hepatology 24 (Suppl 1):3-10 Lok AS., Lai CL., Leung N., dkk. (2003). Long-term safety of lamivudine treatment in patients with chronic hepatitis B. Journal Gastroenterology, 125: 1714-22. Marcellin P., Lau GK., Bonino F., dkk. (2004). Peginterferon alfa-2a alone, lamivudine alone, and the two in combination in patients with HBeAg-negative chronic hepatitis B. National English Journal Medical, 351: 1206-17. Matsuda M., Suzuki F., Suzuki Y., dkk. 2004. Low rate of YMDD motif mutations in polymerase gene of hepatitis B virus in

chronically infected patients not treated with lamivudine. Journal Gastroenterology, 39:34-40. Millich DLT. (2003). Exploring the Biological Basis of Hepatitis B e Antigen in Hepatitis B Virus Infection. Journal Hepatology, 36:1075-1086. Muljono. H.D. (2009). Aspek Biomolekuler pada Hepatitis B Kronis Persistensi dan resistensi. Lembaga Eijkman Jakarta Indonesia. Slide presentation. Muljono. H. D. (2011). Development of Resistant Mutans. What should we know to minimize resistance. Pertemuan Ilmiah Nasional keXVIII PPHI - KONAS XV PGI-PEGI Surakarta,Slide presentation. Scalm SW. (2009). Natural History of Chronic Hepatitis B in European Countries. Journal of Hepatology, 36:1075-1086 available at: accessed 12 Januari 2013 Schildgen V.,Ziegler S.,Tillmann RL. & Schildgen O. (2010). Novel mutation in YMDD motif and direct neighbourhood in a child with chronic HBV-infection and clinical lamivudine and adefovir resistance-a scholarly case. Journal virology, 7:167 Sharifi. Z., Yari F.Y. & Gharebaghiyan A. (2012). Sequence analysis of the Polymerase Gene in Hepatitis B virus infected Blood Donors in Iran. Archives of iranian medicine, Vol 15, Number 2. Sharma SK, S. N. & Chwla Y. (2005). Hepatitis B Virus: Inactive Carriers. Virology Journal, 2:82. Sudoyo.W.A. (2009). Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid I. Edisi IV.


Jakarta. Pusat Penerbitan IPD. FKUI Thedja, M.D., Roni, M., Harahap. A.R., dkk. (2010). Occult hepatitis B in blood donors in Indonesia: altered antigenicity of the hepatitis B virus surface protein. Hepatologi International Journal, 4 :608-614 Tuncbilek S. (2008). Lamivudine resistance in untreated chronic hepatitis B patients in Turkey,

Turki Journal Gastroenterol, 19,(2) :99-103 Wright TL. (2004). Clinical trial results and treatment resistance with lamivudine in hepatitis B. Seminar Liver Disease; Journal hepatology Suppl, 1:31-6. Zoulim. F., Durantel. D. & Deny. P. (2009). Management and prevention of drug resistance in chronic hepatitis B. Liver International Journal hepatology, 29:108-115

POLYMERASE GENE MUTATION PATTERN IN PATIENTS OF CHRONIC HEPATITIS B PRETREATMENT RSU WAHIDIN SUDIROHUSODO

Recommend Documents