Pengolahan komponen darah

Target dari panitia seminar Peserta pelatihan mendapat pengetahuan tentang perkembangan teknologi pengolahan komponen darah untuk transfusi, termasuk apheresis dan automasi pengolahan komponen darah

dr. Auda S. Aziz

Pengolahan komponen darah

asa032016. Pengolahan komponen darah

2

Pemilahan komponen darah

Topik

 Penting pengambilan darah donor dan teknik pemilahan komponen darah untuk menjamin hasil yang optimal baik bagi resipien maupun bagi donor  Metoda pemilahan yang klasik yang banyak langkah manual sedang mengalami perubahan

 Pengambilan dan penanganan darah

sebelum pengolahan  Perkembangan pemilahan komponen darah

 Pengembangan automasi, mulai dari ekspresi plasma sampai

 Apheresis

proses keseluruhan

 Perbedaan metoda produksi Trombosit Pekat melalui Buffy Coat

 Komponen darah

dan PRP

 Berbagai metoda secondary processing : leukoreduction, irradiasi  Bertambah luasnya penggunaan komponen darah apheresis

 Automasi pengolahan komponen darah asa032016. Pengolahan komponen darah

3


4

Pengambilan Darah Lengkap (WB)  Penting diperhatikan

 Penting diperhatikan

 Meminimalisasi kontaminasi

 Ratio antikoagulan memadai, pencampuran baik

 Meminimalisasi komplikasi lokal

 Lama pengambilan DL kurang dari 10 menit ( 15 – 20

 Kantung darah memenuhi syarat, dengan sample

pouch untuk produksi Trombosit Pekat  Memberi label kantung utama, kantung satelit, tabung sampel darah  Volume darah memadai untuk produksi komponen asa032016. Pengolahan komponen darah

…Pengambilan Darah Lengkap (WB)

5

menit tak bisa untuk produksi Trombosit / FFP ) (USA)  Waktu pengambilan darah hingga 12 menit dapat

dibuat semua komponen, 12 – 15 menit tidak untuk TC dan FFP, lebih 15 menit tidak bisa produksi komponen (Ina) asa032016. Pengolahan komponen darah

6

Penanganan DL sebelum dipilah

…Penanganan DL sebelum dipilah

 Untuk produksi Trombosit Pekat

 …Untuk produksi Trombosit Pekat  Pooled BC didiamkan 2 – 18 jam pada suhu 20 - 24° C sebelum Trombosit dipisahkan. Waktunya disesuaikan untuk memudahkan operasional logistik di UTD

 Beberapa center : Trombosit harus dipisahkan dalam

waktu 8 jam setelah pengambilan DL  Beberapa area: membolehkan atau mempertimbang-

kan sampai 24 jam DL berada di suhu 20° - 24° C (Ina)  Semua proses produksi Trombosit dari Buffy Coat (BC) memperpanjang DL pada suhu 20° - 24° C sampai 2 – 24 jam setelah pengambilan DL asa032016. Pengolahan komponen darah

7

 Bila pengambilan darah pagi sampai sore, dipilah Plasma & BC, BC didiamkan 1 malam (single / pooled), Trombosit dipilah pagi hari berikutnya  Atau bila pengambilan darah sore hari, didiamkan 1 malam, pagi hari berikutnya dipilah BC, sore hari dipilah Trombosit asa032016. Pengolahan komponen darah

8



 …Untuk produksi FFP  Europe

 Untuk produksi FFP  USA

 Bila DL segera dimasukkan refrigerator, Plasma dapat dipisahkan dalam waktu 18 jam setelah pengambilan  Bila DL disimpan 20° - 24° C untuk produksi Trombosit Pekat, Plasma dapat dipisahkan dalam waktu 24 jam setelah pengambilan DL, dibekukan dan diberi label FFP  Juga standar Indonesia (Ina)

 FFP diproduksi dlm waktu 8 jam setelah pengambilan DL  Apabila Plasma dibekukan dalam 8 – 24 jam setelah pengambilan DL, diberi label: “Plasma frozen within 24 hours after collection”


9


10

Prinsip dasar pemilahan komponen darah Plasma

Pemilahan komponen darah

Trombosit 3.6 ± 0.7 µm Lbr 0.9 – 0.3 µm Tbl

 Dengan sentrifugasi  Refrigerated centrifuge (klasik)  Mesin apheresis

Leukosit 8 – 15 µm

 Automated Refrigerated centrifuge Eritrosit 7.8 ± 0.6 µm Lbr 2.5 ± 0.2 µm Tbl asa032016. Pengolahan komponen darah

11


12

Perkembangan pemilahan komponen

Pemilahan komponen darah (klasik)

 Adalah pemutaran unit darah lengkap donor

Plasma

TC +

I

awal (PRC & PRP / Plasma) dan atau ke dua (TC & Plasma), sedangkan langkah selanjutnya (pemisahan komponen, seal, dll) dilakukan secara manual

II asa032016. Pengolahan komponen darah

PRP

PRC 13


14

Apheresis komponen darah

Automasi pengolahan darah

•Adalah prosedur mengeluarkan darah dari tubuh

 Adalah pemisahan unit darah donor dengan

seseorang (1), mengambil komponen darah tertentu yang diinginkan (2) dan mengembalikan komponen darah lainnya ke tubuh orang tersebut (3).

mengkombinasikan proses pemisahan darah lengkap awal dan ke dua, sehingga secara bersamaan diperoleh komponen PRC, Plasma, Trombosit

1 3

Unit darah donor

Reveos


15

2 asa032016. Pengolahan komponen darah

16

Mengisi Bowl

Mesin apheresis

MCS+

MCS+ intermitten flow centrifugation


17

… Mesin apheresis  

Trima


18

… Mesin apheresis

Spectra Optia

Com.tec

Amycus

continuos flow centrifugation


19


20

Komponen PRC

Pemilahan komponen dengan sentrifugasi

Suhu simpan 1° - 6° C (USA) (2° - 6° C Ina)

 Variabel utama yang mempengaruhi hasil

Lama simpan :

 Ukuran rotor  Kecepatan putaran

 21 hari dalam CPD, Ht 65 % - 85 % (USA) (65%-75% Ina)

 Lama putaran

 35 hari dalam CPD-A1, Ht < 80 %

 Accelerasi / decelerasi

 42 – 56 hari dalam Additive solution, Ht 55 % - 65 %

Hemolisis di akhir masa simpan harus < 1 % (USA), <

 Centrifuge : cek, validasi, dirawat, kalibrasi

0.8 % (EU, Ina) asa032016. Pengolahan komponen darah

21

Komponen PRC


22

Komponen Trombosit Pekat (TC)

 Hb bervariasi tergantung donor & metoda

 Dalam plasma, volume 40 – 70 mL (mutu baik

 Tidak diatur di USA

dalam 35 – 40 mL plasma) (USA), 50 – 70 mL (Ina)

 Batas minimal 45 g / unit; 40 g / unit untuk leucoreduced

PRC ( EU, Ina); ada juga yang menginginkan 5o g / unit  Hb hilang lebih banyak pada produksi Trombosit via BC

 Suhu simpan 20° - 24° C  Lama simpan 5 hari (USA, Ina), 7 hari (EU), 3 hari

di Jepang  pH < 6.2, suhu simpan 22 ° C, buruk pemulihan in-

vivo (USA) ; harus > 6.4 (Ina) asa032016. Pengolahan komponen darah

23


24

Komponen FFP

…Komponen Trombosit Pekat Apheresis

 USA

Random

 Simpan dalam freezer 8 jam setelah pengambilan DL

1 donor  I unit TC  1 resipien  6 unit TC  6 unit WB  6 donor

( 6 jam bila DL dalam ACD)  Suhu simpan ≤ - 18° C, lama simpan 1 tahun  Suhu pencairan 30° - 37° C, kantung FFP dimasukkan

kantung plastik  FFP cair dipakai segera atau simpan pada 1° - 6° C

3 x 1011 / unit (USA) minimal 2x 1011 / unit (Ina)

5 x 1010 / unit 6 x 1010/unit (Ina)

maksimal 24 jam 25


26

…Komponen FFP

Komponen FFP

 Council of Europe:

 USA  Intervensi meminimalkan pembuatan komponen

dengan volume plasma yang tinggi dari donor yang mempunyai risiko pembentukan antibodi HLA. Jadi dari donor laki-laki, tidak dari wanita yang telah pernah hamil  Karantina FFP 6 bulan

 Dibekukan dalam 6 jam setelah pengambilan DL Atau dalam 18 jam bila DL disimpan pada suhu 1° - 6° C Atau dalam 24 jam bila DL disimpan pada suhu 20° - 22° C  Pembekuan selesai dalam 1 jam pada suhu < - 30° C  Lama simpan 3 bulan pada suhu -18° sampai - 25° C

36 bulan pada suhu ≤ - 25° C  Juga standar Ina


27


28

Komponen Cryoprecipitate

…Komponen Cryoprecipitate

 USA Dari FFP yang dicairkan dalam refrigerator 1° - 6° C selama

1 malam atau dalam circulating waterbath 1°- 6°C Simpan dalam freezer suhu < -18° C dalam 1 jam setelah keluar dari refrigerated centrifuge ; lama simpan 1 tahun

 EU Dicairkan pada suhu 2° - 6° C Disimpan 3 bulan pada suhu - 18° sampai - 25° C

36 bulan pada suhu - 25° C Juga standar Ina asa032016. Pengolahan komponen darah

USA kandungan minimal

EU kandungan minimal

 F VIII 80 IU  Fibrinogen 150 mg (ratarata 250 mg)  vWF 170 unit  F XIII 60 unit  Anti-A, anti-B 1.15 % dari total

 F VIII 70 IU  Fibrinogen 140 mg ( biasanya 388 mg / unit)  vWF 100 IU  Juga standar Ina

29

30

Modifikasi

…Komponen Cryoprecipitate

 Filtrasi leukosit pada DL sebelum disimpan

 USA  Cryoprecipitate cair digunakan segera, atau bisa disimpan

pada suhu 20° - 24° C maksimal 6 jam ( kantung single / pool menggunakan sterile connecting devices) atau 4 jam bila pool dengan open system  Kandungan F VIII pada suhu 20° - 24° C selama 2 jam berkurang 10 %, 4 jam berkurang 20 %, 6 jam turun 30 % asa032016. Pengolahan komponen darah

31

(Prestorage leukocyte reduction by filtration)  Pengurangan volume komponen (volume

reduction)  Irradiasi  Cryopreservation asa032016. Pengolahan komponen darah

32

Karantina

Informasi produk

 Semua komponen yang baru diproduksi di

 The circular information for the use of human blood

karantina sampai pengecekan tentang informasi & pencatatan donor selesai, termasuk informasi terbaru, pernah tidaknya ditolak dan hasil uji saring infeksi sudah lengkap


and blood components  Untuk petugas yang terlibat dalam transfusi darah

33


Automasi pengolahan darah

… Automasi pengolahan darah

 Sistim beroperasi secara automatis, meliputi:

 Proses automasi yang konsisten menghasilkan:

    

   

Membuat keseimbangan Memutar Memisahkan komponen Menyegel Menentukan Volume dan isi komponen trombosit  Mencatat prosedur dan data proses  Beberapa unit darah lengkap pada satu saat. asa032016. Pengolahan komponen darah

34

Presisi tinggi Sedikit kesalahan Sedikit produk gagal Sedikit produk terbuang

 Proses automasi yang akurat memungkinkan:  Mengurangi variasi produk  Meningkatkan konsistensi produk  Mendapatkan volume komponen yang lebih tinggi 35


36



 Sistim automasi menghemat waktu & tenaga

 Sistim automasi menghemat ruangan

 Prosedur berkesinambungan secara automatis

 Jenis peralatan lebih sedikit

 Sistim sangat mendukung Good Manufactur-

 Langkah manual sangat sedikit  Mengurangi jumlah SPO / Instruksi kerja

ing Practices (GM P)

 Memperpendek waktu pelatihan

 Kontrol proses yang tinggi

 Lama prosedur lebih pendek

 Pencatatan data yang lengkap

 Workflow optimal asa032016. Pengolahan komponen darah

37


Manfaat automasi pengolahan darah

Jenis alat pengolah darah automatis

 Memperbaiki efisiensi laboratorium

 Reveos

 Memperbaiki kualitas komponen darah

 TACSI WB System

 Memperbaiki kontrol proses

 TACSI PL System


39


38

40

…The Reveos System

The Reveos System  Didisain bekerja automatis sepenuhnya dalam

Terdiri dari:

mengolah darah lengkap terstandar, terutama untuk lab yang menggunakan metoda PRP untuk memproduksi komponen sel darah merah, plasma dan trombosit

The Reveos device 

Sistim automatis yang pada satu saat dapat mengolah sampai 4 unit Darah Lengkap

Reveos System Manager 

Menangani sistim manajemen data

C adence Data Collection System 

Aplikasi untuk perbaikan pelayanan pelanggan

An integrated processing set 


41


Digunakan untuk koleksi & pengolahan


42

…The Reveos System  Volume darah

lengkap donor 450 mL / unit


43


44


…The Reveos System  Kapasitas 4 unit Darah Lengkap

 Identifikasi

 Lama prosedur 18 menit

kantung darah


45



…The Reveos System  Produk (3C) :

 Menggunakan 2 prosedur utama:  Proses 2 komponen (2C) memproduksi 4 unit PRC,

 4 unit Packed Red Cells

4 unit Plasma dan 4 unit residu leukosit dari 4 unit Darah Lengkap dalam waktu 18 menit  Proses 3 komponen (3C) memproduksi 4 unit PRC, 4 unit Plasma, 4 unit Trombosit dan 4 unit residu leukosit dari 4 unit Darah Lengkap dalam waktu 18 menit

 4 unit Plasma


46

 4 unit Trombocyte

Concentrate  4 unit residu leukosit 47


48



 Produk (2C):  4 unit Packed Red Cells  4 unit Plasma  4 unit residu leukosit


49



50


 Dilengkapi dengan Reveos System Manager

 Seorang operator pada satu saat dapat

(RSM): manajemen data dan sistim informasi yang dirancang untuk operasional sehari-hari


Pooled Platelets

menggunakan 4 mesin Reveos untuk mengolah 1 unit Darah Lengkap per menit

51


52

Volume 105, 1ssue 3 pages 225–235, October 2013

Kualitas produk automasi  Konsisten

Original Article Evaluation of the quality of blood components prepared using the Reveos automated blood processing system L. Johnson*, K. M. Winter, M. Kwok, S. Reid and D. C. Marks

 Variasi lebih kecil


53


54


Material & metoda: Darah Lengkap donor diproses dengan sistim Reveos kemudian produknya dibandingkan dengan komponen yang dipilah dengan metoda semi-automatis yang digunakan sehari-hari

Tujuan : Menentukan spesifikasi produk dan kualitas in vitro produk yang dipilah dengan sistim Reveos


Applied and Developmental Research, Research and Development, Australian Red Cross Bloodasa032016. Service, Sydney, Australia Pengolahan komponen darah

55


56



Material & metoda: Produk Reveos:

Material & metoda: Produk pembanding

 PRC , leucoreduced, dalam SAGM, 4° C

 PRC, plasma dan buffy coat dipilah dengan metoda

 Plasma dibekukan pada suhu -30° C

top & bottom

 Faktor pembekuan diperiksa setelah dicairkan

 TC, leukoreduced, dari pool 4 unit Buffy Coats

 TC , leukoreduced, pool 4 unit interim-TC


57




Hasil: Pemilahan dengan sistim Reveos lebih cepat dibanding metoda semi-automatis (76 menit vs 92 menit) Kandungan (yield) sel darah merah dalam PRC dan trombosit dalam TC lebih tinggi pada komponen yang dipilah dengan sistim Reveos asa032016. Pengolahan komponen darah

58

59

…Hasil: Parameter kualitas in vitro PRC dan Plasma Reveos dan pembanding sama Parameter kualitas in vitro TC Reveos dan pembanding sama:  pH, metabolisme glukosa & laktat, respons shock

hipotonik, ekspresi phosphatidylserine

 Marker aktivasi trombosit lebih tinggi pada produk

TC Reveos


60



Kesimpulan : Sistim Reveos memperbaiki efisiensi komponen darah melalui pengurangan waktu pemilahan dengan tetap memelihara kualitas komponen yang sama

Platelet Concentrate C volume (mL)


299.64 ± 7.14

> 160

297.43 ± 11.68

331.99± 30.03

> 240

Leucocytes

0.33 ± 0.01

0.42 ± 0.38

< 0.8

27.6 ± 1.9

38.1 ± 4.6

249.96 ± 1.75

272.18 ± 4.26

(x 106 / unit)

Reveos

299.74 ± 3.17

299.64 ± 7.14

> 160

Platelet yield (x 109 / unit)

297.43 ± 11.68

331.99± 30.03

> 240

Leucocytes

0.33 ± 0.01

0.42 ± 0.38

< 0.8

27.6 ± 1.9

38.1 ± 4.6

n/a

Lipaemia

(x 106 / unit)


n/a > 220

Hb

(g / unit)

46.58 ± 0.90

47.77 ± 1.68

> 40

Ht

(l/l)

0.58 ± 0.01

0.58 ± 0.02

0.50 – 0.70

0.26 ± 0.01

0,24 ± 0.12

< 1.0

Leucocytes

(x 106 / unit)


62

The TACSI WB system

Reference Plasma volume (mL)

QC Specifications

299.74 ± 3.17

Plasma carryover (%)

61

Reveos

Platelet yield (x 109 / unit)

RBCC volume (mL )


Reference

 The TACSI WB system didisain untuk pengolahan

QC Specifications

DL secara automatis dan terstandar terutama untuk lab yang memproduksi PRC, Plasma dan Trombosit Pekat via Buffy Coat (BC)  Satu operator pada satu saat dapat mengoperasikan 4 TACSI WB devices, memilah 72 - 96 unit DL per jam 63


64

Kesimpulan  Pemilahan komponen darah semakin berkembang

ke arah automasi, meminimalkan tindakan manual, sehingga waktu pengolahan menjadi lebih pendek, hasil produk menjadi lebih konsisten dan tenaga lebih efektif; apheresis pun makin berkembang  Standar pelayanan darah 2015 agar diperhatikan karena pergeseran dari standar USA yang selama ini banyak dianut ke ketetapan dalam standar Europa asa032016. Pengolahan komponen darah

65

Pengolahan komponen darah

Recommend Documents