PENGARUH LAMA FERMENTASI TERHADAP JUMLAH KOLONI BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM SOYGHURT DAN EFEKTIFITASNYA PADA PENYEMBUHAN GASTRITIS LAMBUNG MENCIT

PENGARUH LAMA FERMENTASI TERHADAP JUMLAH KOLONI BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM SOYGHURT DAN EFEKTIFITASNYA PADA PENYEMBUHAN GASTRITIS LAMBUNG MENCIT (Mus musculus L) YANG DIINDUKSI DENGAN ASPIRIN

TESIS

Oleh NAFIAH 097030011/BIO

PROGRAM PASCASARJANA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013

Universitas Sumatera Utara


TESIS




PENGARUH LAMA FERMENTASI TERHADAP JUMLAH KOLONI BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM SOYGHURT DAN EFEKTITASNYA PADA PENYEMBUHAN GASTRITIS LAMBUNG MENCIT (Mus musculus L) YANG DIINDUKSI DENGAN ASPIRIN

TESIS

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains dalam Program Studi Magister Ilmu Biologi pada Program Pascasarjana Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara





PERNYATAAN ORISINALITAS

PENGARUH LAMA FERMENTASI TERHADAP JUMLAH KOLONI BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM SOYGHURT DAN EFEKTIFITASNYA PADA PENYEMBUHAN GASTRITIS LAMBUNG MENCIT YANG DIINDUKSI DENGAN ASPIRIN

TESIS

Dengan ini saya menyatakan bahwa saya mengakui semua karya tesis ini adalah hasil kerja saya sendiri kecuali kutipan dan ringkasan yang tiap satunya telah dijelaskan sumbernya dengan benar.

Medan, 28 Februari 2013

( Nafiah ) NIM. 097030011


PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

Sebagai sivitas akademika Universitas Sumatera Utara, saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama NIM Program Studi Jenis Karay Ilmiah

: : : :

Nafiah 097030011 Biologi Tesis

Demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada Universitas Sumatera Utara Hak Bebas Royalti Non–Eksklusif (Non-Exclusive Royalty Free Right) atas Tesis saya yang berjudul : Pengaruh Lama Fermentasi Terhadap Jumlah Koloni Bakteri Asam Laktat Dalam Soyghurt Dan Efektifitas Pada Penyembuhan Gastritis Lambung Mencit (Mus musculus L) Yang Diinduksi Dengan Aspirin Beserta perangkat yang ada (jika dipedrlukan). Dengan Hak Bebas Royalty NonEksklusif ini, Universitas Sumatera Utara berhak menyimpan, mengalih media, memformat, mengelola dalam bentuk data-base, merawat dan mempublikasikan Tesis saya tanpa meminta izin dari saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis dan sebagai pemegang dan atau sebagai pemilik hak cipta. Demikian pernyataan ini dibuat dengan sebenarnya.

Medan, 28 Februari, 2013

( Nafiah )


Telah diuji pada Tanggal : 15 Februari 2013

PANITIA PENGUJI TESIS

Ketua

: Prof.Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed

Anggota

: 1. Dr.Ir. Herla Rusmarilin, MP 2. Dr. It Jamilah, M.Sc 3. Dr. Salomo Hutahaean, M.Si


RIWAYAT HIDUP

DATA PRIBADI

Nama

: Nafiah, S.Si

Tempat dan Tanggal Lahir

: Medan, 04 Juni 1969

Alamat Rumah

: Jl. Alfalah II No. 5B Medan

Telepon/HP

: 081396328446

e-mail

: [email protected]

Instansi Tempat Bekerja

: Fakultas Kedokteran USU Medan

Alamat Kantor

: Jl. Universitas No.I Gd. Abdul Hakim Kampus USU Medan

Telepon

: (061) 8211746

DATA PENDIDIKAN SD

: SD Negeri Tanjung Selamat Kab. Langkat

Tamat

: 1982

SMP

: SMP Negeri Tg. Pura Kab. Langkat

Tamat

: 1985

SMA

: SMAK Dharma Analitika Medan

Tamat

: 1988

Strata-1

: Fak. Biologi UMA Medan

Tamat

: 2005

Strata-2

: Program PascasarjanaFMIPA USU

Tamat

: 2013


KATA PENGANTAR Pertama-tama Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas limpahan Rahmat dan Hidayahnya, sehinga penulis dapat menyelesaikan penulisan tesis ini. Dengan selesainya tesis ini, perkenankanlah kami mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: Rektor Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. Syahril Pasaribu, DMT&H, M.Sc (CTM), Sp. A(K) atas kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan Program Magister. Dekan Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara, Dr. Sutarman, M.Sc atas kesempatan menjadi mahasiswa Program Magister pada Program Pascasajana FMIPA Universitas Sumatera Utara. Ketua Program Studi Pascasarjana Biologi Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed, Sekretaris Program Studi Pascasarjana Biologi Dr. Suci Rahayu, M.Si beserta seluruh staf pengajar pada Program Studi Pascasarjana Biologi Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara. Terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan yang setinggi-tingginya penulis ucapkan kepada Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed dan Dr.Ir. Herla Rusmarilin, M.P selaku komisi pembimbing yang senantiasa bersedia meluangkan waktu untuk membimbing dan memberikan masukan serta pemikiran dengan penuh kesabaran kepada penulis untuk menyelesaikan tesis ini. Terima kasih juga kepada Dekan Faklutas Kedokteran USU bapak Prof.dr. Gontar A.Siregar, SpPD, KGEH, ketua Departemen P. Anatomi FK USU dr. Ibnu Alferally, Sp.PA, dr. Lidya Imelda Laksmi, Sp.PA beserta seluruh staf pengajar dan teman sejawat di Departemen P. Anatomi FK USU yang telah memberikan kesempatan dan dukungan untuk melanjutkan pendidikan Program Magister pada Program Pascasarjana FMIPA USU. Kepada teman sejawat di Laboratorium Mikrobiologi FK USU serta adikadik mahasiswa strata-1 Fakultas Biologi FMIPA Universitas Sumatera Utara yang telah mambantu penulis dalam melaksanakan Penelitian. Kepada ayahanda Hafas Achmad dan Ibunda Zuraidah (Alm),serta suami tercinta Alimuddin Nst dan kepada anak-anak tersayang Zhafirah Alfina Nst, Nahdansyah Abd. Rauf Nst dan Syafitri Nurhaliza Nst penulis mengucapkan terima kasih yang tulus atas pengertian, pengorbanan baik moril mupun materil serta dukungannya, budi baik ini tidak dapat dibalas hanya diserahkan kepada Allah SWT. Medan, Februari 2013 Penulis,

Nafiah i



ABSTRAK Penggunaan Obat Anti Inflamasi Non Steroid (OAINS) seperti Acetylsalicylic acid (ASA) atau aspirin di masyarakat masih tinggi. Aspirin berefek iritasi terhadap mukosa lambung hingga timbulnya gastritis. Soyghurt dimanfaatkan untuk penyembuhan gastritis. Penelitian ini tentang pembuatan soyghurt dengan menggunakan starter youghurt yang mengandung bakteri asam laktat spesies Lactobacillus bulgaricus dan Streptococcus thermophillus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektifitas soyghurt dalam penyembuhan gasritis lambung mencit yang diinduksi aspirin 400 mg/kg BB dengan jumlah bakteri asam laktat dan lamanya waktu fermentasi yang optimum. Perlakuan lamanya waktu inkubasi pada pembuatan soyghurt adalah 4, 6 dan 8 jam pada suhu inkubasi 40 ⁰C. Analisa jumlah bakteri asam laktat berdasarkan Standar Plate Count. Identifikasi jenis bakteri berdasarkan karakteristik morfologi (pewarnaan Gram) dan uji biokimia (uji katalase, fermentasi karbohidrat, motilitas, reduktase nitrat, dan uji ketahanan suhu). Hasil penelitian menunjukkan bahwa waktu fermentasi yang semakin lama menyebabkan kenaikan total koloni bakteri asam laktat, waktu inkubasi yang optimal adalah 8 jam dengan jumlah koloni sebesar 1,57 x 109 CFU/ml. Pemberian soyghurt sebanyak 0,5 ml per hari selama 14 hari kepada hewan uji (mencit) pada kelompok perlakuan gastritis yang disebabkan aspirin (P1) menunjukkan pengaruh yang berbeda tidak nyata (P>0,05) terhadap kelompok kontrol (P0) melalui gambaran makroskopis, histopatologi dan persentase ketebalan lapisan mukus pada mukosa lambung mencit. Pemberian soyghurt selama 14 hari memberikan pengaruh yang signifikan terhadap pemulihan (recovery) gastritis lambung mencit yang induksi aspirin baik secara makroskopis maupun mikroskopis. Kata kunci : Lama Fermentasi, Bakteri asam laktat, Soyghurt, Gastritis.

ii Universitas Sumatera Utara

THE EFFECT OF FERMENTATION DURATION TO THE NUMER OF COUNT OF LACTIC ACID BACTERIAL IN SOYGURT AND ITS EFFECTIVENESS IN HEALING OF GASTRITIS ON MICE ( Mus musculus L) THAT INDUCED BY ASPIRIN

ABTSRACT Using of non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDS) such as Acetylsalicyclic acid (ASA) or aspirin in the high community. The effect of aspirin against gastric mucosal irritation to the onset of gastritis. Soygurt is used to cure gastritis. Research on creating soygurt using lactic acid bacteria starter yogurt. Objection of this study to determine the effectiveness of soygurt in healing of gastritis that induced aspirin in mice 400 mg/kg body weight by the number of lactic acid bacteria and the optimum duration of fermentation. Treatment duration of incubation on making soygurt is 4, 6 and 8 hours of incubation at 40 °C. Analysis of the amount of lactic acid bacteria based on Standard Plate Count. Identify the types of bacteria based on morphological characteristics (gram staining) and biochemical tests (catalase test, carbohydrate fermentation, motility, nitrate reductase, and temperature resistance test). The results showed that the fermentation time which led to an increase in total lactic acid bacteria colonies, the optimal incubation time is 8 hours by the number of colonies of 1.75 x109 CFU / mL. Administration of soygurt approximately 0.5 mL per day for 14 days to test animals (mice) in the treatment of gastritis caused by aspirin (P1) showed different effects are not significant (p>0.05) for the control group (P0) through macroscopic description, histopathology, and the percentage of the thickness of mucus in the gastric mucosa of mice. Administration of soygurt for 14 days orally found a significant effect on recovery gastritis that induced aspirin of gastric mice at the both microscopic and macroscopic.

Keywords: duration of fermentation, lactic acid bacteria, Soygurt, Gastritis.

iii


DAFTAR ISI Halaman KATA PENGANTAR .......................................................................................... i ABSTRAK ........................................................................................................... ii ABSTRACT ......................................................................................................... iii DAFTAR ISI ....................................................................................................... iv DAFTAR TABEL ................................................................................................ vi DAFTAR GAMBAR ...........................................................................................vii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... ix BAB I

PENDAHULUAN .............................................................................. 1 1.1 Latar Belakang ........................................................................ 1 1.2 Pembatasan dan Perumusan Masalah ..................................... 7 1.3 Kerangka Pemikiran ................................................................ 8 1.4 Tujuan Penelitian ..................................................................... 8 1.5 Manfaat Penelitian ................................................................... 9 1.6 Hipotesis .................................................................................. 9

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 10 2.1 Aspirin ................................................................................... 10 2.1.1 Mekanisme Kerja Aspirin (Asam Asetil Salisilat) ....... 11 2.1.2 Efek OAINS Pada Lambung......................................... 12 2.2 Omeprazole ............................................................................. 13 2.3 Lambung ................................................................................. 14 2.3.1 Fisiologi Lambung ....................................................... 14 2.3.2 Anatomi Dan Histologi Lambung Normal .................. 15 2.3.3 Pertahanan Mukosa Lambung ..................................... 19 2.3.4 Patologi Lambung ........................................................ 21 2.4 Kedelai .................................................................................... 24 2.5 Susu Kedelai .......................................................................... 26 2.6 Yoghurt Susu Kedelai ............................................................. 28 2.7 Bakteri Asam Laktat ............................................................... 30 2.7. 1. Lactobacillus bulgaricus.............................................. 33 2.7.2. Streptococcus thermopillus ........................................... 35 2.8 Bakteri Asam Laktat Sebagai Probiotik.................................. 37 2.9 Potensi Soyghurt Yang Mengandung Bakteri Asam Laktat Dalam Penyembuhan Gastritis Pada Lambung ...................... 38

BAB III

BAHAN DAN METODE ................................................................. 41 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ................................................. 41 3.2 Populasi dan Sampel ............................................................... 41 3.2.1 Populasi ......................................................................... 41 3.2.2 Sampel ........................................................................... 41 3.3 Alat dan Bahan........................................................................ 41 3.3.1 Alat ............................................................................... 41 iv


3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 3.15.

3.16

3.3.2 Bahan ............................................................................. 42 Pembuatan Kultur Stater ......................................................... 42 Pembuatan Susu Kedelai ........................................................ 43 Pembuatan Soyghurt ............................................................... 44 Pemeliharaan Hewan Percobaan ............................................. 44 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Asam Laktat .................. 44 Identifikasi Bakteri Asam Laktat ............................................ 45 Rancangan Percobaan Efek Probiotik Bakteri Asam Laktat Secara in Vivo Pada Hewan Uji Mencit ................................ 47 Pengukuran Berat Badan Mencit.............................................49 Pengukuran Bobot Lambung Mencit.......................................49 Pengamatan Mukosa Lmabung Secara Makroskopis ............. 49 Pengamatan Gambaran Histopatologi Mukosa Lambung Mencit .................................................................................... 49 Penilaian Ketebalan Lapisan Lendir Mukosa Lambung Mencit Menggunakan Pewarnaan Periodic Acid Schiff (PAS) ...................................................................................... 51 Analisis Data ........................................................................... 52

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 53 4.1 Jumlah Koloni Bakteri Asam Laktat Pada Soyghurt ............. 53 4.2 Identifikasi Bakteri Asam Laktat ............................................ 55 4.3 Pengukuran Berat Badan Mencit ............................................ 57 4.4 Bobot Lambung Mencit .......................................................... 60 4.5 Peradangan Mukosa Lambung Mencit Secara Makroskopis.. 62 4.6 Histopatologi Mukosa Lambung Mencit ................................65 4.7 Ketebalan Lapisan Lendir Mukosa Lambung ......................... 70

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 76 5.1 Kesimpulan ............................................................................. 76 5.2 Saran ....................................................................................... 76 DAFTAR KEPUSTAKAAN ......................................................... 78 LAMPIRAN ................................................................................. L1

v


DAFTAR TABEL Nomor Tabel

Judul

Halaman

2.1

Kandungan Gizi dalam tiap 100 gram Biji Kedelai Kering

26

2.2

Komposisi Susu Kedelai, Susu Sapi 100 gram

27

2.3

Tabel 2.3. Syarat Mutu yoghurt Menurut SNI

30

2.4

Diferensial Karakteristik Bakteri Asam Laktat Berdasarkan

31

Morfologi dan Fisiologi 2.5

Pola Fermentasi Karbohidrat Spesies Homofermentatif

32

Obligat dari dari Genus Lactobacillus 4.1

Jumlah Koloni Baktei Asam Laktat Pada Soyghurt suhu

53

0

inkubasi 40 C dengan waktu inkubasi 4, 6 dan 8 jam 4.2

Karakteristik Morfologi Sel dan Uji Biokimia BAL

55

4.3

Peningkatan Berat Badan Mencit pada Hari ke-0 dan Hari

58

ke-24 pada Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.4

Hasil Rata-rata Bobot Lambung Mencit pada Hari ke-24

61

pada Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.5

Hasil Rata-rata Penilaian Makroskopis Lambung Mencit

62

pada Hari ke- 24 Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.6

Hasil Rata-rata Kerusakan dan Derajat Peradangan Mukosa

66

Lambung Mencit Secara Histopatologi pada Hari ke-24 pada Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.7

Perbandingan Nilai Persentase Ketebalan Lapisan Lendir

71

Mukosa Lambung Mencit Pada Hari ke-24 pada Masingmasing Kelompok Perlakuan 4.8

Persentase Penurunan dan Peningkatan Rasio Ketebalan

72

Lapisan Lendir Mukos Lambung Mecit

vi


DAFTAR GAMBAR

Nomor

Judul

Gambar

Halaman

2.1

Struktur Aspirin

11

2.2

Anatomi Eksternal dan Internal Lambung Mamalia

16

2.3

Histologi Normal Mukosa Lambung

19

2.4

Penyebab, Mekanisme Pertahanan dan ulkus Peptik

24

2.5

Youghurt atau Soyghurt

28

2.6

Lactocbacillus bulgaricus

34

2.7

Streptococcs thermopillus

36

2.8

Fermentasi Bakteri Asam Laktat Jalur Homofermentatif

37

(A) dan Heterif (A) dan Heterofermentatif 3.1

Metode Plate Count dan Pengenceran seri

45

Mencit Kelompok Perlakuan P1, P2, dan P3 3.2

Skema Perlakuan Hewan Uji

48

4.1

Histogram selisih berat badan awal dan akhir Mencit

57

Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.2

Histogram Bobot Lambung Mencit pada hari ke-24

60

Masing-masing Kelompok Perlakuan 4.3

Histogram Makroskopis Lambung Mencit pada hari ke-

62

24, terhadap masing-masing kelompok perlakuan 4.4

Gambar Makroskopis Mukosa Lambung Mencit

64

4.5

Histogram Rata-rata Penilaian Kerusakan dan Derajat

65

Peradangan Mukosa Lambung Mencit secara ikroskopis pada hari ke-24, terhadap masing-masing kelompok perlakuan 4.6

Gambar Kerusakan Mukosa Lambung Mencit Secara

69

Histopatologi

vii


4.7

Histogram Perbandingan Nilai Persentase Ketebalan

70

Lapisan Lendir Mukosa Lambung Mencit pada hari ke24 terhadap Masing-Masing Kelompok Perlakuan 4.8

Ketebalan Mukus Mukosa Lambung Mencit dengan

73

Pewarnaan PAS 5.0

Kedelai dan Bioklut (starter komersial)

L-18

6.0

Soyghurt Inkubasi 4,6 dan 8 jam

L-18

7.0

Bakteri Asam Laktat pada Soyghurt Inkubasi 4, 6 dan 8

L-18

jam 8.0

Uji Pewarnaan Gram L. Bulgaricus dan S. termophillus

L-18

9.0

Uji Fermentasi Karbohidrat

L-19

10.0.

Alat Inkubator dan Autoclave

L-19

11.0

Alat Automatic Tissue Processor/Leica TP 1020, Tissue

L-19

Embedding /Leica EG 1160, Microtome/Leica RM 2245 12.0

Mencit Yang Digunakan Untuk Penelitian

L-20

13.0

Blok Paraffin, Slide dan Pewarnaan Haematoxyline-

L-20

Eosin

viii


DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Lampiran A

Judul

Halaman

SuratEthical clearance

L-1

B

Komposisi Media

L-2

C

Cakupan Kegiatan Penelitian

L-3

D

Diagram Alir Pembuatan Starter Soyghurt

L-4

E

Diagram Alir Pembuatan Susu Kedelai

L-5

F

Diagram Alir Pembuatan Soyghurt

L-6

G

Tabel Jumlah koloni L. Bulgaricus dan S. thermophillus

L-7

pada Pengenceran 10-7 H

Identifikasi Fermentasi Karbohidrat Beberapa Genus

L-8

Lactobacillus Menurut Bergey;s I

Hasil Uji Statistik Peningkatan Berat Badan Mencit pada

L-9

Hari ke-0 dan Hari ke-24 Pada Masing-maing Kelompok J

Data-data Bobot Lambung, Makroskopis dan

L-11

Histopatologi Lambung pada Hari ke-24 Pada Masingmaing Kelompok Perlakuan K

Persentase Ketebalan Lapisan Lendir Mukosa Lambung

L-16

Mencit pada Hari ke-24 pada Masing-masing Kelompok Perlakuan L

Dokumentasi Penelitian

L-18

ix


PENGARUH LAMA FERMENTASI TERHADAP JUMLAH KOLONI BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM SOYGHURT DAN EFEKTIFITASNYA PADA PENYEMBUHAN GASTRITIS LAMBUNG MENCIT

Recommend Documents