PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA

PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA (Indole Butyric Acid) TERHADAP PERTUMBUHAN DAN KADAR METABOLIT SEKUNDER (STIGMASTEROL DAN SITOSTEROL) KALUS PURWOCENG (Pimpinella alpine Molk.) PADA MEDIA MS

SKRIPSI

Oleh: SRI LESTARI NIM. 08620043

JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013

PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA (Indole Butyric Acid) TERHADAP PERTUMBUHAN DAN KADAR METABOLIT SEKUNDER (STIGMASTEROL DAN SITOSTEROL) KALUS PURWOCENG (Pimpinella alpine Molk.) PADA MEDIA MS

SKRIPSI

Diajukan kepada : Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)

Oleh : SRI LESTARI NIM. 08620043

JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013

PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA (Indole Butyric Acid) TERHADAP PERTUMBUHAN DAN KADAR METABOLIT SEKUNDER (STIGMASTEROL DAN SITOSTEROL) KALUS PURWOCENG (Pimpinella alpine Molk.) PADA MEDIA MS

SKRIPSI

Oleh: SRI LESTARI NIM. 08620043

Telah Diperiksa dan Disetujui untuk Diuji: Tanggal: 22 Januari 2013

Dosen Pembimbing I

Dosen Pembimbing II

Dr. Evika Sandi Savitri, M.P NIP. 19741018 200312 2 002

Dr. H. Ahmad Barizi, M.A NIP. 19731212 199803 1 001

Mengetahui, Ketua Jurusan Biologi

Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP.19630114 199903 1 001

PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA (Indole Butyric Acid) TERHADAP PERTUMBUHAN DAN KADAR METABOLIT SEKUNDER (STIGMASTEROL DAN SITOSTEROL) KALUS PURWOCENG (Pimpinella alpine Molk.) PADA MEDIA MS

SKRIPSI

OLEH: SRI LESTARI NIM. 08620043

Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Tugas Akhir dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persnyaratan Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)

Tanggal, 22 Januari 2013

Susunan Dewan Penguji

Tanda Tangan

1. Penguji Utama

(

)

(

)

(

)

(

)

2. Ketua 3. Sekretaris 4. Anggota

: Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 001 : Dwi Suheriyanto, M.P NIP. 19740325 200312 1 001 : Dr. Evika Sandi Savitri, M.P NIP. 19741018 200312 2 002 : Dr. H. Ahmad Barizi, M.A NIP. 19731212 199803 1 001

Mengetahui dan Mengesahkan Ketua Jurusan Biologi

Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP.19630114 199903 1 001

Puji Syukur ku ucapkan kepada Mu ya Robbi atas segala cinta, Kasih Sayang yang sudah Engkau berikan kepada hambaMu Ini. Shalawat serta salam tetap kita limpahkan kepada junjungan kita Nabi Besar Muhammad SAW Karena beliau yang telah membawa kita pada jalan kebenaran Karya kecilku ini kupersembahkan untuk : Bapak dan Ibunda tersayang yang telah melahirkan, membimbing, membesarkan, menyayangi, mendidik dan selalu menjadi motivasi dalam hidupku dan selalu mengiringi do’a dalam setiap hela nafasku. Tanpa perjuangan kalian aku takkan bisa seperti ini, terima kasih dari putrimu tak akan pernah cukup untuk membalas jasa Bapak dan Ibu. Semoga karya kecil nan sederhana ini dapat menjadi amal ibadah Bapak… Ibu… Adikku tersayang mutiara kecil yang selalu menjadi sumber inspirasiku… Senyummu telah memberikan sejuta keindahan dalam hidupku Semoga persaudaan kita selalu di rahmati oleh Allah SWT Seluruh keluarga besarku terima kasih nasehat-nasehat yang telah diberikan… Seluruh Guru, Dosen, dan ustadz ustadzah yang telah memberikan cakrawala gemilau dunia pendidikan, dengan penuh kesabaran membimbingku Jasamu sungguh mulia, tanpamu aku takkan bisa seperti ini, Engkau adalah pahlawan tanpa tanda jasa Kawan-kawan team kultur jaringan dan yang membantu proses penelitian terima kasih atas bantuannya, kesabaran kita akan menuai hasil yang diridhai Allah,,, amien Seluruh angkata ’08 biologi dan sahabat kontarakan ku yang senantiasa memberikan semangat dan motivasi dalam setiap langkahku selama ini Sahabat…Terimakasih telah mengajariku segala hal yang tak pernah aku tahu sebelumnya, Kalian semua adalah kisah dalam hidupku yang takkan pernah aku lupakan, dan akan menjadi sejarah terindah dalam setiap perjalanan hidupku selanjutanya….

      

“Sesungguhnya pada langit dan bumi benar-benar terdapat tanda-tanda (kekuasaan Allah) untuk orangorang yang beriman. (Al-Jatsiyah:3)”

Percaya pada dirimu dan cobalah lakukan hal yang benar karena kita sendiri yang memilih untuk jadi siapa diri kita

SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS PENELITIAN

Saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama

: Sri Lestari

NIM

: 08620043

Fakultas/ Jurusan

: Sains dan Teknologi/ Biologi

Judul Penelitian

: Pengaruh Jenis Eksplan dan Konsentrasi IBA (Indole Butyric

Acid)

Terhadap

Pertumbuhan

dan

Kadar

Metabolit Sekunder (Stigmasterol dan Sitosterol) Kalus Purwoceng (Pimpinella Alpine Molk.) Pada Media MS Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa hasil penelitian saya ini tidak terdapat unsur-unsur penjiplakan karya penelitian atau karya ilmiah yang pernah dilakukan atau dibuat oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis dikutip dalam naskah ini dan disebutkan dalam sumber kutipan dan daftar pustaka. Apabila ternyata hasil penelitian ini terbukti terdapat unsur-unsur jiplakan, maka saya bersedia untuk mempertanggung jawabkan, serta diproses sesuai peraturan yang berlaku. Malang, 30 Januari 2013 Yang Membuat Pernyataan,

SRI LESTARI NIM. 08620043

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr Wb Alhamdulillah puji dan syukur senantiasa kita panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat dan karunia-Nya. Shalawat serta salam semoga tercurahkan kepada junjungan kita Nabi besar Muhammad SAW yang telah membimbing kita dari zaman Jahiliyah menuju zaman yang penuh dengan ilmu pengetahuan yakni ad-dhin al-Islam yang selalu kita harapkan syafa’at beliau kelak di al-yaum al-qiyamah. Atas kehendak, hidayah serta inayah Allahlah, penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini. Seiring terselesaikannya skripsi ini, penulis menyadari bahwa banyak pihak yang telah memberikan arahan, bimbingan dan motivasi kepada penulis. Untuk itu, iringan doa’ dan ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada: 1.

Prof. Dr. H. Imam Suprayogo, selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang

2.

Prof. Drs. Sutiman Bambang Sumitro, SU.D.Sc., selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang.

3.

Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd, selaku Ketua Jurusan Biologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang.

4.

Dr. Evika Sandi Savitri, M.P selaku dosen pembimbing skripsi yang telah sabar memberikan arahan, bimbingan dan meluangkan waktu untuk membimbing penulis sehingga skripsi ini terselesaikan dengan baik.

5.

Dr. Ahmad Barizi, MA selaku Dosen Pembimbing Agama, karena atas bimbingan, pengarahan dan kesabarannya sehingga penulisan skripsi ini dapat terselesaikan.

6.

Dr. Retno Susilowati, M.Si selaku dosen pembimbing akademik yang memberikan masukan dan arahan selama perkuliahan.

7.

Bapak Ibu Dosen Biologi yang telah mengajarkan banyak hal dan memberikan pengetahuan yang luas selama masa kuliah sampai pada penyelesaian skripsi ini.

8.

Kedua orang tuaku Bapak Suwanan dan Ibu Musyarofah tercinta dan yang aku hormati, serta adik Syahril Ahmad yang selalu menjadi kekuatan dalam diri dan do’a bagi setiap langkahku, dengan sepenuh hati memberikan dukungan spiritual maupun materiil, semangat, motivasi, serta nasihat yang penuh dengan keikhlasan, kesabaran, serta kasih sayang yang tiada terbalaskan sehingga penulis bisa mengenyam pendidikan setinggi ini.

9.

Segenap karyawan administrasi dan laboran (Mbak Lil, Mbak Retno, Mas Zulfan, mas Ismail, mas Basyar dan mas Saleh ) terima kasih atas bantuan dan dorongan semangatnya semoga kesuksesan menyertai kalian.

10. Teman-teman seperjuangan KJT Team (Nawafila F, Arum SB, Nuris F dan Aland Y.) terimakasih atas motivasi, kerjasama, kekompakan dan kesabarannya sehingga penelitian ini bisa terselesaikan. 11. Teman-teman Biologi yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu khususnya teman-teman angkatan 2008 yang memberikan motivasi dan dukungan selama kuliah dan penulisan skripsi ini sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini 12. Serta semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, yang memberikan do’a, semangat, dukungan, saran dan pemikiran sehingga penulisan ini menjadi lebih baik dan terselesaikan Tiada kata yang pantas penulis ucapkan selain do’a,“Jazakumullahu

Khoiron Katsiraa”, Semoga Allah SWT memberikan balasan atas bantuan dan pemikirannya. Akhirnya penulis berharap skripsi ini bermanfaat dan dapat menjadi inspirasi bagi pembaca pada umumnya serta menambah khasanah ilmu pengetahuan. Wassalamu’alaikum Wr.WB

Malang, 30 Januari 2013

Penulis

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN ........................................................................ ii HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... iii SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS PENELITIAN .......................... iv MOTTO ........................................................................................................... v HALAMAN PERSEMBAHAN ....................................................................... vi KATA PENGANTAR ...................................................................................... vii DAFTAR ISI .................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ........................................................................................... xi DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xiv ABSTRAK ....................................................................................................... xv BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ............................................................................................ 1.2 Rumusan Masalah ....................................................................................... 1.3 Tujuan......................................................................................................... 1.4 Hipotesis ..................................................................................................... 1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................................... 1.6 Batasan Masalah .........................................................................................

1 6 6 6 7 7

BAB II KAJIAN PUSTAKA 2.1 Deskripsi Tumbuhan Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.)..................... .. 9 2.1.1 Habitat ..................................................................................................12 2.1.2 Kandungan dan Manfaat .......................................................................13 2.2 Pertumbuhan secara Kultur in Vitro............................................................. 15 2.2.1 Prinsip Kultur in Vitro...........................................................................15 2.2.2 Teknik Kultur in Vitro ..........................................................................16 2.2.3 Faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan Kultur in Vitro .....................17 2.2.4 Masalah dalam Kultur in Vitro ..............................................................18 2.3 Media Kultur in Vitro .................................................................................. 19 2.3.1 Kandungan Media Kultur in Vitro .........................................................20 2.3.2 Media MS .............................................................................................22 2.4 Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) ....................................................................... 23 2.4.1 ZPT IBA ...............................................................................................23 2.4.2 Kajian Riset IBA sebagai ZPT pada Media Kultur in Vitro ...................25 2.5 Kultur Kalus ............................................................................................... 27 2.6 Metabolit Sekunder ..................................................................................... 31 2.6.1 Senyawa Stigmasterol ...........................................................................34 2.6.2 Senyawa Sitosterol ................................................................................35 2.6.3 Biosintesis Stigmasterol dan Sitosterol ..................................................36 2.6.4 Produksi Metabolit Sekunder melalui Teknik Kultur in Vitro ................38 2.7 Kromatografi Kolom ................................................................................... 39

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitian .................................................................................. 42 3.2 Waktu dan Tempat ...................................................................................... 43 3.3 Alat dan Bahan............................................................................................ 43 3.3.1 Alat-alat ................................................................................................43 3.3.2 Bahan-bahan .........................................................................................43 3.4 Metode Penelitian ....................................................................................... 44 3.4.1 Sterilisasi Alat.......................................................................................44 3.4.2 Pembuatan Media .................................................................................45 3.4.3 Sterilisasi Media ...................................................................................46 3.4.4 Sterilisasi Ruang Tanam .......................................................................46 3.4.5 Tahap Penanaman .................................................................................46 3.4.6 Uji Metabolit Sekunder .........................................................................50 3.5 Analisis Data............................................................................................... 51 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pengaruh jenis eksplan dan Konsentrasi IBA terhadap pertumbuhan dan Perkembangan Kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) pada ................... 52 4.1.1 Pembentukan Kalus Purwoceng ...........................................................52 4.1.2 Persentase Eksplan Berkalus ................................................................57 4.1.3 Morfologi Kalus....................................................................................61 4.1.2.1 Warna Kalus .....................................................................................61 4.1.2.2 Tekstur Kalus ...................................................................................68 4.1.4 Berat Kalus Purwoceng .........................................................................71 4.2 Pengaruh Perbedaan Eksplan dan Konsentrasi IBA terhadap Kadar Stigmasterol dan Sitosterol Kalus Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.) ... 76 BAB V PENUTUP 5.1 Kesimpulan ................................................................................................. 84 5.2 Saran........................................................................................................... 85 DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 86 LAMPIRAN .................................................................................................... 92 BUKTI SURAT KONSULTASI ................................................................... 105 RIWAYAT HIDUP ....................................................................................... 107

DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Kombinasi perlakuan antara jenis eksplan dan konsentrasi IBA ....... 42 Tabel 4.1 Pengaruh Konsentrasi IBA terhadap hari muncul kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) setelah tanam ................................. 52 Tabel 4.2 Perubahan jenis eksplan dan konsentrasi IBA terhadap persentase pertumbuhan kalus Purwoceng ....................................................... 57 Table 4.3 Perubahan warna kalus pada minggu ke-2 dan ke-8 ........................ 61 Table 4.4 Tekstur kalus yang terbentuk setelah 8 minggu ............................... 70 Table 4.5 Pengaruh Konsentrasi IBA terhadap berat kalus Purwoceng ........... 72 Table 4.6 Pengaruh jenis eksplan dan konsentrasi IBA terhadap kadar stigmasterol dan sitosterol kalus Purwoceng ................................... 77

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1.2 Tahap Pertumbuhan Tanaman Purwoceng ................................. 11 Gambar 2.1.2.a Tanaman Purwoceng ......................................................... 11 Gambar 2.1.2.b Kuncup Bunga Tanaman Purwoceng ................................. 11 Gambar 2.1.2.c Bunga MekarTanaman Purwoceng .................................... 11 Gambar 2.1.2.d Buah Purwoceng ............................................................... 11 Gambar 2.1.2.e Akar Tanaman Purwoceng umur 6 bulan........................... 11 Gambar 2.4.1 Struktur Kimia ZPT IBA ........................................................... 24 Gambar 2.5 Macam Tekstur Kalus (remah dan kompak) ................................. 29 Gambar 2.6 Bagan Pembentukan Metabolit Primer manjadi Sekunder ............ 33 Gambar 2.6.1 Struktur kimia Senyawa Stigmasterol ........................................ 34 Gambar 2.6.2 Struktur Kimia Senyawa Sitosterol............................................ 36 Gambar 2.6.3 Bagan Hubungan Metabolit Primer dan Sekunder (Biosintesis Stigmasterol dan Sitosterol) ........................................................ 37 Gambar 2.7 Alat Kromatografi Kolom ........................................................... 40 Gambar 4.1 Persentase eksplan berkalus Purwoceng ...................................... 58 Gambar 4.2 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan Daun dengan IBA 3 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ..... 63 Gambar 4.3 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan Daun dengan IBA 5 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ...... 63 Gambar 4.4 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan Daun dengan IBA 7 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ...... 64 Gambar 4.5 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan Petiol dengan IBA 3 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ..... 65 Gambar 4.6 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan petiol dengan IBA 5 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ..... 65 Gambar 4.7 Perubahan warna kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) eksplan petiol dengan IBA 7 mg/l pada minggu ke-2 (A) dan ke-8 (B) ..... 65

Gambar 4.8 Tekstur kalus Purwoceng (Pimpinella alpine) pada minggu ke8. (A1) eksplan daun dengan IBA 3 mg/l, (A2) eksplan petiol dengan IBA 3 mg/l. (B1) eksplan daun dengan IBA 5 mg/l, (B2) eksplan petiol dengan IBA 5 mg/l. (C1) eksplan daun dengana IBA 7 mg/l, (B2) eksplan petiol dengan IBA 7 mg/l ...................... 70 Gambar 4.9 Histogram berat kalus Purwoceng eksplan daun dan petiol setelah 8 minggu ........................................................................ 74 Gambar 4.10 Kadar stigmasterol kalus purwoceng ......................................... 78 Gambar 4.11 Grafik kadar sitosterol kalus purwoceng ................................... 79

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Skema kerja penelitian ................................................................ 92 Lampiran 2 Skema kerja tahapan sterilisasi .................................................... 93 Lampiran 3 Komposisi media MS .................................................................. 94 Lampiran 4 Tekstur kalus purwoceng ............................................................ 94 Lampiran 5 Data berat kalus purwoceng ......................................................... 95 Lampiran 6 Hasil analisis variansi kalus purwoceng ....................................... 95 Lampiran 7 Hasil analisis variansi hari muncul kalus purwoceng ................... 95 Lampiran 8 Hari muncul kalus purwoceng ..................................................... 96 Lampiran 9 Persentase eksplan berkalus.......................................................... 96 Lampiran 10 Hasil analisis variansi persentase eksplan berkalus .................... 96 Lampiran 11 Kadar stigmasterol kalus purwoceng ......................................... 97 Lampiran 12 Hasil analisis variansi kadar stigmasterol ................................... 97 Lampiran 13 Kadar sitosterol kalus purwoceng .............................................. 97 Lampiran 14 Hasil analisis variansi kadar sitosterol kalus purwoceng ............ 98 Lampiran 15 Perhitungan persentase eksplan berkalus .................................... 98 Lampiran 16 Gambar hasil penelitian ............................................................. 99 Lampiran 17 Gambar kegiatan penelitian ....................................................... 101 Lampiran 18 Gambar alat dan bahan penelitian ............................................... 102 Lampiran 19 Gambar alat uji kromatografi kolom .......................................... 104

ABSTRAK Lestari, Sri. 08620043. 2013. Pengaruh Jenis Eksplan dan Konsentrasi IBA (Indole Butyric Acid) Terhadap Pertumbuhan dan Kadar Metabolit Sekunder (Stigmasterol dan Sitosterol) Kalus Purwoceng (Pimpinella Alpine Molk.) Pada Media MS. Skripsi, Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang. Pembimbing: Dr.Evika Sandi Savitri, MP. dan Dr. H. Ahmad Barizi, MA. Kata kunci: IBA (Indole Butyric Acid), Kalus, Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.), Sitosterol, Stigmasterol Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.) merupakan tanaman obat Indonesia yang memiliki khasiat sebagai afrodisiak, diuretik dan tonik. Keberadaan tanaman ini telah langka dan dikategorikan hampir punah. Teknik kultur jaringan dapat digunakan sebagai alternatif pembiakan dan sarana produksi metabolit sekunder. Pada penelitian ini digunakan zat pengatur tumbuh IBA (Indole Butyric Acid) dalam media MS untuk induksi kalus dan meningkatkan kadar metabolit sekunder berupa stigmasterol dan sitosterol. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui pengaruh jenis eksplan dan konsentrasi IBA terhadap pertumbuhan dan kadar metabolit sekunder (stigmasterol dan sitosterol) kalus Purwoceng (Pimpinella alpine molk.) pada media MS. Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental dengan rancangan acak lengkap (RAL) faktorial, perlakuan berupa jenis eksplan dan konsentrasi IBA. Eksplan berupa daun dan petiol sedangkan konsentrasi IBA yang digunakan 0 mg/l, 3 mg/l, 5 mg/l dan 7 mg/l. Uji kadar stigmasterol dan sitosterol dilakukan dengan kromatografi kolom. Data penelitian berupa data kualitatif (pengamatan secara visual meliputi hari muncul kalus dan morfologi kalus) dan kuantitatif (berat kalus, kadar sitosterol dan stigmasterol). Data kualitatif dianalisis secara deskriptif sedangkan data kuantitatif dianalisis dengan ANAVA (Analisis variansi) 2 jalur, apabila ada pengaruh maka dilanjutkan dengan DMRT 5%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat pengaruh yang nyata dari jenis eksplan dan konsentrasi IBA terhadap pertumbuhan dan kadar metabolit sekunder kalus Purwoceng. Eksplan daun dengan IBA 3 mg/l merupakan perlakuan terbaik menghasilkan pertumbuhan tercepat 10 hst telah muncul kalus berwarna hijau kekuningan, tekstur kompak, serta persentase pertumbuhan kalus tertinggi daun 88.9% dan petiol 100%. Berat kalus tertinggi eksplan daun 0.157 gram dan petiol 0.103 gram. Eksplan daun pada IBA 3 mg/l menghasilkan kadar stigmasterol dan sitosterol tertinggi yaitu 1242.9 ppm dan 2079.42 ppm, sedangkan eksplan petiol stigmasterol 897,69 ppm dan sitosterol 1225,6 ppm.

ABSTRACT Lestari, Sri. 08620043. 2013. The Effect explants and concentration IBA (Indole Butyric Acid) of Growth and Secondary Metabolite Levels (Stigmasterol and Sitosterol) Callus Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.) In the media MS. Thesis, Biology Department, Science and Technology Faculty of Maulana Malik IbrahimState Islamic University of Malang. Supervisors: Dr.Evika Sandi Savitri, MP. and Dr. H. Ahmad Barizi, MA. Key Words: IBA (Indole Butyric Acid), Callus, Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.), Sitosterol, Stigmasterol Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.) Is a Indonesian medicinal plant that has efficacy as an aphrodisiac, diuretic and tonic. The existence of this plant has been consideredrare and endangered. Tissue culture techniques can be used as an alternative means of propagation and secondary metabolite production. In this study, plant growth regulators IBA is used in the media MS for callus induction and increasing levels of secondary metabolites such as stigmasterol and sitosterol. Intention of this research to know effect of type of explants and concentration IBA of growth and secondary metabolite levels (stigmasterol and sitosterol) callus Purwoceng (Pimpinella alpine Molk.) In the media MS. This study included in the experimental with complete random device (RAL) factorial, treatment in the form of type explants and IBA concentration. Explants are in the form of leaf and petiol while IBA concentrations used were 0 mg/l, 3 mg/l, 5 mg/l and 7 mg/l. Test levels of stigmasterol and sitosterol were performed by using column chromatography. Observational data in the form of qualitative data (visual observation including day appeared callus, callus morphology and percentage of callus) and quantitative (callus weight, levels of sitosterol and stigmasterol). Qualitative data were analyzed by using descriptive analysis while quantitative data were analyzed by ANOVA (analysis of variance) 2 way, if there is influence hace continued with DMRT 5%. The results of research showed that the are real influence of type explant and IBA concentrations of growth and secondary metabolite levels (stigmasterol and sitosterol) callus Purwoceng. Leaf explants with treatment IBA 3 mg/l was the best treatment which produces the fastest growth 10 hst has emerged callus chromatic yellowish green with a compact texture, and the highest percentage of callus growth on leaves 88.9% and petiols 100%. The highest callus weight produced is 0.157 grams for the leaves and petiol 0.103 grams. Leaf explants on IBA 3 mg/l produced the highest levels of stigmasterol and sitosterol. That is 1242.9 and 2079.42 ppm ppm, while petiol explants stigmasterol 897,69 ppm and sitosterol 1225,6 ppm.

‫الملخص‬ ‫لستاري‪ ،‬سري‪ .2013 ، .08620043 .‬تأثير نوع اإلكسبلنتس وتركيز ‪( IBA‬إندول حمض زبدي) على النمو‬

‫ومستويات المستقلب الثانوية (ستيغماسترول وسيتوستيرول) الكالس فرواجونج (فيمفمالى ألفين مولك) في وسائل اإلعالم‬

‫‪ .MS‬أطروحة‪ ،‬قسم األحياء‪ ،‬كلية العلوم والتكنولوجيا التابعة جلامعة اإلسالمية احلكومية موالنا مالك ابراىيم ماالنج‪ .‬املشرف‪ :‬د‪.‬‬ ‫إيفكى ساندي سافيرتي‪ .MP ،‬والدكتور احلاج أمحد بريزي‪.MA ،‬‬ ‫كلمات البحث‪( IBA :‬إندول محض زبدي)‪ ،‬الكالس‪ ،‬فرواجونج (فيمفماىل ألفني مولك) ‪ ،‬سيتوستريول‪ ،‬ستيغماسرتول‬ ‫فرواجونج (فيمفمالى ألفين مولك) ىي النباتات الطبية الندونيسيا اليت لو فعالية باعتباره مدر للبول‪ ،‬ومنشط مثري‬ ‫للشهوة اجلنسية‪ .‬وقد اعترب وجود ىذا النبات النادرة واملهددة باالنقراض‪ .‬وميكن استخدام تقنيات زراعة األنسجة كوسيلة بديلة‬

‫للرتبية وإنتاج املركبات الثانوية‪ .‬يف ىذه الدراسة زيادة استخدام منو النبات املنظمني ‪( IBA‬إندول محض زبدي) يف وسائل اإلعالم‬ ‫لتحريض ‪ MS‬الكالس ومستويات املركبات الثانوية مثل سيتوستريول وستيغماسرتول‪ .‬وكان الغرض من ىذه الدراسة لتحديد تأثري‬ ‫نوع من يزدرع و ‪ IBA‬تركيز على النمو ومستويات املستقلب الثانوية (ستيغماسرتول وسيتوستريول) الكالس فرواجونج (فيمفماىل‬ ‫ألفني مولك) يف املتوسط ‪.MS‬‬ ‫مت تضمني ىذه الدراسة يف دراسة جتريبية عشوائية متاما مع التصميم ( ‪ )RAL‬العالج‪ ،‬مضروب يف شكل اإلكسبلنتس‬ ‫الفرق و تركيز ‪ .ZPT IBA‬وشكل األوراق وإكسبلنتس فيطول بينما تركيزات ‪ IBA‬مستعملة يعين‪،1\mg0 :‬‬ ‫‪ .1\mg1،7\mg1،5\mg3‬إجراء اختبار مستويات من ستيغماسرتول وسيتوستريول باستخدام كروماتوغرافيا العمود‪.‬‬ ‫البيانات البحثية يف شكل البيانات النوعية (املالحظة البصرية ويشمل اليوم يبدو الكالس ومورفولوجيا الكالس) والكمية (الوزن‬ ‫الكالس‪ ،‬ومستويات سيتوستريول وستيغماسرتول) وقد مت حتليل البيانات النوعية من البيانات الكمية وحتليل وصفي من قبل أنافا‬ ‫(حتليل التباين) ‪ 2‬املسار‪ ،‬إذا أي تأثري مث تليها اختبار ‪.٪5DMRT‬‬ ‫‪ IBA‬تركيز على النمو ومستويات املستقلب الثانوي‬ ‫أظهرت النتائج أن ىناك تأثري كبري على نوع وإكسبلنتس‬ ‫فرواجونج الكالس‪ .‬كان إكسبلنتس رقة مع ‪ 1\mg3 IBA‬أفضل عالج اليت تنتج بأسرع ‪ HST 10‬دشبذ النمو برزت مع‬ ‫‪ % 88.9‬و فيطول ‪ .%100‬أعلى وزن‬ ‫لون أخضر مصفر‪ ،‬وهلا نسيج املدجمة‪ ،‬وكذلك أعلى نسبة للنمو الكالس من أوراق‬ ‫الكالس من أوراق إكسبلنتس ‪0،157‬غرام و فيطول ‪ 0،103‬غرام‪ .‬إكسبلنتس أوراق على ‪ 1\mg3 IBA‬تنتج أعلى‬ ‫مستويات ستيغماسرتول وسيتوستريول ىي ‪ ppm1242.9‬و ‪ ppm2079،42‬وجزء يف املليون جزء يف املليون‪ ،‬يف حني‬ ‫إكسبلنتس جزء يف املليون ستيغماسرتول فيطول‪ ppm897.69‬جزء يف املليون سيتوستريول و‪.ppm 1225،6‬‬