TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG PAYUK (ACALYPHA INDICA L.) MEMPERPANJANG WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI DARAH MENCIT (MUS MUSCULUS) JANTAN GALUR BALB/C
NI MADE SUMETRI NIM 1390761001
PROGRAM MAGISTER PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2015 i
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG PAYUK (ACALYPHA INDICA L.) MEMPERPANJANG WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI DARAH MENCIT (MUS MUSCULUS) JANTAN GALUR BALB/C
Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister pada Program Magister, Program Studi Biomedik, Program Pascasarjana Universitas Udayana
NI MADE SUMETRI NIM 1390761001
PROGRAM MAGISTER PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2015
ii
Lembar Persetujuan TESIS INI TELAH DISETUJUI TANGGAL JUNI 2015
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Prof. dr. IGM. Aman, Sp.FK
Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes
Mengetahui
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana Universitas Udayana
Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana
Dr.dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih., M.Sc, Sp.GK Sudewi,Sp.S(K) NIP. 195805211985031002
iii
Prof.Dr.dr.A.A.Raka NIP. 195902151985102001
Tesis ini Telah Diuji pada Tanggal 12 Juni 2015
Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK. Rektor Universitas Udayana, No. 1585/UN 14.4/HK/2015 Tanggal 4 Juni 2015
Ketua Sekretaris Anggota
: Prof.dr.I Gusti Made Aman, Sp.Fk : Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes : 1. Prof.Dr.dr. Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And 2. Prof.Dr.dr.Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro 3. Dr.dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro
iv
KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN UNIVERSITAS UDAYANA PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA Alamat : Sekretariat Pascasarjana Universitas Udayana.-Jalan Panglima Sudirman Denpasar,Bali Tel. 0361-7475076, 7425201.Fax 0361-246656, 223797.email
[email protected]
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Nama
:
Ni Made Sumetri
NIM
:
1390761001
Program Studi :
Magister Ilmu Biomedik
Judul
Pemberian Ekstrak Etanol Daun Tumpang Payuk (Acalypha Indica L.) Memperpanjang Waktu Perdarahan dan Koagulasi Darah Mencit (Mus Musculus) Jantan Galur BALB/C
:
Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah Tesis ini bebas plagiat. Apabila di kemudian hari terbukti terdapat plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 tahun 2010 dan Peraturan Perundang-undangan yang berlaku.
Denpasar, 6 Juni 2015 Yang membuat pernyataan,
(Ni Made Sumetri) v
UCAPAN TERIMA KASIH
Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji dan syukur kehadapan Ida Sang Hyang Widi Wasa, Tuhan Yang Maha Esa karena berkat karunia-Nya, penulis dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul “Pemberian Ekstrak Etanol Daun Tumpang payuk (Acalypha indica L.) Memperpanjang Waktu perdarahan
dan
Koagulasi
Darah
Mencit
(Mus
musculus)
Jantan
Galur
Balb/c”.Penelitian ini disusun sebagai syarat untuk meraih gelar magister pada Program Pasca Sarjana Ilmu Biomedis Kekhususan Ilmu Kedokteran Dasar Bidang Farmakologi Universitas Udayana.Penulis telah banyak dibantu oleh berbagai pihak dalam penyelesaian tesis ini. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Prof. Dr. dr.I Ketut Suastika, Sp.PD (KEMD) selaku rektor Universitas Udayana. 2. Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S(K) selaku Direktur Program PascaSarjana Universitas Udayana. 3. Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp. GK selaku Ketua Program Studi Pasca Sarjana Biomedis Universitas Udayana. 4. Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK selaku pembimbing I yang telahmemberi banyak masukan, saran ilmiah serta dorongan 5. Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes selaku pembimbing II yang telah memberi banyak bimbingan, saran ilmiah dan motivasi
vi
6. Prof. Dr. dr. Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And selaku penguji tesis yang telah banyak memberi masukan. 7. Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro selaku penguji tesis yang telah banyakmemberi masukan. 8. Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro selaku penguji tesis yang telah banyak memberimasukan. 9. dr. I GMG. Surya C. Trapika, M.Sc, selaku Ketua Bagian Farmakologi atas ijin yang diberikan kepada penulis untuk melakukan penelitian di Laboratorium hewan bagian Farmakologi Universitas Udayana. 10.IGede Wiranata, yang telahmembantu penulis selama penelitian. 11. Dosen-dosen lain yang telah banyak memberikan saran selama penulisan tesis 12. Keluarga tercinta yang dengan kasih sayang selalu mendukung penulis dalam menyelesaikan pendidikan ini 13. Rekan-rekan yang telah banyak memberi masukan selama proses penulisan tesis berlangsung. Penulis menyadari bahwa tesis ini masih jauh dari kesempurnaan, maka kritik dan saran sangat diharapkan demi kesempurnaan tesis ini. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi banyak pihak. Denpasar, 7 Mei 2015
Penulis vii
ABSTRAK PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG PAYUK (ACALYPHA INDICA L.) MEMPERPANJANG WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI DARAH MENCIT (MUS MUSCULUS) JANTAN GALUR BALB/C Obat yang tersedia untuk thrombosis cukup banyak namun karena efek samping yang ditimbulkan menjadi pertimbangan untuk mencari alternatif yang lebih murah, terjangkau dan efek samping yang relatif kecil. Tumpang payuk (Acalypha indica L.) merupakan golongan tumbuhan dalam family Euphorbiaceae.Ekstrak etanol daun Tumpang payuk mengandung saponin, fenol, steroid dan flavonoid.Flavonoid terutama quercetin diduga dapat mengatasi gangguan pada pembuluh darah seperti thrombosis yang merupakan salah satu penyebab stroke iskemik.Thrombosis merupakan ketidaknormalan dari hemostasis.Parameter hemostsis yang dapat diukur adalah perpanjangan waktu perdarahan dan koagulasi.Tujuan penelitian ini adalah untuk membuktikan pemberian ekstrak etanol daun Tumpang payuk (Acalypha indica L.) dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit. Penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan randomized pretest-posttest control group designyangdilaksanakan di Laboratory Animal Unit bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Udayana.Penelitian inidilakukan selama 14 hari. Sampel yang digunakan sebanyak 18 ekor mencit jantan galur balb/c dan dibagi menjadi 2 kelompok yaitu kelompok kontrol (P0) diberi aquades dan kelompok perlakuan (P1) diberi ekstrak etanol daun Tumpang payuk 200mg/kgBB. Hasil penelitian menunjukkan rerata waktu perdarahan kelompok kontrol 78,68,8 detik menjadi 90,819,2 detik (p>0,05) dan waktu koagulasi 27,111,9 detik menjadi 31,58,4 detik (p>0,05) sedangkan kelompok perlakuan mengalami peningkatan dari 84,012,0 detik menjadi 465,666,0 detik (p<0,05) dan waktu koagulasi 39,615,0 detik menjadi 140,440,2 detik (p<0,05). Ekstrak etanol Acalypha indica L. dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit. Penelitian ini menyimpulkan ekstrak etanol daun Tumpang payuk pada dosis 200mg/kgBB dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit jantan galur balb/c. Disarankan penelitian lebih lanjut untuk mencari konsentrasi optimal terhadap peningkatan waktu perdarahan dan koagulasi. Kata kunci : Ekstrak etanol daun Tumpang payuk, waktu perdarahan dan koagulasi. viii
ABSTRACT ACALYPHA INDICA L. LEAVES EXTRACT PROLONG BLEEDING TIME AND BLOOD COAGULATION IN MALE MICE (Mus musculus) BALB/C A number of medicine for thrombosis are available. However, by several side effect due to the treatment, there are a consideration to find an alternative treatment that is cheaper and lower side effect. Tumpang payuk ( Acalypha indica L.) is a plant in the family of Euphorbiaceae. Ethanol extract of Acalypha indica L. is containing saponin, phenol, steroid and flavonoid. Flavonoid especially quercetin is though to have a beneficial in the treatment of vascular disorder such as thrombosis, one of the cause of ischemic stroke. Thrombosis is an abnormality of hemostasis. Parameter of hemostasis that measurable are the prolongation of bleeding time and coagulation. The purpose of this study is to prove that the ethanol extract of Acalypha indicaL. are beneficial to prolong bleeding and coagulation time of mice. This study was a trueexperimental using randomized pre-test post-test control group design performed in the Laboratory Animal Unit, in Departement of Pharmacology, Faculty of Medicine University of Udayana. Study carried out for 14 days. Samples using in this study were 18 male mice in strain of balb/c, divided into 2 groups. The control groups (K) received aquadest and the treatment groups (P) received ethanol extract of Acalypha indica L. in dose of 200mg/kgbw. Result shown that the mean of bleeding time of control group78,68,8 second to 90,819,2 second (p>0,05) and coagulation time 27,111,9 second to 31,58,4 second (p>0,05). The treatment group has increased from 84,011,7 second to 465,566,1 second (p<0,05) and the mean of coagulation time has increased from 39,714,7 second to 140,240,4 detik (p<0,05). This study significantly found that the ethanol extract of Acalypha indica L. able to prolong bleeding and coagulation time in mice blood. The study concluded that the ethanol extract of Tumpang payuk in dose of 200mg/kgbw could prolong bleeding time and blood coagulation in male mice strain of balb/c. Further study is needed to find out the optimal concentration to prolong bleeding and coagulation time.
Keywords : ethanol extract of Acalypha indica, bleeding time, coagulation time
ix
DAFTAR ISI
SAMPUL DALAM …………………………………………………………
i
PRASYARAT GELAR ……………………………………………………..
ii
LEMBAR PENGESAHAN …………………………………………………
iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI …………………………………………
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT ………………………………
v
UCAPAN TERIMA KASIH …………………………………………………
vi
ABSTRAK …………………………………………………………………...
viii
ABSTRACT ………………………………………………………………….
ix
DAFTAR ISI …………………………………………………………………
x
DAFTAR GAMBAR
……………………………………………
xiv
DAFTAR TABEL
……………………………………………
xv
DAFTAR SINGKATAN
……………………………………………
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
……………………………………………
xvii
BAB I
PENDAHULUAN …………………………………………… 1.1
Latar belakang ……………………………………..
1
1.2
Rumusan masalah …………………………………
5
1.3
Tujuan Penelitian ………………………………….
5
1.4
BAB II
1
1.3.1
Tujuan umum …………………………...
6
1.3.2
Tujuan khusus …………………………..
6
Manfaat Penelitian ………………………………… 1.4.1
Manfaat ilmiah …………………………..
6
1.4.2
Manfaat aplikasi …………………………
7
KAJIAN PUSTAKA ………………………………………... 2.1
6
8
Tumpang Payuk …………………………………..
8
2.1.1
Deskripsi tanaman ………………………
8
2.1.2
Klasifikasi tumpang payuk………………
9
x
2.1.3
Pemakaian empiris……………………….
10
2.1.4
Kandungan kimia………………………..
10
Trombosis ……………………………………………
11
2.2.1
Stroke iskemik……………………………
11
2.3
Fisiologi Pembekuan Darah ……………………….
12
2.4
Fungsi Trombosit…………………………………..
15
2.2
2.4.1
2.4.2
BAB IV
terhadap cedera vaskuler …………………
17
Reaksi pelepasan trombosit ……………..
18
2.5
Flavonoid dan Trombosit………………………….
19
2.6
Tumpang Payuk dan Trombosis ………………….
20
2.7
Hewan Percobaan………………………………….
21
2.8 BAB III
Adhesi dan agregasi trombosit sebagai respon
2.7.1
Anatomi ………………………………….
22
2.7.2
Fisiologi …………………………………..
23
2.7.3
Perilaku …………………………………...
23
Ekstrak ……………………………..
KERANGKA
BERPIKIR,
KONSEP,
24 DAN
HIPOTESIS
PENELITIAN ……………………………………………
25
3.1
Kerangka berpikir ………………………………….
25
3.2
Konsep penelitian ………………………………….
27
3.3
Hipotesis ……………………………………………
27
METODE PENELITIAN ……………………………………
28
4.1 Rancangan penelitian ……………………………..
28
4.2 Tempat dan waktu penelitian ..……………………
29
4.3 Populasi dan Sampel ..……………………………..
29
4.3.1
Perhitungan besar sampel penelitian …….
29
4.3.2
Kriteria sampel ……………………………
30
4.4 Variabel Penelitian ………………………………..
xi
31
4.5 Hubungan Antar Variabel ………………………..
32
4.6 Definisi Operasional Variabel …………………….
32
4.7 Alat, Bahan dan Hewan Percobaan ………………
33
4.7.1
Alat ……………………………………….
33
4.7.2
Bahan …………………………………….
33
4.7.3
Hewan percobaan ………………………..
34
4.8 Prosedur Penelitian ……………………………….
BAB V
34
4.8.1
Penetapan dosis ………………………….
34
4.8.2
Preparasi Simplisia ………………………
34
4.8.3
Ekstraksi ………………………………….
35
4.8.4
Identifikasi flavonoid dalam ekstrak …….
35
4.8.5
Prosedur penelitian , uji waktu perdarahan, uji waktu koagulasi ………………………
36
4.8.6
Alur penelitian ……………………………
39
4.8.7
Analisis data ………………………………
40
HASIL PENELITIAN ……………………………………………
41
5.1 Uji Normalisasi Data ……………………………………….
41
5.2 Uji Homogenitas Data ……………………………………...
42
5.3 Analisis Uji Waktu Perdarahan …………………………….
42
5.3.1
Uji komparabilitas ………………………... 5.3.1.1
Uji perbandingan waktu perdarahan sebelum dan sesudah perlakuan…
5.3.1.2
42
42
Uji perbandingan waktu perdarahan antar kelompok sebelum perlakuan (pretest) ………………………
5.3.1.3
43
Uji efek pemberian perlakuan antar kelompok (posttest) ……………
xii
44
5.4 Analisis Uji Waktu Koagulasi ……………………………
45
Uji komparabilitas ………………………
45
5.4.1
5.4.1.1 Uji perbandingan waktu koagulasi sebelum dan sesudah perlakuan ..
45
5.4.1.2 Uji perbandingan antar kelompok sebelumdiberikanperlakuan (pretest) 46 5.4.1.3 Uji
efek
pemberian
perlakuan
(posttest)………………………….
BAB VI
47
PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN ………………………..
49
6.1 Subyek Penelitian ……………………………………........
49
6.2 Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian ……. ..
49
6.3 Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Acalypha Indica Terhadap Waktu dan Koagulasi ………………………. …………….
50
SIMPULAN DAN SARAN ……………………………………...
53
7.1 Simpulan ……………………………………………………
53
7.2 Saran ………………………………………………………..
53
DAFTAR PUSTAKA ………………………………………………………..
54
LAMPIRAN – LAMPIRAN …………………………………………………
60
BAB VII
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman 2.1 Tanaman Tumpang Payuk……………………………………….
9
2.2 Antitrombosis……………………………………………………..
14
2.3 Protrombosis………………………………………………………
15
2.4 Fungsi trombosit………………………………………………….
16
2.5 Adhesi trombosit ………………………………………………..
17
2.6 Sintesis prostasiklin dan tromboksan……………………………
19
2.7 Mencit……………………………………………………………
23
3.1 Konsep Penelitian………………………………………………
27
4.1 Rancangan Penelitian…………………………………………….
28
4.2 Alur penelitian…………………………………………………...
39
5.1 Perbandingan Waktu Perdarahan Antara Kelompok Kontrol Dengan Kelompok Perlakuan ……………………………………
45
5.2 Perbandingan Koagulasi Antara Kelompok Kontrol Dengan Kelompok Perlakuan ……………………………………………..
xiv
48
DAFTAR TABEL
5.1
Hasil Uji Normalitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi Sebelum dan Sesudah Perlakuan ………………………………….
5.2
41
Homogenitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi Antar Kelompok Perlakuan ………………………………………………
42
5.3
Perbandingan Waktu Perdarahan Sebelum dan Sesudah Perlakuan….
43
5.4
Perbedaan Rerata Waktu Perdarahan Antar Kelompok Sebelum dan Setelah Diberikan Perlakuan …………………………………………..
44
5.5
Perbandingan Koagulasi Sebelum dan Sesudah Pemberian Perlakuan ..
46
5.6
Perbedaan Rerata Koagulasi Antar Kelompok Sebelum dan Setelah Diberikan Perlakuan ……………………………………………………
xv
47
DAFTAR SINGKATAN
ADP
: Adenosin Diposfat
C AMP
: cyclic Adenosinmonophosfat
TXA2
: Tromboksan A2
TXB2
: Tromboksan B2
t-PA
: tissue Plasminogen Aktivator
PGI2
: Prostacyclin
NO
: Nitrit Oksida
AT
: Antitrombin
vWF
: von Willebrand Faktor
Gp
: Glukoprotein
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
: Keterangam kelaikan Etik
Lampiran 2
: Hasil determinasi tanaman Tumpang Payuk
Lampiran 3
: Surat keterangan hasil laboratorium
Lampiran 4
: Hasil analisis fitokimia ekstrak Acalypha indica
Lampiran 5
: Profil Kromatogram ekstrak Acalypha indica
Lampiran 6
: Uji waktu perdarahan
Lampiran 7
: Uji waktu koagulasi
Lampiran 8
: Uji Normalitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi
Lampiran9
: Uji t-independent Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi antar Perlakuan
Lampiran 10
:Uji t-paired Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi pada Masing-masing Kelompok Perlakuan antara Sebelum dengan Sesudah Perlakuan
xvii
