Diagnostiek en Casuïstiek van mycotoxinen:
Diagnostiek en Casuïstiek van mycotoxinen: • Monstername bij praktijk-onderzoek • Mycotoxinen: overzicht eigenschappen en klinisch beeld • Casuïstiek 5 x
Monstername: Bemonstering grondstoffen: - monstername moeilijk (hot spots) - plantaardig gemaskeerde mycotoxinen aanwezig Bemonstering voer uit de fabriek: - voldoet aan de gestelde eisen (gemeten met HPLC) Bemonstering voer uit silo: - na langdurige opslag bacteriële (de-)conjugatie en/of afbraak mogelijk Bemonstering voer uit de voerbak: -Bij droogvoer: voercircuit daarbij tevens bemonsterd -Bij brij: je bemonstert alle grondstoffen en totale installatie in een keer Bemonstering losse grondstoffen op het bedrijf: niet onbelangrijk !
Monstername: Bemonstering aan het dier (bloed): - je hebt te maken met ingewikkelde farmacokinetiek - je kunt relevante monsters nemen gekoppeld aan individuen met kliniek - lab’s zijn i.h.a. minder ingericht voor bepalingen in bloed - bloed: andere monstervoorbereiding en extractietechnieken dan voor voer.
Conclusies m.b.t. monstername bij praktijkonderzoek: Bemonstering grondstoffen en voeders: - het werkelijke gehalte kan hoger zijn dan gemeten - tijdens opslag (in silo’s) kunnen de gehalten nog stijgen - je hebt geen inzicht in combinaties van mycotoxinen Bemonstering bloed: - rekening houden met t1/2 en MRT - veelal een route intra-uterien of via de melk
Diagnostiek en Casuïstiek van mycotoxinen: • Monstername bij praktijk-onderzoek • Mycotoxinen: overzicht eigenschappen en klinisch beeld • Casuïstiek 5 x
Casuistiek: enkele eigenschappen van belangrijke mycotoxinen, een grove benadering:
Belangrijkste ‘verdachten’ bij: •
Staartnecrose: Ergot-alkaloiden en OTA
•
Gezwollen vulva big: Zea en Alfa-ZOL
•
Prolaps ani vleesvarken: Zea en Alfa-ZOL
•
Te vroeg opuieren / gezwollen kling: Zea en Alfa-ZOL
•
Slechte melkgift: Ergot-alkaloiden en Zea / Alfa-ZOL
•
Weinig vitale pasgeboren biggen: DON / ZEA
•
Slechte voeropname / lage weerstand: DON / T2
& ""!$0" +! !!& !$ /"&". !! &! $! & 5
Diagnostiek en Casuïstiek van mycotoxinen: • Monstername bij praktijk-onderzoek • Mycotoxinen: overzicht eigenschappen en klinisch beeld • Casuïstiek 5 x
Casuïstiek 1: zeugen • Klant (300 zeugen) van een ander mengvoerbedrijf meldt zich bij de Heus. • Klachten o.a.: - Opgeuierde zeugen al 2 wk voor het werpen met gezwollen klingen. - Acute PIA en ‘brulhoest’ 8 wk na aanvoer gelten. - Oornecrose gespeende biggen. Handelaar neemt veel biggen niet mee. - Teveel zwak geboren biggen. Circulatie PRRS ?
Vervolg casuïstiek 1:
Vervolg casuïstiek 1: • Juni 2014, bedrijf met 300 zeugen, voerleverancier X. Klacht: opgeuierde zeugen al 2 wk voor het werpen met gezwollen klingen.
+-4$$!'$ $"!4$$!'$
""4$
Vervolg Casuïstiek 1: biggen DON en ZEA pasgeboren biggen: • Bij pasgeboren biggen (bloedonderzoek in het kader van biestscan) zonder klinische symptomen zie je de volgende waarden:
&$&!$"% ! ,!!$$ ,!4 -$! ,$ $!,!=:A> G8 ! !0 $! & "$! !$ 5
Casuïstiek 2: zwarte staartjes bij biggen • Bedrijf met volledig zeugenvoer van mengvoerbedrijf Y • zwarte staartjes bij pasgeboren biggen • Het probleem speelt al gedurende langere tijd • Bloedonderzoek pasgeboren biggen met staartnecrose • Onderzoek van het stro
Casuïstiek 2: uitslag bloedonderzoek biggen:
Casuïstiek 2: onderzoek stro:
"$ ""$! " ! +!!! %6"&%#"&%7 !,"$ !-0 0 !5 "!%&$! % " 5
Casuïstiek 3: vleesvarkens • April 2015, bedrijf met 4500 vv, compleet voer. Klacht: prolaps ani eerste weken na opleg. $ % ! %&!"$ -$3! 5& $ & !6,$%7 @ !#$" #%5
, %4 9 "%"&% 9$%&",$ ,"$ )!$ !
Conclusies casuïstiek 1 t/m 3 • Je kunt niet zomaar van de normaalwaarden van het lab uitgaan. • Beter zelf een databank opzetten en die koppelen aan kliniek. • Gebruik bij voorkeur 1 lab opdat telkens dezelfde extractietechnieken en testen gebruikt worden.
Casuistiek 4: proef bij vv-proefbedrijf
Casuïstiek 4: onderzoeksvraag en opzet: Welke waarden vinden we in serum bij een ELISA op DON en ZEA ? Heeft een mycotoxine belasting invloed op: - Groei - Leverenzymen - de weerstandsopbouw bij vleesvarkens Weerstandsopbouw => - vaccinatie op 17 en 22 weken met Porcilis Porcoli DF: titerbepalingen - serologisch onderzoek naar enkele endemisch voorkomende kiemen
Casuïstiek 4: Uitslag bloedonderzoek ELISA mycotoxinen: • Voor [ ZEA+++Zeranol] <0,07 g/l (norm < 5,00 g/l ) • Voor [DON +15Ac-DON] in g/l: zie grafiek (norm < 20,0 g/l )
Casuïstiek 4: Uitslag Spectrum 380 methodiek:
Casuïstiek 4: gewichtsverloop in de 4 hokken:
Casuïstiek 4: Lever enzymen verhoogd na opname mycotoxinen: F=3>=
""%&+
Casuïstiek 4: Reactie op booster vaccinatie Porcilis Porcoli DF: "! +% 4 !,! ,$% !0 ! % ! !&5
Casuïstiek 4: Serologie in de vier groepen:
Conclusie: geen verschillen gevonden tenzij voor APP:
Casuïstiek 4: mycotoxinen belastingsproef en immuunrespons OMP 9 %$" " 0 $-$! ! /"&". !! $"#!5 F=3=?
>@3A
>?3A >>3A >=3A E3A D3A C3A B3A
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? > > > > > > > > > > > > > > > > > >
Casuïstiek 4: conclusies •
geen verschil in vaccin respons in de met Mycotoxinen belaste groep
•
APP titers zijn lager in de met Mycotoxinen belaste groep (opbouw immuniteit?)
•
Geen verschil tussen beide groepen in de antilichaam respons op PRRS en PCV2
•
in de met Mycotoxinen belaste groep hadden meer dieren een hoge AST waardes wat wijst op belasting/aandoening van de lever
•
Algemeen: Mycotoxinen hebben een invloed op het immuunapparaat – hier was het verschil in Mycotoxinen gehaltes tussen de belaste- en controle groep niet groot, toch lijkt er een verschil.
Casuïstiek 5: bedrijf met 560 zeugen • • • • • •
Q2 2014 chronisch te slechte tomen. Meer DG biggen en minder vitale zeugen Toename afwijkingen biggen bij de geboorte en korte tijd erna: Meer rood gezwollen vulva’s bij geltjes Veel meer staartnecrose in de eerste levensweek Vermoeden invloed Mycotoxinen In schema’s (vaccinatie en voeding) en management geen veranderingen
•
Plan: bloedonderzoek van zeugen die probleem tomen hadden in de kraamstal om rol infecties uit te sluiten of evt. aan te tomen
Casuïstiek 5: zeugen: traag en mindere tomen 2014
Casuïstiek 5: vervolg • Geen infectieuze oorzaak kunnen vinden voor het probleem. • Onderzoek gal van 3 slachtzeugen die probleem tomen hadden. • Elisa en immuno-affiniteitschromatografie
Casuïstiek 5: uitslagen gal
Casuïstiek 5: vermoeden mycotoxine • DON en Zearalenone kunnen deze symptomen veroorzaken. • Daarop toxine binder in de zeugenvoeders (Mycofix) • Varkenshouder zag na 3-4 weken geen verschijnselen meer in de kraamstal.
Casuïstiek 5: diagnostiek zieke zeug / slappe biggen • Goede probleem definitie • Klinische inspectie • Aanvullend onderzoek infectieziekten – 5 goede tomen – 5 slechte tomen • Aanvullend onderzoek Mycotoxinen – 5 goede tomen – 5 slechte tomen
Dank voor uw aandacht!
