MAGYAR BORKÖNYV CODEX VINI HUNGARICI BOROK VIZSGÁLATA

MAGYAR BORKÖNYV

CODEX VINI HUNGARICI

BOROK VIZSGÁLATA

Magyar Borkönyv - Borok vizsgálata fejezet

MAGYAR BORKÖNYV BOROK VIZSGÁLATA Tartalomjegyzék 1. Kémiai vizsgálatok 1. A sűrűség és a relativ sűrűség meghatározása 20 °C hőmérsékleten

7

2. A must, a sűrített must és finomított mustsűrítmény cukortartalmának

28

meghatározása

refraktometriás módszerrel

3. Térfogatszázalékban meghatározott alkoholtartalom

52

4. Az összes extrakttartalom meghatározása

92

5. A redukálócukor-tartalom meghatározása

95

6.A szacharóz-tartalom meghatározása

103

7. A glükóz- és a fruktóztartalom meghatározása

107

8. A must, mustsűrítmény, finomított mustsűrítmény és bor javításának kimutatása a

112

deutériumtartalom mágneses magrezonanciás mérésével (SNIF-NMR/RMN-FINS) 9. A hamu meghatározása

128

10. A hamu lúgosságának meghatározása

130

11. A kloridtartalom meghatározása

131

12. A szulfáttartalom meghatározása

135

13. Az összes savtartalom meghatározása

138

14.Az iIllósav-tartalom meghatározása

142

15. A nem illó savtartalom meghatározása

147

16.A borkősavtartalom meghatározása

148

17.A citromsavtartalom meghatározása

155

18. A tejsavtartalom meghatározása

159

19. Az L-almasav-tartalom meghatározása

167

20. A D-almasav-tartalom meghatározása

171

21. Az összes almasavtartalom meghatározása

177

22. A szorbinsavtartalom meghatározása

180

23. Az L-aszkorbinsav-tartalom meghatározása

186

24.A pH meghatározása

193

25. A kén-dioxid-tartalom meghatározása

196

26. A nátriumtartalom meghatározása

208


27. A káliumtartalom meghatározása

212

28. A magnéziumtartalom meghatározása

217

29. A kalciumtartalom meghatározása

219

30. A vastartalom meghatározása

221

31. A réztartalom meghatározása

226

32.A kadmiumtartalom meghatározása

229

33. Az ezüsttartalom meghatározása

232

34. A cinktartalom meghatározása

234

35. Az ólomtartalom meghatározása

236

36. A fluoridtartalom meghatározása

238

37. A szén-dioxid-tartalom meghatározása

242

38. A cianidszármazékok meghatározása

249

39. Az allil-izotiocionát-tartalom meghatározása

252

40.A színjellemzők meghatározása

255

41. A Folin-Ciocalteu- index meghatározása

269

42. Különleges analitikai módszerek finomított mustsűrítmény esetén

272

(a) Az összes kationtartalom meghatározása

272

(b) A vezetőképesség meghatározása

274

(c) A hidroximetil-furfurol-tartalom (HMF) meghatározása

276

(d) A nehézfém-tartalom meghatározása

280

(e) Az etil-alkohol-tartalom kémiai meghatározása

282

(f) A mezo-inozit-, szcillo-inozit- és szacharóztartalom meghatározása

285

43. A borban lévő víztartalom 18O/16O izotóparányának meghatározása

289

44. Az etil-karbamát meghatározása borban: gázkromatográfiás/tömegspektrometriás

292

módszert alkalmazó szelektív meghatározás 2 . Mikrobiológiai vizsgálatok 1. Általános vizsgálati eljárások

307

3. Egyéb vizsgálatok 1. Borok palacállóságának megállapítása

324

Melléklet: Borüledékek azonosítása

7

4


MAGYAR BORKÖNYV

CODEX VINI HUNGARICI

BOROK VIZSGÁLATA 1. KÉMIAI VIZSGÁLATOK

5


6


MAGYAR BORKÖNYV

BOROK VIZSGÁLATA 1. KÉMIAI VIZSGÁLATOK

1.

A

SŰRŰSÉG

ÉS

A

RELATIV

SŰRŰSÉG

MEGHATÁROZÁSA

20

°C

HŐMÉRSÉKLETEN1 1.

MEGHATÁROZÁSOK A sűrűség a bor vagy a must tömege térfogategységre számítva 20 °C hőmérsékleten, g/ml-ben kifejezve, és ρ 20 °C -val jelölve. A relativ sűrűség (vagy a 20 °C/20 °C sűrűség) egy bizonyos térfogatú 20 °C hőmérsékletű bor vagy must sűrűségének és az ugyanolyan térfogatú, ugyanolyan hőmérsékletű víz sűrűségének tizedes törttel kifejezett aránya 20 °C hőmérsékleten. 20 o C Jele a d 20 . o C

2.

A MÓDSZEREK ELVE A sűrűség és a relatív sűrűség 20 °C hőmérsékleten az alábbiak szerint határozható meg: REFERENCIA-MÓDSZER: meghatározás piknométerrel, SZOKÁSOS MÓDSZER: meghatározás areométerel vagy hidrosztatikus mérleggel. Megjegyzés: Nagyon pontos mérés céljából a sűrűséget korrigálni kell a kén-dioxid-tartalom miatt az alábbi összefüggéssel: ρ20 °C = ρ'20 °C - 0,0006 x S

1

A 2676/1990 / EK rendelet mellékletének 1. módszere


ahol ρ20 °C = a korrigált sűrűség ρ'20 °C = a megállapított sűrűség S = az összes kén-dioxid mennyisége, g/l-ben. 3.

A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE Ha a bor vagy a must jelentős mennyiségű szén-dioxidot tartalmaz, ennek nagy részét távolítsuk el úgy, hogy 250 ml bort egy 1 literes palackban kevergetünk, vagy csökkentett nyomáson mintegy 2 g vattán átszűrjük.

4.

REFERENCIA-MÓDSZER

4.1.

Eszközök Normál laboratóriumi berendezések, valamint az alábbiak :

4.1.1.

Mintegy 100 ml térfogatú pirexüvegből készült piknométer2, normálcsiszolatos csatlakozású, 10-30 °C-ig tizedfokonként kalibrált hőmérővel (1. ábra). A hőmérőnek hitelesítettnek kell lennie.

1. ábra Piknométer A piknométer egy 25 mm hosszúságú és legfeljebb 1 mm belső átmérőjű oldalcsővel van ellátva, amely kúpos csiszolt csatlakozásban végződik. Ezt az 2

Bármilyen ezzel megegyező jellemzőjű piknométer használható.

8


oldalcsövet egy kúpos csiszolt üveg csatlakozócsőből álló olyan ‘edényzáróval’ lehet lezárni, amely egy kivezető szakaszban végződik. Ez az elzáró tágulási kamraként szolgál. A piknométer mindkét csiszolatát nagyon gondosan kell elkészíteni. 4.1.2.

Táraként a leírt piknométerhez hasonló, ugyanolyan külső formájú (legfeljebb 1 ml-es tűréssel) és ugyanolyan tömegű edényt kell alkalmazni, mint a piknométer, 1,01 sűrüségű folyadékkal (nátrium-klorid 2,0% ( m/v)- os oldata) feltöltve. Egy hőszigetelő edény, amely pontosan illeszkedik a piknométerre.

4.1.3.

Egy 300 g terhelhetőségű és 0,1 mg érzékenységű kétkarú mérleg, vagy egy 200 g terhelhetőségű és 0,1 mg érzékenységű egykarú mérleg.

4.2.

A piknométer kalibrálása A piknométer kalibrálásához az alábbi mennyiségek meghatározása szükséges: — az üres piknométer tárája,

4.2.1.

—

a piknométer térfogata 20 °C hőmérsékleten,

—

a vízzel töltött piknométer tömege 20 °C hőmérsékleten.

Kalibrálás kétkarú mérleggel Helyezzük a táraedényt a mérleg bal serpenyőjébe, a tiszta és száraz piknométert pedig a jobb oldali serpenyőbe az „edényzáróval” felszerelve. Állítsuk be a mérleg egyensúlyát (p gramm). Szobahőmérsékleten gondosan töltsük fel a piknométert desztillált vízzel, illesszük rá a hőmérőt; majd gondosan töröljük szárazra a piknométert, és helyezzük a hőszigetelt edénybe. A tartály ide-oda forgatásával keverjük mindaddig, ameddig a hőmérőn leolvasható érték állandóvá válik. Ezután pontosan állítsuk be a szintet az oldalcsövön. Töröljük szárazra az oldalcsövet, és helyezzük fel az „edényzárót”; olvassuk le gondosan a t °C hőmérsékletet, szükség szerint a hőmérsékletskála

9


pontatlanságával korrigálva. Mérjük meg a vízzel töltött piknométert, és jegyezzük fel azt a p’ tömeget grammokban, amely az egyensúly létrehozásához szükséges. Számítás3 Az üres piknométer tárázása: az üres piknométer tárája = p + m, ahol m = a piknométerben lévő levegő tömege, m = 0,0012 (p - p'). Térfogat 20 °C hőmérsékleten: V20 °C = (p + m - p') ⋅ Ft, ahol Ft = az I. táblázatból vett tényező a t °C hőmérsékletre. A V20 °C értéket ± 0,001 ml pontossággal kell számítani. A víz tömege 20 °C hőmérsékleten: M20 °C = 0,998203 V20 °C, ahol a 0,998203 a víz sűrűsége 20 °C hőmérsékleten. 4.2.2.

Kalibrálás egykarú mérleggel Határozzuk meg: — a tiszta és száraz piknométer tömegét: ez legyen P, —

a t °C hőmérsékleten vízzel töltött piknométer tömegét a 4.2.1 szakasz alatt leírt eljárással: ez legyen P1,

—

a táraedény tömegét: T0.

Számítás1 Az üres piknométer tárázása: Az üres piknométer tárája = P - m, ahol m = a piknométerben található levegő tömege, m = 0,0012 (P1 - P).

3

Számpélda ezen rész 6. szakaszában található.

10


Térfogat 20 °C hőmérsékleten: V20 °C = [P1 - (P - m)] x Ft, ahol Ft = az I. táblázatból vett tényező t °C hőmérsékletre. A térfogatot 20 °C hőmérsékleten ± 0,001 ml pontossággal számoljuk ki. A víz tömege 20 °C hőmérsékleten: M20 °C = 0,998203 V20 °C, ahol 0,998203 a víz sűrűsége 20 °C hőmérsékleten. 4.3.

Mérés4

4.3.1.

Mérés kétkarú mérleggel Töltsük meg a piknométert a meghatározásra előkészített mintával a 4.2.1 szakasz alatt leírt módszert követve. Legyen p'' az a g-ban kifejezett tömeg, amely az egyensúly létrehozásához szükséges t °C hőmérsékleten. A piknométerben lévő folyadék tömege = p + m - p''. A látszólagos sűrűség t °C hőmérsékleten: ρ t oC =

p + m − p" V20o C

Számítsuk ki a sűrűséget 20 °C hőmérsékleten a későbbiekben megadott valamelyik korrekciós táblázat segítségével a mért folyadék jellegének megfelelően: száraz bor (II. táblázat), természetes vagy sűrített must (III. táblázat), édes bor (IV. táblázat). A bor 20 °C/20 °C sűrűségét úgy számítjuk, hogy elosztjuk a bor 20 °C hőmérsékleten mért sűrűségét 0,998203-mal.

4


11


4.3.2.

Mérés egykarú mérleggel5 Mérjük meg a táraedényt, ennek tömege legyen T. Számítsuk ki a dT = T1 - T0 értéket. Az üres piknométer tömege a mérés időpontjában = P - m + dT. Mérjük meg a előkészített mintával feltöltött piknométert a 4.2.1 szakasz alatt leírtak szerint. Legyen ennek tömege t °C hőmérsékleten P2. A piknométerben lévő folyadék tömege t °C hőmérsékleten = P2 - (P - m + dT). Látszólagos sűrűség t °C hőmérsékleten:

ρ t oC =

P2 − ( P − m + dT) V20o C

Számítsuk ki a vizsgált folyadék sűrűségét 20 °C hőmérsékleten (száraz bor, természetes vagy sűrített must, vagy édes bor) a 4.3.1 pontnak megfelelően. A 20 °C/20 °C sűrűséget úgy számítjuk ki, hogy elosztjuk a 20 °C hőmérsékleten mért bor sűrűségét 0,998203-mal.

4.3.3

A mérések pontossága A sűrűségmérések megismételhetősége száraz és félédes borokra: r = 0,00010, édes borokra: r = 0,00018.

4.3.4.

A sűrűség mérések reprodukálhatósága: száraz és félédes borokra: R = 0,00037, édes borokra: R = 0,00045.

5.

SZOKÁSOS MÓDSZEREK

5.1.

Meghatározás areométerrel

5.1.1. 5.1.1.1.

Eszközök Areométer Az areométereknek meg kell felelniük az ISO-előírásoknak méretük és fokbeosztásuk tekintetében.

5


12


A fokoló egy henger alakú úszótestből és egy kör keresztmetszetű szárból áll, amelynek belső átmérője legalább 3 mm. Száraz borok mérését 0,983 és 1,003 tartományba eső, 1/1000 és 5/1000 fokbeosztású areométerrel kell végezni. Az ezredjelek távolsága egymástól legalább 5 mm. Az alkoholmentesített borok, az édes borok és mustok sűrűségének méréséhez 5 fokolóból álló készletet kell használni, a következő skálatartományokkal: 1,000-1,030, 1,030-1,060, 1,0601,090, 1,090-1,120 és 1,120-1,150. Ezeket a fokolókat 20 °C-on mért sűrűségre legalább 0,0010 és 0,0005 értékenként kell beosztani, ahol minden 0,0010 jel legalább 3 mm távolságra van a következő jeltől. Ezeknek a fokolóknak olyan beosztásuaknak kell lenniük, hogy a leolvasást ‘a meniszkusz alsó szintjén’ lehessen végezni. A 20 °C hőmérsékleten mért sűrűség vagy relatív sűrűség fokbeosztására és a meniszkusz leolvasásnak módjára a skálán feltüntetett jellel vagy az úszótestben lévő jelzéssel kell utalni. A fokolókat hivatalos helyen kell hitelesíttetni. 5.1.1.2.

Egy legalább 0,5 °C beosztású hitelesített hőmérő

5.1.1.3.

Egy 36 mm belső átmérőjű és 320 mm magasságú mérőhenger, amely szintezőcsavarokkal állítható függőleges helyzetbe.

5.1.2.

Eljárás

5.1.2.1.

Mérés A 3. szerint előkészített mintából öntsünk 250 ml-t a mérőhengerbe (5.1.1.3 szakasz) és helyezzük bele a hőmérőt és a fokolót. A hőmérséklet kiegyenlítődés elősegítésére forgatva mozgatjuk, majd egy perc múlva leolvassuk a hőmérsékletet. Vegyük ki a hőmérőt, és olvassuk le a látszólagos sűrűséget t °C hőmérsékleten a fokolóról egy újabb perc elteltével. A t °C hőmérsékleten leolvasott látszólagos sűrűséget ezután korrigáljuk 20 °C-ra a száraz borokra (V. táblázat), a mustokra (VI. táblázat) vagy a maradék cukrot tartalmazó borokra (VII. táblázat) vonatkozó táblázatok használatával. A 20 °C/20 °C sűrűséget úgy kapjuk meg, hogy a 20 °C hőmérsékleten mért sűrűséget elosztjuk 0,998203-mal.

13


5.2.

Sűrűségmérés hidrosztatikus mérleggel

5.2.1.

Eszközök

5.2.1.1.

Egy 100 g terhelhetőségű és 0,1 mg érzékenységű hidrosztatikus mérleg. Egy-egy, legalább 20 ml térfogatú egyforma pirexüvegből készült úszótest mindkét serpenyő alá van rögzítve úgy, hogy 0,1 mm-nél vékonyabb szállalvan felfüggesztve. A jobb oldali serpenyő alá függesztett úszótest egy olyan üveghengerbe merül, amelyet jellel láttak el. Az üveghengernek legalább 6 mm-rel nagyobb belső átmérőjűnek kell lennie, mint az úszótestnek. Az úszótestnek teljes mértékben bele kell férnie a mérőhenger jelölés alatti térfogatába; a mérendő folyadék felületén csak a felfüggesztő szál haladhat keresztül. A mérőhengerben lévő folyadék hőmérsékletét 0,2 °C-onként beosztott hőmérőn kell leolvasni.

5.2.1.2

Egyserpenyős hidrosztatikus mérleg is használható.

5.2.2.

Eljárás

5.2.2.1.

A hidrosztatikus mérleg kalibrálása Állítsuk be az egyensúlyt úgy, hogy súlyokat teszünk a jobb oldali serpenyőbe, miközben a két úszótest a levegőben lóg. Jegyezzük fel ezeknek a hozzáadott súlyoknak a p tömegét. Töltsük fel a mérőhengert tiszta vízzel a jelölésig, és rázogatás, valamint két-három perces állás után olvassuk le a t °C hőmérsékletet. Ismét állítsuk helyre az egyensúlyt úgy, hogy súlyokat helyezünk a jobb oldali serpenyőbe. Legyen ezeknek a tömege p'. Az úszótest térfogata 20 °C hőmérsékleten: V20 °C = (p' - p) (F + 0,0012) ahol F az I. táblázatban megadott tényező a t °C hőmérsékletre, p és V20 °C az úszótest jellemzői.

14


5.2.2.2.

Mérési módszer A jobb oldali úszótestet a borral (musttal) a jelölésig töltött mérőhengerbe merítjük. Olvassuk le a bor (vagy must) t °C hőmérsékletét, és jegyezzük fel azt a p'' tömeget, amely az egyensúly létrehozásához szükséges. A ρt látszólagos sűrűséget az alábbi összefüggésből kapjuk: ( p"− p ) + 0,0012 ρ t oC = V Ezt a sűrűséget 20 °C-ra korrigáljuk a II., III. vagy a IV. táblázat segítségével, ha az úszótest pirex üvegből készült.

6.

PÉLDA A 20 °C HŐMÉRSÉKLETEN MÉRT SŰRŰSÉG ÉS A 20 °C/20 °C SŰRŰSÉG KISZÁMÍTÁSÁRA (REFERENCIA-MÓDSZER)

6.1.

Mérés piknométerrel kétkarú mérleg használatával

6.1.1.

A piknométer kalibrálása: 1.

Tiszta és száraz piknométer mérése: Tára = piknométer + p p = 104,9454 g

2.

Vízzel feltöltött piknométer mérése t °C hőmérsékleten: Tára = piknométer + víz + p' p' = 1,2396 g t = 20,5 °C hőmérsékleten

3.

A piknométerben lévő levegő tömegének kiszámítása: m = 0,0012 (p - p') m = 0,0012 (104,9454 - 1,2396) m = 0,1244 g

4.

Állandó jellemzők: Az üres piknométer tárája, p + m: p + m = 104,9454 + 0,1244 p + m = 105,0698 g

15


Térfogat 20 °C hőmérsékleten = (p + m - p') . Ft °C F20,5 °C = 1,001900 V20 °C = (105,0698 - 1,2396) x 1,001900 V20 °C = 104,0275 ml A víz tömege 20 °C hőmérsékleten = M20 °C = V20 °C ⋅ 0,998203 M20 °C = 103,8405 g 6.1.2.

A száraz bor sűrűségének és 20 °C/20 °C sűrűségének meghatározása ρ'' = 1,2622, 17,80 °C-on ρ17,80o C =

105,0698 − 12622 , 104,0275

ρ17,80 °C = 0,99788 g/ml A II. táblázat lehetővé teszi, hogy a ρ20° következő összefüggés alkalmazásával: ρ 20o C = ρ t oC ±

C

értéket kiszámítsuk a ρt

°C

értékből a

c 1000

t = 17,80 °C-ra és 11% (V/V) alkoholtartalomra c = 0,54.

ρ 20 C = 0,99788 − o

0,54 1000

ρ20 °C = 0,99734 g/ml o

d 2020o CC =

0,99734 = 0,99913 0,998203

16


6.2.

Mérés piknométerrel egykarú mérleg használatával

6.2.1.

A piknométer kalibrálása 1.

A tiszta és száraz piknométer tömege:

P = 67,7913 g 2.

A vízzel feltöltött piknométer tömege t °C hőmérsékleten:

P1 = 169,2715, 21,65 °C hőmérsékleten 3.

A piknométerben lévő levegő tömege:

m = 0,0012 (P1 - P) m = 0,0012 x 101,4802 m = 0,1218 g 4.

Az állandó jellemzők: Az üres piknométer tárája: P - m

P - m = 67,7913 - 0,1218 P - m = 67,6695 g Térfogat 20 °C hőmérsékleten = [P1 - (P - m)] Ft °C

F21,65 °C = 1,002140 V20 °C = 1,002140 (169,2715 - 67,6695) V20 °C = 101,8194 ml A víz tömege 20 °C hőmérsékleten:

M20 °C = V20 °C x 0,998203 M20 °C = 101,6364 g A táraedény tömege: T0

T0 = 171,9160 g

17


6.2.2.

A száraz bor sűrűségének és relatív sűrűségének meghatározása 20 °C

hőmérsékleten T1 = 171,9178 g dT = 171,9178 - 171,9160 = 0,0018 g P - m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g P2 = 169,2799, 18 °C-on ρ18o C =

169,2799 − 67,6713 , 1018194

ρ18 °C = 0,99793 g/ml A II. táblázat lehetővé teszi, hogy a ρ20 °C-t kiszámítsuk a ρt °C értékből az alábbi összefüggés alkalmazásával: ρ 20o C = ρ t oC ±

c 1000

t = 18 °C hőmérsékletre és 11%(V/V) alkoholtartalomra c = 0,49. ρ 20o C = 0,99793 −

0,49 1000

ρ20 °C = 0,99744 g/ml o

C d 20 = 20o C

0,99744 = 0,99923 0,998203

18


I. TÁBLÁZAT F tényezők, amelyekkel a pirex üvegből készült piknométerben lévő t °C hőmérsékletű víz tömege megszorzandó a piknométer térfogatának kiszámításához 20 °C hőmérsékleten °C 10,0 ,1 ,2 ,3 ,4 10,5 ,6 ,7 ,8 ,9 11,0 ,1 ,2 ,3 ,4 11,5 ,6 ,7 ,8 ,9 12,0 ,1 ,2 ,3 ,4 12,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,000398 1,000406 1,000414 1,000422 1,000430 1,000439 1,000447 1,000456 1,000465 1,000474 1,000483 1,000492 1,000501 1,000511 1,000520 1,000530 1,000540 1,000550 1,000560 1,000570 1,000580 1,000591 1,000601 1,000612 1,000623 1,000634 1,000645 1,000656 1,000668 1,000679

°C 13,0 ,1 ,2 ,3 ,4 13,5 ,6 ,7 ,8 ,9 14,0 ,1 ,2 ,3 ,4 14,5 ,6 ,7 ,8 ,9 15,0 ,1 ,2 ,3 ,4 15,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,000691 1,000703 1,000714 1,000726 1,000738 1,000752 1,000764 1,000777 1,000789 1,000803 1,000816 1,000829 1,000842 1,000855 1,000868 1,000882 1,000895 1,000909 1,000923 1,000937 1,000951 1,000965 1,000979 1,000993 1,001008 1,001022 1,001037 1,001052 1,001067 1,001082

°C 16,0 ,1 ,2 ,3 ,4 16,5 ,6 ,7 ,8 ,9 17,0 ,1 ,2 ,3 ,4 17,5 ,6 ,7 ,8 ,9 18,0 ,1 ,2 ,3 ,4 18,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,001097 1,001113 1,001128 1,001144 1,001159 1,001175 1,001191 1,001207 1,001223 1,001239 1,001257 1,001273 1,001290 1,001306 1,001323 1,001340 1,001357 1,001374 1,001391 1,001409 1,001427 1,001445 1,001462 1,001480 1,001498 1,001516 1,001534 1,001552 1,001570 1,001589

°C 19,0 ,1 ,2 ,3 ,4 19,5 ,6 ,7 ,8 ,9 20,0 ,1 ,2 ,3 ,4 20,5 ,6 ,7 ,8 ,9 21,0 ,1 ,2 ,3 ,4 21,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,001608 1,001627 1,001646 1,001665 1,001684 1,001703 1,001722 1,001741 1,001761 1,001780 1,001800 1,001819 1,001939 1,001859 1,001880 1,001900 1,001920 1,001941 1,001961 1,001982 1,002002 1,002023 1,002044 1,002065 1,002086 1,002107 1,002129 1,002151 1,002172 1,002194

°C 22,0 ,1 ,2 ,3 ,4 22,5 ,6 ,7 ,8 ,9 23,0 ,1 ,2 ,3 ,4 23,5 ,6 ,7 ,8 ,9 24,0 ,1 ,2 ,3 ,4 24,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,002215 1,002238 1,002260 1,002282 1,002304 1,002326 1,002349 1,002372 1,002394 1,002417 1,002439 1,002462 1,002485 1,002508 1,002531 1,002555 1,002578 1,002602 1,002625 1,002649 1,002672 1,002696 1,002720 1,002745 1,002769 1,002793 1,002817 1,002842 1,002866 1,002891

°C 25,0 ,1 ,2 ,3 ,4 25,5 ,6 ,7 ,8 ,9 26,0 ,1 ,2 ,3 ,4 26,5 ,6 ,7 ,8 ,9 27,0 ,1 ,2 ,3 ,4 27,5 ,6 ,7 ,8 ,9

F 1,002916 1,002841 1,002966 1,002990 1,003015 1,003041 1,003066 1,003092 1,003117 1,003143 1,003168 1,003194 1,003222 1,003247 1,003273 1,003299 1,003326 1,003352 1,003379 1,003405 1,003432 1,003458 1,003485 1,003513 1,003540 1,003567 1,003594 1,003621 1,003649 1,003676

°C 28,0 ,1 ,2 ,3 ,4 28,5 ,6 ,7 ,8 ,9 29,0 ,1 ,2 ,3 ,4 29,5 ,6 ,7 ,8 ,9 30,0

19

F 1,003704 1,003731 1,003759 1,003787 1,003815 1,003843 1,003871 1,003899 1,003928 1,003956 1,003984 1,004013 1,004042 1,004071 1,004099 1,004128 1,004158 1,004187 1,004216 1,004245 1,004275

Magyar Borkönyv

III. fejezet Borok vizsgálata

III./1..

II. TÁBLÁZAT c hőmérséklet-korrekciók pirexüvegből készült piknométerrel t °C hőmérsékleten mért száraz borok és alkoholmentes száraz borok sűrűségének 20 °C-ra való átszámítására

ρ 20 = ρ t ±

c 1000

– ha t °C alacsonyabb 20 °C-nál + ha t °C magasabb 20 °C-nál

Hőmérséklet (°C)

Alkoholtartalom %(V/V) 0

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

10o

1,59

1,64

1,67

1,71

1,77

1,84

1,91

2,01

2,11

2,20

2,34

2,46

2,60

2,73

2,88

3,03

3,19

3,35

3,52

3,70

3,87

4,06

4,25

4,44

11o 12o 13o 14o

1,48 1,36 1,22 1,08

1,53 1,40 1,26 1,11

1,56 1,43 1,28 1,13

1,60 1,46 1,32 1,16

1,64 1,50 1,35 1,19

1,70 1,56 1,40 1,23

1,77 1,62 1,45 1,27

1,86 1,69 1,52 1,33

1,95 1,78 1,59 1,39

2,05 1,86 1,67 1,46

2,16 1,96 1,75 1,52

2,27 2,05 1,83 1,60

2,38 2,16 1,92 1,67

2,51 2,27 2,01 1,75

2,63 2,38 2,11 1,84

2,77 2,50 2,22 1,93

2,91 2,62 2,32 2,03

3,06 2,75 2,44 2,11

3,21 2,88 2,55 2,21

3,36 3,02 2,67 2,31

3,53 3,16 2,79 2,42

3,69 3,31 2,92 2,52

3,86 3,46 3,05 2,63

4,03 3,61 3,18 2,74

15o

0,92

0,96

0,97

0,99

1,02

1,05

1,09

1,13

1,19

1,24

1,30

1,36

1,42

1,48

1,55

1,63

1,70

1,78

1,86

1,95

2,03

2,12

2,21

2,30

16o 17o 18o 19o

0,76 0,59 0,40 0,21

0,79 0,61 0,42 0,21

0,80 0,62 0,42 0,22

0,81 0,63 0,43 0,22

0,84 0,65 0,44 0,23

0,86 0,67 0,46 0,23

0,89 0,69 0,47 0,24

0,93 0,72 0,49 0,25

0,97 0,75 0,51 0,26

1,01 0,78 0,53 0,27

1,06 0,81 0,55 0,28

1,10 0,85 0,57 0,29

1,16 0,88 0,60 0,30

1,21 0,95 0,63 0,32

1,26 0,96 0,65 0,33

1,32 1,01 0,68 0,34

1,38 1,05 0,71 0,36

1,44 1,11 0,74 0,37

1,51 1,15 0,77 0,39

1,57 1,20 0,81 0,41

1,64 1,25 0,84 0,42

1,71 1,30 0,87 0,44

1,78 1,35 0,91 0,46

1,85 1,40 0,94 0,47

21o 22o 23o 24o

0,21 0,44 0,68 0,93

0,22 0,45 0,70 0,96

0,22 0,46 0,71 0,97

0,23 0,47 0,72 0,99

0,23 0,48 0,74 1,01

1,24 0,49 0,76 1,03

0,25 0,51 0,78 1,06

0,26 0,52 0,80 1,10

0,27 0,54 0,83 1,13

0,28 0,56 0,86 1,18

0,29 0,59 0,90 1,22

0,30 0,61 0,93 1,26

0,31 0,63 0,96 1,31

0,32 0,66 1,00 1,36

0,34 0,69 1,03 1,41

0,36 0,71 1,08 1,47

0,37 0,74 1,13 1,52

0,38 0,77 1,17 1,58

0,40 0,80 1,22 1,64

0,41 0,93 1,26 1,71

0,43 0,87 1,31 1,77

0,44 0,90 1,37 1,84

0,46 0,93 1,41 1,90

0,48 0,97 1,46 1,97

25o

1,19

1,23

1,25

1,27

1,29

1,32

1,36

1,40

1,45

1,50

1,55

1,61

1,67

1,73

1,80

1,86

1,93

2,00

2,08

2,16

2,24

2,32

2,40

2,48

26o 27o 28o 29o

1,47 1,75 2,04 2,34

1,51 1,80 2,10 2,41

1,53 1,82 2,13 2,44

1,56 1,85 2,16 2,48

1,59 1,89 2,20 2,53

1,62 1,93 2,25 2,58

1,67 1,98 2,31 2,65

1,72 2,04 2,38 2,72

1,77 2,11 2,45 2,81

1,83 2,18 2,53 2,89

1,90 2,25 2,62 2,99

1,96 2,33 2,70 3,09

2,03 2,41 2,80 3,19

2,11 2,50 2,89 3,30

2,19 2,59 3,00 3,42

2,27 2,68 3,10 3,53

2,35 2,78 3,21 3,65

2,44 2,88 3,32 3,78

2,53 2,98 3,45 3,92

2,62 3,09 3,57 4,05

2,72 3,20 3,69 4,19

2,81 3,31 3,82 4,33

2,91 3,42 3,94 4,47

3,01 3,53 4,07 4,61

30o

2,66

2,73

2,77

2,81

2,86

2,92

3,00

3,08

3,17

3,27

3,37

3,48

3,59

3,72

3,84

3,97

4,11

4,25

4,40

4,55

4,70

4,85

4,92

5,17

20o

20 o C

Megjegyzés: Ez a táblázat felhasználható a dt20 sűrűség d 20 o C sűrűségre való átszámításához.

20

Magyar Borkönyv


III./1..

III. TÁBLÁZAT c hőmérséklet-korrekciók pirexüvegből készült piknométerrel t °C hőmérsékleten mért természetes mustok és sűrített mustok sűrűségének 20 °C-ra valóátszámítására


ρ 20 = ρ t ±

c 1000


1,05

1,06

1,07

1,08

1,09

1,10

1,11

1,12

1,13

1,14

Sűrűség 1,15 1,16

1,18

1,20

1,22

1,24

1,26

1,28

1,30

1,32

1,34

1,36

10°

2,31

2,48

2,66

2,82

2,99

3,13

3,30

3,44

3,59

3,73

3,88

4,01

4,28

4,52

4,76

4,98

5,18

5,42

5,56

5,73

5,90

6,05

11° 12° 13° 14°

2,12 1,92 1,72 1,52

2,28 2,06 1,84 1,62

2,42 2,19 1,95 1,72

2,57 2,32 2,06 1,81

2,72 2,45 2,17 1,90

2,86 2,58 2,27 2,00

2,99 2,70 2,38 2,09

3,12 2,82 2,48 2,17

3,25 2,94 2,58 2,26

3,37 3,04 2,69 2,34

3,50 3,15 2,78 2,43

3,62 3,26 2,88 2,51

3,85 3,47 3,05 2,66

4,08 3,67 3,22 2,82

4,29 3,85 3,39 2,96

4,48 4,03 3,55 3,09

4,67 4,20 3,65 3,22

4,84 4,36 3,84 3,34

5,00 4,51 3,98 3,45

5,16 4,65 4,11 3,56

5,31 4,78 4,24 3,67

5,45 4,91 4,36 3,76

15°

1,28

1,36

1,44

1,52

1,60

1,67

1,75

1,82

1,89

1,96

2,04

2,11

2,24

2,36

2,48

2,59

2,69

2,79

2,88

2,97

3,03

3,10

16° 17° 18° 19°

1,05 0,80 0,56 0,29

1,12 0,86 0,59 0,31

1,18 0,90 0,62 0,32

1,25 0,95 0,66 0,34

1,31 1,00 0,68 0,36

1,37 1,04 0,72 0,37

1,43 1,09 0,75 0,39

1,49 1,13 0,77 0,40

1,55 1,18 0,80 0,42

1,60 1,22 0,83 0,43

1,66 1,26 0,85 0,44

1,71 1,30 0,88 0,45

1,81 1,37 0,93 0,48

1,90 1,44 0,98 0,50

2,00 1,51 1,02 0,52

2,08 1,57 1,05 0,54

2,16 1,62 1,09 0,56

2,24 1,68 1,12 0,57

2,30 1,72 1,16 0,59

2,37 1,76 1,19 0,60

2,43 1,80 1,21 0,61

2,49 1,84 1,24 0,62

21° 22° 23° 24°

0,29 0,58 0,89 1,20

0,30 0,61 0,94 1,25

0,32 0,64 0,99 1,31

0,34 0,67 1,03 1,37

0,35 0,70 1,08 1,43

0,37 0,73 1,12 1,49

0,38 0,76 1,16 1,54

0,40 0,79 1,20 1,60

0,41 0,81 1,25 1,66

0,42 0,84 1,29 1,71

0,44 0,87 1,33 1,77

0,46 0,90 1,37 1,82

0,48 0,96 1,44 1,92

0,50 1,00 1,51 2,01

0,53 1,05 1,57 2,10

0,56 1,09 1,63 2,17

0,58 1,12 1,67 2,24

0,59 1,15 1,73 2,30

0,60 1,18 1,77 2,36

0,61 1,20 1,80 2,40

0,62 1,22 1,82 2,42

0,62 1,23 1,84 2,44

25°

1,51

1,59

1,66

1,74

1,81

1,88

1,95

2,02

2,09

2,16

2,23

2,30

2,42

2,53

2,63

2,72

2,82

2,89

2,95

2,99

3,01

3,05

26° 27° 28° 29°

1,84 2,17 2,50 2,86

1,92 2,26 2,62 2,98

2,01 2,36 2,74 3,10

2,10 2,46 2,85 3,22

2,18 2,56 2,96 3,35

2,26 2,66 3,07 3,47

2,34 2,75 3,18 3,59

2,42 2,84 3,28 3,70

2,50 2,93 3,40 3,82

2,58 3,01 3,50 3,93

2,65 3,10 3,60 4,03

2,73 3,18 3,69 4,14

2,87 3,35 3,87 4,34

3,00 3,50 4,04 4,53

3,13 3,66 4,21 4,72

3,25 3,80 4,36 4,89

3,36 3,93 4,50 5,05

3,47 4,06 4,64 5,20

3,57 4,16 4,57 5,34

3,65 4,26 4,86 5,46

3,72 4,35 4,94 5,56

3,79 4,42 5,00 5,64

30°

3,20

3,35

3,49

3,64

3,77

3,91

4,05

4,17

4,30

4,43

4,55

4,67

4,90

5,12

5,39

5,51

5,68

5,84

5,96

6,08

6,16

6,22

20°

20 o C

Megjegyzés: Ez a táblázat felhasználható a dt20 sűrüség d 20 o C sűrüségre való átalakításához.

21

Magyar Borkönyv


III./1..

IV. TÁBLÁZAT c hőmérséklet-korrekciók 13 térfogatszázalékos, vagy annál nagyobb alkoholtartalmú édes borok pirex üveg piknométerrel t °C hőmérsékleten mért sűrűségének 20 °C-ra való átszámítására

ρ 20 = ρ t ±

c 1000


13 térfogatszázalékos borok Sűrűség




1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

10°

2,36

2,71

3,06

3,42

3,72

3,96

4,32

2,64

2,99

3,36

3,68

3,99

4,30

4,59

2,94

3,29

3,64

3,98

4,29

4,60

4,89

11° 12° 13° 14°

2,17 1,97 1,78 1,57

2,49 2,25 2,02 1,78

2,80 2,53 2,25 1,98

2,99 2,79 2,47 2,16

3,39 3,05 2,69 2,35

3,65 3,29 2,89 2,53

3,90 3,52 3,09 2,70

2,42 2,19 1,97 1,74

2,73 2,47 2,21 1,94

3,05 2,75 2,44 2,14

3,34 3,01 2,66 2,32

3,63 3,27 2,87 2,52

3,89 3,51 3,08 2,69

4,15 3,73 3,29 2,86

2,69 2,42 2,18 1,91

3,00 2,70 2,42 2,11

3,32 2,98 2,64 2,31

3,61 3,24 2,87 2,50

3,90 3,50 3,08 2,69

4,16 3,74 3,29 2,86

4,41 3,96 3,49 3,03

15°

1,32

1,49

1,66

1,82

1,97

2,12

2,26

1,46

1,63

1,79

1,95

2,10

2,25

2,39

1,60

1,77

1,93

2,09

2,24

2,39

2,53

16° 17° 18° 19°

1,08 0,93 0,58 0,30

1,22 0,94 0,64 0,34

1,36 1,04 0,71 0,37

1,48 1,13 0,78 0,40

1,61 1,22 0,84 0,43

1,73 1,31 0,89 0,46

1,84 1,40 0,95 0,49

1,81 0,91 0,63 0,33

1,32 1,02 0,69 0,37

1,46 1,12 0,76 0,40

1,59 1,21 0,83 0,43

1,71 1,30 0,89 0,46

1,83 1,39 0,94 0,49

1,94 1,48 1,00 0,52

1,30 1,00 0,69 0,36

1,44 1,10 0,75 0,39

1,58 1,20 0,82 0,42

1,71 1,30 0,89 0,46

1,83 1,39 0,95 0,49

1,95 1,48 1,00 0,52

2,06 1,56 1,06 0,54

21° 22° 23° 24°

0,30 0,60 0,93 1,27

0,33 0,67 1,02 1,39

0,36 0,73 1,12 1,50

0,40 0,80 1,22 1,61

0,43 0,85 1,30 1,74

0,46 0,91 1,39 1,84

0,49 0,98 1,49 1,95

0,33 0,65 1,01 1,37

0,36 0,72 1,10 1,49

0,39 0,78 1,20 1,59

0,43 0,84 1,29 1,72

0,46 0,90 1,38 1,84

0,49 0,96 1,46 1,95

0,51 1,01 1,55 2,06

0,35 0,71 1,10 1,48

0,39 0,78 1,19 1,60

0,42 0,84 1,29 1,71

0,45 0,90 1,38 1,83

0,48 0,96 1,46 1,95

0,51 1,01 1,55 2,06

0,54 1,07 1,63 2,17

25°

1,61

1,75

1,90

2,05

2,19

2,33

2,47

1,73

1,87

2,02

2,17

2,31

2,45

2,59

1,87

2,01

2,16

2,31

2,45

2,59

2,73

26° 27° 28° 29°

1,94 2,30 2,66 3,05

2,12 2,51 2,90 3,31

2,29 2,70 3,13 3,56

2,47 2,90 3,35 3,79

2,63 3,09 3,57 4,04

2,79 3,27 3,86 4,27

2,95 3,44 4,00 4,49

2,09 2,48 2,86 3,28

2,27 2,68 3,10 3,53

2,44 2,87 3,23 3,77

2,62 3,07 3,55 4,02

2,78 3,27 3,77 4,26

2,94 3,45 3,99 4,49

3,10 3,62 4,20 4,71

2,26 2,67 3,08 3,52

2,44 2,88 3,31 3,77

2,61 3,07 3,55 4,01

2,79 3,27 3,76 4,26

2,95 3,46 3,99 4,50

3,11 3,64 4,21 4,73

3,26 3,81 4,41 4,95

30°

3,44

3,70

3,99

4,28

4,54

4,80

5,06

3,68

3,94

4,23

4,52

4,79

5,05

5,30

3,95

4,22

4,51

4,79

5,07

5,32

5,57

20°

22

Magyar Borkönyv


III./1..




1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

10°

3,27

3,62

3,97

4,30

4,62

4,92

5,21

3,62

3,97

4,32

4,66

4,97

5,27

5,56

11° 12° 13° 14°

2,99 2,68 2,40 2,11

3,30 2,96 2,64 2,31

3,61 3,24 2,87 2,51

3,90 3,50 0,09 2,69

4,19 3,76 3,30 2,88

4,45 4,00 3,51 3,05

4,70 4,21 3,71 3,22

3,28 3,96 2,64 2,31

3,61 3,24 2,88 2,51

3,92 3,52 3,11 2,71

4,22 3,78 3,33 2,89

4,50 4,03 3,54 3,08

4,76 4,27 3,74 3,25

5,01 4,49 3,95 3,43

15°

1,76

1,93

2,09

2,25

2,40

2,55

2,69

1,93

2,10

2,26

2,42

2,57

2,72

2,86

16° 17° 18° 19°

1,43 1,09 0,76 0,39

1,57 1,20 0,82 0,42

1,70 1,30 0,88 0,45

1,83 1,39 0,95 0,49

1,95 1,48 1,01 0,52

2,08 1,57 1,06 0,55

2,18 1,65 1,12 0,57

1,56 1,20 0,82 0,42

1,70 1,31 0,88 0,46

1,84 1,41 0,95 0,49

1,97 1,50 1,01 0,52

2,09 1,59 1,08 0,55

2,21 1,68 1,13 0,58

2,32 1,77 1,18 0,61

21° 22° 23° 24°

0,38 0,78 1,19 1,60

0,42 0,84 1,28 1,72

0,45 0,90 1,38 1,83

0,48 0,96 1,47 1,95

0,51 1,02 1,55 2,06

0,54 1,07 1,64 2,18

0,57 1,13 1,72 2,29

0,41 0,84 1,29 1,73

0,45 0,90 1,39 1,85

0,48 0,96 1,48 1,96

0,51 1,02 1,57 2,08

0,54 1,08 1,65 2,19

0,57 1,14 1,74 2,31

0,60 1,19 1,82 2,42

25°

2,02

2,16

2,31

2,46

2,60

2,74

2,88

2,18

2,32

2,47

2,62

2,76

2,90

3,04

26° 27° 28° 29°

2,44 2,88 3,31 3,78

2,62 3,08 3,54 4,03

2,79 3,27 3,78 4,27

2,96 3,42 4,00 4,52

3,12 3,66 4,22 4,76

3,28 3,84 4,44 4,99

3,43 4,01 4,64 5,21

2,53 3,10 3,56 4,06

2,81 3,30 3,79 4,31

2,97 3,47 4,03 4,55

3,15 3,69 4,25 4,80

3,31 3,88 4,47 5,04

3,47 4,06 4,69 5,27

3,62 4,23 4,89 5,48

30°

4,24

4,51

4,80

5,08

5,36

5,61

5,86

4,54

4,82

5,11

5,39

5,66

5,91

6,16

20°

23

Magyar Borkönyv


III./1..

V. TÁBLÁZAT c hőmérséklet-korrekciók száraz borok és alkoholmentes száraz borok normálüveg piknométerrel vagy fokolóval t °C hőmérsékleten mért sűrűségének 20 °C-ra való átszámítására


ρ 20 = ρ t ±

c 1000


Alkoholtartalom %(V/V) 14 15 16 17

0

5

6

7

8

9

10

11

12

13

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

10°

1,45

1,51

1,55

1,58

1,64

1,70

1,78

1,88

1,98

2,09

2,21

2,34

2,47

2,60

2,75

2,90

3,06

3,22

3,39

3,57

3,75

3,93

4,12

4,31

11° 12° 13° 14°

1,35 1,24 1,12 0,99

1,40 1,28 1,16 1,03

1,43 1,31 1,18 1,05

1,47 1,34 1,21 1,07

1,52 1,39 1,25 1,11

1,58 1,44 1,30 1,14

1,65 1,50 1,35 1,19

1,73 1,58 1,42 1,24

1,83 1,66 1,49 1,31

1,93 1,75 1,56 1,37

2,03 1,84 1,64 1,44

2,15 1,94 1,73 1,52

2,26 2,04 1,82 1,59

2,38 2,15 1,91 1,67

2,51 2,26 2,01 1,75

2,65 2,38 2,11 1,84

2,78 2,51 2,22 1,93

2,93 2,63 2,33 2,03

3,08 2,77 2,45 2,13

3,24 2,91 2,57 2,23

3,40 3,05 2,69 2,33

3,57 3,19 2,81 2,44

3,73 3,34 2,95 2,55

3,90 3,49 3,07 2,66

15°

0,86

0,89

0,90

0,92

0,95

0,98

1,02

1,07

1,12

1,17

1,23

1,29

1,35

1,42

1,49

1,56

1,63

1,71

1,80

1,88

1,96

2,05

2,14

2,23

16° 17° 18° 19°

0,71 0,55 0,38 0,19

0,73 0,57 0,39 0,20

0,74 0,57 0,39 0,20

0,76 0,59 0,40 0,21

0,78 0,60 0,41 0,21

0,81 0,62 0,43 0,22

0,84 0,65 0,44 0,23

0,87 0,67 0,46 0,24

0,91 0,70 0,48 0,25

0,96 0,74 0,50 0,26

0,99 0,77 0,52 0,27

1,05 0,81 0,55 0,28

1,10 0,84 0,57 0,29

1,15 0,88 0,60 0,30

1,21 0,92 0,62 0,32

1,27 0,96 0,65 0,33

1,33 1,01 0,68 0,35

1,39 1,05 0,71 0,36

1,45 1,11 0,74 0,38

1,52 1,15 0,78 0,39

1,59 1,20 0,81 0,41

1,66 1,26 0,85 0,43

1,73 1,31 0,88 0,44

1,80 1,36 0,91 0,46

21° 22° 23° 24°

0,21 0,43 0,67 0,91

0,22 0,45 0,69 0,93

0,22 0,45 0,70 0,95

0,23 0,46 0,71 0,97

0,23 0,47 0,72 0,99

0,24 0,49 0,74 1,01

0,25 0,50 0,77 1,04

0,25 0,52 0,79 1,07

0,26 0,54 0,82 1,11

0,27 0,56 0,85 1,15

0,29 0,58 0,88 1,20

0,29 0,60 0,91 1,24

0,31 0,63 0,95 1,29

0,32 0,65 0,99 1,34

0,34 0,68 1,03 1,39

0,35 0,71 1,07 1,45

0,36 0,73 1,12 1,50

0,38 0,77 1,16 1,56

0,39 0,80 1,21 1,62

0,41 0,83 1,25 1,69

0,43 0,86 1,30 1,76

0,44 0,89 1,35 1,82

0,46 0,93 1,40 1,88

0,48 0,96 1,45 1,95

25°

1,16

1,19

1,21

1,23

1,26

1,29

1,33

1,37

1,42

1,47

1,52

1,57

1,63

1,70

1,76

1,83

1,90

1,97

2,05

2,13

2,21

2,29

2,37

2,45

26° 27° 28° 29°

1,42 1,69 1,97 2,26

1,46 1,74 2,03 2,33

1,49 1,77 2,06 2,37

1,51 1,80 2,09 2,40

1,54 1,83 2,14 2,45

1,58 1,88 2,19 2,50

1,62 1,93 2,24 2,57

1,67 1,98 2,31 2,64

1,73 2,05 2,38 2,73

1,79 2,12 2,46 2,82

1,85 2,20 2,55 2,91

1,92 2,27 2,63 2,99

1,99 2,35 2,73 3,11

2,07 2,44 2,83 3,22

2,14 2,53 2,93 3,34

2,22 2,63 3,03 3,45

2,31 2,72 3,14 3,58

2,40 2,82 3,26 3,70

2,49 2,93 3,38 3,84

2,58 3,04 3,50 3,97

2,67 3,14 3,62 4,11

2,77 3,25 3,75 4,25

2,86 3,37 3,85 4,39

2,96 3,48 4,00 4,54

30°

2,56

2,64

2,67

2,72

2,77

2,83

2,90

2,98

3,08

3,18

3,28

3,38

3,50

3,62

3,75

3,88

4,02

4,16

4,30

4,46

4,61

4,76

4,92

5,07

20°

20 o C

Megjegyzés: Ez a táblázat felhasználható a dt20 sűrüség d 20 o C sűrüségre való átalakításához.

24

Magyar Borkönyv


III./1..

VI. TÁBLÁZAT c hőmérséklet-korrekciók természetes mustok és must sűrítmények normálüveg piknométerrel vagy fokolóval t °C hőmérsékleten mért sűrűségének 20 °C-ra való átszámítására


ρ 20 = ρ t ±

c 1000


1,05

1,06

1,07

1,08

1,09

1,10

1,11

1,12

1,13

1,14

Sűrűség 1,15 1,16

1,18

1,20

1,22

1,24

1,26

1,28

1,30

1,32

1,34

1,36

10°

2,17

2,34

2,52

2,68

2,85

3,16

3,16

3,29

3,44

3,58

3,73

3,86

4,13

4,36

4,60

4,82

5,02

5,25

5,39

5,56

5,73

5,87

11° 12° 13° 14°

2,00 1,81 1,62 1,44

2,16 1,95 1,74 1,54

2,29 2,08 1,85 1,64

2,44 2,21 1,96 1,73

2,59 2,34 2,07 1,82

2,86 2,58 2,28 2,00

2,86 2,58 2,28 2,00

2,99 2,70 2,38 2,08

3,12 2,82 2,48 2,17

3,24 2,92 2,59 2,25

3,37 3,03 2,68 2,34

3,48 3,14 2,77 2,42

3,71 3,35 2,94 2,57

3,94 3,55 3,11 2,73

4,15 3,72 3,28 2,86

4,33 3,90 3,44 2,99

4,52 4,07 3,54 3,12

4,69 4,23 3,72 3,24

4,85 4,37 3,86 3,35

5,01 4,52 3,99 3,46

5,15 4,64 4,12 3,57

5,29 4,77 4,24 3,65

15°

1,21

1,29

1,37

1,45

1,53

1,68

1,68

1,75

1,82

1,89

1,97

2,03

2,16

2,28

2,40

2,51

2,61

2,71

2,80

2,89

2,94

3,01

16° 17° 18° 19°

1,00 0,76 0,53 0,28

1,06 0,82 0,56 0,30

1,12 0,86 0,59 0,31

1,19 0,91 0,63 0,33

1,25 0,96 0,65 0,35

1,37 1,05 0,72 0,38

1,37 1,05 0,72 0,38

1,43 1,09 0,74 0,39

1,49 1,14 0,77 0,41

1,54 1,18 0,80 0,42

1,60 1,22 0,82 0,43

1,65 1,25 0,85 0,43

1,75 1,32 0,90 0,46

1,84 1,39 0,95 0,48

1,94 1,46 0,99 0,50

2,02 1,52 1,02 0,52

2,09 1,57 1,06 0,54

2,17 1,63 1,09 0,55

2,23 1,67 1,13 0,57

2,30 1,71 1,16 0,58

2,36 1,75 1,18 0,59

2,42 1,79 1,20 0,60

21° 22° 23° 24°

0,28 0,55 0,85 1,15

0,29 0,58 0,90 1,19

0,31 0,61 0,95 1,25

0,33 0,64 0,99 1,31

0,34 0,67 1,04 0,37

0,37 0,73 1,12 1,48

0,37 0,73 1,12 1,48

0,39 0,76 1,16 1,54

0,40 0,78 1,21 1,60

0,41 0,81 1,25 1,65

0,43 0,84 1,29 1,71

0,44 0,87 1,32 1,76

0,46 0,93 1,39 1,86

0,48 0,97 1,46 1,95

0,51 1,02 1,52 2,04

0,54 1,06 1,58 2,11

0,56 1,09 1,62 2,17

0,57 1,12 1,68 2,23

0,58 1,15 1,72 2,29

0,59 1,17 1,75 2,33

0,60 1,19 1,77 2,35

0,60 1,19 1,79 2,37

25°

1,44

1,52

1,59

1,67

1,74

1,88

1,88

1,95

2,02

2,09

2,16

2,22

2,34

2,45

2,55

2,64

2,74

2,81

2,87

2,90

2,92

2,96

26° 27° 28° 29°

1,76 2,07 2,39 2,74

1,84 2,16 2,51 2,86

1,93 2,26 2,63 2,97

2,02 2,36 2,74 3,09

2,10 2,46 2,85 3,22

2,25 2,65 3,06 0,46

2,25 2,65 3,06 3,46

2,33 2,74 3,16 3,57

2,41 2,83 3,28 3,69

2,49 2,91 3,38 3,80

2,56 3,00 3,48 3,90

2,64 3,07 3,57 4,00

2,78 3,24 3,75 4,20

2,91 3,39 3,92 4,39

3,03 3,55 4,08 4,58

3,15 3,69 4,23 4,74

3,26 3,82 4,37 4,90

3,37 3,94 4,51 5,05

3,47 4,04 4,62 5,19

3,55 4,14 4,73 5,31

3,62 4,23 4,80 5,40

3,60 4,30 4,86 5,48

30°

3,06

3,21

3,35

3,50

3,63

3,91

3,91

4,02

4,15

4,28

4,40

4,52

4,75

4,96

5,16

5,35

5,52

5,67

5,79

5,91

5,99

6,04

20°

20 o C

Megjegyzés: Ez a táblázat felhasználható dt20 sűrüség d 20 o C sűrüségre való átalakításához.

25

Magyar Borkönyv


III./1..

VII. TÁBLÁZAT c hőmérséklet korrekciók 13 térfogatszázalékos vagy annál nagyobb alkoholtartalmú édes borok normálüveg piknométerrel vagy fokolóval t °C hőmérsékleten mért sűrűségének 20 °C-ra való átszámítására

ρ 20 = ρ t ±



c 1000




1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

10°

2,24

2,58

2,93

3,27

3,59

3,89

4,18

2,51

2,85

3,20

3,84

4,15

4,45

4,74

2,94

3,29

3,64

3,98

4,29

4,60

4,89

11° 12° 13° 14°

2,06 1,87 1,69 1,49

2,37 2,14 1,93 1,70

2,69 2,42 2,14 1,90

2,97 2,67 2,37 2,09

3,26 2,94 2,59 2,27

3,53 3,17 2,80 2,44

3,78 3,40 3,00 2,61

2,31 2,09 1,88 1,67

2,61 2,36 2,12 1,86

2,93 2,64 2,34 2,06

3,49 3,13 2,77 2,42

3,77 3,39 2,98 2,61

4,03 3,63 3,19 2,77

4,28 3,84 3,39 2,94

2,69 2,42 2,18 1,91

3,00 2,70 2,42 2,11

3,32 2,98 2,64 2,31

3,61 3,24 2,87 2,50

3,90 3,50 3,08 2,69

4,16 3,74 3,29 2,86

4,41 3,96 3,49 3,03

15°

1,25

1,42

1,59

1,75

1,90

2,05

2,19

1,39

1,56

1,72

2,03

2,18

2,32

2,47

1,60

1,77

1,93

2,09

2,24

2,39

2,53

16° 17° 18° 19°

1,03 0,80 0,54 0,29

1,17 0,90 0,61 0,33

1,30 1,00 0,68 0,36

1,43 1,09 0,75 0,39

1,55 1,17 0,81 0,42

1,67 1,27 0,86 0,45

1,78 1,36 0,92 0,48

1,06 0,87 0,60 0,32

1,27 0,98 0,66 0,36

1,40 1,08 0,73 0,39

1,65 1,26 0,86 0,45

1,77 1,35 0,92 0,48

1,89 1,44 0,97 0,51

2,00 1,52 1,03 0,53

1,30 1,00 0,69 0,36

1,44 1,10 0,75 0,39

1,58 1,20 0,82 0,42

1,71 1,30 0,89 0,46

1,83 1,39 0,95 0,49

1,95 1,48 1,00 0,52

2,06 1,56 1,06 0,54

21° 22° 23° 24°

0,29 0,57 0,89 1,22

0,32 0,64 0,98 1,34

0,35 0,70 1,08 1,44

0,39 0,76 1,17 1,56

0,42 0,82 1,26 1,68

0,45 0,88 1,34 1,79

0,47 0,93 1,43 1,90

0,32 0,63 0,97 1,32

0,35 0,69 1,06 1,44

0,38 0,75 1,16 1,54

0,44 0,87 1,34 1,77

0,47 0,93 1,42 1,89

0,50 0,99 1,51 2,00

0,53 1,04 1,59 2,11

0,35 0,71 1,10 1,48

0,39 0,78 1,19 1,60

0,42 0,84 1,29 1,71

0,45 0,90 1,38 1,83

0,48 0,96 1,46 1,95

0,51 1,01 1,55 2,06

0,54 1,07 1,63 2,17

25°

1,61

1,68

1,83

1,98

2,12

2,26

2,40

1,66

1,81

1,96

2,24

2,39

2,52

2,66

1,87

2,01

2,16

2,31

2,45

2,59

2,73

26° 27° 28° 29°

1,87 2,21 2,56 2,93

2,05 2,42 2,80 3,19

2,22 2,60 3,02 3,43

2,40 2,80 3,25 3,66

2,56 3,00 3,47 3,91

2,71 3,18 3,67 4,14

2,87 3,35 3,89 4,37

2,02 2,39 2,75 3,16

2,20 2,59 2,89 3,41

2,37 2,78 3,22 3,65

2,71 3,17 3,66 4,13

2,86 3,36 3,88 4,38

3,02 3,54 4,09 4,61

3,17 3,71 4,30 4,82

2,26 2,67 3,08 3,52

2,44 2,88 3,31 3,77

2,61 3,07 3,55 4,01

2,79 3,27 3,76 4,26

2,95 3,46 3,99 4,50

3,11 3,64 4,21 4,73

3,26 3,81 4,41 4,95

30°

3,31

3,57

3,86

4,15

4,41

4,66

4,92

3,55

3,81

4,10

4,65

4,93

5,17

5,42

3,95

4,22

4,51

4,79

5,07

5,32

5,57

20°

26

Magyar Borkönyv


III./1..




1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

1,000

1,020

1,040

1,060

1,080

1,100

1,120

10°

3,14

3,48

3,83

4,17

4,48

4,78

5,07

3,50

3,84

4,19

4,52

4,83

5,12

5,41

11° 12° 13° 14°

2,87 2,58 2,31 2,03

3,18 2,96 2,55 2,23

3,49 3,13 2,77 2,43

3,78 3,39 2,99 2,61

4,06 3,65 3,20 2,80

4,32 3,88 3,41 2,96

4,57 4,10 3,61 3,13

3,18 2,86 2,56 2,23

3,49 3,13 2,79 2,43

3,80 3,41 3,01 2,63

4,09 3,67 3,23 2,81

4,34 3,92 3,44 3,00

4,63 4,15 3,65 3,16

4,88 4,37 3,85 3,33

15°

1,69

1,86

2,02

2,18

2,33

2,48

2,62

1,86

2,03

2,19

2,35

2,50

2,65

2,80

16° 17° 18° 19°

1,38 1,06 0,73 0,38

1,52 1,16 0,79 0,41

1,65 1,26 0,85 0,44

1,78 1,35 0,92 0,48

1,90 1,44 0,98 0,51

2,02 1,53 1,03 0,52

2,13 1,62 1,09 0,56

1,51 1,15 0,79 0,41

1,65 1,25 0,85 0,44

1,78 1,35 0,92 0,47

1,91 1,45 0,98 0,51

2,03 1,54 1,05 0,54

2,15 1,63 1,10 0,57

2,26 1,71 1,15 0,59

21° 22° 23° 24°

0,37 0,75 1,15 1,55

0,41 0,81 1,30 1,67

0,44 0,87 1,34 1,77

0,47 0,93 1,43 1,89

0,50 0,99 1,51 2,00

0,53 1,04 1,60 2,11

0,56 1,10 1,68 2,23

0,41 0,81 1,25 1,68

0,44 0,88 1,34 1,80

0,47 0,94 1,44 1,90

0,51 1,00 1,63 2,02

0,54 1,06 1,61 2,13

0,57 1,10 1,70 2,25

0,59 1,17 1,78 2,36

25°

1,95

2,09

2,24

2,39

2,53

2,67

2,71

2,11

2,25

2,40

2,55

2,69

2,83

2,97

26° 27° 28° 29°

2,36 2,79 3,20 3,66

2,54 2,99 3,44 3,92

2,71 3,18 3,66 4,15

2,89 3,38 3,89 4,40

3,04 3,57 4,11 4,64

3,20 3,75 4,32 4,87

3,35 3,92 4,53 5,08

2,55 3,01 3,46 3,95

2,73 3,20 3,69 4,20

2,90 3,40 3,93 4,43

3,07 3,59 4,15 4,68

3,22 3,78 4,36 4,92

3,38 3,96 4,58 5,15

2,54 4,13 4,77 5,36

30°

4,11

4,37

4,66

4,94

5,22

5,46

5,71

4,42

4,68

4,97

5,25

5,53

5,77

6,02

20°

27


2.

A MUST, A SŰRÍTETT MUST ÉS A FINOMÍTOTT MUSTSŰRÍTMÉNY CUKORTARTALMÁNAK MEGHATÁROZÁSA REFRAKTOMETRIÁS MÓDSZERREL1 1.

A MÓDSZER ELVE A 20 °C-on

meghatározott refrakcióértéket törésmutatóként, vagy

szacharóz-

tömegszázalékban kifejezve adjuk meg, melynek alapján a mustokra, a sűrített mustokra és a finomított mustsűrítményekre (rektifikált mustkoncentrátum) vonatkozó megfelelő táblázatok segítségével megkaphatjuk a g/l és a g/kg invertcukor-tartalmat. 2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Abbé-refraktométer Az alkalmazott refraktométert olyan skálával kell ellátni, amely: —

vagy szacharózt tömegszázalékát mutatja 0,1 %-os pontossággal,

—

vagy a törésmutatót mutatja négy tizedes pontosságig.

A refraktométert el kell látni olyan hőmérővel, amelynek mérési tartománya legalább +15 °C és +25 °C között van, valamint olyan hőmérséklet-szabályozó rendszerrel, amely lehetővé teszi, hogy a méréseket 20 °C ± 5 °C hőmérsékleten lehessen elvégezni. A műszer használati utasítását pontosan be kell tartani, különösen a kalibrálás és a fényforrás vonatkozásában. 3.

A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE

3.1.

Must és sűrített must Szükség esetén szűrjük át a mustot száraz gézen, a szűrlet első néhány cseppjét elöntve végezzük el a meghatározást a szűrletből.

1

A 2676/1990 /EK rendelet mellékletének 2. módszere

28


3.2.

Finomított mustsűrítmény A finomított mustsűrítményt koncentrációtól függően közvetlenül vagy hígítva (200 g finomított mustsűrítmény desztillált vízzel 500 g-ra kiegészítve) használjuk a meghatározáshoz.

4.

ELJÁRÁS Állítsuk be a minta hőmérsékletét 20 °C közelire. Tegyünk a mintából kis mennyiséget a refraktométer alsó prizmájára úgy, hogy a minta a két prizma egymásra nyomása után egyenletesen oszoljon el a felületen. A mérést az alkalmazott műszer használati utasításának megfelelően végezzük el. Olvassuk le a szacharóz tömegszázalékot 0,1 % pontossággal, vagy a törésmutatót négy tizedes pontossággal. Ugyanazzal az előkészített mintával végezzünk legalább két meghatározást. Jegyezzük fel a t °C hőmérsékletet.

5.

SZÁMÍTÁS

5.1.

A hőmérséklet korrekciója

5.1.1.

Szacharóz-tömegszázalékra skálázott műszerek esetében: használjuk az I. táblázatot a hőmérséklet korrekciójához.

5.1.2.

Törésmutatóra skálázott műszerek esetében: a II. táblázatban keressük meg a t °C hőmérsékletnél mért törésmutatót, hogy megkapjuk (első oszlop) a megfelelő szacharóz-tömegszázalékot t °C-on. Ezt az értéket az I. táblázat segítségével 20 °C-ra korrigáljuk.

5.2.

Must és sűrített must invertcukor-tartalma Keressük meg a 20 °C-on kapott szacharóz-tömegszázalékot a II. táblázatban, és olvassuk le ugyanabban a sorban

az egy tizedes pontossággal megadott

invertcukor- koncentrációt g/l-ben és g/kg-ban.

29


5.3.

Finomított mustsűrítmény invertcukor-tartalma Keressük meg a 20 °C-on kapott szacharóz-tömegszázalékot a III. táblázatban, és olvassuk le ugyanabban a sorban az egy tizedes pontossággal megadott invertcukorkoncentrációt g/l-ben és g/kg-ban. Ha a mérést hígított finomított mustsűrítménnyel végeztük, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

5.4.

Must, sűrített must és finomított mustsűrítmény törésmutatója A II. táblázatból a 20 °C-on mért törésmutató érték (öt tizedes pontossággal megadva) alapján meghatározzuk a hozzá tartozó szacharóz- tömegszázalékot 20 °C-on.

30


I. TÁBLÁZAT Elvégzendő korrekció, ha a szacharózkoncentrációt nem 20 °C hőmérsékleten határozták meg


Szacharóz, g/100 g minta 5

10

15

20

30

40

50

60

70

75

Levonni 15

0,25

0,27

0,31

0,31

0,34

0,35

0,36

0,37

0,36

0,36

16

0,21

0,23

0,27

0,27

0,29

0,31

0,31

0,32

0,31

0,23

17

0,16

0,18

0,20

0,20

0,22

0,23

0,23

0,23

0,20

0,17

18

0,11

0,12

0,14

0,15

0,16

0,16

0,15

0,12

0,12

0,09

19

0,06

0,07

0,08

0,08

0,08

0,09

0,09

0,08

0,07

0,05

Hozzáadni 21

0,06

0,07

0,07

0,07

0,07

0,07

0,07

0,07

0,07

0,07

22

0,12

0,14

0,14

0,14

0,14

0,14

0,14

0,14

0,14

0,14

23

0,18

0,20

0,20

0,21

0,21

0,21

0,21

0,21

0,21

0,21

24

0,24

0,26

0,26

0,27

0,28

0,28

0,28

0,28

0,29

0,29

25

0,30

0,32

0,32

0,34

0,36

0,36

0,36

0,36

0,36

0,37

A hőmérséklet nem térhet el a 20 ± 5 °C-tól.

31


II. TÁBLÁZAT A must és sűrített must g/l-ben és g/kg-ban kifejezett cukorkoncentrációja2 a refraktometriás módszerrel 20 °C-on meghatározott szacharóz-tömegkoncentráció, vagy a törésmutató alapján. A 20 °C-on mért sűrűség szintén megadásra került.

2

Cukortömegszázalék

Törésmutató 20 °C hőmérsékleten

Sűrűség 20 °C hőmérsékleten

Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

10,0 10,1 10,2 10,3 10,4 10,5 10,6 10,7 10,8 10,9

1,34781 1,34798 1,34814 1,34830 1,34845 1,34860 1,34875 1,34890 1,34906 1,34921

1,0390 1,0394 1,0398 1,0402 1,0406 1,0410 1,0414 1,0419 1,0423 1,0427

82,3 83,4 84,5 85,6 86,6 87,6 88,6 89,7 90,8 91,8

79,2 80,2 81,3 82,2 83,2 84,1 85,1 86,1 87,1 88,1

4,89 4,95 5,02 5,09 5,14 5,20 5,26 5,33 5,39 5,45

11,0 11,1 11,2 11,3 11,4 11,5 11,6 11,7 11,8 11,9

1,34936 1,34952 1,34968 1,34984 1,34999 1,35015 1,35031 1,35046 1,35062 1,35077

1,0431 1,0435 1,0439 1,0443 1,0447 1,0452 1,0456 1,0460 1,0464 1,0468

92,9 94,0 95,0 96,1 97,1 98,2 99,3 100,3 101,4 102,5

89,1 90,0 91,0 92,0 92,9 94,0 95,0 95,9 96,9 97,9

5,52 5,58 5,64 5,71 5,77 5,83 5,90 5,96 6,02 6,09

12,0 12,1 12,2 12,3 12,4 12,5 12,6 12,7 12,8 12,9

1,35092 1,35108 1,35124 1,35140 1,35156 1,35172 1,35187 1,35203 1,35219 1,35234

1,0473 1,0477 1,0481 1,0485 1,0489 1,0494 1,0498 1,0502 1,0506 1,0510

103,6 104,7 105,7 106,8 107,9 109,0 110,0 111,1 112,2 113,2

98,9 99,9 100,8 101,9 102,9 103,8 104,8 105,8 106,8 107,8

6,15 6,22 6,28 6,35 6,41 6,47 6,53 6,60 6,66 6,73

13,0 13,1 13,2 13,3 13,4 13,5 13,6 13,7 13,8

1,35249 1,35266 1,35282 1,35298 1,35313 1,35329 1,35345 1,35360 1,35376

1,0514 1,0519 1,0523 1,0527 1,0531 1,0536 1,0540 1,0544 1,0548

114,3 115,4 116,5 117,6 118,6 119,7 120,8 121,8 122,90

108,7 109,7 110,7 111,7 112,6 113,6 114,6 115,6 116,5

6,79 6,86 6,92 6,99 7,05 7,11 7,18 7,24 7,30

Alkoholtartalom térfogatszázalékban

20 °C hőmérsékleten

A cukorkoncentráció invertcukorként van kifejezve.

32





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

13,9

1,35391

1,0552

124,0

117,5

7,37

14,0 14,1 14,2 14,3 14,4 14,5 14,6 14,7 14,8 14,9 15,0 15,1 15,2 15,3 15,4 15,5 15,6 15,7 15,8 15,9

1,35407 1,35424 1,35440 1,35456 1,35472 1,35488 1,35503 1,35519 1,35535 1,35551 1,35567 1,35583 1,35599 1,35615 1,35631 1,35648 1,35664 1,35680 1,35696 1,35712

1,0557 1,0561 1,0565 1,0569 1,0574 1,0578 1,0582 1,0586 1,0591 1,0595 1,0599 1,0603 1,0608 1,0612 1,0616 1,0621 1,0625 1,0629 1,0633 1,0638

125,1 126,2 127,3 128,4 129,5 130,6 131,6 132,7 133,8 134,9 136,0 137,1 138,2 139,3 140,4 141,5 142,6 143,7 144,8 145,9

118,5 119,5 120,5 121,5 122,5 123,4 124,4 125,4 126,3 127,3 128,3 129,3 130,3 131,3 132,3 133,2 134,2 135,2 136,2 137,2

7,43 7,50 7,56 7,63 7,69 7,76 7,82 7,88 7,95 8,01 8,08 8,15 8,21 8,27 8,34 8,41 8,47 8,54 8,60 8,67

16,0 16,1 16,2 16,3 16,4 16,5 16,6 16,7 16,8 16,9

1,35728 1,35744 1,35760 1,35776 1,35793 1,35809 1,35825 1,35842 1,35858 1,35874

1,0642 1,0646 1,0651 1,0655 1,0660 1,0664 1,0668 1,0672 1,0677 1,0681

147,0 148,1 149,2 150,3 151,5 152,6 153,7 154,8 155,9 157,0

138,1 139,1 140,1 141,1 142,1 143,1 144,1 145,0 146,0 147,0

8,73 8,80 8,86 8,93 9,00 9,06 9,13 9,20 9,26 9,33

17,0 17,1 17,2 17,3 17,4 17,5 17,6 17,7 17,8 17,9

1,35890 1,35907 1,35923 1,35939 1,35955 1,35972 1,35988 1,36004 1,36020 1,36036

1,0685 1,0690 1,0694 1,0699 1,0703 1,0707 1,0711 1,0716 1,0720 1,0724

158,1 159,3 160,4 161,5 162,6 163,7 164,8 165,9 167,0 168,1

148,0 149,0 150,0 151,0 151,9 152,9 153,9 154,8 155,8 156,8

9,39 9,46 9,53 9,59 9,66 9,73 9,79 9,86 9,92 9,99

18,0 18,1 18,2 18,3 18,4 18,5 18,6

1,36053 1,36070 1,36086 1,36102 1,36119 1,36136 1,36152

1,0729 1,0733 1,0738 1,0742 1,0746 1,0751 1,0755

169,3 170,4 171,5 172,6 173,7 174,9 176,0

157,8 158,8 159,7 160,7 161,6 162,6 163,6

10,06 10,12 10,19 10,25 10,32 10,39 10,46



33





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

18,7 18,8 18,9

1,36169 1,36185 1,36201

1,0760 1,0764 1,0768

177,2 178,3 179,4

164,6 165,6 166,6

10,53 10,59 10,66

19,0 19,1 19,2 19,3 19,4 19,5 19,6 19,7 19,8 19,9 20,0 20,1 20,2 20,3 20,4 20,5 20,6 20,7 20,8 20,9

1,36217 1,36234 1,36251 1,36267 1,36284 1,36301 1,36318 1,36335 1,36351 1,36367 1,36383 1,36400 1,36417 1,36434 1,36451 1,36468 1,36484 1,36501 1,36518 1,36534

1,0773 1,0777 1,0782 1,0786 1,0791 1,0795 1,0800 1,0804 1,0809 1,0813 1,0817 1,0822 1,0826 1,0831 1,0835 1,0840 1,0844 1,0849 1,0853 1,0857

180,5 181,7 182,8 183,9 185,1 186,3 187,4 188,6 189,7 190,8 191,9 193,1 194,2 195,3 196,5 197,7 198,8 200,0 201,1 202,2

167,6 168,6 169,5 170,5 171,5 172,5 173,5 174,5 175,5 176,5 177,4 178,4 179,4 180,4 181,4 182,3 183,3 184,3 185,3 186,2

10,72 10,80 10,86 10,93 11,00 11,07 11,13 11,21 11,27 11,34 11,40 11,47 11,54 11,60 11,67 11,75 11,81 11,88 11,96 12,01

21,0 21,1 21,2 21,3 21,4 21,5 21,6 21,7 21,8 21,9

1,36550 1,36568 1,36585 1,36601 1,36618 1,36635 1,36652 1,36669 1,36685 1,36702

1,0862 1,0866 1,0871 1,0875 1,0880 1,0884 1,0889 1,0893 1,0897 1,0902

203,3 204,5 205,7 206,8 207,9 209,1 210,3 211,4 212,5 213,6

187,2 188,2 189,2 190,2 191,1 192,1 193,1 194,1 195,0 196,0

12,08 12,15 12,22 12,29 12,35 12,42 12,49 12,56 12,63 12,69

22,0 22,1 22,2 22,3 22,4 22,5 22,6 22,7 22,8 22,9

1,36719 1,36736 1,36753 1,36770 1,36787 1,36804 1,36820 1,36837 1,36854 1,36871

1,0906 1,0911 1,0916 1,0920 1,0925 1,0929 1,0933 1,0938 1,0943 1,0947

214,8 216,0 217,2 218,3 219,5 220,6 221,7 222,9 224,1 225,2

196,9 198,0 199,0 199,9 200,9 201,8 202,8 203,8 204,8 205,8

12,76 12,83 12,90 12,97 13,04 13,11 13,17 13,24 13,31 13,38

23,0 23,1 23,2 23,3 23,4

1,36888 1,36905 1,36922 1,36939 1,36956

1,0952 1,0956 1,0961 1,0965 1,0970

226,4 227,6 228,7 229,9 231,1

206,7 207,7 208,7 209,7 210,7

13,45 13,52 13,59 13,66 13,73



34





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

23,5 23,6 23,7 23,8 23,9

1,36973 1,36991 1,37008 1,37025 1,37042

1,0975 1,0979 1,0984 1,0988 1,0993

232,3 233,4 234,6 235,8 237,0

211,6 212,6 213,6 214,6 215,6

13,80 13,87 13,94 14,01 14,08

24,0 24,1 24,2 24,3 24,4 24,5 24,6 24,7 24,8 24,9 25,0 25,1 25,2 25,3 25,4 25,5 25,6 25,7 25,8 25,9

1,37059 1,37076 1,37093 1,37110 1,37128 1,37145 1,37162 1,37180 1,37197 1,37214 1,37232 1,37249 1,37266 1,37283 1,37300 1,37317 1,37335 1,37353 1,37370 1,37387

1,0998 1,1007 1,1011 1,1016 1,1022 1,1026 1,1030 1,1035 1,1041 1,1045 1,1049 1,1053 1,1057 1,1062 1,1068 1,1072 1,1076 1,1081 1,1087 1,1091

238,2 239,3 240,3 241,6 243,0 244,0 245,0 246,4 247,7 248,7 249,7 250,7 251,7 253,0 254,4 255,4 256,4 257,8 259,1 260,1

216,6 217,4 218,2 219,4 220,5 221,3 222,1 223,2 224,4 225,2 226,0 226,8 227,6 228,7 229,9 230,7 231,5 232,6 233,7 234,5

14,15 14,22 14,28 14,35 14,44 14,50 14,56 14,64 14,72 14,78 14,84 14,90 14,96 15,03 15,11 15,17 15,23 15,32 15,39 15,45

26,0 26,1 26,2 26,3 26,4 26,5 26,6 26,7 26,8 26,9

1,37405 1,37423 1,37440 1,37457 1,37475 1,37493 1,37510 1,37528 1,37545 1,37562

1,1095 1,1100 1,1106 1,1110 1,1114 1,1119 1,1125 1,1129 1,1133 1,1238

261,1 262,5 263,8 264,8 265,8 267,2 268,5 269,5 270,5 271,8

235,3 236,4 237,5 238,3 239,2 240,3 241,4 242,2 243,0 244,1

15,51 15,60 15,67 15,73 15,79 15,88 15,95 16,01 16,07 16,15

27,0 27,1 27,2 27,3 27,4 27,5 27,6 27,7 27,8 27,9

1,37580 1,37598 1,37615 1,37632 1,37650 1,37667 1,37685 1,37703 1,37721 1,37739

1,1144 1,1148 1,1152 1,1157 1,1163 1,1167 1,1171 1,1176 1,1182 1,1186

273,2 274,2 275,2 276,5 277,9 278,9 279,9 281,3 282,6 283,6

245,2 246,0 246,8 247,9 249,0 249,8 250,6 251,6 252,7 253,5

16,23 16,29 16,35 16,43 16,51 16,57 16,63 16,71 16,79 16,85

28,0 28,1 28,2

1,37757 1,37775 1,37793

1,1190 1,1195 1,1201

284,6 286,0 287,3

254,3 255,4 256,5

16,91 16,99 17,07



35





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

28,3 28,4 28,5 28,6 28,7 28,8 28,9

1,37810 1,37828 1,37846 1,37863 1,37881 1,37899 1,37917

1,1205 1,1209 1,1214 1,1220 1,1224 1,1228 1,1233

288,3 289,3 290,7 292,0 293,0 294,0 295,3

257,3 258,1 259,2 260,3 261,0 261,8 262,9

17,13 17,19 17,27 17,35 14,41 17,47 17,55

29,0 29,1 29,2 29,3 29,4 29,5 29,6 29,7 29,8 29,9 30,0 30,1 30,2 30,3 30,4 30,5 30,6 30,7 30,8 30,9

1,37935 1,37953 1,37971 1,37988 1,38006 1,38024 1,38042 1,38060 1,38078 1,38096 1,38114 1,38132 1,38150 1,38168 1,38186 1,38204 1,38222 1,38240 1,38258 1,38276

1,1239 1,1244 1,1250 1,1254 1,1258 1,1263 1,1269 1,1273 1,1277 1,1282 1,1288 1,1293 1,1298 1,1302 1,1307 1,1312 1,1317 1,1322 1,1327 1,1332

296,7 298,1 299,4 300,4 301,4 302,8 304,1 305,1 306,1 307,4 308,8 310,0 311,2 312,4 313,6 314,8 316,0 317,2 318,4 319,6

264,0 265,1 266,1 266,9 267,7 268,8 269,9 270,6 271,4 272,5 273,6 274,5 275,5 276,4 277,3 278,3 279,2 280,2 281,1 282,0

17,63 17,71 17,79 17,85 17,91 17,99 18,07 18,13 18,19 18,26 18,35 18,42 18,49 18,56 18,63 18,70 18,77 18,85 18,92 18,99

31,0 31,1 31,2 31,3 31,4 31,5 31,6 31,7 31,8 31,9

1,38294 1,38312 1,38330 1,38349 1,38367 1,38385 1,38403 1,38421 1,38440 1,38458

1,1336 1,1341 1,1346 1,1351 1,1356 1,1361 1,1366 1,1371 1,1376 1,1380

320,8 322,0 323,2 324,4 325,6 326,8 328,1 329,3 330,5 331,7

283,0 283,9 284,9 285,8 286,8 287,7 288,6 289,6 290,5 291,5

19,06 19,13 19,20 19,27 19,35 19,42 19,49 19,56 19,64 19,71

32,0 32,1 32,2 32,3 32,4 32,5 32,6 32,7 32,8 32,9

1,38476 1,38494 1,38513 1,38531 1,38550 1,38568 1,38586 1,38605 1,38623 1,38642

1,1385 1,1391 1,1396 1,1401 1,1406 1,1411 1,1416 1,1422 1,1427 1,1432

332,9 334,2 335,5 336,7 338,0 339,3 340,6 341,9 343,1 344,4

292,4 293,4 294,4 295,4 296,4 297,3 298,3 299,3 300,3 301,3

19,78 19,86 19,93 20,00 20,08 20,16 20,24 20,31 20,38 20,46

33,0

1,38660

1,1437

345,7

302,3

20,54



36





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

33,1 33,2 33,3 33,4 33,5 33,6 33,7 33,8 33,9

1,38678 1,38697 1,38715 1,38734 1,38753 1,38771 1,38790 1,38808 1,38827

1,1442 1,1447 1,1452 1,1457 1,1461 1,1466 1,1471 1,1476 1,1481

346,9 348,1 349,3 350,5 351,7 352,9 354,1 355,3 356,5

303,2 304,1 305,0 305,9 306,9 307,8 308,7 309,6 310,5

20,61 20,68 20,75 20,82 20,90 20,97 21,04 21,11 21,18

34,0 34,1 34,2 34,3 34,4 34,5 34,6 34,7 34,8 34,9 35,0 35,1 35,2 35,3 35,4 35,5 35,6 35,7 35,8 35,9

1,38845 1,38864 1,38882 1,38901 1,38919 1,38938 1,38957 1,38975 1,38994 1,39012 1,39031 1,39050 1,39069 1,39087 1,39106 1,39125 1,39144 1,39163 1,39181 1,39200

1,1486 1,1491 1,1496 1,1501 1,1506 1,1512 1,1517 1,1522 1,1527 1,1532 1,1537 1,1543 1,1548 1,1553 1,1558 1,1563 1,1568 1,1573 1,1579 1,1584

357,7 359,0 360,3 361,5 362,8 364,1 365,4 366,7 367,9 369,2 370,5 371,8 373,0 374,3 375,6 376,9 378,1 379,4 380,7 381,9

311,4 312,4 313,4 314,3 315,3 316,3 317,3 318,2 319,2 320,2 321,1 322,1 323,0 324,0 325,0 325,9 326,9 327,8 328,8 329,7

21,25 21,33 21,41 21,48 21,55 21,63 21,71 21,79 21,86 21,94 22,01 22,09 22,16 22,24 22,32 22,39 22,45 22,54 22,62 22,69

36,0 36,1 36,2 36,3 36,4 36,5 36,6 36,7 36,8 36,9

1,39219 1,39238 1,39257 1,39276 1,39295 1,39314 1,39332 1,39351 1,39370 1,39389

1,1589 1,1594 1,1599 1,1604 1,1610 1,1615 1,1620 1,1625 1,1630 1,1635

383,2 384,5 385,8 387,0 388,3 389,6 390,9 392,2 393,4 394,7

330,7 331,6 332,6 335,5 334,5 335,4 336,4 337,3 338,3 339,2

22,77 22,85 22,92 23,99 23,07 23,15 23,22 23,30 23,37 23,45

37,0 37,1 37,2 37,3 37,4 37,5 37,6 37,7 37,8 37,9

1,39408 1,39427 1,39446 1,39465 1,39484 1,39504 1,39523 1,39542 1,39561 1,39580

1,1641 1,1646 1,1651 1,1656 1,1661 1,1666 1,1672 1,1677 1,1682 1,1687

396,0 397,3 398,6 399,8 401,1 402,4 403,7 405,0 406,2 407,5

340,2 341,1 342,1 343,0 344,0 344,9 345,9 346,8 347,7 348,7

23,53 23,60 23,68 23,75 23,83 23,91 23,99 24,06 24,13 24,21



37





Cukor g/l-ben

38,0 38,1 38,2 38,3 38,4 38,5 38,6 38,7 38,8 38,9

1,39599 1,39618 1,39637 1,39657 1,39676 1,39695 1,39714 1,39733 1,39753 1,39772

1,1692 1,1698 1,1703 1,1708 1,1713 1,1718 1,1723 1,1728 1,1733 1,1739

408,8 410,1 411,3 412,6 413,9 415,2 416,4 417,7 419,0 420,2

349,6 350,6 351,5 352,4 353,4 354,3 355,2 356,1 357,1 358,0

24,29 24,37 24,44 24,51 24,59 24,67 24,74 24,82 24,90 24,97

39,0 39,1 39,2 39,3 39,4 39,5 39,6 39,7 39,8 39,9 40,0 40,1 40,2 40,3 40,4 40,5 40,6 40,7 40,8 40,9

1,39791 1,39810 1,39830 1,39849 1,39969 1,39888 1,39907 1,39927 1,39946 1,39966 1,39985 1,40004 1,40024 1,40043 1,40063 1,40083 1,40102 1,40122 1,40141 1,40161

1,1744 1,1749 1,1754 1,1759 1,1764 1,1770 1,1775 1,1780 1,1785 1,1790 1,1796 1,1801 1,1806 1,1812 1,1817 1,1823 1,1828 1,1833 1,1839 1,1844

421,5 422,8 424,1 425,3 426,6 427,9 429,2 430,5 431,7 433,0 434,3 435,6 437,0 438,3 439,7 441,0 442,3 443,7 445,0 446,4

358,9 359,8 360,8 361,7 362,6 363,6 364,5 365,4 366,3 367,3 368,2 369,2 370,1 371,1 372,1 373,0 374,0 374,9 375,9 376,9

25,04 25,12 25,20 25,27 25,35 25,42 25,50 25,58 25,65 25,73 25,80 25,88 25,96 26,04 26,12 26,20 26,28 26,36 26,44 26,52

41,0 41,1 41,2 41,3 41,4 41,5 41,6 41,7 41,8 41,9

1,40180 1,40200 1,40219 1,40239 1,40259 1,40279 1,40298 1,40318 1,40338 1,40357

1,1850 1,1855 1,1860 1,1865 1,1870 1,1875 1,1881 1,1886 1,1891 1,1896

447,7 449,0 450,2 451,5 452,8 454,1 455,3 456,6 457,9 459,1

377,8 378,7 379,6 380,5 381,4 382,3 383,2 384,2 385,1 386,0

26,60 26,68 26,75 26,83 26,90 26,98 27,05 27,13 27,21 27,28

42,0 42,1 42,2 42,3 42,4 42,5 42,6 42,7

1,40377 1,40397 1,40417 1,40436 1,40456 1,40476 1,40496 1,40516

1,1901 1,1907 1,1912 1,1917 1,1923 1,1928 1,1934 1,1939

460,4 461,7 463,1 464,4 465,8 467,2 468,5 469,9

386,9 387,8 388,8 389,7 390,7 391,6 392,6 393,5

27,35 27,43 27,52 27,59 27,68 27,76 27,84 27,92

Cukor g/kg-ban



38





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

42,8 42,9

1,40535 1,40555

1,1945 1,1950

471,2 472,6

394,5 395,4

28,00 28,08

43,0 43,1 43,2 43,3 43,4 43,5 43,6 43,7 43,8 43,9

1,40575 1,40595 1,40615 1,40635 1,40655 1,40675 1,40695 1,40715 1,40735 1,40755

1,1956 1,1961 1,1967 1,1972 1,1977 1,1983 1,1988 1,1994 1,1999 1,2005

473,9 475,2 476,6 477,9 479,3 480,6 481,9 483,3 484,6 486,0

396,4 397,3 398,3 399,2 400,1 401,1 402,0 402,9 403,9 404,8

28,16 28,23 28,32 28,40 28,48 28,56 28,63 28,72 28,79 28,88

44,0 44,1 44,2 44,3 44,4 44,5 44,6 44,7 44,8 44,9 45,0 45,1 45,2 45,3 45,4 45,5 45,6 45,7 45,8 45,9

1,40775 1,40795 1,40815 1,40836 1,40856 1,40876 1,40896 1,40916 1,40937 1,40957 1,40977 1,40997 1,41018 1,41038 1,41058 1,41079 1,41099 1,41119 1,41139 1,41160

1,2010 1,2015 1,2021 1,2026 1,2032 1,2037 1,2042 1,2048 1,2053 1,2059 1,2064 1,2070 1,2076 1,2081 1,2087 1,2093 1,2098 1,2104 1,2110 1,2115

487,3 188,6 490,0 491,3 492,7 494,0 495,3 496,7 498,0 499,4 500,7 502,1 503,5 504,9 506,3 507,8 509,2 510,6 512,0 513,4

405,7 406,7 407,6 408,5 409,5 410,4 411,3 412,3 413,2 414,1 415,0 416,0 417,0 417,9 418,9 419,9 420,9 421,8 422,8 423,7

28,95 29,03 29,11 29,19 29,27 29,35 29,43 29,51 29,59 29,67 29,75 29,83 29,92 30,00 30,08 30,17 30,25 30,34 30,42 30,50

46,0 46,1 46,2 46,3 46,4 46,5 46,6 46,7 46,8 46,9

1,41180 1,41200 1,41221 1,41241 1,41262 1,41282 1,41302 1,41323 1,41343 1,41364

1,2121 1,2127 1,2132 1,2137 1,2143 1,2148 1,2154 1,2159 1,2165 1,2170

514,8 516,1 517,5 518,8 520,2 521,5 522,8 524,2 525,5 526,9

424,7 425,6 426,5 427,5 428,4 429,3 430,2 431,1 432,0 432,9

30,59 30,66 30,75 30,82 30,91 30,99 31,06 31,15 31,22 31,31

47,0 47,1 47,2 47,3 47,4 47,5

1,41384 1,41405 1,41425 1,41446 1,41466 1,41487

1,2175 1,2181 1,2187 1,2192 1,2198 1,2204

528,2 529,6 531,0 532,4 533,8 535,3

433,8 434,8 435,7 436,7 437,6 438,6

31,38 31,47 31,55 31,63 31,72 31,81



39





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

47,6 47,7 47,8 47,9

1,41508 1,41528 1,41549 1,41569

1,2210 1,2215 1,2221 1,2227

536,7 538,1 539,5 540,9

439,5 440,5 441,4 442,4

31,89 31,97 32,05 32,14

48,0 48,1 48,2 48,3 48,4 48,5 48,6 48,7 48,8 48,9

1,41590 1,41611 1,41632 1,41652 1,41673 1,41694 1,41715 1,41736 1,41756 1,41777

1,2232 1,2238 1,2243 1,2249 1,2254 1,2260 1,2265 1,2271 1,2276 1,2282

542,3 543,6 545,0 546,3 547,7 549,1 550,4 551,8 553,1 554,5

443,3 444,2 445,1 446,0 446,9 447,8 448,7 449,7 450,6 451,6

32,22 32,30 32,38 32,46 32,59 32,63 32,70 32,79 32,86 32,95

49,0 49,1 49,2 49,3 49,4 49,5 49,6 49,7 49,8 49,9 50,0 50,1 50,2 50,3 50,4 50,5 50,6 50,7 50,8 50,9

1,41798 1,41819 1,41840 1,41861 1,41882 1,41903 1,41924 1,41945 1,41966 1,41987 1,42008 1,42029 1,42050 1,42071 1,42000 1,42114 1,42135 1,42156 1,42177 1,42198

1,2287 1,2293 1,2298 1,2304 1,2310 1,2315 1,2321 1,2327 1,2332 1,2338 1,2344 1,2349 1,2355 1,2361 1,2366 1,2372 1,2378 1,2384 1,2389 1,2395

555,8 557,2 558,6 560,0 561,4 562,8 564,2 565,6 567,0 568,4 569,8 571,2 572,6 574,0 575,4 576,9 578,3 579,7 581,1 582,5

452,3 453,3 454,2 455,1 456,1 457,0 457,9 458,8 459,8 460,7 461,6 462,5 463,5 464,4 465,3 466,2 467,2 468,1 469,0 469,9

33,02 33,11 33,19 33,27 33,36 33,44 33,52 33,61 33,69 33,77 33,86 33,94 34,02 34,10 34,19 34,28 34,36 34,44 34,53 34,61

51,0 51,1 51,2 51,3 51,4 51,5 51,6 51,7 51,8 51,9

1,42219 1,42240 1,42261 1,42283 1,42304 1,42325 1,42346 1,42367 1,42389 1,42410

1,2401 1,2407 1,2413 1,2419 1,2425 1,2431 1,2437 1,2443 1,2449 1,2455

583,9 585,4 586,9 588,3 589,8 591,3 592,8 594,3 595,7 597,2

470,9 471,8 472,8 473,8 474,7 475,7 476,6 477,6 478,6 479,5

34,69 34,78 34,87 34,95 35,04 35,13 35,22 35,31 35,39 35,48

52,0 52,1 52,2 52,3

1,42431 1,42452 1,42474 1,42495

1,2461 1,2466 1,2472 1,2478

598,7 600,1 601,5 602,9

480,5 481,5 482,3 483,2

35,57 35,65 35,74 35,82



40





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

52,4 52,5 52,6 52,7 52,8 52,9

1,42517 1,42538 1,42559 1,42581 1,42602 1,42624

1,2483 1,2489 1,2495 1,2500 1,2506 1,2512

604,3 605,8 607,2 608,6 610,0 611,4

484,1 485,0 485,9 486,8 487,7 488,6

35,91 35,99 36,08 36,16 36,24 36,33

53,0 53,1 53,2 53,3 53,4 53,5 53,6 53,7 53,8 53,9

1,42645 1,42666 1,42686 1,42707 1,42727 1,42748 1,42769 1,42789 1,42810 1,42830

1,2518 1,2524 1,2530 1,2536 1,2542 1,2548 1,2554 1,2560 1,2566 1,2571

612,8 614,3 615,8 617,2 618,7 620,2 621,7 623,2 624,6 626,1

489,6 490,5 491,4 492,4 493,3 494,3 495,2 496,2 497,1 498,0

36,41 36,50 36,59 36,67 36,76 36,85 36,94 37,03 37,11 37,20

54,0 54,1 54,2 54,3 54,4 54,5 54,6 54,7 54,8 54,9 55,0 55,1 55,2 55,3 55,4 55,5 55,6 55,7 55,8 55,9

1,42851 1,42874 1,42897 1,42919 1,42942 1,42965 1,42988 1,43011 1,43033 1,43056 1,43079 1,43101 1,43123 1,43145 1,43167 1,43189 1,43210 1,43232 1,43254 1,43276

1,2577 1,2583 1,2589 1,2595 1,2600 1,2606 1,2612 1,2617 1,2623 1,2629 1,2635 1,2640 1,2646 1,2652 1,2658 1,2664 1,2670 1,2676 1,2682 1,2688

627,6 629,0 630,4 631,8 633,2 634,7 636,1 637,5 6389 640,3 641,7 643,2 644,6 646,1 647,6 649,1 650,5 652,0 653,5 654,9

499,0 499,9 500,8 501,7 502,6 503,5 504,3 505,2 506,1 507,0 507,9 508,8 509,7 510,7 511,6 512,5 513,4 514,3 515,3 516,2

37,29 37,37 37,45 27,54 37,62 37,71 37,79 37,88 37,96 38,04 38,11 38,22 38,30 38,39 38,48 38,57 38,65 38,74 38,83 38,91

56,0 56,1 56,2 56,3 56,4 56,5 56,6 56,7 56,8 56,9

1,43298 1,43320 1,43342 1,43364 1,43386 1,43409 1,43431 1,43453 1,43475 1,43497

1,2694 1,2700 1,2706 1,2712 1,2718 1,2724 1,2730 1,2736 1,2742 1,2748

656,4 657,9 659,4 660,8 662,3 663,8 665,3 666,8 668,2 669,7

517,1 518,0 518,9 519,9 520,8 521,7 522,6 523,5 524,4 525,4

39,00 39,09 39,18 39,26 29,35 39,44 39,53 39,62 39,70 39,79

57,0 57,1

1,43519 1,43541

1,2754 1,2760

671,2 672,7

526,3 527,2

39,88 39,97



41





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

57,2 57,3 57,4 57,5 57,6 57,7 57,8 57,9

1,43563 1,43586 1,43608 1,43630 1,43652 1,43674 1,43697 1,43719

1,2766 1,2773 1,2779 1,2785 1,2791 1,2797 1,2804 1,2810

674,3 675,8 677,4 678,9 680,4 682,0 683,5 685,1

528,2 529,1 530,1 531,0 532,0 532,9 533,8 534,8

40,06 40,15 40,25 40,34 40,43 40,52 40,61 40,70

58,0 58,1 58,2 58,3 58,4 58,5 58,6 58,7 58,8 58,9

1,43741 1,43763 1,43786 1,43808 1,43831 1,43854 1,43876 1,43899 1,43921 1,43944

1,2816 1,2822 1,2828 1,2834 1,2840 1,2846 1,2852 1,2858 1,2864 1,2870

686,6 688,1 689,6 691,0 692,5 694,0 695,5 697,0 698,4 699,9

535,7 536,6 537,5 538,4 539,3 540,2 541,1 542,0 542,9 543,8

40,80 40,88 40,97 41,06 41,14 41,23 41,32 41,41 41,50 41,58

59,0 59,1 59,2 59,3 59,4 59,5 59,6 59,7 59,8 59,9 60,0 60,1 60,2 60,3 60,4 60,5 60,6 60,7 60,8 60,9

1,43966 1,43989 1,44011 1,44034 1,44056 1,44079 1,44102 1,44124 1,44147 1,44169 1,44192 1,44215 1,44237 1,44260 1,44283 1,44306 1,44328 1,44351 1,44374 1,44396

1,2876 1,2882 1,2888 1,2895 1,2901 1,2907 1,2913 1,2920 1,2926 1,2932 1,2938 1,2944 1,2950 1,2956 1,2962 1,2968 1,2974 1,2980 1,2986 1,2992

701,4 702,9 704,5 706,0 707,6 709,1 710,6 712,2 713,7 715,3 716,8 718,3 719,8 721,2 722,7 724,2 725,7 727,2 728,6 730,1

544,7 545,7 546,6 547,5 548,5 549,4 550,3 551,2 552,2 553,1 554,0 554,9 555,8 556,7 557,6 558,4 559,3 560,2 561,1 562,0

41,67 41,76 41,86 41,95 42,04 42,13 42,22 42,32 42,41 42,50 42,59 42,68 42,77 42,85 42,94 43,03 43,12 43,21 43,29 43,38

61,0 61,1 61,2 61,3 61,4 61,5 61,6 61,7 61,8 61,9

1,44419 1,44442 1,44465 1,44488 1,44511 1,44533 1,44556 1,44579 1,44602 1,44625

1,2998 1,3004 1,3011 1,3017 1,3023 1,3030 1,3036 1,3042 1,3048 1,3055

731,6 733,1 734,7 736,2 737,8 739,4 740,9 742,5 744,0 745,6

562,8 563,8 564,7 565,6 566,5 567,4 568,4 569,3 570,2 571,1

43,47 43,56 43,65 43,74 43,84 43,93 44,02 44,12 44,21 44,30



42





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

62,0 62,1 62,2 62,3 62,4 62,5 62,6 62,7 62,8 62,9

1,44648 1,44671 1,44694 1,44717 1,44740 1,44764 1,44787 1,44810 1,44833 1,44856

1,3061 1,3067 1,3073 1,3080 1,3086 1,3092 1,3098 1,3104 1,3111 1,3117

747,1 748,6 750,2 751,7 753,3 754,8 756,3 757,9 759,4 761,0

572,0 572,9 573,8 574,7 575,6 576,5 577,4 578,3 579,2 580,1

44,39 44,48 44,57 44,66 44,76 44,85 44,94 45,03 45,12 45,21

63,0 63,1 63,2 63,3 63,4 63,5 63,6 63,7 63,8 63,9

1,44879 1,44902 1,44926 1,44949 1,44972 1,44996 1,45019 1,45042 1,45065 1,45089

1,3123 1,3130 1,3136 1,3143 1,3149 1,3156 1,3162 1,3169 1,3175 1,3182

762,5 764,1 765,7 767,3 768,9 770,6 772,2 773,8 775,4 777,0

581,0 582,0 582,9 583,8 584,8 585,7 586,6 587,6 588,5 589,4

45,31 45,40 45,49 45,59 45,69 45,79 45,88 45,98 46,07 46,17

64,0 64,1 64,2 64,3 64,4 64,5 64,6 64,7 64,8 64,9 65,0 65,1 65,2 65,3 65,4 65,5 65,6 65,7 65,8 65,9

1,45112 1,45135 1,45159 1,45183 1,45206 1,45230 1,45253 1,45276 1,45300 1,45324 1,45347 1,45371 1,45394 1,45418 1,45441 1,45465 1,45489 1,45512 1,45536 1,45559

1,3188 1,3195 1,3201 1,3207 1,3213 1,3219 1,3266 1,3232 1,3238 1,3244 1,3251 1,3257 1,3264 1,3270 1,3277 1,3283 1,3290 1,3296 1,3303 1,3309

778,6 780,1 781,7 783,2 784,8 786,3 787,8 789,4 790,9 792,5 794,0 795,6 797,2 798,8 800,4 802,1 803,7 805,3 806,9 808,5

590,4 591,3 592,1 593,0 593,9 594,8 595,7 596,6 597,5 598,3 599,2 600,1 601,1 602,0 602,9 603,8 604,7 605,6 606,6 607,5

46,26 46,35 46,45 46,53 46,63 46,72 46,81 46,90 46,99 47,09 47,18 47,27 47,37 47,46 47,56 47,66 47,75 47,85 47,94 48,04

66,0 66,1 66,2 66,3 66,4 66,5 66,6 66,7 66,8

1,45583 1,45607 1,45630 1,45654 1,45678 1,45702 1,45725 1,45749 1,45773

1,3316 1,3322 1,3328 1,3335 1,3341 1,3347 1,3353 1,3360 1,3366

810,1 811,6 813,2 814,8 816,3 817,9 819,4 820,9 822,5

608,4 609,3 610,1 611,0 611,9 612,8 613,6 614,5 615,4

48,13 48,22 48,32 48,41 48,50 48,60 48,69 48,77 48,87



43





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

66,9

1,45796

1,3372

824,1

616,2

48,97

67,0 67,1 67,2 67,3 67,4 67,5 67,6 67,7 67,8 67,9

1,45820 1,45844 1,45868 1,45892 1,45916 1,45940 1,45964 1,45988 1,46012 1,46036

1,3378 1,3385 1,3391 1,3398 1,3404 1,3411 1,3418 1,3424 1,3431 1,3437

825,6 827,2 828,8 830,4 832,0 833,7 835,3 836,9 838,5 840,1

617,1 618,0 618,9 619,8 620,7 621,6 622,5 623,4 624,3 625,2

49,05 49,15 49,24 49,34 49,43 49,53 49,63 49,73 49,82 49,92

68,0 68,1 68,2 68,3 68,4 68,5 68,6 68,7 68,8, 68,9

1,46060 1,46084 1,46108 1,46132 1,46156 1,46181 1,46205 1,46229 1,46253 1,46277

1,3444 1,3450 1,3457 1,3464 1,3471 1,3478 1,3484 1,3491 1,3498 1,3505

841,7 843,4 845,1 846,7 848,4 850,1 851,8 853,5 855,1 856,8

626,1 627,0 628,0 628,9 629,8 630,8 631,7 632,6 633,5 634,5

50,01 50,11 50,21 50,31 50,41 50,51 50,61 50,71 50,81 50,91

69,0 69,1 69,2 69,3 69,4 69,5 69,6 69,7 69,8 69,9 70,0 70,1 70,2 70,3 70,4 70,5 70,6 70,7 70,8 70,9

1,46301 1,46325 1,46350 1,46374 1,46398 1,46423 1,46447 1,46471 1,46495 1,46520 1,46544 1,46568 1,46593 1,46618 1,46642 1,46667 1,46691 1,46715 1,46740 1,46765

1,3512 1,3518 1,3525 1,3531 1,3538 1,3544 1,3551 1,3557 1,3564 1,3570 1,3577 1,3583 1,3590 1,3596 1,3603 1,3609 1,3616 1,3622 1,3629 1,3635

858,5 860,1 861,7 863,3 864,9 866,9 862,2 869,8 871,4 873,0 874,6 876,2 877,8 879,4 881,0 882,7 884,3 885,9 887,5 889,1

635,4 636,3 637,2 638,0 638,9 639,8 640,7 641,6 642,4 643,3 644,2 645,1 645,9 646,8 647,7 648,6 649,4 650,3 651,2 652,1

51,01 51,10 51,20 51,29 51,30 51,49 51,58 51,68 51,78 51,87 51,97 52,06 52,15 52,25 52,35 52,45 52,54 52,64 52,73 52,83

71,0 71,1 71,2 71,3 71,4 71,5 71,6

1,46789 1,46814 1,46838 1,46863 1,46888 1,46913 1,46937

1,3642 1,3649 1,3655 1,3662 1,3669 1,3676 1,3683

890,7 892,4 894,1 895,7 897,4 899,1 900,8

652,9 653,8 654,7 655,6 656,5 657,4 658,3

52,92 53,02 53,12 53,22 53,32 53,42 53,52



44





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

71,7 71,8 71,9

1,46962 1,46987 1,47011

1,3689 1,3696 1,3703

902,5 904,1 905,8

659,2 660,1 661,0

53,62 53,72 53,82

72,0 72,1 72,2 72,3 72,4 72,5 72,6 72,7 72,8 72,9

1,47036 1,47061 1,47086 1,47110 1,47135 1,47160 1,47185 1,47210 1,47234 1,47259

1,3710 1,3717 1,3723 1,3730 1,3737 1,3744 1,3750 1,3757 1,3764 1,3771

907,5 909,2 910,8 912,5 914,2 915,9 917,5 919,2 920,9 922,5

661,9 662,8 663,7 664,6 665,5 666,4 667,3 668,2 669,0 669,9

53,92 54,02 54,12 54,22 54,32 54,42 54,51 54,62 54,72 54,81

73,0 73,1 73,2 73,3 73,4 73,5 73,6 73,7 73,8 73,9

1,47284 1,47309 1,47334 1,47359 1,47384 1,47409 1,47434 1,47459 1,47484 1,47509

1,3777 1,3784 1,3791 1,3798 1,3804 1,3811 1,3818 1,3825 1,3832 1,3838

924,2 925,9 927,6 929,2 930,9 932,6 934,3 936,0 937,6 939,3

670,8 671,7 672,6 673,5 674,4 675,2 676,1 677,0 677,9 678,8

64,91 55,01 55,11 55,21 55,31 55,41 55,51 55,61 55,71 55,81

74,0 74,1 74,2 74,3 74,4 74,5 74,6 74,7 74,8 74,9

1,47534 1,47559 1,47584 1,47609 1,47634 1,47660 1,47685 1,47710 1,47735 1,47760

1,3845 1,3852 1,3859 1,3866 1,3872 1,3879 1,3886 1,3893 1,3900 1,3906

941,0 942,7 944,4 946,0 947,7 949,4 951,1 952,8 954,4 956,1

679,7 680,5 681,4 682,3 683,2 684,0 684,9 685,8 686,7 687,5

55,91 56,01 56,11 56,21 56,31 56,41 56,51 56,61 56,71 56,81



45


III. TÁBLÁZAT A finomított mustsűrítmény g/l-ben és g/kg-ban kifejezett cukorkoncentrációja3 a refraktometriás módszerrel 20 °C-on meghatározott szacharóz-tömegkoncentráció, vagy a törésmutató alapján. A 20 °C-on mért sűrűség szintén megadásra került.

3

Cukor tömegszázalék



Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban

Alkoholtartalom térfogatszázalékban 20 °C hőmérsékleten

50,0 50,1 50,2 50,3 50,4 50,5 50,6 50,7 50,8 50,9

1,42008 1,42029 1,42050 1,42071 1,42092 1,42113 1,42135 1,42156 1,42177 1,42198

1,2342 1,2348 1,2355 1,2362 1,2367 1,2374 1,2381 1,2386 1,2391 1,2396

627,6 629,3 630,9 632,4 634,1 635,7 637,3 638,7 640,4 641,9

508,5 509,6 510,6 511,6 512,7 513,7 514,7 515,7 516,8 517,8

37,28 27,38 27,48 37,56 37,66 37,76 37,85 37,94 38,04 38,13

51,0 51,1 51,2 51,3 51,4 51,5 51,6 51,7 51,8 51,9

1,42219 1,42240 1,42261 1,42282 1,42304 1,42325 1,42347 1,42368 1,42389 1,42410

1,2401 1,2406 1,2411 1,2416 1,2424 1,2427 1,2434 1,2441 1,2447 1,2454

643,4 645,0 646,5 648,1 649,6 651,2 652,9 654,5 656,1 657,8

518,8 519,9 520,9 522,0 523,0 524,0 525,1 526,1 527,1 528,2

38,22 38,31 38,40 38,50 38,59 38,68 38,78 38,88 38,97 39,07

52,0 52,1 52,2 52,3 52,4 52,5 52,6 52,7 52,8 52,9

1,42432 1,42453 1,42475 1,42496 1,42517 1,42538 1,42560 1,42581 1,42603 1,42624

1,2461 1,2466 1,2470 1,2475 1,2480 1,2486 1,2493 1,2500 1,2506 1,2513

659,4 661,0 662,5 664,1 665,6 667,2 668,9 670,5 672,2 673,8

529,2 530,2 531,3 532,3 533,3 534,4 535,4 536,4 537,5 538,5

39,17 39,26 39,35 39,45 39,54 39,63 39,73 39,83 39,93 40,02

53,0 53,1 53,2 53,3 53,4 53,5 53,6 53,7 53,8 53,9

1,42645 1,42667 1,42689 1,42711 1,42733 1,42754 1,42776 1,42797 1,42819 1,42840

1,2520 1,2525 1,2530 1,2535 1,2540 1,2546 1,2553 1,2560 1,2566 1,2573

675,5 677,1 678,5 680,2 681,8 683,4 685,1 686,7 688,4 690,1

539,5 540,6 541,5 542,6 543,7 544,7 545,8 546,7 547,8 548,9

40,12 40,22 40,30 40,40 40,50 40,59 40,69 40,79 40,89 40,99

A cukorkoncentráció invertcukorként van kifejezve.

46





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban


54,0 54,1 54,2 54,3 54,4 54,5 54,6 54,7 54,8 54,9 55,0 55,1 55,2 55,3 55,4 55,5 55,6 55,7 55,8 55,9

1,42861 1,42884 1,42906 1,42927 1,42949 1,42971 1,42993 1,42014 1,42036 1,42058 1,43079 1,43102 1,43124 1,43146 1,43168 1,43189 1,43211 1,43233 1,43255 1,43277

1,2580 1,2585 1,2590 1,2595 1,2600 1,2606 1,2613 1,2620 1,2625 1,2630 1,2635 1,2639 1,2645 1,2652 1,2659 1,2665 1,2672 1,2679 1,2685 1,2692

691,7 693,3 694,9 696,5 698,1 699,7 701,4 703,1 704,7 706,2 707,8 709,4 711,0 712,7 714,4 716,1 717,8 719,5 721,1 722,8

549,8 550,9 551,9 553,0 554,0 555,1 556,1 557,1 558,2 559,1 560,2 561,3 562,3 563,3 564,3 565,4 566,4 567,5 568,5 569,5

41,09 41,18 41,28 41,37 41,47 41,56 41,66 41,76 41,86 41,95 42,04 42,14 42,23 42,33 42,44 42,54 42,64 42,74 42,83 42,93

56,0 56,1 56,2 56,3 56,4 56,5 56,6 56,7 56,8 56,9

1,43298 1,43321 1,43343 1,43365 1,43387 1,43409 1,43431 1,43454 1,43476 1,43498

1,2699 1,2703 1,2708 1,2713 1,2718 1,2724 1,2731 1,2738 1,2744 1,2751

724,5 726,1 727,7 729,3 730,9 732,6 734,3 737,6 737,6 739,4

570,5 571,6 572,6 573,7 574,7 575,8 576,8 577,8 578,8 579,9

43,04 43,13 43,23 43,32 43,42 43,52 43,62 43,72 43,81 43,921

57,0 57,1 57,2 57,3 57,4 57,5 57,6 57,7 57,8 57,9

1,43519 1,43542 1,43564 1,43586 1,43609 1,43631 1,43653 1,43675 1,43698 1,43720

1,2758 1,2763 1,2768 1,2773 1,2778 1,2784 1,2791 1,2798 1,2804 1,2810

741,1 742,8 744,4 745,9 747,6 746,3 751,0 752,7 754,4 756,1

580,9 582,0 583,0 584,0 585,1 586,1 587,1 588,1 589,2 590,2

44,02 44,12 44,22 44,31 44,41 44,51 44,61 44,71 44,81 44,91

58,0 58,1 58,2 58,3 58,4 58,5 58,6 58,7 58,8 58,9

1,43741 1,43764 1,43784 1,43809 1,43832 1,43854 1,43877 1,43899 1,43922 1,43944

1,2818 1,2822 1,2827 1,2832 1,2837 1,2843 1,2850 1,2857 1,2863 1,2869

757,8 759,5 761,1 762,6 764,3 766,0 767,8 769,5 771,1 772,9

591,2 592,3 593,4 594,3 595,4 596,4 597,5 598,5 599,5 600,6

45,01 45,11 45,21 45,30 45,40 45,50 45,61 45,71 45,80 45,91

59,0 59,1

1,43966 1,43988

1,2876 1,2882

774,6 776,3

601,6 602,6

46,01 46,11

47





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban


59,2 59,3 59,4 59,5 59,6 59,7 59,8 59,9 60,0 60,1 60,2 60,3 60,4 60,5 60,6 60,7 60,8 60,9

1,44011 1,44034 1,44057 1,44079 1,44102 1,44124 1,44147 1,44169 1,44192 1,44215 1,44238 1,44260 1,44283 1,44305 1,44328 1,44351 1,44374 1,44397

1,2889 1,2896 1,2902 1,2909 1,2916 1,2921 1,2926 1,2931 1,2936 1,2942 1,2949 1,2956 1,2962 1,2969 1,2976 1,2981 1,2986 1,2991

778,1 779,8 781,6 783,3 785,2 786,8 788,4 790,0 791,7 793,3 795,2 796,9 798,6 800,5 802,2 803,9 805,5 807,1

603,7 604,7 605,8 606,8 607,9 608,9 609,9 610,9 612,0 613,0 614,1 615,1 616,1 617,2 618,2 619,3 620,3 621,3

46,22 46,32 46,43 46,53 46,64 46,74 46,83 46,93 47,03 47,12 17,23 47,34 47,44 47,55 47,65 47,75 47,85 47,94

61,0 61,1 61,2 61,3 61,4 61,5 61,6 61,7 61,8 61,9

1,44419 1,44442 1,44465 1,44488 1,44511 1,44534 1,44557 1,44580 1,44603 1,44626

1,2996 1,3002 1,3009 1,3016 1,3022 1,3029 1,3036 1,3042 1,3049 1,3056

808,7 810,5 812,3 814,2 815,8 817,7 819,4 821,3 823,0 824,8

622,3 623,4 624,4 625,5 626,5 627,6 628,6 629,7 630,7 631,7

48,04 48,14 48,25 48,36 48,46 48,57 48,67 48,79 48,89 48,99

62,0 62,1 62,2 62,3 62,4 62,5 62,6 62,7 62,8 62,9

1,44648 1,44672 1,44695 1,44718 1,44741 1,44764 1,44787 1,44810 1,44833 1,44856

1,3062 1,3068 1,3075 1,3080 1,3085 1,3090 1,3095 1,3101 1,3108 1,3115

826,6 828,3 830,0 831,8 833,4 835,1 836,8 838,5 840,2 842,1

632,8 633,8 634,8 635,9 636,9 638,0 639,0 640,0 641,0 642,1

49,10 49,20 49,30 49,40 49,50 49,60 49,71 49,81 49,91 50,02

63,0 63,1 63,2 63,3 63,4 63,5 63,6 63,7 63,8 63,9

1,44879 1,44902 1,44926 1,44949 1,44972 1,44995 1,45019 1,45042 1,45065 1,45088

1,3121 1,3128 1,3135 1,3141 1,3148 1,3155 1,3161 1,3168 1,3175 1,3180

843,8 845,7 847,5 849,3 851,1 853,0 854,7 856,5 858,4 860,0

643,1 644,2 645,2 646,3 647,3 648,4 649,4 650,4 651,5 652,5

50,12 50,23 50,34 50,54 50,56 50,67 50,77 50,88 50,99 51,08

64,0 64,1 64,2 64,3

1,45112 1,45135 1,45158 1,45181

1,3185 1,3190 1,3195 1,3201

861,6 863,4 865,1 866,9

653,5 654,6 655,6 656,7

51,18 51,29 51,39 51,49

48





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban


64,4 64,5 64,6 64,7 64,8 64,9 65,0 65,1 65,2 65,3 65,4 65,5 65,6 65,7 65,8 65,9

1,45205 1,45228 1,45252 1,45275 1,45299 1,45322 1,45347 1,45369 1,45393 1,45416 1,45440 1,45463 1,45487 1,45510 1,45534 1,45557

1,3208 1,3215 1,3221 1,3228 1,3235 1,3241 1,3248 1,3255 1,3261 1,3268 1,3275 1,3281 1,3288 1,3295 1,3301 1,3308

868,7 870,6 872,3 874,1 876,0 877,8 879,7 881,5 883,2 885,0 886,9 888,8 890,6 892,4 894,2 896,0

657,7 658,8 659,8 660,8 661,9 662,9 664,0 665,0 666,0 667,0 668,1 669,2 670,2 671,2 672,3 673,3

51,60 51,71 51,81 51,92 52,03 52,14 52,25 52,36 52,46 52,57 52,68 52,79 52,90 53,01 5,12 53,22

66,0 66,1 66,2 66,3 66,4 66,5 66,6 66,7 66,8 66,9

1,45583 1,45605 1,45629 1,45652 1,45676 1,45700 1,45724 1,45747 1,45771 1,45795

1,3315 1,3320 1,3325 1,3330 1,3345 1,3341 1,3348 1,3355 1,3361 1,3367

898,0 899,6 901,3 903,1 904,8 906,7 908,5 910,4 912,2 913,9

674,4 675,4 676,4 677,5 678,5 679,6 680,6 681,7 682,7 683,7

53,34 53,44 53,54 53,64 53,75 53,86 53,96 54,08 54,18 54,29

67,0 67,1 67,2 67,3 67,4 67,5 67,6 67,7 67,8 67,9

1,45820 1,45843 1,45867 1,45890 1,45914 1,45938 1,45962 1,45986 1,46010 1,46034

1,3374 1,3380 1,3387 1,3395 1,3400 1,3407 1,3415 1,3420 1,3427 1,3434

915,9 917,6 919,6 921,4 923,1 925,1 927,0 928,8 930,6 932,6

684,8 685,8 686,9 687,9 688,9 690,0 691,0 692,1 693,1 694,2

54,40 54,51 54,62 54,73 54,83 54,95 55,06 55,17 55,28 55,40

68,0 68,1 68,2 68,3 68,4 68,5 68,6 68,7 68,8, 68,9

1,46060 1,46082 1,46106 1,46130 1,46154 1,46178 1,46202 1,46226 1,46251 1,46275

1,3440 1,3447 1,3454 1,3460 1,3466 1,3473 1,3479 1,3486 1,3493 1,3499

934,4 936,2 938,0 939,9 941,8 943,7 945,4 947,4 949,2 951,1

695,2 696,2 697,2 698,3 699,4 700,4 701,4 702,5 703,5 704,6

55,50 55,61 55,72 55,83 55,94 56,06 56,16 56,28 56,38 56,50

69,0 69,1 69,2 69,3 69,4 69,5

1,46301 1,46323 1,46347 1,46371 1,46396 1,46420

1,3506 1,3513 1,3519 1,3526 1,3533 1,3539

953,0 954,8 956,7 958,6 960,6 962,4

705,6 706,6 707,7 708,7 709,8 710,8

56,61 56,72 56,83 56,94 57,06 57,17

49





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban


69,6 69,7 69,8 69,9 70,0 70,1 70,2 70,3 70,4 70,5 70,6 70,7 70,8 70,9

1,46444 1,46468 1,46493 1,46517 1,46544 1,46565 1,46590 1,46614 1,46639 1,46663 1,46688 1,46712 1,46737 1,46761

1,3546 1,3553 1,3560 1,3566 1,3573 1,3579 1,3586 1,3593 1,3599 1,3606 1,3613 1,3619 1,3626 1,3633

964,3 966,2 968,2 970,0 971,8 973,8 975,6 977,6 979,4 981,3 983,3 985,2 987,1 988,9

711,9 712,9 714,0 715,0 716,0 717,1 718,1 719,2 720,2 721,2 722,3 723,4 724,4 725,4

57,28 57,39 57,51 57,62 57,72 57,84 57,95 58,07 58,18 58,29 58,41 58,52 58,63 58,74

71,0 71,1 71,2 71,3 71,4 71,5 71,6 71,7 71,8 71,9

1,46789 1,46810 1,46835 1,46859 1,46884 1,46908 1,46933 1,46957 1,46982 1,47007

1,3639 1,3646 1,3653 1,3659 1,3665 1,3672 1,3678 1,3685 1,3692 1,3698

990,9 992,8 994,8 996,6 998,5 1000,4 1002,2 1004,2 1006,1 1008,0

726,5 727,5 728,6 729,6 730,7 731,7 732,7 733,8 734,8 735,9

58,86 58,97 59,09 59,20 59,31 59,42 59,53 59,65 59,76 59,88

72,0 72,1 72,2 72,3 72,4 72,5 72,6 72,7 72,8 72,9

1,47036 1,47056 1,47081 1,47106 1,47131 1,47155 1,47180 1,47205 1,47230 1,47254

1,3705 1,3712 1,3718 1,3725 1,3732 1,3738 1,3745 1,3752 1,3758 1,3765

1009,9 1012,0 1013,8 1015,7 1017,7 1019,5 1021,5 1023,4 1025,4 1027,3

736,9 738,0 739,0 740,0 741,1 742,1 743,2 744,2 745,3 746,3

59,99 60,11 60,22 60,33 60,45 60,56 60,68 60,79 60,91 61,02

73,0 73,1 73,2 73,3 73,4 73,5 73,6 73,7 73,8 73,9

1,47284 1,47304 1,47329 1,47354 1,47379 1,47404 1,47429 1,47454 1,47479 1,47504

1,3772 1,3778 1,3785 1,3792 1,3798 1,3805 1,3812 1,3818 1,3825 1,3832

1029,3 1031,2 1033,2 1035,1 1037,1 1039,0 1040,9 1042,8 1044,8 1046,8

747,4 748,4 749,5 750,5 751,6 752,6 753,6 754,7 755,7 756,8

61,14 61,25 61,37 61,48 61,60 61,72 61,83 61,94 62,06 62,18

74,0 74,1 74,2 74,3 74,4 74,5 74,6 74,7

1,47534 1,47554 1,47579 1,47604 1,47629 1,47654 1,47679 1,47701

1,3838 1,3845 1,3852 1,3858 1,3865 1,3871 1,3878 1,3885

1048,6 1050,7 1052,6 1054,6 1056,5 1058,5 1060,4 1062,3

757,8 758,9 759,9 761,0 762,0 763,0 764,1 765,1

62,28 62,41 62,52 62,64 62,76 62,87 62,99 63,10

50





Cukor g/l-ben

Cukor g/kg-ban


74,8 74,9

1,47730 1,47755

1,3892 1,3898

1064,4 1066,3

766,2 767,2

63,23 63,33

75,00

1,47785

1,3905

1068,3

768,3

63,46

51


TÉRFOGATSZÁZALÉKBAN MEGHATÁROZOTT ALKOHOLTARTALOM4

3. 1.

MEGHATÁROZÁS A térfogatszázalékban meghatározott alkoholtartalom a 100 liter borban található etil-alkohol mennyisége literben kifejezve, mindkét térfogatot 20 °C hőmérsékleten mérve. A ‘% (V/V)‘ szimbólummal fejezzük ki.

Megjegyzés: Az etanol és homologjai, valamint ezek észterei az alkoholtartalom részei, mivel ezek átmennek a desztillátumba. 2.

A MÓDSZEREK ELVE

2.1.

Kalcium-hidroxiddal lúgosított bor desztillációja, majd a párlat alkoholtartalmának meghatározása.

2.2.

Referencia-módszer: a párlat sűrűségének meghatározása piknométerrel.

2.3.

Szokásos módszerek:

2.3.1.

A párlat alkoholtartalmának meghatározása areométerrel.

2.3.2.

A párlat alkoholtartalmának meghatározása a sűrűség hidrosztatikus mérleggel való mérésével.

2.3.3.

A párlat alkoholtartalmának refraktometriás meghatározása.

Megjegyzés: Ahhoz, hogy megkapjuk a párlat sűrűségéből az alkoholtartalmat, használjuk az I., II. és III. táblázatot. Ezek kiszámítása a Nemzetközi Hatósági Mérésügyi Szervezet által, annak 22. ajánlásában 1972-ben közzétett és az OIV által elfogadott (1974. évi közgyűlés) Nemzetközi Alkoholtartalom Táblázatok alapján történt. Az I. táblázat adja meg az alkohol térfogatszázalékára és az etil-alkohol--víz elegyek sűrűségére vonatkozó összefüggést a hőmérséklet függvényében.

4

A 2676/1990/ EK rendelet mellékletének 3. módszere

52


3.

A PÁRLAT KÉSZÍTÉSE

3.1.

Eszközök

3.1.1.

Desztillálóberendezés, amely a következőkből áll: —

1 literes normálcsiszolatos gömblombik,

—

kb. 20 cm magas rektifikáló oszlop vagy egyéb olyan készülék, amely megakadályozza a felhabzást,

—

hőforrás; az extraktanyagok odaégését megfelelő eszközzel meg kell akadályozni,

—

egy hűtő (kondenzátor), ami vékony kivezető csőben végződik, a párlatot a néhány ml vizet tartalmazó felfogó edény aljára vezeti.

3.1.2.

Vízgőz-desztillációs készülék, amely az alábbiakból áll: 1.

vízgőzgenerátor;

2.

gőzcső;

3.

rektifikáló oszlop;

4.

hűtő.

Bármilyen desztilláló, vagy vízgőz-desztillációs berendezés használható, ha megfelel az alábbi feltételeknek: Desztilláljunk 10%(V/V)alkoholtartalmú etil-alkohol--víz elegyet egymás után ötször.

A

párlatnak

az

ötödik

lepárlás

után

legalább

9,9%

(V/V)

alkoholtartalomúnak kell lennie, azaz az egyes lepárlások során az alkoholveszteség nem lehet 0,02% (V/V)-nél több. 3.2.

Reagensek

3.2.1.

2 M kalcium-hidroxid szuszpenzió [Ca(OH)2], amelyet úgy kapunk, hogy 1 liter 6070 °C hőmérsékletű vizet óvatosan ráöntünk 120 g égetett mészre (kalcium-oxidra).

3.3.

A minta előkészítése Távolítsuk el a szén-dioxid nagy részét az új borokból és pezsgőkből, ehhez 250300 ml bort 500 ml-es lombikban rázogatunk.

3.4.

Eljárás 200 ml-es mérőlombikot jelig töltünk borral és megállapítjuk a hőmérsékletét. Töltsük át a bort a desztilláló-, illetve a vízgőz-desztillációs berendezés desztilláló lombikjába, és öblítsük ki egymás után négyszer a mérőlombikot 5ml vízzel, amit a 53


szintén a desztillálólombikba öntünk. Adjunk hozzá 10 ml kalcium-hidroxid-oldatot (3.2.1. szakasz) és néhány darab inert, porózus forrkövet ((horzsakő). Gyűjtsük a párlatot abba a 200 ml-es mérőlombikba, amelyet a bor beméréséhez használtunk. Desztilláció esetén gyűjtsük össze az eredeti térfogat mintegy háromnegyedét, ha vízgőz-desztillációt alkalmazunk, akkor 198-199 ml párlatot. Töltsük fel a mérőlombikot 200 ml-re desztillált vízzel, miközben a párlatot 2 °C-kal a kiinduló hőmérsékleten belül tartjuk. Keverjük össze gondosan, körkörös mozgatással.

Megjegyzés: A különösen nagy koncentrációban ammóniumionokat tartalmazó borok esetében a párlatot ismételten le kell párolni a fent leírt körülmények között, a kalcium— hidroxid-szuszpenzió helyett 1 ml 10% (V/V)-os hígított kénsavoldat hozzáadásával. 4.

REFERENCIA-MÓDSZER A párlat alkoholtartalmát piknométerrel mérjük.

4.1.

Eszközök

4.1.1.

Használjunk kalibrált piknométert, amint azt a sűrűség és a relatív sűrűség méréséről szóló fejezetben leírtuk

4.2.

Eljárás Mérjük meg a párlat (3.4. szakasz ) látszólagos sűrűségét t °C hőmérsékleten, amint azt a sűrűség és a relatív sűrűség meghatározásáról szóló részben leírtuk Legyen ez a sűrűség ρt.

4.3. 4.3.1

Az eredmények megadása Számítási módszer Keressük meg az alkoholtartalmat 20 °C hőmérsékletnél az I. táblázatban. A táblázat T hőmérsékletnek megfelelő (egész számmal kifejezett) sorában közvetlenül t °C alatt keressük meg azt a legkisebb sűrűséget, amely nagyobb ρtnél. Használjuk a táblázatban a közvetlenül ez alatt a sűrűség alatt leolvasható különbséget az ennél a T hőmérsékletnél lévő ρ sűrűség kiszámításához. A T hőmérséklet sorában keressük meg a ρ sűrűséget közvetlenül ρ' fölött, és számítsuk ki a ρ és ρ' sűrűség közötti különbséget. Osszuk el ezt a különbséget a ρ' 54


sűrűség mellett leolvasható különbséggel. Ez a hányados adja az alkoholtartalom tizedes részét, míg az alkoholtartalom egész számát annak az oszlopnak a fejléce mutatja, amelyben a ρ' sűrűség található. A 7. szakaszban példát mutatunk be az alkoholtartalom kiszámítására.

Megjegyzés: Ez a hőmérséklet korrekció programozható, esetleg automatikusan is elvégezhető. 4.3.2.

Ismételhetőség r = 0,1% (V/V).

4.3.3.

Reprodukálhatóság R = 0,19% (V/V).

55


5.

SZOKÁSOS MÓDSZEREK

5.1.

Hidrometria

5.1.1.

Eszközök

5.1.1.1.

Szeszfokoló A szeszfokolónak meg kell felelnie az ILMO (Nemzetközi Hatósági Mérésügyi Szervezet) 44. nemzetközi ajánlásában (Szeszfokolók és alkohol hidrométerek) meghatározott I. és II. osztályú eszközökre vonatkozó követelményeknek.

5.1.1.2.

0,1 °C beosztású 0-40 °C mérési tartományú hőmérő, melyet 1/20 °C pontosságra hitelesítettek.

5.1.1.3.

36

mm

belső

átmérőjű

és

320

mm

magasságú

mérőhenger,

amely

szintezőcsavarokkal függőleges helyzetbe állítható. 5.1.2.

Eljárás Öntsük a párlatot (3.4. szakasz ) a mérőhengerbe. Biztosítsuk, hogy a henger függőlegesen maradjon. Helyezzük a párlatba a hőmérőt és a szeszfokolót. Olvassuk le a hőmérsékletet a hőmérőn egy perces keverés után, amellyel a mérőhenger, a hőmérő, a szeszfokoló és a párlat hőmérséklet-különbségét kiegyenlítettük. Vegyük ki a hőmérőt, és egy perc elteltével olvassuk le a látszólagos alkoholtartalmat. Végezzünk legalább három leolvasást nagyító segítségével. Korrigáljuk a t °C hőmérsékleten mért látszólagos alkoholtartalmat a hőmérsékleti hatással a II. táblázat alkalmazásával. A folyadék hőmérséklete csak kis mértékben térhet el a szobahőmérséklettől (legfeljebb 5 °C-kal).

5.2.

Sűrűségmérés hidrosztatikus mérleggel

5.2.1. 5.2.1.1.

Eszközök A sűrűség és relatív sűrűség meghatározásáról szóló részben leírt hidrosztatikus mérleget használjuk.

5.2.2.

Eljárás

56


A párlat látszólagos sűrűségét t °C hőmérsékleten úgy mérjük, ahogy azt a sűrűség és relatív sűrűség meghatározásáról szóló rész 5.2.2 szakaszában leírtuk. 5.2.3.

Az eredmények megadása A 20 °C-on mért alkoholtartalmat a 4.3.1. szakaszban leírt módszer szerint az I. táblázatból, ha pirex üvegből készült úszótestet használunk, és a III. táblázatból, ha normálüvegből készült úszótestet használunk, keressük ki.

5.3.

Refraktometria

5.3.1.

Eszközök

5.3.1.1.

Refraktométer, amely lehetővé teszi a törésmutató mérését 1,330 és 1,346 közötti tartományban. A berendezés típusától függően a méréseket: — 20 °C hőmérsékleten végezzük egy megfelelő berendezéssel, vagy — hőmérővel ellátott műszerrel t °C szobahőmérsékleten, lehetővé téve a hőmérséklet mérését legalább 0,05 °C pontosságon belül. A műszerhez a hőmérséklet-korrekció céljára táblázatot mellékelnek.

5.3.2.

Eljárás A 3.4. szakasz szerint nyert borpárlat törésmutatóját az alkalmazott műszer típusához előírt eljárás szerint kell elvégezni.

5.3.3.

Az eredmények megadása A 20 °C hőmérsékleten kapott törésmutatónak megfelelő alkoholtartalmat a IV. táblázatból kapjuk meg.

Megjegyzés: A IV. táblázat mind a tiszta alkohol-víz elegyek, mind a borpárlat esetére megadja a törésmutatónak megfelelő alkoholtartalmat. Borpárlatok esetében figyelembe veszi a párlatban jelen lévő szennyeződéseket (magasabb rendű alkoholok). A metil-alkohol jelenléte csökkenti a törésmutatót, és így az alkoholtartalmat is.

57


6.

PÉLDA A BOR ALKOHOLTARTALMÁNAK KISZÁMÍTÁSÁRA (Referencia-módszer)

6.1.

Mérés piknométerrel, kétkarú mérleg használatával

6.1.1.

A piknométer állandóit a sűrűség és a relatív sűrűség meghatározására vonatkozó 1. rész 6.1.1 szakaszában leírtak szerint határozzuk meg és számítjuk ki.

6.1.2.

A párlattal töltött piknométer mérése Számpélda

t °C

=

18,90 °C

Tára = piknométer + párlat t °C hőmérsékleten + p'' t °C korrigált =

18,70 °C

=

2,8074 g

p''

p + m - p'' = a párlat tömege t °C hőmérsékleten 105,0698 - 2,8074 = 102,2624 g Látszólagos sűrűség t °C hőmérsékleten ρt =

p + m − p'' a piknométer térfogata 20o C hőmérsékleten

ρ18,70 C = o

102,2624 = 0,983076 104,0229

58


6.1.3.

Az alkoholtartalom kiszámítása A látszólagos sűrűségek táblázatában, a 18 °C hőmérséklet sűrűségnél

sorában nagyobb

a

mért

legkisebb

0,983076 sűrűség

0,98398 a 11% (V/V)-os oszlopban Lásd a víz--alkohol elegyek különböző mért

hőmérsékleteken

látszólagos

sűrűségeire

vonatkozó táblázatot a fentiek

A sűrűség 18 °C hőmérsékleten: (98307,6 + 0,7 x 22) 10-5 = 0,98323 0,98398 - 0,98323 = 0,00075

(4.3.1.) szerint. Az alkoholtartalom térfogatszázalékának tized része 75/114 = 0,65 Az alkoholtartalom 11,65% (V/V) 6.2.

Mérés piknométerrel, egykarú mérleg használatával

6.2.1.

A piknométer állandóit a sűrűség és a relatív sűrűség mmeghatározására vonatkozó 1. rész 6.2.1 szakaszában leírtak szerint határozzuk meg és számítjuk ki.

6.2.2.

A párlattal töltött piknométer mérése A táraedény

tömege a mérés

T1 = 171,9178

időpontjában grammban: A párlattal töltött piknométer

P2 = 167,8438

tömege grammban 20,50 °C hőmérsékleten: A

levegő

felhajtóerejének

dT= 171,9178 – 171,9160 = + 0,0018

változása: A párlat tömege 20,50 °C hőmérsékleten:

Lt = 167,8438 - (67,6695 + 0,0018) =100,1725

59


A párlat látszólagos sűrűsége:

6.2.3.

ρ 20, 50o C =

1001725 , = 0,983825 100,8194

Az alkoholtartalom kiszámítása A látszólagos sűrűségek táblázatában, a 20 °C hőmérséklet sűrűségnél

sorban

a

nagyobb

mért

legkisebb

0,983825 sűrűség

0,98471 a 10% (V/V)-os oszlopban Lásd a víz--alkohol elegyek különböző hőmérsékleteken mért látszólagos sűrűségeire vonatkozó táblázatot a fentiek (4.3.1. szakasz) szerint.

A sűrűség 20 °C hőmérsékleten: (98382,5 + 0,5 x 24) 10-5 = 0,983945 0,98471 - 0,983945 = 0,000765 Az alkoholtartalom térfogatszázalékának tized része 76,5/119 = 0,64 Az alkoholtartalom 10,64% (V/V)

60


7.

ÖSSZEFŰGGÉS AZ ETIL-ALKOHOL--VÍZ ELEGYEK ALKOHOLTARTALMÁRA VONATKOZÓ TÁBLÁZATOK KISZÁMÍTÁSÁHOZ

Egy etil-alkohol--víz elegy t °C hőmérsékleten mért ρ sűrűsége kg/m3-ben

az alábbi

összefüggéssel számítható ki, a következők függvényeként: —

% (m/m) esetén p tizedes törtként kifejezve5,

—

a t hőmérséklet °C-ban kifejezve (EIPT 68),

—

az alább felsorolt numerikus együtthatók.

Az összefüggés -20 és +40 °C hőmérsékletek között érvényes.

12

ρ = A1 + ∑ Ak p

k −1

k =2

n

+∑ i =1

m

∑C k =1

i ,k

p

6

+ ∑ Bk ( t −20 k =1

o

C )k

n=5 m1 = 11 m2 = 10

m3 = 9 m4 = 4 m5 = 2

k ( t − 20o c )i

Az összefüggés numerikus együtthatói

K

Ak

Bk

kg / m 3 1 9,982 012 300 · 102 2 — 1,929 769 495 · 102 3 3,891 238 958 · 102 4 — 1,668 103 923 · 103 5 1,352 215 441 · 104 6 — 8,829 278 388 · 104 7 3,062 874 042 · 105 8 — 6,138 381 234 · 105 9 7,470 172 998 · 105 10 — 5,478 461 354 · 105 11 2,234 460 334 · 105 12 — 3,903 285 426 · 104

5

— 2,061 851 3 · 10-1 kg(m3 · ºC) — 5,268 254 2 · 10-3 kg(m3 · ºC2) 3,613 001 3 · 10-5 kg(m3 · ºC3) — 3,895 770 2 · 10-7 kg(m3 · ºC4) 7,169 354 0 · 10-9 kg(m3 · ºC5) — 9,973 923 1 · 105 kg(m3 · ºC6)

Például 12 % (m/m) esetén p = 0,12.

61


K

C1, k

C 2, k

kg/(m3 · ºC)

kg/(m3 · ºC2)

1 1,693 443 461 530 087 · 10-1 2 — 1,046 914 743 455 169 · 101 3 7,196 353 469 546 523 · 101 4 — 7,047 478 054 272 792 · 102 5 3,924 090 430 035 045 · 103 6 — 1,210 164 659 068 788 · 104 7 2,248 646 550 400 788 · 104 8 — 2,605 562 982 188 164 · 104 9 1,852 373 922 069 467 · 104 10 — 7,420 201 433 430 137 · 103 11 1,285 617 841 998 974 · 103

C 4, k

C3,k kg/(m3 · ºC3) 1— 2 3— 4 5— 6 7— 8 9—

— 1,193 013 005 057 010 · 10-2 2,517 399 633 803 461 · 10-1 — 2,170 575 700 536 993 1,353 034 988 843 029 · 101 — 5,029 988 758 547 014 · 101 1,096 355 666 577 570 · 102 — 1,422 753 946 421 155 · 102 1,080 435 942 856 230 · 102 — 4,414 153 236 817 392 · 101 7,442 971 530 188 783

C 5, k

kg/(m3 · ºC4) -4

6,802 995 733 503 803 · 10 1,876 837 790 289 664 · 10-2 2,002 561 813 734 156 · 10-1 1,002 992 966 719 220 2,895 696 483 903 638 4,810 060 584 300 675 4,672 147 440 794 683 2,458 043 105 903 461 5,411 227 621 436 812 · 10-1

-6

4,075 376 675 622 027 · 10 — 8,763 058 573 471 110 · 10-6 6,515 0,31 360 099 368 · 10-6 — 1,515 784 836 987 210 · 10-6

kg/(m3 · ºC5)

— 2,788 074 354 782 409 · 10--8 1,345 612 883 493 354 · 10--8

62


I. TÁBLÁZAT NEMZETKÖZI, TÉRFOGATSZÁZALÉKBAN MEGADOTT ALKHOLTARTALOM 20 °C HŐMÉRSÉKLETEN

Etil-alkohol--víz elegyek látszólagos sűrűségének táblázata — pirex üvegből készült piknométer t °C hőmérsékleten mért sűrűségek a levegő felhajtóerejével korrigálva Alkoholtartalom, %(V/V) t 0° 1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° 8° 9° 10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19° 20°

0 999,64 -0,07 999,71 -0,05 999,76 -0,03 999,79 -0,02 999,81 0,00 999,81 0,01 999,80 0,03 999,77 0,05 999,72 0,05 999,67 0,07 999,60 0,09 999,51 0,10 999,41 0,11 999,30 0,12 999,18 0,13 999,05 0,15 998,90 0,16 998,74 0,17 998,57 0,18 998,39 0,19 998,20

1,50 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,50 1,51 1,51 1,51 1,50 1,50 1,50 1,51 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50

1 998,14 -0,06 998,20 -0,05 998,25 -0,03 998,28 -0,02 998,30 0,00 998,30 0,01 998,29 0,03 998,26 0,04 998,22 0,06 998,16 0,07 998,09 0,09 998,00 0,09 997,91 0,11 997,80 0,12 997,68 0,14 997,54 0,14 997,40 0,16 997,24 0,17 997,07 0,18 996,89 0,19 996,70

1,44 1,44 1,45 1,45 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46

2 996,70 -0,06 996,76 -0,04 996,80 -0,03 996,83 -0,01 996,84 0,00 996,84 0,01 996,83 0,03 996,80 0,04 996,76 0,06 996,70 0,07 996,63 0,09 996,54 0,09 996,45 0,11 996,34 0,12 996,22 0,14 996,08 0,14 995,94 0,16 995,78 1,17 995,61 0,18 995,43 0,19 995,24

1,40 1,40 1,40 1,41 1,40 1,40 1,41 1,41 1,42 1,42 1,42 1,41 1,42 1,42 1,43 1,42 1,43 1,43 1,42 1,43 1,43

3 995,30 -0,06 995,36 -0,04 995,40 -0,02 995,42 -0,02 995,44 0,00 995,44 0,02 995,42 0,03 995,39 0,05 995,34 0,06 995,28 0,07 995,21 0,08 995,13 0,10 995,03 0,11 994,92 0,13 994,79 0,13 994,66 0,15 994,51 0,15 994,35 0,16 994,19 0,19 994,00 0,19 993,81

1,35 1,35 1,35 1,35 1,36 1,37 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39

4 993,95 -0,06 994,01 -0,04 994,05 -0,02 994,07 -0,01 994,08 0,01 994,07 0,01 994,06 0,04 994,02 0,05 993,97 0,06 993,91 0,07 993,84 0,09 993,75 0,10 993,65 0,11 99354 0,13 993,41 0,13 993,28 0,15 993,13 0,16 992,97 0,17 992,80 0,19 992,61 0,19 992,42

1,30 1,30 1,30 1,30 1,30 1,31 1,32 1,32 1,32 1,32 1,33 1,33 1,34 1,34 1,34 1,35 1,35 1,36 1,36 1,36 1,36

5 992,65 -0,06 992,71 -0,04 992,75 -0,02 992,77 -0,01 992,78 0,02 992,76 0,02 992,74 0,04 992,70 0,05 992,65 0,06 992,59 0,08 992,51 0,09 992,42 0,11 992,31 0,11 992,20 0,13 992,07 0,14 991,93 0,15 991,78 0,17 991,61 0,17 991,44 0,19 991,25 0,19 991,06

1,24 1,24 1,25 1,25 1,26 1,26 1,27 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,29 1,30 1,30 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,33

63


Alkoholtartalom, %(V/V) t 0° 1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° 8° 9° 10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19° 20°

6 991,41 -0,06 991,47 -0,03 991,50 -0,02 991,52 0,00 991,52 0,02 991,50 0,03 991,47 0,04 991,43 0,05 991,38 0,07 991,31 0,08 991,23 0,10 991,13 0,11 991,02 0,12 990,90 0,13 990,77 0,14 990,63 0,16 990,47 0,17 990,30 0,18 990,12 0,19 989,93 0,20 989,73

1,19 1,20 1,20 1,21 1,21 1,21 1,22 1,23 1,24 1,24 1,25 1,25 1,25 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,29

7 990,22 -0,05 990,27 -0,03 990,30 -0,01 990,31 0,00 990,31 0,02 990,29 0,04 990,25 0,05 990,20 0,06 990,14 0,07 990,07 0,09 989,98 0,10 989,88 0,11 989,77 0,12 989,65 0,14 989,51 0,15 989,36 0,16 989,20 0,18 989,02 0,18 988,84 0,20 988,64 0,20 988,44

1,14 1,15 1,16 1,16 1,17 1,17 1,18 1,19 1,19 1,20 1,20 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,25 1,26 1,26 1,27

8 989,08 -0,04 989,12 -0,02 989,14 -0,01 989,15 0,01 989,14 0,02 989,12 0,05 989,07 0,06 989,01 0,06 988,95 0,08 988,87 0,09 988,78 0,11 988,67 0,12 988,55 0,13 988,42 0,14 988,28 0,16 988,12 0,17 987,95 0,18 987,77 0,19 987,58 0,20 987,38 0,21 987,17

1,10 1,11 1,11 1,12 1,13 1,14 1,14 1,15 1,16 1,17 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,21 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24

9 987,98 -0,03 988,01 -0,02 988,03 0,00 988,03 0,02 988,01 0,03 987,98 0,05 987,93 0,07 987,86 0,07 987,79 0,09 987,70 0,10 987,60 0,11 987,49 0,13 987,36 0,14 987,22 0,15 987,07 0,16 986,91 0,17 986,74 0,19 986,55 0,20 986,35 0,20 986,15 0,22 985,93

1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,19 1,20 1,21 1,22

10 986,93 -0,02 986,95 -0,01 986,96 0,01 986,95 0,03 986,92 0,04 986,88 0,05 986,83 0,08 986,75 0,08 986,67 0,10 986,57 0,11 986,46 0,12 986,34 0,13 986,21 0,15 986,06 0,16 985,90 0,17 985,73 0,18 985,55 0,19 985,36 0,21 985,15 0,21 984,94 0,23 984,71

1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,10 1,19

11 985,93 -0,01 985,94 0,00 985,94 0,02 985,92 0,04 985,88 0,05 985,83 0,06 985,77 0,09 985,68 0,09 985,59 0,11 985,48 0,12 985,36 0,13 985,23 0,14 985,09 0,16 984,93 0,16 984,77 0,18 984,59 0,19 984,40 0,20 984,20 0,22 983,98 0,22 983,76 0,24 983,52

64

0,95 0,97 0,98 1,00 1,00 1,01 1,03 1,03 1,05 1,06 1,06 1,07 1,09 1,09 1,11 1,12 1,13 1,14 1,14 1,16 1,16



0 998,20 0,20 998,00 0,21 997,79 0,22 997,57 0,24 997,33 0,24 997,09 0,25 996,84 0,26 996,58 0,27 996,31 1,28 996,03 0,28 995,75 0,30 995,45 0,31 995,14 0,31 994,83 0,32 994,51 0,33 994,18 0,34 993,84 0,35 993,49 0,36 993,13 0,36 992,77 0,37 992,40

1,50 1,50 1,50 1,50 1,49 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,51 1,51 1,51 1,51 1,52 1,52 1,53 1,53 1,53 1,54 1,54

1 996,70 0,20 996,50 0,21 996,29 0,22 996,07 0,23 995,84 0,25 995,59 0,25 995,34 0,26 995,08 0,27 994,81 0,28 994,53 0,29 994,24 0,30 993,94 0,31 993,63 0,31 993,32 0,33 992,99 0,33 992,66 0,35 992,31 0,35 991,96 0,36 991,60 0,37 991,23 0,37 99086

1,46 1,46 1,46 1,47 1,47 1,46 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,47 1,48 1,48 1,49 1,49 1,50 1,50 1,50 1,51

2 995,24 0,20 995,04 0,21 994,83 0,23 994,60 0,23 994,37 0,24 994,13 0,26 993,87 0,26 993,61 0,27 993,34 0,28 993,06 0,29 992,77 0,30 992,47 0,31 992,16 0,32 991,84 0,33 991,51 0,34 991,17 0,35 990,82 0,36 990,46 0,36 990,10 0,37 989,73 0,38 989,35

1,43 1,43 1,43 1,43 1,43 1,44 1,43 1,44 1,44 1,45 1,45 1,45 1,46 1,46 1,46 1,47 1,47 1,46 1,47 1,47 1,48

3 993,81 0,20 993,61 0,21 993,40 0,23 993,17 0,23 992,94 0,25 992,69 0,25 992,44 0,27 992,17 0,27 991,90 0,29 991,61 0,29 991,32 0,30 991,02 0,32 990,70 0,32 990,38 0,33 990,05 0,35 989,70 0,35 989,35 0,35 989,00 0,37 988,63 0,37 988,26 0,39 987,87

1,39 1,40 1,40 1,40 1,41 1,40 1,41 1,41 1,42 1,41 1,42 1,43 1,42 1,42 1,44 1,43 1,43 1,44 1,44 1,45 1,44

4 992,42 0,21 992,21 0,21 992,00 0,23 991,77 0,24 991,53 0,24 991,29 0,26 991,03 0,27 990,76 0,28 990,48 0,28 990,20 0,30 989,90 0,31 989,59 0,31 989,28 0,32 988,96 0,35 988,61 0,34 988,27 0,35 987,92 0,36 987,56 0,37 987,19 0,38 986,81 0,38 986,43

1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,40 1,41 1,40 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,42

5 991,06 0,21 990,85 0,22 990,63 0,23 990,40 0,24 990,16 0,25 989,91 0,26 989,65 0,27 989,38 0,28 989,10 0,29 988,81 0,30 988,51 0,31 988,20 0,32 987,88 0,33 987,55 0,34 987,21 0,35 986,86 0,35 986,51 0,36 986,15 0,37 985,78 0,38 985,40 0,39 985,01

1,33 1,33 1,33 1,34 1,34 1,35 1,35 1,35 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,39

65



6 989,73 0,21 989,52 0,22 989,30 0,24 989,06 0,24 988,82 0,26 988,56 0,26 988,30 0,27 988,03 0,29 987,74 0,29 987,45 0,31 987,14 0,31 986,83 0,32 986,51 0,33 986,18 0,35 985,83 0,35 985,48 0,35 985,83 0,37 984,76 0,37 984,39 0,38 984,01 0,39 983,62

1,29 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,32 1,33 1,33 1,34 1,34 1,34 1,35 1,36 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38

7 988,44 0,22 988,22 0,23 987,99 0,24 987,75 0,25 987,50 0,26 987,24 0,26 986,98 0,28 986,70 0,29 986,41 0,30 986,11 0,31 985,80 0,31 985,49 0,33 985,16 0,34 984,82 0,35 984,47 0,35 984,12 0,36 983,76 0,37 983,39 0,37 983,02 0,39 982,63 0,39 982,24

1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,29 1,31 1,31 1,31 1,32 1,32 1,33 1,33 1,34 1,33 1,34 1,34 1,35 1,36 1,35 1,36

8 987,17 0,22 986,95 0,24 986,71 0,24 986,47 0,26 986,21 0,26 985,95 0,28 985,67 0,28 985,39 0,29 985,10 0,31 984,79 0,31 984,48 0,32 984,16 0,33 983,83 0,35 983,48 0,34 983,14 0,36 982,78 0,36 982,42 0,38 982,04 0,38 981,68 0,38 981,28 0,40 980,88

1,24 1,25 1,25 1,26 1,26 1,27 1,27 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,32 1,32 1,33 1,33 1,34 1,33 1,34 1,35 1,34

9 985,93 0,23 985,70 0,24 985,46 0,25 985,21 0,26 984,95 0,27 984,68 0,28 984,40 0,29 984,11 0,30 983,81 0,31 983,50 0,32 983,18 0,33 982,85 0,34 982,51 0,35 982,16 0,35 981,81 0,36 981,45 0,37 981,08 0,37 980,71 0,39 980,32 0,39 979,93 0,39 979,54

1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,28 1,28 1,28 1,29 1,30 1,30 1,31 1,31 1,31 1,33 1,32 1,33 1,34

10 984,71 0,24 984,47 0,24 984,23 0,26 983,97 0,27 983,70 0,28 983,42 0,28 983,14 0,30 982,84 0,31 982,53 0,31 982,22 0,32 981,90 0,34 981,56 0,35 981,21 0,35 980,86 0,36 980,50 0,36 980,14 0,37 979,77 0,39 979,38 0,38 979,00 0,40 978,60 0,40 978,20

1,19 1,19 1,21 1,20 1,22 1,22 1,24 1,24 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,33

11 983,52 0,24 983,28 0,26 983,02 0,25 982,77 0,29 982,48 0,28 982,20 0,30 981,90 0,30 981,60 0,32 981,28 0,32 980,96 0,33 980,63 0,34 980,29 0,36 979,93 0,35 979,58 0,37 979,21 0,37 978,84 0,38 978,46 0,39 978,07 0,39 977,68 0,40 977,28 0,41 976,87

66

1,16 1,18 1,18 1,20 1,20 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,28 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,32 1,32



10 986,93 -0,02 986,95 -0,01 986,96 0,01 986,95 0,03 986,92 0,04 986,88 0,05 986,83 0,08 986,75 0,08 986,67 0,10 986,57 0,11 986,46 0,12 986,34 0,13 986,21 0,15 986,06 0,16 985,90 0,17 985,73 0,18 985,55 0,19 985,36 0,21 985,15 0,21 984,94 0,23 984,71

1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19

11 985,93 -0,01 985,94 0,00 985,94 0,02 985,92 0,04 985,88 0,05 985,83 0,06 985,77 0,09 985,68 0,09 985,59 0,11 985,48 0,12 985,36 0,13 985,23 0,14 985,09 0,16 984,93 0,16 984,77 0,18 984,59 0,19 984,40 0,20 984,20 0,22 983,98 0,22 983,76 0,24 983,52

0,95 0,97 0,98 1,00 1,00 1,01 1,03 1,03 1,05 1,06 1,06 1,07 1,09 1,09 1,11 1,12 1,13 1,14 1,14 1,16 1,16

12 984,98 0,01 984,97 0,01 984,96 0,04 984,92 0,04 984,88 0,06 984,82 0,08 984,74 0,09 984,65 0,11 984,54 0,12 984,42 0,12 984,30 0,14 984,16 0,16 984,00 0,16 983,84 0,18 983,66 0,19 983,47 0,20 983,27 0,21 983,06 0,22 982,84 0,24 982,60 0,24 982,36

0,92 0,92 0,94 0,95 0,97 0,98 0,99 1,00 1,02 1,02 1,04 1,06 1,06 1,08 1,08 1,09 1,11 1,12 1,13 1,13 1,15

13 984,06 0,01 984,05 0,03 984,02 0,05 983,97 0,06 983,91 0,07 983,84 0,09 983,75 0,10 983,65 0,13 983,52 0,12 983,40 0,14 983,26 0,16 983,10 0,16 982,94 0,18 982,76 0,18 982,58 0,20 982,38 0,22 982,16 0,22 981,94 0,23 981,71 0,24 981,47 0,26 981,21

0,88 0,90 1,91 0,92 0,93 0,95 0,96 0,98 0,98 1,00 1,02 1,02 1,04 1,05 1,07 1,08 1,08 1,09 1,11 1,12 1,13

14 983,18 0,03 983,15 0,04 983,11 0,06 983,05 0,07 982,98 0,09 982,89 0,10 982,79 0,12 982,67 0,13 982,54 0,14 982,40 0,16 982,24 0,16 982,08 0,18 981,90 0,19 981,71 0,20 981,51 0,21 981,30 0,22 981,08 0,23 980,85 0,25 980,60 0,25 980,35 0,27 980,08

0,84 0,85 0,88 0,89 0,91 0,92 0,94 0,95 0,96 0,98 0,99 1,00 1,01 1,02 1,04 1,05 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11

15 982,34 0,04 982,30 0,07 982,23 0,07 982,16 0,09 982,07 0,10 981,97 0,12 981,85 0,13 981,72 0,14 98158 0,16 981,42 0,17 981,25 0,17 981,08 0,19 980,89 0,20 980,69 0,22 980,474 0,22 960,25 0,24 980,01 0,24 979,77 0,26 979,51 0,26 979,25 0,28 978,97

67

0,80 0,83 0,84 0,86 1,87 0,89 0,90 0,92 0,93 0,95 0,96 0,98 1,00 1,01 1,02 1,04 1,04 1,06 1,07 1,09 1,10



16 981,54 0,07 981,47 0,08 981,39 0,09 981,30 0,10 981,20 0,12 981,08 0,13 980,95 0,15 980,80 0,15 980,65 0,18 980,47 0,18 980,29 0,19 980,10 0,21 979,89 0,21 979,68 0,23 979,45 0,24 979,21 0,24 978,97 0,26 978,71 0,27 978,44 0,28 978,16 0,29 977,87

0,78 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,88 0,89 0,92 0,93 0,95 0,96 0,97 0,99 1,00 1,01 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08

17 980,76 0,08 980,68 0,10 980,58 0,11 980,47 0,12 980,35 0,14 980,21 0,14 980,07 0,16 979,91 0,18 979,73 0,19 979,54 0,20 979,34 0,20 979,14 0,22 978,92 0,23 978,69 0,24 978,45 0,25 978,20 0,27 977,93 0,27 977,66 0,28 977,38 0,29 977,09 0,30 976,79

0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,84 0,87 0,89 0,90 0,92 0,92 0,95 0,97 0,98 1,00 1,01 1,02 1,04 1,05 1,07 1,08

18 980,01 0,10 979,91 0,12 979,79 0,013 979,66 0,14 979,52 0,15 979,37 0,17 979,20 0,18 979,02 0,19 978,83 0,21 978,62 0,20 978,42 0,23 978,19 0,24 977,95 0,24 977,71 0,26 977,45 0,26 977,19 0,28 976,91 0,29 976,62 0,29 976,33 0,31 976,02 0,31 975,71

0,73 0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,86 0,88 0,89 0,92 0,94 0,95 0,97 0,98 1,00 1,02 1,03 1,05 1,06 1,08

19 979,28 0,12 979,16 0,14 979,02 0,15 978,87 0,16 978,71 0,17 978,54 0,19 978,35 0,19 978,16 0,21 977,95 0,22 977,73 0,23 977,50 0,25 977,25 0,25 977,00 0,26 976,74 0,27 976,47 0,28 976,19 0,30 975,89 0,30 975,59 0,31 975,28 0,32 974,96 0,33 974,63

0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,82 0,84 0,86 0,88 0,90 0,91 0,93 0,95 0,97 0,98 1,00 1,01 1,03 1,04 1,06 1,07

20 978,56 0,14 978,42 0,16 978,26 0,17 978,09 0,18 977,91 0,19 977,72 0,21 977,51 0,21 977,30 0,23 977,07 0,24 976,83 0,24 976,59 0,27 976,32 0,27 976,05 0,28 975,77 0,28 975,49 0,30 975,19 0,31 974,88 0,32 974,56 0,32 974,24 0,34 973,90 0,34 973,56

0,70 0,73 0,75 0,77 0,79 0,82 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,94 0,96 0,98 1,00 1,01 1,02 1,05 1,06 1,08

21 977,86 0,17 977,69 0,18 977,51 0,19 977,32 0,20 977,12 0,22 976,90 0,22 976,68 0,23 976,45 0,25 976,20 0,26 975,94 0,26 975,68 0,29 975,39 0,28 975,11 0,30 974,81 0,30 975,51 0,32 974,19 0,32 973,87 0,33 973,54 0,35 973,19 0,35 972,84 0,36 972,48

68

0,70 0,72 0,74 0,77 0,79 0,80 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,92 0,95 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,08



10 984,71 0,24 984,47 0,24 984,23 0,26 983,97 0,27 983,70 0,28 983,42 0,28 983,14 0,30 982,84 0,31 982,53 0,31 982,22 0,32 981,90 0,34 981,56 0,35 981,21 0,35 980,86 0,36 980,50 0,36 980,14 0,37 979,77 0,39 978,38 0,38 979,00 0,40 978,60 0,40 978,20

1,19 1,19 1,21 1,20 1,22 1,22 1,24 1,24 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,33

11 983,52 0,24 983,28 0,26 983,02 0,26 982,77 0,29 982,48 0,28 982,20 0,30 981,90 0,30 981,60 0,32 981,28 0,32 980,96 0,33 980,63 0,34 980,29 0,36 979,93 0,35 979,58 0,37 979,21 0,37 978,84 0,38 978,46 0,39 978,07 0,39 977,68 0,40 977,28 0,41 976,87

1,16 1,18 1,18 1,20 1,20 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,28 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,32 1,32

12 982,36 0,26 982,10 0,28 981,84 0,27 981,57 0,29 981,28 0,29 980,99 0,31 980,68 0,31 980,37 0,32 980,05 0,33 979,72 0,34 979,38 0,35 979,03 0,36 978,67 0,37 978,30 0,37 977,93 0,38 977,55 0,38 977,17 0,40 976,77 0,40 976,37 0,41 975,96 0,41 975,55

1,15 1,15 1,17 1,18 1,18 1,20 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,32

13 981,21 0,26 980,95 0,29 980,67 0,28 980,39 0,29 980,10 0,31 979,79 0,31 979,48 0,32 979,16 0,33 978,83 0,34 978,49 0,35 978,14 0,36 977,78 0,37 977,41 0,37 977,04 0,38 976,66 0,39 976,27 0,39 975,88 0,40 975,48 0,41 975,07 0,42 974,65 0,42 974,23

1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,29 1,30 1,30 1,31

14 980,08 0,27 978,81 0,30 979,52 0,29 979,23 0,30 978,93 0,32 978,61 0,32 978,29 0,33 977,96 0,34 977,62 0,35 977,27 0,36 976,91 0,37 976,54 0,38 976,16 0,38 975,78 0,39 975,39 0,39 975,00 0,40 974,60 0,41 974,19 0,42 973,77 0,42 973,35 0,43 972,92

1,11 1,12 1,13 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32

15 978,97 0,28 978,69 0,31 978,39 0,31 978,08 0,31 977,77 0,33 977,44 0,33 977,11 0,34 976,77 0,35 976,42 0,36 976,06 0,37 975,69 0,38 975,31 0,39 974,92 0,39 974,53 0,40 974,13 0,40 973,73 0,41 973,32 0,42 972,90 0,43 972,47 0,43 972,04 0,44 971,60

69

1,10 1,11 1,12 1,13 1,15 1,15 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,23 1,23 1,24 1,25 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32



16 977,87 0,29 977,58 0,33 977,27 0,32 976,95 0,33 976,62 0,33 976,29 0,35 975,94 0,35 975,59 0,36 975,23 0,37 974,86 0,38 974,48 0,40 974,08 0,39 973,69 0,40 973,29 0,41 972,88 0,42 972,46 0,42 972,04 0,43 971,61 0,44 971,17 0,44 970,73 0,45 970,28

1,08 1,10 1,12 1,13 1,13 1,15 1,16 1,15 1,19 1,20 1,22 1,22 1,23 1,25 1,26 1,26 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32

17 976,79 0,31 976,48 0,33 976,15 0,33 975,82 0,33 975,49 0,35 975,14 0,36 974,78 0,36 974,42 0,38 974,04 0,38 973,66 0,40 973,26 0,40 972,86 0,40 972,46, 0,42 972,04 0,42 971,62 0,42 971,20 0,44 970,76 0,44 970,32 0,45 968,87 0,45 969,42 0,46 968,96

1,08 1,10 1,10 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,18 1,20 1,21 1,22 1,24 1,24 1,25 1,27 1,28 1,29 1,30 1,32 1,33

18 975,71 0,33 975,38 0,35 975,05 0,35 974,70 0,35 974,35 0,36 973,99 0,37 973,62 0,38 973,24 0,38 972,86 0,40 972,46 0,41 972,05 0,41 971,64 0,42 971,22 0,42 970,80 0,43 970,37 0,44 969,93 0,45 969,48 0,45 969,03 0,46 968,57 0,47 968,10 0,47 967,63

1,08 1,09 1,11 1,11 1,13 1,14 1,16 1,17 1,19 1,19 1,21 1,22 1,23 1,25 1,26 1,28 1,28 1,30 1,31 1,32 1,33

19 974,63 0,34 974,29 0,35 973,94 0,35 973,59 0,37 973,22 0,37 972,85 0,39 972,46 0,39 972,07 0,40 971,67 0,40 971,27 0,43 970,84 0,42 970,42 0,43 969,99 0,44 969,55 0,44 969,11 0,46 968,65 0,45 968,20 0,47 967,73 0,47 967,26 0,48 966,78 0,48 966,30

1,07 1,09 1,10 1,12 1,13 1,15 1,16 1,17 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,25 1,27 1,27 1,29 1,30 1,32 1,33 1,34

20 973,56 0,36 973,20 0,36 972,84 0,37 972,47 0,38 972,09 0,39 971,70 0,40 971,30 0,40 970,90 0,41 970,49 0,42 970,07 0,44 969,63 0,44 969,19 0,44 968,75 0,45 968,30 0,46 967,84 0,46 967,38 0,47 966,91 0,48 966,43 0,49 965,94 0,49 965,45 0,49 964,96

1,08 1,09 1,10 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,22 1,23 1,25 1,26 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,33 1,35

21 972,48 0,37 972,11 0,37 971,74 0,39 972,47 0,40 970,95 0,40 970,55 0,41 970,14 0,42 969,72 0,43 969,29 0,43 968,86 0,45 968,41 0,45 967,96 0,46 967,50 0,46 967,04 0,47 966,57 0,48 966,09 0,48 965,61 0,49 965,12 0,50 964,62 0,50 964,12 0,51 963,61

70

1,08 1,09 1,12 1,12 1,14 1,16 1,17 1,18 1,20 1,22 1,23 1,24 1,25 1,27 1,29 1,30 1,32 1,33 1,34 1,36 1,37



20 978,56 0,14 978,42 0,16 978,26 0,17 978,09 0,18 977,91 0,19 977,72 0,21 977,51 0,21 977,30 0,23 977,07 0,24 976,83 0,24 976,59 0,27 976,32 0,27 976,05 0,28 975,77 0,28 975,49 0,30 975,19 0,31 974,88 0,32 974,56 0,32 974,24 0,34 973,90 0,34 973,56

0,70 0,73 0,75 0,77 0,79 0,82 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,94 0,96 0,98 1,00 1,01 1,02 1,05 1,06 1,08

21 977,86 0,17 977,69 0,18 977,51 0,19 977,32 0,20 977,12 0,22 976,90 0,22 976,68 0,23 976,45 0,25 976,20 0,26 975,94 0,26 975,68 0,29 975,39 0,28 975,11 0,30 974,81 0,30 974,51 0,32 974,19 0,32 973,87 0,33 973,54 0,35 973,19 0,35 972,84 0,36 972,48

0,70 0,72 0,74 0,77 0,79 0,80 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,92 0,95 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,08

22 977,16 0,19 976,97 0,20 976,77 0,22 976,55 0,22 976,33 0,23 976,10 0,25 975,85 0,25 975,60 0,27 975,33 0,28 975,05 0,28 974,77 0,30 974,47 0,31 974,16 0,31 973085 0,32 973,53 0,34 973,19 0,34 972,85 0,35 972,50 0,36 972,14 0,36 971,78 0,38 971,40

0,69 0,72 0,75 0,76 0,79 0,82 0,83 0,86 0,87 0,89 0,91 0,94 0,95 0,97 0,99 1,00 1,02 1,04 1,05 1,08 1,09

23 976,47 0,22 976,25 0,23 976,02 0,23 975,79 0,25 975,54 0,26 975,28 0,26 975,02 0,28 974,74 0,28 974,46 0,30 974,16 0,30 973,86 0,33 973,53 0,32 973,21 0,33 972,88 0,34 972,54 0,35 972,19 0,36 971,83 0,37 971,46 0,37 971,09 0,39 970,70 0,39 970,31

0,71 0,73 0,75 0,78 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,90 0,93 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,03 1,05 1,07 1,08 1,10

24 975,76 0,24 975,52 0,25 975,00 0,26 975,01 0,27 974,94 0,27 974,47 0,29 974,18 0,30 973,88 0,31 973,57 0,31 973,26 0,33 972,93 0,34 972,59 0,34 972,25 0,35 971,90 0,36 971,54 0,37 971,17 0,37 970,80 0,39 970,41 0,39 970,02 0,40 969,62 0,41 969,21

0,71 0,73 0,76 0,78 0,80 0,83 0,85 0,87 0,89 0,92 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,03 1,05 1,06 1,08 1,10 1,11

25 975,05 0,26 974,79 0,28 974,51 0,28 974,23 0,29 973,94 0,30 973,64 0,31 973,33 0,32 973,01 0,33 972,66 0,34 972,34 0,34 972,00 0,36 971,64 0,36 971,28 0,37 970,91 0,38 970,53 0,39 970,14 0,39 969,75 0,40 969,35 0,41 968,94 0,42 968,52 0,42 968,10

71

0,72 0,75 0,77 0,80 0,82 0,85 0,87 0,89 0,91 0,92 0,95 0,97 0,99 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,11 1,14



26 974,33 0,29 974,04 0,30 973,74 0,31 973,43 0,31 973,12 0,33 972,79 0,33 972,46 0,34 972,12 0,35 971,77 0,35 974,42 0,37 971,05 0,38 970,67 0,38 970,29 0,39 969,90 0,40 969,50 0,40 969,10 0,41 968,69 0,42 968,27 0,43 967,84 0,43 967,41 0,45 966,96

0,75 0,77 0,79 0,81 0,84 0,86 0,86 0,90 0,92 0,95 0,97 0,99 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,14 1,15

27 973,58 0,31 973,27 0,32 972,95 0,33 972,62 0,34 972,28 0,35 971,93 0,35 971,58 0,36 971,22 0,37 970,85 0,38 970,47 0,39 970,08 0,40 969,68 0,40 969,28 0,41 968,87 0,41 968,46 0,42 968,04 0,43 967,61 0,44 967,17 0,45 966,72 0,45 966,27 0,46 965,81

0,77 0,80 0,82 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,05 1,07 1,09 1,11 1,12 1,14 1,16 1,17

28 972,81 0,34 972,47 0,34 972,13 0,36 971,77 0,36 971,41 0,37 971,04 0,37 970,67 0,38 970,29 0,40 969,89 0,39 969,50 0,41 969,09 0,42 968,67 0,42 968,25 0,43 967,82 0,43 967,39 0,44 966,95 0,45 966,50 0,45 966,05 0,47 965,58 0,47 965,11 0,47 964,64

0,80 0,82 0,85 0,87 0,89 0,91 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,13 1,16 1,17 1,18 1,20

29 972,01 0,36 971,65 0,37 971,28 0,38 970,90 0,38 970,52 0,39 970,13 0,40 969,73 0,40 969,33 0,42 968,91 0,41 968,50 0,43 969,07 0,44 967,63 0,44 967,19 0,45 966,74 0,45 966,29 0,46 965,83 0,46 965,37 0,48 964,89 0,48 964,41 0,48 963,93 0,49 963,44

0,83 0,86 0,88 0,90 0,92 0,95 0,97 0,99 1,00 1,03 1,05 1,07 1,08 1,10 1,12 1,14 1,16 1,18 1,19 1,21 1,23

30 971,18 0,39 970,79 0,39 970,40 0,40 970,00 0,40 969,60 0,42 968,18 0,42 968,76 0,42 968,34 0,43 967,91 0,44 967,47 0,45 967,02 0,46 966,56 0,45 966,11 0,47 965,64 0,47 965,17 0,48 964,69 0,48 964,21 0,50 963,71 0,49 963,22 0,50 962,72 0,51 962,21

0,87 0,89 0,91 0,93 0,96 0,98 1,00 1,02 1,05 1,07 1,08 1,09 1,12 1,14 1,16 1,17 1,20 1,20 1,23 1,25 1,26

31 970,31 0,41 969,90 0,41 969,49 0,42 969,07 0,43 968,64 0,44 968,20 0,44 967,76 0,44 967,32 0,46 966,86 0,46 966,40 0,46 965,94 0,47 965,47 0,48 964,99 0,49 964,50 0,49 964,01 0,49 963,52 0,51 963,01 0,50 962,51 0,52 961,99 0,52 961,47 0,52 960,95

72

0,90 0,92 0,95 0,98 1,00 1,01 1,03 1,06 1,07 1,09 1,12 1,13 1,15 1,17 1,19 1,21 1,22 1,24 1,25 1,27 1,29



20 973,56 0,36 973,20 0,36 972,84 0,37 972,47 0,38 972,09 0,39 971,70 0,40 971,30 0,40 970,90 0,41 970,49 0,42 970,07 0,44 969,63 0,44 969,19 0,44 968,75 0,45 968,30 0,46 967,84 0,46 967,38 0,47 966,91 0,48 966,43 0,49 965,94 0,49 965,45 0,49 964,96

1,08 1,09 1,10 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,22 1,23 1,25 1,26 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,33 1,35

21 972,48 0,37 972,11 0,37 971,74 0,39 971,35 0,40 970,95 0,40 970,55 0,41 970,14 0,42 969,72 0,43 969,29 0,43 968,86 0,45 968,41 0,45 967,96 0,46 967,50 0,46 967,04 0,47 966,57 0,48 966,09 0,48 965,61 0,49 965,12 0,50 964,62 0,50 646,12 0,51 963,61

1,08 1,09 1,12 1,13 1,14 1,16 1,17 1,18 1,20 1,22 1,23 1,24 1,25 1,27 1,29 1,30 1,32 1,33 1,34 1,36 1,37

22 971,40 0,38 971,02 0,40 970,62 0,40 970,22 0,41 969,81 0,42 969,39 0,42 968,97 0,43 968,54 0,45 968,09 0,45 967,64 0,46 967,18 0,46 966,72 0,47 966,25 0,48 965,77 0,49 965,28 0,49 964,79 0,50 964,29 0,50 963,79 0,51 963,28 0,52 962,76 0,52 962,24

1,09 1,11 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,26 1,27 1,28 1,29 1,31 1,32 1,34 1,35 1,36 1,38

23 970,31 0,40 969,91 0,41 969,50 0,42 969,08 0,42 968,66 0,43 968,23 0,44 967,79 0,45 967,34 0,46 966,88 0,47 966,41 0,47 965,94 0,48 965,46 0,48 964,98 0,49 964,49 0,50 963,99 0,51 963,48 0,51 962,97 0,52 962,45 0,52 961,93 0,53 961,40 0,54 960,86

1,10 1,12 1,13 1,14 1,16 1,18 1,20 1,21 1,22 1,24 1,26 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,34 1,35 1,37 1,38 1,39

24 969,21 0,42 968,79 0,42 968,37 0,43 967,94 0,44 967,50 0,45 967,05 0,46 966,59 0,46 966,13 0,47 965,66 0,49 965,17 0,49 964,68 0,49 964,19 0,50 963,69 0,50 963,19 0,51 962,68 0,52 962,16 0,53 961,63 0,53 961,10 0,54 960,56 0,54 960,02 0,55 959,47

1,11 1,13 1,15 1,17 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,25 1,26 1,28 1,29 1,31 1,33 1,34 1,35 1,37 1,38 1,40 1,41

25 968,10 0,44 967,66 0,44 967,22 0,45 966,77 0,45 966,32 0,47 965,85 0,47 965,38 0,48 964,90 0,48 964,42 0,50 963,92 0,50 963,42 0,51 962,91 0,51 962,40 0,2 961,88 0,53 961,35 0,53 960,82 0,54 960,28 0,55 959,73 0,55 959,18 0,56 958,62 0,56 958,06

73

1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,26 1,28 1,29 1,30 1,32 1,33 1,34 1,36 1,37 1,38 1,40 1,41 1,43



26 966,96 0,45 966,51 0,45 966,06 0,47 965,59 0,47 965,12 0,48 964,64 0,49 964,15 0,49 963,66 0,50 963,16 0,52 962,64 0,51 962,13 0,52 961,61 0,53 961,08 0,53 960,55 0,54 960,01 0,55 959,46 0,55 958,91 0,56 958,35 0,57 957,78 0,57 957,21 0,58 956,63

1,15 1,16 1,19 1,20 1,22 1,23 1,24 1,26 1,28 1,29 1,31 1,32 1,33 1,35 1,37 1,38 1,40 1,41 1,42 1,43 1,44

27 965,81 0,46 965,35 0,48 964,87 0,48 964,39 0,49 963,90 0,49 963,41 0,50 962,91 0,51 962,40 0,52 961,88 0,53 961,35 0,53 960,82 0,53 960,29 0,54 959,75 0,55 959,20 0,56 958,64 0,56 958,08 0,57 957,51 0,57 956,94 0,58 956,36 0,58 955,78 0,59 955,19

1,17 1,20 1,21 1,22 1,24 1,26 1,27 1,29 1,31 1,31 1,33 1,35 1,36 1,38 1,38 1,40 1,41 1,43 1,44 1,46 1,47

28 964,64 0,49 964,15 0,49 963,66 0,49 963,17 0,51 962,66 0,51 962,15 0,51 961,64 0,53 961,11 0,54 960,57 0,53 960,04 0,55 959,49 0,55 958,94 0,55 958,39 0,57 957,82 0,56 957,26 0,58 956,68 0,58 956,10 0,59 955,51 0,59 954,92 0,60 954,32 0,60 953,72

1,20 1,21 1,23 1,25 1,26 1,28 1,30 1,31 1,33 1,35 1,35 1,37 1,39 1,39 1,42 1,42 1,44 1,45 1,46 1,47 1,49

29 963,44 0,50 962,94 0,51 962,43 0,51 961,92 0,52 961,40 0,53 960,87 0,53 960,34 0,54 959,80 0,56 959,24 0,55 958,69 0,55 958,14 0,57 957,57 0,57 957,00 0,57 956,43 0,59 955,84 0,58 955,26 0,60 954,66 0,60 954,06 0,60 953,46 0,61 952,85 0,62 952,23

1,23 1,25 1,26 1,28 1,30 1,31 1,32 1,34 1,35 1,36 1,39 1,40 1,41 1,43 1,43 1,45 1,46 1,47 1,49 1,50 1,51

30 962,21 0,52 961,69 0,52 961,17 0,53 960,64 0,54 960,10 0,54 959,56 0,54 959,02 0,56 958,46 0,57 957,89 0,56 957,33 0,58 956,75 0,58 956,17 0,58 955,59 0,59 955,00 0,59 954,41 0,60 953081 0,61 953,20 0,61 952,59 0,62 951,97 0,62 951,35 0,63 950,72

1,26 1,27 1,29 1,31 1,32 1,33 1,36 1,36 1,38 1,40 1,40 1,42 1,43 1,45 1,46 1,48 1,49 1,50 1,51 1,53 1,54

31 960,95 0,53 960,42 0,54 959,88 0,55 959,33 0,55 958,78 0,55 958,23 0,57 957,66 0,56 957,10 0,59 956,51 0,58 955,93 0,58 955,35 0,60 954,75 0,59 954,16 0,61 953,55 0,60 952,95 0,62 952,33 0,62 951,71 0,62 951,09 0,63 950,46 0,64 949,82 0,64 949,18

74

1,29 1,31 1,32 1,33 1,35 1,37 1,38 1,40 1,41 1,42 1,44 1,44 1,46 1,47 1,49 1,50 1,51 1,53 1,54 1,55 1,57

Magyar Borkönyv


III/3.

II. TÁBLÁZAT NEMZETKÖZI, TÉRFOGATSZÁZALÉKBAN MEGADOTT ALKOHOLTARTALOM 20 °C HŐMÉRSÉKLETEN A látszólagos alkoholtartalom esetén alkalmazott hőmérséklet-korrekciók táblázata Az alább jelzett korrekciókat hozzá kell adni vagy le kell vonni a t °C hőmérsékleten mért látszólagos alkoholtartalomból (normálüvegből készült szeszfokoló)

0° 1° 2° 3° 4°

0 0,76 0,81 0,85 0,88 0,90

1 0,77 0,83 0,87 0,91 0,92

2 0,82 0,87 0,92 0,95 0,97

3 0,87 0,92 0,97 1,00 1,02

4 0,95 1,00 1,04 1,07 1,09

5 1,04 1,09 1,13 1,15 1,17

6 1,16 1,20 1,24 1,26 1,27

7 1,31 1,35 1,38 1,39 1,40

8 1,49 1,52 1,54 1,55 1,55

9 1,70 1,73 1,74 1,73 1,72

10 1,95 1,97 1,97 1,95 1,92

11 2,26 2,26 2,24 2,20 2,15

12 2,62 2,59 2,54 2,48 2,41

13 3,03 2,97 2,89 2,80 2,71

14 3,49 3,40 3,29 3,16 3,03

15 4,02 3,87 3,72 3,55 3,38

16 4,56 4,36 4,17 3,95 3,75

5° 6° 7° 8° 9°

0,91 0,92 0,91 0,89 0,86

0,93 0,94 0,93 0,91 0,88

0,98 0,98 0,97 0,94 0,91

1,03 1,02 1,01 0,98 0,95

1,10 1,09 1,07 1,04 1,01

1,17 1,16 1,14 1,11 1,07

1,27 1,25 1,33 1,19 1,14

1,39 1,37 1,33 1,28 1,23

1,53 1,50 1,45 1,39 1,33

1,69 1,65 1,59 1,52 1,44

1,87 1,82 1,75 1,66 1,57

2,08 2,01 1,92 1,82 1,71

2,33 2,23 2,12 2,00 1,87

2,60 2,47 2,34 2,20 2,05

2,89 2,74 2,58 2,42 2,24

3,21 3,02 2,83 2,65 2,44

3,54 3,32 3,10 2,88 2,65

0,82 0,78 0,72 0,66 0,59

0,84 0,79 0,74 0,67 0,60

0,87 0,82 0,76 0,69 0,62

0,91 0,86 0,79 0,72 0,64

0,96 0,90 0,83 0,76 0,67

1,01 0,95 0,88 0,80 0,71

1,08 1,01 0,93 0,84 0,74

1,16 1,08 0,99 0,90 0,79

1,25 1,16 1,07 0,96 0,85

1,35 1,25 1,15 1,03 0,91

1,47 1,36 1,24 1,11 0,97

1,60 1,47 1,34 1,19 1,04

1,74 1,60 1,44 1,28 1,12

1,89 1,73 1,56 1,38 1,20

2,06 1,88 1,69 1,49 1,29

2,24 2,03 1,82 1,61 1,39

2,43 2,20 1,96 1,73 1,49

0,51 0,42 0,33 0,23 0,12

0,52 0,43 0,33 0,23 0,12

0,53 0,44 0,34 0,23 0,12

0,55 0,46 0,35 0,24 0,12

0,58 0,48 0,37 0,25 0,13

0,61 0,50 0,39 0,26 0,13

0,64 0,53 0,41 0,27 0,14

0,68 0,56 0,43 0,29 0,15

0,73 0,60 0,46 0,31 0,16

0,77 0,63 0,48 0,33 0,17

0,83 0,67 0,51 0,35 0,18

0,89 0,72 0,55 0,37 0,19

0,95 0,77 0,59 0,40 0,20

1,02 0,82 0,62 0,42 0,21

1,09 0,88 0,67 0,45 0,23

1,16 0,94 0,71 0,48 0,24

1,24 1,00 0,75 0,51 0,25

10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19°

Hozzáadni


Látszólagos alkoholtartalom t °C hőmérsékleten

75

Magyar Borkönyv


III/3.

Látszólagos alkoholtartalom t °C hőmérsékleten 1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

21° 22° 23° 24°

0,13 0,26 0,40 0,55

0,13 0,27 0,41 0,56

0,13 0,28 0,42 0,58

0,14 0,29 0,44 0,60

0,14 0,30 0,45 0,62

0,15 0,31 0,47 0,64

0,16 0,32 0,49 0,67

0,17 0,34 0,51 0,70

0,48 0,36 0,54 0,73

0,19 0,37 0,57 0,77

0,19 0,39 0,60 0,81

0,20 0,41 0,63 0,85

0,22 0,44 0,66 0,89

0,23 0,47 0,70 0,94

0,25 0,49 0,74 0,99

0,26 0,52 0,78 1,04

25° 26° 27° 28° 29°

0,69 0,85

0,71 0,87 1,03 1,21 1,39

0,73 0,90 1,07 1,25 1,43

0,76 0,93 1,11 1,29 1,47

0,79 0,96 1,15 1,33 1,52

0,82 1,00 1,19 1,38 1,58

0,85 1,04 1,23 1,43 1,63

0,89 1,08 1,28 1,49 1,70

0,93 1,13 1,34 1,55 1,76

0,97 1,18 1,40 1,62 1,84

1,02 1,24 1,46 1,69 1,92

1,07 1,30 1,53 1,77 2,01

1,13 1,36 1,60 1,85 2,10

1,19 1,43 1,68 1,93 2,19

1,25 1,50 1,76 2,02 2,29

1,31 1,57 1,84 2,11 2,39

1,57 1,75 1,94

1,61 1,80 2,00 2,20 2,41

1,66 1,86 2,06 2,27 2,48

1,72 1,92 2,13 2,34 2,56

1,78 1,98 2,20 2,42 2,64

1,84 2,05 2,27 2,50 2,72

1,91 2,13 2,35 2,58 2,81

1,98 2,21 2,44 2,67 2,91

2,07 2,30 2,53 2,77 3,02

2,15 2,39 2,63 2,88 3,13

2,25 2,49 2,74 2,99 3,25

2,35 2,60 2,86 3,12 3,38

2,45 2,71 2,97 3,24 3,51

2,56 2,83 3,09 3,37 3,65

2,67 2,94 3,22 3,51 3,79

2,62 2,83

2,70 2,91 3,13 3,36 3,59

2,78 3,00 3,23 3,47 3,70

2,86 3,09 3,33 3,57 3,81

2,95 3,19 3,43 3,68 3,93

3,05 3,29 3,54 3,79 4,05

3,16 3,41 3,65 3,91 4,17

3,27 3,53 3,78 4,03 4,30

3,39 3,65 3,91 4,17 4,44

3,51 3,78 4,04 4,31 4,58

3,64 3,91 4,18 4,46 4,74

3,78 4,05 4,33 4,61 4,90

3,93 4,21 4,49 4,77 5,06

4,08 4,37 4,65 4,94 5,23

3,82

3,94

4,06

4,18

4,31

4,47

4,57

4,71

4,86

5,02

5,19

5,36

5,53

30° 31° 32° 33° 34° 35° 36° 37° 38° 39° 40°

Kivonni


0

76

Magyar Borkönyv


III/3.

0° 1° 2° 3° 4°

14 3,49 3,40 3,29 3,16 3,03

15 4,02 3,87 3,72 3,55 3,38

16 4,56 4,36 4,17 3,95 3,75

17 5,11 4,86 4,61 4,36 4,11

18 5,65 5,35 5,05 4,77 4,48

19 6,16 5,82 5,49 5,17 4,84

20 6,63 6,26 5,89 5,53 5,17

21 7,05 6,64 6,25 5,85 5,48

22 7,39 6,96 6,55 6,14 5,74

23 7,67 7,23 6,81 6,39 5,97

24 7,91 7,45 7,02 6,59 6,16

25 8,07 7,62 7,18 6,74 6,31

26 8,20 7,75 7,31 6,86 6,43

27 8,30 7,85 7,40 6,97 6,53

28 8,36 7,91 7,47 7,03 6,59

29 8,39 7,95 7,51 7,07 6,63

30 8,40 7,96 7,53 7,09 6,66

5° 6° 7° 8° 9°

2,89 2,74 2,58 2,42 2,24

3,21 3,02 2,83 2,65 2,44

3,54 3,32 3,10 2,88 2,65

3,86 3,61 3,36 3,11 2,86

4,20 3,91 3,63 3,35 3,07

4,52 4,21 3,90 3,59 3,28

4,83 4,49 4,15 3,81 3,48

5,11 4,74 4,38 4,02 3,67

5,35 4,96 4,58 4,21 3,84

5,56 5,16 4,77 4,38 3,99

5,74 5,33 4,92 4,52 4,12

5,89 5,47 5,05 4,64 4,23

6,00 5,58 5,15 4,74 4,32

6,10 5,67 5,24 4,81 4,39

6,16 5,73 5,30 4,87 4,45

6,20 5,77 5,34 4,92 4,50

6,23 5,80 5,37 4,95 4,53

2,06 1,88 1,69 1,49 1,29

2,24 2,03 1,82 1,61 1,39

2,43 2,20 1,96 1,73 1,49

2,61 2,36 2,10 1,84 1,58

2,80 2,52 2,24 1,96 1,68

2,98 2,68 2,38 2,08 1,78

3,16 2,83 2,51 2,20 1,88

3,33 2,98 2,64 2,31 1,97

3,48 3,12 2,76 2,41 2,06

3,61 3,24 2,87 2,50 2,13

3,73 3,34 2,96 2,58 2,20

3,83 3,43 3,04 2,65 2,26

3,91 3,50 3,10 2,71 2,31

3,98 3,57 3,16 2,76 2,36

4,03 3,62 3,21 2,80 2,39

4,08 3,66 3,25 2,83 2,42

4,11 3,69 3,27 2,85 2,44

1,09 0,88 0,67 0,45 0,23

1,16 0,94 0,71 0,48 0,24

1,24 1,00 0,75 0,51 0,25

1,32 1,06 0,80 0,53 0,27

1,40 1,12 0,84 0,56 0,28

1,48 1,19 0,89 0,59 0,30

1,56 1,25 0,94 0,62 0,31

1,64 1,31 0,98 0,65 0,33

1,71 1,36 1,02 0,68 0,34

1,77 1,41 1,05 0,70 0,35

1,83 1,46 1,09 0,72 0,36

1,88 1,50 1,12 0,74 0,37

1,92 1,53 1,14 0,76 0,38

1,96 1,56 1,17 0,78 0,39

1,98 1,58 1,18 0,79 0,40

2,01 1,60 1,20 0,80 0,40

2,03 1,62 1,21 0,81 0,41

10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19°

Hozzáadni



77

Magyar Borkönyv


III/3.

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

21° 22° 23° 24°

0,23 0,47 0,70 0,94

0,25 0,49 0,74 0,99

0,26 0,52 0,78 1,04

0,28 0,55 0,82 1,10

0,29 0,57 0,86 1,15

0,30 0,60 0,90 1,20

0,31 0,62 0,93 1,25

0,33 0,65 0,97 1,29

0,34 0,67 1,01 1,34

0,35 0,70 1,04 1,39

0,35 0,72 1,07 1,43

0,37 0,74 1,10 1,46

0,38 0,75 1,12 1,50

0,38 0,76 1,15 1,53

0,39 0,78 1,17 1,55

0,39 0,79 1,18 1,57

0,40 0,80 1,19 1,59

25° 26° 27° 28° 29°

1,19 1,43 1,68 1,93 2,19

1,25 1,50 1,76 2,02 2,29

1,31 1,57 1,84 2,11 2,39

1,37 1,65 1,93 2,21 2,50

1,43 1,73 2,01 2,31 2,60

1,49 1,80 2,10 2,40 2,70

1,56 1,87 2,18 2,49 2,81

1,62 1,94 2,26 2,58 2,91

1,68 2,01 2,34 2,67 3,00

1,73 2,07 2,41 2,76 3,09

1,78 2,13 2,48 2,83 3,18

1,83 2,19 2,55 2,90 3,26

1,87 2,24 2,61 2,98 3,34

1,90 2,28 2,66 3,03 3,40

1,94 2,32 2,70 3,08 3,46

1,97 2,35 2,74 3,13 3,51

1,99 2,38 2,77 3,17 3,55

2,45 2,71 2,97 3,24 3,51

2,56 2,83 3,09 3,37 3,65

2,67 2,94 3,22 3,51 3,79

2,78 3,07 3,36 3,65 3,94

2,90 3,19 3,49 3,79 4,09

3,01 3,31 3,62 3,92 4,23

3,12 3,43 3,74 4,06 4,37

3,23 3,55 3,87 4,20 4,52

3,34 3,67 4,00 4,33 4,66

3,44 3,78 4,11 4,45 4,79

3,53 3,88 4,22 4,57 4,91

3,62 3,98 4,33 4,68 5,03

3,70 4,07 4,43 4,79 5,15

3,77 4,15 4,51 4,88 5,25

3,84 4,22 4,59 4,97 5,34

3,90 4,28 4,66 5,04 5,42

3,95 4,33 4,72 5,10 5,49

35° 36° 37° 38° 39°

3,78 4,05 4,33 4,61 4,90

3,93 4,21 4,49 4,77 5,06

4,08 4,37 4,65 4,94 5,23

4,23 4,52 4,82 5,12 5,41

4,38 4,68 4,98 5,29 5,59

4,53 4,84 5,15 5,46 5,77

4,69 5,00 5,31 5,63 5,94

4,84 5,16 5,48 5,80 6,12

4,98 5,31 5,64 5,97 6,30

5,12 5,46 5,80 6,13 6,47

5,26 5,60 5,95 6,29 6,63

5,38 5,73 6,09 6,43 6,78

5,50 5,86 6,22 6,57 6,93

5,61 5,97 6,33 6,69 7,06

5,71 6,08 6,44 6,81 7,18

5,80 6,17 6,54 6,92 7,29

5,87 6,25 6,63 7,01 7,39

40°

5,19

5,36

5,53

5,71

5,90

6,08

6,26

6,44

6,62

6,80

6,97

7,13

7,28

7,41

7,54

7,66

7,76

30° 31° 32° 33° 34°

Kivonni



78

III. TÁBLÁZAT NEMZETKÖZI, TÉRFOGATSZÁZALÉKBAN MEGADOTT ALKOHOLTARTALOM 20 °C HŐMÉRSÉKLETEN

Etil-alkohol--víz elegyek látszólagos sűrűségeinek táblázata –– normálüvegből készült eszközök Sűrűségek t °C hőmérsékleten a levegő felhajtóerejével korrigálva Alkoholtartalom, % (V/V) t 0° 1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° 8° 9° 10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19° 20°

0 999,34 -0,90 999,43 -0,06 999,49 -0,05 999,34 -0,03 999,57 -0,02 999,59 0,00 999,59 0,01 999,58 0,03 999,55 0,04 999,51 0,06 999,45 0,07 999,38 0,09 999,29 0,09 999,20 0,11 999,09 0,12 998,97 0,13 998,84 0,14 998,70 0,15 998,55 0,17 998,38 0,18 998,20

1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,52 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,50 1,50

1 997,82 -0,09 997,91 -0,06 997,97 -0,05 998,02 -0,03 998,05 -0,02 998,07 0,00 998,07 0,01 998,06 0,03 998,03 0,04 997,99 0,06 997,93 0,06 997,87 0,09 997,78 0,09 997,69 0,11 997,58 0,12 997,46 0,13 997,33 0,14 997,19 0,15 997,04 0,16 996,88 0,18 996,70

1,45 1,45 1,40 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,46 1,47 1,47 1,47

2 996,37 -0,09 996,46 -0,06 996,52 -0,04 996,56 -0,03 996,59 -0,02 996,61 0,00 996,61 0,01 996,60 0,03 996,57 0,04 996,53 0,06 996,47 0,06 996,41 0,09 996,32 0,09 996,23 0,11 996,12 0,12 996,00 0,13 995,87 0,14 995,73 0,16 995,57 0,16 995,41 0,18 995,23

1,39 1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42 1,42

3 994,98 -0,08 995,06 -0,06 995,12 -0,04 995,16 -0,03 995,19 -0,02 995,21 0,01 995,20 0,01 995,19 0,03 995,16 0,04 995,12 0,06 995,06 0,07 994,99 0,09 994,90 0,09 994,81 0,11 994,70 0,12 994,58 0,13 994,45 0,14 994,31 0,16 994,15 0,16 993,99 0,18 993,81

1,35 1,35 1,35 1,35 1,36 1,36 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,39 1,40

4 993,63 -0,08 993,71 -0,06 993,77 -0,04 993,81 -0,02 993,83 -0,02 993,85 0,01 993,84 0,01 993,83 0,04 993,79 0,04 993,75 0,06 993,69 0,07 993,62 0,09 993,53 0,10 993,43 0,11 993,32 0,12 993,20 0,14 993,06 0,14 992,92 0,16 992,76 0,16 992,60 0,19 992,41

1,29 1,29 1,30 1,30 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,32 1,33 1,33 1,33 1,33 1,34 1,34 1,34 1,35 1,35 1,35 1,35

5 992,34 -0,08 992,42 -0,05 992,47 -0,04 992,51 -0,02 992,53 -0,01 992,54 0,01 992,53 0,02 992,51 0,04 992,47 0,04 992,43 0,07 992,36 0,07 992,29 0,09 992,20 0,10 992,10 0,12 991,98 0,12 991,86 0,14 991,72 0,15 991,57 0,16 991,41 0,16 991,25 0,19 991,06

1,24 1,25 1,25 1,26 1,26 1,27 1,27 1,27 1,28 1,29 1,29 1,29 1,30 1,30 1,30 1,31 1,31 1,31 1,32 1,33 1,33

Alkoholtartalom, % (V/V) t 0° 1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° 8° 9° 10° 11° 12° 13° 14° 15° 16° 17° 18° 19° 20°

6 991,10 -0,07 991,17 -0,05 991,22 -0,03 991,25 -0,02 991,27 0,00 991,27 0,01 991,26 0,02 991,24 0,05 991,19 0,05 991,14 0,07 991,07 0,07 991,00 0,10 990,90 0,10 990,80 0,12 990,68 0,13 990,55 0,14 990,41 0,15 990,26 0,17 990,09 0,17 989,92 0,19 989,73

1,18 1,20 1,21 1,21 1,22 1,22 1,23 1,23 1,23 1,24 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,28 1,29 1,30

7 989,92 -0,05 989,97 -0,04 990,01 -0,03 990,04 -0,01 990,05 0,00 990,05 0,02 990,03 0,02 990,01 0,05 989,96 0,06 989,90 0,07 989,83 0,08 989,75 0,11 989,64 0,10 989,54 0,13 989,41 0,13 989,28 0,15 989,13 0,15 988,98 0,17 988,81 0,18 988,63 0,20 988,43

1,15 1,15 1,16 1,16 1,17 1,17 1,18 1,19 1,20 1,20 1,21 1,22 1,22 1,23 1,23 1,24 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27

8 988,77 -0,05 988,82 -0,03 988,85 -0,03 988,88 0,00 988,88 0,00 988,88 0,03 988,85 0,03 988,82 0,06 988,76 0,06 988,70 0,08 988,62 0,09 988,53 0,11 988,42 0,11 988,31 0,13 988,18 0,14 988,04 0,15 987,89 0,16 987,73 0,18 987,55 0,18 987,37 0,21 987,16

1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,14 1,15 1,16 1,16 1,17 1,18 1,18 1,19 1,20 1,20 1,22 1,22 1,23 1,24 1,24

9 987,68 -0,04 987,72 -0,02 987,74 -0,02 987,76 0,01 987,75 0,01 987,74 0,03 987,71 0,04 987,67 0,07 987,60 0,06 987,54 0,09 987,45 0,10 987,35 0,11 987,24 0,12 987,12 0,14 986,98 0,14 986,84 0,17 986,67 0,17 986,50 0,18 986,32 0,19 986,13 0,22 985,92

1,05 1,06 1,06 1,08 1,08 1,09 1,10 1,11 1,11 1,13 1,14 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,18 1,18 1,19 1,20 1,21

10 986,63 -0,03 986,66 -0,02 986,68 0,00 986,68 0,01 986,67 0,02 986,65 0,04 986,61 0,05 986,56 0,07 986,49 0,08 986,41 0,10 986,31 0,10 986,21 0,12 986,09 0,13 985,96 0,15 985,81 0,15 985,66 0,17 985,49 0,17 985,32 0,19 985,13 0,20 984,93 0,22 984,71

1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,07 1,08 1,09 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,17 1,18 1,19

11 985,63 -0,02 985,65 -0,01 985,66 0,01 985,65 0,02 985,63 0,03 985,60 0,06 985,54 0,06 985,48 0,08 985,40 0,08 985,32 0,11 985,21 0,11 985,10 0,13 984,97 0,14 984,83 0,16 984,67 0,16 984,51 0,18 984,33 0,18 984,15 0,19 983,96 0,21 983,75 0,23 983,52

0,96 0,97 0,98 0,99 1,00 1,02 1,02 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17

2


0 998,20 0,19 998,01 0,20 987,81 0,21 997,60 0,21 997,39 0,23 997,16 0,23 996,93 0,25 996,68 0,25 996,43 0,26 996,17 0,27 995,90 0,29 995,61 0,29 995,32 0,30 995,02 0,30 994,72 0,32 994,40 0,32 994,08 0,33 993,75 0,34 993,41 0,35 993,06 0,35 992,71

1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,50 1,51 1,51 1,51 1,51 1,52 1,53 1,53 1,53 1,54 1,54 1,54 1,55

1 996,70 0,19 996,51 0,20 996,31 0,21 996,10 0,21 995,89 0,23 995,66 0,23 995,43 0,25 995,18 0,25 994,93 0,27 994,66 0,27 994,39 0,29 994,10 0,29 993,81 0,31 993,50 0,31 993,19 0,32 992,87 0,32 992,55 0,34 992,21 0,34 991,87 0,35 991,52 0,36 991,16

1,47 1,47 1,46 1,46 1,47 1,47 1,47 1,47 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,48 1,49 1,49 1,50 1,51 1,51

2 995,23 0,19 995,04 0,19 994,85 0,21 994,64 0,22 994,42 0,23 994,19 0,23 993,96 0,25 993,71 0,26 993,45 0,27 993,18 0,27 992,91 0,29 992,62 0,29 992,33 0,31 992,02 0,31 991,71 0,32 991,39 0,33 991,06 0,34 990,72 0,35 990,37 0,36 990,01 0,36 989,65

1,42 1,42 1,43 1,43 1,43 1,43 1,44 1,44 1,44 1,44 1,45 1,45 1,45 1,45 1,45 1,46 1,46 1,46 1,47 1,47 1,48

3 993,81 0,19 993,62 0,20 993,42 0,21 993,21 0,22 992,99 0,23 992,76 0,24 992,52 0,25 992,27 0,26 992,01 0,27 991,74 0,28 991,46 0,29 991,17 0,29 990,88 0,31 990,57 0,31 990,26 0,33 989,93 0,33 989,60 0,34 989,26 0,36 988,90 0,36 988,54 0,37 988,17

1,40 1,40 1,40 1,40 1,40 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,42 1,42 1,43 1,43 1,43 1,43 1,44 1,44 1,44 1,45

4 992,41 0,19 992,22 0,20 992,02 0,21 991,81 0,22 991,59 0,24 991,35 0,24 991,11 0,25 990,86 0,26 990,60 0,27 990,33 0,28 990,05 0,30 989,75 0,30 989,45 0,31 989,14 0,31 988,83 0,33 988,50 0,33 988,17 0,35 987,82 0,36 987,46 0,36 987,10 0,38 986,72

1,35 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,40 1,40 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,41 1,42

5 991,06 0,20 990,86 0,20 990,66 0,22 990,44 0,22 990,22 0,24 989,98 0,24 989,74 0,26 989,48 0,26 989,22 0,28 988,94 0,28 988,66 0,30 988,36 0,31 988,05 0,31 987,74 0,32 987,42 0,33 987,09 0,33 986,76 0,35 986,41 0,36 986,05 0,37 985,68 0,38 985,30

1,33 1,33 1,34 1,34 1,35 1,35 1,35 1,35 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37 1,38 1,38 1,39 1,39 1,39 1,39 1,39

3


6 989,73 0,20 989,53 0,21 989,32 0,22 989,10 0,23 988,87 0,24 988,63 0,24 988,39 0,26 988,13 0,27 987,86 0,28 987,58 0,28 987,29 0,30 986,99 0,31 986,68 0,31 986,37 0,33 986,04 0,33 985,71 0,34 985,37 0,35 985,02 0,36 984,66 0,37 984,29 0,38 983,91

1,30 1,31 1,31 1,31 1,31 1,32 1,33 1,33 1,34 1,34 1,34 1,35 1,35 1,36 1,36 1,36 1,36 1,37 1,37 1,37 1,37

7 988,43 0,21 988,22 0,21 988,01 0,22 987,79 0,23 987,56 0,25 987,31 0,25 987,06 0,26 986,80 0,28 986,52 0,28 986,24 0,29 985,95 0,31 985,64 0,31 985,33 0,32 985,01 0,33 984,68 0,33 984,35 0,34 984,01 0,35 983,65 0,36 983,29 0,37 982,92 0,38 982,54

1,27 1,27 1,28 1,29 1,29 1,29 1,30 1,31 1,31 1,32 1,32 1,33 1,33 1,34 1,34 1,34 1,35 1,35 1,36 1,36 1,36

8 987,16 0,21 986,95 0,22 986,73 0,23 986,50 0,23 986,27 0,25 986,02 0,26 985,76 0,27 985,49 0,28 985,21 0,29 984,92 0,29 984,63 0,31 984,31 0,31 984,00 0,33 983,67 0,33 983,34 0,33 983,01 0,35 982,66 0,36 982,30 0,37 981,93 0,37 981,56 0,38 981,18

1,24 1,25 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,29 1,29 1,29 1,30 1,30 1,31 1,31 1,32 1,33 1,33 1,33 1,34 1,34 1,35

9 985,92 0,22 985,70 0,22 985,48 0,24 985,24 0,24 985,00 0,25 984,75 0,27 984,48 0,28 984,20 0,28 983,92 0,29 983,63 0,30 983,33 0,32 983,01 0,32 982,69 0,33 982,36 0,34 982,02 0,34 981,68 0,35 981,33 0,36 980,97 0,38 980,59 0,38 980,22 0,39 979,83

1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,31 1,31 1,32 1,32 1,32 1,33 1,33

10 984,71 0,23 984,48 0,23 984,25 0,24 984,01 0,25 983,76 0,26 983,50 0,27 983,23 0,29 982,94 0,29 982,65 0,30 982,35 0,31 982,04 0,32 981,72 0,33 981,39 0,34 981,05 0,34 980,71 0,34 980,37 0,36 980,01 0,36 979,65 0,38 979,27 0,38 978,89 0,39 978,50

1,19 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,24 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32 1,32 1,33 1,33

11 983,52 0,23 983,29 0,24 983,05 0,25 982,80 0,26 982,54 0,27 982,27 0,28 981,99 0,29 981,70 0,30 981,40 0,31 981,09 0,32 980,77 0,32 980,45 0,34 980,11 0,34 979,77 0,35 979,42 0,35 979,07 0,37 978,70 0,37 978,33 0,38 977,95 0,39 977,56 0,39 977,17

1,17 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,31 1,32

4


10 986,63 -0,03 986,66 -0,02 986,68 0,00 986,68 0,01 986,67 0,02 986,65 0,04 986,61 0,05 986,56 0,07 986,49 0,08 986,41 0,10 986,31 0,10 986,21 0,12 986,09 0,13 985,96 0,15 985,81 0,15 985,66 0,17 985,49 0,17 985,32 0,19 985,13 0,20 984,93 0,22 987,71

1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,07 1,08 1,09 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,17 1,18 1,19

11 985,63 -0,02 985,65 -0,01 985,66 0,01 985,65 0,02 985,63 0,03 985,60 0,06 985,54 0,06 985,48 0,08 985,40 0,08 985,32 0,11 985,21 0,11 985,10 0,13 984,97 0,14 984,83 0,16 984,67 0,16 984,51 0,18 984,33 0,18 984,15 0,19 983,96 0,21 983,75 0,23 983,52

0,96 0,97 0,98 0,99 1,00 1,02 1,02 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17

12 984,67 -0,01 984,68 0,00 984,68 0,02 984,66 0,03 984,63 0,05 984,58 0,06 984,52 0,08 984,44 0,09 984,35 0,09 984,26 0,12 984,14 0,12 984,02 0,14 983,88 0,15 983,73 0,17 983,56 0,17 983,39 0,19 983,20 0,19 983,01 0,20 982,81 0,22 982,59 0,24 982,35

0,92 0,93 0,94 0,96 0,97 0,98 0,99 1,00 1,01 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,13 1,14 1,14

13 983,75 0,00 983,75 0,01 983,74 0,04 983,70 0,04 983,66 0,00 983,60 0,07 983,53 0,09 983,44 0,10 983,34 0,11 983,23 0,13 983,10 0,13 982,97 0,15 982,82 0,16 982,66 0,18 982,48 0,18 982,30 0,20 982,10 0,20 981,90 0,22 981,68 0,23 981,45 0,24 981,21

0,87 0,89 0,91 0,92 0,93 0,95 0,96 0,97 0,98 1,00 1,01 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,11 1,12 1,13

14 982,88 0,02 982,86 0,03 982,83 0,05 982,78 0,05 982,73 0,08 982,65 0,08 982,57 0,10 982,47 0,11 982,36 0,13 982,23 0,14 982,09 0,15 981,94 0,16 981,78 0,17 981,61 0,19 981,42 0,19 981,23 0,21 981,02 0,21 980,81 0,24 980,57 0,24 980,33 0,25 980,08

0,84 0,86 0,87 0,88 0,90 0,91 0,93 0,95 0,96 0,97 0,99 1,00 1,01 1,03 1,04 1,05 1,06 1,08 1,09 1,10 1,11

15 982,04 0,04 982,00 0,04 981,96 0,06 981,90 0,07 981,83 0,09 981,74 0,10 981,64 0,12 981,52 0,12 980,40 0,14 981,26 0,16 981,10 0,16 980,94 0,17 980,77 0,19 980,58 0,20 980,38 0,20 980,18 0,22 979,96 0,23 979,73 0,25 979,48 0,25 979,23 0,26 978,97

0,81 0,82 0,84 0,86 0,87 0,89 0,90 0,92 0,94 0,95 0,96 0,97 0,99 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,10

5


16 981,23 0,05 981,18 0,06 981,12 0,08 981,04 0,08 980,96 0,11 980,85 0,11 980,74 0,14 980,60 0,14 980,46 0,15 980,31 0,17 980,14 0,17 979,97 0,19 979,78 0,20 979,58 0,22 979,36 0,22 979,14 0,23 978,91 0,24 978,67 0,26 978,41 0,26 978,15 0,28 977,87

0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,98 0,90 0,92 0,93 0,94 0,96 0,98 0,99 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08

17 980,46 0,07 980,39 0,08 980,31 0,10 980,21 0,10 980,11 0,13 979,98 0,13 979,85 0,15 979,70 0,16 979,54 0,16 979,38 0,18 979,20 0,19 979,01 0,21 978,80 0,21 978,59 0,23 978,36 0,24 978,12 0,25 977,87 0,25 977,62 0,27 977,35 0,27 977,08 0,29 976,79

0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,84 0,86 0,88 0,90 0,92 0,93 0,95 0,96 0,98 0,99 1,01 0,02 1,04 1,05 1,07 1,08

18 979,71 0,09 979,62 0,10 979,52 0,12 979,40 0,12 979,28 0,14 979,14 0,15 978,99 0,17 978,82 0,18 978,64 0,18 978,48 0,19 978,27 0,21 978,06 0,22 977,84 0,23 977,61 0,24 977,37 0,26 977,11 0,26 978,85 0,27 976,58 0,28 976,30 0,29 976,01 0,30 975,71

0,73 0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,88 0,90 0,92 0,94 0,96 0,97 0,99 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,08

19 978,98 0,11 978,87 0,12 978,75 0,14 978,61 0,14 978,47 0,16 978,31 0,17 978,14 0,19 977,95 0,19 977,76 0,20 977,56 0,21 977,35 0,23 977,12 0,24 976,88 0,24 976,64 0,26 976,38 0,27 976,11 0,28 975,83 0,29 975,54 0,29 975,25 0,30 974,94 0,31 974,63

0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,82 0,84 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,95 0,97 0,98 0,99 1,01 1,02 1,04 1,05 1,07

20 978,26 0,13 978,13 0,14 977,99 0,16 977,83 0,16 977,67 0,18 977,49 0,19 977,30 0,20 977,10 0,21 976,89 0,22 976,67 0,23 976,44 0,25 976,19 0,26 975,93 0,26 975,67 0,27 975,40 0,28 975,12 0,30 974,82 0,30 974,52 0,31 974,21 0,32 973,89 0,33 973,56

0,70 0,72 0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,94 0,96 0,98 1,00 1,01 1,02 1,04 1,06 1,08

21 977,56 0,15 977,41 0,17 977,24 0,18 977,06 0,18 976,88 0,20 976,68 0,21 976,47 0,22 976,25 0,23 976,02 0,24 975,78 0,25 975,53 0,27 975,26 0,27 974,99 0,28 974,71 0,29 974,42 0,30 974,12 0,31 973,81 0,31 973,50 0,33 973,17 0,34 972,83 0,35 972,48

0,70 0,72 0,74 0,76 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,92 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,08

6


10 984,71 0,23 984,48 0,23 984,25 0,24 984,01 0,25 983,76 0,26 983,50 0,27 983,23 0,29 982,94 0,29 982,65 0,30 982,35 0,31 982,04 0,32 981,72 0,33 981,29 0,34 981,05 0,34 980,71 0,34 980,37 0,36 980,01 0,36 979,65 0,38 979,27 0,38 978,89 0,39 978,50

1,19 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,24 1,25 1,26 1,27 1,27 1,28 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32 1,32 1,33 1,33

11 983,52 0,23 983,29 0,24 983,05 0,25 982,80 0,26 982,54 0,27 982,27 0,28 981,99 0,29 981,70 0,30 981,40 0,31 981,09 0,32 980,77 0,32 980,45 0,34 980,11 0,34 979,77 0,35 979,42 0,35 979,07 0,37 978,70 0,37 978,33 0,38 977,95 0,39 977,56 0,39 977,17

1,17 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,28 1,29 1,29 1,30 1,31 1,31 1,32

12 982,35 0,23 982,12 0,25 981,97 0,26 981,61 0,27 981,34 0,28 981,06 0,29 980,77 0,30 980,47 0,30 980,17 0,32 979,85 0,33 979,52 0,33 979,19 0,34 978,85 0,35 978,50 0,36 978,14 0,36 977,78 0,37 977,41 0,38 977,03 0,39 976,64 0,39 976,25 0,40 975,85

1,14 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,26 1,27 1,28 1,29 1,30 1,30 1,31 1,32

13 981,21 0,25 980,96 0,26 980,70 0,27 980,43 0,28 980,15 0,29 979,86 0,29 979,57 0,31 979,26 0,31 978,95 0,33 978,62 0,34 978,28 0,34 977,94 0,35 977,59 0,35 977,24 0,37 976,87 0,37 976,50 0,38 976,12 0,39 975,73 0,39 975,34 0,40 974,94 0,41 974,53

1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,27 1,28 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32

14 980,08 0,26 979,82 0,27 979,55 0,28 979,27 0,29 978,98 0,30 978,68 0,30 978,38 0,32 978,06 0,32 977,74 0,34 977,40 0,35 977,05 0,35 976,70 0,36 976,34 0,36 975,78 0,38 975,60 0,38 975,22 0,38 974,84 0,40 974,44 0,40 974,04 0,41 976,63 0,42 973,21

1,11 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,31

15 978,97 0,28 978,69 0,28 978,41 0,29 978,12 0,30 977,82 0,31 977,51 0,31 977,20 0,33 976,87 0,33 976,54 0,35 976,19 0,36 975,83 0,36 975,47 0,37 975,10 0,37 974,73 0,39 974,34 0,39 975,95 0,39 973,56 0,41 973,15 0,41 972,74 0,42 972,32 0,42 971,90

1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,16 1,17 1,18 1,20 1,21 1,21 1,22 1,23 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32

7


16 977,87 0,29 977,58 0,29 977,29 0,30 976,99 0,31 976,68 0,32 976,36 0,33 976,03 0,34 975,69 0,35 975,34 0,36 974,98 0,37 974,62 0,37 974,25 0,38 973,87 0,39 976,48 0,40 973,08 0,40 972,68 0,40 972,28 0,42 971,86 0,42 971,44 0,43 971,01 0,43 970,58

1,08 1,10 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,28 1,29 1,30 1,31 1,33

17 976,79 0,31 976,48 0,31 976,17 0,31 975,86 0,32 975,54 0,33 975,21 0,34 974,87 0,36 974,51 0,36 974,15 0,37 973,78 0,38 973,41 0,38 973,03 0,39 972,64 0,40 972,24 0,41 971,83 0,41 971,42 0,42 971,00 0,43 970,57 0,43 970,14 0,44 969,70 0,45 969,25

1,08 1,09 1,10 1,12 1,13 1,15 1,16 1,17 1,19 1,20 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,33

18 975,71 0,32 975,39 0,32 975,07 0,33 974,74 0,33 974,41 0,35 974,06 0,35 973,71 0,37 973,34 0,38 972,96 0,38 972,58 0,38 972,20 0,39 971,81 0,40 971,41 0,41 971,00 0,42 970,58 0,43 970,15 0,43 969,72 0,44 969,28 0,44 968,84 0,45 968,39 0,47 967,92

1,08 1,09 1,10 1,11 1,13 1,14 1,16 1,17 1,18 1,19 1,21 1,22 1,24 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,31 1,32 1,33

19 974,63 0,33 974,30 0,33 973,97 0,34 973,63 0,35 973,28 0,36 972,92 0,37 972,55 0,38 972,17 0,39 971,78 0,39 971,39 0,40 970,99 0,40 970,59 0,42 970,17 0,42 969,75 0,43 969,32 0,44 968,88 0,44 968,44 0,45 967,99 0,46 957,53 0,46 967,07 0,48 966,59

1,07 1,09 1,10 1,12 1,13 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,21 1,23 1,24 1,25 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,33 1,34

20 973,56 0,35 973,21 0,35 972,86 0,35 972,51 0,36 972,15 0,38 971,77 0,38 971,39 0,39 921,00 0,40 970,60 0,40 970,20 0,42 969,78 0,42 969,36 0,43 968,93 0,43 968,50 0,45 968,05 0,45 976,60 0,45 967,15 0,46 966,69 0,47 966,22 0,48 965,74 0,49 965,25

1,08 1,09 1,10 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,19 1,21 1,22 1,23 1,25 1,27 1,27 1,29 1,31 1,32 1,33 1,34 1,35

21 972,48 0,36 972,12 0,36 971,76 0,37 971,39 0,38 971,01 0,39 970,62 0,39 970,23 0,41 969,82 0,41 969,41 0,42 968,99 0,43 968,56 0,43 968,13 0,45 967,68 0,45 967,23 0,45 966,78 0,47 966,31 0,47 965,84 0,47 965,37 0,48 964,89 0,49 964,40 0,50 963,90

1,08 1,09 1,11 1,13 1,14 1,15 1,17 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,26 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,34 1,36 1,37

8


20 978,26 0,13 978,13 0,14 977,99 0,16 977,83 0,16 977,67 0,18 977,49 0,19 977,30 0,20 976,10 0,21 976,89 0,22 970,67 0,23 976,44 0,25 976,11 0,26 975,93 0,26 975,67 0,27 975,40 0,28 975,12 0,30 974,82 0,30 974,52 0,31 974,21 0,32 973,89 0,33 973,56

0,70 0,72 0,75 0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,94 0,96 0,98 1,00 1,01 1,02 1,04 1,06 1,08

21 977,56 0,15 977,41 0,17 977,24 0,18 977,06 0,18 976,88 0,20 976,68 0,21 976,47 0,22 976,25 0,23 976,02 0,24 975,78 0,25 975,53 0,27 975,26 0,27 974,99 0,28 974,71 0,29 974,42 0,30 974,12 0,31 973,81 0,31 973,50 0,33 973,17 0,34 972,83 0,35 972,48

0,70 0,72 0,74 0,76 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,92 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,05 1,06 1,08

22 976,86 0,17 976,69 0,19 976,50 0,20 976,30 0,21 976,09 0,22 975,87 0,23 975,64 0,24 975,40 0,25 975,15 0,26 974,89 0,27 974,62 0,28 974,34 0,29 974,05 0,30 973,75 0,31 973,44 0,32 973,12 0,33 972,79 0,33 972,46 0,34 972,12 0,35 971,77 0,37 971,40

0,69 0,72 0,74 0,77 0,79 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,00 1,02 1,04 1,06 1,07 1,09

23 976,17 0,20 975,97 0,21 975,76 0,23 975,53 0,23 975,30 0,24 975,06 0,25 974,81 0,26 974,55 0,27 974,28 0,28 974,00 0,29 973,71 0,30 973,41 0,31 973,10 0,32 972,78 0,33 972,45 0,33 972,12 0,35 971,77 0,35 971,42 0,36 971,06 0,36 970,70 0,39 970,31

0,70 0,72 0,75 0,77 0,79 0,81 0,84 0,86 0,88 0,90 0,92 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,03 1,05 1,07 1,09 1,10

24 975,47 0,22 975,25 0,24 975,01 0,25 974,76 0,25 974,51 0,26 974,25 0,27 973,97 0,28 973,69 0,29 973,40 0,30 973,10 0,31 972,79 0,32 972,47 0,33 972,14 0,34 971,80 0,35 971,45 0,35 971,10 0,36 970,74 0,37 970,37 0,38 969,99 0,38 969,61 0,40 969,21

0,72 0,74 0,76 0,78 0,81 0,83 0,85 0,87 0,89 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,03 1,05 1,06 1,08 1,10 1,11

25 974,75 0,24 974,51 0,26 974,25 0,27 973,98 0,28 973,70 0,28 973,42 0,30 973,12 0,30 972,82 0,31 972,51 0,32 972,19 0,33 971,86 0,34 971,52 0,35 971,17 0,36 970,81 0,37 970,44 0,37 970,07 0,38 969,69 0,38 969,31 0,40 968,91 0,40 968,51 0,41 968,10

0,72 0,75 0,78 0,80 0,82 0,84 0,87 0,89 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,02 1,04 1,06 10,8 1,10 1,11 1,13

9


26 974,03 0,27 973,76 0,29 973,47 0,29 973,18 0,30 972,88 0,30 972,58 0,33 972,25 0,32 971,93 0,33 971,60 0,34 971,26 0,35 970,91 0,36 970,55 0,37 970,18 0,38 969,80 0,38 969,42 0,39 969,03 0,40 968,63 0,40 968,23 0,42 967,81 0,42 967,39 0,42 966,97

0,74 0,77 0,79 0,82 0,84 0,86 0,88 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,02 1,04 1,06 1,08 1,10 1,11 1,13 1,14

27 973,29 0,30 972,99 0,31 972,68 0,32 972,36 0,32 972,04 0,33 971,71 0,34 971,37 0,35 971,02 0,35 970,67 0,36 970,31 0,37 969,94 0,38 969,56 0,39 969,17 0,39 968,78 0,40 968,38 0,41 967,97 0,42 967,55 0,42 967,13 0,43 966,70 0,44 966,26 0,45 965,81

0,77 0,79 0,82 0,84 0,86 0,88 0,91 0,93 0,95 0,98 1,00 1,02 1,03 1,05 1,07 1,09 1,11 1,12 1,04 1,16 1,17

28 972,52 0,32 972,20 0,34 971,86 0,34 971,52 0,34 971,18 0,35 970,83 0,37 970,46 0,37 970,09 0,37 969,72 0,39 969,33 0,39 968,94 0,40 969,54 0,40 968,14 0,41 967,73 0,42 967,31 0,43 966,88 0,44 966,44 0,43 966,01 0,45 965,56 0,46 965,10 0,46 964,64

0,80 0,83 0,85 0,87 0,89 0,92 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,06 0,18 1,10 1,12 1,13 1,15 1,17 1,18 1,20

29 971,72 0,35 971,37 0,36 971,01 0,36 970,65 0,36 970,29 0,38 969,91 0,39 969,52 0,39 969,13 0,39 968,74 0,41 968,33 0,41 967,92 0,42 967,50 0,42 967,08 0,43 966,65 0,44 966,21 0,45 965,76 0,45 965,31 0,45 964,86 0,47 964,39 0,47 963,92 0,48 963,44

0,83 0,85 0,87 0,89 0,92 0,94 0,96 0,98 1,01 1,03 1,05 1,07 1,09 1,11 1,12 1,14 1,16 1,18 1,19 1,21 1,23

30 970,89 0,37 970,52 0,38 970,14 0,38 969,76 0,39 969,37 0,40 968,97 0,41 968,56 0,41 968,15 0,42 967,73 0,43 967,30 0,43 966,87 0,44 966,43 0,44 965,99 0,45 965,54 0,45 965,09 0,47 964,62 0,47 964,15 0,47 963,68 0,48 963,20 0,49 962,71 0,50 962,21

0,87 0,89 0,92 0,94 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,06 1,08 1,09 1,11 1,13 1,15 1,17 1,19 1,21 1,23 1,24 1,26

31 970,02 0,39 969,63 0,41 960,22 0,40 968,82 0,42 968,40 0,41 967,99 0,43 967,56 0,43 967,13 0,44 966,69 0,45 966,24 0,45 965,79 0,45 965,34 0,46 964,88 0,47 964,41 0,47 963,94 0,49 963,45 0,49 962,96 0,49 962,47 0,50 961,97 0,50 961,47 0,52 960,95

0,90 0,93 0,96 0,98 1,00 1,02 1,04 1,06 1,08 1,09 1,11 1,13 1,15 1,17 1,19 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,29

10


20 973,56 0,35 973,21 0,35 972,86 0,35 972,51 0,36 972,15 0,38 971,77 0,38 971,39 0,39 971,00 0,40 970,60 0,40 970,20 0,42 969,78 0,42 969,36 0,43 969,93 0,43 968,50 0,45 968,05 0,45 967,60 0,45 967,15 0,46 966,69 0,47 966,22 0,48 965,74 0,49 965,25

1,08 1,09 1,10 1,12 1,14 1,15 1,16 1,18 1,19 1,21 1,22 1,23 1,25 1,27 1,27 1,29 1,31 1,32 1,33 1,34 1,35

21 972,48 0,36 972,12 0,36 971,76 0,37 971,39 0,38 971,01 0,39 970,62 0,39 970,23 0,41 969,82 0,41 969,41 0,42 968,99 0,43 968,56 0,43 968,13 0,45 967,68 0,45 967,23 0,45 966,78 0,47 996,31 0,47 965,84 0,47 965,37 0,48 964,89 0,49 964,40 0,50 963,90

1,08 1,09 1,11 1,13 1,14 1,15 1,17 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,25 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,34 1,36 1,37

22 971,40 0,37 971,03 0,38 970,65 0,39 970,26 0,39 969,87 0,40 969,47 0,41 969,06 0,42 968,64 0,43 968,21 0,43 967,78 0,45 967,33 0,44 966,89 0,46 966,43 0,47 965,96 0,47 965,49 0,48 965,01 0,48 964,53 0,48 964,05 0,50 963,55 0,51 963,04 0,51 962,53

1,09 1,11 1,12 1,13 1,15 1,17 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,25 1,27 1,28 1,30 1,31 1,32 1,34 1,35 1,36 1,38

23 970,31 0,39 969,92 0,39 969,53 0,40 969,13 0,41 968,72 0,42 968,30 0,42 967,88 0,44 967,44 0,44 967,00 0,45 966,55 0,46 966,09 0,45 965,64 0,48 965,16 0,48 964,68 0,49 964,19 0,49 963,70 0,49 963,21 0,50 962,71 0,51 962,20 0,52 961,68 0,53 961,15

1,10 1,11 1,13 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,23 1,24 1,25 1,27 1,28 1,30 1,31 1,32 1,34 1,36 1,37 1,38 1,39

24 969,21 0,40 968,81 0,41 968,40 0,42 967,98 0,42 967,56 0,44 967,12 0,44 966,68 0,45 966,23 0,46 965,77 0,46 965,31 0,47 964,84 0,47 964,37 0,49 963,88 0,50 963,38 0,50 962,88 0,50 962,38 0,51 961,87 0,52 961,35 0,52 960,83 0,53 960,30 0,54 959,76

1,11 1,13 1,15 1,16 1,18 1,19 1,21 1,22 1,24 1,26 1,27 1,29 1,30 1,31 1,32 1,34 1,36 1,37 1,39 1,40 1,41

25 968,10 0,42 967,68 0,43 967,25 0,43 966,82 0,44 966,38 0,45 965,93 0,46 965,47 0,46 965,01 0,48 964,53 0,48 964,05 0,48 963,57 0,49 963,08 0,50 962,58 0,51 962,07 0,51 961,56 0,52 961,04 053 960,51 0,53 959,98 0,54 959,44 0,54 958,90 0,55 958,35

1,13 1,15 1,16 1,18 1,20 1,21 1,23 1,25 1,26 1,27 1,29 1,31 1,32 1,33 1,34 1,36 1,37 1,39 1,40 1,42 1,43

11


26 966,97 0,44 966,53 0,44 966,09 0,45 965,64 0,46 965,18 0,46 964,72 0,48 964,24 0,48 963,76 0,49 963,27 0,49 962,78 0,50 962,28 0,51 961,77 0,51 961,26 0,52 960,74 0,52 960,22 0,54 959,68 0,54 959,14 0,55 958,59 0,55 958,04 0,56 957,48 0,56 956,92

1,16 1,17 1,19 1,20 1,22 1,24 1,25 1,27 1,28 1,29 1,31 1,32 1,33 1,35 1,37 1,38 1,39 1,40 1,42 1,43 1,45

27 965,81 0,45 965,36 0,46 964,90 0,46 964,44 0,48 963,96 0,48 963,48 0,49 962,99 0,50 962,49 0,50 961,99 0,50 961,49 0,52 960,97 0,52 960,45 0,52 959,93 054 959,39 0,54 958,85 0,55 958,30 0,55 957,75 0,56 957,19 0,57 956,62 0,57 956,05 0,58 955,47

1,17 1,19 1,21 1,23 1,24 1,26 1,27 1,28 1,30 1,32 1,33 1,34 1,36 1,37 1,38 1,40 1,42 1,43 1,44 1,45 1,47

28 964,64 0,47 964,17 0,48 963,69 0,48 963,21 0,49 962,72 0,50 962,22 0,50 961,72 0,51 961,21 0,52 960,69 0,52 960,17 0,53 959,64 0,53 959,11 0,54 958,57 0,55 958,02 0,55 957,47 0,57 956,90 0,57 956,33 0,57 955,76 0,58 955,18 0,58 954,60 0,60 954,00

1,20 1,22 1,23 1,25 1,27 1,28 1,30 1,31 1,32 1,34 1,35 1,37 1,39 1,40 1,41 1,42 1,44 1,45 1,46 1,48 1,49

29 963,44 0,49 962,95 0,49 962,46 0,50 961,96 0,51 961,45 0,51 960,94 0,52 960,42 0,52 959,90 0,53 959,37 0,54 958,83 0,54 958,29 0,55 957,74 0,56 957,18 0,56 956,62 0,56 956,06 0,58 955,48 0,59 954,89 0,58 954,31 0,59 953,72 0,60 953,12 0,61 952,51

1,23 1,24 1,26 1,28 1,29 1,31 1,32 1,33 1,35 1,36 1,38 1,39 1,40 1,42 1,44 1,45 1,46 1,48 1,49 1,50 1,51

30 962,21 0,50 961,71 0,51 961,20 0,52 960,68 0,53 960,16 0,53 959,63 0,53 959,10 0,53 958,57 0,55 958,02 0,55 957,47 0,56 956,91 0,56 956,35 0,57 955,78 0,58 955,20 0,58 954,62 0,59 954,03 0,60 953,43 0,60 952,83 0,60 952,23 0,61 951,62 0,62 951,00

1,26 1,28 1,29 1,30 1,32 1,33 1,35 1,37 1,38 1,39 1,41 1,43 1,44 1,45 1,47 1,48 1,49 1,50 1,51 1,52 1,54

31 960,95 0,52 960,43 0,52 959,91 0,53 959,38 0,54 958,84 0,54 958,30 0,55 957,75 0,55 957,20 0,56 956,64 0,56 956,08 0,58 955,50 0,58 954,92 0,58 954,34 0,59 953,75 0,60 953,15 0,60 952,55 0,61 951,94 0,61 951,33 0,61 950,72 0,62 950,10 0,64 949,49

1,29 1,31 1,32 1,33 1,34 1,36 1,38 1,40 1,41 1,43 1,44 1,45 1,47 1,48 1,49 1,50 1,51 1,52 1,54 1,55 1,56

12

IV. TÁBLÁZAT

Összefüggés a tiszta etil-alkohol--víz elegyek és párlatok 20 °C hőmérsékleten mért törésmutatója és 20 °C hőmérsékleten mért alkoholtartalma között Törésmutató 20 °C hőmérsékleten

1,33628 1,33642 1,33656 1,33670 1,33685 1,33699 1,33713 1,33727 1,33742 1,33756 1,33770 1,33784 1,33799 1,33813 1,33827 1,33841 1,33856 1,33870 1,33884 1,33898 1,33912 1,33926 1,33940 1,33955 1,33969 1,33983 1,33997 1,34011 1,34025 1,34039 1,34053 1,34067 1,34081 1,34096 1,34110 1,34124 1,34138 1,34152 1,34166 1,34180 1,34194 1,34208

Alkoholtartalom 20 °C hőmérsékleten Etil-alkohol-víz Párlatok elegyek

6,54 6,79 7,05 7,30 7,58 7,83 8,09 8,34 8,62 8,87 9,12 9,36 9,63 9,87 10,12 10,35 10,61 10,86 11,10 11,33 11,47 11,81 12,05 12,30 12,53 12,76 13,00 13,23 13,47 13,70 13,93 14,16 14,41 14,66 14,89 15,13 15,36 15,59 15,83 16,06 16,29 16,52

0,25 0,26 0,25 0,28 0,25 0,26 0,25 0,28 0,25 0,25 0,24 0,27 0,24 0,25 0,23 0,26 0,25 0,24 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,23 0,23 0,24 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,25 0,25 0,23 0,24 0,23 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,24

6,48 6,74 7,00 7,27 7,54 7,79 8,05 8,30 8,56 8,81 9,06 9,30 9,55 9,81 10,05 10,29 10,54 10,78 11,02 11,26 11,50 11,74 11,98 12,22 12,46 12,69 12,92 13,15 13,40 13,62 13,86 14,04 14,32 14,57 14,81 15,06 15,28 15,50 15,74 15,96 16,19 16,41

0,26 0,26 0,27 0,27 0,25 0,26 0,25 0,26 0,25 0,25 0,24 0,25 0,26 0,24 0,24 0,25 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,25 0,22 0,24 0,23 0,23 0,25 0,24 0,25 0,22 0,22 0,24 0,22 0,23 0,22 0,24


1,34222 1,34236 1,34250 1,34264 1,34278 1,34291 1,34305 1,34319 1,34333 1,34347 1,34361 1,34375 1,34389 1,34403 1,34417 1,34431 1,34445 1,34458 1,34472 1,34486 1,34500 1,34513 1,34527 1,34541 1,34555 1,34568 1,34582 1,34596 1,34610 1,34623 1,34637 1,34651 1,34665 1,34678 1,34692 1,34706 1,34720 1,34733 1,34747 1,34760 1,34774 1,34788

Alkoholtartalom 20 °C hőmérsékleten Etil-alkohol-víz Párlatok elegyek

16,76 16,99 17,22 17,44 17,68 17,89 18,12 18,36 18,59 18,82 19,05 19,28 19,51 19,75 19,98 20,22 20,44 20,65 20,89 21,11 21,34 21,55 21,78 22,00 22,23 22,44 22,67 22,90 23,13 23,33 23,57 23,81 24,04 24,26 24,48 24,72 24,95 25,16 25,40 25,62 25,86 26,10

0,23 0,23 0,22 0,24 0,21 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,23 0,24 0,22 0,21 0,24 0,22 0,23 0,21 0,23 0,22 0,23 0,21 0,23 0,23 0,23 0,20 0,24 0,24 0,23 0,22 0,22 0,24 0,23 0,21 0,24 0,22 0,24 0,24 0,22

16,65 16,88 17,12 17,34 17,56 17,78 18,01 18,23 18,46 18,70 18,92 19,17 19,40 19,62 19,86 20,09 20,33 20,54 20,76 20,99 21,21 21,44 21,65 21,87 22,10 22,31 22,54 22,75 22,96 23,17 23,40 23,61 23,85 24,09 24,31 24,56 24,78 25,00 25,23 25,45 25,70 25,93

0,23 0,24 0,22 0,22 0,22 0,23 0,22 0,23 0,24 0,22 0,25 0,23 0,22 0,24 0,23 0,24 0,21 0,22 0,23 0,22 0,23 0,21 0,22 0,23 0,21 0,23 0,21 0,21 0,21 0,23 0,21 0,24 0,24 0,22 0,25 0,22 0,22 0,23 0,22 0,25 0,23 0,22

13

AZ ÖSSZES EXTRAKTTARTALOM MEGHATÁROZÁSA1

4.

1.

MEGHATÁROZÁS Az összes extrakttartalom, vagy az összes szárazanyag-tartalom minden olyan anyagot magában foglal, amely meghatározott fizikai körülmények között nem párolog el. Ezeknek a fizikai körülményeknek olyanoknak kell lenniük, hogy a vizsgálat során az extraktösszetevők a lehető legkisebb változáson menjenek át. A redukálóanyag-mentes extrakt az összes extrakttartalom és az összes cukortartalom különbsége. A redukált ( cukormentes) extrakt az összes extrakt és az 1 g/l-t meghaladó összes cukor, az 1 g/l-t meghaladó kálium-szulfát, az esetleg jelen lévő mannit és bármilyen, a borhoz hozzáadott egyéb anyag különbsége. A maradék extrakt a cukormentes extrakt, valamint a borkősavban kifejezett kötött savtartalom különbsége. Az extraktot g/l-ben fejezzük ki és 0,5 g-os pontossággal kell megadni.

2.

A MÓDSZER ELVE

Egyszerű módszer: meghatározás sűrűségmérővel Az összes extrakttartalmat közvetett módon a must sűrűségéből, illetve bor esetében pedig az alkoholmentes bor sűrűségéből számítjuk. A szárazanyag-tartalom annak a vizes oldatnak a g/l cukorban kifejezett koncentrációja,

amelynek

sűrűsége

megegyezik

a

mustnak

vagy

az

alkoholmentesített bornak a sűrűségével. 3.

SZÁMÍTÁSI MÓDSZER Az ‘alkoholmentes bor’ dr 20/20 sűrűségét az alábbi összefüggéssel számítjuk ki:

dr = dv - da + 1,000 ahol:

dv = a bor sűrűsége 20 °C hőmérsékleten (illósav-tartalommal korrigálva)2 1 2

A 2676/1990 EK rendelet mellékletének 4. módszere E számítás végrehajtása előtt a bor fent meghatározottak szerint mért relatív sűrűségét, illetve sűrűségét korrigálni kell az illósav hatásával az alábbi összefüggés szerint: 20 o C

dv = d 20 o C – 0,0000086a vagy ρv = ρ20 – 0,0000086a ahol a az illósav-tartalom milliekvivalens/l-ben van kifejezve. 14

da = a bornak megfelelő alkoholtartalmú víz-alkohol elegy sűrűsége 20 °C hőmérsékleten dr a bor ρv és az ugyanolyan alkoholtartalmú víz--alkohol elegy ρa 20 °C-on mért sűrűségéből is kiszámítható az alábbi képlettel: dr = 1,0018 (ρv + ρa) + 1,000 abban az esetben, ha a pv kisebb, mint 1,05 – az esetek többségében – az 1,0018 faktor helyett 1-et használhatunk. 4.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA Az összes extraktot g/l-ben az I. táblázatból keressük ki, a must, illetve az alkoholmentes bor d20/20 sűrűségének megfelelően. Az összes extrakttartalmat egy tizedes pontossággal adjuk meg.

15

I. TÁBLÁZAT

Az összes extrakttartalom kiszámításához (g/l) Relatív sűrűség két tizedessel

A relatív sűrűség harmadik tizedese 0

1

2

3

1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20

0 25,8 51,7 77,7 103,7 129,8 155,9 182,1 208,4 234,7 261,0 287,4 313,9 340,4 366,9 393,6 420,3 447,1 473,9 500,9 527,8

2,6 28,4 54,3 80,3 106,3 132,4 158,6 184,8 211,0 237,3 263,6 290,0 316,5 343,0 369,6 396,2 423,0 449,8 476,6 503,5 –

5,1 31,0 56,9 82,9 109,0 135,0 161,2 187,4 213,6 239,9 266,3 292,7 319,2 345,7 372,3 398,9 425,7 452,4 479,3 506,2 –

7,7 33,6 59,5 85,5 111,6 137,6 163,8 190,0 218,9 245,2 271,5 298,0 324,5 351,0 377,6 404,3 431,0 457,8 484,7 511,6 –

4

5

Extrakt g/l 10,3 12,9 36,2 38,8 62,1 64,7 88,1 90,7 114,2 116,8 140,3 142,9 166,4 169,0 192,6 195,2 218,9 221,5 245,2 247,8 271,5 274,2 298,0 300,6 324,5 327,1 351,0 353,7 377,6 380,3 404,3 406,9 431,0 433,7 457,8 460,5 484,7 487,4 511,6 514,3 – –

6

7

8

9

15,4 41,3 67,3 93,3 119,4 145,5 171,6 197,8 224,1 250,4 276,8 303,3 329,8 356,3 382,9 409,6 436,4 463,2 490,1 517,0 –

18,0 43,9 69,9 95,9 122,0 148,1 174,3 200,5 226,8 253,1 279,5 305,9 332,4 359,0 385,6 412,3 439,0 465,9 492,8 519,7 –

20,6 46,5 72,5 98,5 124,6 150,7 176,9 203,1 229,4 255,7 282,1 308,6 335,1 361,6 388,3 415,0 441,7 468,6 495,5 522,4 –

23,2 49,1 75,1 101,1 127,2 153,3 179,5 205,8 232,0 258,4 284,8 311,2 337,8 364,3 390,9 417,6 444,4 471,3 498,2 525,1 –

Interpolációs táblázat A relatív sűrűség negyedik tizedese 1 2 3

Extrakt, g/l

0,3 0,5 0,8

A relatív sűrűség negyedik tizedese 4 5 6

Extrakt, g/l

1,0 1,3 1,6

A relatív sűrűség negyedik tizedese 7 8 9

Extrakt, g/l

1,8 2,1 2,3

16

A REDUKÁLÓCUKOR-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA3

5.

1.

MEGHATÁROZÁS A redukálócukrok azok a cukrok, amelyek keto- vagy aldehidcsoportot tartalmaznak, és amelyeket a lúgos réz-szulfát-oldatára gyakorolt redukáló hatásuk alapján határozunk meg.

2.

A MÓDSZEREK ELVE

2.1.

Referencia-módszer Semlegesítés és az alkohol eltávolítása után a bor ioncserélő oszlopon halad keresztül, amelyben az anionok acetátionokra cserélődnek, amit semleges ólomacetáttal végzett derítés követ.

2.2.

Szokásos módszerek A bort az alábbi reagensek valamelyikével kezelik. - semleges ólom-acetát; - cink-hexaciano-ferrát(II).

2.3.

Egyszerű módsze: A derített bort vagy a mustot meghatározott mennyiségű lúgos réz-szulfát-oldattal reagáltatjuk, és a feleslegben maradt rézionokat jodometriás módszerrel határozzuk meg.

3.

DERÍTÉS A vizsgálandó oldat várható cukortartalmának 0,5 és 5 g/l között kell lennie. A száraz borokat nem, az édes borokat azonban hígítjuk a derítés során abból a célból, hogy a cukorkoncentráció az alábbi táblázatban előírt határértékek közé essen: Megnevezés

Cukortartalom

Sűrűség

(g/l)

Hígítás %

Mustok és misztellák

> 125

> 1,038

1

Édes borok, alkohol

25 – 125

1,005 – 1,038

4

Félédes borok

5 – 25

0,997 – 1,005

20

Száraz borok

<5

< 0,997

Hígítás nélkül

hozzáadásával vagy anélkül

3

A 2676/1990/EK rendelet mellékletének 5. módszere 17

3.1.

Referencia-módszer

3.1.1.

Reagensek

3.1.1.1.

1 M sósavoldat (HCl);

3.1.1.2.

1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH);

3.1.1.3.

4 M ecetsavoldat (CH3COOH);

3.1.1.4.

2 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH);

3.1.1.5.

Anion-cserélő gyanta (Dowex 3 (20-50 mesh) vagy ennek megfelelő gyanta).

Az anioncserélő gyantaoszlop előkészítése: Helyezzünk egy kis üveggyapot dugót és 15 ml anioncserélő gyantát (3.1.1.5) egy 50 ml-es büretta aljára. Mielőtt a gyantát használnánk, végezzünk el rajta két teljes regenerálási ciklust úgy, hogy felváltva 1 M sósavat (3.1.1.1) és 1 M nátrium-hidroxidot (3.1.1.2) engedünk át rajta. Miután 50 ml desztillált vízzel átöblítettük, tegyük át a gyantát egy főzőpohárba, adjunk hozzá 50 ml 4 M ecetsavoldatot (3.1.1.3), és keverjük öt percig. Töltsük fel a bürettát gyantával, és öntsünk át 100 ml 4 M ecetsavoldatot (3.1.1.3) az oszlopon (célszerű gyantát készenlétben tartani 4 M ecetsavval feltöltött üvegben). Mossuk át az oszlopot desztillált vízzel a kiáramló folyadék semlegessé válásáig.

A gyanta regenerálása Folyassunk át 150 ml 2 M nátrium-hidroxid-oldatot a gyantán, hogy eltávolítsuk a savakat és a gyantához kötődött színezékek nagy részét. Öblítsük át 100 ml vízzel, majd öntsünk át rajta 100 ml 4 M ecetsavoldatot. Mossuk, amíg az oszlopból kijövő folyadék semleges lesz. 3.1.1.6.

Semleges ólom-acetát-oldat (közel telített) 250 g semleges ólom-acetátot [Pb (CH3 COO)2 ⋅ 3 H2O] nagyon forró vízben keverés mellett feloldunk, majd 500 ml-re töltjük.

18

3.1.1.7.

Kalcium-karbonát (Ca CO3)

3.1.2.

Eljárás

3.1.2.1.

Száraz borok Öntsünk 50 ml bort egy 10-12 cm átmérőjű lepárlócsészébe 0,5 (n - 0,5) ml 1 M nátrium-hidroxid oldattal (3.1.1.2.) együtt (n a 10 ml borban lévő összes savtartalom meghatározásához felhasznált 0,1 M nátrium-hidroxid oldat térfogata), és helyezzük forrásban lévő vízfürdőre addig, amíg a forró légáramlat a folyadék mennyiségét kb. 20 ml-re csökkenti. Eresszük át ezt a folyadékot egy acetát formájú anioncserélő oszlopon (3.1.1.5) két percenként 3 ml-es sebességgel. Gyűjtsük az eluátumot 100 ml-es mérőlombikba. Mossuk át hatszor az edényt és az oszlopot, 10 ml desztillált vizet használva minden egyes alkalommal. Folyamatosan kevergetve adjunk az eluátumhoz 2,5 ml telített ólom-acetát-oldatot (3.1.1.6) és 0,5 g kalcium-karbonátot (3.1.1.7): rázzuk fel több alkalommal, és hagyjuk állni legalább 15 percig. Töltsük fel jelig vízzel, és szűrjük át. 1 ml szűrlet 0,5 ml bornak felel meg.

3.1.2.2.

Mustok, misztellák, édes és félédes borok Az alábbiakban megadott hígítások iránymutató jellegűek. 1.

Mustok és misztellák: a vizsgálandó oldat 10 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 10 ml-ét használjuk a meghatározáshoz.

2.

Szeszezett vagy nem szeszezett édes borok, amelyek sűrűsége 1,005 és 1,038 között van: a vizsgálandó oldat 20 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 20 mlét használjuk a meghatározáshoz.

3.

Félédes borok, amelyek 20 °C hőmérsékleten 0,997 és 1,005 közötti sűrűségűek. 20 ml hígítatlan bort használunk a meghatározáshoz.

Áramoltassuk át a fent említett bor- vagy mustmennyiségeket acetát formában lévő anioncserélő oszlopon, két percenként 3 ml-es sebességgel. Gyűjtsük össze az eluált folyadékot egy 100 ml-es mérőlombikban, és addig öblítsük az oszlopot, amíg kb. 90 ml folyadékot nyerünk. Adjunk az összegyűjtött folyadékhoz 0,5 g

19

kalcium-karbonátot és 1 ml telített ólom-acetát-oldatot. Keverjük össze, és hagyjuk 15 percig állni, alkalmanként megkeverve. Töltsük fel vízzel jelig, és szűrjük át. 1. esetén

1 ml szűrlet 0,01 ml mustnak vagy misztellának felel meg.

2. esetén

1 ml szűrlet 0,04 ml édes bornak felel meg.

3. esetén

1 ml szűrlet 0,20 ml félédes bornak felel meg.

3.2.

Szokásos módszerek

3.2.1.

Tisztítás semleges ólom-acetáttal

3.2.1.1.

Reagensek Semleges ólom-acetát-oldat (közel telített) (3.1.1.6) Kalcium-karbonát

3.2.1.2.

Eljárás

3.2.1.2.1. Száraz borok: öntsünk 50 ml bort egy 100 ml-es mérőlombikba: adjunk 1/2 (n - 0,5) ml 1 M nátrium-hidroxid-oldatot (3.1.1.2) (ahol n a 10 ml bor összes savtartalmának

meghatározásához

használt

0,1

M

nátrium-hidroxid-oldat

térfogata). Keverés közben adjunk hozzá 2,5 ml telített ólom-acetát-oldatot (3.1.1.6) és 0,5 g kalcium-karbonátot (3.1.1.7). Rázzuk fel több alkalommal, és hagyjuk legalább 15 percig állni. Töltsük fel a jelig, és szűrjük le. A szűrlet 1 ml-e 0,5 ml bornak felel meg. 3.2.1.2.2. Mustok, misztellák, édes és félédes borok: 100 ml-es mérőlombikba öntsük a következő térfogatú bort (vagy mustot, vagy misztellát), a hígítások iránymutató jellegűek: a) Mustok és misztellák: a vizsgálandó oldat 10 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 10 ml-ét használjuk a meghatározáshoz. b) Szeszezett vagy nem szeszezett édes borok, amelyek sűrűsége 1,005 és 1,038 között van: a vizsgálandó oldat 20 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 20 mlét használjuk a meghatározáshoz. c) Félédes borok, amelyek sűrűsége 20 °C hőmérsékleten 0,997 és 1,005 között van: vegyünk 20 ml hígítatlan bort.

20

Adjunk hozzá 0,5 g kalcium-karbonátot, kb. 60 ml vizet és 0,5, illetve 1 vagy 2 ml telített ólom-acetát oldatot. Keverjük meg, és hagyjuk állni legalább 15 percig, esetenként megkeverve. Töltsük fel vízzel a jelig, és szűrjük át.

3.2.2.

1. esetén


2. esetén


3. esetén


Derítés cink-hexaciano-ferrát(II)-tal Ez a derítési eljárás csak fehérborokhoz, enyhén színezett édes borokhoz és mustokhoz használható.

3.2.2.1

Reagensek

3.2.2.1.1. I. oldat, kálium-hexaciano-ferrát(II): 150 g kálium-hexaciano-ferrát(II)-ot (K4Fe(CN)6 ⋅ 3 H2O) töltsük fel vízzel 1 000 ml-re. 3.2.2.1.2. II. oldat, cink-szulfát: 300 g cink-szulfátot (ZnSO4 - 7 H2O) töltsük fel vízzel 1 000 ml-re. 3.2.2.2.

Eljárás Egy 100 ml-es mérőlombikba adjuk a következő bor térfogatokat (vagy must, vagy misztella), a hígítások iránymutató jellegűek: a) Mustok és misztellák: a vizsgálandó oldat 10 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 10 ml-ét használjuk a meghatározáshoz. b) Szeszezett vagy nem szeszezett édes borok, amelyek sűrűsége 1,005 és 1,038 között van: a vizsgálandó oldat 20 ml-ét 100 ml-re hígítjuk, és az oldat 20 mlét használjuk a meghatározáshoz. c) Félédes borok, amelyek sűrűsége 20 °C hőmérsékleten 0,097 és 1,005 között van: vegyünk 20 ml hígítatlan bort. d) Száraz borok: vegyünk 50 ml hígítatlan bort. Adjunk hozzá 5 ml kálium-hexaciano-ferrát (II)-oldatot (3.2.2.1.1) és 5 ml cink-szulfát-oldatot (3.2.2.1.2), keverjük össze. Töltsük fel jelig vízzel. Várjunk 10 percet és szűrjük le.

21

a) esetén


b) esetén


c) esetén


d) esetén

1 ml szűrlet 0,50 ml száraz bornak felel meg.

4.

MEGHATÁROZÁS

4.1.

Reagensek

4.1.1.

Lúgos rézsóoldat: réz-szulfát, a.lt., CuSO4 ⋅ 5H2O citromsav, a.lt., (C6H8O7 ⋅ H2O) kristályos nátrium-karbonát, (Na2CO3 ⋅ 10H2O) vízzel kiegészítve

25 g 50 g 388 g 1 000 ml-re

Oldjuk fel a réz-szulfátot 100 ml vízben, a citromsavat 300 ml vízben és a nátrium-karbonátot 300-400 ml forró vízben. Keverjük össze a citromsav- és nátrium-karbonát- oldatokat. Adjuk hozzá a réz-szulfát oldatot, és töltsük fel egy literre. 4.1.2.

30%-os kálium-jodid-oldat: kálium-jodid (KI) 30 g vízzel kiegészítve 100 ml-re. Tároljuk sötét üvegedényben.

4.1.3.

25%-os kénsavoldat: 25 g tömény kénsav (H2SO4) ρ20 = 1,84 g/ml vízzel felhígítva 100 ml-re. Öntsünk lassan a savat a vízbe, hagyjuk lehűlni, és hígítsuk fel 100 ml-re vízzel.

4.1.4.

5 g/l-es keményítőoldat: Keverjünk össze 5 g keményítőt kb. 500 ml vízzel. Forraljuk fel, folyamatosan keverjük, és forraljuk 10 percen át. Adjunk hozzá 200 g nátrium-kloridot (NaCl). Hagyjuk kihűlni, majd vízzel töltsük fel egy literre.

4.1.5.

0,1 M nátrium-tioszulfát- oldat (Na2S2O3)

4.1.6.

5 g/l invertcukoroldat,

22

ez az oldat a meghatározási módszer ellenőrzésére szolgál. Tegyük az alábbiakat egy 200 ml-es mérőlombikba: szacharóz, a.lt. (C12H22O11) víz, kb. tömény sósav (HCl) (ρ20 = 1,16–1,19 g/ml)

4,75g 100 ml 5 ml

Melegítsük a lombikot 60 °C hőmérsékleten tartott vízfürdőben, amíg az oldat hőmérséklete eléri az 50 °C-ot; ezután tartsuk a lombikot és az oldatot 15 percen keresztül 50 °C-on. Hagyjuk 30 percen keresztül természetes körülmények között lehűlni a lombikot, majd merítsük hideg vízfürdőbe. Töltsük át az oldatot 1 l-es mérőlombikba, és töltsük fel egy literre. Ez az oldat egy hónapig használható. Felhasználás előtt semlegesítsük az oldatot (az oldat savkoncentrációja mintegy 0,06 M) nátrium-hidroxid-oldattal. 4.2.

Eljárás Adjunk 25 ml lúgos rézsóoldatot, 15 ml vizet és 10 ml tisztított oldatot egy 300 mles Erlenmeyer-lombikba. Ez a cukoroldat nem tartalmazhat 60 mg-nál több invertcukrot. Adjunk hozzá néhány apró horzsakövet. Helyezzünk a lombikra egy visszafolyó hűtőt, és forraljuk fel a keveréket két percen belül. Forraljuk a keveréket pontosan 10 percig. Hűtsük le azonnal a lombikot hideg folyó vízben. Amikor teljesen hideg, adjunk hozzá 10 ml 30%-os kálium-jodid-oldatot (4.1.2), 25 ml 25%-os kénsavatoldatot (4.1.3) és 2 ml keményítőoldatot (4.1.4). Titráljuk 0,1 M nátrium-tioszulfát-oldattal (4.1.5). Legyen a felhasznált térfogat mleinek száma n. Végezzünk ezenkívül vaktitrálást is, ahol a 10 ml-es cukoroldat helyett 10 ml desztillált vizet használunk. Legyen a felhasznált nátrium-tioszulfát-oldat térfogat ml-ben kifejezett száma n'.

4.3.

Az eredmények megadása

4.3.1.

Számítás A vizsgált oldatban lévő cukor mennyisége,invertcukorban kifejezve a következő táblázatban található,a felhasznált nátrium-tioszulfát-oldat ml-ben kifejezett térfogata (n' - n) függvényében.

23

A bor cukortartalmát g/l invertcukorban fejezzük ki egy tizedes pontossággal, figyelembe véve a derítés során végzett hígítást és a vizsgált minta térfogatát. 4.3.2.

Ismételhetőség

r = 0,015 xi xi = a minta invertcukor-koncentrációja g/l-ben 4.3.3.

Reprodukálhatóság R = 0,058 xi xi = a minta invertcukor- koncentrációja g/l-ben

Összefüggés a 0,1 M nátrium-tioszulfát-oldat ml-ben kifejezett térfogata (n' - n) és a redukálócukrok mg-ban kifejezett mennyisége között Na2S2O3 RedukálóRedukálóNa2S2O3 Különbség Különbség (ml) cukor (mg) (ml) cukor (mg) 1 2,4 2,4 13 33,0 2,7 2 4,8 2,4 14 35,7 2,8 3 7,2 2,5 15 38,5 2,8 4 9,7 2,5 16 41,3 2,9 5 12,2 2,5 17 44,2 2,9 6 14,7 2,6 18 47,2 2,9 7 17,2 2,6 19 50,0 3,0 8 19,8 2,6 20 53,0 3,0 9 22,4 2,6 21 56,0 3,1 10 25,0 2,6 22 59,1 3,1 11 27,6 2,7 23 62,2 12 30,3 2,7

24

6.

A SZACHARÓZTARTALOM MEGHATÁROZÁSA4

1.

A MÓDSZEREK ELVE

I.

Vékonyréteg-kromatográfiával végzett kvalitatív vizsgálathoz: a szacharózt cellulóz bevonatú lemezen vékonyréteg kromatográfiás módszerrel elválasztjuk a többi cukortól. Az előhívószer karbamid-sósav elegy105 °C hőmérsékleten.

II.

Nagy

teljesítményű

meghatározáshoz:

a

folyadékkromatográfiával szacharózt

alkil-aminnal

végzett módosított

vizsgálathoz

és

kovasavoszlopon

választjuk el, és refraktometriás detektorral határozzuk meg. Az eredményt az ugyanilyen körülmények között analizált külső etalonhoz viszonyítva adjuk meg.

Megjegyzés: A must vagy a bor eredetisége ellenőrizhető a mustok, finomított mustsűrítmények és borok javításának kimutatásánál leírt, a deutérium mágneses magrezonanciáját alkalmazó módszerrel. A szacharóz vizsgálatára és meghatározására gázkromatográfia is alkalmazható a 42. fejezet (f) pontjában leírtak szerint. 2.

KVALITATÍV VIZSGÁLAT VÉKONYRÉTEG-KROMATOGRÁFIÁVAL

2.1.

Berendezések

2.1.1.

Kromatográfiás lemezek kívánt vastagságú cellulózréteggel bevonva (pl. MN 300, 20x20).

2.1.2.

Kromatográfiás edény.

2.1.3.

Mikrofecskendő vagy mikropipetta.

2.1.4.

Szárítószekrény, 105 ± 2 °C hőmérséklethez.

2.2.

Reagensek

2.2.1

Aktív szén.

4

A 2676/1990/ EK rendelet mellékletének 6. módszere 25

2.2.2.

Mozgó fázis: diklór-metán - jégecet (p20= 1,05 g/ml) – etil-alkohol – metil-alkohol - víz (50:25:9:6:10).

2.2.3.

Előhívóoldat Karbamid

5g

2 M sósav

20 ml

Etil-alkohol

100 ml

2.2.4.

Referenciaoldat Glükóz 35 g Fruktóz 35 g Szacharóz 0,5g Desztillált vízzel 1000 ml-re töltjük.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

A minta előkészítése Ha a must vagy a bor erősen színezett, színtelenítsük aktív szenes kezeléssel. Finomított mustsűrítmények esetén használjunk 25% (m/m)-os (25° Brix) cukorkoncentrációjú oldatot, amelyet a bor és a must pH-jának meghatározásához 24. rész 4.1.2 szakaszában leírtak szerint készítettünk elő, és hígítsuk vízzel 1:4 arányban (25 ml/100 ml).

2.3.2.

A kromatogram elkészítése Helyezzünk a lemez alsó szélétől 2,5 cm-re lévő párhuzamos vonalra: − 10 µl mintát, − 10 µl standardot. Helyezzük a lemezt a tartályba, a mozgó fázis párájával előzőleg átitatva. Engedjük, hogy a mozgó fázis a lemez tetejétől mért 1 cm-en belülre vándoroljon. Vegyük ki a lemezt, és szárítsuk meg meleg levegőárammal. Ismételjük meg a futtatást még kétszer, minden alkalommal megszárítva a lemezt. Fújjuk le a lemezt egyenletesen 15 ml előhívó oldattal, és helyezzük 105 °C hőmérsékletű szárítószekrénybe mintegy öt percre.

26

2.4.

Eredmények A szacharóz és a fruktóz mélykék foltként jelenik meg fehér háttérben: a glükóz kevésbé intenzív zöld foltot hagy.

3.

VIZSGÁLAT ÉS MEGHATÁROZÁS NAGY TELJESÍTMÉNYŰ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIÁVAL A kromatográfiás körülmények iránymutató jellegűek.

3.1.

Berendezés

3.1.1.

Nagy teljesítményű folyadékkromatográf, az alábbiakkal felszerelve: 1.

injektor,10 µl-es mintaadagolóval,

2.

detektor: differenciálrefraktométer vagy interferométer,

3.

elválasztó oszlop, (25 cm hosszúságú, 4 mm belső átmérőjű, álló fázis alkilaminnal módosított kovasav)

4.

egy előtétoszlop ugyanazzal a fázissal töltve,

5.

berendezés az előtétoszlop és az elválasztó oszlop termosztálására (30 °C),

6.

egy regisztrálókészülék és szükség esetén egy integrátor,

7.

mozgó fázis áramlási sebessége: 1 ml/perc.

3.1.2.

Membránszűrő (0,45 µm).

3.2.

Reagensek

3.2.1.

Kétszer desztillált víz.

3.2.2.

HPLC-minőségű acetonitril (CH3CN).

3.2.3.

Mozgó fázis: membránszűrőn (0,45 µm) előzőleg átszűrt acetonitril-víz (80:20 arányú elegye). A mozgó fázist használat előtt gáztalanítani kell.

3.2.4.

Standard I. oldat: 1,2 g/l vizes szacharózoldatot, szűrjük át 0,45 µm-es membránszűrőn.

27

3.3.

Eljárás

3.3.1.

A minta előkészítése: — Borok és mustok esetén: szűrjük át 0,45 µm-es membránszűrőn. — Finomított mustsűrítmények esetében: használjunk hígított, finomított mustsűrítményoldatot (40% (m/V), (lásd az összes savtartalomról szóló 13. rész 5.1.2 szakaszában leírtakat) és szűrjük át 0,45 µm-es membránszűrőn.

3.3.2.

Kromatográfiás meghatározás Injektáljunk a kromatográfba egymás után 10 µl standard oldatot és 10 µl, előkészített mintát, majd vegyük fel a kromatogramot. Ismételjük az injektálást ugyanebben a sorrendben. A szacharóz retenciós ideje mintegy 10 perc.

3.4.

Számítások A számításhoz használjuk a standard oldat és a minta 2-2 eredményének átlagát.

3.4.1.

Borok és mustok esetében: a koncentrációt g/l-ben adjuk meg.

3.4.2.

Finomított mustsűrítmény esetében: legyen C a szacharóz koncentráció a finomított mustsűrítmény 40 m/v%-os oldatában. A szacharóz koncentráció a finomított mustsűrítményben g/kg-ban ekkor: 2,5 C.

3.5.

Az eredmények megadása A borok és mustok szacharóztartalmát g/l-ben, a finomított mustsűrítmények szacharóztartalmát g/kg-ban adjuk meg, minden esetben egy tizedes pontosságig.

28

7. 1.

A GLÜKÓZ- ÉS A FRUKTÓZTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 5 MEGHATÁROZÁS A glükóz és a fruktóz enzimatikusan meghatározható. Ez a meghatározás a glükózfruktóz arány számítására is használható.

2.

A MÓDSZER ELVE A glükózt és a fruktózt az adenozin-5-trifosztát(ATP)-hexokináz (HK) enzim által katalizált enzimatikus reakció során foszforozza, és glükóz-6-foszfátot (G6P), valamint fruktóz-6-foszfátot (F6P) hoz létre: HK glükóz + ATP

G6P + ADP HK

fruktóz + ATP

F6P + ADP

A glükóz-6-foszfátot először a nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADP) glükóz-6-foszfát-dehidrogenáz (G6PDH) enzim jelenlétében glükonát-6-foszfáttá oxidálja. A keletkezett redukált nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADPH) mennyisége arányos a glükóz-6-foszfáttal, így a glükózzal. G6PDH glükonát-6-foszfát + NADPH + H+

G6P + NADP

A redukált nikotinamid-adenin-dinukleotid–foszfátot (NADPH) a 340 nm-en mért abszorbanciája alapján határozzuk meg. E reakció végén a fruktóz-6-foszfát glükóz-6-foszfáttá alakul a foszfoglükózizomeráz (PGI) hatására: PGI F6P

5

G6P


A glükóz-6-foszfát ismét reakcióba lép a nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfáttal, glükonát-6-foszfátot

és

redukált

nikotinamid-adenin-dinukleotid-

foszfátot(NADPH) hoz létre, az ismét meghatározható. 3.

ESZKÖZÖK − Spektrofotométer, amely lehetővé teszi 340 nm-en, az NADPH abszorpciós maximumán a méréseket. Mivel abszolút mérésekről van szó (a számításokhoz nem kalibrációs görbéket, hanem az NADPH moláris abszorpciós együtthatóját használjuk), ezért a készülék hullámhosszpontosságát és az abszorpció linearitását ellenőrizni kell. Ha a fenti spektrofotométer nem áll rendelkezésre, szakaszos spektrumú fotométer is használható, amely lehetővé teszi a méréseket 334 nm-en vagy 365 nm-en. —

Üvegküvetta 1 cm-es optikai úthosszal vagy egyszer használatos küvetta.

—

Pipetták az enzimes mintaoldatokhoz, 0,02, 0,05, 0,1, 0,2 ml.

4.

REAGENSEK

4.1.

1. oldat: pufferoldat (0,3 M trietanolamin pH=7,6, 4 x 10-3 M Mg2+). Oldjunk fel 11,2 g trietanol-amin-hidrokloridot ((C2H5)3N ⋅ HCl) és 0,2 g MgSO4 ⋅ 7H2O-t 150 ml kétszer desztillált vízben, és adjunk hozzá mintegy 4 ml 5 M nátrium-hidroxid-oldatot (NaOH), hogy 7,6 pH értéket kapjunk, és töltsük fel 200 ml-re. Ez a pufferoldat négy hétig tartható el +4 °C hőmérsékleten.

4.2.

2. oldat: nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát-oldat (kb. 11,5 x 10-3 M). Oldjunk fel 50 mg dinátrium-nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfátot 5 ml kétszer desztillált vízben. Ez az oldat négy hétig tartható el +4 °C hőmérsékleten.

4.3.

3. oldat: adenozin-5'-trifoszfát oldat (kb. 81 x 10-3 M). Oldjunk fel 250 mg dinátrium-adenozin-5'-trifoszfátot és 250 mg nátrium-hidrogénkarbonátot 5 ml kétszer desztillált vízben. Ez az oldat négy hétig tartható el +4 °C hőmérsékleten.

30

4.4.

4. oldat: hexokináz/glükóz-6-foszfát-dehidrogenáz. Keverjünk össze 0,5 ml hexokinázt (2 mg fehérje/ml, azaz 280 U/ml) 0,5 ml glükóz-6-foszfát-dehidrogenázzal (1 mg fehérje/ml). Ez a keverék egy évig tartható el kb. +4 °C hőmérsékleten.

4.5.

5. oldat: foszfoglükóz-izomeráz (2 mg fehérje/ml, azaz 700 U/ml). A szuszpenziót hígítás nélkül használjuk. Ez a szuszpenzió egy évig tartható el kb. +4 °C hőmérsékleten. Megjegyzés: A fenti oldatok mindegyike kereskedelmi forgalomban kapható.

5.

ELJÁRÁS

5.1.

A minta előkészítése A glükóz és

fruktóz várható koncentrációjától függően hígítsuk a mintát az

alábbiak szerint:

5.2.

Mérés

Mérés

340 és 334 nm-en

365 nm-en

Hígítás vízzel

F hígítási tényező

0,4 g/l-ig

0,8 g/l

–

–

4,0 g/l-ig

8,0 g/l

1+9

10

10,0 g/l-ig

20,0 g/l

1 + 24

25

20,0 g/l-ig

40,0 g/l

1 + 49

50

40,0 g/l-ig

80,0 g/l

1 + 99

100

40,0 g/l fölött

80,0 g/l

1 + 999

1000

Meghatározás 340 nm-es hullámhosszra beállított spektrofotométerrel végezzük el a méréseket, levegőt (nincs küvetta az optikai útban) vagy vizet használva referenciaként. A hőmérséklet 20 °C és 25 °C között legyen. Két küvettába, amelyek optikai útja 1 cm, helyezzük az alábbiakat:

31

Referenciaküvetta

Mintaküvetta

1. oldat (4.1.) 20 °C-ra beállítva

2,50 ml

2,50 ml

2. oldat (4.2.)

0,10 ml

0,10 ml

3. oldat (4.3.)

0,10 ml

0,10 ml

Mérendő minta Kétszer desztillált víz

0,20 ml 0,20 ml

Keverjük össze, majd kb. három perc múlva olvassuk le az oldatok abszorbanciáját (A1). A reakció a 4. oldat hozzáadásával kezdődik: 4. oldat (4.4.)

0,02 ml

0,02 ml

Keverjük össze; várjunk 15 percet; olvassuk le az abszorbanciát, és ellenőrizzük, hogy a reakció további két perc múlva befejeződött-e (A2). Végül adjuk hozzá az 5.oldatot: 5. oldat (4.5.)

0,02 ml

0,02 ml

Keverjük össze; olvassuk le 10 perc múlva az abszorbanciát, és ellenőrizzük, hogy újabb két perc elteltével megállt-e a reakció (A3). Számítsuk ki a referenciaküvettákra és a mintaküvettákra az abszorbanciák közötti különbségeket:

A2 - A1 megfelel a glükóznak, A3 - A2 megfelel a fruktóznak. Számítsuk ki az abszorbanciakülönbségeket a referenciaküvettára (∆AR) és a mintaküvettára (∆AS), és ebből az alábbiakat: glükózra: ∆AG= ∆AS - ∆AR fruktózra: ∆AF= ∆AS - ∆AR

Megjegyzés: Az enzimreakció befejeződéséhez szükséges idő tételről tételre változhat. A fenti érték csak iránymutató jellegű, és ajánlatos ezeket minden tételre meghatározni. 5.3.


5.3.1

Számítás

32

A koncentráció kiszámításának általános összefüggése a következő: C(g / l) =

V×M ∆A ε × d × v × 1000

ahol V v

a standard oldat térfogata (ml) a mintaoldat térfogata (ml)

M d

a meghatározandó anyag molekulatömege

ε

az NADPH abszorpciós együtthatója 340 nm-en (= 6,3 mmol-1 x 1 x

optikai úthossz a küvettában (cm) cm-1)

és

V V v

2,92 ml a glükóz meghatározásához

M d

180

2,94 ml a fruktóz meghatározásához 0,20 ml 1

így Glükóz esetén: Fruktóz esetén:

C (g/l) = 0,417 ∆AG C (g/l) = 0,420 ∆AF

Ha a mintát előkészítése során hígították, szorozzuk be az eredményt az F hígítási tényezővel.

Megjegyzés: Ha a méréseket 334 vagy 365 nm-en végeztük, az alábbi kifejezéseket kapjuk: − 334 nm-en végzett méréskor: ε = 6,2 (mmol-1 x 1 x cm-1) Glükóz esetén: C (g/l) = 0,425 ∆AG Fruktóz esetén: C (g/l) = 0,428 ∆AF − 365 nm-en végzett méréskor: ε = 3,4 (mmol x 1-1 x cm-1) Glükóz esetén: C (g/l) = 0,773 ∆AG Fruktóz esetén: C (g/l) = 0,778 ∆AF 5.3.2.

Ismételhetőség (r)

r = 0,056 xi 5.3.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 0,12 + 0,076 xi xi = a glükóz, illetve a fruktóz koncentrációja g/l-ben. 33

8.

MUSTOK, MUSTSŰRÍTMÉNYEK, FINOMÍTOTT MUSTSŰRÍTMÉNYEK ÉS BOROK JAVÍTÁSÁNAK KIMUTATÁSA A DEUTÉRIUM-TARTALOM MÁGNESES MAGREZONANCIÁS MÉRÉSÉVEL (SNIF-NMR/RMN-FINS)6 1.

MEGHATÁROZÁS A mustban lévő cukrokban és vízben található deutériumatomok erjedés után a bor I., II., III. és IV. molekuláiban az alábbiak szerint oszlanak meg: CH2D CH2 OH

CH3 CHD OH

I.

II.

CH3 CH2 OD

HOD

III.

IV.

A must erjedése előtti, cukrozása (száraz cukrozás) kihat a deutériumatomok eloszlására. Összehasonlítva az ugyanabból a régióból származó természetes bor paramétereire vonatkozó értékeket, a száraz cukrozás az alábbi változásokhoz vezet:

Paraméterek Bor

(D/H)I

(D/H)II

( D / H ) QW

R

— Természetes — Feljavított — Répacukor — Nádcukor — Kukoricacukor (D/H)I: izotóparány az I. molekulában (D/H)II :izotóparány a II. molekulában ( D / H ) QW : a borban lévő víz izotóparánya

R = 2(D/H)II/(D/H)I az I. és II. molekulákban lévő deutérium relatív eloszlását fejezi ki; R a jelek h intenzitásaiból közvetlenül mérhető, és így R = 3hII/hI.

6


(D/H)I mindenek előtt a növényfajt jellemzi, amely a cukrot szintetizálta, és kisebb mértékben a termőhely földrajzi fekvését, (a fotoszintézis során felhasznált víz jellegét). (D/H)II inkább a szőlőtermő helynek az éghajlati viszonyait reprezentálja (az esővíz és időjárási körülmények jellege), és kisebb mértékben az eredeti must cukortartalmát. (D / H )QW a termelés helyének éghajlati körülményeit és az eredeti must cukortartalmát reprezentálja. 2.

ALAPELV A fent megadott paramétereket [R, (D/H)I, (D/H)II] borból vagy a must, a mustsűrítmény, vagy a finomított mustsűrítmény erjedési termékeiből adott körülmények

között

kivont

etil-alkoholban

a

deutérium

mágneses

magrezonanciájával határozzuk meg; ezek a paraméterek kiegészíthetők a borból kivont víz izotóparányának meghatározásával (D / H )QW és az etila-lkoholban lévő 13

C/12C arány meghatározásával.

Az adatbank létrehozásáig az alábbiak szerint járunk el: Borok esetében a régiókból vett ellenőrző minták mellé ugyanolyan származású (földrajzi hely és évjárat) természetes ellenőrző mintákat (legalább hármat) kell társítani; három ilyen mintasorozatot kell venni. Mustok, mustsűrítmények és finomított mustsűrítmények esetén három sorozat ellenőrző mintát kell összeállítani ugyanolyan eredetű (földrajzi hely és évjárat) természetes mustokból. A saját területükön készült termékek ellenőrzésére, a közösségi adatbank létrehozásáig a tagállamok átmenetileg nemzeti adatbankot is használhatnak.

35

3.


3.1.

Az etil-alkohol és víz kinyerése a borból Megjegyzés: Bármilyen etanol-kinyerő berendezés alkalmazható, feltéve, hogy a bor vagy az erjesztett termék alkoholtartalmának legalább 98-98,5 %-át el lehet vele választani, és a végpárlat etanoltartalma 92-93% (m/m) (95%(V/V)).

3.1.1.

Eszközök és reagensek Az etil-alkohol kivonására szolgáló készülék (1. ábra) az alábbiakból áll: —

elektromos fűtőköpeny feszültségszabályozóval,

—

egy literes, normálcsiszolatos gömblombik,

—

Cadiot-oszlop forgatószalaggal (mozgó alkatrész teflonból),

—

125 ml-es, normálcsiszolatos Erlenmeyer-lombikok

—

125 és 60 ml-es műanyag dugós üvegek.

Karl Fischer-módszerrel végzendő vízmeghatározáshoz szükséges reagensek (például Merck 9241 és 9243). 3.1.2.

Eljárás

3.1.2.1.

Határozzuk meg a bor alkoholtartalmát (tv) 0,05% (V/V)-nál pontosabban.

3.1.2.2.

Az etil-alkohol kivonása Töltsünk be 500 ml tv alkoholtartalmú homogén bormintát egy kb. 0,9 állandó refluxarányú desztillációs készülék lombikjába. Készítsünk elő egy 125 ml-es normál csiszolatos, előzetesen lemért Erlenmeyer-lombikot a párlat fogadására. Gyűjtsük össze a forrásban lévő folyadékot 78,0 és 78,2 °C között, kb. 40-60 ml-t. Ha a hőmérséklet túllépi a 78,5 °C hőmérsékletet, szakítsuk meg a gyűjtést öt percre. Amikor a hőmérséklet visszatér 78 °C-ra, folytassuk a párlat gyűjtését 78,5 °C-ig, és ismételjük ezt a műveletet mindaddig, amíg a hőmérséklet a gyűjtés megszakítása és egy zárt körben való működés után állandó marad. A teljes lepárlás kb. öt órán keresztül tart. Ez az eljárás lehetővé teszi, hogy a borban lévő alkohol

36

98-98,5%-át visszanyerjük a párlatban, amelynek alkoholtartalma 92-93% (m/m) között van [95 % (V/V)], és amely alkoholtartalomra a 4. részben leírt mágneses magrezonancia (NMR) vizsgálati körülményeket kialakították. Az összegyűjtött etil-alkoholt megmérjük. A homogén desztillációs maradék 60 ml-ét őrizzük meg egy 60 ml-es lombikban. Ez tulajdonképpen a borból kivont víz, amelynek izotóparánya igény szerint határozható meg.

Megjegyzés: Ha rendelkezésre áll egy 10 ml-es szondával ellátott spektrométer (vö.: 4. rész), 300 ml homogén borminta is elegendő. 3.1.2.3.

A kivont etanoldesztillátum alkoholtartalmának meghatározása 0,5 ml, pontosan ismert tömegű (g), p jelű alkoholminta víztartalmát (p' g) Karl Fischer-módszerrel határozzuk meg.

37

Motor

Légmentes csatlakozás

Vákum

ATMOSZFÉRA

Hőmérő

Oszlop

Hőmérő

Dugó Szonda

Lombik

1. ábra Desztillációs készülék az etil-alkohol kivonásához

38

Az alkohol tömegkoncentrációját az alábbi összefüggés adja:

t mD =

p − p' × 100 l

3.2.

Must, mustsűrítmény és finomított mustsűrítmény erjesztése

3.2.1.

Eszközök és reagensek Borkősav DIFCO Bacto Yeast Nitrogen Base aminosavak nélkül Aktív szárított élesztők (Saccharomyces cerevisiae) Ha a mustból nyert víz izotóparánya ismert, az élesztőt felhasználás előtt 15 percre aktiválhatjuk minimális mennyiségű langyos, nem desztillált vízben, ha annak izotóparánya megegyezik a mustéval. Ha a mustból nyert víz izotóparánya nem ismert, előnyösebb az élesztő közvetlen alkalmazása. A 1,5 literes űrtartalmú erjesztőedény, olyan feltéttel ellátva, amely biztosítja – a levegő kizárásával – az alkoholgőzök kondenzálódását, mivel nem engedhető meg az etil-alkohol-veszteség az erjedés során. Az erjeszthető cukrok több, mint 98%-át alkohollá kell erjeszteni.

3.2.2.

Eljárás

3.2.2.1

Must − Friss must Töltsünk egy liter mustot, amelynek erjeszthető cukortartalmát előzetesen meghatároztuk, az erjesztőedénybe. Adjunk hozzá 1 g reaktivált szárított élesztőt. Helyezzük az erjesztőedényre a feltétet, amely lehetővé teszi az erjedés alatt a levegő kizárását. Az erjesztést kb. 20 °C hőmérsékleten a cukrok teljes kierjedéséig

folytassuk

le.

Az

erjesztési

termék

alkoholtartalmának

meghatározása és a cukrok alkohollá való átalakulási arányának kiszámítása után a kierjedt folyadékot centrifugáljuk, és pároljuk le az etil-alkohol kinyerése céljából.

39

− Kén-dioxiddal fojtott must Kéntelenítsünk egy liternél valamivel több (kb. 1,2 liter) mustot úgy, hogy nitrogént buborékoltatunk át a muston, amíg az összes kén-dioxid-tartalom kevesebb lesz 200 mg/l-nél. A mustot tartalmazó, visszafolyó feltéttel ellátott lombik 70-80 °C-os vízfürdőbe merül. Ügyeljünk arra, hogy a must ne sűrűsödjön be a hatékony hűtés miatti vízpárolgás következtében. Öntsünk egy liter kéntelenített mustot az erjesztő edénybe, és folytassuk a műveletet, ahogy azt a friss must esetében leírtuk.

Megjegyzés: Ha kálium-metabiszulfitot használtak a must kénezésére, 0,25 ml kénsavat (ρ20 = 1,84 g/ml) kell a musthoz adni kéntelenítés előtt az egy liter musthoz felhasznált metabiszulfit minden grammja után. 3.2.2.2.

Mustsűrítmény Öntsünk V ml ismert cukortartalmú mustsűrítményt (kb. 170 g) az erjesztőedénybe. Töltsük fel egy literre (1 000 - V) ml vízzel a természetes mustmintáknak megfelelő ugyanolyan izotóparányú normál vízből. Adjunk hozzá (3.2.1) szárított élesztőt (1 g) és 3 g aminosavak nélküli DIFCO Bacto Yeast Nitrogen Base-t. Homogenizáljunk, és járjunk el az előzőeknek megfelelően.

3.2.2.3

Finomított mustsűrítmény Járjunk el a 3.2.2.2 pontnak megfelelően, feltöltve egy literre (1 000 - V) ml ugyanolyan izotóparányú vízzel, amely ezenfelül még 3 g oldott borkősavat is tartalmaz.

Megjegyzés: Őrizzünk meg 50 ml mintát a mustból, a kén-dioxiddal kezelt mustból, a mustsűrítményből vagy a finomított mustsűrítményből azért, hogy a kivonható víz és ennek izotóparánya meghatározható legyen (D / H )QW . A mustban lévő víz kivonása egyszerűen elvégezhető azeotrópos desztillációval, toluol használatával. 3.3.

Az alkoholminta előkészítése NMR-mérésre

3.3.1.

Reagensek N,N-tetrametil-karbamid (TMU); használjunk egy standard TMU mintát, amelynek adott és ellenőrzött a D/H izotóparánya. Ez a minta beszerezhető az alábbi helyről:

40

Directorate-General for Science, Research and Development, Community Bureau of References, 200 rue de la Loi, B-1049 Brussels. 3.3.2.

Eljárás — 15 mm átmérőjű NMR-szonda: Egy előzetesen lemért mintacsőbe adjunk 7 ml olyan alkoholt, amelyet a 3.1.2 pont szerint kaptunk, és mérjük le 0,1 mg-os pontossággal (mA); ezután vegyünk a belső standard TMU-ból 3 ml-t, mérjük le 0,1 mg-os pontossággal (mst), majd homogenizáljuk rázással. — 10 mm átmérőjű NMR-szonda: 3,2 ml alkohol és 1,3 ml TMU elegendő. Az alkalmazott spektrométer és szonda típusától függően (vö. 4. pont) adjunk hozzá

megfelelő

mennyiségű

hexafluor-benzolt,

a

frekvenciamező

stabilizálására (zárás):

3.4.

Spektrométer

10 mm-es szonda

15 mm-es szonda

7,05 T

150 µl

200 µl

9,4 T

35 µl

50 µl

A vízminta előkészítése NMR-méréshez, az izotóparányának esetleges

meghatározására 3.4.1.

Reagensek N, N-tetrametil-karbamid (TMU): lásd a 3.3.1. pontot

3.4.2.

Eljárás Töltsünk 3 ml vizet, amelyet a 3.1.2. vagy 3.2. pont megjegyzése szerint eljárva kaptunk, tárázott mintacsőbe, és mérjük meg 0,1 mg-os pontossággal (m'E). Töltsünk 4 ml belső standardot (TMU), és mérjük meg 0,1 mg-os pontossággal (mst), homogenizáljuk rázással.

Megjegyzés: Ha a laboratóriumnak van tömegspektrométere az izotópok meghatározásához, a mérések elvégezhetők ezen a műszeren, az NMR-spektrométer terhelésének

41

csökkentése érdekében, mivel a vizsgálandó bor minden sorozatához a TIV arányt meg kell határozni. 4.

AZ ALKOHOL ÉS A VÍZ 2H NMR-SPEKTRUMÁNAK FELVÉTELE Az izotóparányok meghatározása.

4.1.

Eszközök — NMR-spektrométer szelektív ‘deutérium’szondával felszerelve, a B0 mező V0 karakterisztikus frekvenciájára hangolva (pl. B0 = 7,05 T, V0 = 46,05 MHz és B0 = 9,4 T, V0 = 61,4 MHz), protonleválasztó csatornával (B2) és mezőfrekvencia-stabilizáló csatornával (zárás) a fluor frekvenciáján. A spektrumon mért felbontásnak exponenciális szorzás nélkül átalakítva (azaz LB = 0) (2b ábra) és az etanol, metil és metilén jelei, valamint a TMU metil jele

félértékszélességének,

0,5

Hz-nél

kisebbnek

kell

lennie.

Az

érzékenységnek LB egyenlő 2-vel (2a ábra) exponenciális szorzótényezővel mérve nagyobbnak kell lennie 150-nél, vagy azzal egyenlőnek kell lennie a 95 % (V/V) [93,5% (m/m)] alkoholtartalmú etil-alkohol metil jelére. A fenti körülmények között a jelmagasság mérésének konfidenciaintervalluma 97,5%-os valószínűségre és a spektrum 10 ismétlésére számítva 0,35%. —

Automatikus mintaváltó (lehetőleg)

—

Adatfeldolgozó szoftver

—

15 mm-es vagy 10 mm-es mintacsövek a spektrométer teljesítményének megfelelően.

4.2.

Az NMR-spektrométer beállítása és ellenőrzése

4.2.1.

Beállítás A homogenitást és az érzékenységet a gyártó előírásai szerint állítsuk be.

4.2.2.

A beállítás ellenőrzése Használjunk C, V és B betűkkel jelölt referencia-etil-alkoholokat, amelyek izotóparányai különbözőek, de pontosan ismertek. Ezek a betűk a következőket jelölik: — C: nádcukorból vagy kukoricacukorból készült alkohol,

42

— V: borpárlat, — B: répacukorból származó alkohol. Ezeket a mintákat a Közösségi Referencia Hivatal biztosítja. A 4.3 pontban leírt eljárást követően határozzuk meg ezeknek az alkoholoknak az izotóparányait, Cmeas, Vmeas, Bmeas jelekkel jelölve (lásd az 5.3 pontot). Hasonlítsuk össze ezeket az adott megfelelő referenciaértékekkel, amelyek jelölése Cst, Bst, Vst (lásd az 5.3 pontot).

43

Háttér x 10

2a. ábra Borból származó etil-alkohol 2H NMR-spektruma belső standarddal (TMU: N, N-tetrametil-karbamid)

2b. ábra Az etanol 2H spektruma, amelyet ugyanolyan körülmények között vettek fel, mint a 2a. ábra esetében, de exponenciális szorzás nélkül (LB = 0) Minden egyes spektrum 10 ismétlésének átlagából kapott megismételhetőség szórásának, az R értékre vonatkoztatva, kisebbnek kell lenni 0,01-nél és 0,3 ppmnél a (D/H)I és (D/H)II esetében.

44

A különböző izotópos paraméterek (R, (D/H)I, (D/H)II) esetében kapott átlagos értékeknek a Közösségi Referencia Hivatal által adott három referencia alkohol ezen paramétereire megadott megismételhetőség megfelelő szórásán belül kell lenniük. Ha nem, ismét el kell végezni az ellenőrzéseket. 4.3.

Az NMR-spektrum felvételi körülményei Töltsük a 3.3. pont szerint előkészített alkoholmintát (vagy a 3.4. pont szerint előkészített vízmintát) 15 ml-es vagy 10 ml-es mintacsőbe, és ezt helyezzük a szondába. Az NMR-spektrum felvételéhez szükséges körülmények az alábbiak: —

állandó szondahőmérséklet (pl. 302 K);

—

legalább 6,8 másodperc felvételi idő 1200 Hz spektrumszélességhez (16 K), azaz kb. 20 ppm 61,4 MHz-en vagy 27 ppm 46,1 MHz-en;

—

90°-os impulzus;

—

a felvételi idő beállítása: ennek az értéknek hasonló nagyságrendűnek kell, hogy lennie, mint a tartózkodási időnek;

—

parabolikus érzékelés: rögzítsük a 01-es eltolást az OD és CHD referenciajelek között etil-alkohol esetében, valamint a HOD és TMU között a víz referenciajelei esetében;

—

határozzuk meg a proton spektrumról való leválasztási 02 eltolást, amelyet az ugyanazon a csövön lévő leválasztó tekerccsel mérünk. A leválasztás akkor jó, ha a 02 a CH3- és CH2- csoportok között fennálló frekvencia intervallum közepén található. Használjuk a széles sávú leválasztási üzemmódot.

Minden egyes spektrumra végezzünk elegendő számú felvételt (NS, gyűjtések száma), amely elegendő ahhoz, hogy elérjük a 4.1. pontban megadott jel-zaj viszonyt, és ismételjük ezt az NS felvételsorozatot NE = 10-szer. Az NS értékei az alkalmazott spektrométer és szonda típusától függnek (vö.: 4. pont). Példák a lehetséges választásokra: Spektrométer

10 mm-es szonda

15 mm-es szonda

7,05 T

NS = 304

NS = 200

9,4 T

NS = 200

NS = 128

45

5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA

5.1.

Etil-alkohol A 10 spektrum mindegyikére (az etil-alkohol NMR-spektrumát lásd a 2a. ábrán) határozzuk meg:

II jel magassága (CH 3 CHD OH ) 3h II = 3× I jel magassága (CH 2 D CH 2 OH ) hI

—

R=

—

( D / H ) t = 1,5866 × TI ×

—

mt ( D / H ) st × mA t mD m ( D / H ) st ( D / H ) H = 2,3799 × TII × t × mA t mD

ahol --

—

TI =

I jel magassága (CH 2 D CH 2 OH )

a belső sztenderd jelének magassága ( TMU) II jel magassága (CH 3 CHD OH ) TII = a belsõ sztenderd jelének magassága (TMU )

—

mst és mA, lásd a 3.3.2. pontot

—

tD, lásd a 3.1.2.3. pontot

—

(D/H)st = a belső standard (TMU) izotóparánya, amely a Közösségi Referencia Hivatal által biztosított üvegen látható.

A csúcsmagasságok használata a csúcsterületek helyett – ami kevésbé pontos – feltételezi, hogy a csúcs szélessége félmagasságban azonos, és alkalmazhatósága esetén elfogadható közelítést biztosít (2b. ábra). 5.2.

Víz Amikor a víz izotóparányát NMR-rel meghatározzuk a víz-TMU keverékből, az alábbi összefüggéstalkalmazzuk: —

( D / H )WQ = 0,9306 × TIV ×

mst' × ( D / H ) st mE'

ahol

46

a borból kivont víz (HOD) jelének területe a belső sztenderd (TMU) jelének területe

—

TIV =

—

m'st és m'E lásd a 3.4.2. pontot (D/H)st = a belső standard (TMU) izotóparánya, amely a Közösségi

—

Referencia Hivatal által biztosított üvegen látható. 5.3.

Minden egyes izotópparaméterre számítsuk ki a 10 meghatározás átlagát és a konfidenciaintervallumot. A spektrométer számítógépével kompatibilis szoftver (pl. SNIF-NMR) lehetővé teszi ezen értékek „online” számítását.

Megjegyzés: Ha a spektrométer hitelesítése után szisztematikus eltérés van a standardalkoholok (4.2.2. pontra) jellemző izotópjaira kapott értékek és a Közösségi Referencia Hivatal által jelölt értékek között, a szóráson belül az alábbi korrekciók alkalmazhatók ahhoz, hogy bármely X minta valós értékét megkapjuk. Az interpolációt a standardminta értékeinek figyelembevételével végezzük, amely eltér az X mintáétól. Legyen a ( D / H ) ix meas a mért érték és ( D / H )ix corr a korrigált érték. Ez a következőt adja:

[

( D / H ) ixkorr = ( D / H ) iBst + α ( D / H ) ixmeas − ( D / H ) iBmeas

]

ahol ( D / H )iv st − ( D / H )iBst α= ( D / H )iv meas − ( D / H )iBmeas

Példa: A Közösségi Referencia Hivatal által biztosított és hitelesített standardminták: (D/H) lVst = 102,0 ppm (D/H) BIst = 91,95 ppm A laboratórium által mértstandard minták: (D/H) lVmeas = 102,8 ppm (D/H) BImeas = 93,0 ppm Gyanús korrigálatlan minta: (D / H) Ix meas = 100,2 ppm

α = 1,0255 és (D / H) Ixcorr = 99,3 ppm a kiszámított értékek.

47

6.

AZ EREDMÉNYEK ÉRTELMEZÉSE Hasonlítsuk össze a gyanús minta R arányára kapott RX értéket a referencia boroknál kapott arányokkal. Ha RX a szórás több, mint kétszeresével eltér a referencia bornál kapott RT értéktől, hamisítás feltételezhető.

6.1.

Répacukor, nádcukor vagy kukoricacukor hozzáadása

6.1.1.

Borok RX nagyobb mint RT: feltételezhetően répacukrot adtak hozzá. RX kisebb mint RT: feltételezhetően nádcukrot vagy kukoricacukrot adtak hozzá. ( D / H)lx és ( D / H )QX W emelkedett.

Vizsgáljuk meg a ( D / H ) Ix értéket: —

Ha feltételezhetően répacukrot adtak hozzá: a gyanús minta ( D / H ) Ix értéke több, mint egy szórással kisebb, mint a kontrollmintákból kapott ( D / H ) TI átlagérték

—

Ha feltételezhetően nádcukrot vagy kukoricacukrot adtak hozzá: a ( D / H ) Ix több, mint egy szórással nagyobb, mint ( D / H ) TI

—

Az E javítás kiszámítása, az etil-alkohol %(V/V) -ban kifejezve:

—

Répacukor hozzáadása:

( D / H )TI − ( D / H )Ix E%vol = t ( D / H )TI − ( D / H )IB v

ahol ( D / H )IB

a répacukorból kapott alkohol izotóparánya az I helyen;

( D / H )IB

92,57

tv

az analizált bor alkoholtartalma (X).

—

Nádcukor vagy kukoricacukor hozzáadása: ( D / H ) Ix − ( D / H ) TI E%vol = t v ( D / H ) IC − ( D / H ) TI

ahol ( D / H )CI 7

a nádcukor vagy kukoricacukor izotóparánya az I helyen;

Ezek az adatok az ilyen értékekre vonatkozó közösségi adatbank létrehozásáig használhatók. 48

6.1.2.

( D / H )CI

110,52

tv

az analizált bor alkoholtartalma (X)

A must, mustsűrítmény és finomított mustsűrítmény A mustból, mustsűrítményből és finomított mustsűrítményből nyert erjesztett termékből a 3.2. a 3.1. szakaszok szerint kivont alkohol izotópos paramétereinek értékeit a 6.1.1. szakaszában adott útmutatók szerint vizsgáljuk, és az alkohol értékeit a neki megfelelő, autentikus mustok erjedési termékeiből kivont alkohol értékeivel hasonlítjuk össze. A javítás, E, azt az alkoholtérfogatot fejezi ki, amit az erjesztett termékhez adtak hozzá. Ismerve azt a hígítást, amelyet az erjesztés előtt esetleg elvégeztünk (mustsűrítmények és finomított mustsűrítmények), és feltételezve, hogy 16,83 g cukorból 1% (V/V)

alkohol keletkezik, számítsuk ki az egy liter musthoz,

mustsűrítményhez vagy finomított mustsűrítményhez adott cukor mennyiségét (tömeg). 6.2.

Répacukor, nádcukor vagy kukoricacukor keverékének hozzáadása A (D/H)I és az R izotóparányok kevésbé változnak meg, mintha csak egyféle cukrot adnak hozzá. (D/H)II magasabb, mint a (D / H )QW . Ezek a hozzáadások az etil-alkohol

13

C/12C arányának meghatározásával

igazolhatók tömegspektrometriával: ebben az esetben az arány nagyobb.

49

9. 1.

A HAMU MEGHATÁROZÁSA8 MEGHATÁROZÁS Hamunak nevezzük azokat az anyagokat, amelyek a bor bepárlása és elhamvasztása után visszamaradnak. Az izzítást olyan módon végezzük, hogy az összes kationt (kivéve az ammóniumiont) karbonátokká vagy egyéb, kötött vizet nem tartalmazó szervetlen sókká alakítjuk.

2.

A MÓDSZER ELVE A bor extraktját 500 és 550 °C közötti hőmérsékleten izzítjuk, amíg a szerves anyagok teljes elégését (oxidációját) el nem érjük.

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

100 °C-os vízfürdő;

3.2.

0,1 mg pontosságú analitikai mérleg;

3.3.

Elektromos vagy infravörös elpárologtató;

3.4.

Hőmérséklet -szabályozású izzítókemence;

3.5.

Exszikkátor;

3.6.

70 mm-es átmérőjű és 25 mm magas platinacsésze.

4.

ELJÁRÁS Pipettázzunk 20 ml bort az előzőleg tárázott platinacsészébe (eredeti tömeg P0 g). Pároljuk be forró vízfürdőn, és a maradékot elektromos vagy infravörös elpárologtató alatt

200 °C hőmérsékleten melegítsük mindaddig, amíg

elszenesedik. Ha már nem keletkezik több füst, helyezzük az edényt az izzítókemencébe, amelyet 525 ± 25 °C hőmérsékleten tartunk. 15 perces 8


hamvasztás után vegyük ki az edényt a kemencéből, adjunk hozzá 5 ml desztillált vizet, vízfürdőn vagy az infravörös elpárologtató alatt beszárítjuk, és ismét hevítjük a maradékot 525 °C hőmérsékleten 10 percig. Ha az elszenesedett részecskék égése nem fejeződött be, folytassuk a műveletet az elszenesített részecskék nedvesítésével, a víz elpárologtatásával és izzítással. A nagyobb cukortartalmú borok esetében célszerű néhány csepp tiszta növényolajat adni az extraktumhoz az első hamvasztás előtt, hogy megakadályozzuk a túlzott habképződést. A platinacsésze exikkátorban való lehűlése után megmérjük a tömegét: (P1 g). A vizsgált minta térfogatában (20 ml) lévő hamu tömege: P = (P1 - P0) g.

5.

AZ EREDMÉNYEK KIFEJEZÉSE A hamut, P-t g/l-ben adjuk meg két tizedes pontosságig a következő kifejezéssel:

P = 50 p.

51

10. A HAMU LÚGOSSÁGÁNAK MEGHATÁROZÁSA9 1.

MEGHATÁROZÁS A hamu lúgossága a bor szerves savaihoz kötött kationok összessége (kivéve ammóniumiont).

2.

A MÓDSZER ELVE A hamut ismert mennyiségű fölöslegben lévő savban melegítéssel feloldjuk; a feleslegben lévő savat metilnarancs-indikátor jelenlétében visszatitráljuk.

3.

REAGENSEK ÉS ESZKÖZÖK

3.1.

0,05 M kénsavoldat (H2SO4);

3.2.

0,1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH);

3.3

0,1% (m/v)-os vizes metilnarancsoldat;

3.4.

100 °C-os vízfürdő.

4.

ELJÁRÁS A platinacsészében lévő 20 ml bor hamujához adjunk 10 ml 0,05 M kénsavoldatot (3.1.). Helyezzük az edényt a forró vízfürdőre kb. 15 percre, a hamu feloldását üvegbottal keverve elősegítjük. Majd két csepp metilnarancsoldat jelenlétében 0,1 M nátrium-hidroxiddal (3.2) visszatitráljuk az oldatot, az indikátor sárga színátcsapásáig.

5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A hamu lúgosságát (A) milliekvivalens/l-ben kifejezve, egy tizedes pontosságig az alábbi összefüggés adja meg:

A = 5 (10 - n) ahol n a fogyott 0,1 M nátrium-hidroxid-oldat ml-ben megadott térfogata. 9

A 2676/1990 EK/ rendelet mellékletének 10. módszere 52

11. 1.

A KLORIDTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 10 A MÓDSZER ELVE Potenciometriás titrálással Ag/AgCl elektróddal közvetlenül határozzuk meg a bor kloridtartalmát.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

pH/mV-mérő, legalább 2 mV-os beosztással

2.2.

Mágneses keverő

2.3.

Ag/AgCl elektród, telített kálium-nitrát-oldattal

2.4.

Mikrobüretta 1/100 ml-es beosztással

2.5.

Stopper

3.

REAGENSEK

3.1.

Standard kloridoldat: 2,1027 kálium-kloridot, (KCl a.lt., legfeljebb 0,005% Br) felhasználás előtt néhány napig exszikkátorban szárítunk, kétszer desztillált vízben feloldjuk és egy literre feltöltjük. 1 ml oldat 1 mg Cl−-iont tartalmaz.

3.2.

Ezüst-nitrát-mérőoldat: 4,7912 g analitikai tisztaságú ezüst-nitrátot, (AgNO3) 10 %(V/V)-os alkohololdatban feloldva, és egy literre feltöltve. 1 ml ilyen oldat 1 mg Cl−-ionnak felel meg.

3.3.

Salétromsav, legalább 65%-os (ρ20 = 1,40 g/ml).

4.

ELJÁRÁS

4.1.

5,0 ml standard kloridoldatot mérünk egy 150 ml-es főzőpohárba, amelyet mágneses keverőre helyeztünk, felhígítjuk desztillált vízzel kb. 100 ml-re, és 1,0 ml salétromsavat (legalább 65%-os) adunk hozzá. Az elektródot bemerítjük az oldatba úgy, hogy a diafragmán felül legyen a folyadék. Ezt követően mikrobüretta

10


segítségével ezüst-nitrát mérőoldattal mérsékelt keverés mellett titráljuk az oldatot. Az első 4,00 ml-ig 1,00 ml-enként adjuk hozzá a mérőoldatot, és olvassuk le a megfelelő mV-értékeket. A következő két ml-t 0,20 ml-es részletekben adjuk hozzá. Végül 1 ml-es részletekben adjuk hozzá összesen 10 ml-ig. Minden egyes hozzáadás után várjunk kb. 30 másodpercet, mielőtt leolvasnánk a megfelelő mV értékeket. Vigyük fel az így kapott értékeket milliméterpapírra a titrálóoldat milliliterben megadott téfogatának függvényében, és határozzuk meg az egyenérték- pontot az így kapott görbén lévő inflexióspont alapján. 4.2.

5 ml standard kloridoldatot mérünk egy 150 ml-es főzőpohárba 95 ml desztillált vízzel és 1 ml salétromsavval (legalább 65%-os). Merítsük be az elektródot, és keverés közben titráljuk mindaddig, amíg meg nem kapjuk az egyenértékpont feszültségét. Ezt a meghatározást addig ismételjük, amíg az eredmények megfelelő mértékben meg nem egyeznek. Ezt az ellenőrzést a mintákban lévő kloridok mérésének minden sorozata előtt el kell végezni.

4.3.

50 ml vizsgálandó bort mérünk egy 150 ml-es főzőpohárba. Adjunk hozzá 50 ml desztillált vizet és 1 ml salétromsavat (legalább 65%-os), és titráljuk az előző szakaszban leírt eljárás szerint.

5.


5.1.

Számítás Ha n az ezüst-nitrát-mérőoldat ml-ben megadott térfogata, a vizsgálati folyadék kloridtartalma a következő: 20 x n

mg/l kloridban kifejezve

0,5633 x n milliekvivalens/l-ben kifejezve 32,9 x n

mg/l nátrium-kloridban kifejezve

5.2.

Ismételhetőség (r): r = 1,2 mg/l klorid r = 0,03 milliekvivalens/l r = 2,0 mg/l nátrium-klorid

5.3.

Reprodukálhatóság (R): R = 4,1 mg/l klorid R = 0,12 milliekvivalens/l

54

R = 6,8 mg/l nátrium-klorid 3. KIEGÉSZÍTŐ MEGHATÁROZÁS Nagyon pontos meghatározáshoz, vizsgáljuk meg a vizsgálandó oldat ezüst-nitráttal végzett meghatározása során kapott teljes titrálási görbét, a titrálás végpontját grafikusan vagy számítással az egyenérték pontból határozzuk meg. (a) Mérjünk 50 ml vizsgálandó bort egy 150 ml-es főzőpohárba. Adjunk hozzá 50 ml desztillált vizet és 1 ml salétromsavat (legalább 65%-os). Titráljuk az oldatot ezüst-nitrát mérőoldattal 0,5 ml-enként, egyidejűleg regisztráljuk a fogyáshoz tartozó feszültségértékeket millivoltban. Határozzuk meg ebből az első titrálásból a fogyott ezüst-nitrát-mérőoldat körülbelüli térfogatát. (b) Kezdjük újra a meghatározást ugyanilyen körülmények között. Kezdjük egyszerre mindig 0,5 ml-es titrálóoldat hozzáadásával, amíg a hozzáadott térfogat 1,5-2 ml-rel lesz kevesebb, mint az (a) pontban meghatározott térfogat. Folytassuk az oldat hozzáadását a körülbelül a meghatározott egyenérték ponton túl szimmetrikus módon, azaz először 0,2 ml, majd 0,5 ml mérőoldat hozzáadásával. A mérés végpontját és a felhasznált ezüst-nitrát pontos térfogatát az alábbi módon kapjuk meg: —

vagy megrajzoljuk a görbét, és meghatározzuk a titrálás végpontját,

—

vagy az alábbi összefüggéssel: V = V'+ ∆Vi

∆∆E1 ∆∆E1 + ∆∆E 2

Ahol:

V V' ∆ Vi ∆∆ E1 ∆∆ E2

a titrálóoldat térfogata a titrálás végpontjában; a mérőoldat térfogata a legnagyobb feszültségváltozás előtt; a mérőoldat adagolásának állandó térfogata, azaz pl. 0,2 ml; a második feszültségkülönbség a legnagyobb feszültségváltozás előtt; a második feszültségkülönbség a legnagyobb feszültségváltozás után.

55

Példa: Az AgNO3- mérőoldat

E feszültség

térfogata

mV

Különbség, ∆ E

Második különbség ∆∆ E

0

204

4

0

0,2

208

4

2

0,4

212

6

0

0,6

218

6

0

0,8

224

6

2

1,0

230

8

4

1,2

238

12

10

1,4

250

22

22

1,6

272

44

10

1,8

316

34

8

2,0

350

26

6

2,2

376

20

2,4

396

Ebben a példában a titrálás végpontja 1,6 és 1,8 ml között van: a legnagyobb feszültségváltozás (∆E = 44 mV) ebben az intervallumban következik be. A mintában lévő kloridok méréséhez felhasznált ezüst-nitrát-mérőoldat térfogata:

V = 16 , + 0,2

22 = 174 , ml 22 + 10

56

12.

A SZULFÁTTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 11

1.

A MÓDSZER ELVE

1.1.

Referencia-módszer A szulfáttartalmat leválasztás után bárium-szulfátként, gravimetriásan határozzuk meg. Az ugyanilyen körülmények között levált bárium-foszfát a csapadék sósavas mosásával távolítható el. Nagy mennyiségű kén-dioxidot tartalmazó mustok vagy borok esetében célszerű a szulfitokat előzetesen a levegő kizárása mellett végzett forralással eltávolítani.

1.2.

Gyors vizsgálati módszer A borok különböző kategóriákba sorolhatók az úgynevezett határértékmódszerrel, ami a szulfátnak bárium-szulfátként való leválasztásán alapul, ismert mennyiségű bárium-klorid-oldattal.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Reagensek

2.1.1.

2 M sósavoldat

2.1.2.

200 g/l bárium-klorid-oldat (BaCl2 ⋅ 2H2O).

2.2.

Eljárás

2.2.1.

Általános eljárás Mérjünk 40 ml vizsgálandó mintát egy 50 ml-es centrifugacsőbe, adjunk hozzá 2 ml 2 M sósavat és 2 ml 200 g/l bárium-klorid-oldatot. Keverjük össze üvegbottal; öblítsük le a keverőpálcát egy kevés desztillált vízzel, és hagyjuk állni az oldatot öt percig. Centrifugáljuk öt percig, majd óvatosan öntsük le a folyadék tisztáját. Ezután mossuk a bárium-szulfát-csapadékot a következők szerint: adjunk hozzá 10 ml 2 M sósavat, rázzuk fel a csapadékot, és centrifugáljuk öt percig, majd óvatosan

11


öntsük le a folyadék tisztáját. Ismételjük meg a mosást kétszer ugyanolyan körülmények között, minden alkalommal 15 ml desztillált vizet használva. Mossuk át az egész csapadék mennyiséget desztillált vízzel öblítve egy tárázott platinacsészébe és tegyük 100 °C hőmérsékletű vízfürdőre, majd pároljuk szárazra. A száraz csapadékot többször röviden láng fölött izzítjuk addig, amíg fehér maradékot nem kapunk. Exszikkátorba tesszük és kihűlés után mérjük. Legyen m az így kapott bárium-szulfát tömege, milligrammban. 2.2.2.

Különleges eljárás: nagy kén-dioxid-tartalmú must és bor esetében Először távolítsuk el a kén-dioxidot. Mérjünk 25 ml vizet és 1 ml tiszta sósavat (ρ20 = 1,15-1,18 g/ml) 50 ml-es Erlenmeyer-lombikba, amely csepegtetőtölcsérrel és kivezető csővel van ellátva. Forraljuk az oldatot, hogy a levegő eltávozzon, és juttassunk bele 100 ml bort a csepegtetőtölcséren keresztül. Folytassuk a forralást, amíg a lombikban lévő folyadék térfogata kb. 75 ml-re csökken, és a teljes mennyiséget hűtés után vigyük át 100 ml-es mérőlombikba. Töltsük fel desztillált vízzel jelig. Határozzuk meg a szulfáttartalmat a mintaoldat 40 ml-éből a 2.2.1. szakaszban leírtak szerint.

2.3.


2.3.1.

Számítás: A szulfáttartalom mg/l kálium-szulfátban kifejezve: 18,67 x m A mustban vagy borban lévő szulfáttartalmat egész számra kerekítve, mg/l kálium-szulfátban, (K2SO4) adjuk meg.

2.3.2.

Ismételhetőség 1000 mg/l-ig: r = 27 mg/l kb. 1500 mg/l-nél: r = 41 mg/l

2.3.3.

Reprodukálhatóság 1000 mg/l-ig: R = 51 mg/l 1500 mg/l körül: R = 81 mg/l

58

3.

GYORS VIZSGÁLATI MÓDSZER

3.1.

Reagensek

3.1.1.

Bárium-klorid- mérőoldat 2,804 gramm bárium-kloridot, (BaCl2·2H2O) és 10 ml sósavat (ρ20 = 1,151,18 g/ml) desztillált vízzel 1 literre töltünk fel. 1 ml ilyen oldat 2 mg káliumszulfátnak megfelelő szulfátiont választ le.

3.1.2.

10 % (m/V)-os kénsavoldat (ρ20 = 1,84 g/ml).

3.2.

Eljárás Mérjünk 10 ml mustot vagy bort három kémcsőbe; adjunk az elsőhöz 3,5 ml, a másodikhoz 5 ml és a harmadikhoz 10 ml bárium-klorid-oldatot. Rázzuk össze, és forraljuk fel; hagyjuk állni 1-2 órán keresztül. A folyadék tisztáját mindhárom kémcsőből szűrjük le, és osszuk két részre. Az egyik részhez adjunk néhány csepp hígított kénsavoldatot, a másikhoz néhány csepp bárium-klorid-oldatot. Vizsgáljuk meg mindegyik kémcsövet, és állapítsuk meg, hogy a folyadék tiszta-e vagy zavaros. E megfigyelések értelmezését az alábbi táblázat mutatja. Szűrt bor + Bor

Bárium-

hígított kénsav

-klorid ml

ml

báriumklorid- oldat

Zavaros

tiszta

(0,7 g K2SO4/l-nél kevesebb) Első minta

10

3,5

Tiszta

zavaros

(0,7 g K2SO4/l-nél több) Zavaros Második minta

10

5

tiszta

(kevesebb, mint 1 g K2SO4/l) Tiszta

zavaros

(több, mint 1 g K2SO4/l) Zavaros Harmadik minta

10

10

tiszta

(kevesebb, mint 2 g K2SO4/l) Tiszta

zavaros

(több, mint 2 g K2SO4/l)

59

13. 1.

AZ ÖSSZES SAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 12 MEGHATÁROZÁS Összes sav a titrálható savak összessége. A titrálást lúgos mérőoldattal pH = 7 értékig végezzük. Az összes savtartalom a szén-dioxidot nem tartalmazza.

2.

A MÓDSZER ELVE Potenciometrikus titrálás vagy titrálás brómtimolkékindikátor mellett szín összehasonlító oldatot használva.

3.

REAGENSEK

3.1.

Pufferoldat, pH 7,0: —

kálium-dihidrogén-foszfát, (KH2PO4)............................................107,3 g

—

1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH) ............................................. 500 ml

—

desztillált vízzel feltöltve ........................................................ 1 000 ml-re

Kereskedelmi forgalomban kapható pufferoldatok is használhatók. 3.2.

0,1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH).

3.3.

4 g/l brómtimolkékindikátor-oldat: —

brómtimolkék (C7H28Br2O5S) ...............................................................4 g

—

semleges etil-alkohol, 96% (V/V).................................................. 200 ml

Oldjuk fel, és adjunk hozzá: —

CO2 -mentes vízet........................................................................... 200 ml

—

Annyi 1 M nátrium-hidroxid-oldatot, amely elegendő a kékeszöld szín létrehozásához (pH 7) ............................................................... kb. 7,5 ml

—

12

desztillált vízet ........................................................................ 1 000 ml-ig


4.

ESZKÖZÖK

4.1.

Vízsugárszivattyú.

4.2.

500 ml-es vákuumlombik.

4.3.

pH-mérő és elektródok. Az üvegelektródot desztillált vízben kell tartani. A kalomel/telített kálium-klorid elektródot telített kálium-klorid-oldatban kell tárolni. Leggyakrabban kombinált elektródot használnak: ezt desztillált vízben kell tárolni.

4.4.

50 ml-es főzőpohár (bor), és 100 ml-es főzőpohár (finomított mustsűrítmény) méréséhez.

5.

ELJÁRÁS

5.1.

A minta előkészítése:

5.1.1.

Bor A szén-dioxid eltávolítása. Töltsünk kb. 50 ml bort egy vákuumlombikba; kapcsoljunk vákuumot a lombikra a vízsugár szivattyúval egy vagy két percen keresztül, miközben folyamatosan rázzuk.

5.1.2.

Finomított mustsűrítmény Töltsünk

200

g

pontosan

lemért

finomított

mustsűrítményt 500 ml-es

mérőlombikba. Töltsük fel jelig vízzel és homogenizáljuk. 5.2.

Potenciometriás titrálás

5.2.1.

A pH-mérő kalibrálása A pH mérőt 20 °C hőmérsékleten való használatra kalibráljuk a gyártó útmutatása szerint pH= 7,00 pufferoldattal 20 °C hőmérsékleten.

5.2.2.

Mérési módszer Az 5.1. pont szerint előkészített borminta 10 ml-ét, illetve a finomított mustsűrítmény oldat 50 ml-ét mérjük a főzőpohárba, adjunk hozzá 10 ml desztillált vizet, és 0,1 M nátrium-hidroxid- cvoldattal (3.2) pH=7,0-ig (20 °C) titráljuk. A

61

nátrium-hidroxid oldatot lassan adagoljuk, az oldatot folyamatosan keverjük. Legyen n ml a hozzáadott 0,1 M nátrium-hidroxid oldat térfogata. 5.3.

Titrálás indikátorral (brómtimolkék)

5.3.1.

Előzetes vizsgálat: szín-összehasonlító oldat készítése Főzőpohárba öntsünk 25 ml kiforralt desztillált vizet, 1 ml brómtimolkékoldatot és az 5.1. szakasz szerint előkészített, borminta 10 ml-ét vagy finomított mustsűrítmény oldat 50 ml-ét. Adjunk hozzá 0,1 M nátrium-hidroxid-oldatot, amíg a szín kékeszöldre nem változik. Ezután adjunk hozzá 5 ml pH=7 értékű pufferoldatot .

5.3.2

Meghatározás Főzőpohárba öntsünk 30 ml kiforralt desztillált vizet, 1 ml brómtimolkékoldatot és az 5.1. szakasz szerint előkészített borminta 10 ml-ét vagy finomított mustsűrítmény oldat 50 ml-ét. Titráljuk 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal, amíg ugyanazt a színt nem kapjuk, mint az előzetes vizsgálat során (5.3.1. pont). Legyen

n ml a hozzáadott 0,1 M nátrium-hidroxid-oldat térfogata. 6.


6.1.

Számítás Bor

6.1.1.

A milliekvivalens/l-ben kifejezett összes savtartalmat az alábbi összefüggés adja:

A = 10n. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. Az összes savtartalom borkősav g/l-ben kifejezve:

A' = 0,075 A Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. 6.1.2.

Finomított mustsűrítmény —

A finomított mustsűrítmény milliekvivalens/g-ban kifejezett összes savtartalma: a = 5n.

—

Az összes cukortartalom egy kilogrammjára jutó milliekvivalensben kifejezett összes savtartalom az alábbi képlettel határozható meg:

A=

500 × n P 62

P az összes cukor tömegkoncentrációja [%m/m)]. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. 6.2.

Ismételhetőség (r) indikátorral végzett titrálás esetén: r = 0,9 milliekvivalens/l r = 0,07 g/l borkősav fehér-, rozé- és vörösborokra.

6.3.

Reprodukálhatóság (R) indikátorral végzett titrálás esetén (: Fehér- és rozéborok esetén:

R = 3,6 milliekvivalens/l R = 0,3 g/l borkősav Vörösborok esetén:

R = 5,1 milliekvivalens/liter R = 0,4 g/l borkősav

63

14. 1.

AZ ILLÓSAV-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 13 MEGHATÁROZÁS Az illósav-tartalom a borban szabad vagy kötött állapotban lévő, az alifás sorba tartozó zsírsavak összessége.

2.

A MÓDSZER ELVE A borból vízgőz-desztillációval elkülönített illó savakat nátrium-hidroxid-oldattal megtitráljuk. A szén-dioxidot titrálás előtt el kell távolítani a borból. A vízgőz-desztilláció során átdesztillált szabad és kötött kén-dioxid mennyiségét le kell vonni az illósav-tartalomból. A borhoz adott szorbinsavat is le kell vonni.

Megjegyzés: Az egyes országokban a bor stabilizálására használt szalicilsav egy része jelen lehet a párlatban. Ezt meg kell határozni, és a savtartalomból le kell vonni. A meghatározás módját a 7. szakasza írja le. 3.

REAGENSEK

3.1.

Kristályos borkősav (C4H6O6).

3.2.


3.3.

1%-os fenolftaleinoldat 96% (V/V)-os semleges alkoholban.

3.4.

1:4 hígítású sósav (ρ20 = 1,18-1,19 g/ml)

3.5.

0,005 M jódoldat (I2).

3.6.

Kristályos kálium-jodid (KI).

3.7.

5 g/l keményítőoldat.

13


Adjunk 5 g keményítőt kb. 500 ml vízhez, folyamatos keverés mellett forraljuk fel, majd forraljuk kb. 10 percen keresztül. Adjunk hozzá 200 g nátrium-kloridot. Ha kihűlt, töltsük fel egy literre. 3.8.

Telített nátrium-borát-oldat (Na2B4O7 ⋅ 10H2O), 55 g/l 20 °C hőmérsékleten.

4.

ESZKÖZÖK

4.1.

Vízgőz-desztillációs készülék, amely az alábbiakból áll: 1.

vízgőzgenerátor; a gőz nem tartalmazhat szén-dioxidot;

2.

gőzcsővel ellátott lombik;

3.

rektifikálóoszlop;

4.

hűtő.

Ennek a berendezésnek az alábbi feltételeket kell teljesíteni: (a) Öntsünk 20 ml kiforralt desztillált vizet a lombikba. Fogjunk fel 250 ml párlatot, és adjunk hozzá 0,1 ml 0,1 M nátrium-hidroxid oldatot és két csepp fenolftaleinoldatot. A rózsaszín elszíneződésnek meg kell maradnia legalább 10 másodpercig (azaz a gőznek szén-dioxid mentesnek kell lennie ). (b) Töltsünk 20 ml 0,1 M ecetsav-oldatot a lombikba. Fogjunk fel 250 ml párlatot. Titráljuk 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal: a fogyásnak legalább 19,9 ml-nek kell lennie (azaz az ecetsavnak legalább 99,5%-a átdesztillált a vízgőzzel). (c) Öntsünk 20 ml 1 M tejsavoldatot a lombikba. Fogjunk fel 250 ml párlatot, és titráljuk a párlatot 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal . A hozzáadott nátrium-hidroxid-oldat térfogata 1,0 ml vagy annál kevesebb kell hogy legyen (azaz az átdesztillált tejsav mennyisége <=0,5%-nál). Minden készülék és eljárásmód, amely kielégíti a fenti követelményeket, hivatalosan nemzetközileg elfogadott. 4.2.

Vízsugárszivattyú.

4.3.

Vákuumlombik.

5.

ELJÁRÁS

5.1.

A minta előkészítése

65

A szén-dioxid eltávolítása. Öntsünk kb. 50 ml bort vákuumlombikba; helyezzük a lombikot vízsugárszivattyú segítségével vákuum alá egy vagy két percig, folyamatosan rázva. 5.2.

Vízgőz-desztilláció Öntsünk 20 ml, az 5.1 szerint szén-dioxid-mentesített bort a lombikba. Adjunk hozzá kb. 0,5 g borkősavat. Gyűjtsünk össze legalább 250 ml desztillátumot.

5.3.

Titrálás Titráljuk a párlatot 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal indikátorként két csepp fenolftaleint használva . Legyen n ml a felhasznált nátrium-hidroxid-oldat térfogata. Adjunk hozzá négy csepp 1:4 hígítású sósavat, 2 ml keményítőoldatot és néhány kristály kálium-jodidot. Titráljuk a szabad kén-dioxidot 0,005 M jódoldattal. Legyen n' ml a felhasznált térfogat. Adjunk hozzá telített nátrium-borát-oldatot, amíg a rózsaszín elszíneződés újból megjelenik. Titráljuk a kötött kén-dioxidot 0,005 M jódoldattal. Legyen n'' ml a felhasznált térfogat.

6.


6.1.

Számítás A milliekvivalens/l-ben kifejezett illósav-tartalom egy tizedes pontosságig az alábbi összefüggéssel határozható meg:

A = 5(n - 0,1 n' - 0,05 n''). A g/l ecetsavban kifejezett illósav tartalom két tizedes pontosságig az alábbiak szerint határozható meg: 0,300 (n - 0,1 n' - 0,05 n''). 6.2.

Ismételhetőség (r) r = 0,7 milliekvivalens/l r = 0,04 g/l ecetsav.

6.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 1,3 milliekvivalens/l R = 0,08 g/l ecetsav.

66

6.4.

Szorbinsavtartalmú bor Mivel a szorbinsav 96%-a vízgőz-desztillációval átmegy a 250 ml térfogatú párlatba, ezért azt le kell vonni az illósav-tartalomból. 100 mg szorbinsav 0,89 milliekvivalens vagy 0,053 g ecetsavnak felel meg. A szorbinsavtartalmat mg/lben, a 18. számú módszerrel határozhatjuk meg.

7.

A SZALICILSAV MEGHATÁROZÁSA AZ ILLÓSAV-DESZTILLÁTUMBÓL

7.1.

A módszer elve Az illósav-tartalom meghatározása és a kén-dioxidra végzett korrekció után a szalicilsav jelenlétét az oldat savanyítása után, ha vas(III)sót adunk hozzá, ibolyaszínű elszíneződés jelzi. A desztillátumba az illósav-tartalommal együtt átkerült szalicilsav meghatározását egy második desztillátumból végezzük, amely azonos térfogatú, mint amelyből az illósav-tartalom meghatározását végeztük. Ebben a desztillátumban a szalicilsavtartalmat összehasonlító kolorimetriás módszerrel határozzuk meg. Ezt levonjuk az illósav-párlat savtartalmából.

7.2.

Reagensek

7.2.1.

Sósav (HCl) (ρ20 = 1,18-1,19 g/l).

7.2.2.

0,1 M nátrium-tioszulfát-oldat (Na2S2O3 ⋅ 5H2O)

7.2.3.

10% (m/V)-os vas(III)-ammónium-szulfát-oldat (Fe2(SO4)3 ⋅ (NH4)2SO4 ⋅ 24H2O).

7.2.4.

0,01 M nátrium-szalicilát-oldat. 1,60 g/l nátrium-szalicilátot (NaC7H5O3) tartalmazó oldat.

7.3.

Eljárás

7.3.1.

A szalicilsav kimutatása az illósav-párlatban Közvetlenül az illósav-meghatározás és a szabad és kötött kén-dioxidra végzett korrekció után töltsünk egy Erlenmeyer-lombikba 0,5 ml sósavat, 3 ml 0,1 M nátrium-tioszulfát-oldatot és 1 ml vas(III)- ammónium-szulfát oldatot.

67

Szalicilsav jelenlétében, ibolyaszínű elszíneződés jelenik meg. 7.3.2.

A szalicilsav meghatározása A fent említett Erlenmeyer-lombikon jelöljük meg a desztillátum térfogatát, öntsük ki a desztillátumot, és öblítsük ki a lombikot. Vízgőz-desztillációval desztilláljunk át 20 ml új bormintát, és gyűjtsük össze a párlatot az Erlenmeyer-lombikban a jelig. Adjunk hozzá 0,3 ml tömény sósavat és 1 ml vas(III)-ammónium-szulfát-oldatot. Az Erlenmeyer-lombikban az oldat színe ibolyaszínűre változik. Egy ugyanolyan Erlenmeyer-lombikba, mint amit a jellel megjelöltünk, öntsünk desztillált vizet a jelig. Adjunk hozzá 0,3 ml tömény sósavat és 1 ml vas(III)ammónium-szulfát oldatot. Bürettából engedjünk hozzá 0,01 M nátrium szalicilát oldatot addig, amíg ugyanolyan intenzitású ibolyaszínt kapunk, mint a desztillátum színe. Legyen n'’' a bürettából fogyott oldat térfogata ml-ben.

7.3.3.

Az illósav tartalom korrigálása Vonjuk le a 0,1 x n''' ml-t az illósav tartalom meghatározása során a desztillátum illósav-titrálásához használt 0,1 M nátrium-hidroxid oldat n ml térfogatából.

68

15. 1.

A NEM ILLÓSAV-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 14 A MÓDSZER ELVE A nem illósav-tartalmat az összes savtartalom és az illósav tartalom különbségéből számítjuk ki.

2.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A nem illósav-tartalmat az alábbiak szerint adjuk meg: − milliekvivalens/l, − g/l borkősav.

14


16.

A BORKŐSAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 15

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer A borkősavat kalcium-(±)-tartarát (kalcium-racemát) formában választjuk le, és gravimetriás módszerrel határozzuk meg. Ez a meghatározás az összehasonlítás érdekében térfogatos módszerrel is kiegészíthető. A leválasztás körülményei (pH, a kiindulási oldat össztérfogata, a leválasztó ionok koncentrációja) olyanok, hogy a kalcium-(±)-tartarát kicsapódása teljes, a kalcium-D(–)-tartarát-oldatban marad. Ha metaborkősavat adtak a borhoz, ami a kalcium-(±)-tartarát teljes leválasztását megakadályozza, ezt előbb hidrolizálni kell.

1.2.

Szokásos módszer A borkősavat ioncserélő oszlopon elválasztva, kolorimetriásan határozzuk meg az eluátumban a vanádiumsavval vbégbemenő reakció által létrehozott piros szín fotometriás mérésével. Az eluátumban előforduló tejsav és almasav a reakciót nem zavarja.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Gravimetriás módszer

2.1.1.

Reagensek

2.1.1.1.

Kalcium-acetát-oldat, amely literenként 10 g kalciumot tartalmaz: − kalcium-karbonát (CaCO3) ..........................................................................25 g − jégecet (CH3COOH) (ρ20 = 1,05 g/ml) ..................................................... 40 ml − víz........................................................................................................... 1 literig

2.1.1.2

Kristályos kalcium-(±)-tartarát: CaC4O6H4 ⋅ 4H2O: Öntsünk 20 ml L(+) borkősavoldatot (5 g/l) 400 ml-es főzőpohárba. Adjunk hozzá 20 ml ammónium-(–) tartarát oldatot (6,126 g/l) és 6 ml kalcium-acetát-oldatot, amely literenként 10 g kalciumot tartalmaz.

15


Hagyjuk állni két órán keresztül, hogy a csapadék kiválása megtörténjen. Gyűjtsük össze a csapadékot 4-es porozitású szűrőtégelyben, és mossuk át háromszor kb. 30 ml

desztillált

vízzel.

Szárítsuk

tömegállandóságig

70

°C

hőmérsékletű

szárítószekrényben. A fent jelzett mennyiségű reagens használatával kb. 340 mg kristályosított kalcium-(±)-tartarátot nyerünk. Csiszolatos dugójú üvegben tároljuk. 2.1.1.3.

Leválasztó oldat (pH= 4,75): − D(–)-borkősav .........................................................................................122 mg − 25% (V/V) ammónium-hidroxid-oldat (ρ20 = 0,97 g/ml) ........................ 0,3 ml − kalcium-acetát-oldat (10 g/l kalcium)....................................................... 8,8ml − víz..................................................................................................... 1 000 ml-re Oldjuk fel a D(–) borkősavat, adjuk hozzá az ammónium-hidroxidot, és töltsük fel kb. 900 ml-re; adjunk hozzá 8,8 ml kalcium-acetát-oldatot, töltsük fel egy literre, és állítsuk be a pH értéket 4,75-re ecetsavval. Mivel a kalcium-(±)-tartarát kismértékben oldható ebben az oldatban, adjunk hozzá 5 mg kalcium-(±)-tartarátot literenként, rázzuk 12 órán keresztül, és szűrjük le.

2.1.2.

Eljárás

2.1.2.1.

Borok (metaborkősav hozzáadása nélkül) Öntsünk 500 ml kicsapó oldatot és 10 ml bort egy 600 ml-es főzőpohárba. Keverjük össze, és az edény falát egy üvegbot végével dörzsölgessük a csapadék kiválásának elősegítése céljából. Hagyjuk kicsapódni 12 órán keresztül (egy éjszakán át). Vákuummal szűrjük a csapadékot egy lemért 4-es porozitású szűrőtégelyre. Öblítsük ki a szűrlettel azt az edényt, amelyben a csapadék volt, hogy biztosítsuk az összes csapadék átvitelét. Szárítsuk a csapadékot 70 °C hőmérsékletű szárítószekrényben tömegállandóságig. Legyen p az így nyert kristályos kalcium-(±)-tartarát (CaC4O6H4 ⋅ 4H2O) tömege.

2.1.2.2.

Borok (metaborkősav hozzáadással) Ha

olyan

borokat

vizsgálunk,

amelyekhez

metaborkősavat

adtak,

vagy

vélelmezhető a metaborkősav hozzáadása a borhoz, először hidrolizáljuk a metaborkősavat az alábbiak szerint: Öntsünk 10 ml bort és 0,4 ml jégecetet (CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/l) egy 50 ml-es Erlenmeyer-lombikba. Helyezzünk visszacsepegő hűtőt a lombik tetejére, és forraljuk 30 percig. Hagyjuk lehűlni, majd öntsük át az Erlenmeyer-lombikban lévő

71

oldatot egy 600 ml-es főzőpohárba. Öblítsük át kétszer a lombikot 5-5 ml vízzel, majd folytassuk az eljárást a fent leírtak szerint. A metaborkősav a végeredményben borkősavként jelenik meg. 2.1.3.

Az eredmények megadása Egy molekula kalcium-(±)-tartarát megfelel fél molekula L(+)-borkősavnak a borban. Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége milliekvivalensben kifejezve: 384,5 p. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége gramm borkősavban kifejezve: 28,84 p. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége gramm kálium-hirogén-tartarátban kifejezve: 36,15 p. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg.

2.2.

Összehasonlító térfogatos analízis

2.2.1.

Reagensek

2.2.1.1.

(1:5) hígítású sósav (HCl) (ρ20 = 1,18-1,19 g/ml)

2.2.1.2.

0,05 M EDTA-oldat: EDTA (etilén-diamin-tetraecetsav-dinátrium só: C10H14N2O8Na2 ⋅ 2H2O) 18,61 g desztillált víz........................................................................................ 1 000 ml-ig

2.2.1.3.

Nátrium-hidroxid-oldat, 40% (m/V): nátrium-hidroxid (NaOH).................................................................................40 g desztillált víz............................................................................................ 100 ml-ig

2.2.1.4.

Komplexometriás indikátor: 1% (m/m) 2-hidroxi-1-(2-hidroxi-4-szulfo-1-naftil-azo)-1-naftolsav (C21H14N2O7S ⋅ 3H2O)1 g vízmentes nátrium-szulfát (Na2SO4)...............................................................100 g

2.2.2.

Eljárás

72

A lemért kalcium-(±)-tartarát-csapadékot tartalmazó szűrőtégelyt tegyük a vákuum lombikra, és oldjuk fel a csapadékot 10 ml sósavoldattal. Mossuk át a szűrőtégelyt 50 ml desztillált vízzel. Adjunk hozzá 5 ml 40%-os nátrium-hidroxid-oldatot és kb. 30 mg indikátort. Titráljuk 0,05 M EDTA-oldattal . Legyen a felhasznált ml-ben mért térfogat n. 2.2.3.

Az eredmények megadása Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége milliekvivalensben kifejezve 5 n. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége gramm borkősavban kifejezve: 0,375 n. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg. Az egy liter borban lévő borkősav mennyisége gramm kálim-hidrogén-tartarátban kifejezve 0,470 n. Az eredményt egy tizedes pontossággal adjuk meg.

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER

3.1.

Reagensek

3.1.1.

A bor előkészítéséhez

3.1.1.1.

30/100% (V/V) ecetsav, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml),

3.1.1.2.

Erősen lúgos ioncserélő gyanta (pl. Merck III 20-50 mesh ) acetát formában. Készítsünk szuszpenziót az ioncserélő gyantából (kb. 100 g) 200 ml 30%-os ecetsavban (3.1.1.1). Hagyjuk így legalább 24 órán keresztül, mielőtt felhasználjuk. Tároljuk az ioncserélő gyantát a 30%-os ecetsavban a későbbi meghatározásokhoz.

3.1.1.3.

Ecetsav-oldat 0,5%-os [CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml), hígítva]

3.1.1.4.

7,1 g/100 ml (0,5 M) nátrium-szulfát-oldat Oldjunk fel 71 g vízmentes nátrium-szulfátot (Na2SO4) desztillált vízben, és töltsük fel desztillált vízzel 1 000 ml-re.

3.1.2.

A borkősav meghatározásához

3.1.2.1.

27% (m/V) nátrium-acetát-oldat (CH3CONa):

73

Oldjunk fel 270 g vízmentes nátrium-acetátot (CH3CONa) desztillált vízben, és töltsük fel 1 000 ml-re. 3.1.2.2.

Vanádiumreagens: Oldjunk fel 10 g ammónium-metavanadátot (NH4VO3) 150 ml 1 M nátrium-hidroxidoldatban (3.1.2.10). Töltsük át ezt az oldatot egy 500 ml-es mérőlombikba, és adjunk hozzá 200 ml 27%-os nátrium-acetát-oldatot (3.1.2.1). Töltsük fel 500 ml-re desztillált vízzel.

3.1.2.3.

1 M kénsavoldat (H2SO4)

3.1.2.4.

0,5 M kénsavoldat (H2SO4)

3.1.2.5.


3.1.2.6.

0,05 M perjódsavoldat: Tegyünk 10,696 g nátrium-perjodátot (NaIO4) és 50 ml 0,5 M kénsavat (3.1.2.4) egy 1 000 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel 1 000 ml-re desztillált vízzel.

3.1.2.7.

10% (mV) glicerinoldat: Tegyünk 10 g glicerint (C3H8O3) egy 100 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel.

3.1.2.8.

Nátrium-szulfát-oldat, 7,1 g /100 ml-es

3.1.2.9

Borkősavoldat, 1 g/l: Tegyünk 0,5 g borkősavat, és 6,6 ml 1 M nátrium-hidroxid-oldatot egy 500 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel 500 ml-re 7,1%-os nátrium-szulfát-oldattal.

3.1.2.10. 1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH), 3.2.

Eszközök

3.2.1.

10-11 mm belső átmérőjű és mintegy 300 mm hosszú üvegcső, leeresztő csappal.

3.2.2.

Spektrofotométer, amely 490 nm-es hullámhosszon lehetővé teszi az abszorbancia méréseket, 10 mm-es küvettával.

74

3.3.

Eljárás

3.3.1.

Az ioncserélő oszlop előkészítése Helyezzünk üveggyapot dugót az üvegcsőbe a leeresztő csap fölé. Itassuk át ezt a dugót desztillált vízzel. Öntsünk a csőbe 10 ml acetát formájú ioncserélő gyanta szuszpenzióját (3.1.1.2). Engedjük leülepedni. Helyezzünk üveggyapot dugót a gyanta tetejére (megakadályozva a felkeveredését a további átmosások során). Az ioncserélő gyanta csak egyszer használható.

3.3.2.

A szerves savak elválasztása A csap kinyitásával engedjük, hogy az ecetsav lefolyjon az oszlopban a felső üveggyapot dugótól kb. 2-3 mm-re. Adjunk hozzá 10 ml 0,5%-os ecetsavoldatot, és hagyjuk, hogy a folyadék ismét lefolyjon ugyanarra a szintre, mint az előző művelet során. Ismételjük meg ezt a mosási műveletet négy vagy több alkalommal. Az utolsó mosás után zárjuk el a csapot, és öntsünk 10 ml bort vagy mustot az ioncserélő gyantára. Hagyjuk cseppenként átfolyni (átlagban másodpercenként egy csepp), és állítsuk meg az átfolyást éppen az ioncserélő gyanta fölött. Töltsünk még egyszer 10 ml 0,5%-os ecetsavoldatot az oszlopba, hagyjuk ugyanolyan sebességgel lefolyni, mint előzőleg, és ezután hétszer mossuk át ugyanúgy, minden alkalommal 10 ml desztillált vizet használva. Az utolsó mosás során zárjuk el a csapot, mihelyt a folyadékszint éppen a felső üveggyapot dugó fölé kerül. Eluáljuk az ioncserélő gyantán abszorbeálódott savakat 7,1%-os nátrium-szulfátoldattal (3.1.1.4). Gyűjtsük össze 100 ml eluátumot 100 ml-es mérőlombikba.

3.3.3.

A borkősav meghatározása

3.3.3.1.

Borok metaborkősav hozzáadása nélkül Pipettázunk 20 ml eluátumot két Erlenmeyer-lombikba (a és b). Használjuk az a lombikot a meghatározáshoz, és a b lombikot, amelyben a borkősavat perjódsavval lebontottuk, vakpróbának. Töltsünk az a lombikba: —

2 ml 1 M kénsavoldatot,

—

5 ml 0,05 M kénsavoldatot,

—

1 ml 10%-os glicerinoldatot.

Öntsünk a b lombikba: —

2 ml 1 M kénsavoldatot,

—

5 ml 0,05 M perjódsavoldatot.

75

Várjunk 15 percig; adjunk hozzá 1 ml 10%-os glicerint a fölösleges perjódsav lebontásához. Várjunk két percig. Ezután keverés közben pipettázzunk 5 ml vanádiumreagenst először a b lombikba, majd közvetlenül ezután az a lombikba. Azonnal indítsunk el egy stopperórát, és öntsük az a és b lombikok tartalmát a spektrofotométer küvettákba. 90 másodperc múlva mérjük meg az a lombikból (mérőoldat) származó folyadék abszorbanciáját 490 nm-en, a b (vak) folyadékhoz viszonyítva. Ha az eluátum borkősavtartalma túl nagy, az az túl nagy abszorbanciákat kapunk, akkor 7,1%-os nátrium-szulfát-oldattal

hígítjuk az eluátumot, majd a hígított

oldattal végezzük el a mérést. 3.3.3.2.

Metaborkősavat tartalmazó borok Ha

olyan

borokat

vizsgálunk,

amelyekhez

metaborkősavat

adtak,

vagy

vélelmezhető a metaborkősav hozzáadása a borhoz, először hidrolizáljuk a metaborkősavat az alábbiak szerint: Lehűtés után az Erlenmeyer-lombik tartalmát az ioncserélő oszlopra öntjük, majd ezután öblítővizet öntünk rá (kétszer 5 ml-t). Folytassuk a fent leírtak szerint. A metaborkősav a végeredményben borkősavként jelenik meg. 3.3.4.

A kalibrációs görbe felvétele Pipettázzunk 10, 20, 30, 40 és 50 ml 1 g/l borkősavoldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel 100 ml-re 7,1 %-os nátrium-szulfát-oldattal. Az oldatok koncentrációi megfelelnek az 1, 2, 3, 4 és 5 g/l borkősavat tartalmazó boreluátumoknak. Töltsünk két Erlenmeyer-lombikba (a és b) 20 ml-t ezekből az oldatotokból, és folytassuk, ahogy ezt a fentiekben leírtuk a boreluátumra. Ezeknek az oldatoknak az abszorbanciagörbéje borkősavtartalmuk függvényében egy egyenes, amely enyhén az origó felé görbül. Szükség esetén a görbének ezt a részét rajzoljuk meg pontosabban, ismert 1,0 g/l-es koncentrációnál kisebb koncentrációjú oldatok meghatározásait használva.

3.3.5.

Az eredmények megadása Keressük meg az eluátumra mért abszorbanciát a kalibrációs görbén, amely megadja a bor borkősavtartalmát g/l-ben. Az eredményt egy tizedes pontosságig adjuk meg.

76

17. 1.

A CITROMSAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 16 A MÓDSZER ELVE A citromsavat oxálacetáttá és acetáttá alakítjuk egy citrát-liázzal (CL) katalizált reakcióban: citrát

CL

oxálacetát + acetát

Malát-dehidrogenáz (MDH) és laktát-dehidrogenáz (LDH) jelenlétében az oxálacetát és annak dekarboxilezési terméke a piruvát-L-maláttá és L-laktáttá redukálódik a redukált nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAH) segítségével : oxálacetát + NADH + H+ piruvát + NADH + H+

MDH LDH

L-malát + NAD+ L-laktát + NAD+

Az NAD+-á oxidált NADH-mennyiség ezekben a reakciókban arányos a jelen lévő citrát mennyiségével. Az NADH oxidációját az abszorbancia ebből eredő csökkenésével mérjük 340 nm hullámhosszon. 2.

REAGENSEK

2.1.

Pufferoldat pH = 7,8. (0,51 M glicil-glicin: pH = 7,8; Zn2+ (0,6 x 10 -3M): Oldjunk fel 7,13 g glicil-glicint kb. 70 ml kétszer desztillált vízben. Állítsuk be a pH-értéket 7,8-ra kb. 13 ml 5 M nátrium-hidroxid-oldattal, adjunk hozzá 10 ml cink-klorid-oldatot (80 mg/100 ml), és töltsük fel 100 ml-re kétszer desztillált vízzel. Az oldat 4 hétig tartható el + 4 oC hőmérsékleten.

2.2.

Redukált nikotinamid-adenin-dinukleotid-oldat (NADH) (kb. 6 x 10-3 M): oldjunk fel 30 mg NADH-t és 60 mg NaHCO3-t 6 ml kétszer desztillált vízben.

16

A 2676/1990 EK / rendelet mellékletének 17. módszere 77

2.3.

Malát dehidrogenáz/laktát-dehidrogenáz-oldat (MDH/LDH) (0,5 mg MDH/ml), (2,5 mg LDH/ml): keverjünk össze 0,1 ml MDH-t (5 mg MDH/ml), 0,4 ml 3,2 M ammónium-szulfát-ldatot M és 0,5 ml (5 mg/ml) LDH. Ez a szuszpenció legalább egy évig, 4 °C hőmérsékleten stabil marad.

2.4.

Citrát-liáz (CL, 5 mg fehérje/ml): oldjunk fel 168 mg liofilizátumot 1 ml jéghideg vízben. Ez az oldat 4 °C hőmérsékleten legalább egy hétig, ha pedig lefagyasztjuk, legalább négy hétig marad stabil. Ajánlatos, hogy a meghatározás előtt ellenőrizzük az enzimaktivitást.

2.5.

Polivinil-polipirrolidon (PVPP)

Megjegyzés: Az összes fent említett reagens kereskedelmi forgalomban is beszerezhető. 3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a mérést 340 nm-en, amely hullámhosszon a NADH-nak abszorbciós maximuma van, vagy olyan fotométer, amely lehetővé teszi a méréseket 334 nm-en vagy 365 nm-en. Mivel abszolútabszorbancia-méréseket végeznek (azaz kalibrációs görbéket nem használunk, de standardizálást végzünk a NADH abszorpciós koefficiensének figyelembevételével), a készülék hullámhosszpontosságát és az abszorbancia linearitását ellenőrizni kell.

3.2.

Üvegküvetták 1 cm-es optikai úthosszal vagy egyszer használatos küvetták.

3.3.

Mikropipetták 0,02-2 ml közötti térfogatok pipettázására.

4.

A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE A citrátmeghatározást normális esetben közvetlenül a borból végezzük előzetes színtelenítés és hígítás nélkül, feltéve, hogy a citromsavtartalom kevesebb, mint 400 mg/l. Ha ez nem így van, hígítsuk a bort addig, amíg a citrátkoncentráció 20 és 400 mg/l közé kerül (azaz 5 és 80 µg közötti a mintarészben). A fenolvegyületekben gazdag vörösborok esetében PVPP-vel való előzetes kezelés célszerű:

78

Készítsünk kb. 0,2 g PVPP-ből vizes szuszpenziót, és hagyjuk állni 15 percig. Szűrjük át szűrőpapíron. Öntsünk 10 ml bort egy 50 ml-es Erlenmeyer-lombikba, adjuk hozzá a nedves PVPP-t, amelyet eltávolítottunk a szűrőről egy spatula segítségével. Rázzuk kéthárom percig, majd szűrjük át. 5.

ELJÁRÁS A spektrofotométert 340 nm-es hullámhosszra beállítva határozzuk meg az abszorbanciát az 1 cm-es küvetták használatával, levegőt használva zéró abszorbanciához (nincs küvetta az optikai útban). Helyezzük a következőket az 1 cm-es küvettákba: Referenciaküvetta (ml)

Mintaküvetta (ml)

2.1. oldat

1,00

1,00

2.2. oldat

0,10

0,10

Mérendő minta

-

0,20

Kétszer desztillált víz

2,00

1,80

2.3. oldat

0,02

0,02

Keverjük össze, és kb. öt perc múlva olvassuk le a referencia és a mintaküvettákban lévő oldatok abszorbanciáját (A1). Adjunk hozzá: 2.4. oldatot

0,02 ml

0,02 ml

Keverjük össze; várjuk meg, amíg a reakció befejeződik (kb. öt perc), és olvassuk le a referencia-, valamint a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciáit (A2). Számítsuk ki az abszorbanciakülönbséget (A2 - A1) a referencia- és a mintaküvettákra, ∆AR és ∆AS. Végezetül számoljuk ki a különbségek közötti különbséget. ∆A = ∆AS - ∆AR

Megjegyzés:

79

Az enzimreakció befejeződéséhez szükséges idő tételről tételre változhat. A fenti érték csak iránymutató jellegű, és ajánlatos azt minden tételre meghatározni. 6.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A citromsav-koncentrációt mg/l-ben adjuk meg, egész számban kifejezve.

6.1.

Számítás A koncentráció mg/l-ben való kiszámításához az alábbi általános képlet használható: V×M × ∆A C= ε×d×v ahol V

v M d

ε

a vizsgálandó oldat térfogata ml-ben (itt 3,14 ml)

a minta térfogata ml-ben (itt 0,2 ml) a meghatározandó anyag molekulatömege (itt a tiszta citromsavra M = 192,1) optikai útvonal hossza a cellában cm-ben (itt 1 cm) az NADH abszorpciós koefficiense 340 nm-nél ε = 6,3 mmol-1 x l x cm-1),

így tehát

C = 479 x ∆A Ha az előkészítés során a mintát hígítottuk, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

Megjegyzés: 334 nm-nél: C = 488 x ∆A (ε = 6,2 mmol-1 x l x cm-1). 365 nm-nél: C = 887 x ∆A (ε = 3,4 mmol-1 x l x cm-1). 6.2.

Ismételhetőség (r) 400 mg/l-nél kisebb citromsavkoncentráció: r = 14 mg/l 400 mg/l-nél nagyobb citromsavkoncentráció: r = 28 mg/l.

6.3.

Reprodukálhatóság (R) 400 mg/l-nél kisebb citromsavkoncentráció: R = 39 mg/l 400 mg/l-nél nagyobb citromsavkoncentráció: R = 65 mg/l.

80

18.

A TEJSAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 17

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer Az összes tejsavat (L-laktát és D-laktát) a nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD) oxidálja piruváttá, L-laktát-dehidrogenáz (L-LDH) és D-laktát-dehidrogenáz (DLDH) által katalizált reakcióban. A reakció egyensúlyi állapota normális esetben erőteljesebben a laktát irányába tolódik. A piruvátnak a reakció keverékből való eltávolítása eltolja az egyensúlyi állapotot a piruvát kialakulásának irányában. L-glutamát jelenlétében a piruvát L-alaninná alakul glutamát-piruvát-transzamináz (GPT) által katalizált reakcióban: L-laktát + NAD+

D-laktát + NAD+

Piruvát + L-glutamát

L-LDH

D-LDH

piruvát + NADH + H+ (1)

piruvát + NADH + H+

GPT

(2)

L-alanin + α-ketoglutarát

(3)

a NADH képződés, amely 340 nm hullámhosszon bekövetkező abszorbancia növekedés által mérhető, arányos az eredetileg jelen lévő tejsav mennyiségével.

Megjegyzés: Az L-tejsav az (1) és (3) reakciók alkalmazásával egymástól függetlenül, míg a Dtejsav a (2) és (3) reakciók segítségével, szintén egymástól függetlenül határozható meg. 1.2.

Szokásos módszer Az anioncserélő gyantaoszlopon elválasztott tejsavat acetaldehiddé oxidáljuk, és fotometriásan határozzuk meg, miután nitroprusszid-nátriummal és piperidinnel reagáltattuk.

17


2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Reagensek

2.1.1.

Pufferoldat, pH=10 (glicil-glicin 0,6 mol/l; L-glutamát 0,1 mol/l: Oldjunk fel 4,75 glicil-glicint és 0,88 g L-glutamin-savat kb. 50 ml kétszer desztillált vízben; állítsuk be a pH-t 10-re néhány ml 10 M nátrium-hidroxiddal, és töltsük fel 60 ml-re kétszer desztillált vízzel. Ez az oldat legalább 12 hétig stabil marad 4 °C-os hőmérsékleten.

2.1.2.

Nikotinamid-adenin-dinukleotid-oldat (NAD) (kb. 40 x 10-3 M): Oldjunk fel 900 mg NAD-t 30 ml kétszer desztillált vízben. Ez az oldat legalább négy hétig stabil marad 4 °C-os hőmérsékleten.

2.1.3.

Glutamát-piruvát-transzamináz-szuszpenzió (GPT) (20 mg/ml): A szuszpenzió stabil marad legalább egy évig 4 °C hőmérsékleten.

2.1.4.

L-laktát-dehidrogenáz-szuszpenzió (L-LDH) (5 mg/ml). Ez a szuszpenzió stabil marad legalább egy évig 4 °C hőmérsékleten.

2.1.5.

D-laktát-dehidrogenáz-szuszpenzió (D-LDH) (5 mg/ml). Ez a szuszpenzió stabil marad legalább egy évig 4 °C hőmérsékleten. Ajánlatos a meghatározás előtt az enzimaktivitást ellenőrizni.

Megjegyzés: Az összes reagens kereskedelmi forgalomban beszerezhető. 2.2.

Eszközök

2.2.1.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a 340 nm hullámhosszon végzett méréseket, a NADH abszorbanciamaximumán. Ennek hiányában szakaszos spektrumú spektrofotométer is használható, amely lehetővé teszi a méréseket 334 vagy365 nm-en. Mivel abszolútabszorbancia-méréseket végzünk (azaz kalibrációs görbéket nem használunk, de standardizálás történik a NADH abszorpciós koefficiensének figyelembevételével), a készülék hullámhosszpontosságát és az abszorbancia linearitását ellenőrizni kell.

82

2.2.2.

1 cm optikai úthosszú üvegküvetták vagy egyszer használatos küvetták.

2.2.3.

0,02-2 ml-es mikropipetták a minták bemérésére.

2.3.

A minta előkészítése Előzetes megjegyzés: Ügyeljünk arra, hogy ne nyúljunk az üvegeszközöknek ahhoz a részéhez, amely érintkezésbe kerül a reakciókeverékkel, mivel az ujjunkról L-tejsav kerülhet rá, és így hibás eredményeket kaphatunk. A laktátmeghatározást normális esetben közvetlenül a borból végezzüka színanyag előzetes eltávolítása és hígítás nélkül, feltéve, hogy a tejsavkoncentráció kisebb, mint 100 mg/l. Ha azonban a tejsavkoncentrációja az alábbi értékek közé esik: —

100 mg/l és 1 g/l között, hígítsuk 1/10-ére kétszer desztillált vízzel,

—

1 g/l és 2,5 g/l között, hígítsuk 1/25-ére kétszer desztillált vízzel,

—

2,5 g/l és 5 g/l között, hígítsuk 1/50-ére kétszer desztillált vízzel.

2.4.

Eljárás

2.4.1.

Az összes tejsav meghatározása A pufferoldatnak 20 és 25 °C között kell lennie a mérés kezdete előtt. A spektrofotométert 340 nm-es hullámhosszra beállítva határozzuk meg az abszorbanciát az 1 cm-es küvetták használatával, a zérusabszorbanciához levegőt (nincs küvetta az optikai útban) vagy vizet használva. Helyezzük a következőket az 1 cm-es küvettákba: Referenciaküvetta

Mintaküvetta

(ml)

(ml)

2.1.1. oldat

1,00

1,00

2.1.2. oldat

0,20

0,20


1,00

0,80

2.1.3. szuszpenzió

0,02

0,02

Mérendő minta

-

0,20

83

Keverjük üvegkeverővel vagy lapos végű műanyag pálcával; kb. öt perc múlva mérjük meg az oldatok abszorbanciáját a referencia- és a mintaküvettákban (A1). Adjunk hozzá 0,02 ml 2.1.4. oldatot és 0,05 ml 2.1.5. oldatot, homogenizáljuk, várjuk meg a reakció befejeződését (kb. 30 perc), és mérjük meg a referencia- és a mintaküvettákban lévő oldatok abszorbanciáit (A2). Számítsuk ki a referencia- és a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciáinak különbségeit (A2 - A1), ∆AR és ∆AS. Végezetül számítsuk a két különbség közötti különbséget: ∆A = ∆AS – ∆AR 2.4.2.

Az L-tejsav és a D-tejsav meghatározása Az L-tejsav és a D-tejsav meghatározásait egymástól függetlenül lehet elvégezni úgy, hogy az A1 meghatározásáig az összes tejsavra vonatkozó eljárást alkalmazzuk, majd onnan az alábbiak szerint folytatjuk: Adjunk hozzá 0,02 ml 2.1.4. oldatot, homogenizáljuk, várjuk meg, amíg a reakció befejeződik (kb. 20 perc), és mérjük meg a referencia-, illetve a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciáját (A2). Adjunk hozzá 0,05 ml 2.1.5. oldatot, homogenizáljuk, várjunk amíg a reakció befejeződik (kb. 30 perc), és mérjük meg a referencia-, illetve a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciáit (A3). Számítsuk ki a referencia-, illetve a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciái közötti ∆AR és ∆AS különbségeket L-tejsavra (A2 - A1) és D-tejsavra (A3 - A2). Végezetül számítsuk ki az a két különbség közötti különbséget: ∆A = ∆AS – ∆AR

Megjegyzés: Az enzimreakció befejeződéséhez szükséges idő tételről tételre változhat. A fenti érték csak iránymutatásként szerepel, és ajánlatos azt meghatározni minden tételre. Ha csak az L-tejsavat határozzuk meg, az inkubációs idő 10 percre csökkenthető. 2.5.

Az eredmények kifejezése A tejsavkoncentrációt g/l-ben adjuk meg egy tizedes pontosságig.

84

2.5.1.

Számítás A g/l-ben kifejezett koncentráció számítására alkalmazott általános összefüggés:

C=

V×M × ∆A ε × d × v × 1000

ahol

V

tesztoldat térfogata ml-ben (V = 2,24 ml L-tejsavra, V = 2,29 ml Dtejsavra és az összes tejsavra)

2.5.1.1.

a minta térfogata ml-ben (itt 0,2 ml)

v M d

a meghatározandó anyag molekulatömege (itt a DL-tejsavra M = 90,08)

ε

az NADH abszorpciós együtthatója (340 nm-en ε = 6,3 mmol-1 x 1 x cm-1).

a küvetta optikai úthossza (itt 1 cm)

Összes tejsav és D-tejsav

C = 0,164 x ∆A Ha a mintát hígítottuk az előkészítés során, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

Megjegyzés: Mérés 334 nm-en: C = 0,167 x ∆A, (ε = 6,2 mmol-1 x l x cm-1). Mérés 365 nm-en: C = 0,303 x ∆A, (ε = 3,4 mmol-1 x l x cm-1). 2.5.1.2.

L-tejsav

C = 0,160 x ∆A Ha a mintát az előkészítés során hígítottuk, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

Megjegyzés: Mérés 334 nm-en: C = 0,163 x ∆A, (ε = 6,2 mmol-1 x l x cm-1). Mérés 365 nm-en: C = 0,297 x ∆A, (ε = 3,4 mmol-1 x l x cm-1). 2.5.2.

Ismételhetőség (r) r = 0,02 + 0,07 xi g/l xi a minta tejsavkoncentrációja g/l-ben.

2.5.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 0,05 + 0,125 xi g/l xi a minta tejsavkoncentrációja g/l-ben. 85

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER

3.1

Reagensek

3.1.1.

A bor előkészítéséhez Lásd a borkősav meghatározásáról szóló rész 3.1.1. .pontját (Szokásos módszer).

3.1.2.

A tejsav meghatározásához

3.1.2.1.

0,1 M cérium(IV)-szulfát 0,35 M kénsavban: Oldjunk fel 40,431 cérium(IV)-szulfátot, Ce(SO4)2 ⋅ 4H2O 350 ml pontosan kimért 1 M kénsavoldatban. Töltsük fel 1 000 ml-re desztillált vízzel.

3.1.2.2.


3.1.2.3.

Nátrium-acetát-oldat, 270 g/l (vízmentes nátrium-acetátból készítve, CH3COONa).

3.1.2.4.

1 M kénsav (H2SO4).

3.1.2.5.

2% (m/V) nitroprusszid-nátrium-oldat (nátrium-nitrozil-pentaciano-ferrát(III)) (Na2FeNO(CN)5 ⋅ 2H2O). Tároljuk sötét, csiszolatos üvegdugóval jól lezárt üvegben. Ne tároljuk az oldatot nyolc napnál hosszabb ideig.

3.1.2.6.

10% (m/V) piperidinoldat (C5H11N).

3.1.2.7.

1 M tejsavoldat: 100 ml tejsavat (C3H6O3) 400 ml vízzel hígítunk. Ezt az oldatot forró vízfürdő fölött lepárló edényben melegítjük négy órán keresztül, alkalmanként desztillált vízzel feltöltve. Hűtés után töltsük fel egy literre. Titráljuk az oldat 10 ml-éből a tejsavat 1 M nátrium-hidroxid-oldattal. Állítsuk be a tejsavoldatot pontosan 1 M-ra (90 g/l tejsav).

3.1.2.8.

1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH).

3.2.

Eszközök

86

3.2.1.

10-11 mm belső átmérőjű és kb. 300 mm hosszú üvegoszlop, leeresztő csappal ellátva az áramlás szabályozása céljából.

3.2.2.

Állandó 65 °C hőmérsékletű vízfürdő.

3.2.3.

Spektrofotométer, amellyel 570 nm-es hullámhosszon lehet abszorbanciát mérni, 1 cm-es küvettákkal.

3.3.

Eljárás

3.3.1

Az ioncserélő oszlop előkészítése Lásd a borkősav meghatározásáról szóló rész 3.3.1. szakaszát (Szokásos módszer).

3.3.2.

A szerves savak elválasztása Lásd a borkősav meghatározásáról szóló rész 3.3.2. szakaszát (Szokásos módszer).

3.3.3.

A tejsav meghatározása Öntsünk 10 ml eluátumot egy 50 ml-es üvegkémcsőbe, amely csiszolatos üvegdugóval van ellátva, és adjunk hozzá 10 ml cérium(IV)-szulfát-oldatot. Keverjük össze; tegyük a kémcsövet egy 65 °C-os hőmérsékletű vízfürdőbe, pontosan 10 percre. Amikor a kémcsövet bemerítjük a fürdőbe, vegyük ki az üvegdugót

néhány

másodpercre,

hogy

kiegyenlítsük

a

melegítés

miatti

nyomásnövekedést, majd tegyük vissza a dugót úgy, hogy szorosan lezárjuk a kémcsövet, és megakadályozzuk, hogy acetaldehidveszteség keletkezzen. Vegyük ki a kémcsövet a fürdőből, és hűtsük le folyó víz alatt kb. 20 °C hőmérsékletre. Adjunk hozzá 5 ml 2,5 M nátrium-hidroxid-oldatot, keverjük össze, és szűrjük le. A szűrlet 15 ml-ét öntsük egy 50 ml-es csiszolatos üvegdugóval lezárható lombikba, amely már 5 ml 27%-os nátrium-acetát-oldat és 2 ml 1 M kénsav elegyét tartalmazza. Adjunk hozzá 5 ml nitroprusszid-nátrium-oldatot, keverjük össze, majd adjunk hozzá 5 ml piperidinoldatot, keverjük gyorsan át, és öntsük ezt az oldatot azonnal a spektrofotométer küvettájába. Az elszíneződés zöldtől ibolyáig változik, és 570 nm-en levegőhöz viszonyítva (nincs küvetta az optikai útban) mérjük. A színintenzitás először nő, majd gyorsan csökken. Kövessük az abszorbancia növekedését, és olvassuk le a maximális értéket, mint mérési eredményt. Ha az eluátumban túl sok tejsav van, és az abszorbancia túl nagy, hígítsuk az eluátumot 7,1%-os nátrium-szulfát-oldattal, és végezzük el a mérést a hígított oldattal.

87

3.3.4.

A kalibrációs görbe felvétele Pipettázzunk 10 ml 1 M tejsavoldatot és 10 ml 1 M nátrium-hidroxid-oldatot (egy 1 000 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel jelig 7,1%-os nátrium-szulfát-oldattal. Vegyünk 5, 10, 15, 20 és 25 ml-t ebből az oldatból, és töltsük ezeket 100 ml-es mérőlombikokba. Töltsük fel jelig 7,1%-os nátrium-szulfát-oldattal. Vegyünk az így készült oldatok mindegyikéből 10 ml-t, és határozzuk meg ezek abszorbanciáit a 3.3.3 szakaszban az eluátumra leírt eljárás szerint. Ezenek az oldatoknak a koncentrációi megfelelnek a 0,45, 0,9, 1,35, 1,80 és 2,25 g/l tejsavat tartalmazó boreluátumoknak. Ezen oldat tejsavtartalmának függvényében felvett abszorbanciaértékei egy egyenest adnak.

3.4.

Az eredmények megadása A bor tejsavtartalmát g/l-ben a kalibrációs görbéről olvassuk le. Az eredményt egy tizedes pontosságig adjuk meg.

Megjegyzés: A 250 mg/l-nél több kén-dioxidot tartalmazó borokban esetleg acetaldehid-szulfonsav lehet jelen, ami növelheti a mért tejsavtartalom eredményét. Ebben az esetben az eredményt a következő kiegészítő műveletből származó mennyiséggel kell korrigálni: 15 ml eluátumot összekeverünk egy csiszolatos üvegdugóval zárható kémcsőben 5 ml 27%-os nátrium-acetáttal és 2 ml 0,775 M H2SO4-val (77,5 ml 1 M H2SO4 100 ml-re kiegészítve desztillált vízzel). Ezután ugyanúgy, ahogy a tejsav meghatározáskor, adjunk hozzá 5 ml 2%-os nitroprusszid-nátriumot és 5 ml 10%os piperidint. Összekeverés után mérjük meg az abszorbanciát a tejsav meghatározásánál leírtak szerint. Keressük meg ezt az abszorbanciát a kalibrációs görbén, hogy megkapjuk az acetaldehid-szulfonsav következtében megjelenő tejsavértéket B g/l-ben. Ha a 3.3.3. szakasz szerint kapott látszólagos tejsav tartalmat L'-vel jelöljük, a tejsav L tényleges koncentrációját az alábbi összefüggés adja a borban:

L = L' - B x 0,4 (g/l)

88

19. 1.

AZ L-ALMASAV-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 18 A MÓDSZER ELVE Az L-almasav nikotinamid-adenin-dinukleotiddal (NAD) oxálacetáttá oxidálódik, L-malát-dehidrogenáz (L-MDH) által katalizált reakcióban. A reakció egyensúlyi pontja normális esetben erősen a malát irányába tolódik. Az oxálacetátnak a reakció keverékből való eltávolítása az egyensúlyi pontot az oxálacetát keletkezése irányába tolja el. L-glutamát jelenlétében az oxálacetát Laszpartáttá

alakul,

glutamát-oxálacetát-transzamináz

(GOT)

által

katalizált

reakcióban: (1) L-malát + NAD+

L-MDH

(2) Oxálacetát - L-glutamát

Oxálacetát + NADH + H+

L-aszpartát + α-ketoglutarát

GOT

a NADH-képződés, amely 340 nm hullámhosszon bekövetkező abszorbancianövekedés

által

mérhető,

arányos

az

eredetileg

jelen

lévő

L-almasav

mennyiségével. 2.

REAGENSEK

2.1.

Pufferoldat, pH = 10 (0,6 M glicil-gicin: 0,1 M L-glutamát): oldjunk fel 4,75 glicil-glicint és 0,88 g L-glutamin-savat kb. 50 ml kétszer desztillált vízben; állítsuk be a pH-t 10-re kb. 4,6 ml 10 M nátrium-hidroxiddal, és töltsük fel 60 ml-re kétszer desztillált vízzel. Ez az oldat legalább 12 hétig stabil marad 4 °C-os hőmérsékleten.

2.2.

Nikotinamid-adenin-dinukleotid-oldat (NAD), (kb. 47 x 10-3 M): oldjunk fel 420 mg NAD-t 12 ml kétszer desztillált vízben. Ez az oldat legalább négy hétig stabil marad 4 °C-os hőmérsékleten.

18


2.3.

2 mg/ml glutamát-oxálacetát-transzamináz-szuszpenzió (GOT). A szuszpenzió legalább egy évig stabil marad 4 °C hőmérsékleten.

2.4.

5 mg/ml L-malát-dehidrogenáz-oldat (L-MDH). Az oldat legalább egy évig stabil marad 4 °C hőmérsékleten.

Megjegyzés: Az összes reagens kereskedelmi forgalomban kapható. 3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a 340 nm hullámhosszon végzett méréseket, a NADH abszorbanciamaximumán. Ennek hiányában, szakaszos spektrumú fotométer is használható, amely lehetővé teszi a méréseket 334 vagy 365 nm-en. Mivel abszolútabszorbancia-méréseket végzünk (azaz kalibrációs görbéket nem használunk, de standardizálást végzünk a NADH abszorpciós koefficiensének figyelembevételével), a készülék hullámhosszpontosságát és az abszorbancia linearitását ellenőrizni kell.

3.2.

1 cm optikai úthosszú üvegküvetták vagy egyszer használatos küvetták.

3.3.

0,01-2 ml-es mikropipetták a minták beméréséhez.

4.

A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE Az L-almasav meghatározását általában közvetlenül a borból végezzük a színanyag előzetes eltávolítása és hígítás nélkül, feltéve, hogy az L-almasav koncentráció kisebb, mint 350 mg/l (365 nm-en mérve). Más esetben hígítsuk a bort kétszer desztillált vízzel, amíg az L-almasav koncentráció 30 és 350 mg/l közé kerül (azaz az L-almasav koncentráció a vizsgálati mintában 3 és 35 µg között van). Ha az L-almasav koncentráció a borban 30 mg/l-nél kisebb, a vizsgálati minta térfogatát 1 ml-ig növelhető. Ebben az esetben a hozzáadandó víz mennyiségét úgy kell csökkenteni, hogy a teljes térfogat a két küvettában egyforma legyen.

5.

ELJÁRÁS

90

A spektrofotométert 340 nm hullámhosszra beállítva, határozzuk meg az abszorbanciát 1 cm-es küvetták használatával, a zérus abszorbanciahoz (referencia) levegőt (nincs küvetta az optikai útban) vagy vizet használva. Helyezzük a következőket az 1 cm-es küvettákba: Referenciaküvetta

Mintaküvetta

(ml)

(ml)

2.1. oldat

1,00

1,00

2.2. oldat

0,20

0,20


1,00

0,90

2.3. szuszpenzió

0,01

0,01

Mérendő minta

-

0,10

Keverjük össze; kb. három perc múlva mérjük meg az oldatok abszorbanciáit a referencia-, valamint a mintaküvettában (A1). Adjunk hozzá: 2.4. oldatot

0,01 ml

0,01 ml

Keverjük össze; várjunk a reakció befejezéséig (5-10 perc), és mérjük meg az oldatok abszorbanciáit a referencia-, illetve a mintaküvettában (A2). Számítsuk ki a referencia- és a mintaküvettában lévő oldatok abszorbanciáinak különbségeit (A2 - A1), ∆AR és ∆AM. Végezetül számítsuk e két különbség különbségét: ∆A = ∆AM – ∆AR

Megjegyzés: Az enzimreakció befejeződéséhez szükséges idő tételről tételre változhat. A fenti érték csak iránymutatásként szerepel, és ajánlatos azt meghatározni minden tételre. 6.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA Az L-almasav-koncentrációt g/l-ben adjuk meg egy tizedes pontosságig.

Számítás

91

6.1.

A g/l-ben kifejezett koncentráció számítására alkalmazott általános összefüggés:

C=

V×M ×∆A ε × d × v × 1000

ahol

V v

tesztoldat térfogata ml-ben (itt 2,22 ml)

M

a meghatározandó anyag molekula tömege (itt az L-almasav esetében M =

a minta térfogata ml-ben (itt 0,1 ml) 134,09)

d

optikai úthossz a küvettában cm-ben (itt 1 cm)

ε

az NADH abszorpciós együtthatója (340 nm-en ε = 6,3 mmol-1 x l x cm-1),

így az L-almasav esetében: C = 0,473 x ∆A g/l Ha a mintát előkészítése során hígítottuk, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

Megjegyzés: Mérés 334 nm-en C = 0,482 x ∆A Mérés 365 nm-en: C = 0,876 x ∆A 6.2.

Ismételhetőség (r) r = 0,03 + 0,034xi xi az almasav-koncentráció a mintában g/l-ben.

6.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 0,05 + 0,071 xi xi az almasav-koncentráció a mintában g/l-ben.

92

20. A D-ALMASAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 19 (enzimes módszer) 1.

A MÓDSZER ELVE D-malát-dehidrogenáz (D-MDH) jelenlétében a D-almasavat (D-malát) a nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD) oxálacetáttá oxidálja. A létrejött oxálacetát piruváttá és szén-dioxiddá bomlik. D-almasav + NAD+

D-MDH

piruvát + CO2 + NADH + H+

A keletkezett NADH mennyisége arányos a D-almasav koncentrációjával, és 334, 340 vagy 365 nm-en mérjük. 2.

REAGENSEK Tesztkombináció kb. 30 meghatározáshoz. (a)

1. számú palack kb. 30 ml oldattal, amely Hepes-pufferből [N-(2hidroxietil)piperazin-N'-2-etánszulfonsav; pH = 9,0] és stabilizátorokból áll;

(b)

2. számú palack kb. 210 mg NAD liofilizátummal;

(c)

3. számú palack, három darab D-MDH liofilizátummal, darabonként kb. 8 U.

Az oldatok elkészítése 1.

Az 1. számú palack tartalmát hígítatlanul használjuk. Felhasználás előtt állítsuk be az oldat hőmérsékletét 20-25 °C-ra.

2.

Oldjuk fel a 2. számú palack tartalmát 4 ml kétszer desztillált vízben.

3.

Oldjuk fel az egyik 3. számú palack tartalmát 0,6 ml kétszer desztillált vízben. Felhasználás előtt állítsuk be az oldat hőmérsékletét 20-25 °C-ra.

Az oldatok eltarthatósága Az 1. számú palack tartalma legalább egy évig áll el, ha +4 °C hőmérsékleten tároljuk; a 2. számú oldat három hónapig áll el, ha +4 °C hőmérsékleten tároljuk, és két hónapig, ha -20 °C hőmérsékleten tároljuk; a 3. számú oldat öt napig áll el, ha +4 °C hőmérsékleten tároljuk. 19

A 761/1999/EK rendelet 1. mellékletének 20. módszere 93

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Spektrofotométer, amellyel 340 nm-en lehet méréseket végezni, amely hullámhosszon a NADH-nak abszorpciós maximuma van. Ha nincs ilyen készülék, szakaszos spektrumforrású spektrofotométer is használható, amellyel 334 vagy 365 nm-en lehet mérni. Mivel abszolútabszorbancia-méréseket végzünk (azaz nincs kalibrációs oldatsorozat, hanem a NADH abszorpciós együtthatójához való viszonyítást végzünk), a készülék hullámhosszpontosságát és abszorbancia linearitását ellenőrizni kell.

3.2.

Üvegküvetták 1 cm-es optikai úthosszal (rétegvastagsággal). Igény szerint eldobható küvetták is használhatók.

3.3.

Mikropipetták 0,01-2 mm térfogatok pipettázásához.

4.

A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE A D-almasav meghatározását normális esetben közvetlenül a borból végzik, előzetes színtelenítés nélkül. A küvettában lévő D-almasav mennyiségének 2-50 µg között kell lennie. A bort ezért úgy kell hígítani, hogy a D-almasav-koncentráció 0,02 és 0,5 g/l vagy 0,02 és 0,3 g/l között legyen (az alkalmazott készüléktől függően).

Hígítási táblázat: Becsült D-almasav mennyisége g /liter Mérési hullámhossz: 340 vagy 334 nm

5.

Hígítás vízzel

F hígítási tényező

-

1

1+9

10

365 nm

< 0,3 g

< 0,5 g

0,3 - 3,0 g

0,5 - 5,0 g

ELJÁRÁS 340 nm-es hullámhosszra beállított spektrofotométerrel határozzuk meg az abszorbanciát 1 cm-es küvetták használatával, a zérusabszorbancia beállításához levegőt (nincs küvetta az optikai útban) vagy vizet használva. Pipettázzunk a küvettákba:

94

Referenciaoldat

Vizsgálati minta

1. oldat

1,00 ml

1,00 ml

2. oldat

0,10 ml

0,10 ml


1,80 ml

1,70 ml

-

0,10 ml

Minta a méréshez

Keverjük össze, és kb. hat perc múlva mérjük meg a referencia- és a vizsgálati oldat abszorbanciáját (A1). Adjuk hozzá a következőt:

3. oldat

Referenciaoldat

Vizsgálati minta

0,05 ml

0,05 ml

Keverjük össze: várjuk meg, amíg a reakció befejeződik (kb. 20 perc), és mérjük meg a referencia- és a vizsgálatioldat abszorbanciáit (A2). Számítsuk ki az abszorbanciakülönbséget (A2 - A1) a referencia- (∆AT) és a vizsgálati (∆AE) oldatokra. Végezetül számítsuk ki ezen különbségek közötti különbséget: ∆A = ∆AE - ∆AT.

Megjegyzés: Az enzimreakció befejeződéséhez szükséges idő tételről tételre változhat. A fent megadott időtartam csak iránymutató jellegű, és ajánlatos azt meghatározni minden egyes tételhez. A D-almasav gyorsan reagál. Az enzim az L-borkősavat is átalakítja, bár sokkal lassabban. Ez magyarázza azt az enyhe mellékreakciót, amely extrapoláció segítségével korrigálható (lásd az A függeléket). 6.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A koncentrációnak mg/l-ben történő kiszámítására szolgáló általános összefüggés az alábbi: V × PM × ∆A C= ε×d×v ahol V

a vizsgálati oldat térfogata ml-ben (2,95 ml)

95

v

a minta térfogata ml-ben (0,1 ml)

PM

a meghatározandó anyag molekulatömege (D-almasavra PM = 134,09)

d

a küvetta optikai úthossza cm-ben (1 cm)

ε

az NADH moláris abszorpciós együtthatója: 340 nm-nél = 6,3 (1 mmol-1 cm-1) 365 nm-nél = 3,4 (1 mmol-1 cm-1) 334 nm-nél = 6,18 (1 mmol-1 cm-1)

Ha a mintát az előkészítés során hígítottuk, szorozzuk be az eredményt a hígítási tényezővel. A D-almasav koncentrációt mg/l-ben adjuk meg tizedesek nélkül. 7.

PONTOSSÁG A módszer pontosságára vonatkozó laboratóriumok közötti minták részleteit a B függelék összegzi. Előfordulhat, hogy a laboratóriumok közti mintából eredő értékek nem alkalmazhatók a B függelékben lévő koncentráció és mátrixok tartományain kívüli tartományokra.

7.1.

Ismételhetőség (r) Egy ugyanazt a készüléket használó vízsgáló által a lehető legrövidebb időn belül végzendő azonos anyagból vett mintára megadott két önálló eredmény közötti abszolút különbség nem lépheti túl az r megismerhetőségi értéket az esetek több, mint 5%-ában. r = 11 mg/l.

7.2.

Reprodukálhatóság (R) Két különböző laboratóriumban azonos anyagból vett mintára megadott két önálló eredmény közötti abszolút különbség nem lépheti túl az R reprodukálhatósági értéket az esetek több, mint 5%-ában. R = 20 mg/l.

8.

MEGJEGYZÉSEK E módszer pontossága szempontjából az 50 mg/l alatti D-almasav értékeket szükség esetén más mérési alapelvet használó analitikai módszerrel kell igazolni, mint pl. a Pryborski et al. módszere (Mitteilungen Klosterneuburg 43, 1993; 215-218. 1993). A küvettában lévő borminta nem lehet több, mint 0,1 ml az enzimtevékenység esetleges polifenolok általi gátlásának megakadályozása érdekében.

96

A függelék Hogyan kezeljük a mellékreakciókat? A mellékreakciókat általában az enzim másodlagos reakciói, a mintamátrixban lévő más enzimek jelenléte vagy a mátrixban lévő társtényezővel rendelkező egy vagy több elem interakciója okozzák az enzimreakcióban. Normálreakció esetén az abszorbancia bizonyos idő, általában 10-20 perc elteltével állandó értéket ér el a specifikus enzimreakció sebességétől függően. Ha azonban másodlagos reakciók fordulnak elő, az abszorbancia nem ér el állandó értéket, hanem idővel általában nő. Ezt a folyamattípust általában „mellékreakciónak” hívjuk. Ha mellékreakció fordul elő, az oldat abszorbanciáját rendszeres időintervallumokban kell mérni (minden második-ötödik percben), miután eltelt az az idő, amely ahhoz szükséges, hogy a standard oldat elérje végső abszorbanciáját. Ha az abszorbancia szabályosan nő, öt vagy hat mérést kell végezni, és vissza kell extrapolálni egy grafikon vagy számítás segítségével, hogy meghatározzuk azt az abszorbanciát, amelyet akkor figyelhettünk volna meg, amikor az utolsó enzimet hozzáadtuk (T0). A szubsztrátumkoncentrációt az erre az időre extrapolált abszorbancia különbsége alapján számítjuk (Af - Ai). Abszorbancia

∆A / ∆t =állandó

fő- és mellékreakció főreakció

mellékreakció

T0 (utolsó enzim hozzáadása)

Idő

1. ábra: Mellékreakció

97

B függelék

A laboratóriumok közötti minták statisztikai eredményei Az laboratóriumok közötti minták vizsgálatának éve:

1995

Laboratóriumok száma:

8

Minták száma:

5, D-almasav hozzáadásával Minta

A

B

C

D

E

7

8

7

8

7

1

-

1

-

1

35

41

35

41

36

Átlagérték ( χ ) (mg/l)

161,7

65,9

33,1

106,9

111,0

Ismételhetőség szórása (sr) (mg/l)

4,53

4,29

1,93

4,36

4,47

Ismételhetőség relatív szórása (RSDr) (%)

2,8

6,4

5,8

4,1

4,00

Ismételhetőségi határérték (R) (mg/l)

12,7

11,9

5,4

12,2

12,5

Reprodukálhatóság szórása (SR) (mg/l)

9,26

7,24

5,89

6,36

6,08

Reprodukálhatóság relatív szórása (RSDR) (%)

5,7

11

17,8

5,9

5,5

Reprodukálhatósági határérték (R) (mg/l)

25,9

20,3

16,5

17,8

17,0

A hibás eredményeket szolgáltató laboratóriumok kiszűrése után fennmaradt laboratóriumok száma Hibás eredményeket szolgáltató laboratóriumok száma Elfogadott eredmények száma −

Minták típusai: A: vörösbor; B: vörösbor; C: fehérbor; D: fehérbor; E: fehérbor

98

21. 1.

AZ ÖSSZES ALMASAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 20 A MÓDSZER ELVE Az anioncserélő oszlopon elválasztott DL-almasavat kolorimetriásan határozzuk meg. Az eluálószerben sárga elszíneződést hoz létre az almasav a 96 %-os kénsav jelenlétében a kromotropsavval. A zavaró anyagok korrekcióját úgyvégezzük, hogy kivonjuk a 86%-os kénsavval, illetve kromotropsavval kapott abszorbanciát a 96%os koncentrációjú kénsavval kapott abszorbanciából (az almasav nem reagál ezen a savkoncentrációkon).

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Kb. 250 mm hosszúságú és 35 mm belső átmérőjű üvegoszlop leeresztő csappal ellátva.

2.2.

Kb. 300 mm hosszúságú és 10-11 mm-es belső átmérőjű üvegoszlop leeresztő csappal ellátva.

2.3.

Vízfürdő, 100 °C hőmérsékletű

2.4.

Spektrofotométerkészlet 420 nm-en végzendő abszorbanciamérésre, 10 mm-es küvettákkal.

3.

REAGENSEK

3.1.

Erősen lúgos ioncserélő gyanta (pl. Merck III).

3.2.

5% (m/V)-os nátrium-hidroxid.

3.3.

30% (m/V)-os ecetsav.

3.4.

0,5% (m/V)-os ecetsav.

3.5.

10% (m/V)-os nátrium-szulfát-oldat.

3.6.

Koncentrált kénsav (H2SO4) 95-97% (m/m)-os.

20


3.7.

86% (m/m)-os kénsav

3.8.

5% (m/V)-os kromotropsav Minden egyes meghatározás előtt készítsünk friss oldatot úgy, hogy feloldunk 500 mg kromotropsavas-nátriumot (C10H6Na2O8S2 ⋅ 2H20) 10 ml desztillált vízben.

3.9.

0,5 g/l DL-almasav-oldat Oldjunk fel 250 mg almasavat (C4H6O5) 10%-os nátrium-szulfát oldatban), töltsük fel 500 ml-re nátrium-szulfát-oldattal (10%-os).

4.

ELJÁRÁS

4.1.

Az ioncserélő gyanta előkészítése Tegyünk egy desztillált vízzel átnedvesített üveggyapot dugót az oszlop aljába (35 x 250 mm) a csap fölött. Öntsünk anioncserélő gyanta szuszpenzióját az üvegoszlopba. A folyadék szintjének 50 mm-rel a gyanta szintje fölött kell lennie. Öblítsük át 1 000 ml desztillált vízzel. Mossuk át az oszlopot 5%-os nátriumhidroxid-oldattal úgy, hogy a gyanta felső szintjétől 2-3 mm-en belüli szintig engedjük le, ismételjük meg két további, 5%-os nátrium-hidroxidos mosással, és hagyjuk állni egy órán keresztül. Mossuk át az oszlopot 1 000 ml desztillált vízzel. Töltsük fel újra az oszlopot 30%-os ecetsavval, hagyjuk lefolyni az oszlop tetejétől számított 2-3 mm-ig, és ismételjük meg a 30%-os ecetsavas átmosást még kétszer. Használat előtt hagyjuk legalább 24 órát állni. Tároljuk az ioncserélő gyantát 30%os ecetsavban a további analízisek számára.

4.2.

Az ioncserélő oszlop előkészítése Helyezzünk üveggyapot dugót az oszlop aljára (11 x 300 mm) a csap fölé. Öntsünk bele ioncserélő gyanta szuszpenzióját (a 4.1. szakasz szerint előkészítve) 10 cm-es magasságig. Nyissuk ki a csapot, és hagyjuk, hogy lefolyjon a 30%-os ecetsav a gyanta tetejétől számított 2-3 mm-re. Mossuk át 50 ml 0,5%-os ecetsavval.

4.3.

A DL-almasav elválasztása Öntsünk a 4.2. szakasz szerint előkészített oszlopra 10 ml bort vagy mustot. Hagyjuk cseppenként lefolyni (átlagban másodpercenként egy csepp), és állítsuk le az áramlást a gyanta tetejétől számított 2-3 mm-re. Mossuk át az oszlopot 50 ml 0,5%-os ecetsavval, majd 50 ml desztillált vízzel, és hagyjuk lecsöpögni ugyanolyan sebességgel, mint az előbb, megállítva az áramlást a gyanta tetejétől számított 2-3 mm-en belül.

100

Eluáljuk az ioncserélő gyantán abszorbeálódott savakat 10%-os nátrium-szulfát-oldattal. Gyűjtsük össze az eluátumot egy 100 ml-es mérőlombikban. Az oszlop a 4.1. szakaszban leírt eljárás szerint regenerálható. 4.4.

Az almasav meghatározása Címkézzünk fel két széles nyakú, 30 ml-es kémcsövet (csiszolt üvegdugókkal ellátva), A-t és B-t. Mindegyik csőbe töltsünk 1,0 ml eluálószert és 1 ml 5%-os kromotropsavat. Adjunk 10 ml 86%-os kénsavat az A kémcsőhöz (referencia) és 10 ml 96%-os kénsavat a B kémcsőhöz (minta). Dugjuk be, és rázással homogenizáljuk, ügyelve arra, hogy az üvegdugó ne legyen nedves. Merítsük a csöveket forró vízfürdőbe, pontosan 10 percig. Hűtsük le a csöveket sötétben 20 °C-ra, pontosan 90 percen át. Azonnal mérjük meg a kontrollhoz viszonyított abszorbanciát 420 nm-en 10 mm-es kűvettában.

4.5.

A kalibrációs görbe felvétele Pipettázunk 5,0, 10,0, 15,0 és 20 ml 0,5 g/l almasavoldatot 50 ml-es mérőlombikokba, majd töltsük fel jelig 10%-os nátrium-szulfát-oldattal. Ezek az oldatok megfelelnek a 0,5, 1,0, 1,5 és 2 g/l almasavtartalmú borból nyert eluátumoknak. Folytassuk a 4.4. szakaszban leírtak szerint. Az oldatok abszorbanciáját az almasavtartalom függvényében ábrázolva egy, az origón áthaladó egyenest kapunk. A kialakult szín intenzitása nagymértékben függ a felhasznált kénsav koncentrációjától, a kalibrációs görbét legalább sorozatonként egy ponton ellenőrizni kell, hogy nem változott-e a kénsav koncentrációja.

5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A DL-almasavtartalmat a mért abszorbanciaérték alapján a kalibrációs görbéről kapjuk meg. A minta almasavkoncentrációt g/l-ben egy tizedes pontosságig adjuk meg.

Ismételhetőség: Tartalom < 2 g/l: r = 0,1 g/l. Tartalom > 2 g/l: r = 0,2 g/l.

Reprodukálhatóság: R = 0,3g/l.

101

22.

A SZORBINSAVTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 21

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Meghatározás ultraibolyaabszorpciós spektrofotometriával A

vízgőz-desztillációval

elválasztott

szorbinsavat

(2,4-hexadiénsav)

a

desztillátumban ultraibolyaabszorpciós spektrofotometriával határozzuk meg. Az ultraibolyaspektrumot zavaró anyagokat kalcium-hidroxiddal végzett enyhe lúgosítást követő szárazra párolással távolítjuk el. A 20 mg/l-nél kisebb szorbinsavkoncentrációk igazolásához vékonyrétegkromatográfiát használunk (érzékenység 1 mg/l). 1.2.

Meghatározás gázkromatográfiával A dietil-éterrel extrahált szorbinsavat gázkromatográfiával határozzuk meg belső standard jelenlétében.

1.3.

Nyomnyi mennyiségű szorbinsav kimutatása vékonyréteg-kromatográfiával A dietil-éterrel extrahált szorbinsavat vékonyréteg kromatográfiával mutatjuk ki, és koncentrációját félkvantitatív módon határozzuk mg.

2.

MEGHATÁROZÁS ULTRAIBOLYAABSZORPCIÓS SPEKTROFOTOMETRIÁVAL

2.1.

Reagensek

2.1.1.

Kristályos borkősav (C4H6O2).

2.1.2.

kb. 0,02 M kalcium-hidroxid-ldat Ca(OH)2

2.1.3.

20 mg/l referencia-szorbinsavoldat, Oldjunk fel 20 mg szorbinsavat (C6H8O2) kb. 2 ml 0,1 M nátrium-hidroxid-oldatban. Öntsük egy 1 000 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel vízzel a jelig, vagy 26,8 mg kálium-szorbátot (C6H7KO2) oldunk fel vízben, és töltsük fel 1 000 ml-re.

2.2.

Eszközök

2.2.1.

Vízgőz-desztillációs készülék (lásd az illó savakról szóló részt).

21


2.2.2.

Vízfürdő 100 °C hőmérsékleten.

2.2.3.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a méréseket 256 nm-es hullámhosszon, és amely 1 cm optikai úthosszú kvarcküvettával van ellátva.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

Desztilláció Töltsünk a vízgőz-desztillációs készülék lombikjába 10 ml bort, és adjunk hozzá 12 g borkősavat. Gyűjtsünk össze 250 ml desztillátumot.

2.3.2.

A kalibrációs görbe elkészítése A referenciaoldat hígításával készítsünk négy hígított referenciaoldatot 0,5, 1,0, 2,5 és 5 mg/l koncentrációjú szorbinsavoldatot. Mérjük meg az oldatok abszorbanciáit a spektrofotométerrel 256 nm-en, vakpróbaként desztillált vizet használva. Készítsük el a kalibrációs egyenest, amely az abszorbancia változását mutatja a koncentráció függvényében.

2.3.3.

Meghatározás Öntsünk 5 ml desztillátumot egy 55 mm átmérőjű lepárló edénybe, és adjunk hozzá 1 ml kalcium-hidroxid-oldatot. Pároljuk az oldatot vízfürdőn szárazra. Oldjuk fel a maradékot néhány ml desztillált vízben, vigyük át az oldatot egy 20 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel jelig. Mérjük meg az abszorbanciát 256 nm-en a spektrofotométerrel egy olyan vakpróbával szemben, amely 1 ml kalcium-hidroxid-oldat vízzel 20 ml-re való felhígításával készült. A mért abszorbanciaérték alapján az oldatban lévő szorbinsav C koncentrációját a kalibrációs görbe alapján határozzuk meg. Megjegyzés: Rutinvizsgálatkor nem szükséges a zavaróanyagok eltávolítása. Az UV-mérést közvetlenül a desztillált vízzel 1:4 arányban hígított desztillátumból végezzük.

2.4.


2.4.1

Számítás A borban lévő szorbinsavkoncentrációt mg/l-ben 100 x C adja

103

ahol C = a szorbinsav koncentrációja a spektrofotometriásan analizált oldatban mg/l-ben. 3.

MEGHATÁROZÁS GÁZKROMATOGRÁFIÁVAL

3.1.

Reagensek

3.1.1.

Dietil-éter, (C2H5)2O közvetlenül a felhasználás előtt desztillálva.

3.1.2.

Belső referenciaoldat: 1 g/l udekánsavoldat, C11H22O2 95%-os etilalkoholban

3.1.3.

1:3 (V/V) hígítású kénsavoldat, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml)

3.2.

Eszközök

3.2.1

Gázkromatográf lángionizációs detektorral és rozsdamentes oszloppal felszerelve (4 m x 1/2"), [előzetesen dimetil-diklór-szilánnal (DMDCS) kezelt 80-100 mesh szemcsenagyságú Gaschrom Q], amelyre dietilénglikol-szukcinát (5%-os) és foszforsav (1%) (DEGS – H3PO4) elegyét vagy dietilénglikol-adipát (7%) és foszforsav (1%) (DEGA – H3PO4) elegyét, mint álló fázist hordtak fel. Az oszlop kezelése DMDCS-nal – áramoltassunk át az oszlopon 2-3 g DMDCS tartalmú toluololdatot. Azonnal mossuk át metil-alkohollal, majd nitrogénnel, és ezután mossuk át hexánnal, amelyet további nitrogén követ. Ezután feltöltésre készen áll. Működési körülmények: Kolonna-hőmérséklet: 175 °C. Az injektor és a detektor hőmérséklete: 230 °C. Vivőgáz: nitrogén (áramlási sebesség = 20 ml/perc).

3.2.2.

10 µl-es mikrofecskendő 0,1 µl-es beosztással. Megjegyzés: Más típusú oszlopok is használhatók, amelyek jó elválasztást adnak, különösen a kapillárisoszlopok (pl. FFAP). A működési módszer csak példa.

104

3.3.

Eljárás

3.3.1.

A minta előkészítése Egy csiszolatos üvegdugóval ellátott kb. 40 ml-es üvegkémcsőbe öntsünk 20 ml bort, adjunk hozzá 2 ml-es belső referenciaoldatot és 1 ml hígított kénsavoldatot. Miután az oldatot a cső többszöri felfordításával megkevertük, adjunk hozzá 10 ml dietil-étert. Extraháljuk a szerves fázisban lévő szorbinsavat a cső öt percig tartó rázásával. Hagyjuk leülepedni.

3.3.2.

A referenciaoldat előkészítése Válasszunk ki egy olyan bort, amelynek az éterextraktumos kromatogramja nem tartalmaz a szorbinsavnak megfelelő csúcsot. Telítsük túl ezt a bort 100 mg/l koncentrációjú szorbinsavval. Kezeljük az így előkészített minta 20 ml-jét a 3.3.1 szakaszban leírtak szerint.

3.3.3.

Kromatográfia Mikrofecskendővel injektáljunk a kromatográfba egymás után 2 µl-t a 3.3.2. szakaszban leírtak

szerint nyert éterextraktumos fázisból és 2 µl-t a 3.3.1.

szakaszban leírtak szerint nyert éterextraktumos fázisból. Regisztráljuk a megfelelő kromatogramokat: ellenőrizzük a szorbinsav és a belső standard megfelelő retenciós időinek azonosságát. Mérjük meg mindkét regisztrált csúcs magasságát (vagy területét). 3.4.

Az eredmények kifejezése

3.4.1.

Számítás Az elemzett bor szorbinsav tartalmát mg/l-ben az alábbi képlet adja meg:

100 ×

h I × H i

ahol H

a szorbinsav csúcsmagassága a referenciaoldatban;

h

a szorbinsav csúcsmagassága az analizált mintában;

I

a belső standard csúcsmagassága a referenciaoldatban;

i

a belső standard csúcsmagassága az analizált mintában.

Megjegyzés: A szorbinsavtartalom ugyanilyen módon meghatározható a megfelelő csúcsok alatti területek mérésével. 105

4.

SZORBINSAVNYOMOK

AZONOSÍTÁSA

VÉKONYRÉTEG-KROMATOG-

RÁFIÁVAL 4.1.

Reagensek

4.1.1.

Etil-éter, (C2H5)2O.

4.1.2.

Kénsav vizes oldata, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml), 1:3 (V/V) arányban hígítva.

4.1.3.

20 mg /l szorbinsav-referenciaoldat kb. 10% (V/V)-os etil-alkohol-víz elegyben.

4.1.4.

Mozgó fázis: hexán-pentán-ecetsav (20:20:3) (C6H14/C5H12/CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/ml).

4.2.

Eszközök

4.2.1.

Előre bevont 20 x 20 cm-es vékonyréteg kromatográfiás lemezek, poliamid gél bevonattal (0,15 mm vastag), fluoreszcens indikátorral.

4.2.2.


4.2.3.

Mikropipetta vagy mikrofecskendő 5 µl-es térfogatok ± 0, 1 µl-es pontossággal való adagolásához.

4.2.4.

Ultraibolyalámpa (254 nm)

4.3.

Eljárás

4.3.1.

A minta előkészítése Csiszolatos üvegdugóval ellátott kb. 25 ml-es üvegkémcsőbe helyezzünk 10 ml bort, adjunk hozzá 1 ml hígított kénsavat és 5 ml etil-étert. Keverjük meg a kémcsövet többször megfordítva. Hagyjuk leülepedni.

4.3.2.

A hígított referenciaoldatok előkészítése Készítsünk öt hígított referenciaoldatot a 4.1.3. oldatból literenként 2, 4, 6, 8 és 10 mg szorbinsavtartalommal.

106

4.3.3.

Kromatográfia Mikrofecskendővel vagy mikropipettával juttassunk 5 µl-t a 4.1.3. szakaszban leírtak szerint kapott éterrel extrahált fázisból és 5 µl-t mindegyik referenciahígításból a lemez alsó peremétől számított 2 cm-re lévő pontokra, egymástól 2 cm távolságban. Helyezzük a mozgó fázist a kromatográfiás edény kb. 0,5 cm magasságába, és hagyjuk, hogy a tartály légtere telítődjön az oldószergőzökkel. Helyezzük a lemezt a tartályba. Hagyjuk a kromatogramot 12-15 cm-re fejlődni (kifejlődési idő kb. 30 perc). Szárítsuk meg a lemezt hideg levegőáramban. Vizsgáljuk meg a kromatogramot 254 nm-es ultraibolyalámpa alatt. A szorbinsav jelenlétét mutató foltok sötét ibolyaszínűnek tűnnek a lemez sárga fluoreszcens hátterén.

4.4.

Az eredmények megadása Az vizsgálandó minta és a referenciaoldatok által létrehozott foltok intenzitásainak összehasonlítása lehetővé teszi a 2 és 10 mg/l közötti szorbinsavkoncentráció félkvantitatív

becslését.

A

borban

1

mg/l

szorbinsavkoncentráció

még

meghatározható, ha a mintaoldat 10 µl-t visszük fel a lemezre. Ha a bor szorbinsavtartalma több, mint 10 mg/l, 5 µl-nél kevesebb vizsgálati mintákat vigyünk fel (mikrofecskendővel kimérve).

107

23. 1.

AZ L-ASZKORBINSAV-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 22 A MÓDSZEREK ELVE A javasolt módszerek lehetővé teszik a borokban vagy a mustokban jelen lévő Laszkorbinsav és dehidroaszkorbinsav meghatározását.

1.1.

Referencia-módszer (fluorimetria) Az L-aszkorbinsavat aktív szénen dehidroaszkorbinsavvá oxidáljuk. Ez utóbbi fluoreszkáló vegyületet képez ortofenilén-diaminnal (OFDA) reagálva. Bórsav jelenlétében végzett kontroll lehetővé teszi a zavaró fluoreszcenciák kiküszöbölését (bórsav/dehidroaszkorbinsav

komplex

létrehozásával)

és

a

fluorimetriás

meghatározás eredményének korrigálását. 1.2.

Szokásos módszer (kolorimetria) Az L-aszkorbinsavat jóddal dehidroaszkorbinsavvá oxidáljuk, amely a 2,4dinitrofenil-hidrazinnal reagál és piros színű diketo-gulonsav – 2,4-dinitro-fenilhidrazon keletkezik. Vékonyréteg kromatográfiás elválasztás után és ecetsavban oldva a piros színű származékot spektrofotometriával határozzuk meg 500 nm-en.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER (fluorimetriás módszer)

2.1.

Reagensek

2.1.1.

0,02% (m/V)-os ortofenilén-diamin-dihidroklorid-oldat (C6H10Cl2N2), közvetlenül felhasználás előtt készítsük el.

2.1.2.

500 g/l koncentrációjú nátrium-acetát-oldat (CH3COONa ⋅ 3H2O).

2.1.3.

Bórsavas nátrium-acetát- oldat: Oldjunk fel 3 g bórsavat (H3BO3) 100 ml nátrium-acetát-oldatban. Ezt az oldatot közvetlenül a felhasználás előtt kell készíteni.

22


2.1.4.

Jégecetoldat, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml), 56%-ra hígítva (V/V) 1,2 pH közeli értékkel.

2.1.5.

1g/l-es L-aszkorbinsav-referenciaoldat: Közvetlenül a felhasználás előtt oldjunk fel 50 mg L-aszkorbinsavat (C6H8O6), amelyet előzőleg fény és levegő kizárása mellett, exszikkátorban szárítottunk, 50 ml ecetsav oldatban .

2.1.6.

Analitikailag legtisztább aktív szén23 Egy 2 literes Erlenmeyer-lombikba helyezzünk 100 g aktív szenet, és adjunk hozzá 500 ml 10% (V/V)-os sósavoldatot (HCl) (ρ20 = 1,19 g/ml). Forraljuk fel, és 3-as porozitású szűrőtégellyel szűrjük le. Gyűjtsük össze az így kezelt szenet egy 2 literes Erlenmeyer-lombikba, adjunk hozzá 1 liter vizet, rázzuk fel, és szűrjük le 3as porozitású szűrőtégelyen. Ismételjük meg ezt a műveletet még kétszer. Helyezzük a maradékot 115 ± 5 °C hőmérsékletű szárítószekrénybe 12 órára (egy éjszakán át).

2.2.

Eszközök

2.2.1.

Fluoriméter: Használjunk folyamatos spektrumot adó lámpával felszerelt spektrofluorimétert, amely a lámpát minimális teljesítménnyel használja. A vizsgálathoz szükséges optimális extinciós és emissziós hullámhosszakat előzetesen határozzuk meg. Iránymutató jelleggel a kioltási hullámhossz kb. 350 nm és a kibocsátási hullámhossz kb. 430 nm. 1 cm-es küvetták.

2.2.2.

3-as porozitású szűrőtégely.

2.2.3.

Kémcsövek (kb. 10 mm-es átmérőjű).

2.2.4.

Keverőpálcák a kémcsövekhez.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

A bor- vagy a mus minta előkészítése Vegyünk megfelelő térfogatú bort vagy mustot, és hígítsuk 100 ml-re mérőlombikban 56%-os ecetsavoldattal úgy, hogy olyan oldatot kapjunk, amelyben

23

A kereskedelmi nevek egyike ‘Norite’. 109

az L-aszkorbinsav koncentrációja 0 és 60 mg/l között van. Homogenizáljuk a lombik tartalmát keveréssel. Adjunk hozzá 2 g aktív szenet, és hagyjuk állni 15 percig, alkalmanként megkeverve. Szűrjük át szűrőpapíron, elengedve a szűrlet első néhány milliliterjét. Két darab 100 ml-es mérőlombikba töltsünk 5 ml szűrletet, és az elsőbe 5 ml bórsavas nátrium-acetát-oldatot (vakpróba), míg a másikba 5 ml nátrium-acetát-oldatot (minta). Hagyjuk állni 15 percig, alkalmanként megkeverve. Töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Vegyünk mindkét lombik tartalmából 2-2 ml-t, és adjunk hozzá 5 ml ortofeniléndiamin-oldatot, keverjük össze; hagyjuk a reakciót 30 percig sötétben kifejlődni majd végezzük el a spektrofluorimetriás méréseket. 2.3.2.

A kalibrációs görbe elkészítése Három 100 ml-es mérőlombikba töltsünk 2, 4, illetve 6 ml referencia-Laszkorbinsav-oldatot, töltsük fel 100 ml-re ecetsavoldattal, és homogenizáljuk keveréssel. Az ilyen módon elkészített referenciaoldatok 2, 4, illetve 6 mg/100 ml L-aszkorbinsavat tartalmaznak. Adjunk mindegyik lombikhoz 2 g aktív szenet, és hagyjuk állni 15 percig, alkalmanként megkeverve. Szűrjük át szűrőpapíron, elengedve az első néhány millilitert. Mindegyik szűrletből töltsünk 5-5 ml-t három darab 100 ml-es mérőlombikba (első sorozat). Ismételjük meg a műveletet, hogy megkapjuk a három mérőlombikból álló második sorozatot.

Az első sorozat mindegyik

lombikjába (a vakpróbának megfelelő) adjunk 5 ml bórsavas nátrium-acetátoldatokat, a második sorozat mindegyik lombikjához adjunk 5 ml nátrium acetátoldatot . Hagyjuk állni 15 percig, alkalmanként megkeverve. Töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Vegyünk mindegyik lombik tartalmából 2 ml-t, adjunk hozzá 5 ml ortofenilén-diamin oldatot, rázás után az oltatot 30 percig sötétben állni hagyjuk, majd elvégezzük a fluoreszcenciás mérést. 2.3.3.

Fluorimetriás meghatározás Készítsük el a kalibrációs görbét, amely egy, az origón áthaladó egyenes. Az Laszkorbinsav- és dehidroaszkorbinsav-tartalmat (C) a kalibrációsgörbéről olvassuk le.

2.3.4.

Az eredmények megadása A borban lévő L-aszkorbinsav és dehidroaszkorbinsav koncentrációját mg/l-ben a

110

C x F adja, ahol F a hígítási tényező. 3.

SZOKÁSOS MÓDSZER (kolorimetriás módszer)

3.1.

Reagensek

3.1.1.

30% (m/V)-os metafoszforsavoldat: Mérjünk be 30 g metafoszforsavat, (HPO3)n, amelyet előzőleg dörzscsészében összetörtünk. Mossuk le gyorsan desztillált vízbe merítéssel és keveréssel. A mosó folyadékot öntsük el. Oldjuk fel a lemosott savat desztillált vízben, 100 ml-es mérőlombikban rázva, és töltsük fel jelig. Az így kapott metafoszforsavoldat koncentrációja kb. 30% (m/V).

3.1.2.

3% (m/V)-os metafoszforsavoldat Közvetlenül a felhasználás előtt készítjük, a 30%-os oldatot desztillált vízzel 10szeresére hígítva.

3.1.3.

1 % (m/V)-os metafoszforsav oldat Közvetlenül a felhasználás előtt készítjük, a 30%-os oldatot 30-szorosára hígítva.

3.1.4.

Poliamidszuszpenzió: Készítsünk a kromatográfiához 10 g poliamidszuszpenziót 60 ml desztillált vízzel. Hagyjuk állni két órán keresztül. Az így előkészített mennyiség négy meghatározáshoz elég.

3.1.5.

Tiokarbamid, (NH2)2CS.

3.1.6.

0,05 M jódoldat.

3.1.7.

6% (m/V)-os 2,4-dinitrofenil-hidrazin-oldat: Készítsünk 6 g 2,4-dinitrofenil-hidrazin-szuszpenziót (C6H6N4O4) 50 ml jégecetben (ρ20 = 1,05 g/ml), és adjunk hozzá 50 ml kénsavat (ρ20 = 1,84 g/ml). A 2,4-dinitrofenil-hidrazint keveréssel oldjuk.

3.1.8.

Etil-acetát (C4H8O2) 2% (V/V)-os jégecet hozzáadásával

3.1.9.

Kloroform, CHCl3.

111

3.1.10.

0,5 % (m/V)-os vizes keményítőoldat.

3.1.11.

Mozgó fázis: etil-acetát ................................................................................. 50 térfogat kloroform ................................................................................. 60 térfogat jégecet ........................................................................................ 5 térfogat Felhasználás előtt 12 órán keresztül ne nyúljunk az oldószerkeverékhez.

3.1.12.

Jégecet, CH3COOH, (ρ20 = 1,05 g/ml).

3.1.13.

0,1 g/100 ml L-aszkorbinsav-oldat, 1%-os metafoszforsavoldatban.

3.2.

Eszközök

3.2.1.

Laboratóriumi

centrifuga,

csiszolt

üvegdugóval

ellátott

50

ml-es

centrifugacsövekkel. 3.2.2.

Vízfürdő, 5 és 10 °C között szabályozott hőmérséklettel.

3.2.3.

20 °C-ra beállított vízfürdő.

3.2.4.

20 x 20 cm-es használatra kész vékonyréteg-kromatográfiás lemezek, szilikagél G bevonattal (vastagság 0,25 vagy 0,3 mm)

3.2.5.


3.2.6.

0,2 ml-es térfogatok adagolására alkalmas mikropipetta.

3.2.7.

Spektrofotométer, amely alkalmasd 500 nm-en abszorbanciamérésre, 1 cm-es opti küvettákkal felszerelve.

3.3.

Eljárás

3.3.1.

Az L-aszkorbinsav oxidálása dehidroaszkorbinsavvá Töltsünk 50 ml bort egy 100 ml-es mérőlombikba, adjunk hozzá 15 ml poliamidszuszpenziót, és töltsük fel a jelig 3%-os metafoszforsavoldattal. Hagyjuk állni egy órán keresztül, gyakran összerázva. Szűrjük át bordás szűrőn. Gyűjtsünk össze 20 ml szűrletet egy centrifugacsőbe, adjunk hozzá 1 ml 0,05 M jódoldatot.

112

Homogenizáljuk rázással a ledugózott centrifugacsövet, és egy perc múlva csökkentsük a jódfelesleget kb. 25 mg tiokarbamid hozzáadásával. 3.3.2.

A

diketogulonsav-bis(2,4-dinitrofenil-hidrazon)-származék

létrehozása

és

extrahálása Helyezzük a csövet vízfürdőbe, amelynek hőmérsékletét 5 és 10 °C között tartjuk; adjunk hozzá 4 ml 2,4-dinitrofenil-hidrazin-oldatot. Keverjük össze óvatosan a tartalmát, ügyelve arra, hogy az üvegdugó ne legyen nedves. Zárjuk le teljesen a csövet, és helyezzük 20 °C hőmérsékletű vízfürdőbe kb. 16 órán keresztül (egy éjszakán át). Jutassunk 15 ml etil-acetátot a centrifugacsőbe. Zárjuk le a csövet csiszolatos üvegdugóval, és erőteljesen rázzuk 30 másodpercig. Centrifugáljuk öt percig 350400 g-vel. Pipettázzunk 10 ml etil-acetát-extraktumot egy Erlenmeyer-lombikba, amely csiszolatos üvegdugóval van ellátva. Vegyük ki a centrifugacső dugóját, és adjunk hozzá további 5 ml etil-acetátot, ismét rázzuk 30 másodpercig, és centrifugáljuk 5 percig ugyanolyan sebességgel. Pipettázzunk 5 ml etil-acetát-extraktumot az Erlenmeyer-lombikba, amely tartalmazza az első extrakció 10 mljét. Keverjük össze. 3.3.3.

A bis(2,4-dinitrofenil-hidrazon) elválasztása kromatográfiával; ezt az extrakciót követő 2 órán belül kell elvégezni (3.3.2). Vigyünk fel 0,2 ml etil-acetát-extraktumot a lemez szélétől 2 cm-re lévő startvonal egészére, 2 cm margót hagyva a lemez két oldalán. Töltsük a mozgó fázist a kromatográfiás tartályba 1 cm-es magasságig, és hagyjuk, hogy a tartály légtere telítődjön az oldószerpárákkal. Helyezzük be a lemezt, hagyjuk, hogy az oldószer a lemez felső széléig fusson. Szárítsuk egy órán keresztül a lemezt elszívófülkében. Tartsuk a lemezt függőleges helyzetben egy simított papírlap fölött, és egy spatulával kaparjuk le (a futás irányára merőlegesen) a piros színű zónát (amely a 2,4-dinitrofenil-hidrazonra jellemző). Tegyük át a porított termékeket veszteség nélkül egy csiszolatos üvegdugóval ellátott Erlenmeyer-lombikba, és adjunk hozzá 4 ml ecetsavat. Hagyjuk állni 30 percig, gyakran kevergetve. Szűrjük át bordás szűrőpapíron közvetlenül egy spektrofotometriás küvettába. A kapott szűrletnek teljesen tisztának kell lennie. Mérjük meg ennek az oldatnak az abszorbanciáját 500 nm-en, a referenciaküvettában ecetsavat használva , hogy megkapjuk a mérések nulla pontját.

113

3.3.4.

A kalibrációs görbe elkészítése Töltsünk 5, 10 és 15 ml L-aszkorbinsav-oldatot három, egyenként 1 000 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel jelig 1%-os metafoszforsavoldattal. Az így kapott oldatok 50, 100, illetve 150 mg/l aszkorbinsav-koncentrációjúak. Kezeljük mindegyik oldatot a 3.3.1., 3.3.2. és 3.3.3. szakaszban leírt eljárás szerint. Készítsük el a kalibrációs görbét, amely az origón áthaladó egyenes.

3.3.5.

Az eredmények kifejezése A bor L-aszkorbinsav- és dehidroaszkorbinsav-koncentrációját mg/l-ben fejezzük ki.

3.3.5.1.

Számítás Keressük meg a 3.3.3. szakaszban leírtak szerint mért abszorbanciaértéket az egyenes

kalibrációs

görbén,

és

határozzuk

meg

az

L-aszkorbinsav

+

dehidroaszkorbinsav koncentrációját az analizálandó oldatban. Megjegyzés: Ha az L-aszkorbinsav + dehidroaszkorbinsav koncentrációja nagyobb mint 150 mg/liter, csökkentsük a vizsgálati minta térfogatát 25, 20 vagy 10 ml borra, és szorozzuk meg a kapott eredményt az F hígítási tényezővel.

114

24. 1.

A pH MEGHATÁROZÁSA24 ALAPELV A vizsgálandó folyadékba merített két elektród közötti potenciálkülönbséget mérjük. A két elektród egyikének potenciálja a folyadék pH-értékétől függ, míg a másik elektród, a referenciaelektród potenciálja állandó és ismert értékű.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

pH-mérő, amely pH-egységekben van kalibrálva, és lehetővé teszi a méréseket legalább ±0,05 pH-egység pontossággal.

2.2.

Elektródák

2.2.1.

Üvegelektród, desztillált vízben tárolva.

2.2.2.

Referenciaelektród (kalomelelektród, telített kálium-klorid-oldatban), telített kálium-klorid-oldatban tárolva.

2.2.3.

Kombinált elektród, desztillált vízben tárolva.

3.

REAGENSEK

3.1.

Pufferoldatok

3.1.1.

Kálium-hidrogén-tartarát telített oldata, amely legalább 5,7 g kálium-hidrogén-tartarátot tartalmaz (C4H5KO6) literenként, 20 °C hőmérsékleten. (Ez az oldat két hónapig is eltartható, ha 200 ml oldatba 0,1 g timolt teszünk.)

pH

3.1.2.

3,57


3,56


3,55


0,05 M kálium-hidrogén-ftalát-oldat, literenként 10,211 g kálium-hidrogén-ftalát-tartalommal (C8H5KO4) 20 °C hőmérsékleten.

24


(Maximális eltarthatósági idő két hónap.)

pH

3.1.3.

3,999

15

°C hőmérsékleten

4,003

20


3,008

25


4,015

30


Oldat, amely az alábbiakat tartalmazza: kálium-dihidrogén-foszfát, KH2PO4 ............................................. 3,402 g dikálium-hidrogén-foszfát, K2HPO4 ............................................. 4,354 g víz ...........................................................................................1 000 ml-ig (Maximális eltarthatósági idő két hónap)

pH

6,90


6,88

20


6,86

25


6,85

30


Megjegyzés: Kereskedelmi forgalomban kapható pufferoldatok is használhatók. 4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése

4.1.1.

A mustot vagy a bort közvetlenül használjuk a méréshez.

4.1.2.

Finomított mustsűrítmény esetében: hígítsuk a finomított mustsűrítményt vízzel úgy, hogy 25 ± 0,5% (m/m) összescukortartalmat érjünk el (25° Brix). Ha az összes cukortartalom a finomított mustsűrítményben, % (m/m)-ben kifejezve 2500 g mustsűrítményt, és egészítsük ki 100 g-ra desztillált vízzel. P, mérjünk be P A felhasznált víz vezetőképességének 2 mikrosiemens/cm-nél kisebbnek kell lennie.

116

4.2.

A készülék nullpontjának beállítása Minden mérés előtt állítsuk be a pH-mérő nullapontját az alkalmazott készülék használati utasítása szerint.

4.3.

A pH-mérő kalibrálása Kalibráljuk a pH-mérőt 20 °C hőmérsékleten 6,88 és 3,57 pH-jú, 20 °C hőmérsékletű pufferoldattal.. Használjunk 4,00 pH-jú, 20 °C hőmérsékletű pufferoldatot a kalibrálás ellenőrzésére.

4.4.

Meghatározás Merítsük az elektródokat a vizsgálandó oldatba, amelynek hőmérséklete legyen 20 és 25 °C között, lehetőleg 20 °C közelében. Olvassuk le a pH-értéket közvetlenül a skáláról. Legalább két meghatározást végezzünk el ugyanazon a mintán. A végeredményt a két meghatározás számtani átlagából kapjuk.

5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A must, a bor vagy a finomított mustsűrítmény 25 % (m/m)-os (25° Brix) oldatának pH-értékét két tizedes pontossággal adjuk meg.

117

25. A KÉN-DIOXID-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA25 1.

MEGHATÁROZÁSOK A mustban és borban lévő kén-dioxid H2SO3 és HSO3,- formájában van jelen. Az e formák közötti egyensúly a pH és a hőmérséklet függvénye: H2SO3

H+ + HSO3-

A H2SO3 molekuláris kén-dioxidot reprezentál. Az összes kén-dioxid a borban lévő kén-dioxid valamennyi formájának összege, melyek szabad vagy kötött formában fordulnak elő a borban. 2.

A SZABAD ÉS AZ ÖSSZES KÉN-DIOXID

2.1.

A MÓDSZEREK ELVE

2.1.1.

Referencia-módszer

2.1.1.1.

Borok és mustok esetében A kén-dioxidot levegő- vagy nitrogénárammal, hígított és semleges hidrogénperoxid-oldatot tartalmazó szedőedénybe visszük, ahol oxidáljuk. A képződött kénsavat nátrium-hidroxid-oldattal titráljuk. A szabad kén-dioxidot alacsony hőmérsékleten (10 °C), az összes kén-dioxidot magas hőmérsékleten (kb. 100 °C) hajtjuk át a borból.

2.1.1.2.

Finomított mustsűrítmények esetében A kén-dioxidot az előzőleg hígított finomított mustsűrítményből magas hőmérsékleten (kb. 100 °C) hajtjuk át a borból.

25


2.1.2.

Gyors meghatározási módszer (borok és mustok esetében) A szabad kén-dioxidot közvetlen jodometriás titrálással határozzuk meg. A kötött kén-dioxidot lúgos hidrolízist követő jodometriás titrálással határozzuk meg. A szabad kén-dioxidhoz hozzáadva a kötött kén-dioxidot megkapjuk

az

összes kén-dioxid-tartalmat. 2.2.

Referencia-módszer

2.2.1.

Eszközök

2.2.1.1.

Az alkalmazott készüléknek meg kell felelni, különösen a hűtő tekintetében, az 1. ábrán látható készüléknek.

Vízsugárszivattyú

1. ábra A méretek mm-ben értendők. A hűtőt alkotó négy koncentrikus cső belső átmérője 45, 34, 27 és 10 mm.

119

A B buborékoltatóba vezető gázbevezető cső egy kis, 1 cm átmérőjű gömbben végződik, amelynek horizontális kerületén 20 db 0,2 mm átmérőjű lyuk található. Ez a cső frittüveg lapban is végződhet, amely nagyszámú, igen apró buborékot hoz létre, ezáltal biztosítva a megfelelő érintkezést a folyadék- és a gázfázis között. A készüléken áthaladó gáz sebessége kb. 40 l/óra legyen. Az ábra jobb oldalán látható palack célja, hogy 200-300 vízoszlop miliméterre korlátozza a vízsugárszivattyú által létrehozott nyomáscsökkenést. A megfelelő értékű vákuum beállításához egy félkapilláriscsővel ellátott áramlásmérőt kell a buborékoltató és a palack közé szerelni. 2.2.1.2.

Mikrobüretta.

2.2.2.

Reagensek

2.2.2.1.

85%-os foszforsav (H3PO4, ρ20 = 1,71 g/ml).

2.2.2.2.

9,1 g/l [3 % (V/V)] hidrogén-peroxid-oldat.

2.2.2.3.

Indikátoroldat: metilvörös ..................................................................................... 100 mg metilénkék....................................................................................... 50 mg 50% (V/V)-os alkohol ................................................................... 100 ml

2.2.2.4.

0,01 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH) .

2.2.3.

Eljárás

2.2.3.1.

A szabad kén-dioxid meghatározása A bort teletöltött és lezárt palackban kell tárolni 20 °C hőmérsékleten két napon keresztül a meghatározást megelőzően. Töltsünk 2-3 ml hidrogén-peroxid-oldatot és két csepp indikátor oldatot a B buborékoltatóba, és semlegesítsük a hidrogén-peroxid-oldatot 0,01 M nátriumhidroxid-oldattal. Csatlakoztassuk az abszorpciós edényt a készülékhez.

120

Töltsünk 50 ml mintát és 15 ml foszforsavat a készülék A lombikjába. Csatlakoztassuk a lombikot a készülékhez. Buborékoltassunk levegőt (vagy nitrogént) 15 percen keresztül a készüléken át. Az átvitt szabad kén-dioxid kénsavvá oxidálódik. Vegyük le a buborékoltatót a készülékről, és titráljuk a képződött savat 0,01 M nátrium-hidroxid-oldattal . n = 0,01 M nátrium-hidroxid-oldat fogyása ml-ben. 2.2.3.2.

Az eredmények megadása A szabad kén-dioxidot mg/l-ben adjuk meg, egész számra kerekítve. A szabad kén-dioxid-tartalom mg/l-ben: 6,4 n.

2.2.3.3.

Az összes kén-dioxid-tartalom meghatározása

2.2.3.3.1. Finomított mustsűrítmény Használjuk a vizsgálandó mintát 40% (m/V)-ra hígítva, amint azt az összes savtartalomról szóló rész 5.1.2 szakaszában leírtuk. Töltsünk 50 ml ilyen oldatot és 5 ml foszforsavat az elválasztó készülék 250 ml-es A lombikjába. Csatlakoztassuk a lombikot a készülékre. 2.2.3.3.2. Borok és mustok Ha a minta várható összes kén-dioxid-tartalma kisebb, mint 50 mg/l: Töltsünk 50 ml mintát és 15 ml foszforsavat a 250 ml-es A lombikba, majd csatlakoztassuk a lombikot a készülékhez. Legkésőbb 1992. december 31-ig azonban a szőlőlé kén-dioxid tartalmának meghatározásához 5 ml 25% (m/V)-os foszforsavoldatot kell használni. Ha a minta várható összes kén-dioxid-tartalma kisebb, mint 50 mg/l: Töltsünk 20 ml mintát és 5 ml foszforsavat a 100 ml-es A lombikba, majd csatlakoztassuk a lombikot a készülékhez. Töltsünk 2-3 ml hidrogén-peroxid-oldatot a B buborékoltatóba, az előbbieknek megfelelően semlegesítve, és forraljuk fel az A lombikban lévő bort 4-5 cm-es kis lángon, amely közvetlenül érje a lombik alját. A lombikot ne fémhálóra, hanem egy olyan lemezre tegyük, amelyen egy kb. 30 mm átmérőjű lyuk van. Ennek az a célja, hogy elkerüljük az extraktanyagok lombik falára való égését.

121

Tartsuk forrásban a mintát, miközben levegő (vagy nitrogén) áramlik át rajta. 15 percen belül az összes kén-dioxid átjut, és oxidálódik. Határozzuk meg a képződött kénsavat 0,01 M nátrium-hidroxid-oldattal végzett titrálással. n = 0,01 M nátrium-hidroxid fogyás ml-ben. 2.2.3.4.

Az eredmény megadása Mustok és borok esetében az összes kén-dioxid-tartalmat mg/l-ben kifejezve, finomított mustsűrítmény esetében mg/kg összes cukorban adjuk meg egészszámra kerekitve. Borok esetében: Az összes kén-dioxid-tartalom mg/l-ben: —

alacsony kén-dioxid tartalmú minták (50 ml-es vizsgálati minta): 6,4 n

—

egyéb minták (20 ml-es vizsgálati minta): 16 n

Finomított mustsűrítmények esetében: Az összes kén-dioxid-tartalom mg/kg összes cukorban kifejezve (50 ml előkészített vizsgálati minta):

1600 × n P ahol P = az összes cukortartalom, %(m/m)-ben 2.2.3.4.2. Ismételhetőség (r) 50 ml-es vizsgálati minta < 50 mg/l; r = 1 mg/l. 20 ml-es vizsgálati minta > 50 mg/l; r = 6 mg/l. 2.2.3.4.3. Reprodukálhatóság (R) 50 ml-es vizsgálati minta < 50 mg/l; R = 9 mg/l. 20 ml-es vizsgálati minta > 50 mg/l; R = 15 mg/l.

122

2.3.

Gyors meghatározási módszer

2.3.1.

Reagensek

2.3.1.1.

EDTA (Komplexon III): Etilén-diamin-tetraecetsavdinátrium-sója (C10H14N2O8Na2 ⋅ 2H2O)

2.3.1.2.

4 M (160 g/l) nátrium-hidroxid-oldat (NaOH).,

2.3.1.3.

10% (V/V)-os kénsavoldat ( H2SO4) (ρ20 = 1,84 g/ml).

2.3.1.4.

5 g/l keményítőoldat: Keverjünk össze 5 g keményítőt kb. 500 ml vízzel. Forraljuk fel folyamatosan keveréssel, és hagyjuk forrni kb. 10 percen át. Adjunk hozzá 200 g nátrium-kloridot (NaCl). Lehűlés után töltsük fel egy literre.

2.3.1.5.

0,025 M jódoldat ( I2).

2.3.2.

Eszközök

2.3.2.1.

500 ml-es Erlenmeyer-lombik.

2.3.2.2.

Büretta.

2.3.2.3.

1, 2, 5 és 50 ml-es pipetták.

2.3.3.

Eljárás

2.3.3.1

Szabad kén-dioxid Töltsünk egy 500 ml-es Erlenmeyer-lombikba: —

50 ml bort,

—

5 ml keményítőoldatot,

—

30 mg EDTA (Komplexon III)-at,

—

3 ml 10% (V/V)-os kénsavoldatot .

Titráljuk azonnal az oldatot 0,025 M jódoldattal addig, amíg a határozott kék színű elszíneződés 10-15 másodpercig megmarad. Legyen n ml a fogyott jódoldat térfogata.

123

2.3.3.2.

Összes kén-dioxid Adjunk a vizsgált oldathoz 8 ml 4 M nátrium-hidroxid oldatot, majd keverjük meg, és hagyjuk állni öt percig. Főzőpohárból adjunk hozzá erőteljes keveréssel, és egy műveletben 10 ml 10%-os kénsavoldatot. Titráljuk haladéktalanul 0,025 M jódoldattal. Legyen n' ml a fogyott jódoldat térfogata. Adjunk az oldathoz további 20 ml 4 M nátrium-hidroxid-oldatot, keverjük össze, és hagyjuk állni öt percig. Hígítsuk fel 200 ml jéghideg vízzel. Adjuk az oldathoz erőteljes keveréssel és egy műveletben a 30 ml 10%-os kénsavval töltött kémcső tartalmát. Titráljuk haladéktalanul a szabad kén-dioxidot 0,025 M jódoldattal, a fogyott jódoldat térfogata legyen n'' ml.

2.3.4.


2.3.4.1.

Számítás: A szabad kén-dioxid tartalom mg/l-ben: 32 n. Az összes kén-dioxid tartalom mg/l-ben: 32 (n + n' + n''). Megjegyzések: (1) Kis kén-dioxid-tartalmú vörösborok esetében célszerű 0,025 M jódoldatnál hígabb oldatot használni (pl. 0,01 M jódoldat). Ekkor a fenti összefüggésben az együttható értéke 32 helyett 12,8 lesz. (2) Vörösborok titrálásakor célszerű alulról megvilágítani kálium-kromát-oldaton keresztül világító normál villanykörte sárga fénysugarával, vagy nátriumgőzlámpával a titrálandó oldatot. A meghatározást sötét helyen kell végezni, és figyelni kell a bor áttetszőségét: a végpont elérésekor homályossá válik. (3) Ha a kén-dioxid (H2SO3) mennyisége közel van a megengedett határértékhez, vagy azt meghaladja, az összes kén-dioxid-tartalmat a referencia-módszerrel kell meghatározni.

124

(4) Ha a kén-dioxid meghatározását nagyon pontosan kell elvégezni, az analízist olyan mintán végezzük el, amelyet két napig levegő kizárása mellett, 20 °C hőmérsékleten tartottunk az analízist megelőzően. A meghatározást is 20 °C hőmérsékleten hajtsuk végre. (5) Mivel bizonyos anyagokat a jód savas közegben oxidálja, az ilyen módon felhasznált jód mennyiségét döntő vizsgálatok esetén figyelembe kell venni. Ennek elérése érdekében a szabad kén-dioxidot fölösleges acetaldehiddel vagy propionaldehiddel kell lekötni a jódos titrálás elvégzése előtt. Adjunk 5 ml 7 g/l-es acetaldehidoldatot (C2H4O) vagy 5 ml 10 g/l-es propionaldehidoldatot (C3H6O) 50 ml borhoz egy 300 ml-es Erlenmeyer-lombikba. Zárjuk le a lombikot, és hagyjuk állni legalább 30 percig. Adjunk hozzá 3 ml 10%-os

kénsavoldatot

és

titráljuk

az

oldatot

0,025

M

jódoldattal

színátcsapásig. Legyen n''' ml a felhasznált jód térfogata. Ezt ki kell vonni az n-ből (szabad kén-dioxid), és az n + n' + n''-ből (összes kén-dioxid). Az n''' értéke általában kicsi, 0,2-0,3 ml 0,025 M jód. Ha aszkorbinsavat adtak a borhoz, n''' értéke lényegesen nagyobb, és lehetővé teszi egy közelítő meghatározását a hozzáadott aszkorbinsavnak (1 ml 0,025 M jód 4,4 mg aszkorbinsavat oxidál). Az n''' meghatározásával meglehetősen könnyen tetten érhető a 20 mg/l-nél nagyobb mennyiségű maradék aszkorbinsav jelenléte azokban a borokban, amelyek más redukáló anyagot nem tartalmaznak.

3.

A MOLEKULÁRIS KÉN-DIOXID

3.1.

A MÓDSZER ELVE A molekuláris kén-dioxid (H2SO3) százalékos arányát a szabad kén-dioxidban a pH, az alkoholtartalom és a hőmérséklet függvényében számítjuk ki. Adott hőmérséklet és alkoholtartalom esetében: H+ + HSO3-.

H2SO3

[H 2 SO3 ] =

L 10

( pH − pK M ) +1

(1)

ahol 125

pK M = pK T −

A I 1+ B I

L = [H2SO3]+[HSO3-] ahol

I

ionerősség,

A és B

a hőmérséklettől és alkoholtartalomtól függő együtthatók,

KT

termodinamikai disszociációs együttható: a pKT értékeit az 1. táblázat mutatja a hőmérsékletek és az alkoholtartalom függvényében.

KM

vegyes disszociációs együttható.

A 2. táblázat különböző hőmérsékletekre és alkoholtartalmakra a pKM értékeit adja meg az I ionerősségre 0,038 átlagértéket figyelembe véve. Az (1) kifejezéssel kiszámított molekuláris kén-dioxid tartalmat a 3. táblázat adja meg a pH, a hőmérséklet és az alkoholtartalom különböző értékeire. 3.2.

Számítás A bor pH-jának és alkoholtartalmának ismeretében a molekuláris kén-dioxid százalékos arányát a 3. táblázat adja meg T °C hőmérsékletre. Legyen ez X %. A molekuláris kén-dioxid tartalom mg/l-ben:

XxC ahol C

a szabad kén-dioxid tartalom mg/l-ben.

126

1. TÁBLÁZAT

A pKT termodinamikai disszociációs együttható állandó értékei Alkoholtartalom

Hőmérséklet, °C

% (V/V)

20

25

30

35

40

0

1,798

2,000

2,219

2,334

2,493

5

1,897

2,098

2,299

2,397

2,527

10

1,997

2,198

2,394

2,488

2,606

15

2,099

2,301

2,503

2,607

2,728

20

2,203

2,406

2,628

2,754

2,895

2. TÁBLÁZAT

A pKM vegyes disszociációs együttható értékei (I = 0,038) Alkoholtartalom

Hőmérséklet, °C

% (V/V)

20

25

30

35

40

0

1,723

1,925

2,143

2,257

2,416

5

1,819

2,020

2,220

2,317

2,446

10

1,916

2,116

2,311

2,405

2,522

15

2,014

2,216

2,417

2,520

2,640

20

2,114

2,317

2,538

2,663

2,803

127

3. TÁBLÁZAT

Molekuláris kén-dioxid a szabad kén-dioxid százalékában (I=0,038)

pH 2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3,3 3,4 3,5 3,6 3,7 3,8

0

5

T=20 °C Alkoholtartalom. % (V/V) 10

7,73 6,24 5,02 4,03 3,22 2,58 2,06 1,64 1,31 1,04 0,83

9,46 7,66 6,18 4,98 3,99 3,20 2,56 2,04 1,63 1,30 1,03

11,55 9,40 7,61 6,14 4,94 3,98 3,18 2,54 2,03 1,62 1,29

14,07 11,51 9,36 7,58 6,12 4,92 3,95 3,16 2,53 2,02 1,61

17,09 14,07 11,51 9,36 7,58 6,12 4,92 3,95 3,16 2,53 2,02

17,15 14,12 11,55 9,40 7,61 6,14 4,94 3,97 3,18 2,54 2,03

20,67 17,15 14,12 11,55 9,40 7,61 6,14 4,94 3,97 3,18 2,54

24,75 22,71 17,18 14,15 11,58 9,42 7,63 6,16 4,55 3,98 3,18

24,49 20,48 16,98 13,98 11,44 9,30 7,53 6,08 4,89 3,92 3,14

29,28 24,75 20,71 17,18 14,15 11,58 9,42 7,63 6,16 4,95 3,98

35,36 30,29 25,66 21,52 17,88 14,75 12,08 9,84 7,98 6,44 5,19

15

20

T=25 °C 2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3,3 3,4, 3,5 3,6 3,7 3,8

11,471 9,58 7,76 6,27 5,04 4,05 3,24 2,60 2,07 1,65 1,32

14,23 11,65 9,48 7,68 6,20 4,99 4,00 3,20 2,56 2,05 1,63 T=30 °C

2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3,3 3,4, 3,5 3,6 3,7 3,8

18,05 14,89 12,20 9,94 8,06 6,51 5,24 4,21 3,37 2,69 2,16

20,83 17,28 14,23 11,65 9,48 7,68 6,20 4,99 4,00 3,21 2,56

128

3. TÁBLÁZAT

(folytatás) 0

5

T=35 °C Alkoholtartalom , % (V/V) 10

22,27 18,53 15,31 12,55 10,24 8,31 6,71 5,44 4,34 3,48 2,78

24,75 20,71 17,18 14,15 11,58 9,42 7,63 6,16 4,95 3,98 3,18

28,71 24,24 20,26 16,79 13,82 11,30 9,19 7,44 6,00 4,88 3,87

34,42 29,42 24,88 20,83 17,28 14,23 11,65 9,48 7,68 6,20 4,99

42,18 36,69 31,52 26,77 22,51 18,74 15,49 12,71 10,36 8,41 6,80

34,52 29,52 24,96 20,90 17,35 14,29 11,70 9,52 7,71 6,22 5,01

40,89 35,47 30,39 25,75 21,60 17,96 14,81 12,13 9,88 8,01 6,47

50,14 44,74 38,85 33,54 28,62 24,15 20,19 16,73 13,77 11,25 9,15

pH

2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3,3 3,4 3,5 3,6 3,7 3,8

15

20

T=40 °C 2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3,3 3,4, 3,5 3,6 3,7 3,8

29,23 24,70 20,67 17,15 14,12 11,55 9,40 7,61 6,14 4,94 3,97

30,68 26,01 21,83 18,16 14,98 12,28 10,00 8,11 6,56 6,28 4,24

129

26.

A NÁTRIUMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 26

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer: atomabszorpciós spektrofotometria A nátriumtartalmat közvetlenül a borból határozzuk meg atomabszorpciós spektrofotometriával, miután ionizációs pufferoldatot (cézium-klorid) adtunk hozzá a nátrium ionizációjának csökkentésére.

1.2.

Szokásos módszer: lángfotometria A nátriumtartalmat közvetlenül a hígított borból (legalább 1:10) határozzuk meg lángfotometriával.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Reagensek

2.1.1.

1 g/l nátriumtartalmú oldat Használjunk kereskedelmi standardoldatot, amely 1 g nátriumot tartalmaz literenként. Ezt az oldatot úgy is el lehet készíteni, hogy feloldunk 2,542 g vízmentes nátrium-kloridot (NaCl) desztillált vízben, és feltöltjük a térfogatot 1 literre. Tároljuk ezt az oldatot polietilénpalackban.

2.1.2.

Mátrixoldat (modell) : citromsav, C6H8O7 ⋅ H2O .................................................................. 3,5 g szacharóz, C12H22O11 ......................................................................... 1,5g glicerin, C3H8O3................................................................................. 5,0g vízmentes kalcium-klorid, CaCl2 .................................................... 50 mg vízmentes magnézium-klorid, MgCl2 ............................................. 50 mg abszolút alkohol, C2H5OH ............................................................... 50 ml desztillált víz..............................................................................500 ml-ig

2.1.3.

Cézium-klorid-oldat, 5% céziumtartalommal: oldjunk fel 6,330 g cézium-kloridot (CsCl) 100 ml desztillált vízben.

26


2.2.

Eszközök

2.2.1.

Atomabszorpciós spektrofotométer, acetilén-levegő égőfejjel felszerelve.

2.2.2.

Nátrium-vájtkatódlámpa.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

A minta előkészítése Pipettázzunk 2,5 ml bort egy 50 ml-es mérőlombikba, adjunk hozzá 1 ml céziumklorid-oldatot, és töltsük fel jelig desztillált vízzel.

2.3.2.

Kalibrálás Öntsünk 5,0 ml mátrixoldatot egy sorozat 100 ml-es mérőlombik mindegyikébe, és adjunk hozzá 0, 2,5 5,0, 7,5, valamint 10 ml 1 g/l-es nátriumoldatot, amelyet előzőleg 1:100 arányban hígítottunk. Adjunk minden egyes lombikhoz 2 ml cézium-klorid oldatot, és töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Az így előkészített standard oldatok 0, 0,25, 0,50, 0,75 illetve 1,00 mg nátriumot és 1 g céziumot tartalmaznak literenként. Tároljuk ezeket az oldatokat polietilén palackokban.

2.3.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 589,0 nm-re. Nullázzuk az abszorbanciaskálát az 1 g/l céziumtartalmú mátrixoldattal. Jutassuk a hígított bort a spektrofotométer égőfejébe, amelyet a standard oldatok (2.3.2) kövessenek. Olvassuk le az abszorbanciaértékeket. Ismételjünk meg minden mérést.

2.4.


2.4.1.

A számítás módja Vegyük fel a kalibrációs görbét ( az abszorbanciaértékeket a nátrium-koncentráció függvényében). A hígított bor mérése során kapott abszorbanciaérték átlagához határozzuk meg a

C nátriumtartalmat, mg/l-ben, a kalibrálógörbe segítségével.

131

A bor nátriumtartalma mg/l-ben ekkor 20C lesz, egész számra kerekítve adjuk meg. 2.4.2.

Ismételhetőség (r) r = 1 + 0,024 xi mg/l. xi = a nátrium koncentrációja a mintában mg/l-ben.

2.4.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 2,5 + 0,05 xi mg/l. xi = a nátrium koncentrációja a mintában mg/l-ben.

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER

3.1.

Reagensek

3.1.1.

Literenként 20 mg/l nátriumot tartalmazó referenciaoldat Abszolút alkohol (C2H5OH) ............................................................ 10 ml Citromsav (C6H8O7 ⋅ H2O) ........................................................... 700 mg Szacharóz (C12H22O11).................................................................. 300 mg Glicerin (C3H8O3) ...................................................................... 1 000 mg Kálium-hidrogén-tartarát (C4H5KO6) ........................................ 481,3 mg Vízmentes kalcium-klorid (CaCl2) ................................................. 10 mg Vízmentes magnézium-klorid (MgCl2) .......................................... 10 mg Szárított nátrium-klorid (NaCl) ................................................. 50,84 mg Desztillált víz................................................................................1 literig

3.1.2.

Hígító oldat Abszolút alkohol (C2H5OH) ............................................................ 10 ml Citromsav (C6H8O7 ⋅ H2O) ........................................................... 700 mg Szacharóz (C12H22O11).................................................................. 300 mg Glicerin (C3H8O3) ...................................................................... 1 000 mg Kálium-hidrogén-tartarát (C4H5KO6) ........................................ 481,3 mg Vízmentes kalcium-klorid (CaCl2) ................................................. 10 mg Vízmentes magnézium-klorid (MgCl2) .......................................... 10 mg Víz.................................................................................................1 literig A referencia és higító oldat előkészítéséhez oldjuk fel a kálium-hidrogén-tartarátot kb. 50 ml nagyon forró desztillált vízben, keverjük össze ezt az oldatot 400 ml

132

olyan desztillált vízzel, amelyben a többi összetevőt már feloldottuk, és töltsük fel 1 literre. Tároljuk az oldatokat polietilénpalackokban, két csepp allil-izotiocianátot hozzáadva. 3.2.

Eszközök

3.2.1.

Lángfotométer, bután-levegő égőfejjel ellátva.

3.3.

Eljárás

3.3.1.

Kalibrálás Töltsünk 5, 10, 15, 20 és 25 ml referenciaoldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel 100 ml-re a hígító oldattal. Ezzel a módszerrel 1, 2, 3, 4 és 5 mg/l nátriumkoncentrációjú oldatokat kapunk.

3.3.2.

Meghatározás Végezzük el a méréseket 589,0 nm-en. Végezzük el a beállítást 100%-os fényátbocsátásra desztillált vízzel. Ezután jutassuk be először a standard oldatokat (3.3.1), majd ezután a desztillált vízzel tízszeresére hígított bort a fotométer égőjébe, és jegyezzük fel a transzmisszió százalékban kifejezett értékeit. Szükség esetén a már tízszeresére hígított bort tovább lehet hígítani a hígító oldattal.

3.4.


3.4.1

Számítási mód Készítsük el a kalibrálógörbét, amely a százalékos fényáteresztés változását mutatja a nátriumkoncentráció függvényében. Jelöljük be a hígított bormintával kapott fényáteresztést a grafikonon, és határozzuk meg a hozzátartozó C nátriumkoncentrációt. A nátriumkoncentráció, mg/l-ben, F x C, ahol F a hígítási tényező.

3.4.2.

Ismételhetőség (r)

r = 1,4 mg/l (kivéve a likőrborokat) r = 2,0 mg/l likőrborra. 3.4.3.

Reprodukálhatóság (R)

133

R = 4,7 + 0,08 xi mg/l. xi = nátriumkoncentráció a mintában mg/l-ben.

134

27.

A KÁLIUMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 27

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer A káliumtartalmat közvetlenül a borból határozzuk meg atomabszorpciós spektrofotometriával, miután ionizációs pufferoldatot (cézium-klorid) adtunk hozzá a kálium ionizációjának megakadályozására.

1.2.

Szokásos módszer A káliumtartalmat közvetlenül a hígított borból (legalább 1:10) határozzuk meg lángfotometriás módszerrel.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Reagensek

2.1.1.

1 g/l kálium tartalmú oldat Használjunk 1 g/l káliumot tartalmazó kereskedelmi standard oldatot. Ez az oldat elkészíthető 4,813 g kálium-hidrogén-tartarát (C4H5KO6) desztillált vízben való feloldásával, és a térfogat 1 literre történő kiegészítésével is.

2.1.2.

Mátrixoldat (modell): citromsav (C6H8O7 ⋅ H2O) ................................................................ 3,5 g szacharóz (C12H22O11) ....................................................................... 1,5g glicerin (C3H8O3) ............................................................................... 5,0g vízmentes kalcium-klorid (CaCl2) .................................................. 50 mg vízmentes magnézium-klorid (MgCl2) ........................................... 50 mg abszolút alkohol (C2H5OH) ............................................................. 50 ml desztillált víz..............................................................................500 ml-ig

2.1.3.

Cézium-klorid-oldat, 5% céziumtartalommal Oldjunk fel 6,33 g cézium-kloridot (CsCl) 100 ml desztillált vízben.

27


2.2.

Eszközök

2.2.1.

Atomabszorpciós spektrofotométer acetilén-levegő égőfejjel felszerelve.

2.2.2.

Kálium-vájtkatód ámpa.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

A minta előkészítése Pipettázzunk 2,5 ml (előzőleg tízszeresére hígított) bort egy 50 ml-es mérőlombikba, adjunk hozzá 1 ml cézium-klorid-oldatot, és töltsük fel jelig desztillált vízzel.

2.3.2.

Kalibrálás Töltsünk 5,0 ml mátrixoldatot egy sorozat 100 ml-es mérőlombik mindegyikébe, és adjunk hozzá 0, 2,0, 4,0 6,0, illetve 8,0 ml 1 g/l-es káliumoldatot (amit előzőleg tízszeresére hígítottunk). Adjunk 2 ml cézium-klorid-oldatot

mindegyik

lombikhoz, és töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Az így előkészített standard oldatok mindegyike 0, 2, 4, 6 illetve 8 mg káliumot és 1 g céziumot tartalmaz literenként. Tároljuk ezeket az oldatokat polietilénpalackokban. 2.3.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 769,9 nm-re. Nullázzuk az abszorbanciaskálát az 1 g/l céziumtartalmú mátrixoldattal használatával. Mérjük először a hígított bort (2.3.1), majd a standard oldatokat (2.3.2) egymást követően, majd ismételjük meg a méréseket.

2.4.


2.4.1.

Számítás Vegyük fel a kalibrációs görbét ( az abszorbanciaértékeket a káliumkoncentráció függvényében). A hígított bor mérése során kapott abszorbancia érték átlagához határozzuk meg a

C káliumtartalmat, mg/l-ben a kalibrálógörbe segítségével. A bor mg/l-ben kifejezett káliumtartalma ekkor

F x C lesz,

136

ahol F a hígítási tényező (itt 200), a számított értéket egész számra kerekítve adjuk meg. 2.4.2.

Ismételhetőség (r) r = 35 mg/l.

2.4.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 66 mg/l.

2.4.4.

Az eredmények megadásának egyéb módjai Milliekvivalens/l-ben: 0,0256 F C, mg/l kálium-hidrogén-tartarátban: 4,813 F C.

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER: LÁNGFOTOMETRIA

3.1.

Reagensek

3.1.1.

100 mg/l káliumtartalmú referenciaoldat Abszolút alkohol (C2H5OH) ............................................................ 10 ml Citromsav (C6H8O7 x H2O) .......................................................... 700 mg Szacharóz (C12H22O11).................................................................. 300 mg Glicerin (C3H8O3) ...................................................................... 1 000 mg Nátrium-klorid (NaCl) ................................................................. 50,8 mg Vízmentes kalcium-klorid (CaCl2) ................................................. 10 mg Vízmentes magnézium-klorid (MgCl2) .......................................... 10 mg Szárított kálium-hidrogén-tartarát (C4H5KO6) .......................... 481,3 mg Víz...........................................................................................1 000 ml-ig Oldjuk fel a kálium-hidrogén-tartarátot 500 ml forró desztillált vízben, keverjük össze ezt az oldatot 400 ml desztillált vízzel, amelyben a többi összetevőt már feloldottuk, és töltsük fel egy literre.

3.1.2.

Hígító oldat Abszolút alkohol (C2H5OH) ............................................................ 10 ml Citromsav (C6H8O7 x H2O) .......................................................... 700 mg Szacharóz (C12H22O11).................................................................. 300 mg Glicerin (C3H8O3) ...................................................................... 1 000 mg

137

Nátrium-klorid (NaCl) ................................................................. 50,8 mg Vízmentes kalcium-klorid (CaCL2)................................................ 10 mg Vízmentes magnézium-klorid (MgCl2) .......................................... 10 mg Borkősav (C4H6O6)....................................................................... 383 mg Víz...........................................................................................1 000 ml-ig Tároljuk ezeket az oldatokat polietilénpalackokban két csepp allil-izotiocianát hozzáadásával. 3.2.

Eszközök

3.2.1.

Lángfotométer bután-levegő égőfejjel ellátva.

3.3.

Eljárás

3.3.1.

Kalibrálás Töltsünk 25, 50, 75, illetve 100 ml referenciaoldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel 100 ml-re a hígító oldattal. Ezen a módon 25, 50, 75 és 100 mg/l káliumtartalmú oldatokat kapunk.

3.3.2.

Meghatározás Végezzük el a méréseket 766 nm-en. Végezzük el a beállítást 100%-os fényáteresztésre desztillált vízzel. Ezután mérjük a standard oldatokat (3.3.1), majd a desztillált vízzel tízszeresére hígított bort és jegyezzük fel a leolvasott fényáteresztési tényező százalékértékeit. Szükség esetén a már tízszeresére hígított bort tovább lehet hígítani a hígító oldattal .

3.4.


3.4.1

Számítás Készítsük el a kalibrációs görbét, amely a százalékos fényáteresztés változását mutatja a standard oldatokban lévő káliumkoncentráció függvényében. Jelöljük be a hígított bormintával kapott százalékos fényáteresztést a grafikonon, és határozzuk meg a megfelelő C káliumkoncentrációt. A káliumkoncentrációt, mg/l-ben,

F x C adja meg, egész számra kerekítve, ahol F a hígítási tényező.

138

3.4.2.


3.4.3.


3.4.4.

Az eredmények megadásának egyéb módjai Milliekvivalens/l-ben: 0,0256 F C, mg/l kálium-hidrogén-tartarátban: 4,813 F C.

139

28. A MAGNÉZIUMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 28 1.

A MÓDSZER ELVE A magnéziumtartalmat közvetlenül a megfelelően hígított borból határozzuk meg atomabszorpciós spektrofotometriás módszerrel.

2.

REAGENSEK

2.1.

1 g/l magnéziumtartalmú oldat Használjunk 1 g/l kereskedelmi standard magnézium oldatot (1 g/l). Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy feloldunk 8,3646 g magnézium-kloridot (MgCl2 ⋅ 6H2O) desztillált vízben, és feltöltjük 1 literre.

2.2.

5 mg/l magnéziumtartalmú hígított standard oldat Megjegyzés: Tároljuk a standard magnéziumoldatokat polietilénpalackokban.

3.

ESZKÖZÖK

3.1.


3.2.

Magnézium-vájtkatódlámpa.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Hígítsuk fel a bort 1:100 arányban desztillált vízzel.

4.2.

Kalibráció Négy, 100 ml-es mérőlombikba töltsünk 5, 10, 15, illetve

20 ml hígított

magnézium-standard-oldatot, és töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Az ilyen módon előkészített standardoldatok 0,25, 0,50, 0,75 és 1,0 mg/l magnéziumot tartalmaznak. Tároljuk az oldatokat polietilénpalackokban.

28


4.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 285 nm-re. Állítsuk be az abszorbanciaskála nullapontját desztillált vízzel. Mérjük a hígított bort, majd egymás után a standard oldatokat. Olvassuk le az abszorbanciaértékeket. Ismételjük meg mindegyik mérést.

5.


5.1.

Számítás Készítsük el az abszorbanciaváltozás görbéjét a standard oldatokban lévő magnéziumkoncentráció függvényében. Jelöljük meg a hígított bormintából kapott abszorbancia-átlagértéket ezen a grafikonon, és határozzuk meg a C magnéziumkoncentrációt mg/l-ben. A bor magnéziumtartalmát, mg/l-ben, 100 C, egész számra kerekítve adjuk meg.

5.2.


5.3.


141

29.

1.

A KALCIUMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 29

A MÓDSZER ELVE A kalciumtartalmat közvetlenül a borból határozzuk meg atomabszorpciós spektrofotometriás módszerrel, miután pufferoldatot (lantán-klorid) adtunk hozzá.

2.

REAGENSEK

2.1.

1 g/l kalcium tartalmú oldat Használjunk kereskedelmi 1 g/l-es kalcium tartalmú oldatot. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy 2,5 g kalcium-karbonátot (CaCO3) annyi 1:10 (v/v) HCl-ban oldunk, amely ezt teljes mértékben feloldja, és feltöltjük egy literre desztillált vízzel.

2.2.

50 mg/l hígított kalcium standard oldat Megjegyzés: Tároljuk a standard kalcium oldatokat polietilén palackokban.

2.3.

50 g/l lantán-klorid oldat Oldjunk fel 13,369 g lantán-kloridot (LaCl3 ⋅ 7H2O) desztillált vízben; adjunk hozzá 1 ml 1:10 (v/v) hígítású HCl-t, és töltsük fel 100 ml-re.

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Acetilén-levegő égőfejjel felszerelt atomabszorpciós spektrofotométer.

3.2.

Kalcium-vájtkatódlámpa.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Töltsünk 1 ml bort, 2 ml lantán-klorid-oldatot egy 20 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel jelig desztillált vízzel. Az 1:20 arányban hígított bor literenként 5 g lantánt tartalmaz.

29


Megjegyzés: Édes borok esetében 5 g/l lantán koncentráció elegendő, feltéve, hogy a hígítás a cukortartalmat 2,5 g/l alá csökkenti. Nagyobb cukortartalmú borok esetén a lantántartalmat 10 g/l-re kell növelni. 4.2.

Kalibrálás Töltsünk 0, 5, 10, 15 és 20 ml hígított standard kalcium-standardoldatot 100 ml-es mérőlombikokba. Adjunk minden lombikhoz 10 ml lantán-klorid-oldatot, és töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Az ilyen módon előkészített oldatok mindegyike 0, 2,5, 5,0, 7,5 és 10 mg/l kalciumot és 5 g/l lantánt tartalmaz. Ezeket az oldatokat polietilénpalackokban kell tárolni.

4.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 422,7 nm-re. Nullázzuk az abszorbanciaskálát az 5 g/l lantántartalmú oldattal. Mérjük a hígított bort, majd egymás után az öt standard oldatot (4.2). Olvassuk le az abszorbanciákat. Ismételjük meg mindegyik mérést.

5.


5.1.

Számítás Vegyük fel a kalibrációs görbét, amely az abszorbancia változását a kalciumkoncentráció függvényében mutatja. Jelöljük meg a hígított bormintából kapott abszorbancia középértékét a grafikonon, és határozzuk meg az ehhez tartozó C kalciumtartalmat. A bor kalciumtartalma, mg/l-ben, 20 C lesz, egész számra kerekítve adjuk meg.

5.2.

Ismételhetőség (r) Koncentráció < 60 mg/l: r = 2,7 mg/l. Koncentráció > 60 mg/l: r = 4 mg/l.

5.3.

Reprodukálhatóság (R) R = 0,114 xi - 0,5. xi = koncentráció a mintában mg/l-ben.

143

30. A VASTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 30 1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer A bor alkoholtartalmának eltávolítása és megfelelő hígítása után a vastartalmat közvetlenül atomabszorpciós spektrofotometriával határozzuk meg.

1.2.

Szokásos módszer 30%-os hidrogén-peroxid-oldattal végzett feltárást követően az összes vastartalmat, amely ekkor Fe(III) állapotból Fe(II) állapotba redukálódik, az ortofenantrolin által okozott elszíneződés alapján határozzuk meg.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Reagensek

2.1.1.

1 g/l vas(III)tartalmú oldat. Kereskedelmi standard oldatot is használhatunk. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy feloldunk 8,6341 g vas(III)-ammónium-szulfátot (FeNH4(SO4)2 ⋅ 12H2O) desztillált vízben, amelyet 1 M sósavval enyhén megsavanyítunk, és feltöltünk egy literre.

2.1.2.

100 mg/l hígított vas(III)-standardoldat

2.2.

Eszközök

2.2.1.

Rotációs bepárló, termosztatikusan szabályozott vízfürdővel.

2.2.2.


2.2.3.

Vas-vájtkatódlámpa.

2.3.

Eljárás

30

A 2676/1990 EK rendelet mellékletének 30. módszere 144

2.3.1.

A minta előkészítése Távolítsuk el az alkoholt a borból úgy, hogy rotációs bepárlóval (50-60 °C) a minta térfogatát eredeti térfogatának felére csökkentjük, majd töltsük fel az eredeti térfogatra desztillált vízzel. Szükség esetén a meghatározás előtt hígítsuk a mintát.

2.3.2.

Kalibrációs oldatok készítése Öntsünk 1, 2, 3, 4, illetve 5 ml 100 mg/l vas(II)-standardoldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel mindegyiket 100 ml-re desztillált vízzel. Az így előkészített oldatok 1, 2, 3, 4 illetve 5 mg/l vasat tartalmaznak. Ezeket az oldatokat polietilénpalackokban kell tárolni.

2.3.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 248,3 nm-re. Nullázzuk az abszorbanciaskálát desztillált vízzel. Mérjük először a hígított mintát, majd egymás után az öt standard oldatot. Olvassuk le az abszorbanciákat. Ismételjünk meg minden mérést.

2.4.


2.4.1.

Számítás Vegyük fel a kalibrációs görbét, amely az abszorbanciaváltozást mutatja a standardoldatokban lévő vaskoncentráció függvényében. Jelöljük meg a hígított bormintából kapott abszorbancia-átlagértéket ezen a grafikonon, és határozzuk meg a C vastartalmat. A bor vastartalmát, mg/l-ben, FC adja meg, egész számra kerekítve, ahol F a hígítási tényező.

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER

3.1.

Reagensek

3.1.1.

30% (m/V)-os vasmentes hidrogén-peroxid-oldat (H2O2).

3.1.2.

1 M vasmentes sósav.

3.1.3.

Ammónium-hidroxid (ρ20 = 0,92 g/ml).

145

3.1.4.

Horzsakő, amelyet forró sósav 1:2 arányú oldatában kezeltünk, és desztillált vízzel átmostunk.

3.1.5.

2,5%-os hidrokinonoldat (C6H6O2), amelyet 100 ml-enként 1 ml koncentrált kénsavval savanyítunk meg (ρ20 = 1,84 mg/l). Ezt az oldatot sötét palackban, hűtőszekrényben kell tárolni, és a barnulás legkisebb jelére el kell dobni.

3.1.6.

20%-os nátrium-szulfit oldat (Na2SO3), semleges vízmentes nátrium-szulfitból előállítva.

3.1.7.

0,5%-os ortofenantrolin (C12H8N2) oldat, 96% (V/V)-os alkoholban.

3.1.8.

20% (m/V)-os ammónium-acetát-oldat (CH3COONH4).

3.1.9.

1 g/l vas(III)tartalmú oldat. Kereskedelmi vas(III)-oldat is használható. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy 8,6341 g vas(III)-ammónium-szulfátot (FeNH4(SO4)2 ⋅ 12H2O) 100 ml 1 M sósavban feloldunk és feltöltjük 1 literre 1 M sósavval.

3.1.10.

100 mg/l vas(III)-standardoldat.

3.2.

Eszközök

3.2.1.

100 ml-es Kjeldahl-lombik.

3.2.2.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a mérést 508 nm-es hullámhosszon.

3.3.

Eljárás

3.3.1

Feltárás

3.3.1.1.

50 g/l-nél kevesebb cukrot tartalmazó borok: Töltsünk 25 ml bort, 10 ml hidrogén-peroxid-oldatot 100 ml-es Kjeldahl-lombikba, és adjunk hozzá néhány szemcse horzsakövet, majd töményítsük az oldatot 2-3 mlre. Hagyjuk kihűlni, és adjunk a maradékhoz – ügyelve arra, hogy a lombik fala ne legyen nedves – elegendő ammónium-hidroxidot, hogy a folyadék lúgossá váljon, és a hidroxidok kiváljanak.

146

Hűtés után adjunk 1 M sósavat a lúgos folyadékhoz olyan mennyiségben, amely elég ahhoz, hogy feloldja a kivált hidroxidokat, és töltsük át az így kapott oldatot egy 100 ml-es mérőlombikba. Öblítsük ki a Kjeldahl-lombikot 1 M sósavval, és az öblítő folyadékot töltsük a mérőlombikba, majd töltsük fel a lombikot jelig 1 M sósavval. 3.3.1.2.

50 g/l-nél több cukrot tartalmazó borok:

3.3.1.2.1. Ha a cukortartalom 50 és 200 g/l között van, a 25 ml-es bormintát 20 ml hidrogénperoxid-oldattal kezeljük. Járjunk el ugyanúgy, mint a 3.3.1.1 szakaszban. 3.3.1.2.2. Ha a cukortartalom 200 g/l fölött van, a bor- vagy a mustmintákat 1:2, esetleg 1:4 arányban hígítani kell, a a hidrogén-peroxid-oldatos kezelés előtt (lásd az előző bekezdést). 3.3.2.

Vakpróba Készítsünk vakpróbát desztillált vízzel ugyanolyan mennyiségű hidrogén-peroxid – -oldatot használva, mint amennyit a feltáráshoz használtunk, és járjunk el a 3.3.1.1. szakaszban leírtaknak megfelelően.

3.3.3.

Meghatározás Töltsük a feltárt sósavas mintaoldat 20 ml-ét és a vakpróba sósavas oldatát egy-egy 50 ml-es mérőlombikba. Adjunk mindegyik lombikhoz 2 ml hidrokinonoldatot, 2 ml szulfitoldatot és 1 ml ortofenantrolinoldatot. Hagyjuk állni 15 percig, ami alatt a Fe(III) Fe(II)-vé redukálódik. Adjunk hozzá 10 ml ammónium-acetát-oldatot, töltsük fel 50 ml-re desztillált vízzel, és rázzuk össze a két mérőlombikot. Használjuk a vakpróbából származó oldatot az abszorbanciaskála nullázásához 508 nm-en, és mérjük meg a meghatározandó oldat abszorbanciáját ugyanezen a hullámhosszon.

3.3.4.

Kalibrálás Helyezzünk 0,5, 1, 1,5 és 2 ml 100 mg/l vas-standardoldatot egy sorozat 50 ml-es mérőlombikba, és adjunk mindegyikhez 20 ml desztillált vizet. Végezzük el a 3.3.3 szakaszban leírt eljárást, hogy megmérjük minden egyes így elkészített standardoldat abszorbanciáját, amelyek 50, 100, 150 illetve 200 µg vasat tartalmaznak.

147

3.4.


3.4.1.

Számítás Vegyük fel az abszorbancia változását standardoldatokkal a vaskoncentráció függvényében. Jelöljük be a vizsgálandó oldatból kapott abszorbanciát, és számoljuk ki a C vaskoncentrációt a feltárás során kapott 20 ml sósavas mintában, azaz az analizálandó borminta 5 ml-jében. A bor vaskoncentrációja mg/l-ben egy tizedes pontossággal 200 C lesz. Ha a bort (vagy mustot) hígítottuk, a vas koncentrációja, mg/l-ben, egy tizedes pontossággal, 200 x F x C lesz, ahol F a hígítási tényező.

148

31. 1.

A RÉZTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 31 A MÓDSZER ELVE A módszer atomabszorpciós spektrofotometrián alapul.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Platinacsésze.

2.2.

Atomabszorpciós spektrofotométer.

2.3.

Réz-vájtkatódlámpa.

2.4.

Gázellátás: levegő-acetilén vagy dinitrogén-oxid/acetilén.

3.

REAGENSEK

3.1.

Réz (fém).

3.2.

65%-os salétromsav (HNO3) , ρ20 = 1,38 g/ml.

3.3.

1:2 V/V arányban hígított salétromsav

3.4.

1 g/l-es rézoldat. Kereskedelmi réz-standardoldat is használható. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy pontosan bemérünk1,000 g fémrezet és veszteség nélkül átvisszük egy 1 000 ml-es mérőlombikba. Hozzáadunk 1:2 arányban (V/V) hígított salétromsavat éppen olyan mennyiségben, hogy a fémet feloldja, majd 10 ml tömény salétromsavat adunk hozzá, és feltöltjük jelig kétszer desztillált vízzel.

3.5.

100 mg/l réztartalmú oldat. Töltsünk 10 ml, 1 g/l-es rézoldatot egy 100 ml-es mérőlombikba, és töltsük fel jelig kétszer desztillált vízzel.

31


4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése és a réz meghatározása Szükség esetén készítsünk megfelelően hígított oldatot kétszer desztillált vízzel.

4.2.

Kalibrálás Pipettázzunk a 100 mg/l réztartalmú oldatból 0,5, 1 és 2 ml-t 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel a lombikokat jelig kétszer desztillált vízzel. Az így kapott oldatok 0,5, 1 és 2 mg/l rezet tartalmaznak.

4.2.

Meghatározás Az abszorbanciaértékek mérését 324,8 nm-en végezzük. Állítsuk be a nulla értéket kétszer desztillált vízzel. Mérjük meg közvetlenül a hígított minta és a 4.2. szakasz szerint elkészített standardoldatok abszorbanciaértékeit egymás után. Végezzük el a mérést kétszer.

5.


5.1.

Számítás Vegyük fel a kalibrációs görbét, az abszorbancia változását a standardoldatok réztartalmának függvényében. A minták mért abszorbanciáját felhasználva olvassuk le a C koncentrációt mg/l-ben a kalibrációs görbéről. Ha F a hígítási tényező, a bor réztartalmát, mg/l-ben , FC segítségével kapjuk meg, és két tizedes pontosságig adjuk meg.

Megjegyzések: (1) A kalibrációsgörbe létrehozásához olyan oldatokat válasszunk, és a mintákhoz olyan hígítást alkalmazzuk, amely megfelel az alkalmazandó készülék érzékenységének és a minta rézkoncentrációjának. (2) Ha

az

analizálandó

minta

várható

réz

tartalma

nagyon

kicsi,

a

következőképpen járjunk el. Töltsünk 100 ml mintát egy platinacsészébe és párologtassuk vízfürdőn 100 °C hőmérsékleten, amíg szirupossá válik. Adjunk hozzá cseppenként 2,5 ml koncentrált salétromsavat úgy, hogy az teljesen fedje az edény alját. Óvatosan hamvasszuk a maradékot egy elektromos főzőlapon vagy kis lángon. Ezután

150

helyezzük az edényt egy tokos kemencébe 500 ± 25 °C hőmérsékleten, és tartsuk ott legalább egy órán át. Lehűtés után nedvesítsük meg a hamut 1 ml koncentrált salétromsavval, miközben egy üvegbottal kapargatjuk; pároljuk be a keveréket az előbbiek szerint szirupsűrűségűre, majd ismét hamvasszuk. Helyezzük az edényt ismét 15 percre a tokos kemencébe; ismételjük meg a salétromsavas kezelést legalább háromszor. Oldjuk fel a hamut 1 ml koncentrált salétromsavval és 2 ml kétszer desztillált vízzel, és töltsük át az edényből az egészet egy 10 ml-es lombikba. Mossuk ki az edényt háromszor, minden alkalommal 2 ml kétszer desztillált vizet használva. Végül töltsük fel a lombikot 10 ml-re kétszer desztillált vízzel.

151

32. 1.

A KADMIUMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 32 ALAPELV A kadmiumtartalmat közvetlenül a borból határozzuk meg láng nélküli atomabszorpciós spektrofotometriás módszerrel.

2.

ESZKÖZÖK Minden üvegedényt felhasználás előtt el kell mosni 70-80 °C hőmérsékletű tömény salétromsavban, és el kell öblíteni kétszer desztillált vízzel.

2.1.

Atomabszorpciós

spektrofotométer

grafitkemencével,

háttérkorrekcióval

és

kompenzográffal felszerelve. 2.2.

Kadmium-vájtkatódlámpa.

2.3.

5 µl-es mikropipetták atomabszorpciós mérésekhez.

3.

REAGENSEK Boroszilikátüveg készülékben kétszer desztillált vizet, vagy ehhez hasonló tisztaságú vizet kell használni. Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak, mindenekelőtt kadmiummentesnek kell lennie.

3.1.

85%-os foszforsav (ρ20 = 1,71 g/ml).

3.2.

Foszforsavoldat: 8 ml foszforsav vízzel 100 ml-re töltve.

3.3.

Etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) dinátriumsójának 0,02 M oldata.

3.4.

9 pH-jú pufferoldat: oldjunk fel 5,4 g ammónium-kloridot néhány ml vízben egy 100 ml-es mérőlombikban, adjunk hozzá 35 ml 25% (V/V)-os ammóniumhidroxid-oldatot (ρ20 = 0,92 g/ml) és töltsük fel 100 ml-re vízzel.

3.5. 32

1% (m/m)-os Eriokróm-fekete T-indikátor szilárd nátrium-kloriddal elkeverve.


3.6.

Kadmium-szulfát (3CdSO4 ⋅ 8H2O). A kadmium-szulfát hatóanyagát az alábbi módszerrel kell meghatározni: Mérjünk be pontosan 102,6 mg kadmium–szulfátot, kevés vízzel vigyük át egy Erlenmeyer-lombikba, és rázzuk mindaddig, amíg fel nem oldódik; adjunk hozzá 5 ml 9 pH-jú pufferoldatot és kb. 20 mg eriokróm-fekete T-indikátort. Titráljuk az oldatot EDTA-oldattal, amíg az indikátor kék színűvé válik. A fogyott EDTA-oldat térfogatának 20 ml-nek kell lennie. Ha a térfogat ettől eltérő, korrigáljuk ennek megfelelően a referenciaoldat készítéséhez használt kadmium-szulfát mennyiségét.

3.7.

1 g/l kadmium-referenciaoldat Kereskedelmi minőségű standardoldatot is használhatunk. Ezt az oldatot 2,2820 g kadmium-szulfát vízben való feloldásával és egy literre való kiegészítésével is elkészíthetjük. Tároljuk az oldatot boroszilikátüveg palackban, amely csiszolatos üvegdugóval van ellátva.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Hígítsuk fel a bort 1:2 (V/V) arányban a foszforsavoldattal.

4.2.

Az oldatok kalibrációs sorozatának előkészítése Kadmium-referenciaoldatot használva készítsünk 2,5, 5, 10 és 15 µg/l kadmiumhígítási sorozatot.

4.3.

Meghatározás

4.3.1.

A kemence programozása (csak iránymutató jelleggel): Szárítás 100 °C hőmérsékleten 30 másodpercig Hamvasztás 900 °C hőmérsékleten 20 másodpercig Atomizálás 2250 °C hőmérsékleten 2-3 másodpercig Nitrogénáramlási sebesség (öblítő gáz): 6 liter/perc

Megjegyzés: Az eljárás végén emeljük a hőmérsékletet 2700 °C-ra a kemence kitisztításához.

153

4.3.2.

Atomabszorpciós mérések: Állítsuk be a hullámhosszt 228,8 nm-re. Állítsuk be a nullapontot az abszorbanciaskálán kétszer desztillált vízzel. Mikropipettával juttassunk a kemencébe a kalibrációs sorozat oldataiból és az analizálandó mintaoldatból háromszor 5 µl-es adagokat.

Rögzítsük

a

mért

abszorbanciákat.

Számítsuk

ki

a

hármas

méréssorozatok eredményeiből az abszorbancia-átlagértéket. 5.


5.1.

Számítás Készítsük el az abszorbancia változásának görbéjét a kalibrációs sorozat oldataiban lévő kadmiumkoncentráció függvényében. A változás lineáris. Jelöljük meg a minta-oldat abszorbanciaértékének átlagát a kalibrációs görbén, és határozzuk meg ebből a C kadmiumkoncentrációt. A borban lévő kadmiumkoncentráció, µg/l-ben, 2C.

154

33. 1.

AZ EZÜSTTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 33 A MÓDSZER ELVE A minta hamvasztás utáni atomabszorpciós spektrofotometriás mérésén alapul.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Platinacsésze.

2.2.

Termosztatikusan 100 °C hőmérsékletre beállított vízfürdő.

2.3.

Kemence, 500-525 °C hőmérsékletre beállítva.

2.4.

Atomabszorpciós spektrofotométer.

2.5.

Ezüst-vájtkatódlámpa.

2.6.

Gázellátás: levegő, acetilén.

3.

REAGENSEK

3.1.

Ezüst-nitrát (AgNO3).

3.2.

65%-os salétromsav (HNO3), ρ20= 1,38 g/ml.

3.3.

1:10 V/V hígított sósav.

3.4.

1 g/l ezüsttartalmú oldat. Kereskedelmi standard ezüstoldatot is használhatunk. Ezt az oldatot úgy is elkészíthetjük, hogy feloldunk 1,575 g ezüst-nitrátot hígított salétromsavban, és feltöltjük 1 000 ml-re hígított salétromsavval.

3.5.

10 mg/l ezüsttartalmú oldat. Az 1 g/l ezüsttartalmú oldat oldatból 10 ml-t 1 000 ml-re hígítunk hígított salétromsavval.

33

A 2676/1990 /EK rendelet mellékletének 33. módszere 155

4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Helyezzünk 20 ml mintát egy platinacsészébe, és pároljuk szárazra forró vízfürdő fölött. Hamvasszuk 500-525 °C hőmérsékleten kemencében. Nedvesítsük meg a fehér hamut 1 ml koncentrált salétromsavval. Pároljuk újra szárazra forró vízfürdő fölött, ismételjük meg az 1 ml salétromsav hozzáadását és a szárazra párlást még egyszer. Adjunk hozzá 5 ml hígított salétromsavat, és enyhén melegítsük addig, amíg feloldódik.

4.2.

Kalibrálás Pipettázzunk 2, 4, 6, 8, 10 és 20 ml 10 g/l ezüsttartalmú oldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel jelig hígított salétromsavval az így kapott oldatok 0,20, 0,40, 0,60, 0,80, 1,0 és 2,0 mg/l ezüstöt tartalmaznak.

4.3.

Állítsuk be a hullámhosszt 328,1 nm-re. Állítsuk be a nulla értéket kétszer desztillált vízzel. Mérjük meg közvetlenül a minta és a 4.2 szerint előkészített standardoldatok abszorbanciaértékeit egymást követően. Végezzük el a méréseket kétszer.

5.


5.1.

Számítás Vegyük fel az abszorbancia változását mutató görbét a standardoldatokban lévő ezüstkoncentráció függvényében. A minta mért abszorbanciájának felhasználásával olvassuk le a kalibrációs görbéről a C koncentrációt mg/l-ben. A borban található ezüstkoncentrációt 0,25 C összefüggéssel kapjuk meg, mg/l-ben. Az eredményt két tizedes pontosságig adjuk meg.

Megjegyzés: Olyan

mintatérfogatokat,

olyan

végső

folyadéktérfogatokat,

és

olyan

oldatkoncentrációkat válasszunk a kalibrációs görbe elkészítéséhez, amelyek megfelelnek az alkalmazott készülék érzékenységének.

156

34. A CINKTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 34 1.

A MÓDSZER ELVE Az alkohol eltávolítása után a borban lévő cinktartalmat közvetlenül határozzuk meg atomabszorpciós spektrofotometriás módszerrel.

2.

REAGENSEK Boroszilikátüveg készülékben kétszer desztillált vízet vagy ehhez hasonló tisztaságú vizet kell használni.

2.1.

1 g/l-es cink standardoldat: Kereskedelmi standard cinkoldatot is használhatunk. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy feloldunk 4,3975 g cink-szulfátot (ZnSO4 x 7H2O) vízben, és feltöltjük a térfogatot egy literre.

2.2.

100 mg/l cink standardoldat

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Rotációs bepárló, termosztatikus szabályozású vízfürdővel.

3.2.


3.3.

Cink-vájtkatódlámpa.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Távolítsuk el az alkoholt 100 ml borból úgy, hogy a mintát eredeti térfogatának felére csökkentjük a rotációs bepárló segítségével (50-60 °C hőmérsékleten). Töltsük fel az eredeti 100 ml térfogatra kétszer desztillált vízzel.

34


4.2.

Kalibrálás Töltsünk 0,5, 1, 1,5 és 2 ml 100 mg/l cink standardoldatot 100 ml-es mérőlombikokba, és töltsük fel jelig kétszer desztillált vízzel. Az így elkészített oldatok 0,5, 1, 1,5 és 2 mg/l cinket tartalmaznak.

4.3.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 213,9 nm-re. Állítsuk be az abszorbanciaskála nulla értékét kétszer desztillált vízzel. Mérjük a bort közvetlenül, és ezt követően a négy standardoldatot (4.2. szakasz). Olvassuk le az abszorbanciaértékeket. Ismételjünk meg minden mérést.

5.


5.1.

Számítás Vegyük fel a kalibrációs görbét, amely az abszorbancia változását a standardoldatok cinkkoncentrációjának függvényében mutatja. Jelöljük meg ezen a grafikonon a hígított bormintából kapott abszorbanciaértéket, és határozzuk meg a cink koncentrációt egy tizedes pontossággal.

158

35. 1.

AZ ÓLOMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 35 ALAPELV Az ólmot közvetlenül a borból határozzuk meg láng nélküli atomabszorpciós spektrofotometriás módszerrel.

2.

ESZKÖZÖK Az alkalmazott üvegedényeket felhasználás előtt 70-80 °C hőmérsékleten forró koncentrált salétromsavban kell elmosni, és kétszer desztillált vízzel el kell öblíteni.

2.1.

Grafitkemencével,

háttér-kompenzációval

és

kompenzográffal

felszerelt

atomabszorpciós spektrofotométer. 2.2.

Ólom-vájtkatódlámpa.

2.3.

5 µl-es mikropipetták atomabszorpciós mérésekhez .

3.

REAGENSEK Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak, mindenek előtt ólommentesnek kell lennie. Boroszilikátüveg készülékben kétszer desztillált vizet vagy ehhez hasonló tisztaságú vizet kell használni.

3.1.

85%-os foszforsav (ρ20 = 1,71 g/ml).

3.2.

Foszforsav oldat: 8 ml foszforsavat vízzel 100 ml-re töltünk.

3.3.

Salétromsav (ρ20 = 1,38 g/ml).

3.4.

1 g/l ólomoldat Kereskedelmi minőségű standard ólomoldatot is használhatunk. Ezt az oldatot úgy is elkészíthetjük, hogy 1,600 g ólom(II)-nitrátot (Pb(NO3)2) feloldunk 1% (V/V)-os salétromsavban, és feltöltjük egy literre. Tároljuk az oldatot boroszilikátüveg palackban csiszolatos üvegdugóval lezárva.

35


4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Hígítsuk fel a bort 1:2 vagy 1:3 arányban foszforsav oldattal a feltételezett ólomkoncentrációtól függően.

4.2.

A kalibrációs oldatsorozat elkészítése Az 1 g/l-es ólomoldat felhasználásával készítsünk 2,5, 5, 10 és 15 µg/l ólom tartalmú hígítási sorozatot, kétszer desztillált vízzel hígítva.

4.3.

Meghatározás

4.3.1.

A kemence programozása (csak iránymutató jelleggel): Szárítás 100 °C hőmérsékleten 30 másodpercig Hamvasztás 900 °C hőmérsékleten 20 másodpercig Atomizálás 2 250°C hőmérsékleten 2-3 másodpercig Nitrogénáramlási sebesség (öblítő gáz): 6 liter/perc.

Megjegyzés: Az eljárás végén növeljük a hőmérsékletet 2 700 °C-ra a kemence tisztításához. 4.3.2.

Mérések Állítsuk be a hullámhosszt 217 nm-re. Állítsuk be az abszorbanciaskála nullapontját kétszer desztillált vízzel. Mikropipettával juttassunk be a programozott kemencébe a kalibrációs sorozat minden oldatából és az analizálandó mintaoldatból háromszor 5 µl-es adagokat. Számítsunk átlagos abszorbanciaértéket a három mérés eredményeiből.

5.


5.1.

Számítás Készítsük el az abszorbanciaváltozás görbéjét a kalibrációs sorozatban lévő ólomkoncentrációk függvényében. Jelöljük meg a mintaoldat átlagos abszorbanciaértékét a kalibrációs görbén, és határozzuk meg ebből a C ólomkoncentrációt. Az ólomkoncentráció a borban µg/l-ben : C F. Ahol F = a hígítási tényező.

160

36. A FLUORIDTARTALOM MEGHATÁROZÁSA 36 1.

A MÓDSZER ELVE A bor fluoridtartalmát pufferoldat hozzáadása után ionszelektív membrán elektróddal határozzuk meg. A mért potenciál arányos a vizsgált oldatban lévő fluorid-ion aktivitásának logaritmusával, az alábbi összefüggésnek megfelelően: E = Eo ±S log aF

(1)

ahol E

az ionszelektív elektród potenciálja a referenciaelektróddal szemben a vizsgálandó oldatban;

Eo

az elektród normálpotenciálja;

S

az

ionszelektív

elektród

meredeksége

(Nernst-tényező)

25

°C

hőmérsékleten, a meredekség elméleti értéke 59,2 mV; aF

A vizsgálandó oldat fluoridion-aktivitása.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Fluoridion-szelektív membránelektród.

2.2.

Referenciaelektród (kalomel, vagy Ag/AgCl).

2.3.

pH- mérő vagy ionméter, pontossága: 0,1 mV.

2.4.

Mágneses keverő szigetelőlemezzel, amely védi az oldatot a motor hőjétől. Műanyag bevonatú keverőpálca (polietilén vagy ezzel egyenértékű anyag).

2.5.

30 vagy 50 ml-es műanyag poharak és műanyag palackok (polietilén vagy ennek megfelelő anyag).

2.6.

Precíziós pipetták (mikropipetták vagy bármilyen egyéb megfelelő pipetta).

3.

REAGENSEK

3.1.

1000 mg/l fluorid-standardoldat.

36


Kereskedelmi standardoldatot is használhatunk. Ez az oldat úgy is elkészíthető, hogy 2,210 g nátrium-fluoridot (három-négy órán keresztül 105 °C-on szárított) desztillált vízben feloldunk, majd

egy literre töltjük fel. Az oldatot műanyag

palackban tároljuk. 3.2.

Megfelelő koncentrációjú további fluorid-standardoldatokat az 1000 mg/l-es standardoldat desztillált vízzel való hígításával készítjük. Az oldatokat műanyag edényben tároljuk. A mg/l-es fluoridkoncentrációjú oldatokat felhasználás előtt kell elkészíteni.

3.3.

5,5 pH-jú citrát-pufferoldat Szuszpendáljunk 10 g 1,2-diamino-ciklohexán-tetraecetsavat (CDTA) mintegy 50 ml desztillált vízben; adjunk hozzá 58 g nátrium-kloridot és 29,4 g trinátriumcitrátot 700 ml desztillált vízben tartalmazó oldatot. 32% (m/V)-os nátriumhidroxid- oldat (kb. 6 ml) hozzáadásával oldjuk fel a CDTA-t. Végül adjunk hozzá 57 ml ecetsavat (ρ20 = 1,05 g/ml), és állítsuk be a pH-t 5,5-re 32%-os nátrium-hidroxid-oldattal (kb. 45 ml). Hagyjuk lehűlni, és töltsük fel egy literre desztillált vízzel.

4.

ELJÁRÁS

Megjegyzés: Ügyeljünk arra, hogy minden oldat a mérés során 25 °C (± 1 °C) hőmérsékleten maradjon. (1 °C-nál nagyobb eltérés kb. 0,2 mV-os eltérést eredményez a meredekségváltozásban). 4.1.

Közvetlen módszer Helyezzünk meghatározott térfogatú bort és vele egyenlő térfogatú pufferoldatot egy műanyag pohárba. Keverjük az oldatot egyenletesen és mérsékelten. Amikor a potenciál már nem változik 0,2-0,3 mV/3 perc-nél gyorsabban, olvassuk le a potenciál értéket mV-ban.

4.2.

Meghatározás standard addíciós módszerrel Folyamatosan keverés mellett, precíziós pipettával adjunk ismert térfogatú fluorid-standardoldatot a vizsgálandó oldathoz. Amikor a elektrodpotenciál stabilizálódik, olvassuk le az elektrodpotenciál különbséget mV-ban. A hozzáadandó fluoridoldat koncentrációját az alábbiak szerint választjuk meg:

162

(a) a fluoridion-koncentráció kétszeresére, illetve háromszorosára emelkedjen az analizálandó oldatban; (b) az analizálandó oldat térfogatának gyakorlatilag állandónak kell maradnia (1%os vagy kisebb térfogat növekedés). (A utóbbi feltétel egyszerűsíti a számításokat, lásd az 5. pontot). Az analizálandó oldat hozzávetőleges koncentrációját egy féllogaritmikus papíron felvett kalibrációs görbén olvassuk le, melyet 0,1, 0,2, 0,5, 1,0 és 2,0 mg/l koncentrációjú standard fluorid- standardoldatokkal veszünk fel.

Megjegyzés: Hígítsuk meg a mintát, ha az analizálandó oldat körülbelüli koncentrációja a standard oldatok tartományán kívül esik.

Például: Ha az analizálandó oldat (20 ml térfogat) körülbelüli fluoridtartalma 0,25 mg/l F-; a koncentrációt 0,25 mg/l-rel kell növelni. Ehhez a megfelelő pipettával adjunk pl. 0,20 ml (= 1%) standard oldatot, amely 25 mg/l fluoridiont tartalmaz, vagy 100 mg/l fluoridion tartalmú 0,050 ml standardoldatot. 5.

SZÁMÍTÁSOK A

vizsgálandó

oldat

fluoridtartalmát,

mg/l-ben

kifejezve,

a

következő

összefüggéssel kapjuk: CF =

Va × C a l × V0 (antilogaritmus ∆E/S) − l

ahol

CF

a vizsgálandó oldat fluoridkoncentrációja (mg/l);

Ca

a vizsgálandó oldathoz adott standard oldat (Va) fluoridkoncentrációja (mg/l);

V0

a vizsgálandó oldat térfogata addíció előtt (ml);

Va

Az addicionált standardoldat térfogata (ml);

∆E

a 4.1 és 4.2 szakaszok szerint kapott E1 és E2 potenciálok különbsége (mV);

S

Az elektród meredeksége a vizsgálandó oldatban.

163

Ha Va nagyon közel van V0-hoz (lásd a 4.2. szakaszt), a következő egyszerűsített összefüggés alkalmazható:

CF = Ca ×

l (antilogaritmus ∆E/S) − l

Az így kapott eredményt meg kell szorozni a pufferoldat hozzáadásából eredő hígítási tényezővel.

164

37.

A SZÉN-DIOXID-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 37

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Referencia-módszer

1.1.1.

Szénsavmentes borok (szén-dioxid-túlnyomás ≤ 0,5 x 105 Pa)38 A kb. 0 °C-ra lehűtött bor alikvot részéhez annyi nátrium-hidroxidot adunk, hogy pH-ja 10-11 legyen. A titrálást savoldattal végezzük karboanhidráz jelenlétében. A szén-dioxid-tartalmat abból a savmennyiségből számítjuk, amely ahhoz szükséges, hogy a pH 8,6-ról (bikarbonát forma) 4,0-ra változzon (szénsav). Vaktitrálást végzünk ugyanolyan körülmények között szén-dioxid-mentesített borral.

1.1.2.

Pezsgők és habzóborok Az analizálandó bormintát közel fagypontig hűtjük. Miután egy bizonyos mennyiséget

kivettünk

abból

a

célból,

hogy

vakpróbaként

használjuk

szénsavmentesítés után, a palackban lévő maradékot lúgosítjuk, hogy az összes szén-dioxidot Na2CO3 formájában megkössük. A titrálást savoldattal végezzük karboanhidráz jelenlétében. A szén-dioxid-artalmat abból a savoldatmennyiségből számítjuk ki, amely ahhoz szükséges, hogy a pH értéket 8,6-ról (bikarbonát forma) 4,0-ra változtassa (szénsav). Vaktitrálást végzünk ugyanilyen körülmények között a szén-dioxid-mentesített borral. 1.2.

Szokásos módszer: Pezsgők és habzóborok Nyomásmérés: a szén-dioxid túlnyomását közvetlenül mérjük a palackban nyomásmérő segítségével.

2.

REFERENCIA-MÓDSZER

2.1.

Szénsavmentes borok (CO2 túlnyomás ≤ 0,5 x 105 Pa)

37 38

A 2676/1990 EK rendelet mellékletének 37. módszere 105 pascal (Pa) = 1 bar. 165

2.1.1.

Eszközök

2.1.1.1.

Mágneses keverő

2.1.1.2.

pH-mérő

2.1.2.

Reagensek

2.1.2.1.

0,1 M nátrium-hidroxid-oldat (NaOH) ,

2.1.2.2.

0,05 M kénsavoldat (H2SO4),

2.1.2.3.

1 g/l karboanhidrázoldat .

2.1.3.

Eljárás Hűtsük le a bormintát kb. 0 °C-ra, a mintavételhez használt 10 ml-es pipettával együtt. Töltsünk 25 ml nátrium-hidroxid-oldatot egy 100 ml-es főzőpohárba; adjunk hozzá két csepp karboanhidrázoldatot. Adjunk hozzá 10 ml bort a 0 °C-ra lehűtött pipettával. Helyezzük a főzőpoharat a mágneses keverőre, merítsük az elektródot a vizsgálandó oldatba, és mérsékelten keverjük. Amikor a folyadék elérte a szobahőmérsékletet, lassan titráljuk kénsavoldattal, amíg a pH eléri a 8,6-ot. Jegyezzük fel a büretta állását. Folytassuk a titrálást a kénsavval, amíg a pH eléri a 4,0-t. Legyen a 8,6 és 4,0 pH között felhasznált térfogat n ml. Távolítsuk el a szén-dioxidot kb. 50 ml bormintából úgy, hogy a mintát vákuum alatt három percig mozgatjuk, miközben a palackot vízfürdőben kb. 25 °C hőmérsékletre melegítjük. Végezzük el a fenti eljárást 10 ml szén-dioxid-mentesített borral. Legyen n' ml a felhasznált térfogat.

2.1.4.

Az eredmények megadása 0,1 M nátrium-hidroxid-oldat 1 ml-e megfelel 4,4 mg CO2-nek. A CO2 mennyiségét g/l-ben az alábbi összefüggés adja: 0,44 (n - n') Az eredményt két tizedes pontosságig adjuk meg.

166

Megjegyzés: Ha a bor kevés szén-dioxidot tartalmaz (CO2 < 1 g/l), a CO2 hidratálásának katalizálásához használt karboanhidráz hozzáadása nem szükséges. 2.2.

Pezsgők és habzóborok

2.2.1.

Eszközök

2.2.1.1.

Mágneses keverő

2.2.1.2.

pH- mérő.

2.2.2.

Reagensek

2.2.2.1.

50% (m/m)-os nátrium-hidroxid-oldat (NaOH)

2.2.2.2.


2.2.2.3.

1 g/l karboanhidrátoldat.

2.2.3.

Eljárás Jelöljük meg a bor szintjét a palackban, majd hűtsük le, amíg fagyni kezd. Hagyjuk a palackot kicsit felmelegedni, közben rázzuk, hogy a jégkristályok eltűnjenek. Vegyük ki gyorsan a dugót, és töltsünk 45-50 ml bort egy mérőhengerbe vaktitrálás céljából. A kivett pontos térfogatot, a v ml-t, akkor határozzuk meg, amikor újból elérte a szobahőmérsékletet. A vakminta kivétele után azonnal adjunk 20 ml nátrium-hidroxid oldatot a 750 mles palackhoz.Várjuk meg, amíg eléri a szobahőmérsékletet. Töltsünk 30 ml kiforralt desztillált vizet és két csepp karboanhidrázoldatot egy 100 ml-es főzőpohárba. Adjunk hozzá 10 ml lúgosított bort. Helyezzük a főzőpoharat mágneses keverőre, állítsuk be az elektródot és a mágneses keverőt, és óvatosan keverjük. Titráljuk lassan kénsavoldatta, amíg a pH eléri a 8,6-ot. Jegyezzük meg a büretta állását. Folytassuk lassan a titrálást a kénsavval, amíg a pH eléri a 4,0-t. Legyen n ml a 8,6 és 4,0 pH között felhasznált térfogat.

167

Távolítsuk el a CO2-t a vaktitrálás céljára félre tett v ml borból úgy, hogy vákuum alatt három percig mozgatjuk, miközben a palackot vízfürdőben kb. 25 °C hőmérsékletűre melegítettük. Vegyünk ki 10 ml szénsavmentesített bort, és adjuk 30 ml kiforralt desztillált vízhez, adjunk hozzá két-három csepp nátrium-hidroxid-oldatot, hogy a pH 10-11 legyen. Ezután járjunk el a fent leírtak szerint. Legyen n' ml a hozzáadott 0,5 M kénsavoldat térfogata. 2.2.4

Az eredmények megadása 1 ml 0,05 M kénsav megfelel 4,4 mg CO2-nek. Ürítsük ki a lúgosított bort tartalmazó palackot, és határozzuk meg 1 ml-es térfogaton belül a kiinduló bortérfogatot úgy, hogy feltöltjük jelig vízzel, mondjuk

V ml-ig. A CO2 mennyisége g/l-ben az alábbi képlettel határozható meg: 0,44 (n − n' ) ×

(V − v + 20) V−v

Az eredményt két tizedes pontosságig adjuk meg. 2.3.

Az eredmények megadása A túlnyomást 20 °C hőmérsékleten (Paph20) pascalban fejezzük ki az alábbi összefüggéssel:

Paph20 =

Q − Patm 1,951×10 (0,86 − 0,01A)(1 − 0,00144 S ) −5

ahol:

Q

a bor CO2-tartalma g/l-ben,

A

a bor alkoholtartalma % (V/V)-ben, 20 °C hőmérsékleten,

S Patm

a bor cukortartalma g/l-ben, az atmoszférikus nyomás pascalban kifejezve.

3.

SZOKÁSOS MÓDSZER: PEZSGŐK ÉS HABZÓBOROK

3.1.

Eszközök

3.1.1.

Afrométer A pezsgő és habzóboros palackokban lévő túlnyomás meghatározását lehetővé tévő eszközt afrométernek nevezzük. A palack zárásától (fémkupak, csavaros kupak,

168

parafa vagy műanyag dugó, lásd az 1. és 2. ábrát) függően külöböző afrométereket alkalmaznak. Az afrométert pascalban (Pa)39 kell hitelesíteni, célszerű 105 Pa-t vagy kilopascalt (kPa) egységként választani. Az afrométereket különböző osztályokba sorolják. A manométer pontossági osztálya a leolvasás pontosságát jelenti egész skálára vonatkoztatva, százalékban kifejezve (pl. egy I osztályú 1 000 kPa-s manométer azt jelenti, hogy legfeljebb 1 000 kPa nyomás olvasható le ± 10 kPa-os pontossággal). A pontos méréshez I. osztályú műszer javasolható. Az afrométereket rendszeresen ellenőrizni kell (legalább évente egyszer). 3.2.

Eljárás A méréseket olyan palackokon kell elvégezni, amelyek hőmérsékletét legalább 24 órán keresztül stabilizálták. A kupak, a parafa dugó vagy az egyéb dugó átszúrása után a palackot erőteljesen rázni kell a nyomás állandóvá válásáig, hogy a műszert leolvassuk.

1. ábra: Afrométer kupakokhoz

39

2. ábra: Afrométer parafa és egyéb dugókhoz

1 Pa = 1 N/m2 = 105 bar. 169

3.3.

Az eredmények megadása A túlnyomást 20 °C hőmérsékleten (Paph20) pascalban (Pa) vagy kilopascalban (kPa) fejezzük ki. A megadásnak a manométer pontosságával összhangban kell lenni. (pl. 6,3 x 105 Pa vagy 630 kPa, és nem pedig 6,33 x 105 Pa vagy 633 kPa egy 1 000 kPa-ig mérő I. osztályú manométer esetében). Ha a hőmérséklet, amelyen a mérést végeztük, 20 °C-tól eltér, korrekciót kell alkalmazni úgy, hogy a mért nyomást megszorozzuk az alábbi együtthatóval Paph 20 Paph t az I. táblázat szerint, 20 °C-ra való átszámításhoz.

4.

ÖSZEFŰGGÉS A NYOMÁS ÉS A SZÉN-DIOXID MENNYISÉGE KÖZÖTT 40 HABZÓBOR ÉS PEZSGŐ ESETÉBEN A 20 °C hőmérsékleten mért túlnyomásból (Paph20) a 20 °C hőmérsékleten mért abszolút nyomást (Pabs20) az alábbi összefüggés segítségével számítjuk ki: Pabs20 = Patm + Paph20 ahol Patm az atmoszférikus nyomás barban kifejezve. A borban található szén-dioxid mennyiségét az alábbi összefüggések adják: — liter CO2/l bor: 0,987 x 10-5 Pabs20 (0,86 - 0,01 A) (1 - 0,00144 S), — gramm CO2/l bor: 1,951 x 10-5 Pabs20 (0,86 - 0,01 A) (1 - 0,00144 S), ahol

A a bor alkoholtartalma% (V/V)-ben, 20 °C hőmérsékleten, S a bor cukortartalma g/l-ben.

40

Nem vesszük figyelembe azokat az egyéb jelen levő gázokat (O2, N2 stb.), amelyek csak olyan kis mennyiségben vannak jelen, hogy a túlnyomásra nincsenek hatással. 170

I. táblázat

A habzóbor és pezsgő 20 °C hőmérsékleten mért Paph20 túlnyomásának viszonya a Papht túlnyomáshoz a megadott hőmérsékleteken Hőmérséklet °C 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Paph20/ Papht 1,85 1,80 1,74 1,68 1,64 1,59 1,54 1,50 1,45 1,40 1,36 1,32 1,28

Hőmérséklet °C 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

Paph20/ Papht 1,24 1,20 1,16 1,13 1,09 1,06 1,03 1,00 0,97 0,95 0,93 0,91 0,88

171

38.

A CIANIDSZÁRMAZÉKOK MEGHATÁROZÁSA41

(Figyelem: tartsuk be a biztonsági intézkedéseket a klóramin-T, a piridin, a kálium-cianid, a sósav és a foszforsav használatakor. Az elhasznált termékeket helyezzük el a hatályos környezetvédelmi szabályoknak megfelelően. Legyünk óvatosak a megsavanyított bor desztillációjakor felszabaduló hidrogén-cianiddal.) 1.

ALAPELV A borban lévő összes szabad hidrogén-cianidot savas hidrolízissel felszabadítjuk, és desztillációval választjuk el. A klóramin-T-vel és piridinnel végbemenő reakció után a kialakult glutakon-dialdehidet fotometriásan határozzuk meg az 1,3-dimetil-barbitursavval létrejövő kék elszíneződés alapján.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Desztillációs készülék Használjunk olyan desztillációs készüléket, amelyet a bor alkoholtartalmának meghatározásánál (3. rész) írtunk le

2.2.

500 ml-es gömblombik, normál csiszolattal

2.3.

Termosztatikusan 20 °C-ra beállított vízfürdő

2.4.

Spektrofotométer, amellyel 590 nm-es hullámhosszon lehet abszorbanciát mérni

2.5.

Üvegküvetták vagy egyszer használatos küvetták 20 mm-es optikai úttal (rétegvastagság).

3.

REAGENSEK

3.1.

25% (m/V)-os foszforsav-oldat (H3PO4)

3.2.

3 % (m/V)-os klóramin-T-oldat (C7H7CINNaO2S 3H2O)

3.2.

1,3-dimetil-barbitursav-oldat:

41

A 761/1999/ EK rendelet 2. mellékletének 38. módszere 172

Oldjunk fel 3,658 g 1,3-dimetil-barbitursavat (C6H8N2O3) 15 ml piridinben és 3 ml sósavban (ρ20 = 1,19 g/ml), és adjunk hozzá 50 ml desztillált vizet. 3.4.

Kálium-cianid (KCN)

3.5.

10 % (m/V)-os kálium-jodid-oldat (KI)

3.6.

0,1 M ezüst-nitrát-oldat (AgNO3)

4.

ELJÁRÁS

4.1.

Desztillálás 500 ml-es lombikba tegyünk 25 ml bort, 50 ml desztillált vizet, 1 ml foszforsavat és néhány üveggyöngyöt. Illesszük össze a lombikot azonnal a desztillációs készülékkel. Kúpos csövet használva, a desztillátumot 50 ml-es, kalibrált lombikba vezetjük, amely már 10 ml vizet tartalmaz. Merítsük a kalibrált lombikot jeges vízbe. Gyűjtsünk össze 30-35 ml desztillátumot (vagy összesen kb. 45 ml folyadékot) a kalibrált lombikba. Öblítsük át a hűtő kúpos csövét néhány milliliter desztillált vízzel, állítsuk be a desztillátum hőmérsékletét 20 °C-ra, és töltsük fel jelig desztillált vízzel.

4.2.

Mérés Tegyünk 25 ml desztillátumot egy 50 ml-es Erlenmeyer-lombikba, amelyhez csiszolatos üvegdugó tartozik, adjunk hozzá 1 ml klóramin-T-oldatot, és zárjuk le a dugóval. Pontosan 60 másodperc múlva adjunk hozzá 3 ml 1,3-dimetil-barbitursav-oldatot, zárjuk le a dugóval, és hagyjuk 10 percig állni. Ezután mérjük meg az abszorbanciát a kontrollhoz viszonyítva (25 ml desztillált víz a 25 ml desztillátum helyett) 590 nm hullámhosszon, 20 mm-es optikai rétegvastagságú küvettákban.

5.

KALIBRÁLÁS

5.1.

A kálium-cianid argentometriás titrálása Oldjunk fel pontosan kimért 0,2 g KCN-ot 100 ml desztillált vízben egy 300 ml-es kalibrált lombikban. Adjunk hozzá 0,2 ml kálium-jodid-oldatot, és titráljuk 0,1 M ezüst-nitrát-oldattal, amíg stabil sárgás színt kapunk. 1 ml 0,1 M ezüst-nitrát-oldat megfelel 13,2 mg KCN-nak, mely alapján kiszámítható az oldat KCN-koncentrációja.

173

5.2.

A standard oldatok előkészítése Az 5.1 szakaszban leírt eljárás szerint megállapított koncentrációjú KCN-ból készítsünk standard oldatot, amely 30 mg/l hidrogén-cianidot tartalmaz (30 mg HCN

≅ 72,3 mg KCN). Hígítsuk az oldatot tízszeresére. Tegyünk 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 és 5,0 ml-t a fentiek szerint hígított oldatot 100 ml-es kalibrált lombikokba, és töltsük fel jelig desztillált vízzel. Az így készített oldatok 30 µg, 60 µg, 90 µg, 120 µg és 150 µg hidrogén-cianidot tartalmaznak literenként. 5.3.

A kalibrációs görbe felvétele Vegyünk 25 ml-t az így kapott oldatokból, és járjunk el a 4.1 és 4.2 szakaszban leírtaknak megfelelően. A

standardoldatok

hidrogén-cianid-koncentrációinak

függvényében

kapott

abszorbanciaértékek az origón áthaladó egyenest adnak. 6.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A hidrogén–cianid- koncentrációt µg/l-ben adjuk meg, tizedesek nélkül.

6.1.

Számítási mód Olvassuk le a hidrogén-cianid-koncentrációt a kalibrációs görbén. Ha a mintát hígítottuk, szorozzuk meg az eredményt a hígítási tényezővel.

Ismételhetőség (r) és reprodukálhatóság (R) Fehérbor = r = 3,1 µg/l vagy kb. 6% ⋅ xi R = 12 µg/l vagy kb. 25% ⋅ xi Vörösbor

=

r = 6,4 µg/l vagy kb. 8% ⋅ xi R = 23 µg/l vagy kb. 29% ⋅ xi

xi = a HCN átlagos koncentrációja a borban xi = 48,4 µg/l fehérborra xi = 80,5 µg/l vörösborra.

174

39. 1.

AZ ALLIL-IZOTIOCIONÁT-TARTALOM MEGHATÁROZÁSA 42 A MÓDSZER ELVE A

borban

jelen

levő

allil-izotiocionátot

desztillációval

dúsítjuk

és

gázkromatográfiával mutatjuk ki. 2.

REAGENSEK

2.1.

Abszolút etil-alkohol.

2.1.

Standardoldat: allil-izotiocionát abszolút alkoholos oldata, amely 15 mg allil-izotiocionátot tartalmaz literenként.

2.2.

Etil-alkoholból és szárazjégből álló fagyasztókeverék (hőmérséklet -60 °C).

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Desztillációs készülék (nitrogénáram alatt), lásd az ábrát.

3.2.

Fűtőköpeny, termosztatikus szabályozással.

3.3.

Áramlásmérő.

3.4.

Gázkromatográf a kénvegyületek számára ECD (=394 nm) vagy bármilyen egyéb megfelelő detektorral felszerelve.

3.5.

3 mm belső átmérőjű és 3 m hosszú rozsdamentes kromatográfiás oszlop 10% Chromosorb WHP, 80-100 mesh szemcsenagyságú Carbowax 20 M-en.

3.6.

42

Mikrofecskendő, 10 µl.


4.

ELJÁRÁS Töltsünk két liter bort a desztillációs palackba, tegyünk néhány ml etil-alkoholt (2.1) a két gyűjtőcsőbe úgy, hogy a gázdiszperziós rudak porózus részei teljesen belemerüljenek. Hűtsük le a két csövet kívülről a fagyasztókeverékkel. Csatlakoztassuk a lombikot a gyűjtőcsövekhez, és kezdjük el átöblíteni a készüléket nitrogénnel, óránként három literes sebességgel. Melegítsük fel a bort 80 °C hőmérsékletűre a fűtőköpeny segítségével, desztilláljuk, és gyűjtsünk össze 45-50 ml desztillátumot. A következő gázkromatográfiás körülmények alkalmazása célszerű: —

befecskendezési hőmérséklet: 200 °C,

—

oszlophőmérséklet: 130 °C,

—

a hélium vivőgáz áramlási sebessége: 20 ml /min.

Mikrofecskendővel juttassunk be akkora térfogatú standardoldatot, hogy az allil-izotiocionátnak

megfelelő

csúcs

könnyen

azonosítható

legyen

a

gázkromatogramon. Hasonlóképpen

juttassunk

be

ugyanilyen

mennyiségű

desztillátumot

a

kromatográfba. Ellenőrizzük, hogy az így kapott csúcs retenciós ideje megfelel-e az allil-izotiocionát csúcs retenciós idejének. A fent leírt körülmények között a borban jelen levő természetes vegyületek nem hoznak létre interferáló csúcsokat a mintaoldat kromatogramján.

176

N2 bemenet

Áramlásmérő

Fűtőköpeny Gázdiszperziós cső

Desztillációs

készülék

nitrogénáramlással

177

A SZÍNJELLEMZŐK MEGHATÁROZÁSA43

40. 1.

BOR ÉS MUST

1.1.

Meghatározások A bor és must színjellemzőit annak fényessége és színessége adja. A fényességet a transzmittancia reprezentálja, ez fordított arányban változik a bor színintenzitásával. A színességet az uralkodó hullámhossz reprezentálja (ami a színt jellemzi), valamint a szín tisztasága. A hagyománynak megfelelően és az egyszerűség kedvéért a vörös- és rozéborok színjellemzőit úgy adjuk meg, mint a színintenzitást és a színtónust, összhangban a szokásos módszerrel.

1.2.

A MÓDSZEREK ELVE

1.2.1.

Referencia-módszer Spektrofotometriás módszer, amely lehetővé teszi a tristimulus értékek, valamint a szín jellemzéséhez szükséges három színkoordináta meghatározását, ahogy azt a Nemzetközi Megvilágítási Bizottság (CIE) meghatározta.

1.2.2.

Szokásos módszer (vörös- és roz borok esetén) Ez

egy

olyan

spektrofotometriás

módszer,

amellyel

a

színjellemzőket

hagyományosan az alábbi módon fejezzük ki: A minta színintenzitását az 1 cm-es küvettában 420, 520 és 620 nm hullámhosszon mért abszorbanciák összege adja. A színtónust a 420 nm-en és 520 nm-en mért abszorbanciák arányával fejezzük ki. 1.3.

Referencia-módszer

1.3.1.

Eszközök

1.3.1.1.

Spektrofotométer, amellyel 300 és 700 nm között lehet mérni.

43

A 2676/1990 EK rendelet mellékletének 40. módszere 178

1.3.1.2.

Üvegküvetta, amelyek optikai úthossza (b) 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2 és 4 cm.

1.3.2.

Eljárás

1.3.2.1.

A minta előkészítése A zavaros mustot centrifugálással vagy menbránon át végzett szűréssel kell tisztítani. Az újborokban és pezsgőkben lévő szén-dioxid nagy részét vákuum alatti rázással el kell távolítani.

1.3.2.2.

Mérések A b optikai úthosszt az üvegküvettában úgy kell megválasztani, hogy a mért abszorbancia 0,3 és 0,7 között legyen. Az optikai úthossz megfelelő kiválasztásához a következő iránymutatás szolgál: használjunk 2 (vagy 4) cm-es küvettát fehérborokhoz, 1 cm-est rozéborokhoz és 0,1 cm-est (vagy 0,2 cm-est) vörösborokhoz. A spektrofotometriás méréseket úgy végezzük, hogy a referenciafolyadéknak megfelelő b optikai úthosszúságú küvettába desztillált vizet töltünk, hogy meghatározzuk az abszorbanciaskála nullapontját 445, 495, 550 és 625 nm hullámhosszon. Ezután megmérjük a bor négy megfelelő abszorbanciáját három tizedes pontossággal a b optikai úthosszra. Legyenek ezek az értékek A445, A495, A550 és

A625. 1.3.3.

Számítások Az 1. táblázat segítségével ezeket az abszorbanciaértékeket használva a b cm optikai úthosszhoz megkapjuk a megfelelő transzmittanciaértékeket (T%). Legyenek ezek T445, T495, T550 és T625. Számítsuk ki az X, Y és Z tristimulus értékeket tizedes törtekben kifejezve

—

az alábbi kifejezésekből:

X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445 Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T445 Z = 0,24 T495 + 0,94 T445 − Számítsuk ki az x és y színkoordinátákat az alábbi összefüggésből: x=

X X+Y+Z

y=

Y X+Y+Z 179

1.3.4.


1.3.4.1.

A relatív fényességet az y érték adja százalékosan. (Például a teljes sötétségre y = 0%; a színtelen folyadékokra y = 100%.)

1.3.4.2.

A színességet a domináns hullámhossz és a tisztaság fejezi ki. E két mennyiség meghatározásához a színtáblát használjuk, amelyet a spektrumszínek pályája vesz körül, ahogyan ezt az 1. ábra mutatja. Az e diagramban felrajzolt O pont az alkalmazott fehér fényforrást jeleníti meg, amelynek koordinátái egy C standard fényforrás koordinátáival xo = 0,3101 és yo = 0,3163 egyezzék meg, ami átlagos világosságú napfényt jelent. —

Domináns hullámhossz Jelöljük meg a színtáblán a C pontot x és y koordinátáival. Ha C az AOB háromszögön kívül esik, húzzunk egy egyenes vonalat az O és C között, és hosszabbítsuk meg úgy, hogy az keresztezze a spektrumszínek pályáját S ponton, ami megfelel a domináns hullámhossznak. Ha C az AOB háromszögön belül van, húzzunk egy vonalat C-től O-ig, és hosszabbítsuk meg úgy, hogy metssze a spektrumszínek pályáját egy olyan ponton, amely megfelel a bor komplementer színe hullámhosszának. Ezt a hullámhosszt C betűvel jelöljük.

—

Tisztaság Ha a C pont az AOB háromszögön kívül esik, a tisztaságot az alábbi arány adja meg százalékosan:

100 ×

C − O távolság O − S távolság

Ha a C pont az AOB háromszögön belül esik, a tisztaságot az alábbi arány adja meg százalékosan: 100 ×

C − O távolság O − P távolság

44

ahol P az a pont, ahol az OC egyenes a bíborszínek vonalát metszi (AB vonal).

44

Ezt a távolságot O-C irányban kell megadni. 180

A tisztaságot közvetlenül a színtáblából is megkaphatjuk az x és y ismeretében (2, 3, 4, 5 és 6 ábra). 1.3.4.3.

Eredmények Egy bor színét teljes mértékben meghatározza annak fényessége, színessége (a domináns hullámhosszban kifejezve) és tisztasága. Ezeket annak az optikai útnak az értékével együtt kell megadni az analitikai jelentésben, amelyen a mérést végeztük.

1.4.

SZOKÁSOS MÓDSZER

1.4.1.

Eszközök

1.4.1.1.

Spektrofotométer, amellyel 300 és 700 nm között lehet mérni.

1.4.1.2.

Üvegküvettapárok, amelyek b optika útja 0,1, 0,2, 0,5 és 1 cm.

1.4.2.

A minta előkészítése A zavaros bort centrifugálással kell megtisztítani. Az újborok és pezsgők szén-dioxidjának nagy részét vákuum alatti rázással kell eltávolítani.

1.4.3.

Eljárás Az üvegküvetta b optikai úthosszát úgy kell kiválasztani, hogy a mért A abszorbancia 0,3 és 0,7 között legyen. A spektrofotometriás méréseket úgy kell elvégezni, hogy a referenciafolyadék optikai úthosszával azonos úthosszú küvettában desztillált vízzel meghatározzuk az abszorbanciaskála nullpontját 420, 520 és 620 nm-en.

1.4.4.


1.4.4.1

Számítások Számítsuk ki a három hullámhossz abszorbanciáit 1 cm-es optikai úthosszra a mért abszorbanciák b-vel történő elosztásával, cm-ben. Legyenek ezek A420, A520 és A620. Az I színintenzitást a hagyományoknak megfelelően az alábbi kifejezés adja:

I = A420 + A520 + A620

181

Három tizedes pontosságig adjuk meg. Az N színt hagyományosan az alábbi kifejezés adja: N=

A 420 A 520

Három tizedes pontosságig adjuk meg.

182

1. TÁBLÁZAT

Az abszorbancia átszámítása transzmittanciára (T%) Használati mód Keressük meg az abszorbancia első tizedes számát az első függőleges oszlopban, és nevezzük ezt a sort R-nek. Keressük meg az abszorbancia második tizedes számát a felső vízszintes sorban, és legyen ez az oszlop C. Olvassuk le az R sor és C oszlop metszésében lévő számot. A transzmittancia (T%) kiszámításához osszuk el ezt a számot 10-zel, ha az abszorbancia 1-nél kisebb, 100-zal ha 1 és 2 között van, és 1 000-rel, ha 2 és 3 között van.

Megjegyzés: A küvetták jobb felső sarkában lévő szám lehetővé teszi az abszorbancia harmadik tizedes számának figyelembevételét interpoláció segítségével. 0

1 23

0

1000

1

794

2

631

3

501

4

398

5

316

6

251

7

199

8

158

22

977

18

11

11

9

389 7

9

380 7

309 6

4

5

3

4

155 3

3

123

4

4

4

4

3

141 3

115

2

112

4

3

4

162 3

132 2

107

5

204

166

135 3

110

5

4

3

6

257

209

170

138

6

5

4

8

324

263

214

174

7

6

5

9

407

331

269

219

178

144 2

117

5

10

8

6

12

513

417

339

275

224

182

148 3

120

5

4

3

7

12

10

8

15

646

525

427

347

282

229

186

151

6

5

4

8

15

12

9

19

813

661

537

436

355

288

234

190

8

7

6

9

19

15

13

9

832

676

549

447

363

295

240

195

8

7

5

10

19

16

13

8

851

692

562

457

371

302

245

11

20

16

13

7

871

708

575

468

20

16

14

6

891

724

589

479

21

17

14

5

912

741

603

490

21

17

14

4

933

759

617

9

126

22

18

11

3

955

776 14

9

2

3

129 3

105

2

102

183

Példa: Abszorbancia

0,47

1,47

2,47

3,47

T%

33,9

3,4

0,3

0

A T% átlátszóságot 0,1%-os pontossággal kell megadni.

184

1. ábra

x értékei

A spektrum összes színét tartalmazó színtábla.

x értékei

185

2. ábra

x értékei

Hígítatlan vörösborok (élénkvörös) és vörösesbarna (téglavörös) borok színtáblája

x értékei

186

3. ábra

x értékei

Hígítatlan vörösborok (élénkvörös) és vörösesbarna (téglavörös) borok színtáblája

x értékei

187

4. ábra

x értékei

Hígítatlan vörösborok (élénkvörös) és bíborszínű borok színtáblája

x értékei

188

5. ábra

x értékei

Hígítatlan vörösborok (élénkvörös) és bíborszínű borok színtáblája

x értékei

189

6. ábra

x értékei

Vörösesbarnaborok (téglavörös) és bíborszínű borok színtáblája

x értékei

190

2.

FINOMÍTOTT MUSTSŰRÍTMÉNYEK

2.1.

A MÓDSZER ELVE A finomított mustsűrítmények abszorbanciáját 425 nm-en mérjük 1 cm optikai úthosszú üvegküvettában, miután hígítással a cukorkoncentrációt 25% (m/m)-ra (25° Brix) állítottuk be.

2.2.

Eszközök

2.2.1.

Spektrofotométer, amely lehetővé teszi a méréseket 300 és 700 nm között.

2.2.2.

1 cm optikai úthosszú üvegküvetták.

2.2.3.

0,45 µm pórusátmérőjű membránszűrő.

2.3.

Eljárás

2.3.1.

A minta előkészítése Használjunk 25% (m/m) (25° Brix) cukortartalmú oldatot, amelyet a pH meghatározására vonatkozó (24. rész) 4.1.2 szakaszában leírtak szerint készítettünk elő. Szűrjük át 0,45 µm-es pórusátmérőjű membránszűrőn.

2.3.2.

Az abszorbancia meghatározása Nullázzuk az abszorbanciaskálát 425 nm-es hullámhosszon, desztillált vizet tartalmazó 1 cm-es optikai úthosszú küvetta alkalmazásával. Mérjük meg a 2.3.1 szakasz szerint előkészített és 1 cm-es optikai úthosszú cellába helyezett 25%-os cukortartalmú (25° Brix) oldat A abszorbanciáját ugyanezen a hullámhosszon.

2.4.

Az eredmények megadása A 25%-os cukortartalmú (25° Brix) oldatban lévő finomított mustsűrítmény 425 nm-en mért abszorbanciáját két tizedes pontossággal adjuk meg.

191

41. 1.

A FOLIN—CIOCALTEU-INDEX MEGHATÁROZÁSA45 MEGHATÁROZÁS A Folin—Ciocalteu-index az alább leírt módszer alkalmazásából kapott eredmény.

2.

A MÓDSZER ELVE A borban található összes fenolvegyületet a Folin—Ciocalteu-reagens oxidálja. Ez a reagens foszfor-wolframsav (H3PW12O40) és foszfor-molibdénsav (H3PMo12O40) keverékéből áll, amelyek a fenolok oxidálását követően

kék színű wolfram-

(W8O23) és molibdén-oxiddá (Mo8O23) redukálódnak. A létrejött kék szín abszorpciós maximuma 750 nm-en van, mely arányos az eredetileg jelen levő fenolvegyületek összes mennyiségével. 3.

REAGENSEK Ezeknek analitikai tisztaságúaknak kell lenniük. A felhasznált víznek desztilláltnak vagy azzal egyenlő tisztaságúnak kell lennie.

3.1.

Folin—Ciocalteu-reagens Ez a reagens kereskedelmi forgalomban felhasználásra készen kapható. El is készíthető a következőképpen: oldjunk fel 100 mg nátrium-wolframátot (Na2WO4 ⋅ 2H2O) és 25 g nátrium-molibdenátot (Na2MoO4 ⋅ 2H2O) 700 ml desztillált vízben. Adjunk hozzá 50 ml 85%-os foszforsavat (ρ20 = 1,71 g/ml) és 100 ml koncentrált sósavat (ρ20 = 1,19 g/ml). Forraljuk fel, és forraljuk 10 órán keresztül reflux körülmények között. Ezután adjunk hozzá 150 g lítium-szulfátot (Li2SO4 ⋅ H2O) és néhány csepp brómot, és forraljuk még egyszer 15 percen keresztül. Hagyjuk lehűlni, és töltsük fel egy literre desztillált vízzel.

3.2.

20% (m/V) nátrium-karbonát (Na2CO3) oldat.

4.

ESZKÖZÖK Szükséges laboratóriumi eszközök:

4.1. 45

100 ml-es mérőlombikok.


4.2.

Spektrofotométer, 750 nm-en való méréshez.

5.

ELJÁRÁS

5.1.

Vörösbor Tegyük a következőket egy 100 ml-es mérőlombikba (4.1), szigorúan az alábbi sorrendben: 1 ml bor, amelyet előzőleg 1:5 arányban hígítottunk, 50 ml desztillált víz, 5 ml Folin—Ciocalteu-reagens (3.1), 20 ml nátrium-karbonát-oldat (3.2). Töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Keveréssel homogenizáljuk. Várjunk 30 percig, hogy a reakció stabilizálódjon. Határozzuk meg az abszorbanciát 750 nm-en 1 cm-es úthosszon. A null érték a desztillált vízzel készített vakpróba. Ha az abszorbancia nem 0,3 körüli, megfelelő hígítást kell készíteni.

5.2.

Fehérbor Végezzük el ugyanezt az eljárás 1 ml hígítatlan borral.

5.3. 5.3.1.

Finomított mustsűrítmény A minta előkészítése Használjunk 25% (m/m) (25° Brix) cukortartalmú oldatot, amelyet a pH maghatározására vonatkozó (24. rész) 4.1.2 szakaszában leírtak szerint készítettük elő.

5.3.2.

Mérés Járjunk el ugyanúgy, mint ahogyan a vörösbor esetében, az 5.3.1 szakaszban előkészített 5 ml minta felhasználásával, és mérjük meg az abszorbanciát 5 ml 25% (m/m)-os invertcukor-oldat segítségével elkészített kontrollhoz viszonyítva.

6.


6.1.

Számítás Az eredményt egy index formájában fejezzük ki, amelyet úgy kapunk, hogy az abszorbanciát 100-zal szorozzuk 1:5 arányban hígított vörösborok esetében (vagy a

193

megfelelő tényezővel egyéb hígítások esetében), és 20-szal fehérborok esetén. Finomított mustsűrítmények esetén az abszorbanciát 16-tal szorozzuk. 6.2.

Ismételhetőség Az ugyanazon analitikus által párhuzamosan vagy nagyon gyorsan egymásután elvégzett két meghatározás eredményei közötti különbség nem lehet nagyobb, mint 1. Az eredmények jó megismételhetőségét rendkívül gondosan megtisztított eszközök segítségével érhetjük el (mérőlombikok és spektrofotométerküvetták).

194

42.

KÜLÖNLEGES ANALITIKAI MÓDSZEREK FINOMÍTOTT MUSTSŰRÍTMÉNY ESETÉN46

(a)

AZ ÖSSZES KATIONTARTALOM MEGHATÁROZÁSA

1.

A MÓDSZER ELVE A vizsgálati mintát erősen savas kationcserélővel kezeljük. A kationok H+-ra cserélődnek. Az összes kationt az eluátum és a vizsgálati minta összes savtartalma közötti különbségeként fejezzük ki.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

10-11 mm-es belső átmérőjű és kb. 300 mm hosszúságú üvegoszlop leeresztő csappal ellátva.

2.2.

pH-mérő, legalább 0,1 pH- egységekben beosztott skálával.

2.3.

Elektródok: —

üvegelektród, desztillált vízben tárolva,

—

kalomel/telített kálium-klorid referenciaelektród, telített kálium-kloridban tárolva,

—

vagy kombinált elektród, desztillált vízben tárolva.

3.

REAGENSEK

3.1.

Erősen savas kationcserélő gyanta H+ formában, egy éjszakán keresztül vízben áztatva, előre duzzasztva.

3.2.

0,1 M nátrium-hidroxid-oldat,

3.3.

pH-papír.

46


4.

ELJÁRÁS

4.1.

A minta előkészítése Használjuk a hígított mustsűrítménynek az összes savtartalom meghatározására vonatkozó rész (24. rész) 5.1.2 szakaszában leírtak szerinti hígításával kapott 40% (m/V)-os oldatot.

4.2.

Az ioncserélő oszlop előkészítése Tegyünk az oszlopba kb. 10 ml előduzzasztott H+ formájú ioncserélőgyantát. Öblítsük át az oszlopot desztillált vízzel semlegesre indikátor papírral ellenőrízve.

4.3.

Ioncsere Engedjünk át a 4.1. szakasz szerint előkészített finomított mustsűrítmény oldatából 100 ml-t az oszlopon, másodpercenként egy csepp sebességgel. Gyűjtsük össze az eluátumot egy főzőpohárban. Öblítsük át az oszlopot 50 ml desztillált vízzel. Titráljuk az összes eluátum savasságát (az öblítővízzel együtt) 0,1 M nátrium-hidroxid-oldattal, amíg elérjük a 7 pH-t 20 °C hőmérsékleten. A lúgos oldatot lassan kell hozzáadni, és az oldatot folyamatosan rázni kell. Legyen n ml a felhasznált 0,1 M nátrium-hidroxid-oldat térfogata.

5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA Az összes kationt milliekvivalens/kg összes cukorban fejezzük ki egy tizedes pontossággal.

5.1.

Számítások —

Az eluátum savassága milliekvivalens/kg finomított mustsűrítményben kifejezve:

E = 2,5n —

A finomított mustsűrítmény összes savtartalma milliekvivalens/kg (lásd az összes savtartalom meghatározására vonatkozó rész 6.1.2 szakaszát): a

—

Összes kation milliekvivalens/kg összes cukorban: 2,5n − a × 100 P

ahol P = az összes cukorkoncentráció % (m/m)-ban kifejezve.

196

(b)

VEZETŐKÉPESSÉG

1.

A MÓDSZER ELVE Két párhuzamos platinaelektród végei által meghatározott folyadékoszlop vezetőképességét úgy mérjük, hogy egy Wheatstone-híd egyik ágába kötjük. A vezetőképesség a hőmérséklettel változik, ezért 20 °C hőmérsékletre vonatoztatva adjuk meg.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Vezetőképesség-mérő

készülék

(konduktométer),

amely

lehetővé

teszi

a

-1

vezetőképesség mérését 1-1 000 mikrosiemens/cm (µS cm ) közötti tartományban. 2.2.

Vízfürdő, amely az analizálandó minta hőmérsékletét 20 °C körül tartja (20 ± 2°C).

3.

REAGENSEK

3.1.

Ioncserélt víz, amelynek a fajlagos vezetőképessége 2 µS cm-1 alatt van 20 °C hőmérsékleten.

3.2.

Kálium-klorid referenciaoldat. Oldjunk fel előzőleg 105 °C hőmérsékleten állandó tömegűre szárított kálium-kloridból (KCl) 0,581 g-ot ioncserélt vízben. Töltsük fel egy literre ioncserélt vízzel. Ennek az oldatnak a vezetőképessége 1 000 µS cm-1 20 °C hőmérsékleten. Nem tartható el három hónapnál hosszabb ideig.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

Az analizálandó minta előkészítése Használjunk 25% (m/m) (25° Brix) összes cukortartalmú oldatot, amint azt a pH meghatározására vonatkozó rész ( 24. rész)4.1.2 szakaszában leírtuk.

4.2.

A vezetőképesség meghatározása A vizsgálandó mintát vízfürdőben 20 °C-ra temperáljuk, majd a hőmérsékletet 0,1 °C pontossággal leolvassuk. Öblítsük át a vezetőképesség-mérőcellát kétszer a vizsgálandó oldattal.

197

Mérjük meg a vezetőképességet, és fejezzük ki az eredményt µS cm-1 mértékegységben. 5.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA Az eredményt mikrosiemens/cm-ben (µS cm-1), egész számmal fejezzük ki 20 °C hőmérsékleten, a finomított mustsűrítmény 25%-os (m/m) (25° Brix) oldatára vonatkoztatva. Ha a készülék nincs ellátva hőmérséklet-szabályozó eszközzel, korrigáljuk a mért vezetőképességet az I. táblázat használatával. Ha a hőmérséklet 20 °C alatt van, adjuk hozzá a korrekciót; ha a hőmérséklet 20 °C fölött van, vonjuk le a korrekciót.

I. TÁBLÁZAT A vezetőképesség korrekciói 20 °C-tól eltérő hőmérsékletekre (µS cm-1) Vezetőképesség

0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 1 2

20,2 19,8 0 0 0 1 1 1 1 1 2 2 2 2 3

20,4 19,6 0 0 1 1 2 2 3 3 3 3 4 5 5

20,6 19,4 0 1 1 2 3 3 4 5 5 6 7 7 8

20,8 19,2 0 1 2 3 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Hőmérséklet (°C) 21,0 21,2 19,0 18,8 0 0 1 1 2 3 3 4 4 5 6 7 7 8 8 9 9 11 10 12 11 13 12 14 13 16

21,4 18,6 0 1 3 5 6 8 9 11 12 14 15 17 18

21,6 18,4 0 2 3 5 7 9 11 12 14 16 18 19 21

21,8 18,2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24

22,01 18,02 0 2 4 7 9 11 13 15 18 20 22 24 26

Vonjuk le a korrekciót. Adjuk hozzá a korrekciót.

198

(c)

A HIDROXI-METILFURFUROL-TARTALOM (HMF) MEGHATÁROZÁSA

1.

A MÓDSZEREK ELVE

1.1.

Fotometriás módszer A furánból származó aldehidek, amelyek közül a legfontosabb a hidroxi-metil-furfurol, a barbitursavval és a paratoluidinnel vörös színű vegyületet képeznek, amelynek abszorbanciamaximuma 550 nm-en van.

1.2.

Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) Elválasztás egy fordított fázisú oszlopon, és meghatározás az UV-tartományba eső 280 nm-en.

2.

FOTOMETRIÁS MÓDSZER

2.1.

Eszközök

2.1.1.

Spektrofotométer, amellyel 300 és 700 nm közötti méréseket lehet végezni.

2.1.2.

1 cm-es üvegküvetták.

2.2.

Reagensek

2.2.1.

0,5% (m/V)-os barbitursavoldat Oldjunk fel 500 mg barbitursavat, (C4O3N2H4) desztillált vízben, és óvatosan melegítsük fel egy vízfürdő fölött 100 °C-on. Töltsük fel 100 ml-re desztillált vízzel. Az oldat kb. egy hétig áll el.

2.2.2.

10% ( m/V) paratoluidinoldat Tegyünk 10 g paratoluidint, (C6H4(CH3)NH2) egy 100 ml-es mérőlombikba; adjunk hozzá 50 ml izopropanolt, (CH3CH(OH)CH3) és 10 ml jégecetet, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml). Töltsük fel 100 ml-re izopropanollal. Az oldatot naponta frissen kell készíteni.

2.2.3.

1% ( m/V)- os acetaldehi oldat (CH3CHO) Közvetlenül felhasználás előtt készítsük el.

2.2.4.

1 g/l hidrox-imetil-furfuro-törzsoldat ( C6O3H6,) [HMF-törzsoldat]

199

Ebből az oldatból készítsünk hígítási sorozatot, amelyek 5, 10, 20, 30, illetve 40 mg/l HMF-t tartalmaznak. Az 1 g/l-es, valamint a hígított oldatokat frissen kell elkészíteni. 2.3.

Eljárás

2.3.1.

A minta előkészítése Használjunk olyan oldatot, amelyet finomított mustsűrítmény 40% (m/V)-ra történő hígításával kapunk, amint azt az összes savtartalom meghatározására vonatkozó 13. rész 5.1.2 szakaszában leírtuk. Végezzük el a meghatározást az oldat 2 ml-jén.

2.3.2.

Fotometriás meghatározás Két csiszolatos üvegdugóval ellátott 25 ml-es lombikba, a-ba és b-be töltsünk 2 ml mintát, amelyeket a 2.3.1. szakasz szerint készítettünk elő. Tegyünk mindegyik lombikba 5 ml paratoluidinoldatot, majd keverjük össze. Adjunk 1 ml desztillált vizet a b lombikba (kontroll) és 1 ml barbitursavat az a lombikba. Rázással homogenizáljuk. Tegyük a lombikok tartalmát spektrofotométerküvettákba, amelyek optikai úthossza 1 cm. Állítsuk be az abszorbanciaskála nullapontját a b lombik tartalmával 550 nm-es hullámhosszon. Figyeljük meg

az a lombik

tartalmának abszorbanciaváltozását: jegyezzük fel az A maximális értéket, amelyet kettő-öt perc után ér el. 30 mg/l-nél nagyobb hidroxi-metil-furfurol-koncentrációjú mintákat az analízis előtt hígítani kell. 2.3.3.

A kalibrációs görbe elkészítése Az 5, 10, 20, 30, valamint 40 mg/l-es hidroxi-metil-furfurol-oldatokból tegyünk 2-2 ml-t két sorozat 25 ml-es a és b lombikba, és kezeljük ezeket a 2.3.2. szakaszban leírtak szerint. A kapott kalibrációsgörbe egy egyenes, amely az origón halad át.

2.4.

Az eredmények megadása A

finomított

mustsűrítményekben

lévő

hidroxi-metil-furfurol-koncentrációt

milligramm/kg összes cukorban fejezzük ki. 2.4.1.

Számítás Az analizálandó mintában lévő C mg/l hidroxi-metil-furfurol-koncentráció a minta mért A abszorbanciának megfelelő koncentráció a kalibrációs görbén.

200

A hidroxi-metil-furfurol-koncentráció mg/kg összes cukor mértékegységben az alábbi összefüggésből számítható ki: 250 ×

C P

ahol P a % (m/m) összes cukortartalom a finomított mustsűrítményben. 3.

A NAGY TELJESÍTMÉNYŰ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIÁS MÓDSZER

3.1.

Eszközök

3.1.1.

Nagy teljesítményű folyadékkromatográf, amely az alábbiakkal van felszerelve: —

injektor 5 vagy 10 µl-es mintahurokkal,

—

UV detektor 280 nm-en végzendő mérésekhez,

—

elválasztó oszlop, fordított fázisú C18 oktadecillel kötött kovasavoszlop (pl. Bondapack C18 - Corasil, Waters Ass.),

—

egy regisztrálókészülék, lehetőleg egy integrátor.

A mozgó fázis áramlási sebessége: 1,5 ml/perc. 3.1.2.

Membrán-szűrőkészülék, pórusátmérő 0,45 µm.

3.2.

Reagensek

3.2.1.

Kétszer desztillált víz.

3.2.2.

Desztillált metil-alkohol (CH3OH) vagy HPLC minőségű.

3.2.3.

Ecetsav, CH3COOH, (ρ = 1,05 g/ml).

3.2.4.

Mozgó fázis: víz-metil-alkohol-ecetsav, előzetesen membránszűrőn átszűrve (0,45 µm), [40:9:1; (V/V)]. Ezt a mozgó fázist naponta el kell készíteni, és használat előtt gázmentesíteni kell.

3.2.5.

25 mg/l hidroxi-metil-furfurol-referenciaoldat 100 ml-es mérőlombikba helyezzünk 25 mg hidroxi-metil-furfurolt (C6H3O6) pontosan kimérve, és töltsük fel jelig metil-alkohollal. Hígítsuk ezt az oldatot 1:10 arányban metil-alkohollal és szűrjük át egy membránszűrőn (0,45 µm).

201

Ha hűtőszekrényben, barna üvegpalackban tartjuk

ezt az oldatot, két-három

hónapig is eltartható. 3.3.

Eljárás

3.3.1.

A minta előkészítése Használjuk a finomított mustsűrítmény 40% (m/V)-ra hígított oldatát, amint azt az összes savtartalomról szóló fejezet 5.1.2 szakaszában leírtuk, és szűrjük át 0,45 µmes membránszűrőn.

3.3.2.

Kromatográfiás meghatározás Fecskendezzünk be 5 (vagy 10) µl mintát, amelyet a 3.3.1. szakasz szerint készítettünk elő, és 5 (vagy 10) µl hidroxi-metil-furfurol-referenciaoldatot a kromatográfba. Regisztráljuk a kromatogramot. A hidroxi-metil-furfurol retenciós ideje kb. hat-hét perc.

3.4.

AZ EREDMÉNYEK MEGADÁSA A finomított mustsűrítményben lévő hidroxi-metil-furfurol-tartalmat mg/kg összes cukor mértékegységben adjuk meg.

3.4.1.

Számítás Legyen a 40% (m/V)-os finomított mustsűrítmény hexametil-furfurol- koncentrációja C mg/l. A hidroxi-metil-furfurol-koncentrációt mg/kg összes cukor mértékegységben az alábbi összefüggés adja: C 250 × P ahol P a % (m/m) összes cukortartalom a finomított mustsűrítményben.

202

(d)

A NEHÉZFÉMTARTALOM MEGHATÁROZÁSA

1.

A MÓDSZEREK ELVE

I.

Gyors módszer a nehézfémek becslésére A nehézfémeket a megfelelően hígított finomított mustsűrítményben a szulfidok képződésével létrejövő elszíneződés mutatja ki. Ezek értékelését egy standard ólomoldattal való összehasonlítással végezzük, amely megfelel a legnagyobb megengedett koncentrációnak.

II.

Az ólomtartalom meghatározása atomabszorpciós spektrofotometriával Az ólomnak az ammónium-pirrolidin-ditiokarbamáttal létrehozott kelátját metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az abszorbanciát 283,3 nm-en mérjük. Az ólomtartalmat addíciós módszerrel határozzuk meg.

2.

GYORS MÓDSZER A NEHÉZFÉMEK MEGHATÁROZÁSÁHOZ

2.1.

Reagensek

2.1.1.

Hígított sósav Vegyünk 70 g tömény sósavat (HCl) (ρ20 = 1,16-1,19 g/ml), és töltsük fel 100 ml-re vízzel.

2.1.2.

Hígított sósav Vegyünk 20 g sósavat (HCl) (ρ20 = 1,16-1,19 g/ml), és töltsük fel 100 ml-re vízzel.

2.1.3.

Hígított ammónia. Vegyünk 14 g ammóniát (NH3) (ρ20 = 0,931-0,934 g/ml), és töltsük fel 100 ml-re vízzel.

2.1.4.

3,5 pH-jú pufferoldat Oldjunk fel 25 g ammónium-acetátot (CH3COONH4) 25 ml vízben, és adjunk hozzá 38 ml hígított sósavat (2.1.1). Állítsuk be a pH-t, ha szükséges, hígított sósavval (2.1.2) vagy hígított ammóniával (2.1.3), és töltsük fel 100 ml-re vízzel.

2.1.5.

4% (m/V) tioacetamid-oldat (C2H5 SN) ,

203

2.1.6.

85% ( m/V) glicerinoldat (C3H8O3)( n 20 D

2.1.7.

Tioacetamidreagens

o

C

= 1,449-1,455).

0,2 ml tioacetamidoldathoz adjunk 1 ml-t, az 5 ml vízből, 15 ml 1 M nátriumhidroxid-oldatból és 20 ml glicerinoldatból álló elegyből. Melegítsük vízfürdőn 100 °C hőmérsékleten 20 másodpercig. A reagenst közvetlenül felhasználás előtt készítsük el. 2.1.8.

0,002 g/l ólomtartalmú oldat Készítsünk 1 g/l-es ólomoldatot úgy, hogy feloldunk 0,400 g ólom-nitrátot, Pb(NO3)2 vízben, és feltöltjük 250 ml-re vízzel. A felhasználás időpontjában hígítsuk fel ezt az oldatot vízzel úgy, hogy 0,002 g/l-es oldatot kapjunk.

2.2.

Eljárás Oldjuk fel 10 g finomított mustsűrítmény mintáját 10 ml vízben. Adjunk hozzá 2 ml 3,5 pH-jú pufferoldatot, keverjük össze. Adjunk hozzá 1,2 ml tioacetamidreagenst. Keverjük össze rögtön. Készítsük el a kontrollt ugyanilyen körülmények között 10 ml 0,002 g/l ólomoldattal (2.1.8). Két perc elteltével a finomított mustsűrítmény oldatának barna elszíneződése nem lehet intenzívebb, mint a kontrollé.

2.3.

Számítások A fenti eljárással a kontrollminta a maximálisan megengedett nehézfémkoncentrációnak felel meg, amelyet 2 mg ólom/kg finomított mustsűrítmény egységben fejezünk ki.

3.

AZ

ÓLOMTARTALOM

MEGHATÁROZÁSA

ATOMABSZORPCIÓS

SPEKTROFOTOMETRIÁVAL 3.1.

Eszközök

3.1.1.


3.1.2.

Ólom-vájtkatódlámpa.

3.2.

Reagensek

3.2.1.

Hígított ecetsav

204

Vegyünk 12 g jégecetet (ρ = 1,05 g/ml), és töltsük fel vízzel 100 ml-re. 3.2.2.

1% (m/V)-os ammónium–pirrolidin-ditiokarbamát-oldat (C5H12N2S2)

3.2.3.

Meti-lizobutil-keton, (CH3)2CHCH2COCH3

3.2.4.

0,010 g/l ólomtartalmú oldat Hígítsunk 1 g/l-es ólomoldatot (2.1.8) 1:100 (v/v) arányban.

3.3.

Eljárás

3.3.1.

A vizsgálandó oldat előkészítése Oldjunk fel 10 g finomított mustsűrítményt egyenlő térfogatú hígított ecetsav (3.2.1) és víz elegyében, és töltsük fel 100 ml-re ezzel az eleggyel. Adjunk hozzá 2 ml ammónium-pirrolidin-ditiokarbamát-oldatot és 10 ml metilizobutil-ketont. Rázzuk 30 másodpercig, miközben óvjuk az erős fénytől. Hagyjuk a két réteget különválni. Használjuk a metil-izobutil-keton-réteget.

3.3.2.

Referenciaoldatok készítése Készítsünk három referenciaoldatot, amelyek a 10 g finomított mustsűrítményen túlmenően 1, 2, illetve 3 ml 0,010 g/l ólomtartalmú-oldatot (3.2.4) tartalmaznak. Kezeljük ezeket ugyanúgy, ahogy a vizsgálandó oldatot.

3.3.3.

Kontroll Készítsünk kontrollt ugyanolyan körülmények között, ahogy azt a 3.3.1 szakaszban leírtuk, de finomított mustsűrítmény hozzáadása nélkül.

3.3.4.

Meghatározás Állítsuk be a hullámhosszt 283,3 nm-re. Atomizáljuk a kontrollminta metil-izobutil-keton-fázisát a lángba, és nullázzuk az abszorbanciaskálát. Határozzuk meg a vizsgálandó oldat, valamint a referenciaoldatok abszorbanciáit ezek megfelelő oldószerextraktumaival.

3.4.

Az eredmények megadása Az ólomtartalmat fejezzük ki m/kg finomított mustsűrítmény egységben egy tizedes pontossággal.

205

3.4.1.

Számítás Készítsük el az abszorbanciaváltozás görbéjét a referenciaoldatokhoz adott ólomtartalom függvényében, a nulla koncentráció a vizsgálandó oldatnak felel meg. Extrapoláljuk a pontokat összekötő egyenest, amíg az metszi a koncentrációtengely negatív részét. A metszéspont és az origó közötti távolság adja meg a vizsgált oldat ólomtartalmát.

(e)

AZ ETIL-ALKOHOL-TARTALOM KÉMIAI MEGHATÁROZÁSA Ezt a módszert a kis alkoholtartalmú folyadék alkoholtartalmának meghatározására használjuk, például mustok, sűrített mustok és finomított mustok esetében.

1.

A MÓDSZER ELVE A folyadék egyszerű desztillációja. A desztillátumban lévő etil-alkohol oxidálása kálium-dikromáttal. A dikromát fölöslegének visszatitrálása vas(II)oldattal.

2.

ESZKÖZÖK

2.1.

Használjunk olyan desztillációs készüléket, amilyet az alkohol térfogatszázalék meghatározására vonatkozó 3. rész, 3.1 szakasza bemutat.

3.

REAGENSEK

3.1.

Kálium-dikromát-oldat Oldjunk fel 33,600 g kálium-dikromátot (K2Cr2O7) megfelelő mennyiségű vízben, és töltsük fel az oldatot egy literre 20 °C hőmérsékleten. Ennek az oldatnak egy ml-je 7,8924 mg alkoholt oxidál.

3.2.

Vas(II)-ammónium-szulfát-oldat Oldjunk fel 135 g vas(II)-ammónium-szulfátot (FeSO4 ⋅ (NH4)2SO4 ⋅ 6H2O), elegendő mennyiségű vízben, hogy egy liter oldatot kapjunk, és adjunk hozzá 20 ml koncentrált kénsavat, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml). 1 ml oldat megfelel 0,5 ml kálium-dikromát- oldatnak az elkészítés időpontjában. Az oldat lassan oxidálódik.

3.3.

Kálium-permanganát oldat Oldjunk fel 1,088 g kálium-permanganátot (KMnO4) megfelelő mennyiségű vízben, hogy egy liter oldatot kapjunk.

206

3.4.

1:2 (V/V) arányban hígított kénsav Adjunk 500 ml kénsavat, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml) 500 ml vízhez úgy, hogy egyszerre csak kis mennyiségeket töltünk hozzá, és folyamatosan keverjük.

3.5.

Vas(II)-ortofenantrolin-reagens Oldjunk fel 0,695 g vas(II)-szulfátot (FeSO4 ⋅ 7H2O), 100 ml vízben, és adjunk hozzá 1,485 g ortofenantrolin-monohidrátot (C12H8N2 ⋅ H2O). Melegítsük az oldódás elősegítése céljából. Ez az erősen vörös oldat jól eltartható.

4.

ELJÁRÁS

4.1.

Desztilláció Töltsünk 100 g finomított mustsűrítményt és 100 ml vizet a desztillációs lombikba. Gyűjtsük össze a desztillátumot 100 ml-es mérőlombikban, és töltsük fel jelig vízzel.

4.2.

Oxidálás Vegyünk egy csiszolatos üvegdugóval ellátott széles nyakú lombikot, amely lehetővé teszi, hogy a nyakat veszteség nélkül leöblíthessük. A lombikba töltsünk 20 ml kálium-dikromát-titrálóoldatot és 20 ml 1:2 (V/V) hígítású kénsavat, és rázzuk össze. Adjunk hozzá 20 ml-t a desztillátumból. Dugjuk be a lombikot, rázzuk össze, és várjunk legalább 30 percig, egyszer-egyszer összerázva (mintaoldat lombik). Végezzük el a vas(II)ammónium-szulfát-oldat (3.2) titrálását a kálium-dikromátoldattal úgy, hogy egy ugyanolyan lombikba ugyanolyan mennyiségű reagenst teszünk, de a 20 ml desztillátumot 20 ml desztillált vízzel helyettesítjük (ez a kontroll- lombik).

4.3.

Titrálás Adjunk négy csepp ortofenantrolinreagenst a minta‘oldat’ lombikához. Titráljuk a felesleges dikromátot, hozzáadva a vas(II)ammónium-szulfát-oldatot. Fejezzük be a vas(II)oldat hozzáadását, ha a keverék zöldeskékről barnára vált. A végpont pontosabb meghatározásához változtassuk vissza a keverék színét barnáról zöldeskékre kálium-permanganát-oldattal. Vonjuk le ennek az oldatnak az egytizedét a hozzáadott vas(II)oldat térfogatából. Legyen a különbség n ml. Járjunk el ugyanígy a ‘kontroll’- lombikkal. Legyen n' ml itt a különbség.

207

5.

AZ EREDMÉNYEK KIFEJEZÉSE Az etil-alkoholt g/kg cukorban adjuk meg egy tizedes pontossággal.

5.1.

Számítási mód n' ml vas(II)oldat 20 ml dikromátoldatot redukál, amely 157,85 mg tiszta alkoholt oxidál. Egy milliliter vas(II)oldat ugyanolyan redukáló hatású, mint 157,85 mg etil-alkohol. n'

n - n' ml vas(II)oldat megfelel 157,85 (n − n' ) mg etil-alkoholnak. n' Az etil-alkohol-koncentrációt g/kg finomított mustsűrítményben az alábbi összefüggés adja: ( n'− n) 7,892 × n Az etil-alkohol-koncentrációt g/kg összes cukorban az alábbi összefűggés adja meg:

ahol P a % (m/m) összes cukortartalom. (f)

A MEZO-INOZIT-, SZKILLO-INOZIT- ÉS SZACHARÓZ- TARTALOM MEGHATÁROZÁSA

1.

ALAPELV Derivatizált származékok gázkromatográfiás meghatározása.

2.

REAGENSEK

2.1.

Belső standard: xilit (kb. 10 g/l-es vizes oldat, amelyhez egy spatulahegynyi nátrium-azidot adunk)

208

2.2.

Bisz-(trimetil-szilil)-trifluora-cetamid (BSTFA), (C8H18F3NOSi2)

2.3.

Trimetil-klorszilán (C3H9ClSi)

2.4.

Piridin a.t. (C5H5N)

2.5.

Mezo-inozit (C6H12O6)

3.

ESZKÖZÖK

3.1.

Gázkromatográf az alábbiakkal felszerelve:

3.2.

Kapillárisoszlop (OV 1-gyel bevont olvasztott szilika, 0,15 µm-es filmvastagság, 25 m-es hosszúság és 0,3 mm-es belső átmérő) Működési körülmények: —

vivőgáz: hidrogén vagy hélium,

—

vivőgáz áramlási sebessége: kb. 2 ml/perc,

—

injektor/detektor hőmérsékleet: 300 °C,

—

a hőmérséklet programozása: 1 perc 160 °C-on, 4 °C/perc gradienssel 260 °C-ra, 15 perc 260 °C-on,

—

osztási arány: kb. 1:20.

3.3.

Integrátor.

3.4.

Mikrofecskendő, 10 µl.

3.5.

Mikropipetták, 50, 100 és 200 µl.

3.6.

2 ml-es lombik PTFE-dugóval.

3.7.

Szárítószekrény.

4.

A MÉRÉS VÉGREHAJTÁSA Kb. 5 g pontosan kimért finomított mustsűrítménymintát 50 ml-es lombikba helyezünk. 1 µl standardszilitoldatot (2.1) adunk hozzá, és vízzel feltöltjük jelig. Összekeverés után 100 µl oldatot veszünk, és egy lombikba helyezzük, ahol enyhe

209

légáramban megszárítjuk. 100 µl abszolút etil-alkohol adható hozzá, ha szükséges, a párologtatás elősegítéséhez. A maradékot óvatosan feloldjuk 100 µl piridinben (2.4), és 100 µl bis-(trimetilszilil)-trifluor-acetamidot (2.2.) és 10 µl trimetil-klorszilánt (2.3.) adunk hozzá. A lombikot lezárjuk a PTFE-dugóval, és egy órán keresztül 60 °C-on melegítjük. Vegyünk ki 0,5 µl tiszta folyadékot, és fecskendezzük be egy melegített üreges tű segítségével a meghatározott osztási aránynak megfelelően. 5.

AZ EREDMÉNYEK SZÁMÍTÁSA

5.1.

Egy oldatot készítünk, amely az alábbiakat tartalmazza: 60 g/l glükóz, 60 g/l fruktóz, 1 g/l mezo-inozit és 1 g/l szacharóz. Kimérünk 5 g oldatot, és a 4. szakasz szerint járunk el. A mezo-inozit és a szacharóz eredményeit a xilitol vonatkozásában a kromatogramról számítjuk ki. Szkillo-inozitol esetében, amely kereskedelmi forgalomban nem kapható, és amelynek tartózkodási ideje a glükózanomer formájának utolsó csúcsa és a mezoinozit (lásd a túloldali diagramot) csúcsa között van, ugyanazt az eredményt vesszük figyelembe, mint a mezo-inozit esetében.

6.


6.1.

A mezo-inozitot és a szkillo-inozitot milligramm/kg összes cukorban adjuk meg. A szacharózt g/kg finomított mustsűrítményben fejezzük ki.

210

mezo-inozit

szacharóz xilitol

szkillo-inozit

A xilitol, a mezo-inozit, a szkillo-inozit és a szacharóz GC-kromatogramja

211

43.

A BORBAN LÉVŐ VÍZ 18O/16O IZOTÓPARÁNYÁNAK MEGHATÁROZÁSA47

I.

A MÓDSZER LEÍRÁSA

1.

A módszer célja Ezzel a módszerrel a különböző eredetű vizek 18

18

O/16O izotóparánya mérhető. Az

O/16O izotóparány, mint δ ‰ szórás a nemzetközi V.SMOW referencia-izotóparány

értékéhez viszonyított arányban fejezhető ki:  Ri  δ i [‰] =  − 1 × 1000  RSMOW 

2.

A módszer elve A

18

O/16O izotóparány izotóparány-mérő tömegspektrometriás (IR-MS) módszerrel a

borban lévő vízzel lefolytatott, alábbi reakció szerint létrejött csere után nyert széndioxid által létrehozott 46 m/z (12C16O18O) és 44 m/z (12C16O2) ionáramokból határozható meg: C16O2+H218O ↔ C16O18O+H216O Az analízishez gázfázisú szén-dioxidot használunk.

3.

Reagensek: — Szén-dioxid az analízishez, — SMOW (Standard Mean Ocean Water - átlagos óceánvíz) — GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation - grönlandi jégtakarócsapadéka) — SLAP (Standard Light Arctic Precipitation - standard könnyű arktikus csapadék) — A laboratóriumra specifikus referenciavíz, amely gondosan standardizált a Bécsi Nemzetközi Atomenergia Ügynökség (IAEA) referenciamintájára vonatkoztatva.

4.

Laboratóriumi berendezések — izotóparány-mérő tömegspektrométer 0,05 ‰ belső ismételhetőséggel, — hármas kollektor a 44, 45 és 46 m/z ionok egyidejű regisztrálására vagy alapértelmezésként egy kettős kollektor a 44 és 46 m/z ionok mérésére, — termosztátrendszer (± 0,5 °C), a CO2 és a borban lévő víz közötti egyensúly létrehozásának végrehajtásához,

47


—

vákuumszivattyú, amellyel 0,13 Pa belső nyomás biztosítható,

—

15 ml-es térfogatú fiolák a minták számára, kapilláris-toldalékcsővel, amelynek belső átmérője kb. 0,015 mm,

—

Eppendorf-pipetta eldobható műanyag véggel.

5.

A mérés végrehajtása

5.1.

Manuális módszer A kiegyenlítési módszer eljárása A minta bevitele —

Eppendorf-pipettára illesszünk 1,5 ml rögzített térfogatú pipettavéget, és jutassuk a pipettával az analizálandó folyadékot a gömblombikba. Ezután kenjük be szilikonzsírral a gömblombik nyakát, és csatlakoztassuk a gömblombikot a szelephez, ellenőrizve, hogy megfelelő-e a zárás.

—

Ismételjük meg a műveletet a munkarámpán lévő valamennyi gömblombikkal, miközben a laboratórium referenciavizét is az egyik gömblombikba juttatjuk.

A rámpa gáztalanítása Mindkét rámpát folyékony nitrogénnel lehűtjük, majd az egész rendszerben 0,1 mm Hg vákuumot hozunk létre, a szelepek nyitott állás mellett. Ezután zárjuk el a szelepeket, és hagyjuk a berendezést felmelegedni. A gáztalanítási ciklust ismételjük meg a nyomásváltozás megszűntéig. A víz és a CO 2 kiegyenlítése Hűtsük le a munkarámpákat -70 °C hőmérsékletre (folyékony nitrogén és alkohol keveréke) azért, hogy a vizet kifagyasszuk, és helyezzük az egészet vákuum alá. A vákuum stabilizálása után válasszuk le a rámpát a szelep működtetésével, és fúvassuk át a CO2 -bevezető rendszert. Jutassuk be a CO2 gázt a munkarámpába, és miután leválasztottuk a rendszer többi részéről, helyezzük a rámpát 25 °C (± 0,5 °C) hőmérsékleten tartott fürdőbe 12 órán át (egy éjszaka). A kiegyenlítéshez szükséges idő optimalizálásához célszerű a mintákat a munkaidő végén előkészíteni, így az egyensúly az éjszaka során kialakul. A kicserélt CO 2 bevitele a mérőcellákba Illesszünk egy olyan mintatartót a munkarámpára, amely a kicserélt CO2-t tartalmazó gömblombikok számának megfelelő számú mérőcellát tartalmaz. Az üres cellákat légtelenítsük gondosan, és a ballonokban lévő kicserélt gázokat egymás után juttassuk

213

be a mérőcellákba, amelyeket folyékony nitrogénnel hűtöttünk le. Ezután hagyjuk a mérőcellákat szobahőmérsékletre felmelegedni. 5.2.

Automatikus cserélőkészülék alkalmazása A kiegyenlítődés végrehajtása céljából a mintafiolákat 2 ml borral vagy 2 ml vízzel (laboratóriumi munkareferencia) töltjük meg, és lehűtjük -18 °C-ra. A fagyasztott mintákat tartalmazó mintaedényeket a kiegyenlítő rendszerhez csatlakoztatjuk, és miután vákuumot hoztunk létre a rendszerben, szén-dioxidot juttatunk be 800 hPa nyomáson. Az egyensúlyt 22 ± 0,5 °C hőmérsékleten érjük el legalább ötórás időtartamot követően, mérsékelt rázással. Mivel a kiegyenlítődési időtartam függ a fiola geometriájától, az alkalmazott rendszerhez az optimális időtartamot kell meghatározni. A fiolákban lévő szén-dioxidot ezután kapilláriscsövön keresztül juttatjuk be a tömegspektrométer bevezető kamrájába, és a mérést az egyes berendezéseknek megfelelő specifikus előírások szerint végezzük.

6.

Az eredmények számítása és megadása A 46 és 44 (I46/I44) m/z ionarány intenzitásoknak a minta és a referencia közötti δ' relatív különbségét ‰-ben fejezzük ki az alábbi összefüggéssel:  ( I 46 / I 44 ) minta  δ' minta =  − 1 × 1000  ( I 46 / I 44 ) referencia  A

minta

18

O

intenzitását

összehasonlítva

a

V.SMOW

referenciáéval

a

W.SMOW/SLAP skálán az alábbi összefüggést kapjuk:  δ ' minta − d' SMOW  δ '18 O =   × 55,5  δ ' SMOW − δ ' SLAP  A SLAP vízre elfogadott érték -55,5 ‰, a W.SMOW-vel szemben. A referencia izotóparányát az ismeretlen mintákon végzett tíz mérésből álló sorozat alapján kell határozni.

7.

Megbízhatóság —

ismételhetőség (r): 0,24 ‰,

—

reprodukálhatóság (R): 0,50 ‰.

214

44. AZ ETIL-KARBAMÁT MEGHATÁROZÁSA BORBAN: GÁZKROMATOGRÁFIÁS-TÖMEGSPEKTROMETRIÁS MÓDSZERT ALKALMAZÓ SZELEKTÍV MEGHATÁROZÁS48 (10-200 µg/l koncentrációjú etil-karbamát meghatározására alkalmas) (Figyelem: tartsuk be a biztonsági intézkedéseket az etil-alkohol, az aceton, a karcinogén termékek (etil-karbamát és diklór-metán) kezelésekor. Az elhasznált oldatokat helyezzük el a hatályos környezetvédelmi szabályoknak megfelelően.) 1.

A MÓDSZER ELVE Belső standardként propil-karbamátot adunk a mintához, az oldatot vízzel hígítjuk, és 50 ml szilárd fázisú extrakciós oszlopra visszük. Az etil-karbamátot és a propilkarbamátot diklór-metánnal eluáljuk. Az eluátumot vákuumban rotadeszt készülékkel töményítjük be. A koncentrátumot gázkromatográfiás módszerrel (GC) analizáljuk. A detektálást tömegspektrometriásan SIM (szelektív ion-gyűjtés) üzemmódban végezzük.

2.

ESZKÖZÖK ÉS KROMATOGRÁFIÁS KÖRÜLMÉNYEK (példa)

2.1.

Gázkromatográf/tömegspektrométer (GC/MS), és ha szükséges, minta- és adatkezelő, vagy azzal egyenértékű rendszer. Ömlesztett kvarcüveg kapillárisoszlop. 30* m x 0,25 mm (belső átmérő), 0,25 µm-es Carbowax 20M-mel aktiválva. Működés: injektor: 180 °C, héliumgáz-sebesség. 1 ml/perc 25 °C hőmérsékleten, injektálás

osztásmentes módszerrel. Hőmérsékletprogram: 40 °C 0,75 percig, ezután hőmérséklet-növelés 10 °C/perces gradienssel 60 °C-ig,

majd 3 °C/perccel 150 °C-ig**, emelés 220 °C-ra, és ezen a hőmérsékleten tartva 4,25 percig. Az etil-karbamát retenciós ideje 23-27 perc, a propil-karbamáté 23-31 perc. Gázkromatográf/tömegspektrométer (GC/MS) interfész: 220 °C-os átvezető. A tömegspektrométer paramétereit manuálisan hangoljuk perfluor-tributil-aminnal, és 48

A 2676/1990 EK/ rendelet 3. mellékletének 44. módszere Bizonyos borok esetében 50 m-es kapilláris oszlop is szükséges lehet. ** Bizonyos borok esetében 2 °C/perces hőmérsékleti programra lehet szükség. *

215

optimalizáljuk az alsó tömegérzékenységre, SIM gyűjtési mód, oldószer-késleltetés és a gyűjtéskezdés időpontja 22 perc, tartózkodási idő/ion 100 ms. 2.2.

A Kuderna Danish-hoz hasonló forgó vákuumban is működő rotadeszt berendezés. Megjegyzés:

Az etil-karbamát vizsgálati mintából való visszanyerési hatásfokának, C(g), 90 és 110% között kell lennie a folyamat során. 2.3.

300 ml-es, normálcsiszolatos gömblombik

2.4.

Töményítő cső - 4 ml-es, kalibrált, PTFE bevonatú csatlakozóval és dugóval.

3.

REAGENSEK

3.1.

Aceton, kromatográfiás minőségű Megjegyzés:

Ellenőrizzünk minden tételt, mielőtt a GC/MS-ben használnánk, hogy elkerüljük a reakciót a 62, 74 és 89 m/z ionokra. 3.2.

Diklór-metán Megjegyzés:

Vizsgálhunk meg minden tételt, mielőtt a GC/MS-ben használnánk 200-szoros töményítés után, annak ellenőrzésére, hogy elkerüljük a a reakciót a 62, 74 és 89 m/z ionokra. 3.3.

Etil-alkohol, vízmentes

3.4.

Etil-karbamát-standardoldatok (EC)

3.4.1. 1,00 mg/ml koncentrációjú törzsoldat 100 ml-es mérőlombikba mérjünk be 100 mg etil-karbamátot (EC) (tisztaság ≥ 99%), és töltsük fel jelig acetonnal. 3.4.2. 10,0 µg/ml koncentrációjú munkaoldat Egy 100 ml-es mérőlombikba tegyünk 1 ml etil-karbamát-törzsoldatot, és töltsük fel jelig acetonnal.

216

3.5.

Propil-karbamát-tandardoldatok (PC),

3.5.1. 1,00 mg/ml koncentrációjú törzsoldat. 100 ml-es mérőlombikba mérjünk be 100 mg propil-karbamátot (tisztaság ≥ 99%), és töltsük fel jelig acetonnal. 3.5.2. 10,0 µg/ml koncentrációjú standard munkaoldat. 100 ml-es mérőlombikba tegyünk 1 ml propil-karbamát-törzsoldatot, és töltsük fel jelig acetonnal. 3.5.3. 400 ng/ml-es koncentrációjú belső standardoldat. 100 ml-es mérőlombikba tegyünk 4 ml probil-karbamát munkaoldatot, és töltsük fel vízzel jelig. 3.6.

Etil-karbamát—Propil-karbamát kalibrálóoldatok (EC-PC oldatok) Hígítsunk etil-karbamát-munkaoldatot és propil-karbamát-munkaoldatot diklórmetánnal úgy, hogy az alábbi oldatokat kapjuk:

3.7.

1.

(100 ng etil-karbamát és 400 ng propil-karbamát)/ml;

2.

(200 ng etil-karbamát és 400 ng propil-karbamát/ml;

3.


4.


5.

(1 600 ng etil-karbamát és 400 ng propil-karbamát)/ml.

Ellenőrző minta – 100 ng etil-karbamát/ml 40%-os etil-alkoholban 100 ml-es mérőlombikba tegyünk 1 ml etil-karbamát-munkaoldatot (3.4.2.), és töltsük 40% etil-alkohollal jelig.

3.8.

Szilárd fázisú extrakciós oszlop – kovafölddel töltött, 50 ml-es kapacitású, egyszer használatos. Megjegyzés: Vizsgálat előtt ellenőrizzük az extrakciós oszlopok minden tételét az etil-karbamát és

propil-karbamát visszanyerésre és a 62, 74 és 89 m/z ionreakciók hiányára. Készítsünk 100 ng etil-karbamát/ml ellenőrző mintát (3.7. szakasz szerint). Vizsgáljunk 5,00 ml ellenőrző mintát a 4., az 5. és a 6. szakaszokban leírtak szerint. 90-110 ng etil-karbamát/ml-es visszanyerés elfogadható. A szabálytalan szemcseátmérőjű abszorbensek lassú áramláshoz vezethetnek, ami befolyásolja az etil-

217

karbamát és propil-karbamát visszanyerést. Ha ismételt vizsgálat után sem kapunk 90110%-os visszanyerési hatásfokot, cseréljük ki az oszlopot, vagy használjunk a visszanyerési hatásfokkal korrigált kalibrációs görbét az etil-karbamát mennyiségi meghatározásához. A korrigált kalibrációs görbe felvételéhez készítsünk standard oldatokat a 3.6. szakaszokban leírtaknak megfelelően, 40%-os etil-alkoholt használva a diklór-metán helyett. Vizsgáljunk 1 ml standard kalibrációs oldatot, ahogy azt a 4., 5. és 6. részben leírtuk. Hozzunk létre egy új kalibrációs görbét az extrahált standardok etil-karbamát/propilkarbamát arányának használatával. 4.

A VIZSGÁLATI MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE Tegyük a következő térfogatú vizsgálandó mintákat két önálló 100 ml-es főzőpohárba: 14% (V/V) alkoholnál nagyobb alkoholtartalmú borok: 5,00 ± 0,01 ml; legfeljebb 14% (V/V) alkoholtartalmú borok: 20,00 ± 0,01 ml. Mindegyik főzőpohárhoz adjunk 1 ml belső propil-karbamát- standardoldatot (3.5.3. szakasz) és vizet, hogy összesen 40 ml térfogatot kapjunk (vagy 40 g-ot).

5.

EXTRAHÁLÁS Az extrahálást elszívófülkében végezzük, megfelelő szellőztetéssel. Vigyük fel a 4. szakasz szerint előkészített mintát az extraháló oszlopra. Öblítsük ki a főzőpoharat 10 ml vízzel, és töltsük az öblítővizet is az oszlopra. Hagyjuk a folyadékot abszorbeálódni négy percig, majd eluáljuk 2 x 80 ml diklór-metánnal. Gyűjtsük össze az eluátumot egy 300 ml-es Erlenmeyer-lombikba. Töményítsük az eluátumot 2-3 ml-re vízfürdős rotadeszt berendezésben 30 °C hőmérsékleten. Megjegyzés:

Ne engedjük szárazra párolódni. Tegyük át a töményített maradékot egy 4 ml-es kalibrált csőbe Pasteur pipettával. Öblítsük át a lombikot 1 ml diklór-metánnal, és az öblítő folyadékot vigyük át a csőbe. Töményítsük be a mintát 1 ml-re gyenge nitrogénáram alatt. Tegyük a koncentrátumot az automintavevő küvettájába a GC/MS vizsgálathoz.

218

6.

GC/MS VIZSGÁLAT

6.1.

Kalibrációs görbe Injektáljuk minden standard kalibrációs oldatból (3.6. szakasz) 1 µl-t a GC/MS-be. Vegyük fel a kalibrációs görbét. A függőleges tengelyen a 62 m/z ionreakció etil-karbamát-propil-karbamát területi arányát, a vízszintes tengelyen az etil-karbamát koncentrációját ng/ml-ben (100, 200, 400, 800, 1 600 ng/ml) adjuk meg.

6.2.

Etil-karbamát mennyiségi meghatározása Injektáljunk 1 µl-t az 5. szakasz

szerint előkészített töményített extraktumból a

GC/MS rendszerbe, és számítsuk ki az etil-karbamát-propil-karbamát területi arányát a 62 m/z ionra. Határozzuk meg az etil-karbamát-koncentrációt (ng/ml) az extraktumban a kalibrációs görbe használatával. Számítsuk ki az etil-karbamát koncentrációt a vizsgálati mintában (ng/ml) úgy, hogy elosztjuk az extraktumban lévő etil-karbamát (ng) mennyiségét a vizsgálati minta térfogatával (ml). 6.3.

Az etil-karbamát azonosság igazolása Határozzuk meg, hogy a 62, 74 és 89 m/z ionok reakciói megjelennek-e az etilkarbamát retenciója során. Ezek a reakciók a (M - C2H2)+ és (M - CH3)+ fő fregmentek, valamint az (M)+ molekulaion jellemzői. Az etil-karbamát jelenléte akkor igazolt, ha ezeknek az ionoknak a relatív arányai az etil-karbamát standard arányainak 20%-án belül vannak. Szükségessé válhat az extraktum esetleges további tőményítése abból a célból, hogy megfelelő reakciót kapjunk a 89 m/z ionra.

7.

Kollaboratív analízis Az alábbi táblázat a gyakorlati minta önálló eredményeit mutatja mindkét bortípusra. A Cohran-vizsgálat csak egy eredménypár kizárásához vezetett a 14% (V/V) alkoholtartalomnál magasabb, valamint a 14% (V/V) alkoholtartalmú vagy annál kisebb alkoholtartalmú borok esetében, két különböző laboratóriumban. A relatív reprodukálhatóság (RSDR) csökkenő trendet mutat az etil-karbamát koncentrációjának növekedésével.

219

Alkoholos italokban lévő etil-karbamát GC/MS módszerrel végzett meghatározásának teljesítménye Minta

Átlagosan talált

Az etil-

etil-karbamát-

-karbamát

tartalom

visszanyerési

(ng/ml)

hatásfoka

Sr

SR

RSDr

RSDR

(%)

(%)

(%) Borok > 14% (V/V)

Borok ≤ 14% (V/V)

40

1,59

4,77

4,01

12,02

80

89

3,32

7,00

4,14

8,74

162

90

8,20

11,11

5,05

6,84

0,43

2,03

3,94

18,47

11 25

93

1,67

2,67

6,73

10,73

48

93

1,97

4,25

4,10

8,86

A Magyar Borkönyv III./1. Kémiai vizsgálatok fejezet vége

220

MIKROBIOLÓGIAI VIZSGÁLATOK 3.2.1.

1. 1.1.

Általános vizsgálati eljárások

Általános vizsgálati eljárások Berendezések és eszközök

1.1.1. Berendezések 1.1.1.1. Lamináris box vagy sterilizálható légterű oltófülke 1.1.1.2. Sterilező autokláv 1.1.1.3. Hőlégsterilező vagy 180 oC-ig termosztálható szárítószekrény (egyszer használatos steril eszközök alkalmazása esetén nem szükséges) 1.1.1.4. Laboratóriumi mérleg, legalább 0,1 g pontosságú 1.1.1.5. Termosztát 28 ± 2 oC 1.1.1.6. Elektromos pH-mérő, ± 0,1 pontosságú 1.1.1.7. Membránszűrő készülék 500 ml-es feltéttel, szívópalackkal (pl. Sartorius, Millipore)

1.1.1.8. Vákuumszivattyú vagy vízlégszivattyú 1.1.1.9. Kémcsőhomogenizátor 1.1.1.10. Mikroszkóp 20-40-100-szoros nagyítású objektívlencsével 1.1.2. Eszközök Az üvegeszközök anyaga hőálló üveg legyen.

Lombikok, 250, 500, 1000 ml térfogatúak 1 ml-es osztott pipetták, teljes kifolyásra kalibráltak, 0,1 ml –es osztással*

Osztott pipetták, 5, 10, 25 ml térfogatúak Kémcsövek, perem nélkül, 16 x 160 mm Rugós fém vagy sterilezhető műanyag kémcsőkupakok Petri-csészék, 90 mm belső átmérőjű, 18 mm magas* Petri-csészék, 60 vagy 70 mm belső átmérőjűek* Üvegbot, végén (kb. 120o-ban) meghajlítva, szélesztéshez Tárgylemezek Fedőlemezek

221

Bakteriológiai oltókacs Fémcsipesz Laboratóriumi gázégő *Megjegyzés: Az oltási célú 1 ml-es üvegpipetták helyett célszerű 100 –1000 µl között állítható finnpipetta használata, autoklávozható műanyag pipettahegyekkel. Üveg Petri-csészék helyett gyárilag sterilezett műanyag csészék is használhatók. 1.1.3. Az eszközök sterilezése Nedves sterilezés: autoklávban 121 oC-on legalább 20 percig. Száraz sterilezés: hőlégsterilezőben 180 oC-on 1 órán át vagy 160 oC-on két órán át.

A fémeszközöket alkoholos lángolással, az oltókacsot izzítással sterilezzük. Műanyag Petri-csészék ismételt felhasználásra csak hideg eljárással (etilénoxidos kezelés, sugársterilezés) sterilezhetők. 1.2.

Mintavétel Gyártásközi mikrobiológiai vizsgálatok céljára steril edénybe, aszeptikus körülmények között kell mintát venni és a mintavevő edényt azonnal aszeptikusan lezárni. Tartályokból, technológiai berendezésekből (pl. szűrőgép) végzett mintavételkor kb. 5 l folyadék leengedése után a mintavételi csapot alkoholba mártott tamponnal lelángoljuk, majd újabb 2-3 liter folyadék átengedése után végezzük el a mintavételt. Felülről hozzáférhető kisebb tartályokból steril gumicsővel vagy pipettával vehetünk mintát, a mintavevő edény bemerítése nélkül. Dugó vizsgálatkor lelángolt csipesszel kell a mintaelemeket steril edénybe (pl. széles szájú Erlenmelyer-lombikba) helyezni. Üres palackok mintavételekor a palackot aszeptikusan (pl. steril fóliával vagy vattadugóval) zárjuk. Felületek mintavételekor az ismert méretű (pl. 5x5 cm) felületet steril, nedvesített tamponnal letörölünk és a tampont kémcsőbe kiadagolt, ismert mennyiségű (pl. 10 ml) steril vízbe mossuk.

1.3.

Minta-előkészítés

Palackozott késztermékesetén a palack nyakát lelángoljuk és a

vizsgálatot

közvetlenül a frissen felbontott palackból végezzük. Felnyitás előtt a palack 222

tartalmát alaposan homogenizáljuk, majd lelángolt dugóhúzóval a dugót olyan módon húzzuk ki, hogy kézzel egy mozdulattal eltávolítható legyen. Szénsavas borok esetén a homogenizált vizsgálati anyag megfelelő mennyiségét steril kémcsőben vagy lombikban kémcsőkeverővel vagy rázással szénsavmentesítjük és ebből végezzük a bemérést. Dugó és üres palack vizsgálatához előre sterilezett, ismert mennyiségű öblítővíz szükséges, amelybe a dugó, illetve palack felületén lévő mikrobákat alapos rázással bemossuk. 1.4.

Élősejtszám- meghatározás tenyésztéses eljárásokkal, szilárd táptalajon

1.4.1. Lemezöntéses módszer 1.4.1.1. A módszer elve

A vizsgálati anyag (must, bor, öblítővíz stb.) 0,1 – 1,0 ml-ét homogén eloszlásban szilárd táptalajba vagy annak felületére juttatjuk, majd a táptalajt több napig inkubáljuk. A mintában lévő életképes egyedi sejtek (sejtpárok, esetleg sejthalmazok) vegetatív szaporodás útján szilárd táptalajon szemmel látható méretű telepeket képeznek, amelyek számlálásával következtetünk az eredeti élősejtszámra. A számolhatóság alapfeltétele, hogy a tenyésztés során különálló (szoliter) telepeket nyerjünk, amelyet nagy sejtkoncentráció esetén a minta tizedelő hígításával biztosítunk. Megjegyzés: A telepszámlálásos módszerekkel valójában a telepképző egységek számát határozzuk meg, ami nem feltétlenül azonos az egyedi sejtek számával. A nemzetközi gyakorlatban a sejtszám helyett a “telepképző egység” megfelelő rövidítéseit, elsősorban az angol CFU (colony forming unit) rövidítést használják, ami azonos a ezen módszerleírásban használt "sejtszám" kifejezéssel. Élesztő és penészgombák esetében a különbség a tényleges sejtszám és a telepképző egységek száma között általában nem jelentős, de baktériumok esetén az egy nagyságrendet is meghaladhatja, mivel a bor baktériumai gyakran képeznek sejthalmazokat (pl. sejtláncokat).

223

1.4.1.2. Anyagok

Kémcsövekbe 9 ml-enként szétadagolt steril fiziológiás sóoldat (8,5 g nátrium- klorid 1 l vízben oldva) A mikrobacsoportnak megfelelő táptalajok, a 2.2.2., 2.4.2., 2.5.2. vagy a 2.6.2. szakasz szerint. 1.4.1.3. A vizsgálat menete

Hígítási sor készítése: A vizsgálati anyagból 1 ml-t 9 ml steril vízbe pipettázunk (101 hígítás), majd kémcsőkeverővel

alaposan

homogenizáljuk.

Az

így

tízszeresére

higított

szuszpenzióból váltott steril pipettával 1 ml-t újabb 9 ml steril vízbe pipettázunk (102 hígítás). A műveletet addig folytatjuk, míg a higított szuszpenzió 1 ml-e nagy valószínűséggel már 100 – nál kevesebb sejtet tartalmaz.

A táptalaj előkészítése: A megfelelő táptalajt vízfürdőben vagy mikrohullámú sütőben csomómentesen felolvasztjuk, az esetleges adalékanyagokkal kiegészítjük, majd 46-48

o

C-ra

visszahűtjük.

A táptalaj beoltása: A beoltás kétféle, közel azonos értékű technikával végezhető. A B módszer előnye, hogy az agarlemezek előre elkészíthetők, valamint egyes mikrobacsoportok esetén (pl. penészgombák) a felületi tenyésztés gyorsabb növekedést biztosít. Hátránya azonban, hogy csak tízszer nagyobb sejtkoncentráció kimutatására alkalmas, mint az A módszer.

A-módszer: lemezöntés 1 ml mintával A vizsgálati anyagból, illetve a hígítási sor tagjaiból 1-1 ml-t aszeptikus körülmények között steril Petri-csészébe pipettázunk, hígítási fokozatonként 2-2 párhuzamos lemezt alkalmazva (a hígítási fokozatot a csészék fedelén előzetesen feljegyezzük). Ezután a megolvasztott és visszahűtött agar táptalajból kb. 15 ml-t öntünk a csészékbe és az asztalon, váltott irányú körkörös mozgatással a szuszpenziót a táptalajjal alaposan elkeverjük, ügyelve arra, hogy az agar a csésze falára ne csapódjon fel. A táptalaj megszilárdulása után a csészéket megfordítva termosztátba helyezzük.

224

Megjegyzés: 50 oC feletti agarhőmérseklet a sejteket károsítja, másrészt az agar táptalaj 45 oC alatt azonnal dermed, ezért a műveletet gyorsan kell végezni.

B-módszer: felületi szélesztés 0,1 ml mintából Az agart áptalajt üres, steril Petri-csészékbe öntjük és hagyjuk megdermedni. Ezután a vizsgálati anyagból, illetve a hígítási sorozat tagjaiból 0,1-0,1 mlt aszeptikus körülmények között az agarlemezek felületére pipettázunk, hígítási fokozatonként 2-2 párhuzamos lemezt alkalmazva. A felvitt szuszpenziót alkoholba mártott, lelángolt, majd visszahűtött (célszerűen meghajlított) üvegbottal a táptalaj felületén egyenletesen elszélesztjük. A csészéket megfordítva termosztátba helyezzük. Megjegyzés: A táptalaj előzetes visszahűtésének a B-módszer

esetében a csésze fedelén

bekövetkező páralecsapódás mérséklése céljából van jelentősége. Szoliter telepek biztonsággal csak akkor nyerhetők, ha a szélesztést kondenzvíztől mentes lemezfelületre végezzük. Ez elősegíthető azzal, ha a kiöntött lemezeket lamináris boxban nyitott fedéllel néhány percig szikkasztjuk, vagy a lemezek kiöntését az oltás előtti napon végezzük. 1.4.1.4. Értékelés

A mikrobacsoportra előírt tenyésztési idő után megszámoljuk a telepeket. Az eredmény megadásához lehetőség szerint azokat a lemezeket vesszük figyelembe, amelyeken a telepszám 30 és 300 között van. Ha a telepszám minden csészében kisebb 30–nál, tájékoztató értékként a legalacsonyabb hígítási szint eredményét vesszük figyelembe. Pontos vizsgálat céljából ilyenkor a leoltást értelemszerűen kisebb hígításból, hígítás nélkül vagy membránszűréssel megismételjük. Az A-módszer esetén az adott hígítási szint párhuzamos csészéiben kapott telepszámok számtani átlagát megszorozzuk a hígítási fokozattal és az eredményt normálalakban (10 hatványának szorzataként) egy tizedesjegyre kerekítve, sejt/ml-ben (vagy CFU/ml-ben) adjuk meg.

225

A B-módszer alkalmazása esetén a hígítási fokozaton kívül további 10 -szeres szorzást végzünk, mivel a kioltás itt csak 0,1 ml –rel végeztünk. Ha a minta-előkészítés során további hígítást is alkalmaztunk (pl. öblítéses vizsgálatok), természetesen ezt is figyelembe vesszük a számításkor. Értékelhető, tehát nullánál nagyobb telepszám esetén az eredmény - szükség szerint - nagyobb mintamennyiségre (pl. 1 literre) is felszorozható, de a nulla telepszámot mindig a ténylegesen vizsgált mintamennyiségre kell megadni, nagyobb mintamennyiségre vonatkoztatva csak egyenlőtlenség formájában adhatjuk meg. Pl. ha a B-módszerrel a hígítatlan mintában sem kaptunk telepszámot, az eredmény megadása: 0/0,1 ml , azaz <10 / ml

Példák az eredmény kiszámítására A Petri-csészékben leolvasott telepszám: Higítás/telepszám:

a, 100/>500

101/312

102/38

103/4

b, 100/>500

101/385

102/26

103/3

1. Borminta

A-módszer esetén a fenti telepszámokból számított eredmény: (38+26)/2 x 102 = 32 x 102 = 3,2 x 103 sejt / ml B-módszer esetén a fenti telepszámokból számított eredmény: (38+26)/2 x 10 x 102 = 3,2 x 104 sejt / ml 2. Dugóminta

5 db dugót 50 ml steril vízzel öblítettünk, majd az öblítővíz vizsgálatából az A-módszerrel a fenti eredményeket kaptuk. Az eredményt egy db dugóra számítjuk át: 3,2x 103 (sejt/ml) x50 (ml)/ 5 (db)= 3,2 x 104 (sejt / db dugó) Megjegyzés: Az öblítővíz mennyisége lemezöntéses módszer esetén alapvetően megszabja a módszer kimutathatósági határát, ezért ilyen esetben minél kisebb hígításra célszerű törekedni az öblítés során (pl. 5 elemű dugómintát 50 ml vízben öblítve, 1 ml öblítővíz kioltásával a módszer kimutathatósági határa 10 sejt/dugó, 100 ml vízzel öblítve azonban csak 20 sejt/dugó). Öblítéses mintákból kis sejtszám esetén pontos eredmény csak membránszűréssel kapható.

226

1.4.2. Membránszűréses módszer 1.4.2.1. A módszer elve

Azokban a mintákban, amelyek 1 ml-ében nem található élő sejt, lemezöntéssel nem kapunk számolható eredményt. Ilyenkor nagyobb mennyiségű mintát megfelelő pórusméretű membránon átszűrünk, ezzel a mintában található sejteket a szűrőmembrán felületén összegyűjtjük. A táptalaj felületére helyezett membránon kitenyésztett telepek számából a leszűrt mintamennyiség ismeretében következtetünk az eredeti sejtkoncentrációra. 1.4.2.2. Anyagok

- Steril szűrőmembránok Cellulóz acetát, cellulóz nitrát vagy kevert észter alapanyagból, a szűrőkészülék típusától függően 47 - 50 mm átmérővel, a vizsgált mikrobacsoportnak megfelelő pórusmérettel ( 0,2 /0,45 - 0,8 µm). - Táptalajok A vizsgált mikrobacsoportnak megfelelő táptalajok a 2.2.2., 2.4.2., 2.5.2. vagy 2.6.2. szakaszok szerint. A szűrőmembránok inkubálásához elegendő 60 – 70 mm átmérőjű Petri-csészék alkalmazása, melyekbe 6-8 ml táptalajt adagolunk. Membránszűréses vizsgálatok céljára egyes táptalajok adszorbens korongra felvitt és megszárított állapotban is kaphatók (pl. Sartorius, Millipore stb.), ezeket felhasználás előtt steril vízzel át kell nedvesíteni. További lehetőség a táptalajok folyékony formában való felvitele steril, üres adszorbens korongra közvetlenül a vizsgálat előtt. - Alkohol, 96% (V/V)-os - Vatta, üvegbotra felsodorva 1.4.2.3. A vizsgálat menete

A membrán-szűrőkészülék előkészítése: Az alaposan átmosott szűrőkészüléket minden egyes szűrés előtt gondosan sterilezzük. Első lépésben a szétszerelt szűrőkészülék lyukacsos fémszűrő betétjét, valamint felfordított helyzetben - a tölcsérnek a membrán leszorítására szolgáló peremét alkohollal lelángoljuk. Ezután a tölcsért felszereljük, majd alkohollal bőségesen megnedvesítve belsejét is lelángoljuk, a fedél belső felületét alkohollal áttöröljük és felhelyezzük, a rajta lévő levegőző nyílásba alkohollal átitatott vattát helyezünk.

227

(Alternatív megoldásként a teljes szűrőkészüléket forrásban lévő vízfürdőbe merítjük 10 percre, majd forrón összeszereljük.) Lehülés után, a tölcsért megemelve, a fémszűrő betétre lelángolt csipesszel megfelelő pórusméretű steril szűrőmembránt helyezünk, majd a tölcsért visszazárjuk. Ha a membrán nem gyárilag sterilezett, a szűrés előtt desztillált vízben 30 percig forralással csírátlanítjuk. (A sterilezés cellulóz-acetát membránok esetében nedves vattát tartalmazó Petri-csészében, autoklávban is végezhető 121 oC-on, 20 percig.)

Szűrés: A vizsgálati anyag megfelelő mennyiségét (10 – 500 ml) aszeptikusan a szűrőtölcsérbe töltjük, majd vákuumszivattyúval átszívatjuk. Ezután a tölcsér belsejét kb. 10 - 20 ml steril vízzel körbe öblítjük, hogy a falán tapadt sejteket is a szűrőlapra mossuk, majd a folyadékot átszívatjuk. A membránt lelángolt csipesszel Petri-csészébe kiöntött táptalaj felületére helyezzük oly módon, hogy a szűrőfelület felfelé nézzen és a membrán és a táptalaj között légbuborék ne maradjon. A csészéket fordított helyzetben termosztátba helyezzük. Készen kapható száraz táptalajkorongok esetén a szűrést megelőzően a korongot az előírt mennyiségű steril vízzel és az esetleg szükséges adalékanyagokkal (pl. borkősav vagy antibiotikum-törzsoldat) Petri-csészében átitatjuk, majd ezután helyezzük rá a szűrőmembránt. Ilyenkor a csészéket álló helyzetben inkubáljuk. 1.4.2.4. Értékelés

A membrán felületén kifejlődött telepeket az előírt tenyésztési idő után leszámoljuk és az élősejtszámot a leszűrt mintamennyiségre vonatkoztatva adjuk meg (pl. sejt/100 ml vagy CFU/100 ml). A számoláshoz lupét vagy sztereo-binokuláris mikroszkópot használva az inkubálási idő legalább egy nappal csökkenthető. Öblítővízből végzett vizsgálatkor (pl. dugó, üres palack, felületek) az eredményt értelemszerűen sejt/dugó, sejt/palack, sejt/cm2 stb. értékben adjuk meg, vagy erre számítjuk át.

Megjegyzés: Értékelhető telepszám esetén az eredmény – szükség szerint– nagyobb mintamennyiségre, pl. 1 literre vagy 1 palackra is felszorozható, de a nulla telepszám nagyobb mintamennyiségre vonatkoztatva csak egyenlőtlenség formájában adható meg. 228

Pl.: 0 sejt/50 ml esetén az eredmény l l-re átszámítva: <20 /l.

229

MAGYAR BORKÖNYV BOROK VIZSGÁLATA 2. MIKROBIOLÓGIAI VIZSGÁLATOK 2.2.

2. 2.1.

Mikrobacsoportok meghatározási módszerei

Mikrobacsoportok meghatározási módszerei Mikrobacsoportok általános jellemzése Az élesztők savanyú közeget jól toleráló, vegetatív úton sarjadzással vagy hasadással

szaporodó egysejtű gombák. Egyes fajaik obligát aerobok, mások a cukrokat erjesztéssel is hasznosítják (fakultatív anaerobok). Az erjesztésben és egyes speciális borászati technológiákban kiemelt pozitív szerepük van, másrészt romlásokozók és a palackos borokban utóerjedést, üledékképződést okozhatnak. A penészgombák savtűrő, konidiumokkal vagy sporangiospórákkal szaporodó, obligát

aerob fonalas gombák. Borászati szerepük kevés kivétellel negatív. A késztermékek minőségét az élesztőknél kevésbé veszélyeztetik, de dugóízt okozhatnak és jelzik a palackozás mikrobiológiai hiányosságait. A savképző baktériumok a must, vagy a bor pH-ján szaporodásra képes baktériumok,

amelyek a cukrokból tejsavat és/vagy ecetsavat és egyéb káros anyagokat képeznek. Rendszertanilag két nagy csoportba sorolhatók. - A tejsavbaktériumok a savképző baktériumokon belül olyan Gram-pozitív pálcák vagy kokkuszok, amelyek a cukrokat tejsavas erjedéssel bontják. Aerotoleráns anaerob szervezetek, katalázpróbájuk negatív. Általában romlásokozók, de egyes fajok szerepe a biológiai almasavbomlás során hasznos is lehet. - Az ecetsavbaktériumok a savképző baktériumokon belül obligát aerob, Gramnegatív, kataláz pozitív pálcák. Súlyos romlásokozók, mert alkoholból és cukrokból ecetsavat képeznek.

230

2.2

Az élesztők és a penészgombák számának meghatározása tenyésztéses eljárásokkal

2.2.1. A módszer elve Az élesztő- és penészgombákat egyszerű összetételű komplett táptalajokon tenyésztjük,

amelyeken

a

baktériumok

szaporodását

savanyítással

vagy

antibiotikummal gátoljuk. Az élesztő- és penészgombatelepek egymástól szemmel jól megkülönböztethetők és egymás mellett számolhatók. 2.2.2. Táptalajok A tenyésztés során összehasonlítható eredményt ad az élesztőkivonat-glükóz agar, az élesztőkivonat-pepton-glükóz agar (YEPD), valamint a sörcefre agar (Würze- vagy Wort-agar). A táptalajok készen vagy poralakú táptalajként is beszerezhetők. 2.2.2.1. Élesztőkivonat -glükóz agar glükóz

20 g

élesztőkivonat 5 g agar

20 g

desztillált víz 1000 ml Sterilezés: 121 oC-on 20 percig. 2.2.2.2. Élesztőkivonat - pepton - glükóz agar(YEPD ) glükóz

20 g

élesztőkivonat 10 g pepton

10 g

agar

20 g

desztillált víz 1000 ml Sterilezés: 121 oC-on 20 percig. 2.2.2.3. Sörcefre agar (Wort /Würze-agar) Kész táptalajként érdemes beszerezni (pl. Difco, Merck, Oxoid stb.) 2.2.2.4. A táptalajok szelektivitása A táptalajok szelektivitása kétféle módszerrel biztosítható:

231

A. módszer Savanyítás 10%-os steril borkősavoldattal 3,5-4 pH érték közé

A savanyítást az agar felolvasztása után, közvetlenül a lemezöntés előtt végezzük. A savanyított agartáptalaj már nem sterilezhető, mert az agar savanyú közegben elhidrolizál és a táptalaj nem szilárdul meg. B. módszer Antibiotikum adagolása

100 mg/l klóramfenikol, amely autoklávozás előtt is a táptalajhoz adható. Helyettesíthető 100 mg/l oxitetraciklinnel, amelyet steril vízben oldva, felhasználás előtt adunk a táptalajhoz. Az élesztőkivonat-glükóz agar többféle szelektív, antibiotikumos változata is készen kapható (pl. OGYE, Chloramfenicol Agar, RoseBengal Chloramfenicol Agar stb.) 2.2.3. A vizsgálat menete Késztermék, dugó, palack vizsgálatát membránszűréssel végezzük (1.4.2. szakasz szerint). Késztermékből legalább 100 ml-t, az öblítéses vizsgálatok esetén az öblítővíz teljes mennyiségét leszűrjük. A szűrőmembrán pórusmérete ne legyen nagyobb 0,8 µm-nél. Az inkubálást szelektív táptalajon, 28 oC-on végezzük. Ha a vizsgálat célja az élesztőszám meghatározása, akkor az inkubációs idő 48-72 óra. A penészszám egyidejű meghatározása esetén az értékelést 2 nap múlva megismételjük.

Egyéb mintákból a meghatározást a várható sejtkoncentrációtól függően hígítással, lemezöntéssel (1.4.1. szakasz) vagy membránszűréssel (1.4.2.szakasz) végezzük a fenti táptalajok egyikén. Lemezöntéses vizsgálatok esetén a felületi szélesztést (1.4.1.3. szakasz B-módszer) kell alkalmazni akkor, ha a penészszámot is pontosan meg akarjuk határozni. 2.2.4. Értékelés

Az élesztőszámot és a penészszámot külön-külön adjuk meg a telepek eltérő alaktani tulajdonságai alapján. Az élesztőtelepek felülete sima vagy enyhén

232

ráncos, fényes, tompa fényű vagy matt, színe többnyire fehér vagy krémszínű, de lehet barnás, rózsaszín vagy piros. A penésztelepek felülete jellegzetesen “bolyhos”, gyepszerű, színe kezdetben fehér, majd széles skálán változik, többnyire zöld, szürke vagy barna. Megjegyzés: Ha a táptalaj szelektivitását antibiotikum nélkül, savanyítással biztosítjuk, néhány savképző (ennélfogva savtűrő) baktériumfaj három nap alatt gyenge növekedést mutathat a táptalajon, különösen akkor, ha a minta élesztőre és penészgombára negatív. A baktériumtelepek azonban ezeken a táptalajokon három nap után sem nagyobbak 1 mm-nél, általában jellegzetesen áttetszőek, esetleg barnák és savanyú vagy kifejezetten ecetes szagúak. Ilyenkor a gyanús telepekből mikroszkópos vizsgálatot kell végezni. Az eredményt lemezöntés esetén az 1.4.1.4., membránszűrés esetén a 1.4.2.4. szakaszok szerint adjuk meg. 2.3.

Az élesztőszám meghatározása mikroszkópos számlálással

2.3.1. A módszer elve

Speciálisan csiszolt, pontosan ismert térfogatú vérsejtszámláló kamra celláiban mikroszkóp alatt megszámoljuk a sejteket, és a cella térfogatának ismeretében az egy cellára jutó átlagos sejtszámot sejt/ml –re számítjuk át. Megfelelő festéssel az élő és holt élesztősejtek is megkülönböztethetők és külön számolhatók. A módszer csak viszonylag nagy sejtkoncentráció (>5 x 105 sejt/ml) esetén alkalmazható, ezért elsősorban fajélesztő készítmények, anyaélesztő, erjedő mustok, valamint újborok vizsgálatára alkalmas. (Baktériumsejtek – kis méretük és intenzív hőmozgásuk miatt – ezzel a módszerrel nem vagy csak nagyon pontatlanul számolhatók.)

233

2.3.2. Speciális eszközök és anyagok 2.3.2.1. Bürker-kamra, vagy ezzel egyenértékű számlálókamra 2.3.2.2. Metilénkék 0,03 %-os vizes oldata.

0,03 g metilénkéket 100 ml desztillált vízben oldunk, majd szűrőpapíron leszűrjük. Hűvös helyen, fénytől védve több hónapig tárolható, de felhasználás előtt újra szűrjük meg. 2.3.3. A vizsgálat 2.3.3.1. Előkészítõ műveletek

Szárított élesztőkészítmény 1 g-ját 10 ml 35 – 40 oC-os csapvízben 15 percig rehidratáljuk (tízszeres hígítás), majd az alaposan homogenizált szuszpenzióból további százszoros (összesen ezerszeres) hígítást végzünk. Folyékony anyaélesztő, must, újbor általában hígítás nélkül, közvetlenül vizsgálható. 2.3.3.2. Az élő és a holt sejtek elkülönítése metilénkékes festéssel

A vizsgálati anyag 0,5 –1 ml-ét azonos mennyiségű metilénkékfesték-oldattal alaposan elkeverjük (kétszeres hígítás), majd kb. 5 perc után a szuszpenziót mikroszkóppal vizsgáljuk. A holt sejteket a metilénkékfesték kékre - kékeszöldre színezi, míg az élő sejtek enzimei a festéket redukálják, így színtelenek maradnak. 2.3.3.3. Bürker-kamrás sejtszámolás

Az alaposan homogenizált (akár festett, akár festetlen) vizsgálati anyag egy cseppjét tiszta, száraz Bürker-kamrába töltjük oly módon, hogy az üresen lezárt kamra fedőlemezének széléhez érintjük a pipetta hegyét, amíg a szuszpenzió a kamra kapillárisaiba egyenletesen beszívódik. Egy tárgylemezen két darab Bürker-kamra-csiszolat található, ezeket párhuzamosként kezeljük. Mikroszkóppal, 20-as vagy 40-es objektívlencsével megkeressük a kamra rácshálózatát. A Bürker-kamra háromféle elemi idomot (cellát) tartalmaz, amelyek közül a sejtkoncentrációtól függően szabadon választhatjuk azt a cellát, amelyben a sejtek számlálását végezzük. Pontos és gyors számoláshoz célszerű azt az idomot választani,

234

amelyben a sejtszám 10 körül van. A tárgyasztallal átlósan mozogva legalább annyi cellát számolunk meg, amely összesen 500 sejtet tartalmaz. Festett preparátum esetén azonos cellákban külön-külön számoljuk a színtelen(élő) és a kék (holt) sejteket. A cellák két-két határoló vonalára eső sejteket következetesen beszámítjuk, a másik két vonalra eső sejteket pedig figyelmen kívül hagyjuk. Az asztalon való haladás útjába eső üres, valamint a nagy sejtcsomókat tartalmazó cellákat egyaránt figyelembe vesszük, tehát a cellák között szubjektíven nem válogatunk. A sarjadzó sejteket egy sejtnek számoljuk. A feljegyzett sejtszámokat összeadjuk és elosztjuk a megvizsgált cellák számával, így megkapjuk az adott idomra vonatkozó átlagos sejtszámot. 2.3.4. Az eredmény megadása

A Bürker-kamra különböző elemi celláinak térfogata pontosan ismert (0,004, 0,001, valamint 0,00025 mikroliter), ennek alapján az adott idomban mért átlagos sejtszám (Xátl.) a megfelelő szorzófaktorral átszámítható sejt /ml –re, azaz a Bürker-kamrába betöltött szuszpenzió sejtkoncentrációjára. Az eredeti mintára vonatkoztatott sejtkoncentrációhoz (N) figyelembe kell venni az esetleges előzetes hígításokat, illetve metilénkékes festés esetén a festékkel végzett hígítást is. N (sejt/ml vagy sejt/g) = Xátl x F x H ahol: F

a Bürker-kamra különböző cella-típusaihoz tartozó szorzófaktor: Nagy kamra: 2,5 x 105 Téglalap alakú kamra: 1 x 106 Kis kamra: 4 x 106

H

az alkalmazott hígítás mértéke

Festés nélküli vizsgálat esetén az összes sejtszámot adjuk meg. Metilénkékes festés után az összes sejtszámon kívül tetszőlegesen megadhatjuk az élő és/vagy a holt sejtek számát, illetve az összes sejthez viszonyított százalékos arányukat.

235

Példa az eredmény megadására: Szárított élesztőkészítményt 1000-szeresre higítottunk, majd metilénkékkel 1:1 arányban festettük (újabb 2-szeres hígítás). Bürker kamrában, a tégla alakú cellákban átlagosan 8,2 db élő sejtet és 0,7 db holt sejtet számoltunk. A készítmény sejtkoncentrációja: Összes sejtszám: 8,9 x 106 x 2 x 103 = 1,78 x 1010 sejt/g Élő sejtszám: 8,2 x 106 x 2 x 103 = 1,64 x 1010 sejt/g (92,1%) Holt sejtszám: 0,7 x 106 x 2 x 103 = 1,4 x 109 sejt/g ( 7,9 %) 2.4.

Az összes savképző baktériumok számának meghatározása


A savképző baktériumok (tejsav- és ecetsavbaktériumok) speciális összetételű, tápanyagban gazdag táptalajokon aerob körülmények között együttesen kitenyészthetők, ha az esetleg jelen lévő, gyorsabban növekvő élesztő- és penészgombákat antibiotikummal gátoljuk. A baktériumtelepek savtermelő képességét a táptalajhoz adott indikátor színváltása jelzi. 2.4.2. Táptalajok

A bor egyes jellemző tejsavbaktériumai (pl. Leuconostoc oenos, Lactobacillus fructivorans) rosszul tenyészthetők az élelmiszeriparban általánosan használt tejsavbaktérium-táptalajokon (pl. MRS agar). A

következő

–

paradicsomlével

kiegészített

-

táptalajok

egymással

összehasonlítható eredményt adnak: 2.4.2.1. Dubois-féle paradicsomagar (104-es táptalaj)

élesztőkivonat

5g

pepton

5g

L-almasav

3g

magnézium-szulfát

0,05 g

mangán-szulfát

0,05 g

aktidion

0,05 g

236

agar

20 g

paradicsomlé

250 ml

Tween 80

1 ml

desztillált víz

1000 ml-ig 2.4.2.2. TJ (Tomato Juice)- agar

glükóz

5g

tripton

2g

pepton

5g

élesztőkivonat

5g

májkivonat

1g

aktidion

0,05 g

agar

20 g

paradicsomlé

400 ml

Tween 80

1 ml

desztillált víz

1000 ml -ig 2.4.2.3. Módosított MRS-TJ-agar

pepton

10 g

élesztőkivonat

4g

húskivonat

8g

glükóz

20 g

nátrium-acetát

2g

triammónium-citrát

5g

magnézium-szulfát

0,2 g

mangán-szulfát

0,05 g

aktidion

0,05 g

paradicsomlé

250 ml

Tween-80

1 ml

desztillált víz

1000 ml-ig

2.4.2.4. Táptalajok készítése:

237

A tartósítószer-mentes natúr paradicsomlé vagy négyszeresére higított (eredetileg 28 – 30 ref%-os) konzerv paradicsompüré durva rostját centrifugálással vagy durva szűrőpapírral eltávolítjuk. Az egyéb komponenseket és az agart kb. 700 ml (TJ agar esetén 500 ml) desztillált vízben forralással feloldjuk, majd a megfelelő mennyiségű paradicsomlét az oldathoz keverjük. A pH-t 1 M NaOH-val vagy 1 M sósavval 5,2 – 5,4 közé állítjuk, majd literenként 3

ml

1,5%-os

brómkrezolzöld-indikátort

adunk

a

táptalajhoz

(1,5

g

brómkrezolzöld 100 ml 96% (V/V)-os alkoholban oldva), végül a térfogatot pontosan 1 literre kiegészítjük. A táptalaj színe ezen a pH értéken fűzöld. A sterilezést 121 oC-on 20 percig végezzük. Megjegyzés: Aktidion (cikloheximid) helyett az élesztők és penészgombák gátlására pimaricin (100 mg/l) vagy nystatin (50 mg/l) is alkalmazható. Az előbbit steril vízben, az utóbbit 96% (V/V)-os alkoholban oldva, frissen készített 0,2%-os törzsoldatból adagoljuk a táptalajhoz felhasználás előtt (nem autoklávozhatók). 2.4.3. A vizsgálat menete

A várt baktériumszámtól, illetve a kívánt érzékenységtől függően lemezöntést vagy membránszűrést végzünk, 0,2–0,45 µm pórusméretű membránnal az 1.4.1. illetve az 1.4.2. szakasz szerint. Az inkubálást 28 oC-on 10 napig végezzük. 2.4.4. Értékelés Az értékelést először 3-4 nap múlva végezzük a savképző telepek megjelölésével, majd 10 nap után megismételjük.

A táptalajok gyenge szelektivitása miatt nem savképző (a bor szempontjából jelentéktelen) baktériumok is kinőhetnek a lemezeken. A savtermelő képességet a telep körüli sárga udvar, nagy telepszám esetén az egész lemez lesárgulása jelzi. Egyes gyorsabb növekedésű ecetsav-baktériumok körül a táptalaj idővel visszakékülhet, ezért fontos az első leolvasás. Az értékeléskor az 1 mm átmérőt meghaladó, de savképzést egyik leolvasás során sem mutató telepeket nem vesszük figyelembe. A kisebb méretű, tűhegynyi telepek esetében a savképzés nem mindig észlelhető (ezek valószínűleg gyenge növekedésű hetero-fermentatív tejsavbaktériumok). 238

További vizsgálatok ilyen esetben: Gram-festés, kataláz-próba és mikroszkópos vizsgálat (2.7. szakasz). A vizsgálati eredmények alapján a szemmel láthatóan még nem savképző telepek közül is savképző baktériumnak tekintjük a Gram-pozitív, kataláznegatív pálcákat vagy kokkuszokat. Az eredményt az 1.4.1.4 és az 1.4.2.4. szakaszok szerint adjuk meg.

239

2.5.

A tejsavbaktérium-szám célzott meghatározása


A tejsavbaktériumok aerotoleráns anaerob baktériumok, ezért a szigorúan aerob ecetsav-baktériumoktól anaerob tenyésztéssel elkülöníthetők. 2.5.2. Táptalajok és speciális eszközök 2.5.2.1. Táptalajok

A vizsgálathoz ugyanazok a táptalajok használhatók, mint az összes savképző baktériumok számának meghatározásához (2.4.2. szakasz). Az élesztők gátlására ez esetben is szükség van, mivel az élesztők egy részét az anaerob tenyésztés nem szorítja vissza. 2.5.2.2. Eszközök anaerob tenyésztési körülmények biztosításához Légmentesen zárható edényzet:

Az anaerob tenyésztésre alkalmas: pl. anaerob “jar" vagy laboratóriumi exszikkátor, amelybe a Petri-csészék mellé helyezett gázfejlesztő készlettel oxigénszegény, széndioxidban gazdag légteret biztosítunk vegyszeres úton (Pl. Oxoid, Merck, BBL, bioMérieux stb. készletek).

Anaerob feltételeket biztosító edényzet Hermetikusan lezárt Petri-csészében, a felfordított csésze fedelébe vagy az álló helyzetű dupla fenekű csészébe helyezett pirogallollal is megteremthetők (pl. Sartorius TJ-táptalajkorong). 2.5.3. A vizsgálat menete

Megegyezik a 2.4.3. szakaszban leírt vizsgálattal, de a tenyésztést levegőtől elzártan, anaerob körülmények között végezzük. 2.5.4. Értékelés

Tíz nap múlva leolvassuk a telepszámot és az 1.4.1.4. vagy az 1.4.2.4. szakaszban leírtak szerint, tejsavbaktérium-számként adjuk meg.

240

2.6.

Az ecetsavbaktérium-szám célzott meghatározása

2.6.1. A módszer elve A borban előforduló ecetsavbaktériumok (ellentétben a tejsavbaktériumokkal) egyedüli szénforrásként etil-alkoholt tartalmazó táptalajon szelektíven tenyészthetők. 2.6.2. Táptalaj Élesztőkivonat - etanol agar (Carr táptalaj)

Élesztőkivonat Agar

30 g 20 g

Brómkrezolzöldindikátor 2,2%-os alkoholos oldata Desztillált víz

1 ml 1000 ml

Sterilezés 121 oC-on 15 percig. Felhasználás előtt a táptalajhoz membránszűréssel (0,45 µm) sterilezett etil-alkoholt adunk 2% (V/V) végkoncentrációban (pl. 15% (V/V)-os alkoholból 15 ml táptalajhoz 2 ml-t). 2.6.3. A vizsgálat menete A mintából a várható baktériumszámtól függően felületi szélesztéssel lemezöntést (1.4.1.3. szakasz, B-módszer) vagy membránszűrést (1.4.2.3. szakasz) végzünk. A membrán pórusmérete 0,45 µm. A lemezeket 28 oC-on 3 napig inkubáljuk. 2.6.4. Értékelés A kifejlődött kék, zöld vagy áttetsző, savképző (sárga udvarral körülvett), 1-2 mm átmérőjű telepekből mikroszkópos ellenőrző vizsgálatot végzünk, hogy az esetlegesen előforduló élesztőtelepeket kizárjuk. Az eredményt ecetsavbaktérium-számként, az 1.4.1.4. vagy 1.4.2.4. szakasz szerint adjuk meg.

241

2.7.

A tejsav- és ecetsavbaktériumok elkülönítésére alkalmas megerősítő vizsgálatok

2.7.1. Natív készítmény mikroszkópos vizsgálata

A szoliter savképző telepből vagy feltételezetten savképző tűtelepből lelángolt oltókaccsal vagy tűvel mintát veszünk, és tárgylemezre cseppentett vízben szuszpendáljuk. A fedőlemezzel lezárt preparátumot mikroszkóppal, immerziós lencsével (immerziós olajjal lefedve 100-szoros nagyítású objektívvel) vagy fáziskontraszt megvilágításban 40-szeres nagyítású Ph-objektívvel vizsgáljuk. − A tejsavbaktériumok önálló mozgást nem végző pálca vagy gömb (kokkusz) alakú

baktériumok, gyakran szabályos sejthalmazokba (pár, tetrád, lánc) rendeződve. − − Az ecetsavbaktériumok többnyire vaskos rövid pálcák egyesével, párban vagy

láncban. A hosszabb sejtláncokban szabálytalan, nagyméretű sejtek is előfordulhatnak. A borokban előforduló törzsek általában mozdulatlanok, de ritkán önálló mozgás is megfigyelhető. 2.7.2. Gram-festés 2.7.2.1. A módszer elve

A valódi baktériumok sejtfaluk kémiai összetétele alapján két nagy csoportba sorolhatók. A Gram- pozitív sejtfal a jód-pararozanilin festékkomplexet erősen megköti, a Gram-negatív sejtfalból azonban a festék alkohollal kimosható. A tejsavbaktériumok Gram-pozitív, az ecetsavbaktériumok Gram-negatív festődést mutatnak. 2.7.2.2. Anyagok

Kristályibolyafesték-oldat: A-oldat: 2g kristályibolya (vagy genciánibolya) 20 ml 96 V/V%-os alkoholban oldva. B-oldat: 0,08 g ammónium-oxalát 80 ml desztillált vízben oldva.

242

A két oldatot közvetlenül felhasználás előtt öntsük össze és szűrjük meg. Az elegyített, kész festék fénytől védve csak 1-2 hétig tárolható. Lugololdat: jód

1g

kálium-jodid

2g

desztillált víz

300 ml

A kálium-jodidot, majd a jódot először csak kis mennyiségű (4-5 ml ) vízben oldjuk, majd teljes feloldódás után az oldatot 300 ml-re kiegészítjük és megszűrjük. Barna üvegben hosszabb ideig tárolható (a szalmasárga színű oldat már nem megfelelő).

Szafraninoldat szafranin

0,25 g

etil-alkohol, 96% (V/V)-os

10 ml

desztillált víz

90 ml

A szafranint alkoholban oldjuk, majd ezután töltsük fel desztillált vízzel. Az oldatot fénytől védve tároljuk. Felhasználás előtt szűrjük meg.

Etilalkohol, 96% (V/V)-os 2.7.2.3. A vizsgálat menete

A

baktériumtelepből

egy

kacsnyi

mennyiséget

tárgylemezen,

vízcseppben

egyenletesen elszélesztünk, majd levegőn hagyjuk megszáradni. A száraz kenetet láng felett háromszor áthúzva fixáljuk, majd 1-2 csepp kristályibolya oldattal lefedjük. Három perc múlva a felesleges festéket leöntjük, a preparátumot folyó csapvízzel óvatosan leöblítjük, a vizet szűrőpapírral leitatjuk, majd 1-2 csepp lugololdatot teszünk a kenetre. Egy perc várakozás után a készítményből a festéket 96% (V/V)-os alkohollal kimossuk mindaddig, míg a lecsepegő alkohol színtelen nem lesz. Ezután a készítményt csapvízzel ismét öblítjük, majd 1-2 csepp szafraninnal 30 másodpercig kontrasztfestést végzünk. Vizes öblítés majd teljes száradás után a készítményre immerziós olajat cseppentünk és mikroszkóppal kb. ezerszeres nagyításban (immerziós objektívvel) vizsgáljuk. 2.7.2.4. Értékelés

Gram-pozitívnak minősítjük a lilára - kékesfeketére színeződött sejteket. A Gram-negatív sejtek a kontrasztfestés következtében rózsaszínűek.

243

2.7.3. Katalázpróba 2.7.3.1. A módszer elve

Az aerob ecetsavbaktériumok rendelkeznek katalázenzimmel, amely a hidrogén-peroxidot vízre és oxigénre bontja. A bomlás következtében felszabaduló oxigén szemmel jól érzékelhető. Az anaerob tejsavbaktériumok a hidrogén-peroxidot nem bontják. 2.7.3.2. Anyagok

5 %-os hidrogén-peroxid-oldat, frissen készítve. 2.7.3.3. A vizsgálat menete

A próbát csak szoliter telepből végezzük, mert kevert tenyészet hamis pozitív eredményt adhat. A baktériumkolóniából egy kacsnyi mennyiséget tárgylemezre cseppentett hidrogén-peroxid-oldatba szuszpendálunk és kb. fél perc múlva szemmel értékeljük. 2.7.3.4. Értékelés

Kataláz- pozítívnak tekintjük a tenyészetet, ha abban határozott pezsgés, esetleg habzás látható. Kataláz-negatív a tenyészet, ha abban pezsgés nem észlelhető, legfeljebb a hidrogénperoxid önbomlása következtében kismérvű buborékképződés mutatkozik.

244

2. fejezet EGYÉB VIZSGÁLATOK Tartalomjegyzék

3.3.1. Borok palackállóságának megállapítása 1. Meghatározás 2. A módszer elve 3. Alkalmazási terület 4. Eszközök 5. A minta előkészítése 6. Az eljárás végrehajtása 6.1. Hidegpróba 6.2. Melegpróba 7. Levegőpróba 8. Rázópróba 9. Az eredmények értékelése Melléklet: Borüledékek azonosítása 1. FOGALOMMEGHATÁROZÁS 2. A MÓDSZEREK ÁLTALÁNOS ELVE 3. ALKALMAZÁSI TERÜLET 4. ESZKÖZÖK 5. A MINTA ELŐKÉSZÍTÉSE 6. MIKROSZKÓPOS VIZSGÁLAT 7. A KRISTÁLYOS ÜLEDÉKEK AZONOSÍTÁSA 8. AZ AMORF ÜLEDÉKEK AZONOSÍTÁSA 1)a táblázat : Biológiai borüledékek makroszkópos és mikroszkópos megjelenése 1)b táblázat: Kristályos borüledékek makroszkópos és mikroszkópos megjelenése

346 346 346 346 347 347 347 348 349 349 349

349

1)c táblázat: Néhány fizikai (technológiai) üledék makroszkópos és mikroszkópos

349 350 350 350 350 351 351 352 13 13

14

megjelenése 2. táblázat: A leggyakrabban előforduló amorf üledékek morfológiai, fizikai és kémiai

15

tulajdonságai

245

3. EGYÉB VIZSGÁLATOK 3.1.

1.

BOROK PALACKÁLLÓSÁGÁNAK MEGÁLLAPÍTÁSA

Meghatározás Palackálló (stabil) az a palackozott bor, amely szakszerű szállítási, tárolási és fogyasztási

körülmények

mellett

a

vonatkozó

termékleírásokban

meghatározottak szerint tiszta és üledékmentes marad és érzékszervi 2.

tulajdonságai hátrányosan nem változnak meg. A módszer elve A készre kezelt, tiszta bort olyan környezeti hatásoknak (hideg, meleg, levegő, rázás) tesszük ki, amelyek felgyorsítják a palackban természetes úton lassan lejátszódó kémiai és mikrobiológiai folyamatokat. A bort palackállónak tekintjük, ha a különböző behatások nem okoznak benne zavarosodást, üledékképződést vagy egyéb hátrányos elváltozást.

3.

Megjegyzés: A bor komplex kémiai összetételéből adódó mátrixhatások miatt a vizsgálati módszerekkel nagy valószínűséggel becsülhető a bor stabilitása, de teljes biztonsággal nem állapítható meg. Alkalmazási terület A palackállósági vizsgálatokat egyrészt a készre kezelt, palackozásra előkészített borokból végezzük a palackozásra való alkalmasság megállapításához, másrészt a már letöltött késztermékből a tétel várható stabilitásának ellenőrzése céljából.

4.

Eszközök 4.1.

Hűtőszekrény (referencia-módszer) vagy hűtőszekrény mélyhűtő rekesszel, illetve -10 oC-ig szabályozható termosztát (gyors módszerek).

4.2.

Termosztát,

35

o

C-ig

szabályozható

(referencia-módszer)

vagy

55

o

C-ig

szabályozható, illetve vízfürdő, 70 oC-ig szabályozható (gyors módszerek).

4.3. 4.4.

Lineáris rázókészülék Üvegedények (palackozás előtti vizsgálathoz): lombik, becsiszolt dugós, 150 / 200 ml-es vagy színtelen üvegpalack, csavarzáras, 100 ml-es

246

4.5.

Laboratóriumi szűrőkészülék (palackozás előtti vizsgálathoz)

5.

A minta előkészítése A palackozást megelőző vizsgálatok során a pincei tartályból vett homogén, reprezentatív bormintát laboratóriumi szűrőn tükrösre szűrjük, a palackozás során ténylegesen

alkalmazni

kívánt

típusú

(pórusméretű)

szűrőlappal

illetve

szűrőmembránnal, majd színtelen üvegedényekbe (kisméretű palackokba vagy Erlenmeyer-lombikokba) szétadagoljuk. Lepalackozott késztermék vizsgálatakor a próbákat az eredeti töltésű, felbontatlan palackokból végezhetjük. 6.

Az eljárás végrehajtása

6.1.

Hidegpróba

6.1.1. Referencia-módszer Az eredeti töltésű bontatlan palackot vagy a borral töltött és lezárt üvegedényt hűtőszekrényben vagy termosztátban 0 és + 5 oC közötti hőmérsékleten tartjuk 7 napon át. A palackokat naponta felrázzuk, hogy a kristályképződést elősegítsük. Az értékelést hidegen végezzük, mert egyes üledékek szobahőmérsékleten visszaoldódhatnak (az üveg faláról a páralecsapódást letöröljük). A módszer elsősorban a borkősavas sók és egyes termolabilis fehérjék okozta kicsapódások előrejelzésére alkalmas. 6.1.2. Használati módszerek 6.1.2.1. Gyors módszer A borral háromnegyed részig töltött üvegedényt 24 órára –4 oC-os termosztátba helyezzük, közben 1-2 alkalommal felrázzuk. Hidegen értékeljük (az üveg faláról a páralecsapódást letöröljük). 6.1.2.2. Szigorított gyors módszer A borral háromnegyed részig töltött üvegedényt hűtőszekrény mélyhűtő részébe vagy –10 oC-os termosztátba helyezzük és 1-2 alkalommal felrázva, folyamatosan figyelve a bort fagyásig hűtjük. Ezután azonnal áthelyezzük a hűtőszekrény normál légterébe (+4 oC-ra), ahol hagyjuk felengedni és 16-20 óra múlva hidegen értékeljük (az üveg faláról a páralecsapódást letöröljük). Megjegyzés:

247

Ha a bort megfagyasztás után nem távolítjuk el azonnal a fagyasztó térből, a próba gyakran eredményezhet hamis pozitív eredményt. Ilyenkor, pozitív eredmény esetén a próbát megismételjük. 6.2.

Melegpróba

6.2.1. Referencia-módszer Az eredeti töltésű bontatlan palackot vagy a tágulási űr figyelembevételével teletöltött és lazán lezárt üvegedényt 35 oC-os termosztátban tartjuk 7 napon át. A palackokat lehülés után, szobahőmérsékleten értékeljük. A módszer a termolabilis fehérjék jelenléte mellett a mikrobiológiai instabilitást is jelezheti. 6.2.2. Használati módszerek 6.2.2.1. Szigorított gyors módszer Az eredeti töltésű bontatlan palackot, vagy a tágulási űr figyelembevételével megtöltött és lazán lezárt üvegedényt 55 oC-os termosztátban tartjuk 3 napon át, majd szobahőmérsékletre hűtjük. Értékelés után +4 oC-ra helyezzük és 1 nap múlva újra értékeljük. A módszer mikrobiológiai zavarosodás előrejelzésére nem alkalmas. 6.2.2.2. Tájékozódó vizsgálat gyors módszerrel A tágulási űr figyelembevételével megtöltött és lazán lezárt üvegedényt (esetleg kémcsövet) 15 percre 70 oC-os vízfürdőbe helyezzük, majd szobahőmérsékletre hűtjük. A módszer a mikrobiológiai zavarosodás előrejelzésére nem alkalmas. 7.

Levegőpróba A steril Erlenmeyer-lombikot a vizsgálandó borral kétharmad – háromnegyed részig töltjük, alaposan összerázzuk, majd steril vattadugóval zárjuk és 7 napon át szobahőmérsékleten tartjuk. Palackozott késztermékből a próbát az eredeti palackban is végezhetjük, a bor legalább negyedrészének eltávolítása után. A palackban maradt bort alaposan rázzuk fel és steril vattadugóval zárjuk. A próba elsősorban az oxidációs kiválások és a biológiai zavarosodás előrejelzésére alkalmas, de csak viszonylag nagy kezdeti sejtszámot képes kimutatni.

248

8.

Rázópróba Az eredeti töltésű bontatlan palackot vagy a légmentesen lezárt, teletöltött üvegedényt vízszintes mozgást végző (65-80 löketszámra beállított) rázógépre helyezzük akár álló akár fekvő helyzetben és 48 órán keresztül szobahőmérsékleten rázatjuk. A rázópróba a szállítás során előforduló kiválások előrejelzésére szolgál, többféle kémiai kiválás mellett a mikrobaszaporodást is stimulálja.

9.

Az eredmények értékelése

A vizsgálati időtartamok letelte után szemmel értékeljük a borok tisztaságát. Az értékeléshez erős fényforrást használjunk. A fehér borokat lehetőleg sötét háttér előtt, áteső fényben vizsgáljuk. A vörös borok esetében az izzó szála világítsa át a palackot. Először a felrázatlan palackot vizsgáljuk meg, figyelemmel a lombik vagy palack alján lévő esetleges üledékre. Felrázás után ismételten nézzük meg a bort. A bort palackállónak tekintjük, ha mindegyik próba negatív, azaz szemmel látható elváltozást (a melegpróba során esetleg bekövetkező színmélyüléstől eltekintve) egyik próba után sem tapasztalunk. Üledékképződés, zavarosodás esetén az üledék típusát a Melléklet szerinti módszerekkel határozhatjuk meg.

MELLÉKLET Borüledékek azonosítása 1. 1.1.

FOGALOMMEGHATÁROZÁS

Borüledékek: mindazok a mikrobiológiai, kémiai és fizikai eredetű részecskék,

amelyek a stabilizált, szűrt borban szaporodás, kicsapódás vagy utószennyeződés útján

nemkívánatos

elváltozást

(opálosság,

porosság,

zavarosság)

okoznak,

függetlenül attól, hogy a részecskék a borban leülepednek vagy lebegve maradnak. 1.2.

Biológiai üledékek: élő és holt élesztőgombasejtek, baktériumsejtek vagy sejt-

halmazok, valamint penészgombafonalak. 1.3.

Kémiai üledékek: a bor természetes oldott anyagainak környezeti hatásokra

bekövetkező kicsapódásai, kristályos vagy amorf részecskék formájában.

249

1.4.

Fizikai üledékek: a tiszta borba technológiai szennyeződés útján bekerült oldhatatlan

részecskék, többnyire derítőszerek, szűrőanyagok, dugópor vagy dugóbevonat.

2. A MÓDSZEREK ÁLTALÁNOS ELVE Mikroszkópos megjelenésük alapján a borüledékek egy részét azonosítjuk, más részüket csoportokba soroljuk. A csoportokon belül a további azonosítást kémiai vizsgálatokkal (oldási próbák, valamint specifikus színreakciók) végezzük. 3. ALKALMAZÁSI TERÜLET A vizsgálatokat a palackállósági próbák során kapott üledékekből, valamint a palackozott instabil késztermékekből végezzük.

4.1.

4. ESZKÖZÖK Mikroszkóp, 20, 40 és 100-szoros nagyítású objektívlencsével

4.2.

Tárgylemezek és fedőlemezek

4.3.

Laboratóriumi centrifuga, 25 - 50 ml-es csövekkel vagy membrán-szűrőkészülék

4.4.

Kémcsövek

4.5.

Osztott pipetták, 1-10 ml-es 5.


Az üledék megjelenését (szín, állag, ülepedés gyorsasága stb.) a nyugvó, majd a felrázott palackban megfigyeljük, feljegyezzük, majd a tiszta bortól az üledéket minél hatékonyabban elválasztjuk. Jól ülepedő, nagy mennyiségű részecske esetén egyszerű dekantálást, kisebb méretű és/vagy kevés részecske esetén centrifugálást vagy membránszűrést végzünk. Az üledéket a palack aljából kevés borral, a centrifugacsőből, illetve a membránról üvegbot segítségével kb. 5- 10 ml hideg, 10% (V/V)-os alkoholban vesszük fel. A vizsgálatokhoz határozottan észlelhető zavarosságú szuszpenzióra van szükség. 6. MIKROSZKÓPOS VIZSGÁLAT Teljesen zsírtalanított, tiszta tárgylemezre egy csepp vizsgálati anyagot helyezünk, ügyelve arra, hogy a cseppben kevés részecske szabad szemmel is észlelhető legyen. A készítményt fedőlemezzel lefedve először 20-szoros, majd szükség szerint növekvő nagyitású objektívvel vizsgáljuk. 250

Kontrollként

tiszta

“vak”preparátumot,

desztillált hogy

a

vízből

is

tárgylemez,

készítünk

fedőlemez,

egy illetve

mikroszkópos víz

esetleges

szennyeződéseit megállapítsuk (kevés üledékmennyiség esetén ezek a szennyeződések félrevezetők lehetnek). Vegyes üledékben a domináns részecsketípus azonosítására törekedjünk. A mikroszkópos kép alapján – a jellegzetes megjelenés ismeretében – biztonsággal azonosíthatók a biológiai üledékek (1a táblázat), valamint a fizikai üledékek egy része: kovaföld, perlit, dugópor (1c táblázat). Az azonosítást megkönnyíti, ha az utóbbi anyagok mikroszkópos képét ismert mintákon előzetesen tanulmányozzuk. A fizikai üledékek más része, valamint a kémiai üledékek mikroszkópos vizsgálattal két csoportba sorolhatók be: kristályos üledékek (1b táblázat), valamint az amorf üledékek (2. táblázat) csoportjába. Ezek azonosításához további kémiai vizsgálatok szükségesek. 7.

KRISTÁLYOS ÜLEDÉKEK AZONOSÍTÁSA

7.1. A módszer elve A borban leggyakrabban előforduló kristályos kiválások, a borkő (káliumhidrogén-tartarát), valamint a kalcium-tartarát tipikus formái mikroszkópos képük alapján is megkülönböztethetők (1b táblázat). Nem tipikus kristályforma vagy az előbbiektől eltérő kristályok esetén a kalcium jelenlétét kénsavas átkristályosítással mutatjuk ki: a képződő kalcium-szulfát (gipsz) apró, tű alakú kristályai mikroszkópban jól azonosíthatók. 7.2.

Anyagok

16-17%-os kénsav (H2SO4)

7.3. A vizsgálat menete és értékelése Az üledéket tartalmazó szuszpenzió kb. 0,5 ml-éhez kb. 0,5 ml 16-17%-os kénsavat adunk, majd összerázzuk. 1-2 perc múlva a próbát szabad szemmel, majd mikroszkóppal értékeljük az alábbiak szerint:

- Ha a kristályok teljesen feloldódnak: az üledék borkő -

Ha a kristályok a kénsav hatására kalcium-szulfáttá (gipsszé) kristályosodnak át: az üledék kalcium-tartarát, kalcium-mucát (nyálkasavas kalcium), kalcium-oxalát, esetleg más kalciumsó. A finomszemcsés, fehér gipsz szabad szemmel is látható.

251

Mikroszkóp alatt az eredeti kristályok helyett apró, tű alakú gipszkristályok “tüskés” halmazait látjuk, amelyek fokozatosan egyedi kristályokra hullanak szét. A további azonosítást a kristályok eredeti (kénsavpróba előtti) mikroszkópos képe alapján végezzük(1btáblázat).

-

Ha a kénsav hatására semmilyen változást nem észlelünk, valószínűleg a kristályos kiválásokhoz némileg hasonló perlit, esetleg üvegpor alkotja az üledéket. Ez utóbbiak savban, lúgban, alkoholban nem oldhatók fel, ismert kontrollmintával összehasonlítva jól azonosíthatók.

Megjegyzés: A próba tárgylemezen, egy csepp kénsavban szuszpendált üledékkel is elvégezhető és a fedőlemezzel lefedett mintában a folyamat mikroszkóppal végig követhető (az objektívlencsét gondosan óvjuk a kénsavval való érintkezéstől). 8.

AZ AMORF ÜLEDÉKEK AZONOSÍTÁSA

8.1. A módszer elve Az amorf üledékeket jellegzetes alakkal nem jellemezhető, többé-kevésbé szabálytalan szemcsék, gömböcskék alkotják, amelyek gyakran kisebbnagyobb csomókba vagy pelyhekbe tömörülnek. A részecskék kisméretűek, 40-szeres objektívvel (400-500 –szoros nagyításban) csak nehezen észlelhetők, alapos vizsgálatukhoz 1000-szeres nagyítás szükséges. A kokkusz alakú baktériumokkal könnyen összetéveszthetők, bár az amorf részecskék mérete és halmazokba rendeződése szabálytalan, míg a baktériumoké általában szabályos. Az amorf üledékeket savban, lúgban próbáljuk feloldani, valamint oxidáljuk. A reakciókból következtetünk az anyag jellegére, majd specifikus reagenssel megerősítő vizsgálatot végzünk (2. táblázat). Az itt közölt módszerrel a fontosabb vegyületcsoportok meghatározásáig juthatunk el.

8.2.

Anyagok

10%-os sósav (HCl) 1 M nátrium-hidroxid (NaOH) 10%-os hidrogén-peroxid (H2O2) 1%-os sárgavérlúgsó (K4[Fe(CN)6 ] x 3H2O ) 10 % (V/V)-os etil-alkohol Kb. 5%-os CuSO4--oldat (vagy Fehling I.oldat).

252

Folin--Ciocalteau- reagens: jódos kálium-jodid-oldat: 100 ml-es mérőlombikban 0,2 g jódot 2 ml 96% (V/V)-os alkoholban oldunk, hozzáadunk 2 g kálium-jodidot (KJ), majd desztillált vízzel jelig töltjük. Desztillált víz Finom szűrőpapír

8.3.

A vizsgálat menete és értékelése

A vizsgálatokat a 2. táblázatnak megfelelően végezzük, anyag és időtakarékosság céljából az alábbiakban javasolt lépésekben. 8.3.1. Három kémcsőbe 2 – 2 ml üledékmintát mérünk, majd az elsőhöz 2 ml desztillált vizet (kontroll), a másodikhoz 2 ml sósavat, a harmadikhoz 2 ml lúgot adunk. Alapos összerázás után, kb egy perc múlva a kémcsöveket összehasonlítjuk. A vizes kontrollhoz képest megállapítjuk, hogy az üledék savban vagy lúgban oldódik-e. - Az üledék savban oldódik, lúgban nem oldódik: valószínűleg fémes kiválás (2. lépés).

- Az üledék lúgban oldódik, savban nem oldódik: valószínűleg fehérje- vagy cserzőanyagkiválás (4. lépés). - Az üledék sem savban sem lúgban nem oldódik (7. lépés). 8.3.2. Tiszta kémcsőbe 2 ml üledékmintát mérünk, majd hozzáadunk egy-két csepp 10%-os hidrogén-peroxidot.

-

Az oldat feltisztul: réz(I)-szulfitos kiválás.

-

A zavarosság nem változik vagy erősödik: az üledéket vasas vagy egyéb fémes kiválás alkotja (3. lépés).

8.3.3. Vas kimutatása: a sósavban oldott üledékhez 0,5 ml 0,1%-os sárgavérlúgsót adunk. Erős kék színeződés (berlinikék) vas jelenlétét mutatja. A vizsgálathoz a bor tükrös tisztaságú

szűrletéből

vakpróbát

is

készítünk

azonos

mennyiségekkel

és

körülmények között (sósav és sárgavérlúgsó kozzáadásával), mert a bor oldott állapotban is tartalmazhat vasat. -

Az üledékmintában a kék szín határozottan erősebb, mint a vakpróbában: az üledéket vasas kiválás alkotja.

253

- Az üledékmintában nincs kék szín, vagy csak azonos a vakpróbával: az üledék nem vasas kiválás (4. lépés). 8.3.3. A további vizsgálatokhoz az üledéket kimossuk, tisztítjuk, mert a bor oldott anyagai a próbákat zavarják. Ha eddig borban szuszpendált anyaggal dolgoztunk, akkor a bort centrifugáljuk, dekantálás után az üledéket 10% (V/V)-os alkoholban felkeverjük, majd újra centrifugáljuk és dekantáljuk. Ha már centrifugált, alkoholos szuszpenziót vizsgáltunk, akkor ezt újra centrifugáljuk és dekantáljuk. Membránszűréses elválasztás esetén a membránon 10%-os alkoholt szívatunk át. A tisztított üledéket az 1. lépés eredményétől függően vesszük fel a centrifugacsőből, vagy a membránról. -

Ha lúgban oldódott, akkor 3-5 ml 1 M nátrium-hidroxidban (5 .lépés).

-

Ha savban oldódott, akkor 2-3 ml 10 %-os sósavban (6. lépés).

8.3.4. Két kémcsőbe 1-1 ml tisztított üledéket, valamint 1-1 ml nátrium-hidroxid-oldatot mérünk, majd az első kémcsőhöz 1 csepp Folin—Ciocalteau-reagenst, a másodikhoz 2 csepp réz-szulfát-oldatot adunk. További két kémcsőbe 1-1 ml vizet és 1-1 ml tiszta nátrium-hidroxid-oldatot mérünk, amelyekben a reagensekkel vakpróbát készítünk. A próbákat összerázzuk, majd öt perc múlva értékeljük, összehasonlítva a megfelelő vakpróbával. A vakpróbák színe: Folin--Ciocalteau - színtelen, réz-szulfát - világoskék, lilás árnyalat nélkül!). - Folin—Ciocalteau- reagens hatására élénk kék, sötétkék, liláskék vagy kékesfekete szín. Réz-szulfát hatására halványkék szín vagy nincs változás: az üledék valószínűleg kondenzált cserzőanyag, színanyag.

- Réz-szulfát hatására ibolyakék, lilás szín (biuret-reakció), Folin—Ciocalteau-reagens hatására halványkék-szürkéskék szín: az üledék fehérje. - Réz-szulfát hatására lilás szín, Folin—Ciocalteau-reagens hatására élénk kék, sötétkék szín: fehérje-cserzőanyag komplex (kombinált üledék). - Nincs határozott színreakció 6. lépés. Megjegyzések:

254

A Folin—Ciocalteau-reagens nemcsak a fenolos anyagokkal (cserzőanyagokkal), hanem a fehérjékben lévő tirozinnal is kék színreakciót ad, ezért önmagában nem alkalmas a két vegyületcsoport elkülönítésére. Mindkét csoporthoz megerősítő próbaként alkalmazható a polifenolokkal a kék színreakció, mivel fajlagosan sokkal intenzívebb, mint a fehérjékkel. A szemmel értékelhető biuret-próbához az üledékmintában legalább 1-2 mg/ml fehérjekoncentráció szükséges, amit gyakran csak egy teljes palackból több részletben végzett centrifugálással és mosással lehet összegyűjteni. 8.3.6. Lúgos vagy savas üledékhez (lásd 4. lépést) kb. 1 ml jódos kálium-jodid-oldatot keverünk. - liláskék-kék, barnás narancs, esetleg narancsszín poliszacharidok jelenlétére utal. - Nincs színreakció: az azonosítás sikertelen (7. lépés) 8.3.7. A sikertelen azonosítás oka lehet a kis anyagmennyiség, esetleg oldhatatlan poliszacharid, vagy kémiai kiválások helyett szilíciumtartalmú borkezelő anyagok (fizikai üledékek) jelenléte. További lehetőség, hogy autolizálódott, nem tipikus baktériumüledékről van szó, amely az amorf kiválásokkal összetéveszthető. Ilyenkor az üledék szerves vagy szervetlen voltáról égetéssel (2. táblázat) kapunk információt, majd a fenti (8.3.48.3.6. szakaszok szerinti vizsgálatokat nagyobb üledékmennyiségből megismételjük, vagy az üledékmintát műszeres analízisre küldjük.

255

1a táblázat: Biológiai üledékek makroszkópos és mikroszkópos megjelenése Az üledék

Megjelenés

Mikroszkópos kép

fajtája Élesztő

Baktérium

(biztos felismeréshez szükséges nagyítás) Világos, poros vagy szemcsés,

Gömbölyű, tojásdad vagy megnyúlt, gyakran sarjadzó

esetleg pelyhes üledék vagy

sejtek. Belsejükben sötétebb vagy világosabb foltok

zavaros bor. Cukortartalmú

(vakuólumok, tápanyag granulátumok) felismerhetők.

borban szén-dioxid-képződés.

( kb. 400 x)

Világos, finom poros,

Apró kokkuszok vagy pálcikák egyenként, párban vagy

esetleg pelyhes üledék vagy

jellegzetes csoportokban (pl. tetrád, lánc, szőlőfürt, stb).

opálos bor. Szén-dioxid-képződés Szabályos alak és méret. Penészgomba

változó, száraz borban is lehet.

(kb. 1000 x)

Világos vagy sötét pelyhek,

Szabályos, helyenként elágazó gombafonalak, általában

szálak vagy vattaszerű csomó(k).

harántfalakkal elválasztva. Vegetatív szaporító képletek

Szén-dioxid-képződés nincs.

(konídiumtartók vagy sporangiumok) borban csak ritkán láthatók. (kb. 200 x)

1b táblázat: Kristályos borüledékek makroszkópos és mikroszkópos megjelenése Az üledék

Megjelenés

Mikroszkópos kép

fajtája

(biztos felismeréshez szükséges nagyítás)

Kálium-

Csillogó világos vagy barnás, Tipikus forma: lekerekített, tompa élű , gyakran barnás

-hidrogén-

felismerhető

-tartarát

finomabb-durvább üledék.

kristályok

vagy amorf részecskékkel (cserzőanyagokkal) borított kristályok:

szemcsés gabonaszem, csónak vagy kagyló alakúak.

Felrázás

után

gyors Tipikus forma: szabályos síklapokkal határolt, hasáb vagy

ülepedés.

dupla trapéz alakú kristályok. (kb. 100 x).

Ca-tartarát

Csillogó világos kristályok, vagy Tipikus forma: erősen fénytörő, szabályos sík lapokkal és durva szemcsés üledék. Felrázás élekkel határolt, zömök vagy megnyúlt hasáb alakú, rombos után gyors ülepedés.

kristályok (“koporsóalak”). Többnyire világosak vagy áttetszően csillogóak. A méret nagyon változó lehet, gyakori az óriás kristály. (kb. 100 x)

Nyálkasavas

Világos,

apró

kristálycsomók Tipikus forma: szabályos, erősen megnyúlt hasáb alakú

kalcium

vagy szemcsés (grízes) üledék. (oszlopszerű), kisméretű kristályok. A hasábok néha Felrázás után gyors ülepedés

csillagszerű, tüskés alakzatba tömörülnek. (kb. 200 x)

Ca-oxalát

Finom fehér por vagy finom Nagyon apró, zömök, hasáb alakú kristályok, tompa szemcsés üledék. Az ülepedés élekkel. A tipikus méret az élesztősejtekéhez hasonló, de lassú, a felrázott bor gyakran néha sokkal kisebb: 400-szoros vagy kisebb nagyításban sokáig opálos.

gyakran még amorf részecskének tűnhetnek! (1000 x !!!) 256

1c táblázat: Néhány fizikai (technológiai) üledék makroszkópos és mikroszkópos megjelenése Az üledék

Megjelenés

Mikroszkópos kép

fajtája

(biztos felismeréshez szükséges nagyítás)

Dugópor

Különálló, többnyire kevés A nagyobb részecskék sötétbarnák-barnásfeketék. Belsejük nem

(dugómorzsa)

barnás színű szemcse vagy világítható át, de szélükön a parafa szövetsejtjeinek kontúrjai pehely. Felrázás után

(tompa élű sokszögek vagy téglalapok) gyakran jól felismerhetők.

sokáig lebeg. Tárgy-

A kisebb részecskék egy vagy kétrétegű, sárga vagy vörösesbarna

lemezre helyezve a

színű, átvilágítható parafasejthalmazból állnak.

nagyobb részecskék

(200 x)

feltűnően rugalmasak, a fedőlemezt “visszarúgják”. Kovaföld

Finom fehér por, gyorsan Vegyes, jellegtelen alakú törmelék között mindig fellelhetők a ülepedik.

kovamoszat

jellegzetes

vázmaradványai.

Ezek

szabályos

kazettákból álló (lépsejtekre emlékeztető szerkezetű) körök, körcikkek vagy körszeletek. (200 x) Perlit

Durvább

fehér

gyorsan ülepedik.

por, Áttetsző,

szabálytalan

üvegszilánkokra

vagy

tépett

cellofándarabkákra emlékeztető, lapos részecskék. Kristályos kiválással esetleg összetéveszthetők. (200 x)

Azbesztszál

Finom fehér szál vagy Fénytörő, erős kontúrú vékony szálak vagy ezek párhuzamos pehely.

Nagyon

vagy nem ülepszik.

lassan kötegéből álló fonálszerű részecskék. Harántfalak soha nem láthatók, a fonál vége szabálytalan, törött vagy szálakra szétbomló. (200 x)

257


2. táblázat: A leggyakrabban előforduló amorf üledékek morfológiai, fizikai és kémiai tulajdonságai

Vas(III)-foszfát

Megjelenés

MIKROSZKÓPOS KÉP (NAGYÍTÁS) Oldódás 1M NaOH-ban Oldódás 10%-os HCl-ban H2O2 hatására Kálium-vas(II)-cianid hatásra Égetés spatulán Egyéb reakciók

Fehér-szürkésfehér fátyolosság vagy finom porszerű üledék.

Vas(III)-tannát

Sötétszürke – fekete – kékesfekete fátyolosság vagy finom porszerű üledék. Nagyon finom Finom vagy durvább szemcsék. szemcsék. (1000 x) (400–1000x) Nem oldódik, Nem vagy gyengén később vörösesbarna oldódik, később finom csapadék. vöröses-barna finom csapadék. Gyorsan oldódik. Lassan oldódik.

Réz(I)-szulfit

Fehérje

Cserző

Piros-vörösbarna, nagyon finom, fátyolos üledék.

Világos vagy a bor színével megegyező fátyolosság vagy finom porszerű üledék.

Sárga – sá vagy vörö (vörösbor szemcsés

Nagyon finom szemcsék. (1000 x) Nem oldódik.

Finom szemcsék, gyakran csomókban . (400–1000x) Oldódik.

Színes, du általában p (400 x) Lassan old

Oldódik.

Nem oldódik.

Nem oldó

Zavarosság erősödik Zavarosság erősödik Zavarosság feltisztul. vagy nem változik. vagy nem változik. HCl-dal kék szín. HCl-dal kék szín Vörös csapadék.

-

-

-

-

Nem ég, fehér olvadék.

Teljesen elég, égett hajra Teljesen e emlékeztető szag.

-

Részben elég, barna Nem ég, fehér maradék. maradék (zöld színű lángfestés). -

Biuret-próba: ibolya szín. Folin—Ciocalteau-próba: kék szín.

258

Folin—Ci sötétkék s

MAGYAR BORKÖNYV CODEX VINI HUNGARICI BOROK VIZSGÁLATA

Recommend Documents