Leggyakrabban vizsgált minták - vér (teljes vér), szérum, plazma - vizelet - agyfolyadék, liquor - lavage (pl. broncho-alveolaris lavage, BAL) - izületi folyadék - folyadékgyülem - bélsár - bendőfolyadék
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 1 Prof. Dr. Gaál Tibor
Teljes vér, vérplazma, vérszérum
Teljes vér antikoaguláns + centrifugálás
Plazma
alvadás
Szérum
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 2 Prof. Dr. Gaál Tibor
MÉRÉS ELİTTI, PREANALITIKAI HATÁSOK 1.: a beküldı kilinikus felelıssége Vérvételi eszközök: • steril, éles, száraz (vagy alvadásgátlóval “átmosott”), kellı vastagságú tő • steril, száraz (vagy alvadásgátlót tartalmazó), megfelelı vákuumra alkalmas fecskendı • száraz (alvadásgátlót tartalmazó) vércsı • üvegcsı: szérumnyeréshez jobb (+ alvadásgyorsító) • mőanyag csı: plazmanyeréshez jobb (+ alvadásgátló) Vérvételi hibák: • rossz technika (“pumpálás”, nagy vákuum haemolysist okoz (l. késıbb) • etetés utáni vérvétel lipaemiát okoz (húsevık!) • rosszul megválasztott alvadásgátló téves eredményt okoz Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 3 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vérplazma: színeltérések szmha
a
kutya
b
Karotindús plazma (a) Karotinszegény szérum (b)
egészséges (N), hemolizált (Hem), icterusos (Ict), lipémiás (Lip) Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 4 Prof. Dr. Gaál Tibor
MÉRÉS ELİTTI, PREANALITIKAI HATÁSOK 2.: a beküldı klinikus és a fogadó labor felelıssége. A szállítás hibái: • lassú • meleg hımérséklet • rázkódás A tárolás hibái: • szobahımérsékleten? • jégszekrényben? • fagyasztva? Forrás: • meddig? SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés Prof. Dr. Gaál Tibor
5
Vákuumos vérvételi eszközök
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 6 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vákuumos vérvételi csövek
Gyári vákuummal
“Saját” vákuum biztositásával Letörhetı dugattyúnyél
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 7 Prof. Dr. Gaál Tibor
Alvadásgyorsitós és szérumszeparátoros vérvételi csövek
Alvadásgyorsitó üveggyöngyös, nyitott vérvételhez
Szérumszeparátorgéles, zárt (vákuumos) vérvételhez
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 8 Prof. Dr. Gaál Tibor
Szérumszeparátoros (géles) vérvételi csı
1.
2.
3.
4.
Forrás:
1. Üres csı, alul a gél/zselé SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 2. Csı vérrel feltöltve Prof. Dr. Gaál Tibor 3. Ülepités 3 óráig (a gél nem jön fel) 9 4. Centrifugálás 10 percig (a gél feljön a szérum alá)
Szérumszeparátoros, vákuumos vérvételi csı (centrifugálás után)
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 10 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vákuumos vérvételi csövek
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 11 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vérvétel vákuumos csıbe kutyából
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 12 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vérvételi tők fecskendıvel történı vérvételhez
Vastag tő: minimális hemolizisveszély, kellı mennyiség gyorsan nyerhetı Vékony tő: hemolizisveszély, bealvad, lassú
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 13 Prof. Dr. Gaál Tibor
A centrifugálás elıtt minden vér egyforma!
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 14 Prof. Dr. Gaál Tibor
Leggyakoribb hatások: hemolízis, lipémia, icterus
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 15 Prof. Dr. Gaál Tibor
A hemolízis hatása Növeli a plazmában/szérumban a vvs-ben nagyobb mennyiségben lévı anyagokat: •enzimek (AST, GLDH, LDH) •szubsztrátok: NH3, K-, Mg-, foszfát-ionok a hasonló spektrumban mérhetı anyagokat: bilirubin Csökkenti a plazmában a vvs-ben kisebb mennyiségben lévı anyagokat: •glükóz Forrás: •Na SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés Prof. Dr. Gaál Tibor
A HEMOLÍZIS ÉS A LIPÉMIA HATÁSA 1. Paraméter
Hemolízis
Lipaemia
ALP, AST, ALT, CK, GGT, LDH
+
-
Bilirubin
+
-
+/-
-
Karbamid
+
-
Kreatinin
+
+
Anorg. foszfát (P)
+
-
Ammónia
+
-
Kálium
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 17 Prof. Dr. Gaál Tibor
A HEMOLÍZIS ÉS A LIPÉMIA HATÁSA 2.
Paraméter
Hemolízis
Lipaemia
+
-
Koleszterin
+/-
+/-
Triglicerid
-
+
Glükóz
-/0
-
Összfehérje
+
+
Összlipid
-
+
Vas
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 18 Prof. Dr. Gaál Tibor
A HEMOLÍZIS LEGGYAKORIBB OKAI túl erıs szívóhatás "pumpálás" a vérvételkor (kisállat) kontamináció (vizes csı, detergens nyomok) a vérminta állása több óráig hőtés, melegítés túl hosszú ideig tartó vagy/és túl gyors centrifugálás durva "bánásmód" a vérmintával (rázás) Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 19 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vvs- és plazma-NH3
Arány: 3:1
A hemolízis növeli a plazma-NH3 - at Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés Prof. Dr. Gaál Tibor
Vvs- és plazmaglükóz
Arány: 0,7- 0,8:1
A hemolízis enyhén csökkenti a plazmaglükózt Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés Prof. Dr. Gaál Tibor
A LIPAEMIA HATÁSA A lipidaemia NÖVELI vagy CSÖKKENTI néhány anyag mérési eredményét a plazmában (szérumban) néhány extra lipidfrakció jelenléte vagy az okozott turbiditás miatt: - ↑ összlipid, triglicerid, koleszterin - többi: általában nem is mérhetők Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 22 Prof. Dr. Gaál Tibor
ANTIKOAGULÁNSOK HATÁSA (FONTOSABB PÉLDÁKKAL) Heparin
EDTA
Citrát
Enzimek
-
+
+
Ammónia
+
-
+
Glükóz
-
-
+
GGT
-
-
+
Kalcium
-
+
+
Karbamid
+/-
-
-
Kreatinin
-
+
+
Menny. vérkép
+
-
+
Min. vérkép
+
-
+
Hemosztázis
+
+
-
23
Na-citráros vérvételi csövek 9NC kék kupakos hemosztázishoz
4NC fekete kupakos vörösvérsejtsüllyedéshez
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 24 Prof. Dr. Gaál Tibor
Antikoaguláns-hatás Példa : kálium- és calciumion-koncentráció heparinos és K-EDTA plazmában, egészséges állatból Heparin-plazma: Élettani lelet
K-EDTA plazma: Kóros lelet ( K és Ca)
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 25 Prof. Dr. Gaál Tibor
ANTIKOAGULÁNSOK HATÁSA 2. Az elızıek miatt: BIOKÉMIÁHOZ: heparint/szérumot,
HEMATOLÓGIÁHOZ (mennyiségi, minıségi vérképhez) EDTÁ-t,
VÉRALVADÁS VIZSGÁLATOKHOZ (protrombin idıhöz, APTI-hoz stb.) citrátot használjunk Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 26 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vérvételi csövek színkódja (német)
Vvs-süllyedés: lila Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 27 Prof. Dr. Gaál Tibor
Citrátos gyári vércsövek (amerikai színkód) hemosztázis-vizsgálathoz és vérsüllyedéshez
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 28 Prof. Dr. Gaál Tibor
Antikoagulánsok javasolt felhasználása
A gyári csövek: készen, megfelelı arányban tartalmazzák az antikoagulánsokat. Ezeket használjuk! Pontosan a jelig kell venni a vért! Kétszer óvatosan átfordítani elegendı. Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 29 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vérparaméterek stabilitása leszívott szérumban/plazmában 1. Szobahım.
4-8 °C
-20 °C
>7 nap (- 10 %)
7 nap
7 nap
Ammónia (EDTA!)
-
0,5-2 ó (jégen)
7-10
ALT
2
3
7
AST
2
3
7
ALP
Bilirubin
Csak friss szérumból!
CK
1
7
2-3 hét
Gamma GT
7
7
2 hét
4ó
3
10
Glükóz (deprot) Hb(teljes vér)
24 órán belül
24 órán belül
24 órán belül
30
Vérparaméterek stabilitása leszívott szérumban/plazmában 2. Szobahım.
4-8 °C
-20 °C
2 hét
2 hét
hetek
Karbamid
1
3
6 hónap
Kalcium
10
10
6 hónap
Koleszterin
6
6
6 hónap
4-6 ó
1
6 hónap
6
6
10
3
hetek
Kálium
Kreatinin Összfehérje Összlipid
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 31 Prof. Dr. Gaál Tibor
Állott vér ionogramja
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 32 Prof. Dr. Gaál Tibor
SZÉRUMOT VAGY PLAZMÁT HASZNÁLJUNK? 1. Általában jelentıs különbség nincs, bár a szérum biológiai "mátrix-hatása" kisebb (direkt bilirubint, epesavakat csak szérumból lehet mérni) 2. A szérumnyerés idıigényes, még alvadásgyorsító (drága!) használatakor is 3. Szérumnyerés esetén fokozott a hemolízis veszélye 4. Símafalú mőanyag kémcsıben (ami egyébként olcsó lenne) a szérum esetleg ki sem válik Ezért általában plazma nyerésére törekedjünk! Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés Prof. Dr. Gaál Tibor
Teljes vér vagy plazma/szérum? Sok szárazreagens-automatával és tesztcsíkkal teljes vérbıl is lehetséges meghatározásokat végezni. A nedveskémiai analízisek csak plazmából/szérumból kivitelezhetık. Összehasonlíthatók-e az eredmények? Általában NEM. Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 34 Prof. Dr. Gaál Tibor
Mérés elıtti, preanalitikai tényezık: vizelet Mintavétel : - spontán (középsugár!) - katéterezés - cystocentesis (kisállatban) Kontamináció: - vér - baktérium - spermium - detergensek/mosogatószerek Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 35 Prof. Dr. Gaál Tibor
Vizeletvétel, de hogyan?
Szabadon: technikai nehézségek (szuka!), szennyezıdés Katéterezés: technikai nehézségek (kistető szuka!, tehén), húgyúti szennyezıdés, téves proteinuria- és hematuriadiagnózis 36 Cystocentesis: még szokatlan. Baktériumvizsgálatnál indokolt
A VIZELET TÁROLÁSA, KÜLDÉSE Vizelet tárolása: lehetıleg ne tároljuk (bakteriális fertızıdés) +4 és +8 °C között maximum 10-12 óráig tárolható, hozzá néhány timolkristályt vagy kevés fenolt kell adni A fagyasztás a mikroszkópos elemzést lehetetlenné teszi! "Maradványanyagok" veszélye: • mosószer (pH!) • redukáló anyagok (pl. cukrok) jelenléte
Nagyon jól záródó edényben küldjük vizsgálatra! Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 37 Prof. Dr. Gaál Tibor
A vizelettárolás hatása (dalmata)
1. csı: friss vizelet, egészséges dalmát kutyából 2. csı: ugyanaz a vizelet 24 órás hőtıszekrényben való tárolás után 3. csı: ugyanaz a vizelet centrifugálás után (sedimentum lateritum, kicsapódott húgysav-kristályok)
38
Preanalitikai hatások: liquor, lavage, synovia, folyadékgyülem Mintavétel: • Steril viszonyok! • Csak friss mintát • Két cső használata: EDTA és üres Kontamináció: • vér • baktérium
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 39 Prof. Dr. Gaál Tibor
Mérés elıtti hatások: liquor, lavage, synovia, folyadékgyülem Tárolás: • Sose tároljuk. Jusson a laboratóriumba < 30 perc alatt • Fagyasztás: mikroszkópos sejtelemzést lehetetlenné teszi • Biokémiai vizsgálathoz: előzetes centrifugálás után a felülúszó fagyasztása lehetséges
Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 40 Prof. Dr. Gaál Tibor
Mérés elıtti hatások: bendıfolyadék Mintavétel: • Óvatos szondakezelés (trachea!) • Megfelelő szűrő a szonda végén Kontamináció: • Nyál Tárolás: Ne tároljuk Mikroszkópos vizsgálat: Elımelegített tárgylemez, -tartó Forrás: SZIE, ÁTK, Labordiagnosztikai továbbképzés 41 Prof. Dr. Gaál Tibor
