LAMPIRAN Lampiran 1 Tabel 1: Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN Tes Sampel
Kode sampel
Tes perkiraan
MPN penegasan
290/B/AB/02/201 Air Bersih
5-1-0
5-1-0
33
4
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2 Flowsheet Pembuatan Media Lactose Broth Pembuatan Media Lactose Broth Double D bl Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham
masing-masing 5 ml
dalam 5 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil
Universitas Sumatera Utara
Pembuatan media lactose broth single
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil
Universitas Sumatera Utara
Media Brilliant Green Lactose Broth
Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth sebanyak 40 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit. Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. Hasil
Universitas Sumatera Utara
Uji Perkiraan
Pada tes perkiraan digunakan media Lactose Broth. Tes perkiraan dilakukan dengan 2 cara, yaitu single dan double. Single : 13 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 10 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 10 tabung diisi dengan masing-masing 10 ml media. Double : 52 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 5 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 5 tabung tersebut diisi dengan 10 ml media.
Hasil
Universitas Sumatera Utara
Sampel Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam masing-masing tabung media LB. Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air dengan media bercampur rata. Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk
asam
dan
gas
dalam
tabung
fermentasi. Bila
tidak
ada
reaksi
asam
atau
gas,
inkubasikan kembali sampai 48 jam. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan positif. kemudian
tabung-tabung
yang
positif
dilanjutkan ke tes penegasan.
Hasil
Universitas Sumatera Utara
Uji Penegasan Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok. kemudian dipindahkan dengan ose/lop ke dalam media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB). Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan positif. Hitung
MPN
total
koliform
dengan
menggunakan tabel MPN dari jumlah tabung BGLB yang positif, dibaca pada tabel MPN.
Hasil
Universitas Sumatera Utara
Total Koliform Tabung yang dinyatakan positif pada uji perkiraan, diinokulasikan kedalam tabung yang berisi media Brilla. Masing-masing diisi satu sampai dua ose yang pengerjaanya dilakukan secara aseptis. Diinkubasi pada suhu 35˚C selama 2x24 jam. Dilakukan pengamatan dengan melihat tabung yang menunjukkan adanya terbentuk gas dalam tabung durham yang menyatakan positif. Pembacaan hasil dilakukan dengan menghitung jumlah tabung yang positif. Angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN.
Hasil
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3 Tabel 2. Perkiraan Terdekat Jumlah (MPN) Koliform Untuk Kombinasi Porsi: 5 x 10 ml; 5 x 1 ml; 5 x 0,1 ml dengan 95% batas kepercayaan Jumlah tabung yang positif 5 tabung 5 tabung 5 tabung 10 ml 1 ml 0,1 ml 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 1 1 0 2 0 0 2 1 0 3 0 1 0 0 1 0 1 1 0 2 1 1 0 1 1 1 1 1 2 1 2 0 1 2 1 1 3 0 1 3 1 1 4 0 2 0 0 2 0 1 2 0 2 2 1 0 2 1 1 2 1 2 2 2 0 2 2 1 2 2 2 2 3 0 2 3 1 2 4 0 3 0 0 3 0 1 3 0 2 3 1 0 3 1 1 3 1 2
MPN / 100 ml < 1,8 1,8 1,8 3,6 3,7 5,5 5,6 2,0 4,0 6,0 4,0 6,1 8,1 6,1 8,2 8,3 10 10 4,5 6,8 9,1 6,8 9,2 12 9,3 12 14 12 14 15 7,8 11 13 11 14 17
95% batas kepercayaan Lebih rendah Lebih tinggi 0,090 0,090 0,70 0,70 1,8 1,8 0,10 0,70 1,8 0,71 1,8 3,4 1,8 3,4 3,4 3,5 3,5 0,79 1,8 3,4 1,8 3,4 4,1 3,4 4,1 5,9 4,1 5,9 5,9 2,1 3,5 5,6 3,5 5,6 6,0
6,8 6,8 6,9 10 10 15 15 10 10 15 12 15 22 15 22 22 22 22 15 15 22 17 22 26 22 26 36 26 36 36 22 23 35 26 36 36
Universitas Sumatera Utara
3 3 3 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
2 2 2 3 3 3 4 4 5 0 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 0 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 2 3 3
0 1 2 0 1 2 0 1 0 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 0 1 2 0 1 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 4 0 1
14 17 20 17 21 24 21 24 25 13 17 21 25 17 21 26 31 22 26 32 38 27 33 39 34 40 47 41 48 23 31 43 58 33 46 63 84 49 70 94 120 150 79 110
5,7 6,8 6,8 6,8 6,8 9,8 6,8 9,8 9,8 4,1 5,9 6,8 9,8 6,0 6,8 9,8 10 6,8 9,8 10 14 9,9 10 14 14 14 15 14 15 6,8 10 14 22 10 14 22 34 15 22 34 36 58 22 34
36 40 40 40 40 70 40 70 70 35 36 40 70 40 42 70 70 50 70 70 100 70 70 100 100 100 120 100 120 70 70 100 150 100 120 150 220 150 170 230 250 400 220 250
Universitas Sumatera Utara
5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
3 3 3 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 5 5
2 3 4 0 1 2 3 4 5 0 1 2 3 4 5
140 170 210 130 170 220 280 350 430 240 350 540 920 1600 >1600
52 70 70 36 58 70 100 100 150 70 100 150 220 400 700
400 400 400 400 400 440 710 710 1100 710 1100 1700 2600 4600 -
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4 Tabel 3. BAKU MUTU MIKROBIOLOGI AIR NOMOR : 492/MENKES/PER/IV/2010 TANGGAL : 19 APRIL 2010 NO 1 2
JENIS PARAMETER E. Coli Total Bakteri Koliform
SATUAN Jumlah per 100 ml Sampel Jumlah per 100 ml Sampel
KADAR MAX YG DIPERBOLEHKAN 0 0
Lampiran 5 Tabel 4. Hasil Pengamatan Bakteri Koliform Jenis Sampel Air Minum Air Bersih Air Badan Air Air Limbah Air Minum Air Limbah Air Limbah Air Limbah Air Limbah Air Bersih Air Minum Air Minum Air Minum Air Limbah Air Limbah
Nomor Sampel
Koliform
MPN
289/B/AM/02/2014 290/B/AB/02/2014 291/B/ABA/02/2014
Hasil Test Perkiraan 1-0-0 5-1-0 5-1-1
1-0-0 5-1-0 5-1-1
2,0 33 46
292/B/AL/02/2014
4-3-1
4-3-1
33
293/B/AM/02/2014 294/B/AL/02/2014
5-5-5 5-5-4
5-5-5 5-5-4
>1600 1600
295/B/AL/02/2014
5-5-3
5-5-3
920
296/B/AL/02/2014
5-4-5
5-4-5
430
297/B/AL/02/2014
5-5-5
5-5-5
>1600
298/B/AB/02/2014 299/B/AM/02/2014 300/B/AM/02/2014 301/B/AM/02/2014 302/B/AL/02/2014
3-0-0 5-0-1 2-1-0 0-0-0 5-5-3
3-0-0 5-0-1 2-1-0 0-0-0 5-5-2
7,8 31 6,8 <1,8 540
303/B/AL/02/2014
2-1-0
2-1-0
6,8
Universitas Sumatera Utara
Air Limbah Air Limbah Air Bersih Air Badan Air Air Badan Air
314/B/AL/02/2014
5-5-5
5-5-5
>1600
315/B/AL/02/2014
5-4-1
5-3-1
110
316/B/AB/02/2014 324/B/ABA/02/2014
5-5-5 5-5-5
5-5-5 5-5-5
>1600 >1600
323/B/ABA/02/2014
5-5-5
5-5-5
>1600
Lampiran 6 Gambar Alat dan Bahan
Gambar 1. Alat Timbangan Analitik
Gambar 3. Inkubator Suhu 35°C
Gambar 2. Hot Plate
Gambar 4. Oven
Universitas Sumatera Utara
Gambar 5. Media BGLB
Gambar 6. Media Lactose Broth
Universitas Sumatera Utara
