Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016

Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016

Taufan H. Sugara

Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etil Asetat Daun Tanaman Bandotan (Ageratum conyzoides L) Anti Bacteria Activity of Ethyl Acetate Fraction Bandotan leaf (Agerantum conyzoides L) Taufan H. Sugara*, Tun Tedja Irawadi, Irma Herawati Suprapto, Muhammad Hanafi Dosen Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Mataram, Dosen Departemen Kimia IPB, Peneliti Kimia, LIPI. [email protected]

Abstrak Pemanfaatan tanaman bandotan (Ageratum conyzoides L.) untuk penyembuhan luka dan gangguan pencernaan seringkali dikaitkan dengan aktivitas antibakteri yang dimiliki. Namun demikian, informasi tentang aktivitas antibakteri tanaman ini masih sebatas pada fraksi polar dan non polar saja. Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi semi polar daun tanaman bandotan terhadap bakteri Staphylococcus aureus and Eschirichia coli. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat daun tanaman bandotan mengandung senyawa flavonoid, steroid, p-hidrokuinon dan terpenoid. Fraksinasi ekstrak etil asetat dengan eluen kloroform : metanol (9:1) menghasilkan 8 fraksi dengan jumlah rendemen berturut-turut sebanyak 15,14g; 22,21g; 21,19g; 20,44g; 5,79g; 4,50g; 1,40g; 1,43g; dan 0,93g. Ekstrak etil asetat dan seluruh fraksi yang terkandung di dalamnya menunjukkan aktivitas antibakteri berspektrum luas dengan daya hambat yang tergolong dalam kategori kuat. Ratarata daya hambat ekstrak etil asetat dan fraksi 1-8 terhadap S. aureus berturut-turut sebesar 14mm; 12mm; 12,5mm; 15,5mm; 16mm; 12mm; 11,5mm; 10mm; 9,5mm. Sedangkan rata-rata daya hambat ekstrak etil asetat dan fraksi 1-8 terhadap E. coli berturut-turut sebesar 11mm; 11,5mm; 11mm; 11,5mm; 13mm; 14mm; 10,5mm; 10mm; 9,5mm. Kata kunci: Daun tanaman bandotan, ekstrak etil asetat, antibakteri.

88

Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin

Makalah diterima: 9 Februari 2016, Diterima untuk diterbitkan: 25 Februari 2016, diterbitkan: 1 Maret 2016


Taufan H. Sugara

Abstract Utilization of Ageratum conyzoides L. leaf for wound healing and digestion disorders are often associated with its antibacterial activities. However, informastion of this plant as antibacterial agent still limited on the polar and non polar fraction. Therefore, the objective of this study was to identify the antibacterial activity of semipolar fraktion extract of Ageratum conyzoides L. leaves to Staphylococcus aureus and Eschirichia coli. Phytochemical test results showed that the ethyl acetate extract of bandotan leaves contains flavonoids, steroids, phydroquinone and terpenoids. Fractionation of ethyl acetate extract with eluent chloroform: methanol (9:1) produced 8 fractions by the number of consecutive yield as much 15,14g; 22,21g; 21,19g; 20,44g; 5,79g; 4,50g; 1,40g; 1,43g; and 0,93g. Overal antibakterial activity result of ethyl acetat extract and fraction 1-8 showed broad-spectrum antibacterial activity with inhibition of belonging to the strong category. The average inhibition of ethyl acetate extracts and fractions 1-8 against S. aureus in a row amounted to 14mm; 12mm; 12,5mm; 15,5mm; 16mm; 12mm; 11,5mm; 10mm; 9,5mm. While, the average inhibition of ethyl acetate extracts and fractions 1-8 against E. coli in a row amounted to 11mm; 11,5mm; 11mm; 11,5mm; 13mm; 14mm; 10.5 mm; 10mm; 9,5mm. Keywords: Ageratum conyzoides leaf, ethyl acetat fraction, antibacterial.

PENDAHULUAN Salah satu tanaman obat yang

mempercepat

proses

cukup dikenal di masyarakat adalah

penyembuhan

tanaman

dengan mencegah terjadinya infeksi

bandotan

(Ageratum

conyzoides L). Tanaman bandotan

obat

luka dan

gangguna

luka

adalah

yang disebabkan oleh bakteri.

umumnya digunakan oleh masyarakat untuk

pada

Tanaman bandotan mengandung

senyawa-senyawa

pencernaan. Khasiat herba bandotan

sekunder

antara lain untuk pengobatan luka,

flavonoid,

gatal-gatal, flu, demam, diare, radang

chromen, chromon, kumarin, minyak

usus, dan rematik (Sukamto, 2007;

atsiri, dan tanin sehingga tanaman ini

Hasim, 2005). Penggunaan daun

dipercaya memiliki banyak manfaat

tanaman ini pada luka dipercaya dapat

dan salah satunya adalah sebagai

menghentikan

antibakteri (Ming, 1999; Kamboj &

pendarahan

dan

seperti

metabolit

terpena,

alkaloid,

2008).

sterol,

benzofuran,

mempercepat proses penyembuhan.

Saluja,

Oladejo et al. (2003) mengemukakan

antibakteri dari ekstrak polar dan non

bahwa salah satu cara untuk

polar

tanaman

Kajian

aktivitas

bandotan

Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin Makalah diterima: 9 Februari 2016, Diterima untuk diterbitkan: 25 Februari 2016, diterbitkan: 1 Maret 2016

telah 89


Taufan H. Sugara

dilaporkan oleh beberapa peneliti

semipolar

sebelumnya.

digunakan dan diketahui mampu

Ekstrak

polar

dari

yang

paling

sering

seperti ekstrak metanol (Almagboul

memisahkan

et al., 1985; Oladejo et al., 2003),

metabolit sekunder yang tidak dapat

ekstrak etanol (Widodo et al., 2007),

larut

dan ekstrak air (Yamamoto et al.,

nonpolar. Tujuan dari penelitian ini

1991; Okwori et al., 2007; Mustafa et

adalah mengetahui aktivitas anti-

al.,

memiliki

bakteri senyawa aktif yang terdapat

aktivitas sebagai antibakteri terhadap

pada ekstrak etil asetat daun tanaman

bakteri yang diujikan. Sedangkan dari

bandotan (Ageratum conyzoides L).

2005)

diketahui

ekstrak non polar, Okwori et al.,

senyawa-senyawa

dalam

pelarut

polar

dan

METODOLOGI PENELITIAN

(2007) melaporkan bahwa ekstrak

Sebanyak 1,5 kg simplisia

heksana tanaman bandotan memiliki

daun tanaman bandotan dimaserasi

aktivitas antibakteri terhadap bakteri

dengan pelarut heksana untuk meng-

uji.

hilangkan kandungan lemak dan Pengembangan

penelitian

minyak yang terdapat dalam sampel.

tentang aktivitas antibakteri dari

Setelah

tanaman bandotan sangatlah penting

residu yang dihasilkan dimaserasi

dan

dengan

kembali dengan pelarut etil asetat

pemanfaatannya sebagai obat luka

sehingga diperoleh ekstrak etil asetat.

secara tradisional. Sampai saat ini,

Daun tanaman bandotan dan ekstrak

dapat

dikaitkan

pencarian senyawa aktif antibakteri

dilakukan

penyaringan,

kasar yang diperoleh kemudian diuji

dari tanaman bandotan hanya terbatas

aktivitas antibakteri dan kandungan

pada fraksi polar dan non polar saja

fitokimianya. Ekstrak kasar etil asetat

sehingga pencarian senyawa aktif dari

kemudian

fraksi semipolarnya perlu dilakukan.

terbaiknya yang akan digunakan

Secara ilmiah, fraksi semipolar juga

dalam proses

mengandung

penentuan

senyawa-senyawa

metabolit sekunder yang memiliki aktivitas sebagai antibakteri. Etil asetat adalah salah satu pelarut 90

ditentukan

eluen

fraksinasi. Setelah

eluen

terbaik

dengan

metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Ekstrak etil asetat kemudian difraksinasi

dengan

kromatografi




Taufan H. Sugara

kolom sehingga diperoleh beberapa

Hasil

analisis

fitokimia

fraksi. Masing-masing fraksi diuji

terhadap daun bandotan menunjukkan

aktivitas

dengan

adanya senyawa-senyawa flavonoid,

metode (tripton Soy Agar) TSA untuk

steroid, p-hidrokuinon, terpenoid dan

mendapatkan fraksi yang memiliki

tanin.

aktivitas antibakteri paling tinggi.

juga terdapat pada ekstrak etil asetat,

antibakterinya

HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi maserasi simplisia

Senyawa-senyawa

kecuali

senyawa

tersebut

tanin

yang

menunjukkan hasil negatif. Senyawa

bandotan

tanin merupakan senyawa polifenol

menggunakan pelarut heksana dan

yang bersifat polar dan hanya dapat

etil asetat diperoleh ekstrak heksana

larut dalam pelarut dengan tingkat

sebanyak 75,95 g dan ekstrak etil

kepolaran yang sesuai. Perbedaan

asetat sebanyak 71,50 g. Simplisia

tingkat kepolaran etil asetat dan

dan ekstrak etil asetat yang diperoleh

senyawa tanin menyebabkan senyawa

kemudian dillakukan uji fitokimia

ini tidak dapat larut dalam pelarut etil

untuk membandingkan kandungan

asetat.

daun

tanaman

senyawa metabolit sekunder sebelum

Sebelum fraksinasi dilakukan,

dan setelah proses ekstraksi maserasi

terlebih dahulu ditentukan eluen yang

dilakukan. Hasil uji fitokimia daun

menghasilkan pola pemisahan terbaik

tanaman bandotan dan ekstrak etil

untuk

asetat disajikan pada Tabel 1 berikut

fraksinasi. Kombinasi pelarut yang

digunakan

digunakan

ini. Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Daun Bandotan dan Ekstrak etil Asetat Jenis Metabolit Sekunder

Daun Bandotan

Alkaloid Flavonoid p-hidrokuinon Terpenoid Steroid Saponin Tanin

++ ++ ++ ++ ++++

Ekstrak Etil Asetat ++ ++ + ++++ -

sebagai

dalam

eluen

proses

adalah

kloroform : asam asetat : air (90:45:6) dan kloroform : etanol (9:1). Hasil pengamatan penentuan eluen terbaik dengan metode KLT disajikan pada Gambar 1 berikut ini.


91


Taufan H. Sugara kepolaran yang tidak terlalu tinggi sehingga

sesuai

dengan

tingkat

kepolaran yang dihasilkan oleh eluen kloroform : etanol (9:1). Setelah

diketahui

eluen

terbaiknya, proses selanjutnya yaitu fraksinasi

dengan

metode

kromatografi kolom. Fraksi-fraksi Gambar 1. Hasil Analisis KLT (a) kloroform : asam asetat : air (90:45:6) dan (b) kloroform : etanol (9:1)

yang keluar dari kromatografi kolom ditampung pada tabung reaksi dengan

bahwa

jumlah 5 ml untuk masing-masing

eluen kloroform :asam asetat : air

tabung reaksi. Jumlah tabung yang

(90:45:6) hanya menghasil 6 spot

diperoleh dari hasil kromatografi

dengan pola pemisahan yang kurang

kolom adalah sebanyak 150 tabung.

baik. Eluen kloroform : etanol (9:1)

Tabung-tabung

menghasil pola pemisahan yang lebih

kesamaan

baik

digabungkan sehingga diperoleh total

Hasil

pengamatan

dengan

jumlah

spot

yang

dihasilkan sebanyak 8. Jumlah dan

8

pola pemisahan

kemudian

yang dihasilkan

fraksi.

yang

memiliki

spot

kemudian

pola

Masing-masing diuapkan

fraksi

pelarutnya

dipengaruhi oleh sifat kepolaran

dengan rotary evaporator. Nilai Rf,

senyawa-senyawa yang terkandung

warna dan jumlah rendemen yang

dalam

daun

dihasilkan dari masing-masing spot

tersebut

untuk eluen kloroform : etanol (9:1)

ekstrak

bandotan. kemungkinan

etil

asetat

Senyawa memiliki

tingkat

disajikan pada Tabel 2 berikut ini.

Tabel 2. Nilai Rf, warna jumlah rendemen yang dihasilkan dari masing-masing spot pada eluen kloroform : etanol (9:1) No 1 2 3 4 5 6 7 8

92

Warna pada cahaya tampak Hijau kehitaman Hijau tua Hijau muda Hijau muda Kuning muda Tidak berwarna Hijau muda Hijau muda

Warna pada UV (λ = 254 nm) Merah kehitaman Merah kehitaman Hijau tua Hijau tua Hijau muda Kuning Kuning muda Kuning muda

Rf 0,95 0,84 0,73 0,59 0,44 0,33 0,23 0,10

Rendemen (g) 15,14 22,21 21,19 20,44 5,79 4,50 1,43 0,93



Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016 Fraksi 1-4 memiliki jumlah rendemen

yang

lebih

tinggi

dibandingkan dengn 4 fraksi lainnya. tingginya

rendemen

fraksi

Taufan H. Sugara tersebut terabsorbsi lebih lemah oleh absorben sehingga akan keluar lebih dahulu dari kolom kromatografi.

1-4

Uji

aktivitas

antibakteri

menunjukkan bahwa ekstrak etil

dilakukan terhadap pelarut etil asetat,

asetat lebih banyak mengandung

ekstrak etil asetat, serta 8 fraksi yang

senyawa-senyawa

diperoleh

dengan

tingkat

dari

proses

fraksinasi.

kepolaran yang cenderung rendah.

Sebagai

antibakteri

standar,

Fraksi 1-4 memiliki tingkat kepolaran

digunakan

kloramfenikol

dengan

yang lebih rendah dibandingkan

konsentrasi 0,4 mg/ml. Hasil uji

dengan fraksi 5-8. Tingkat kepolaran

aktivitas antibakteri disajikan pada

yang rendah menyebabkan senyawa

Tabel 3 berikut ini.

Tabel 3. Hasil uji aktivitas antibakteri

Sampel Pelarut etil asetat Ekstrak etil asetat Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 Kloramfenikol (0,4 mg/ml)

Zona Hambat (mm) S. aureus E. coli Pengulangan Pengulangan Rata-rata Rata-rata 1 2 1 2 14,0 14,0 14,0 11,0 11,0 11,0 12,0 12,0 12,0 11,0 12,0 11,5 13,0 12,0 12,5 11,0 11,0 11,0 15,0 16,0 15,5 11,0 12,0 11,5 16,0 16,0 16,0 13,0 13,0 13,0 12,0 12,0 12,0 14,0 14,0 14,0 11,0 12,0 11,5 11,0 10,0 10,5 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 9,0 9,5 10,0 9,0 9,5 18,0 19,0 18,5 20,0 20,0 20,0

Hasil uji aktivitas antibakteri

terhadap E. coli sebesar 11 mm.

menunjukkan bahwa ekstrak kasar

Besarnya diameter

etil asetat dan fraksi-fraksi yang

ekstrak etil asetat hampir sama

terkandung di dalamnya memiliki

dengan diameter zona hambat ekstrak

aktivitas antibakteri seperti ekstrak

air, metanol dan heksana. Okwori et

polar dan non polarnya. Diameter

al.,

zona hambat yang dihasilkan oleh

diameter

ekstrak kasar etil asetat terhadap

dihasilkan oleh ektrak air, metanol

bakteri S. aureus sebesar 14 mm dan

dan heksan daun tanaman bandotan

(2007)

zona hambat

menyebutkan zona

hambat


bahwa yang

93


Taufan H. Sugara

terhadap S. aureus berturut-turut

Hasil uji aktivitas antibakteri

dalam kisaran 7-15 mm, 10-14 mm,

menunjukkan bahwa ekstrak etil

9-16 mm, sedangkan terhadap E. coli

asetat daun bandotan dan semua

sebesar 6-12 mm, 10-16 mm, 7-16

fraksi didalamnya memiliki spektrum

mm.

luas karena mampu menghambat Hasil uji aktivitas antibakteri

pertumbuhan bakteri gram positif dan

juga menunjukkan bahwa rata-rata

gram negatif. Dari hasil penelitian

zona

juga

hambat

yang

dihasilkan

diperoleh

informasi

bahwa

terhadap S. aureus cenderung lebih

ekstrak etil asetat dan fraksi 1-6

besar dibandingkan dengan E. coli.

tergolong sebagai antibakteri yang

Hal ini menunjukkan bahwa sampel

memiliki

yang diujikan memiliki sensitivitas

menghasilkan rata-rata diameter zona

yang lebih baik terhadap bakteri uji.

hambat diatas 10 mm. Stout dalam

Perbedaan sensitivitas bakteri gram

Maryuni

positif dan negatif diduga berasal dari

pengelompokan

perbedaan morfologi struktur dinding

berdasarkan luasan daya hambatnya

sel

ke

keduanya.

Hodges

(2002)

aktivitas

kuat

(2008)

dalam

4

karena

menjelaskan anti-bakteri

kelompok,

yaitu

menerangkan bahwa bakteri gram

antibakteri dengan aktivitas rendah

negatif memiliki membran fosfo-

(<5 mm), sedang (6-10 mm), kuat

lipida bagian luar yang menjaga

(11-20 mm) dan sangat kuat (>20

struktur komponen lipopolisakarida

mm). Namun demikian, zona hambat

nya sehingga dinding sel menjadi

yang dihasilkan oleh ekstrak etil

impermeable

asetat dan fraksi yang terkandung

terhadap

senyawa

antibakteri. Hal ini menyebabkan

didalamnya

dinding sel bakteri gram negatif dapat

hambat

bertindak

kloramfenikol

sebagai

penghalang

tidak

yang

sebesar

daya

dihasilkan

oleh

sebagai

antibakteri

terjadinya difusi dan membuatnya

standar. Kloramfennikol merupakan

kurang sensitif terhadap senyawa

antibiotik

aminoglikosida

yang

antibakteri

bersifat

bakteriostatik

dan

gram positif.

dibandingkan

bakteri

berspektrum luas dengan mekanisme kerja

94

yaitu

menggangu

sintesis



Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016 protein

pada

bakteri

(Schunack,

1990).

Taufan H. Sugara lebih sensitif terhadap bakteri gram positif.

Meskipun

aktivitas

anti-

bakteri yang ditunjukkan lebih rendah KESIMPULAN

dari kloramfenikol sebagai antibakteri

Berdasarkan hasil penelitian

standar, namun demikian esktrak etil

yang dilakukan, diketahui bahwa

asetat dan sebagian besar fraksi-fraksi

ekstrak etil asetat dan fraksi-fraksi

yang

yang

termasuk sebagai anti-bakteri dengan

memiliki

terkandung aktivitas

didalamnya antibakteri

terkandung

di

dalamnya

kategori aktivitas kuat.

berspektrum luas namun cenderung

DAFTAR PUSTAKA Almagboul et al., 1985, antimicrobial activity of certain sudanese plant used in forcloric medicine: screening for antibacterial activity, part II, Fitoterapia 56:103-109. Hasim, 2005, Mengembangkan potensial bakteri bandotan. http://www. kompas.com [23 mei 2005]. Hodges S, 2002, Pharmaceutical aplication of microbiological techniques in: Pharmaceutics: The science of dosage desaign, Aulton ME, Ed. 2nd. Edn. Harcourt Publisher Ltd. London.pp:606. Kamboj A, Saluja AK, 2008, Ageratum conyzoides L: A review on its phytochemical and pharmacological profile. International journal of green pharmacy: 59-68. Maryuni AE, 2008, Isolasi dan identifikasi senyawa antibakteri minyak atsiri daun zodia (Evodia sp) [tesis]. Bogor:

Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Ming LC, 1999, Ageratum conyzoides: A trapical source of medicinal and agricultural product. J.Janick, ASHS Press, Alexandria, VA. Mustafa et al., 2005, Evaluation of wound healing of Ageratum conyzoides L. Extratct in combination with honey in rats as animal model. International J of molecular and advance science (1):406-410. Okwori et al., 2007, Antibacterial activities of Ageratum conyzoides extract on selected baterial pathogens, The internet journal of microbiologyTM ISSN:1937-8289. Oladejo OW et al., 2003, Enhancemen of cutaneous wound healing by methanolic extract of Ageratum conyzoides in the wistar rat, African Journal of biomedical research, vol 6:27-31.


95

Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016 Schunack W et al., 1990, Senyawa Obat Ed.2, penerjemah: Watimena Jr & Soebito S, Yogyakarta: UGM Press. Sukamto, 2007, Bandotan Ageratum conyzoides tanaman multi fungsi yang menjadi inang potensial virus tanaman, Warta Puslitbangbun 13: Desember 2007.

96

Taufan H. Sugara Widodo et al., 2007, Isolation of antifungal and antibacterial compounds from etanol extract of Ageratum conyzoides Leaves (Ageratum conyzoides L), Acta pharmaceutica 31(2):86-88. Yamamoto et al., 1991, Pharmacological sreening of Ageratum conyzoides L. (Mentrasto), Mem Inst Oswaldo Cruz (86):145-147.



Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 1(1), 88-96, 2016

Recommend Documents