Inzet van Nederlandse mobiele laboratoria in de Ebola epidemie Suzan Pas1 Teamleider moleculaire diagnostiek Coördinator Dutch Mobile laboratories Teamleider Freetown1 1Viroscience
lab, Erasmus MC, Rotterdam, the Netherlands
Waarom is kennis over biosafety zo belangrijk…
“The last health worker infection in Guinea was reported on 6 April, and 14 May in Sierra Leone. There have been a total of 869 confirmed health worker infections reported from Guinea, Liberia, and Sierra Leone since the start of the outbreak, with 507 reported deaths” Bron: sit rep WHO 27th May
Ebolavirus : BSL4 pathogeen
Viremie: meestal 4-10 dagen (range 2-21 days).
Afdeling Viroscience, Erasmus MC, Rotterdam ISO15189:2012 geaccrediteerd
Reference functions • VWS en European commission Nationaal influenza center • WHO center voor Influenza
• WHO center voor Measles en rubella • Nationaal referentie center voor ‘emerging’ infections • VWS en WHO collaborating center voor viraal hemorrhagische koortsen en Arbo virussen
Timeline Erasmus MC: Eind oktober gevraagd voor advisering! http://www.defensiebond.nl/defensie/karel-doorman-vertrekt-6november-naar-west-afrika
Nederlandse Ebola response
Nederlandse mobiele laboratoria in zeecontainers 1. Sierra Leone (Kono) 40ft –DIFD/PIH
2. Liberia (Sinje) 20ft - Save the Children/IOM 3. Sierra Leone (Freetown, PCMH/ODCH) 20ft – Save the Children/PIH/MOH BSL2 faciliteit, BSL3 glovebox, interlock sluis, onderdruk, airconditioned, generator, HEPA filter. Capaciteit : max 60- samples per dag (EBOV + Malaria)
Location of laboratories in Guinea, Liberia, and Sierra Leone
http://apps.who.int/ebola/en/ebola-situation-report/situation-reports/ebola-situation-report-25-february-2015
Airflow in BSL3 container laboratoria
HEPA filtered air
HEPA filtered air Inlet dust filters
Lab aan de binnen kant…
Hier werd een filmpje getoond. Deze is online niet beschikbaar
Team selectie / training Teamleader : arts-microbioloog of (medisch) moleculair bioloog met minimaal 6-8 jaar ervaring 2 laboranten met BSL3 werk ervaring, bij voorkeur glovebox ervaring of 1 laborant met lange biosafety ervaring. Daarnaast nog 1-2 moleculair biologisch analisten met minimaal 2 jaar ervaring in analyses van klinische materialen
Eventueel nog verdere ondersteuning door analisten / PhD studenten / Post-Docs met ervaring in moleculaire detectie technieken Daarnaast: tijdens speed-date sessie met trainers worden o.b.v ervaring en persoonlijkheid teams samengesteld.
Inhoud training van vrijwilligers •
2 dagen : Save the Children, London, UK, - Algemene veiligheidstraining mbv Disaster ready - Acculturatie training - Psychologische training
•
3 dagen: training bij Erasmus MC, Rotterdam - Algemene Ebola kennis: achtergrond en epidemiologie - Ebola diagnostiek; algemeen en specifieke protocollen - Technische training container labs (theorie) - PPE (personal protective equipment) aan/uit kleden, protocollen - Glovebox: theorie en praktijk - Monster ontvangst : administratieve en biosafety handelingen - Data interpretatie / management - QC: kwaliteits controles - Spill protocols
Duidelijke foto-formaat biosafety protocollen
Uitzending West –Afrika • 3 dagen : on site training / overdracht (West Afrika) - Technische training container labs (praktijk) - Specifieke site-gerelateerd kennis - Acclimatisatie - Herhaling biosafety en diagnostische protocollen - Biosafety training van lokale labpersoneel ook belangrijk voor eigen veiligheid!
Personal protective equipment (PPE)
Niet nodig voor labwerkers, immers: eerste veiligheids niveau is glovebox
PPE sample ontvangst en laboratorium
Buddy check !
FFP2 masker
Full PPE bij spill protocol
FFP2 masker
Spill protocol – full PPE
Sample ontvangst Bag-in-a-bag 10 min in 0.5% chlorine
‘vies’ gedeelte
‘schoon’ gedeelte
administratieve ruimte / opslag
Glovebox – onderdruk / HEPA filter Hanteer algemene BSL3 regels Check differentiaal meters min. -30 Pa Check integriteit handschoenen
Lek detectie : Formeergas , Stikstof 95% / waterstof 5% (bij start, daarna 1x pm of vermoedde lekkage)
Ook in het laboratorium : buddies!
Indeling glovebox
Botte schaar beter dan safetybags open scheuren
Inactivatie Ebola virus Voor verdere moleculaire analyse : “lysis buffer” chaotropische werking (guanidinium iso thiocyanaat, [CH6N3]+), virus partikel 100ul sample + 300ul lysisbuffer, 15 min incubatie Hitte inactivatie is ook mogelijk; minimaal 60 min op 60 ͦC
Decontaminatie : hypochloriet , 10 min incubatie tijd
Buiten het lab
In lab
Waarvoor?
ppm
% (=g/100ml)
Handen wassen
500
0,05
Monster ontvangst
5000
0,50
bsl2 lab
1000
0,10
bsl3 glovebox
10000
1,00
Total number of tested samples in Dutch Mobile labs
Kono-SL Liberia Freetown - SL
total 2093 1332 192
pos 34 12 2
3617 samples t/m 29 mei 2015 getest
Result types of all Dutch mobile labs
average of positives (Ct values, n=48) : Ct 22.1 (15.8-36.8)
~ 10 miljoen virus partikels per ml bloed!!
Biosafety ook buiten het laboratorium
Ebola Checkpoints
Hand hygiëne
Awareness
Freetown – Sierra Leone
ODCH EHC PCMH
PCMH EHC
Holding Unit ODCH
PCMH - EHC
Ebola Treatment Unit (ETU)
Uitdagingen Elektriciteit 24/7 tot nu toe 3 power failure events Gevoeligheid van materialen tegen klimaat - chirurgische latex hanschoenen + mieren
- regenseizoen bliksem / slecht begaanbare wegen - airco hoge luchtvochtigheid in Freetown: waterlekkage logistieke keten:
- duur! luchtvracht ong. 7.50 euro /kilo! - tijdrovend Gebrek aan coordinatie in de (inter)nationale Ebola response
Glovebox met ‘roest-vrij’ staal handgrepen voor sluis
Grootste uitdaging: glovebox Geroeste ‘roest-vrij’ stalen handgrepen door 10.000 ppm hypochloriet na 5 maanden intensief gebruik Geen service mogelijkheid: motor doorgebrand
Bio-safety voor wie??
Acknowledgements Team Freetown 1
Dutch Mobile Labs (Erasmus MC)
Chantal Reusken Jolanda Maaskant Jeroen Roose Heidi de Gruijter
Marion Koopmans Bart Haagmans Chantal Reusken
Dank aan alle vrijwilligers
http://dutchebolalabs.nl/
Dutch Mobile Lab Freetown
