Prijs ƒ 3,-
OCTROOIRAAD Ter inzage gelegde Octrooiaanvrage Nr, Klasse
7 2 1 0 0 2 7.
30 . h 2 a ( 30 h 9', 120 M 7 5 ,
NEDERLAND CL
Indieningsdatum:
20 j u l i 1 9 7 2 , 15 u u r 30 K i n .
A 61 k 27/04 / / G 21 h 5 / 0 2 .
Datum van terinzagelegging:
23 j a n u a r i ' ; 1973.
De hierna volgende tekst is een afdruk van de beschrijving met conclusie(s)„ zoals deze op bovengenoemde datum werd ingediend.
Aanvrager;
E.R. SQUIBB & SOUS, INC,, P r i n c e t o n , New J e r s e y , Ver.St.v.Amerika
Gemachtigde: Octrooibureau Vriesendorp & Gaade ( I r , C, M, R. Davidson c . s . ) Dr. Kuyperstraat 6, 's-Gravenhage. Ingeroepen recht van voorrang! ' '20 j u l i 1971 Ver.St.V.Amerika I6h,k5ë 23 j u n i 1972 " 265o849 Korte aanduiding!
ï e c h n e t i i M - a l b u w i n e - a g g r e g a t e n , en werkwijze b e r e i d i n g daarvan.
voor de
D e z e / u i t v i n d i n g b e t r e f t h e t merken van m e n s e l i j k ;
serum-albumine met h e t r a d i o - a c t i e v e i s o t o o p technetium-99ra op eenvoud i g e 'wijze én zonder verwarming.
; 5
Gevonden i s dat aggregaten van albumine en s t a n n o -
j c h l o r i d e met Tc-99m b e h a n d e l d kunnen w o r d e n , waarna men de v e r k r e g e n f • . j ' s u s p e n s i e i n t r a v e n e u s i n h e t l i c h a a m kan i n j i c e r e n . ; |
Menselijk serum-albumine, gemerkt met r a d i o a c t i e f jodium.isgebruikt om van d i v e r s e l i c h a a m s d e l e n wat t e weten t e komen.
;
1 Ook i s Tc-99m i n de a f g e l o p e n j a r e n s t e r k opgekomen a l s r a d i o - a c t i e f i ! ""'*", • I 10 - element voor h e t merken. Diverse werkwijzen z i j n v o o r g e s t e l d om albumine f • met Tc-99m i n p l a a t s van met r a d i o - a c t i e f jodium t e merken.
!
Technétiüm-99m dankt z i j n g e s c h i k t h e i d voor de t r a e e r - 1 "! chemie zowel aan z i j n
72 1
9
293.
f y s i s c h e a l s z i j n chemische eigenschappen, Z i j n
j
k o r t e h a l f w a a r d e t i j & van 6 uur g e e f t i n combinatie met de a f w e z i g h e i d van primaire 0 - e m i s s x e l a g e s t r a l i n g s d o s e s
i n de w e e f s e l s . De hoge a c t i v i t e i -
t e n d i e men dus kan t o e d i e n e n verkorten de t i j d n o d i g voor een opname, en maken meerdere*momentopnamen van h e t t e onderzoeken orgaan m o g e l i j k . De l a g e e n e r g i e van z i j n y - s t r a l i n g (140 KeV) maakt h e t m o g e l i j k van een b e p a a l d , s l e c h t s e n k e l e c e n t i m e t e r s dik "vlak", waarop men met behulp van een c o l l i m a t o r scherp s t e l t , een b e e l d t e k r i j g e n ; d i t komt g e d e e l t e l i j k door h e t b e t e r e o p l o s s e n d vermogen, en g e d e e l t e l i j k doordat de s t r a l i n g s b i j drage van dieper l i g g e n d e l a g e n door z e l f a h s o r p t i e verminderd » wordt. Zoals 'reeds vermeld kan technetium i n d i v e r s e chemische vormen a f g e l e v e r d worden en kan h e t met e i w i t t e n complexen vormen. De t o e p a s s i n g van Tc-9S>m met m e n s e l i j k albumine i n de vorm van macro-aggregaten voor h e t onderzoeken van de longen i s beschreven door M.M.Gwyther en E.O. F i e l d i n I n t . J . Appl. Rad, and I s o t o p e s , 1£ (1966) 485-486; d a a r b i j gebruikt men hogere c o n c e n t r a t i e s aan f e r r i c h l o r i d e en ascorbinezuur. Een andere benadering van h e t probleem i s beschreven door T, DePaoli, A, Hager en J.O. N i c o l i n i i n I n t e r n . J . Appl. Rad. and I s o t o p e s ,
17, (1966)
551-4; d a a r b i j wordt TcO^ met zoutzuur e n ammoniumthiocyanaat gereduceerd en wordt m e n s e l i j k serum-albumine toegevoegd, wat een n e e r s l a g g e e f t dat meer dan 95% van h e t Tc-99m b e z a t . Een meer v o l l e d i g e b e s c h r i j v i n g van macroaggregaten kan men vinden i n h e t a r t i k e l van B. M. Bowen en D.E. Wood i n A . J . H o s p i t a l Pharm. 26 (1969) 529-534. I n d i t a r t i k e l v i n d t men de volgende c r i t e r i a voor aanvaardbare macroaggregaten: 1. Ze moeten s t e r i e l en p y r o g e e n - v r i j
zijn,
2 . minder dan % van de t o t a l e i a d i o - a c t i v i t e i t mag v r i j zijn, 3 . minder dan 10% der d e e l t j e s mag k l e i n e r dan 5 micron z i j n , en geen e n k e l d e e l t j e g r o t e r dan 100 micron; de gemiddelde d e e l t j e s a f m e t i n g moet t u s s e n 10 en 50 micron vallen; 4 . dé" s p e c i f i e k e a c t i v i t e i t moet zodanig z i j n dat de benodigde h o e v e e l h e i d r a d i o - a c t i v i t e i t op n i e t meer dan 1,5 mg albumine toegevoegd kan worden. A l ; deze bekende werkwijzen hebben h e t b e l a n g r i j k e n a d e e l
72 1 U 0 2 7
geoefend p e r s o n e e l en s p e c i a l e apparatuur t e vergen voor h e t u i t v o e r e n •van de manipulaties. Er z i j n pogingen geweest deze w e r k w i j z m t e v e r e e n voudigen, maar nog a l t i j d moet men meerdere malen mengen en verwarmen.
.
De volgens de u i t v i n d i n g t e v e r k r i j g e n aggregaten z i j n 5
i n d i t vak hekend a l s "macroaggregaten van menselijk serum-albuminel' • De werkwijze volgens de u i t v i n d i n g h e s t a a t h i e r u i t dat men een stannohalogenide (stannochloridev-bromide, -jodide^ aan een
,"
aangezuurde o p l o s s i n g van menselijk serum-albumine t o e v o e g t , de pH. op het i s o - e l e k t r i s c h e punt van het albumine i n s t e l t , zodat z i c h maeroaggrega10
ten vormen, waarna men de aldus gevormde bovenstaande v l o e i s t o f v e r w i j d e r t , dat men de gevormde macroaggregaten suspendeert i n een o p l o s s i n g i d i e geschikt i s voor i n j e c t i e , d i e men dan a l dan n i e t ontwatert, en dat men hieraan een Td99m~oplossing t o e v o e g t , om r a d i o - a c t i e f gemerkte macroaggregaten t e v e r k r i j g e n ,
15
In deze
b e s c h r i j v i n g worden met "macroaggregaten" d e e l t j e s
met afmetingen t u s s e n 10 en 100 micron bedoeld, b i j voorkeur met afmetingen t u s s e n 30 en 50 micron, " De macroaggregaten volgens deze u i t v i n d i n g worden boroiü u i t menselijk serumalbumine dat genatureerd i s (en wel t o t i n de e e r s t e 20
f a s e ) , dat men op i e d e r e bekende w i j z e kan b e r e i d e n . Een methode b e s t a a t u i t het verwarmen en a l k y l e r e n van normaal serumalbumine (USA) gevolgd door a l k a l i s c h maken. Men neme menselijk normaal serumalbumine a l s men u i t e i n d e l i j k proeven men mensen w i l u i t v o e r e n , en het overeenkomstige , d i e r l i j k e serum a l s men proeven met k o e i e n , honden, r a t t e n e n z . w i l
25 •
u i t v o e r e n . Het ISA wordt v e r h i t t o t een temperatuur t u s s e n 55 en 95° G s b i j voorkeur 1- t o t 60 minuten
t u s s e n 75-85°C, a f h a n k e l i j k van de gebruikte
h o e v e e l h e i d albumine. Met grotere hoeveelheden albumine h e è f t men langere t i j d e n nodig dan b i j k l e i n e r e hoeveelheden. Met een anorganisch zuur zoals, zwavelzuur, zoutzuur, salpeterzuur en d e r g e l i j k e , en met organische basen 30
z o a l s natriumacetaat, a z i j n z u u r / a c e t a a t - b u f f e r en met anorganische basen zoals
natriumhydroxyde en natriumbicarbonaat kan men de pH van h e t
albumine t o t 4,5-6 i n s t e l l e n , b i j voorkeur op 5 , 3 . D i t doet h e t gedenatureerde albimine neerslaan.•Opgemerkt moet worden dat het albumine gédena- ' tueerd kan worden door de pH op ongeveer 8 i n t e s t e l l e n , gevolgd door 35
.
aanzuren t o t pH van 4 , 5 t o t 6 , maar ook door de pH op ongeveer 2 i n t e s t e l l e n ea met bas® t e n e u t r a l i s e r e n op eerder genoemde pH-traject. Het
12 1 0 0 2 7 .
j
1
' - 1;
•
, .
•
*
i n s t e l l e n van genoemde hoge of l a g e pH-waarde gaat gewoonlijk gepaard met verwarmen om de denaturering v o l l e d i g t e maken. Een andere manier om h e t Q
'
albamine v o l g e n s deze u i t v i n d i n g t e b r e i d e n
b e s t a a t h i e r u i t dat men een
emulsie van albumine i n een o l i e z o a l s k a t o e n z a a d o l i e aanmaakt, de aldus gevormde macro-aggregaten ( d i e i n de t e c h n i e k a l s " m i c r o b o l l e t j e s " bekend staan), a f s c h e i d t , k l a s s i f i c e e r t en droogt. Een meer g e d e t a i l l e e r d v o o r s c h r i f t Vöctó deze methode kan men vinden i n
R a d i o l o g i e C l i n i c s of North
America 8_ (l969) 233 en i n I n t e r n a t i o n a l Journal o f Applied Radiation and I s o t o p e s 2 1 (1970) 155. De bevoorkeurde manier i s h e t gebruik van i n de handel v e r k r i j g b a a r m e n s e l i j k serum albumine, waarin ook conserveermiddelen en a n t i - s c h u i m s t o f f e n opgenomen z i j n . Van d i t m a t e r i a a l s t e l t men de pH met behulp van een anorganisch zuur z o a l s zwavelzuur o f zoutzuur de pH t u s s e n 1,0 en 3 , 0 i n , b i j v o o r k e u r t u s s e n 1,5 en 2 , 0 . Dan wordt een starmohalogen i d e i n de zure o p l o s s i n g o p g e l o s t . De verhouding van staiyio-ionen t o t albumine moet t u s s e n 1:2 en 1:20 l i g g e n ; de b e s t e r e s u l t a t e n v e r k r i j g t men met een stanno/albuminelverhouding van ongeveer 1:5. D i t toevoegen gebeurt a l s h e t gedenatureerde NSA r e e d s aangemaakt i s ; de pH moet d a a r b i j t u s s e n 1,0 en 2 , 0 l i g g e n , b i j voorkeur t u s s e n 1,1 en 1 , 3 . Dan wordt de pH van de o p l o s s i n g op h e t i s o - e l e k t r i s c h e punt i n g e s t e l d , wat voor gedenatureerd albumine ongeveer 5»3 i s , maar tussen
en 5 , 8 mag l i g g e n . Er o n t s t a a t dan een n e e r s l a g , dat i n de
t e c h n i e k a l s macroaggregaten bekend s t a a t . D i t n e e r s l a a n kan nog ondersteund worden door de o p l o s s i n g $0 t o t
minuten op 75-85°C t e
verwarmen, b i j voorkeur 10 t o t 20 minuten op 7 8 - 8 l ° C . Het aldus verkregenneerslag wordt dan met g e d e s t i l l e e r d w a t e r , z o u t - o p l o s s i n g o f een t h i o n i e t - o p l o s s i n g u i t g e w a s s e n . Het n e e r s l a g wordt dan weer gesuspendeerd i n voor i n j e c t i e g e s c h i k t w a t e r ,
zoutoplossing
of een o p l o s s i n g van een g e s c h i k t reductiemiddel z o a l s g l u c o s e ,
diïjhioniet,
e . d . De macroaggre^gaten kunnen desgewenst ook ontwaterd worden, daar d i t de s t a b i l i t e i t van h e t stanno t e n goede s c h i j n t t e komen. De bevoorkeurde methode van ontwateren i s v r i e s d r o g e n , hoewel andere standaardwerkwijzen ook t o e g e p a s t mogen worden. Hoewel i n de b e s c h r i j v i n g s t e e d s over albumine gesproken i s kunnen macroaggregaten v o l g e n s deze u i t v i n d i n g ook met andere eiwt-itten
-... z o a l s g l o b u l i n e s aangemaakt worden. Zo z i j n a , g - en y - g ^ b u l i n e n
hiervoor
g e s c h i k t , met b i j z o n d e r e voorkeur voor f i b r i n o g e e n * Tot zo v e r worden deze werkwijzen zodanig u i t g e v o e r d dat de verkregen preparaten s t e r i e l en n i e t - p y r o g e e n z i j n , dus g e s c h i k t voor 5
• i n j e c t i e . Men maakt zodanig doses aan dat met een e n k e l e i n t r a v e n e u z e i n j e c t i e een zoogdier van 70 kg 1-5 m i l l i c u r i e aan technet&rfum-99m ontvangt, b i j voorkeur ongeveer 3 m i l l i c u r i e . In de p r a k t i j k z a l men de laborant een ampul met vooraf b e r e i d e macroaggregaten v e r s c h a f f e n . A l l e s wat h i j most doen i s de benodigde
10
h o e v e e l h e i d Tc-99^ u i t een generator ( z o a l s beschreven i n h e t Amerikaanse o c t r o o i s c h r i f f c 3 . 3 6 9 . 1 2 1 ) t o e t e voegen. Dit wordt i n w a t e r i g e o p l o s s i n g t o e g e v o e g d , b i j v o o r k e ü r i n een z o ü t - o p l o s s i n g , a l naar h e t v o o r s c h r i f t van de a r t s » waarbij de gewenste h o e v e e l h e i d r a d i o - a c t i v i t e i t de bepalende f a c t o r i s b i j h e t
15
[
doseren van h e t techneti^um-99m. Het meten o f h e t opgeven van h e t t e verstrekken technetium i n chemische hoeveelheden i s o n p r a k t i s c h , daar
'
d i t s t e r k afhankelijk, i s van. de generator en hoe l a n g g e l e d e n d i e voor
\
h e t l a a t s t g e ë l u e e r d werd. Opgemerkt moet worden dat de r e a c t i e even goed : gaat b i j . een omgekeerde volgorde van t o e v o e g e n . Men gebruikt een s t a n n o 20
:
zout i n een anorganisch zuur, b i j voorkeur e e n h a l o g e n i d e . De u i t v i n d i n g wordt nu nader t o e g e l i c h t door de volgende
:
voorbeelden. Voorbeeld I B e r e i d i n g van albumine-macroaggregaten, 25
30
Benodigd:
..
Menselijk serum-albumine 25$
0 , 4 ml (100 mg USA)
Benzylalcohol
0 , 9 ml
Propaandiol-1,2
2 , 0 ml
Anti-schuimmiddel
c a . 2 druppels
Water voor i n j e c t i e 0 , 1 1 ïïCl ad pH«r,75
75 .
SnClg.SHgO 0,5M A c e t a a t - b u f f e r ad pH=5,1 .
ml
1,1 ml 100
mg
20
ml
Het m e n s e l i j k e serum-albumine, b e n z y l a l c o h o l , 35
' propaandiol,
anti-schuimmiddel en water voor i n j e c t i e worden met elkaargemengd. Dan
' ^
wordt de pH met 0,IN HCl op 1,75 i n g e s t e l d , wordt s t a n n o c h l o r i d e t o e g e v o e g d
72
260 9
293.
en wordt h e t g e h e e l gemengd. Dan wordt Ö,5M a c e t a a t - b u f f e r onder schudden toegevoegd en h e t mengsel ho minuten i n een waterhad op 80°C ( i 15°C) verwarmd, t e r w i j l h e t voortdurend geroerd wordt. Dan wordt h e t mengsel g e c e n t r i f u g e e r d e n de bovenstaande v l o e i s t o f weggedaan. Om de macroaggregaten verder t e z u i v e r e n worden de macroaggregaten weer i n water voor i n j e c t i e gesuspendeerd, wordt h e t mengsel weer g e c e n t r i f u g e e r d , en wordt de bovenstaande v l o e i s t o f opnieuw weggedaan. Dan wordt h e t gedenatureerde m e n s e l i j k e serum-aibumine i n 100 ml water voor i n j e c t i e gesuspendeerd en op c i r k a 5°C bewaard. Voorbeelden I I en I I I Overeenkomstig v o o r b e e l d I werden twee preparaten aangemaakt Beide werden beproefd op b i n d i n g van de toegevoegde h o e v e e l h e i d r a d i o a c t i v i t e i t i n longen en l e v e r van r a t t e n . Daartoe werd aan een s u s p e n s i e van macroaggregaten met o f zonder k a l i u m b i f t a l a a t - b u f f e r een Tö-99mo p l o s s i n g u i t een g e n e r a t o r toegevoegd, Nadat de preparaten aangemaakt waren werd
p r e c i e s 0 , 2 5 ml i n de b u i t e n s t e h a l s a d e r van r a t t e n g e i n j i -
c e e r d ; p e r preparaat werden 3 r a t t e n g e b r u i k t . Ua 15 minuten v e r b l i j f t i j d werden de r a t t e n o p g e o f f e r d , en werd nagegaan h o e v e e l
van de g e i n j i c e e r d e
d o s i s i n de longen en h o e v e e l h e i d i n de l e v e r t e r e c h t gekomen was. Ter v e r g e l i j k i n g werd n a t u u r l i j k ook de r a d i o - a c t i v i t e i t van h e t g e b r u i k t e preparaat gemeten; ook werden deze g e c e n t r i f u g e e r d en werd van de bovenstaande v l o e i s t o f f e n de r a d i o - a c t i v i t e i t bepaald. De radiochemische b i n d i n g wordt g e d e f i n i e e r d a l s : Totale r a d i o a c t i v i t e i t vloeistof Totale r a d i o a c t i v i t e i t T a b e l
r a d i o a c t i v i t e i t van bovenstaande ^ A Voorbeeld I I
Suspensie van m e n s e l i j k serumalbumine (volgens voorbeeld I )
2 ml
Kaliumbiftalaat-buffer
1 ml
Tc-99m ( u i t g e n e r a t o r )
2 ml
% g e i n j i c e e r d e dosisr i h r a t t e n l o n g e n
95,V *
Voorbeeld I I I 1 ml
t ml 9 9 , 6 * ) gemid-
% geinjiceerde dosis i n rattenlever J 3 rat) ten Uit deze voorbeelden b l i j k t dat aggregaten, van ionogeen
72
"i UQ
27.
t i l l en Tc-99m met albumine v l o t 'gebruikt kunnen worden voor h e t a f z o e k e n van de longen. Voorbeeld XV B e r e i d i n g van macroaggrega#ten 5
Benodigd: Menselijk serum albumine 25$
0,if ml (100 mg NSA)
Water voor i n j e c t i e
50
ml
:
0 , 1 1 HC1 ad pH= 2 2,5% SnClg.2HgO i n 0 , 1 1 HC1 10
1 . ml
.
;
,1M A c e t a a t - b u f f e r ad pH=5,1-5,2 Het serum-albumine, h e t water voor i n j e c t i e en h e t 0,1K ÏÏC1 worden gecombineerd en 20 minuten b i j 79°C gemengd ( c i r k a 325 t r i l l i n g e n / m i n . ) . Dan wordt de 2,5% s t a n n o c h l o r i d e - o p l o s s i n g t o e g e v o e g d , en wordt de pH met 1M a c e t a a t - b u f f e r op 5 , 1 - 5 , 2 i n g e s t e l d . Het mengsel wordt opnieuw
15
met schudden 20 minuten op 79°C verwarmd. ( c i r k a 325 t r i l l i n g e n / m i n . ) , Dan wordt het mengsel g e c e n t r i f u g e e r d en doet men de boenstaande v l o e i s t o f ; weg. Voor h e t uitwassen van de niacroaggregaten mengt men ze met water voor i n j e c t i e , centrifugeert
het mengsel opnieuw, en doet dé bovenstaande
• v l o e i s t o f weer weg. Dit uitwassen wordt h e r h a a l d , en dan worden de 20
macroaggregaten i n 100 ml water voor i n j e c t i e gesuspendeerd, en i n de ijskast geplaatst, Voorbeeld V Met h e t preparaat v o l g e n s v o o r b e e l d I I werden r a t t e n p r o e v e n overeenkomstig voorbeeld I I I u i t g e v o e r d ; de b e l a n g r i j k s t e gegevens z i j n
25
samengevat i n t a b e l B.
*
, ..
"
T a b e l
B
Suspensie van m e n s e l i j k serumalbumine ( v o l g e n s v o o r b e e l d I I )
1 ml
TC-99m ^generator )
1 ml
Water voor i n j e c t i e 30
•
% geïnjecteerde dosis i n rattenlongen
8 ml 10S ) gemiddeld • f over 3 0,57) r a i . ^ e n
% geïnjecteerde dosis i n rattenlever t- .
H i e r u i t b l i j k t wel hoe goed x'dit preparaat i a de l o n g e n
f
v a s t g e l e g d wordt, • Voorbeeld VI 35
;
" •'•
ïa, een mengsel van 20 ml 0,5N zoutzuur en toO a l water voor
72 1
0- 0 27
8 i n j e c t i e werd 0 , 7 5 g normaal menselijk serum-albumine opgenomen, en het g e h e e l werd 30 minuten onder roeren op 80°C verwarmd. Aan het afgekoelde mengsel werd 7 S 0 ml
s t a n n o c h l o r i d e - o p l o s s i n g door een s t e r i l i s e r e n d
f i l t e r toegevoegd, en d i r e k t daarna 100 ml 1M a c e t a a t - b u f f e r ( 8 , 5 g w a t e r v r i j natriumacetaat en 4 , 0 ml i j s a z i j n , met water voor i n j e c t i e t o t 100 ml aangevuld). D i t mengsel werd nog eens 50 minuten onder roeren op 80°C verwarmd, waarna men de aggregaten r u s t i g l i e t bezinken. Deze werden a f g e s c h e i d e n en opnieuw gesuspendeerd i n water voor i n j e c t i e , waarvan z o v e e l gebruikt werd-dat de c o n c e n t r a t i e aan gedenatureerd albumine 0 , 7 5 mg/ml bedroeg. Uitgerekend werd hoeveel normaal menselijk s^um-albumine nodig was om h e t produf? n 0,5#
o p l o s s i n g t e maken.
Ampullen ( b i j voorkeur
van kwarts) werden gevuld, en de inhoud werd gevriesdroogd. Voordat de ampullen dichtgesmolten werden werden ze met s t i k s t o f u i t g e s p o e l d . B i j t o e p a s s i n g kan een Tc-99m-oplossing een a c t i v i t e i t hebben die v a r i e e r t van 0 , 5 t o t 200 m i l l i c u r i e per ml, a f h a n k e l i j k van de bron van de r a d i o a c t i v i t e i t ; i n het algemeen s t e l t men deze o p l o s s i n g e c h t e r zodanig i n dat men met 1-3 ml Tc-99m-oplossing een preparaat k r i j g t met een a c t i v i t e i t van 1 t o t 10 m i l l i c u r i e per ml. C o n c l u s i e s 1. Macroaggregaten van technetium-99m, albumine en tweewaardig t i n . 2 . Macroaggregaat volgens c o n c l u s i e 1, waarvan de d e e l t j e s doorsneden van 5 t o t 100 micron hebben, 3. Macroaggregaat volgens c o n c l u s i e 1 of 2 , met h e t kenmerk, dat h e t albumine i n de vorm van m i c r o b o l i e t j e s
is.
4. Werkwijze voor het bereiden van een preparaat voor r a d i o a c t i e f onderzoek, met het kenmerk, dat men aan een zure o p l o s s i n g van gedenatureerd albumine of g l o b u l i n e een stanno-2out t o e v o e g t , de pïï van het mengsel t u s s e n 4 , 5 en 6 i n s t e l t , zodat h e t e i w i t - t i n - c o m p l e x a l s macroaggregaten n e e r s l a a t , en dat men vlak voor gebruik deze macroaggregaten met een waterige Tc-99m-oplossing combineert. 5. Werkwijze volgens c o n c l u s i e 4, met het kenmerk, dat de ______ pH b i j g e r e g e l d wordt met een anorganische b a s e . 6 . Werkwijze v o l g e - n s c o n c l u s i e 4 of 5» met het kenmerk, dat h e t e i w i t - t i n - c o m p l e x ontwaterd wordt voordat men d i t met de teehnefeiuor*99»»oplossing combineert,
f
7 . Werkwijze voor h e t onderzoeken van l o n g e n , waarbij men een r a d i o a c t i e f gemerkt preparaat i n t r a v e n e u s i n j i c e e r t , met h e t kenmerk, dat men hiervoor een preparaat g e b r u i k t , verkregen door een werkwijze volgens een der c o n c l u s i e s 4 t/m 6,
