Prijs ƒ 3,-
OCTROOIRAAD Ter inzage gelegde Octrooiaanvrage Nr. I n t a
NEDERLAND
Indienmgsdatum:
^ a p r i l 1972, 8 uur 59 min.
G 01
»
7 2 0 5 2 2 3
33/16
'
Datum van terinzagelegging:
G 21
h
5/
°°-
23 o k t o b e r
1973.
De hierna volgende tekst is een afdruk van de beschrijving met conclusie(s) en tekening(en), zoals deze op bovengenoemde datum werd ingediend.
Aanvrager: N.V. PHILIPS' GLOEILAMPENFABRIEKEN te EINDHOVEN
Gemachtigde: N.V. Internationaal Octrooibureau, Kastanjelaan 1 te Eindhoven (Dr. J. W. Schuttevaer c.s.) Ingeroepen recht van voorrang :
geen
Korte aanduiding: "Toestel geschikt voor toepassing bij radioimmunologische bepalingen alsmede methode voor de bepaling van het gehalte aan een specifiek hormoon in een serummonster"
De uitvinding heeft betrekking op een toestel dat geschikt is om te worden toegepast bij radio-immunologisa i e bepalingen. Volgens de radio-immunologische bepalingsmethodiek worden een serummonster dat een te bepalen gehalte aan een specifiek hormoon bevat, en een bekende hoeveelheid van hetzelfde maar dan radio-actief gemerkte hormoon toegevoegd aan een specifiek bindmiddel dat uit hormoon-bindende eiwitten of antilichamen bestaat. Na een incubatieperiode, waarin adsorptie van hormonale stof en radio-actieve stof aan de actieve plaatsen' van het bindmiddel plaatsbindt, wordt nagegaan in welke mate de toegevoegde radio-actieve stof aan het bindmiddel is ge-
72 0 5 2 2 3
-
2
-
b o n d e n . H i e r t o e wordt de g e b o n d e n r a d i o - a c t i e v e
stof
s c h e i d e n v a n de niet gebonden vorm en v e r v o l g e n s m i d d e l v a n een r a d i o - a c t i v i t e i t s m e t i n g g e b o n d e n en/of vrije r a d i o - a c t i e v e
ge-
door
de h o e v e e l h e i d v a n de
stof
bepaald.
N u geldt bij r a d i o - i m m u n o l o g i s c h e b e p a l i n g e n de mate w a a r i n de r a d i o - a c t i e v e
stof of h o r m o n a l e
dat
stof ge-
b o n d e n wordt aan het b i n d m i d d e l afhangt v a n de
verhouding
tussen h e t aantal b e s c h i k b a r e b i n d i n g s p l a a t s e n
in het b i n d -
m i d d e l en de totale h o e v e e l h e i d h o r m o n a l e - en
radio-actieve
stof. Het percentage radio-actieve
stof dat
gebonden
wordt is dus a f h a n k e l i j k v a n de aanwezige h o e v e e l h e i d m o n a l e stof. Met b e h u l p v a n standaardgegevens door r a d i o - a c t i v i t e i t s m e t i n g e n gebonden radio-actieve h o r m o n a l e stof w o r d e n
hor-
k a n uit het
vastgestelde
percentage
stof, de h o e v e e l h e i d
te b e p a l e n
afgeleid.
M e e r in het b i j z o n d e r betreft
de u i t v i n d i n g
een
toestel v o o r het u i t v o e r e n v a n een b o v e n o m s c h r e v e n r a d i o - ' i m m u n o l o g i s c h e b e p a l i n g , waarbij dit
toestel v o o r z i e n
v a n een b u i s v o r m i g r e a c t i e v a t dat op k u n s t s t o f hormoon-bindende
eiwitten of a n t i l i c h a m e n
symposium, Liège, M a y
19-25,
of the
"Protein and
international
1968; u i t g e g e v e n
B x c e r p t a M e d i c a Foundation, A m s t e r d a m ,
aangebrachte
bevat.
E e n d e r g e l i j k toestel is b e k e n d uit Polypeptide Hormones"; proceedings
is
door
1969 p a g i n a ' s
639-645. D i t b e k e n d e toestel b e s t a a t uit een aan de zijde g e s l o t e n b u i s v o r m i g r e a c t i e v a t van
polypropyieen,
p o l y e t h y l e e n of p o l y s t y r e e n w a a r v a n de b i n n e n w a n d telijk is bedekt met een dun laagje van B i j het u i t v o e r e n van een b e p a l i n g met behulp v a n dit bekende
onder-
gedeel-
antilichamen.
radio-immunologische toestel wordt
een
m o n s t e r serumeiwit dat een te b e p a l e n gehalte aan
een
h o r m o o n bevat alsmede
hetzelfde
een bekende h o e v e e l h e i d v a n
m a a r d a n r a d i o - a c t i e f gemerkte h o r m o o n in het b u i s j e g e b r a c h t . N a een incubatieperiode
72 05 2 2 3
reactie-
wordt de
vloei-
bare
inhoud van h e t
buisje
vervolgens
tenslotte gemeten. teit is
reactiebuisje
verschillende
de r a d i o - a c t i v i t e i t
totale
activiteit
e e n maat v o o r h e t
van het
bekende
bepaling heeft
t i j d vrij. lang
is
het
relatief
vloeistof
en a n t i - l i c h a m e n ten
Voorts anti-lichamen
waaraan hormonale
bezit.
een lage
Dit
relatief
grote
hoeveelheid
en v a n de t o e g e v o e g d e In Journal M e t a b o l i s m 30
of
( 1970)
geschikt
Hierbij
incubatievan
hoeveelheid
gevolg
te
stof
heeft in
dit
gevoeligheidsgraad sprake
bepalen
is
van
hormoon
stof.
Endocrinology 153-160
s c h i j v e n van
and is
aangegeven
polypropyleen
radio-immunologische worden deze
een r e a c t i e b u i s j e
schijven
aanwezig mengsel
metingen toegevan een
hormoon en e e n b e k e n d e h o e v e e l h e i d
te
radio-
hormoon. Na e e n v r i j
lange
o p l o s s i n g van hormonale buisje
de
tot
indien
pagina's
om b i j
door
en r a d i o - a c t i e v e
cq.
van het
bedekte
zijn
bepalen hoeveelheid actief
uiting
2,
de
bepaling uitgevoerd
Clinical
no.
t e worden t o e g e p a s t . voegd aan een i n
stof
radio-actieve
d a t met a n t i l i c h a m e n , eveneens
tot
wordt
verdeling
toestel
nauwkeurigheids-
komt v o o r a l
incubatie-
incubatievloeistof.
gering hetgeen
deze radio-immunologische
toestel,
tussen
radio-
de
veroorzaakt
v a n de
hormoon
serumeiwit.
uitgevoerde
slechte
i n het bekende
gebonden kunnen worden, dat
en de
opzichte
is
van h e t
kontaktoppervlak
wordt
radio-activi-
bezwaar dat
hetgeen wellicht
geringe
anti-lichamen
het
waarna
radio-actieve
toestel
immunologische
reactie-
reactiebuisje
laatstgemeten
hormoongehalte
Een met d i t
het
keren gewassen,
van h e t
De v e r h o u d i n g v a n d e
en de
verwijderd.,
verwijderd,
incubatieperiode,
stof
en r a d i o - a c t i e v e
de a c h t e r b l i j v e n d e
wassen en gedroogd waarna t e n s l o t t e v a n de s c h i j v e n wordt De m e t d e z e bepaling heet
72 05 2 2 3
stof
de uit
s c h i j v e n worden
het ge-
radio-activiteit
gemeten. schijven uitgevoerde
dezelfde
bepaling waarbij
de
wordt
bezwaren a l s
e e n met
radio-immunologische
de e e r d e r
antilichamen
gecoat
beschreven buisvormig
reactievat
wordt
ongewenst
lange
toegepast.
Ook h i e r
incubatietijd,
meetgevoeligheid
gegeven bezit.
soort
merkt d a t
in het
volgens
elastisch
drukbaar i s
en waarvan h e t
inwendige,
een
de voornoemde b e z w a r e n
sponsje
gehele, is
eiwitten.
is
kan b e s t a a n u i t
daarvan.
Zeer g u n s t i g e
sing van een t o e s t e l sponsje laagje
is
volgens
vervaardigd uit
volgens
onderste
opening voorziene
gunstige
aan b o v e n -
buisvormige
het
sponsje
vat
een daarin verplaatsbare Met b e h u l p v a n h e t
bijvoorbeeld
in
insuline
lichamen binden.
Bij
kontakt
en bedekt
eiwitten
het
zuiger
een
toestel
van
het
volgens
Het
intrinsic
toestel
welke
het
een tussen
uitvinding
is
ook
volgens
als
vanzelf-
de
uitvinding
te bepalen insuline
sponsjes
zoals
mogelijk
factor
antilichamen
gecoate
in
reactie-
de
H e t moge
specifiek het
met s p e c i f i e k e
het
zich
waarbij
antihormoon is
het
tegen kunnen
geen antibody bevatten
t e b r e n g e n met een verdunde w a t e r i g e
72 05 2 2 3
met
bevat.
een b e p a l i n g van b i j v o o r b e e l d
sponsjes
het is
sponsje
en o n d e r z i j d e
toegepast.
in het
die
toepas-
uitvoeringsvorm van
worden b e p a a l d .
De m e t a n t i l i c h a m e n
door
waarbij
b e d e k t moet z i j n met e e n l a a g j e
dus g e c o a t
insuline. bereid
sponsje of
sponsje
dat het
bij
serum voorkomende hormonen
s p e c i f i e k bindmiddel wordt sprekend z i j n
sponsje
mengsels
worden b e r e i k t
reactievat,
v i t a m i n e B12 t e b e p a l e n w a a r b i j
aanwezige
of
e n de o p e n i n g aan de b o v e n z i j d e ,
kunnen v e r s c h i l l e n d e
antilichamen
polypropyleen,
stoffen
polyurethaan
samenals
waaruit het
polyethyleen,
de u i t v i n d i n g b e v i n d t
d e e l van h e t
geheel
insuline.
In een verdere toestel
dat
de u i t v i n d i n g
geken-
kunststof
zowel uitwendige
polymere
aanniet
hierdoor
van een l a a g j e
resultaten
antilichamen van
is
De k u n s t s t o f
en s o o r t g e l i j k e
is
een u i t
aanwezig
hormoonbindende
polystyreen
geringe
van de e e r d e r
de u i t v i n d i n g
oppervlak voorzien
vervaardigd,
toestel
buisvormig reactievat
vervaardigd
vaneen,
meetgebied.
ontwikkeld welke
Het t o e s t e l
sprake
een b e t r e k k e l i j k
en een k l e i n
Aanvraagster h e e f t
is
worden
in
oplossing
van
of
- 5 -
antibodies
waarin zo w e i n i g m o g e l i j k
eiwitmolekulen
of
andere
ionen aanwezig z i j n .
storende
De s p o n s j e s
z o d a n i g gedompeld worden i n de a n t i b o d y - o p l o s s i n g lucht
in het
sponsje
eerst
volledig
achterblijft.
ingedrukt
Hiertoe
of v o l l e d i g
i n de a n t i b o d y - o p l o s s i n g
de b e h a n d e l i n g
met a n t i b o d y - o p l o s s i n g
enkele uren geincubeerd,
een f y s i o l o g i s c h e
zoutoplossing
Het v r i e s d r o o g p r o c e s In p l a a t s
v a n de
oplossing, sponsjes
sponsjes
te
polyurethaan-schuim, en v e r v o l g e n s
zijn,
worden de
De u i t v i n d i n g b e t r e f t b e p a l e n van h e t
gehalte
serummonster waarbij
op k u n s t s t o f
aangebrachte
opgezogen i n samendrukbaar
sponsje
worden.
wordt
of
kunststof
vervaardigd,
waarvan h e t
en t e n s l o t t e
de d a a r u i t
inwendig-
het
met
of
hierdoor hormoon
worden
elastisch en
hormoonbindende het
en
uitwendig eiwitten
sponsje
de r a d i o - a c t i v i t e i t
verwijderde
radio-actieve
van
het
vloeistof
bepaald. De v e r h o u d i n g
activiteit
tussen de'laatst
en de r a d i o - a c t i v i t e i t
radio-actief
hormoon i s
aan hormoon i n h e t van
is
en r a d i o - a c t i e f
nai e e n i n c u b a t i e p e r i o d e
sponsje
eiwitten
de u i t v i n d i n g
of
leeggedrukt
vervaardigd.
worden g e b r a c h t
z i j n met e e n l a a g j e
wordt
deze
een methode voor
oppervlak bedekt antilichamen,
Uit
hormoon.
serummonster
een u i t
van
antibody-oplossing
hormoonbindende
De m e t h o d e v o l g e n s dat
platen
s p e c i f i e k hormoon i n e e n ön serummonster/een bekende h o e v e e l h e i d
gemerkt hormoon i n k o n t a k t
gekenmerkt,
w a a r u i t de
aan een
radio-actief
a n t i l i c h a m e n van h e t
antibody-
worden
voorts
met
voorafgaan.
materiaal
gewassen en g e v r i e s d r o o g d
Na
gewassen
bijvoorbeeld
sponsjes
alvorens
sponsjes
wasproces
b e h a n d e l d worden met
p l a t e n kunnen de b e n o d i g d e
sponsje
gevriesdroogd.
b e h a n d e l e n met
zoals
geen
het
plaatsbindt.
en t e n s l o t t e
kunnen ook p l a t e n v a n h e t
vervaardigd
wordt
vervolgens
kan ook aan h e t
dat
vacuum g e z o g e n
onderdompeling
gedurende
moeten
72 0 5 2 2 3
e e n maat v o o r h e t
serummonster.
standaardgegevens
v a n de
Hieruit
(ijkkrommen)
het
gemeten totale
radiohoeveelheid
te bepalen kan,
met
werkelijk
gehalte
behulp gehalte
worden
afgeleid. De t o t a l e
hoeveelheid
toegevoegd
radio-actief
h o r m o o n lean d o o r m i d d e l v a n e e n r a d i o - a c t i v i t e i t s m e t i n g den b e p a a l d .
Een d e r g e l i j k e
meting kan p l a a t s v i n d e n
dat het
radio-actieve
sponsje
maar k a n e v e n g o e d g e r e a l i s e e r d
radio-actief
hormoon wordt
hormoon r e e d s
Aanvraagster
in het
noodzakelijk
is
gelijktijdig
op t e
t a t e n worden b e r e i k t opgezogen i n het sponsje
wordt
opgezogen,
wederom w o r d t
activiteit actieve
sponsje,
van het
sponsje.
eerst het
vervolgens
het
sponsje
of
beschrijving
resul-
wordt het
radio-actieve
en t e n s l o t t e
het
de
radio-
verwijderde
radio-
gemeten.
De u i t v i n d i n g m o g e a a n d e h a n d v a n d e tekening alsmede
hormoon
serummonster
de d a a r u i t
toe-
niet
na een i n c u b a t i e p e r i o d e ,
leeggedrukt
v l o e i s t o f ' wordt
bij
Zeer goede
het
het
is.
na een i n c u b a t i e p e r i o d e
leeggedrukt,
hormoon wordt sponsje
indien
gevonden dat,
en r a d i o - a c t i e f
zuigen in het
het
aanwezig
de u i t v i n d i n g ,
om s e r u m m o n s t e r
voor-
worden wanneer
sponsje
heeft voorts
p a s s i n g v a n de methode v o l g e n s
opgezogen in
wor
door middel van de aan h e t
bijgevoegde
eind van
opgenomen u i t v o e r i n g s v o o r b e e l d e n
de
nader
worden
toegelicht. In f i g . uitvoeringsvorm
1 is
een dwarsdoorsnede
van het
toestel
volgens
van een
geschikte
de u i t v i n d i n g
weer-
gegeven. Xn d e z e
fig.
is
met h e t v e r w i j z i n g s c i j f e r
1 een
buisvormig reactievat
van polypropyleen
de b o v e n z i j d e
open i s
en v o o r z i e n van een handgreep
de
bevat het
onderzijde
een opening opening
4 is
uitgespaard.
k een tuitvormig
centraal kanaal
6,
zuiger
z i e n vaneen zuigerstang
zuiger
van het
deel
Bodem 3 b e v a t 5 dat'voorzien
7 aanwezig.
8 welke
reactievat
afgekeerde uiteinde
72 05 2 2 3
1 een bodemdeel
Binnen h e t buisvormig vat
axiaal verplaatsbare
uiteinde
reactievat
aangegeven dat
zich
1 uitstrekt voorzien
is
een
,
voor-
het
en aan h e t van een
waarin
een
7 is
voorbij
Aan
de
van
1 is
Zuiger
tot
3
rondom is
2.
aan
open
van
aandruk-
de
plaat uit
9•
Tussen zuiger
kunststof,
i en g e h e e l wendige
zoals
7 en bodemdeel
zich
polyurethaan vervaardigd,
samendrukbaar
oppervlak
3 bevindt
sponsje
van het
10,
sponsje
elastisch
Het u i t w e n d i g e
10 i s
gecoat
een
en
met
in-
anti-
'. l i c h a m e n . De m e t h o d e v o l g e n s van het
gehalte
de u i t v i n d i n g
aan e e n hormoon i n e e n
bepalen
serummonster,
behulp van h e t
i n de t e k e n i n g w e e r g e g e v e n
de u i t v i n d i n g ,
wordt
i n de v o l g e n d e
voor het
toestel
met
volgens
uitvoeringsvoorbeelden
verduidelijkt. Uitvoeringsvoorbeeld
1;
Methode v o o r h e t b e p a l e n van h e t in
serummonsters. Zuiger
wordt door h e t
7 van h e t
waarbij
het
zuigerstand
met a n t i - l i c h a m e n
polyurethaan vervaardigde drukt.
Het
gestoken
toestel
tuit^ormig
deel
5 van h e t
(j
niet
insuline
aanwezig
d o o r d e d r u k op d e
zich geheel^zonder
volume
Het kanaal
afgesloten
niet e e n d o p j e ,
sponsje
wordt nu g e d u r e n d e
Het
bedraagt
vult
vloeistofvolume
te
laat
men
verminderen,
sponsje
met de genoemde deel
het
tot
waarbij het
tuitvormig
11.000
3 uren b i j
sponsje
en hormoon i n de
type
0,6
5 wordt
c.p.m.
Het
kamertemperatuur tussen
oplossing
geheel
optreedt.
gemeten.
nu
van
toestel
|
geincubeerd
!
antilichatóea
op
het
Het dopje
wordt
waarbij
v e r w i j d e r d wordt u i t
Opnietiw w o r d t d e r a d i o a c t i v i t e i t
ml
kristal.
en de z u i g e r n a a r b e n e d e n bewogen
7 2 0 5 219393
picogram
picogram
Vervolgens
in een w e l l
een evenwichtstoestand
ml v l o e i s t o f
vervolgens
waarna de r a d i o - a c t i v i t e i t
waarbij
de 0 , 6
en 25
terugkomen,
6 in het
wordt gemeten
De r a d i o - a c t i v i t e i t
verwijderd
zijn.
zuiger
luchtbellen
oplossing.
uit
samenge-
wordt
waarin 200
-insuline)
een standaardmaat.
oorspronkelijk
en
K
insuline
v a n 0 , 6 ml i s
bewogen
wordt
toestel
1
9
gecoate
10 g e h e e l
i n 0,6 ml v a n e e n o p l o s s i n g
gemerkt
in fig.
naar beneden
van i n s u l i n e
radio-actief
het
8,
sponsje
•j ^
sponsje,
weergegeven
u i t o e f e n e n v a n druk op a a n d r u k p l a a t
en daarmede v e r b o n d e n
zijn
insuline-gehalte
Deze
het
sponsje.
bedraagt
"thans 5 - 7 0 0
c.p.m.
Gelijktijdig in drie
andere
gecoate
sponsjes
met de b o v e n s t a a n d e
toestellen,
bepaling
w a a r i n met h e t z e l f d e
aanwezig z i j n ,
b e p a l i n g e n van
en 0 picogram n i e t
gemerkt i n s u l i n e 125 200 picogram J -insuline
uitgevoerd,
eveneens
wordt
u i t v o e r i n g van deze bepalingen
'anti-lichaam 150,
500
waarbij
toegepast.
De
geheel
identiek
hierboven uitvoerig beschreven bepaling.
Nadat de
sponsjes
activiteiten
gemeten:
zijn
leeggedrukt,
is
worden
worden de v o l g e n d e
bij
0 picogram i n s u l i n e :
6,700
bij
150 p i c o g r a m
insuline:
4,000
c.p.m.
bij
500 picogram i n s u l i n e :
3*700
c.p.m.
c.p.m.
Xn t a b e l v o r m k u n n e n d e v e r k r e g e n r e s u l t a t e n worden
aax/de
als
volgt
samengevat. TABEL I
Hoeveelheid niet radioactief insuline in picogrammen
Radio-activit e i t (in counts per minute) van totale hoeveelheid radioactief insuline
Radio-activit e i t (in counts per minute) van aan sponsje gebonden r a d i o actief insuline
Percentage van t o e g e voegd radioactief insul i n e d a t aan sponsje gebonden wordt
0
6700
1 1 ..000
61$
25
5700
11.000
52%
150
4000
11.000
36
500
3700
11.000
3bi
Uit
deze
t a b e l kan worden opgemaakt d a t de mate w a a r i n
radio-actief
insuline
aan h e t
a f h a n g t van de h o e v e e l h e i d insuline.
radio-actief
wordt
aanwezig n i e t
Met b e h u l p v a n d e z e
percentage
sponsje
tabel
insuline
dat
insuline
worden
72 0 5 219403
radio-actief het
gebonden wordt
een onbekende h o e v e e l h e i d n i e t bepaald.
geabsorbeerd,
kan dus u i t
sponsje,
het
radio-actief
gemeten, aan
het
- 9 -
Uitvoeringsvoorbeeld Methode
2:
t e r b e p a l i n g van i n s u l i n e - g e h a l t e
in
serummonsters. Zuiger 5
sponsje
gecoate
10 g e h e e l
5 van h e t
10
druk op t e tot
zijn
sponsje
15
1 weergegeven
zuiger
samengedrukt.
100 p i c o g r a m
volume
zich geheel vult
toestel
met e e n d o p j e
geheel
en h e t
dopje verwijderd wordt nu 0 , 6 125
afgesloten
bevat
kamertemperatuur
het
toestel
Het a f s l u i t d o p j e
sponsje
leeggedrukt.
gemeten
en b e d r a a g t
Het
geheel De
hoeveelheid
22.000
kktfa g e b o n d e n a a n d e o p h e t De b o v e n s t a a n d e
proef
zijn
72 0 5 2 2 3
in
wordt
sponsje
weer 4
uren
counts
per
verwijderd
en
het
radio-activiteit per minute.
insuline
aanwezige
is
tabel
II
Van
de
dus
antilichamen.
wordt h e r h a a l d met
onderstaande
het
picogram
hoeveelheden n i e t gemerkt i n s u l i n e n a m e l i j k 0, p i c o g r a m i n s u l i n e en met d e z e l f d e h o e v e e l h e i d , 125 1000 p i c o g r a m , J-insuline. De r e s u l t a t e n
uren
In het
50.000
counts
sponsje
het
radio-aktiviteitVan
de
radio-actief
de
oplossing.
gedurende
wordt v e r v o l g e n s
Opnieuw w o r d t
van
Door
wordt
1000
toestel
en b e d r a a g t
thans
ml
afgesloten
meerdere
leeggedrukt.
en h e t
wordt gemeten
ml
Vervolgens
geincubeerd.
minute.
toegevoegde
gedurende
opgenomen.
bij
0,6
deel
sponsje
wordt v e r v o l g e n s
sponsje
met h e t d o p j e
bevat.
men h e t
ml v a n e e n o p l o s s i n g w e l k e
J-insuline
0,6
terugkomen waarbij
kamertemperatuur. en h e t
tuitvormig
gestoken in
met de genoemde
De o n d e r k a n t 'van h e t
anti-lichamen
Het
laat
toestel
vervaardigde
insuline
te verminderen
oorspronkelijke
met
polyurethaan
wordt v e r v o l g e n s
welke
geincubeerd b i j
:
en u i t
wordt
toestel
een o p l o s s i n g
25
in f i g .
wordt naar beneden bewogen w a a r b i j h e t van i n s u l i n e
20
7 van het
andere
200 en dat i s
verwerkt.
300
TABEL II
Hoeveelheid niet radioactief insuline in picogramnen
Radio-activiteit (in counts per minute) van een spotje gebonden Jinsuline 32500 22000 17500
0 100 200 300
13500
Radio-activiteit (in counts per minute) van totale hoeveelheid 125 Jinsuline 50.000 50.000 50.000 50.000
Percentage aan sponsje gebonden J-insuline
6% kb-io 271°
De mate waarin 125 J-insuline gebonden wordt aan het sponsje hangt af van de hoeveelheid niet radio-actief insuline. 125
Uit het gemeten percentage gebonden J-insuline, kan een onbekende hoeveelheid insuline worden afgeleid. CONCLUSIES: 1. Toestel geschikt voor toepassing bij radioimmunologische bepalingen, bevattende een buisvormig reactievat dat voorzien is van op kunststof aangebrachte hormoonbindende eiwitten of antilichamen, met het kenmerk, dat hetreactievat een uit kunststof vervaardig elastisch sponsje bevat dat geheel samendrukbaar is en waarvan het uitwendig en inwendig oppervlak voorzien zijn van een laagje antilichamen of hormoonbindende eiwitten. 2. Toestel volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het sponsje zich bevindt in het onderste deel van het aan boven- en onderzijde van een opening voorziene buisvormige reactievat en voorts het reactievat tussen sponsje en opening aan de bovenzijde, voorzien is van een binnen het reactievat verplaatsbare zuiger. 3• Toestel volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat het sponsje uit polyurethaan vervaardigd is en bedekt is met een laagje antilichamen van insuline. b. Methode voor het bepalen van het gehalte aan een 72 0 5 2 5 3
s p e c i f i e k hormoon i n
een
serummonster waarbij
en een bekende h o e v e e l h e i d
radio-actief
in kontakt
met op k u n s t s t o f
worden g e b r a c h t
hormoonbindende
eiwitten
met h e t kenmerk,
dat
worden
in
opgezogen
of
serummonster een u i t
oppervlak
z i j n met e e n
of
wordt
antilichamen, leeggedrukt
sponsje wordt
waarvan h e t
in-wendig-
laagje
en t e n s l o t t e
hormoon, hormoon
vervaardigd,
elastisch
en
uitwendig
hormoonbindende
na een i n c u b a t i e p e r i o d e
de d a a r u i t
het
eiwit-
sponsje
de r a d i o - a c t i v i t e i t
verwijderde
Methode v o l g e n s serummonster wordt
incubatieperiode het
aangebrachte
radio-actieve
van
het
vloeistof
bepaald.
5. het
of
hormoon
en r a d i o - a c t i e f
kunststof
sponsje
ten
gemerkt
a n t i l i c h a m e n van h e t
en samendrukbaar bedekt
serummonster
radio-actieve
periode
het
het
de r a d i o - a c t i v i t e i t
Eindhoven,
sponsje
van h e t
1972.
k,
wordt
kenmerk,
sponsje,
leeggedrukt,
opgezogen,
of
na
en
de d a a r u i t
gemeten.
dat
een
vervolgens
na een
leeggedrukt
sponsje wordt
met h e t
in het
wederom w o r d t
vloeistof
18 a p r i l
72 0 5 2 5 3
opgezogen
hormoon wordt
sponsje
de r a d i o - a c t i e v e
conclusie
r
incubatietenslotte verwijder-
>
I
72 0 5 2 2 3
