DAFTAR ISI Halaman HALAM AN JUDUL...................................................................................................i HALAM AN PEN GESAH AN...................................................................................iii HALAM AN PERNY ATAA N.................................................................................. iv PRAKATA..................................................................................................................v HALAM AN PERSEM BAHA N...................................................................... ..........ix DAFTAR ISI...............................................................................................................x DAFTAR TABEL.....................................................................................................xii DAFTAR GAM BAR...............................................................................................xiii DAFTAR LAM PIRAN.............................................................................................xv DAFTAR SINGKATAN.........................................................................................xvi INTISARI...............................................................................................................xvii ABSTRACT.............................................................................................................xviii I PENDAHULUA N ............................................................................................... 1 A. Latar Belakang ................................................................................................... 1 1. Perumusan M asalah .......................................................................................... 9 2. Keaslian Penelitian ......................................................................................... 10 3. M anfaaat Penelitian ........................................................................................ 13 B. Tujuan Penelitian .............................................................................................. 14 1. Tujuan Umum ................................................................................................ 14 2. Tujuan Khusus................................................................................................ 14 II TINJAUAN PUSTAK A .................................................................................... 16 A. Telaah Pustaka .................................................................................................. 16 1. Korosi pada Komponen Alat Cekat Ortodonti ............................................... 16 1.1. Peran Saliva terhadap Terjadinya Korosi ................................................ 19 2. Pengaruh Ion Nikel yang Terlepas dari Alat Ortodonti Cekat terhadap Jaringan di Rongga M ulut ............................................................................. 21 2.1. Sitotoksitas...................................................................................................25 2.2. Pengaruh Ion Nikel terhadap Fibroblas G ingiva ................................ .......26 2.2.1 Kerusakan DNA ............................................................................. 28 2.2.2 Apoptosis Sel ................................................................................. 30 3. Pengaruh Pemakaian Alat Ortodonti terhadap Peningkatan Pertumbuhan Bakteri dan Fungi di Rongga M ulut .............................................................. 31 3.1. Streptococcus mutans ..............................................................................34 3.2. Candida albicans ....................................................................................35 4. Kitosan ......................................................................................................... 37 4.1. Sifat Adsorbsi Kitosan ............................................................................38 4.2. Interaksi Kitosan dengan Ion logam ....................................................... 40 4.3. Kitosan sebagai A ntibakteri dan Antifungi ................................................41 4.4. Nanokitosan ........................................................................................... 43 5. Hidrogel Gelatin ........................................................................................... 45 B. Landasan Teori ................................................................................................. 49 x
C. Kerangka Teori ................................................................................................. 53 D. Hipotesis .......................................................................................................... 54 III M ETODE PENELITIAN.....................................................................................56 A. Jenis Penelitian ................................................................................................. 56 B. Identifikasi Variabel Penelitian ......................................................................... 56 C. Definisi Operasional Variabel ........................................................................... 57 D. Bahan dan Alat Penelitian ................................................................................. 61 E. Jalannya Penelitian ............................................................................................ 64 1. Pembagian Kelompok Penelitian ................................................................... 64 2. Pembuatan Larutan Nikel pada Saliva Tiruan....................................................64 3. Prosedur Pembuatan Nanokitosan ................................................................. 65 4. Preparasi Pembuatan Hidrogel Gelatin .......................................................... 65 5. Karakterisasi M embran Hidrogel Nanokitosan.................... ..............................66 6. Penentuan Daya Serap M embran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi Berat Nanokitosan..............................................................................................66 7. Penentuan Daya Serap M embran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi Waktu Perendaman ....................................................................................... 67 8. Pengambilan Sampel Jaringan Gingiva ......................................................... 67 9. Persiapan Kultur Primer Sel Fibroblas G ingiva M anusia ............................... 67 10. Pembuatan Sub kultur ................................................................................... 68 11. Pembuatan Sam pel untuk Uji Sitotoksisitas: .................................................. 69 12. Pembuatan Sampel untuk Uji Proliferasi Sel ................................................. 70 13. Uji Apoptosis................................................................................................ 71 14. Pengujian Daya Hambat Pertumbuhan S. mutans........................................... 72 15. Pengujian Daya Hambat Pertumbuhan C. albicans ........................................ 73 16. Bagan Penelitian … … … … … … … …… … …… … …… … …… … … ..… … ….76 F. Analisis Hasil .................................................................................................... 81 IV HASIL DAN PEM BAHASAN… … … … .… … …..….....…… ..… … …… … ….. 83 A. Hasil Penelitian … … .… … … …… … …..…… … ….… .......… … …… … …… … ...83 B. Pembahasan… …… … …… … …… … … …… … …… … … ......… … .… … …… … 118 V. KESIM PULAN DAN SARAN ..........................................................................142 A. Kesimpulan..........................................................................................................142 B.Saran.....................................................................................................................143 RINGKASAN...........................................................................................................145 SUM M ARY..............................................................................................................153 DAFTAR PUSTAKA… ..… .....… …… … …… … ..… …… … …… … ...…… … … ...160 LAM PIRAN..........…… … ......….............… …… … ..… …… … …… ...… …… .......171
xi
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 4.1
Rerata penyerapan ion nikel oleh membran hidrogel nanokitosan ..... 86
Tabel 4.2
Hasil uji anova dua jalur penyerapan ion nikel....................................89
Tabel 4.3
Ringkasan uji LSD penyerapan ion nikel.............................................89
Tabel 4.4
Rerata dan simpangan baku viabilitas sel fibroblas............................ 91
Tabel 4.5
Hasil uji anova dua jalur viabilitas sel fibroblas..................................93
Tabel 4.6
Ringkasan uji LSD viabilitas sel fibroblas...........................................94
Tabel 4.7
Rerata nilai persentase viabilitas/ proliferasi sel fibroblas.… … … … 96
Tabel 4.8
Hasil uji anova dua jalur nilai proliferasi sel fibroblas.... ..................101
Tabel 4.9
Ringkasan uji LSD proliferasi sel fibroblas.......................................102
Tabel 4.10
Rerata apoptosis sel fibroblas terhadap membran hidrogel nanokitosan-nikel...............................................................................106
Tabel 4.11
Hasil analisis Friedman untuk kelompok membran hidrogel nanokitosan dan kelompok waktu perendaman… … .… …..…… … ..107
Tabel 4.12
Ringkasan uji Wilcox on apoptosis sel fibroblas… … … … … ..…… ..108
Tabel 4.13
Rerata zona hambat pertum buhan S. mutans.................................... 109
Tabel 4.14 Analisis statistik dengan Anova dua jalur zona hambat S. mutans......................................................................................... 111 Tabel 4.15 Ringkasan uji LS D zona hambat S. Mutans.......................................112 Tabel 4.16 Rerata zona hambat pertumbuhan C. albicans .......................... .......114 Tabel 4.17
Analisis statistik dengan A nova dua jalur zona hambat C. albicans........................................................................................116
Tabel 4.18
Ringkasan uji LSD zona hambat C. Albicans....................................117
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Halaman Struktur kitosan ....................................................... .......................38
Gambar 2.2
Bagan kerangka teori.......................................................................53
Gambar 3.1
Pengukuran diameter zona hambat ............................................… .75
Gambar 3.2
Bagan penelitian penyerapan ion nikel ...........................................76
Gambar 3.3
Bagan penelitian viabilitas sel fibroblas..........................................77
Gambar 3.4
Bagan penelitian proliferasi sel fibroblas........................................78
Gambar 3.5
Bagan penelitian apoptosis sel fibroblas..........................................79
Gambar 3.6
Bagan penelitian zona hambat pertumbuhan S. mutans...................80
Gambar 3.7
Bagan penelitian zona hambat pertumbuhan C. albicans................80
Gambar 4.1
Karakteristik fisik membran hidrogel nanokitosan sebelum dan sesudah perendaman........................................................................83
Gambar 4.2
Foto TEM nanokitosan perbesaran 2 0.000x ...................................85
Gambar 4.3
Foto TEM nanokitosan perbesaran 40.000x....................................85
Gambar 4.4
Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g – Ni, membran Hg NK 1g – Ni, jam ke-24 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x. ...........................................
99
Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g – Ni, membran Hg NK 1g – Ni, jam ke-48 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x.............................................
99
Gambaran proliferasi sel fibroblas setelah diberi paparan membran Hg NK 0,6g - Ni, (b) membran Hg NK 0,8g – Ni, membran Hg NK 1g – Ni, jam ke-72 dilihat menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 100x… … … ................................
99
Gambar 4.5
Gambar 4.6
Gambar 4.7
Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 0,6g – Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit .................................................... 105 xiii
Gambar 4.8
Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 0,8g – Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit .................................................... 105
Gambar 4.9
Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan membran Hg NK 1g – Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit.......................................................105
Gambar 4.10 Gambaran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan kontrol membran NK 0,8g – Ni dengan lama peredaman (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit ................................................................. 105 . Gam bar 4.11 Zona hambat S. mutans dalam sumuran setelah diberi perlakuan (a) membran Hg NK 0,6g; (b) membran Hg NK 0,8g; (c) membran Hg NK 1g........................................... 109 Gambar 4.12 Zona hambat C. Albicans dalam sumuran setelah diberi perlakuan (a) membran Hg NK 0,6g; (b) membran Hg NK 0,8g; (c) membran Hg NK 1g… … … …… … ..… …… .. ... 113 Gambar 4.13 Gambar ikatan ion nikel dengan gugus amina dan hidroksil nanokitosan ........................,...........................................................122 Gambar 4.14 Pengaruh logam berat pada kerja enzim .........................................126
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lam piran 1
Halaman Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap penyerapan ion nikel… … … … … … …… … …… … …… … … …… … ...…… .171
Lampiran 2
Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap viabilitas sel fibroblas… … … … … … …… … …… … … …… … …… … … ...175
Lampiran 3
Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap proliferasi sel fibroblas… … … … … … …… … …… … …… … …… … …… … … 179
. Lampiran 4
Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap apoptosis sel fibroblas… … … … … … …… … …… … … …… … .… … .… … .182
Lampiran 5
Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap pertumbuhan bakteri S. Mutans… … … … … … … …… … …… … …...................184
Lampiran 6
Hasil uji statistik untuk perbedaan pengaruh variasi berat kitosan dan waktu perendaman terhadap pertumbuhan C. Albican… … … … … … …… … …… … …… … … …… … ..........187
Lampiran 7
Surat-surat perijinan dan keterangan selesai penelitian… ..… … ..190
Lampiran 8
Data hasil penelitian penyerapan ion nikel.............................. .....196
Lampiran 9
Data hasil penelitian sitotoksisitas sel fibroblas… … … .… … ..… 200
Lampiran 10
Data hasil penelitian proliferasi sel fibroblas… ......… … …..…...201
Lampiran 11
Data hasil penelitian zona hambat C. albicans … .......................204
Lampiran 12
Data hasil penelitian zona hambat S. mutans… ...........................205
xv
