Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 1
01/2009:0008
AQUA PURIFICATA Tisztított víz H2O
Mr 18,02
DEFINÍCIÓ A tisztított víz – indokolt és engedélyezett esetek kivételével – azon gyógyszerek előállítására szánt víz, amelyekkel szemben nem követeljük meg, hogy sterilek és pirogénmentesek legyenek.
Letöltetlen, tisztított víz ELŐÁLLÍTÁS A letöltetlen, tisztított víz desztillálással, ioncserélő eljárással, fordított ozmózissal, vagy egyéb alkalmas módszerrel, az illetékes hatóság által meghatározott előírásoknak megfelelő, emberi fogyasztásra szánt vízből állítható elő. A tisztított víz tárolási és széttöltési körülményeit úgy kell kialakítani, hogy a mikroorganizmusok szaporodása, és az anyag minden egyéb szennyeződése kizárt legyen. Mikrobiológiai monitorozás. Az előállítás és az azt követő tárolás során megfelelő intézkedésekkel biztosítani kell a mikroorganizmus-szám kielégítő ellenőrzését és monitorozását. A nemkívánatos folyamatok észlelése érdekében megfelelő figyelmeztető és beavatkozási határértékeket kell megállapítani. Szokásos körülmények között megfelelőnek tekinthető az összes életképes mikroorganizmus-számra (2.6.12) vonatkozó, 100 CFU/ml-es beavatkozási határérték; ezt R2A agar táptalaj felhasználásával, legalább 5 napon át 30–35 °C-on történő inkubálással, membránszűréses eljárással (legfeljebb 0,45 μm névleges pórusméretű membránt alkalmazva) kell meghatározni. A minta mennyiségét a várható eredménnyel összhangban kell megválasztani. R2A agar
Aqua purificata élesztő-kivonat
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 2 0,5 g
proteózpepton 0,5 g kazein-hidrolizátum
0,5 g
kazein-hidrolizátum
0,5 g
glükóz
0,5 g
keményítő
0,5 g
dikálium-hidrogén-foszfát
0,3 g
vízmentes magnézium-szulfát nátrium-piruvát
0,024 g
0,3 g
agar 15,0 g tisztított víz
ad 1000 ml
A táptalaj pH-ja sterilezés után 7,2 ± 0,2 legyen. A sterilezést autoklávban, 15 percen át 121 °C-on végezzük. Az R2A agar mikroorganizmusok növekedését elősegítő hatása −
Teszt-törzsek készítése. Vagy standardizált, stabil teszt-törzs szuszpenziókat használunk, vagy saját magunk készítünk ilyeneket az 0008-1. táblázatban leírtak szerint. A törzsfenntartás technikáit (seed-lot system) alkalmazzuk, úgy, hogy az eredeti törzstenyészetnek legfeljebb az első öt átoltásából veszünk ki beoltásra szánt, életképes mikroorganizmusokat. Az egyes baktériumtörzseket – a 0008-1. táblázatban leírtak szerint – külön-külön tenyésztjük. A tesztszuszpenziókat nátrium-klorid–pepton–tompítóoldattal (pH 7,0) vagy foszfát–tompítóoldattal (pH 7,2) készítjük. A szuszpenziókat 2 órán belül, vagy – ha 2–8 °C-on tároljuk – 24 órán belül fel kell használni. Azonkívül, hogy a Bacillus subtilis vegetatív sejtjeiből készített, majd hígított, friss szuszpenziót nyerünk, úgy is eljárhatunk, hogy stabil spóraszuszpenziót készítünk, és a beoltást a spóraszuszpenzió megfelelő térfogatával végezzük. A stabil spóraszuszpenzió 2–8 °C-on validált ideig eltartható.
−
A növekedés elősegítése. A felhasználásra kész táptalajok és egyéb – akár dehidratált táptalajból, akár az előírt összetevőkből készült – táptalajok minden egyes gyártási tételét meg kell vizsgálni. A 0008-1. táblázatban feltüntetett mikroorganizmusok kis mennyiségeivel (legfeljebb 100 CFU) külön-külön
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 3
beoltunk R2A agar lemezeket, amelyeket ezután a táblázatban megadott körülmények között inkubálunk. Standardizált inokulum esetén az észlelt növekedés nem térhet el 2-nél nagyobb faktorral a számított értéktől. Ha az inokulum frissen készült, a mikroorganizmus növekedésének összemérhetőnek kell lennie egy korábban vizsgált és megfelelőnek bizonyult gyártási tételnél észlelt mikroorganizmus-növekedéssel. 0008-1. Táblázat. – Az R2A agar mikroorganizmusok növekedését elősegítő hatása Mikroorganizmusok
Pseudomonas aeruginosa
A teszt-törzsek előkészítése
Szója-kazein-agar, vagy szójakazein folyékony táptalaj
pl.:
A növekedés elősegítése
R2A agar ≤ 100 CFU
ATCC 9027
30-35 °C 30-35 °C
NCIMB 8626
≤ 3 nap 18-24 h
CIP 82.118 NBRC 13275
Bacillus subtilis
Szója-kazein-agar, vagy szójakazein folyékony táptalaj
R2A agar
pl.:
≤ 100 CFU
ATCC 6633
30-35 °C
NCIMB 8054
≤ 3 nap
CIP 52.62 30-35 °C NBRC 3134 18-24 h
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 4
Összes szerves szén, illetve oxidálható anyagok. 0,5 mg/l határérték figyelembevételével elvégezzük az összes szerves szén meghatározását (2.2.44), vagy e helyett az oxidálható anyagokra vonatkozó következő vizsgálatot: 100 ml anyaghoz 10 ml R hígított kénsavat és 0,1 ml 0,02 M kálium-permanganát– mérőoldatot elegyítünk. Az oldatnak 5 percig tartó forralás után is halvány rózsaszínűnek kell maradnia. Elektromos vezetés. Az elektromos vezetést off-line vagy in-line módon a következő körülmények között határozzuk meg. KÉSZÜLÉK Konduktometriás cella: −
alkalmas anyagból, pl. rozsdamentes acélból készült elektródok;
−
cellaállandó: értékét általában a gyártó bizonylattal adja meg, és ezt az értéket bizonylattal ellátott, 1500 μS·cm-1-nél kisebb elektromos vezetésű, referenciaoldattal, vagy bizonylatolt cellaállandójú mérőcellához viszonyítva, megfelelő időközönként ellenőrizni kell. A cellaállandó változatlannak tekinthető, ha a mért érték legfeljebb 2%-kal tér el a bizonylatolt értéktől; ellenkező esetben ismételt kalibrálás szükséges.
Konduktométer: pontossága a legalsó tartományban 0,1 μS·cm-1 vagy ennél jobb. A rendszer (konduktometriás mérőcella és konduktométer) kalibrálása: −
egy vagy több, alkalmas, bizonylattal ellátott referenciaoldattal szemben;
−
torzítás: legfeljebb a mért elektromos vezetés 3%-a, plusz 0,1 μS·cm-1.
A konduktométer kalibrálása: a kalibrálást a konduktometriás mérőcella kikapcsolása után – bizonylatolt preciziós ellenállások vagy ezzel egyenértékű eszközök segítségével – az összes használatos mérési tartományban elvégezzük. A torzítás legfeljebb a bizonylatolt érték 0,1%-a lehet. Amennyiben olyan in-line konduktometriás cellákkal dolgozunk, amelyeket nem szétszerelni, a rendszert – közvetlenül a kalibrálandó cella mellé, a vízáramba helyezett konduktometriás cellával ellátott – kalibrált konduktométerrel szemben is kalibrálhatjuk. Hőmérsékletmérés: tűréshatár ±2 °C.
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 5
VIZSGÁLAT Az elektromos vezetést hőmérséklet-kompenzálás nélkül, egyidejű hőmérsékletregisztrálással végezzük. Megfelelő validálás után hőmérséklet-kompenzálással is végezhetünk méréseket. A vizsgálandó víz abban az esetben felel meg a követelményeknek, ha a regisztrált hőmérsékleten mért elektromos vezetés nem haladja meg a 0008.-2. táblázatban feltüntetett értéket. 0008.-2. Táblázat. – Hőmérséklet és elektromos vezetés Hőmérséklet
Elektromos vezetés
(°C)
μS·cm-1
0
2,4
10
3,6
20
4,3
25
5,1
30
5,4
40
6,5
50
7,1
60
8,1
70
9,1
75
9,7
80
9,7
90
9,7
100
10,2
Azon hőmérsékletekre, amelyek a 0008.-2.-táblázatban nincsenek feltüntetve, a táblázat két szomszédos értékéből interpolálással számoljuk ki a megengedett legnagyobb elektromos vezetést. Nehézfémek. Ha a letöltetlen, tisztított víz megfelel a letöltetlen Injekcióhoz való vízre (0169) előírt "Elektromos vezetés" vizsgálat követelményeinek, az alábbiakban előírt "Nehézfémek" vizsgálatot nem kell elvégezni. SAJÁTSÁGOK Küllem: tiszta és színtelen folyadék.
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 6
VIZSGÁLATOK Nitrát: legfeljebb 0,2 ppm. Egy 5 ml anyagot tartalmazó, jeges vízbe merített kémcsőbe R kálium-klorid oldatából (100 g/l) 0,4 ml-t, R difenilamin–oldatból 0,1 ml-t, R nitrogénmentes tömény kénsavból pedig cseppenként és rázogatás közben 5 ml-t mérünk. Ezután a kémcsövet 50 °C-os vízfürdőbe helyezzük. 15 perc elteltével az oldat kék színe nem lehet erősebb, mint az egyidejűleg és azonos módon készített összehasonlító oldaté. Az összehasonlító oldat készítéséhez 4,5 ml R nitrátmentes víz és 0,5 ml R nitrát–mértékoldat (2 ppm NO3) elegyét használjuk. Alumínium (2.4.17): legfeljebb 10 ppb. A dializáló oldatok előállítására szánt anyag feleljen meg e vizsgálat követelményének is. Előírt oldat. A vizsgálandó víz 400 ml-éhez 10 ml R acetát–tompítóoldatot (pH 6,0) és 100 ml R desztillált vizet elegyítünk. Összehasonlító oldat. 2 ml R alumínium–mértékoldatot (2 ppm Al) 10 ml R acetát– tompítóoldattal (pH 6,0) és 98 ml R desztillált vízzel elegyítünk. Üres kísérlet. 10 ml R acetát–tompítóoldatot (pH 6,0) 100 ml R desztillált vízzel elegyítünk. Nehézfémek (2.4.8/A): legfeljebb 0,1 ppm. Üveg bepárlócsészébe mért, 200 ml anyagot 0,15 ml 0,1 M salétromsav hozzáadása után vízfürdőn 20 ml-re bepárologtatunk. Az így betöményített oldat 12 ml-ét vizsgáljuk. Az összehasonlító oldatot 10 ml R ólom–mértékoldattal (1 ppm Pb) készítjük, 0,075 ml 0,1 M salétromsavat adva hozzá. Az üres oldatot 0,075 ml 0,1 M salétromsav hozzáadásával készítjük. Bakteriális endotoxinok (2.6.14): kevesebb, mint 0,25 NE/ml. A dializáló oldatok előállítására szánt anyag – abban az esetben, ha a készítmény előállítása során nem alkalmaznak a bakteriális endotoxinok eltávolítására alkalmas eljárást – feleljen meg e vizsgálat követelményének is. FELIRAT A feliraton adott esetben fel kell tüntetni, hogy az anyag felhasználható dializáló oldatok készítéséhez.
Letöltött, tisztított víz
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 7
A letöltött, tisztított víz letöltetlen, tisztított vízből készül, olyan körülmények között, amelyek a letöltés és a tárolás során biztosítják az előírt mikrobiológiai minőséget. A letöltött, tisztított víz adalékanyagokat nem tartalmazhat. SAJÁTSÁGOK Küllem: tiszta és színtelen folyadék.
VIZSGÁLATOK Az anyag feleljen meg a „Letöltetlen, tisztított víz”-re előírt követelményeknek, az alábbi kiegészítésekkel: Savasság, lúgosság. A boroszilikát-üveglombikban frissen kiforralt, majd lehűtött anyag 10 ml-e 0,05 ml R metilvörös–oldattal elegyítve, nem színeződhet vörösre. Az anyag 10 ml-e 0,1 ml R1 brómtimolkék–oldattal elegyítve, nem színeződhet kékre. Oxidálható anyagok. 100 ml anyaghoz 10 ml R hígított kénsavat és 0,1 ml 0,02 M kálium-permanganát–mérőoldatot elegyítünk. Az oldatnak 5 percig tartó forralás után is halvány rózsaszínűnek kell maradnia. Klorid. 10 ml anyaghoz 1 ml R hígított salétromsavat és 0,2 ml R2 ezüst-nitrát– oldatot elegyítünk. Az oldat külleme legalább 15 percig nem változhat. Szulfát. 10 ml anyaghoz 0,1 ml R hígított sósavat és 0,1 ml R1 bárium-klorid– oldatot elegyítünk. Az oldat külleme legalább 1 órán át nem változhat. Ammónium: legfeljebb 0,2 ppm. 20 ml anyaghoz 1 ml R lúgos kálium-[tetrajodo-merkurát(II)]–oldatot elegyítünk. 5 perc elteltével az oldatot felülnézetben, a kémcső függőleges tengelyének irányában vizsgáljuk. Az oldat színe nem lehet erősebb, mint a következő összehasonlító oldaté, amelyet egyidejűleg készítünk: 4 ml R ammónium– mértékoldat (1 ppm NH4) és 16 ml R ammóniamentes víz elegyéhez 1 ml R lúgos kálium-[tetrajodo-merkurát(II)]–oldatot elegyítünk. Kalcium és magnézium. 100 ml anyaghoz 2 ml R ammónium-klorid– tompítóoldatot (pH 10,0), 50 mg R eriokrómfekete-T–porhígítást és 0,5 ml 0,01 M nátrium-edetát–mérőoldatot elegyítünk. Az oldat tiszta kékre színeződjék.
Aqua purificata
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.3 - 8
Bepárlási maradék: legfeljebb 0,001%. A vizsgálathoz 100 ml anyagot vízfürdőn szárazra párologtatunk, majd szárítószekrényben, 100–105 °C-on szárítunk. A maradék tömege legfeljebb 1 mg lehet. Mikrobiológiai szennyezés. TAMC: összes életképes mikroorganizmus-szám (2.6.12) legfeljebb 102 CFU/ml. Szója-kazein-agar táptalajt alkalmazunk. FELIRAT A feliraton adott esetben fel kell tüntetni, hogy az anyag felhasználható dializáló oldatok készítéséhez.
