B TB Stain Kits and Reagents
U
A jelmagyarázat a használati utasítás végén található
8820201
2005/05 Magyar
TB Stain Kit K TB Carbolfuchsin KF TB Decolorizer TB Brilliant Green K
Mycobacteriumok Kinyoun-féle (hideg) saválló festéséhez.
1 1 x 250 mL 1 x 250 mL 1 x 250 mL
Kat. sz. 212522
TB Stain Kit ZN TB Carbolfuchsin ZN TB Decolorizer TB Methylene Blue
Mycobacteriumok ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festéséhez.
1 1 x 250 mL 1 x 250 mL 1 x 250 mL
212520
1 1 x 250 mL 1 x 250 mL
212315
TB Quick Stain Kit TB Quick Stain Carbolfuchsin TB Quick Stain Methylene Blue
A mycobacteriumok hideg saválló festésének gyors módszere.
TB Fluorescent Stain Kit M TB Auramine M TB Decolorizer TM TB Potassium Permanganate
Mycobacteriumok Morse-, Blair-, Weiser- és Sproat-féle fluoreszcens festéséhez.
1 1 x 250 mL 1 x 250 mL 1 x 250 mL
212519
TB Fluorescent Stain Kit T TB Auramine-Rhodamine T TB Decolorizer TM TB Potassium Permanganate
Mycobacteriumok Truant-, Brett- és Thomas-féle fluoreszcens festéséhez.
1 1 x 250 mL 1 x 250 mL 1 x 250 mL
212521
TB Auramine M
Mycobacteriumok Morse-, Blair-, Weiser- és Sproat-féle fluoreszcens festéséhez.
4 x 250 mL
212514
TB Auramine-Rhodamine T
Mycobacteriumok Truant, Brett és Thomas-féle fluoreszcens festéséhez.
4 x 250 mL
212515
TB Brilliant Green K
Mycobacteriumok Kinyoun-féle (hideg) és ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festéséhez.
4 x 250 mL
212523
TB Carbolfuchsin KF
Mycobacteriumok Kinyoun-féle (hideg) saválló festéséhez.
4 x 250 mL
212518
TB Carbolfuchsin ZN
Mycobacteriumok ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festéséhez.
4 x 250 mL
212511
TB Decolorizer
Mycobacteriumok Kinyoun-féle (hideg) és ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festéséhez.
4 x 250 mL
212517
TB Decolorizer TM
Mycobacteriumok Truant-, Brett- és Thomas-féle, valamint Morse-, Blair-, Weiser- és Sproat-féle fluoreszcens festéséhez.
4 x 250 mL
212512
TB Methylene Blue
Mycobacteriumok Kinyoun-féle (hideg) és ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festéséhez.
4 x 250 mL
212516
TB Potassium Permanganate
Mycobacteriumok Truant-, Brett- és Thomas-féle, valamint Morse-, Blair-, Weiser- és Sproat-féle fluoreszcens festéséhez.
4 x 250 mL
212513
TB Quick Stain Carbolfuchsin
A mycobacteriumok hideg saválló festésének gyors módszere.
3 x 250 mL
212316
TB Quick Stain Methylene Blue
A mycobacteriumok hideg saválló festésének gyors módszere.
3 x 250 mL
212317
HASZNÁLATI JAVASLAT A TB Stain Kit festékkészlet mycobacteriális fertõzés korai feltételes diagnózisának felállításához és a baktériumizolátumok jellemzéséhez használható, olyan mintákból és tenyészetekbõl készült kenetek festésére, amelyek feltételezhetõen tartalmaznak mycobacteriumokat. ÖSSZEGZÉS ÉS MAGYARÁZAT A festés a tuberkulózisbaktériumok mikroszkópos kimutatásának egyik legrégebbi, és mind a mai napig alapvetõ módszere.1 A mycobacterium egyedülálló savállósága teszi a festést megbízható módszerré a korai feltételes diagnózis felállításában és a jelenlévõ saválló pálcák számának meghatározásában. A fluoreszcens mikroszkópos vizsgálatnak számos elõnye van a mycobacteriumok klasszikus kimutatási módszereihez képest, mivel gyorsabb és egyszerûbb, a lemezek könnyebben vizsgálhatók meg, és a módszer igen megbízható és kiváló.2 A TB Stain Kit K a Kinyoun-féle (hideg) saválló festés módszere alapján mûködik.3 A TB Stain Kit Z a ZiehlNeelsen-féle (meleg) saválló festés módszere alapján mûködik.4
A TB Quick Stain Kit a hideg festési módszer gyorsabb változata. A TB Fluorescent Stain Kit M az auramin-O saválló fluoreszcens festés módszere alapján mûködik.5 A TB Fluorescent Stain Kit T az auramin-rodamin saválló fluoreszcens festés Truant, Brett és Thomas által leírt módszere alapján mûködik.6 AZ ELJÁRÁS ELVE A mycobacteriumok egyik jellemzõ tulajdonsága, hogy savállóak, vagyis ha azokat megfestik az anilinfestékkel, a bázikus fukszinnal, nehezen színteleníthetõk el, és még akkor is megtartják a színüket, ha savas etanol keverékével kezelik õket. A ZiehlNeelsen-féle festékben a metilénkék a kontrasztfesték. A Kinyoun-féle festékben a szükséges kontrasztot a brillantzöld biztosítja. A TB Quick Stain metilénkéket használ kontrasztfestéknek, de az elszíntelenítés nem külön lépésben történik, mivel a Reagent B színtelenítõ/kontrasztfesték egy lépésben színteleníti el és festi meg a kontrasztfestékkel a kenetet. A fluoreszcensz festék egyik tulajdonsága, hogy az ultraibolya fénynél rövidebb hullámohosszú fénnyel, például higanygõzlámpa fényével, vagy megfelõen szûrt erõs kék fénnyel megvilágítva látható kék sugárzást bocsát ki.7 Az auramin-O és a rodamin-B a mycobacteriális sejtek sejtfalának fajlagos zsírsavaihoz kötõdik.8 A szabad festéket a savas etanol színtelenítõoldat mossa ki. A kálium-permanganát kontrasztfestékként szolgál, hogy elnyomja a nem specifikus háttér-fluoreszcenciát. REAGENSEK Hozzávetõleges érték, 1 literenként* TB Stain Kit K (TB K festékkészlet) TB Carbolfuchsin KF (TB karbolos fukszin KF) Lúgos fukszin ..........................................15,0 g Fenol, USP ................................................45,0 g Izopropanol ..........................................200,0 mL Etanol ......................................................50,0 mL Desztillált víz ..........................................750,0 mL
TB Fluorescent Stain Kit M TB Auramine M (TB auramin M) Auramin-O ..........................................................2,0 g Fenol, USP ..........................................................4,0 g Glicerin, USP....................................................100,0 mL Izopropanol ....................................................250,0 mL Desztillált víz ..................................................650,0 mL
TB Decolorizer (TB színtelenítõ folyadék) Sósav ........................................................30,0 mL Etanol/Metanol ......................................970,0 mL
TB Decolorizer TM (TB színtelenítõ folyadék TM) Sósav ..................................................................5,0 mL Izopropanol ....................................................700,0 mL Desztillált víz ..................................................300,0 mL
TB Brilliant Green K (TB brillantzöld K) Brillantzöld ................................................2,0 g Nátrium-hidroxid ......................................0,02 g Desztillált víz ........................................1000,0 mL TB Stain Kit ZN (TB festékkészlet ZN) TB Carbolfuchsin ZN (TB karbolos fukszin ZN) Lúgos fukszin ............................................1,7 g Fenol, USP ................................................50,0 g Izopropanol ............................................95,0 mL Desztillált víz ..........................................905,0 mL TB Decolorizer (TB színtelenítõ folyadék) Sósav ........................................................30,0 mL Etanol/Metanol ......................................970,0 mL TB Methylene Blue (TB metilénkék) Metilénkék, USP ........................................2,4 g Etanol/Metanol ......................................300,0 mL Desztillált víz ..........................................700,0 mL TB Quick Stain Reagents (TB gyorsfesték) reagensek Carbolfuchsin Reagent A (Karbolos fukszin A reagens) Lúgos fukszin (alkoholos)........................17,0 g Fenol vizes oldata ................................1000,0 mL
TB Potassium Permanganate (TB kálium-permanganát) Kálium-permanganát ........................................5,0 g Desztillált víz ................................................1000,0 mL TB Fluorescent Stain Kit T (TB fluoreszcens festékkészlet T) TB Auramine-Rhodamine T (TB auraminrodamin T) Auramin O ........................................................12,0 g Rodamin B ..........................................................6,0 g Fenol, USP ........................................................80,0 g Glicerin, USP....................................................600,0 mL Izopropanol ....................................................140,0 mL Desztillált víz ..................................................260,0 mL TB Decolorizer TM (TB színtelenítõ folyadék TM) Sósav ..................................................................5,0 mL Izopropanol ....................................................700,0 mL Desztillált víz ..................................................300,0 mL TB Potassium Permanganate (TB kálium-permanganát) Kálium-permanganát ........................................5,0 g Desztillált víz ................................................1000,0 mL
Methylene Blue Reagent B (Metilénkék B reagens) Metilénkék (alkoholos)..............................2,0 g Savas etanol ........................................1000,0 mL *Úgy beállítva és/vagy kiegészítve, hogy megfeleljen a végrehajtási követelményeknek. Figyelmeztetés: In vitro diagnosztikai felhasználásra. A klinikai mintákban patogén mikroorganizmusok, pl. Hepatitis és HIV-vírusok lehetnek jelen. Minden vérrel, illetve más testnedvvel fertõzött tételt a Szokványos óvintézkedéseket 9-12 elõírásai szerint, illetve az intézet irányelvei szerint kell kezelni. Az aeroszolt nem termelõ klinikai minta feldolgozási folyamatoknál, mint amilyen a saválló kenet készítése, Biosafety Level 2 gyakorlat és felszerelés szükséges. Minden aeroszol képzõdéssel járó mûvelethez 1. vagy 2. osztályú biztonsági elszívófülke alatt kell elvégezni. Biosafety Level 3 színtû gyakorlat, elszigetelt felszerelés és berendezés szükséges az M. tuberculosis és az M. bovis tenyészetekkel való munkához. Az állatokkal végzett vizsgálatokhoz is speciális eljárás szükséges.13 2
A reagensek szemirritációt vagy vakságot okozhatnak, és lenyelésük sérüléshez vagy halálhoz vezethet. Ha a reagens a szembe kerül, legalább 15 percig öblögesse szemöblítõvel vagy csapvízzel, majd forduljon orvoshoz. A festék- és színtelenítõoldatok fokozottan tûzveszélyesek, gõzeik veszélyesek lehetnek; ne használja õket nyílt láng közelében. Ügyeljen arra, hogy ne kerüljenek bõrre, szembe vagy nyálkahártyára. A reagenseket jól szellõzõ helyen használja, és vigyázzon, hogy ne kerüljenek a bõrére, ne nyelje le õket és gõzeiket ne lélegezze be tartósan. TB Carbolfuchsin ZN: Bõrre kerülve és lenyelés esetén mérgezõ! Égést okozhat. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Ügyeljen arra, hogy a folyadék ne kerüljön a szembe vagy a bõrre. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. TB Decolorizer TM: Égést okozhat. Tartsa az edényeket gondosan lezárva és jól szellõzõ helyen. Ha a szer a szembe kerül, azonnal öblítse ki bõ vízzel, majd forduljon orvoshoz. Használjon megfelelõ védõruházatot, kesztyût, valamint szem- és arcvédõt. Baleset vagy rosszullét esetén azonnal kérjen orvosi segítséget. TB Potassium Permanganate: Szem-, légúti- és bõrirritációt okozhat. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Ügyeljen arra, hogy a folyadék ne kerüljön a szembe vagy a bõrre. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. TB Auramine M: Gyúlékony. Szem-, légúti- és bõrirritációt okozhat. Ha a szer a bõrre kerül, az érintett bõrfelületet azonnal le kell öblíteni bõ vízzel. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Tartsa távol a tûzforrásoktól A vegyszer közelében tilos a dohányzás. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. TB Auramine-Rhodamine T: Gyúlékony. Bõrre kerülve és lenyelés esetén mérgezõ! Égést okozhat. Hatására visszafordíthatatlan károsodások léphetnek fel. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Ha a szer a szembe kerül, azonnal öblítse ki bõ vízzel, majd forduljon orvoshoz. Használjon megfelelõ védõruházatot, kesztyût, valamint szem- és arcvédõt. Baleset vagy rosszullét esetén azonnal kérjen orvosi segítséget. TB Decolorizer: Belélegzése és lenyelése veszélyes! Tartsa az edényeket gondosan lezárva és jól szellõzõ helyen. Tartsa távol a tûzforrásoktól Tilos a dohányzás. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. TB Methylene Blue: Belélegzése és lenyelése veszélyes! Szem-, légúti- és bõrirritációt okozhat. Hatására visszafordíthatatlan károsodások léphetnek fel. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Tartsa távol a tûzforrásoktól A vegyszer közelében tilos a dohányzás. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. TB Carbolfuchsin KF: Bõrre kerülve és lenyelés esetén veszélyes! Szem- és bõrirritációt okozhat. Hatására visszafordíthatatlan károsodások léphetnek fel. Tartsa az edényeket gondosan lezárva. Tartsa távol a tûzforrásoktól A vegyszer közelében tilos a dohányzás. Ha a szer a szembe kerül, azonnal öblítse ki bõ vízzel, majd forduljon orvoshoz. Használjon megfelelõ védõruhát és kesztyût. Tárolás: A TB Stain Kits and Reagents 1530°C közötti hõmérsékleten tárolandó. A kartondobozukból kivett reagenseket sötétben kell tárolni. A szavatossági idõ az elõírásoknak megfelelõen tárolt, bontatlan csomagolású termékre vonatkozik. MINTÁK GYÛJTÉSE ÉS ELÕKÉSZÍTÉSE Készítsen a mintából egy vékony kenetet közvetlenül egy tiszta tárgylemezre. A kenetkészítésre alkalmas a köpet (közvetlen minta vagy koncentrált köpet), a gerincfolyadék vagy más testnedv (katéter-vizelet), a homogenizált szövet és a lenyomati készítmények.1 Hagyja a kenetet a szabad levegõn megszáradni. Rögzítsék a kenetet a tárgylemezre úgy, hogy a tárgylemezt átviszik alacsony lángon 2-3x, kerülve a túlzott hõt vagy használjanak elektromos tárgylemez melegítõt 6575°C hõmérsékleten legalább 2 órán keresztül.14 ELJÁRÁS Szállított anyagok*: TB Stain Kit K, TB Stain Kit ZN, TB Quick Stain Kit, TB Fluorescent Stain Kit M, TB Fluorescent Stain Kit T. *Külön megrendelhetõ reagensekkel Szükséges, de nem szállított anyagok: Tárgylemezek újak vagy dikrómsav-oldattal tisztítottak, festõtálca, valamint olajimmerziós objektívvel ellátott mikroszkóp vagy fluoreszcens mikroszkóp. A teszt kivitelezése KINYOUN-FÉLE FESTÉS TB Stain Kit K Használati utasítás: 1. Helyezze a lemezeket a festõtálcára és 4 percre fedje be azokat TB Carbolfuchsin KF oldattal. Ne melegítse a tárgylemezeket. 2. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 3. Színtelenítse el a lemezeket 35 másodpercig a TB Decolorizer oldattal. 4. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 5. Végezzen kontrasztfestést 30 másodpercig TB Brilliant Green K vagy TB Methylene Blue (külön megrendelhetõ) festékkel. 6. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 7. A lemezeket hagyja a levegõn megszáradni. TB Methylene Blue használata esetén gyenge hõforrás felett szárítsa meg a lemezeket. ZIEHLNEELSEN-FÉLE FESTÉS TB Stain Kit ZN Használati utasítás: 1. Helyezze a lemezeket a festõtálcára és fedje be azokat TB Carbolfuchsin ZN oldattal. Óvatosan hevítse a lemezeket, amíg gõzölni nem kezdenek, majd 5 percig tartsa fenn ezt az állapotot. 2. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 3. A TB Decolorizer színtelenítõoldattal 12 percig színtelenítse a lemezeket közben kétszer cserélje le a színtelenítõoldatot , mindaddig, amíg a mosófolyadékban már nem látható piros szín. 3
4. 5. 6. 7.
Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. Végezzen kontrasztfestést 30 másodpercig TB Methylene Blue vagy TB Brilliant Green K festékkel. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. Gyenge hõ fölött szárítsa meg a lemezeket.
TB QUICK STAIN TB Quick Stain Kit Használati utasítás: 1. Helyezze a lemezeket a festõtálcára és fedje be õket TB Quick Stain Carbolfuchsin A reagenssel. Hagyja 5 percig állni. 2. Vízsugár alatt addig mossa óvatosan a lemezeket, amíg már nem látható festék az öblítõvízben. 3. Végezze el a kontrasztfestést nagy mennyiségû Methylene Blue B reagenssel, majd a lemezeket hagyja állni 2,53 percig. 4. Vízsugár alatt óvatosan öblítse le a lemezeket és hagyja azokat a levegõn megszárítani. MORSE-FÉLE FESTÉS TB Fluorescent Stain Kit M Használati utasítás: 1. Helyezze a lemezeket a festõtálcára, és fedje be azokat 15 percre TB Auramine M oldattal. 2. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 3. Színtelenítse el a lemezeket 3060 másodpercig a TB Decolorizer TM oldattal. 4. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 5. Végezzen kontrasztfestést 2 percig a TB Potassium Permanganate oldattal. 6. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 7. A lemezeket hagyja a levegõn megszáradni. 8. A lemezeket a Chapin és Murray által leírt szûrõkkel felszerelt mikroszkóppal vizsgálja meg.15 TRUANT-FÉLE FESTÉS TB Fluorescent Stain Kit T Használati utasítás: 1. Helyezze a lemezeket a festõtálcára és fedje be azokat 15 percre TB Auramine-Rhodamine T oldattal, amelyet elõtte gondosan felrázott. Szobahõmérsékleten hagyja állni 2025 percig. 2. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 3. Színtelenítse el a lemezeket 23 percig a TB Decolorizer TM oldattal. 4. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 5. Végezzen kontrasztfestést 45 percig a TB Potassium Permanganate oldattal. 6. Folyó víz alatt óvatosan öblítse le a lemezeket. 7. Óvatosan itassa fel a tárgylemezekrõl a nedvességet. Hagyja a lemezeket a szabad levegõn megszáradni vagy nagyon óvatosan láng fölött szárítsa meg azokat. 8. A lemezeket a Truant et. al.6, illetve a Chapin és Murray által leírt szûrõkkel felszerelt mikroszkóppal vizsgálja meg.15 Felhasználói minõség-ellenõrzés: Tanácsos naponta kontrollt készíteni a BBL AFB Slide (Kat.sz. 231391) tárgylemezzel vagy ismert saválló és nem saválló mikroorganizmusok alkalmazásával. A minõségellenõrzési követelmények betartásának összhangban kell lennie a vonatkozó helyi, állami és/vagy szövetségi szabályozásokkal vagy követelményekkel és a végzõ laboratórium irányadó minõségellenõrzési eljárásaival. A megfelelõ minõség-ellenõrzési gyakorlat kialakításánál tanácsos figyelembe venni az érvényes CLSI (eredetileg NCCLS) elõírásokat és a CLIA szabályzatot. Mikroorganizmus Mycobacterium tuberculosis H37Ra ATCC 25177 Bacillus subtilis ATCC 6633
Várt eredmények Pozitív Negatív
AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI A pozitív festési eredmény elõzetesen megerõsíti a mycobacteriumok jelenlétét a mintában. A negatív színezési reakció nem jelenti okvetlenül, hogy a minta tenyészete negatív a mycobacteriumok jelenlétére. A mycobacteriumok pozitív azonosítására, egyéb módszereket kell alkalmazni (tenyészet, molekuláris, stb.). VÁRT EREDMÉNYEK ÉS TELJESÍTMÉNYJELLEMZÕK1-8,15
TB Stain Kit K TB Stain Kit ZN TB Quick Stain Kit
Saválló pálca alakú baktériumok élénk piros, rózsaszín élénk rózsaszín, piros élénk piros, rózsaszín
TB Fluorescent Stain Kit M TB Fluorescent Stain Kit T
Nem saválló pálca alakú baktériumok zöld kék kék, zöldeskék
Mycobacteriumok élénk sárgán-zölden fluoreszkáló pirosas narancsszínben fluoreszkáló
4
IRODALOMJEGYZÉK 1. Nolte, F.S. and B. Metchock. 1995. Mycobacterium, p. 400 436. In P.R. Murray, E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover and R.H. Yolken (ed.), Manual of clinical microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 2. Tenover, F.C., J.T. Crawford, R.E. Huebner, L.J. Geiter, C.R. Horsburgh, Jr., and R.C. Good. 1993. The resurgence of turberculosis: is your laboratory ready? J. Clin. Microbiol. 31: 767 770. 3. Ebersole, L.L. 1994. Acid-fast stain procedures, p.3.5.1. 3.5.11. In H.D. Isenberg (ed.), Clinical microbiology procedures handbook, vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 4. Murray, R.G.E., R.N. Doetsch and C.F. Robinow. 1994. Determinative and cytological light microscopy, p. 21 41. In P. Gerhardt, R.G.E. Murray, W.A. Wood and N.R. Krieg (ed.), Methods for general and molecular bacteriology, American Society for Microbiology, Washington, D.C. 5. Heifets, L.B. and R.C. Good. 1994. Current laboratory methods for the diagnosis of tuberculosis, p. 85 110. In B.R. Bloom (ed.), Tuberculosis: pathogenesis, protection, and control, American Society for Microbiologhy, Washington, D.C. 6. Truant, J.P., W.A. Brett and W. Thomas, Jr. 1962. Fluorescence microscopy of tubercle bacilli stained with auramine and rhodamine. Henry Ford Hosp. Med. Bull. 10: 287 296. 7. Cernoch, P.L., R.K. Enns, M.A. Saubolle and R.J. Wallace, Jr. 1994. Cumitech 16A, Laboratory diagnosis of the mycobacterioses. Coord. ed. A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 8. Baron, E.J. and S.M. Finegold. 1990. Bailey & Scotts diagnostic microbiology, 8th ed. The C.V. Mosby Company, Baltimore, MD. 9. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2001. Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, Pa. 10. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: 53-80. 11. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 12. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 13. U.S. Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, 4th ed. HHS Publication No. (CDC) 93-8395. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 14. Kent, P.T. and G.P. Kubica, 1985. Public Health Mycobacteriology. A guide for the level III laboratory, p. 58, U.S. Dept. of Health and Human Services, Centers for Disease Control, Atlanta Ga. 15. Chapin, K.C. and P.R. Murray. 1999. Stains, p. 1674 1686. In P.R. Murray, E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover and R.H. Yolken (ed.), Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5
m Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland 21152 USA 800-638-8663
A BENEX Limited
Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon, County Clare, Ireland Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46
ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company © 2005 BD.