ZACHÁZENÍ S INSEMINAČNÍ DÁVKOU Mel DeJarnette, Senior Reproductive Specialist Dr. Ray Nebel, Senior Reproductive Specialist
Bezchybná manipulace s inseminační dávkou je jedním z předpokladů dosažení uspokojivých výsledků reprodukce ve vašem stádě či ve stádě vašeho zákazníka. Chceme-li disponovat v okamžiku vlastní inseminace plnohodnotným spermatem, je potřeba předtím věnovat pozornost řadě detailů, uvedených v tomto manuálu. SKLADOVÁNÍ PEJET V GOBLETÁCH Normální sperma WWS je obvykle v ½ kubíkových pejetách. Sexované sperma pak v ¼ kubíkových. Metodika zacházení je pro obě varianty stejná. Pejety o délce cca 13 cm jsou při dodání uloženy v gobletách, obvykle ve stejné gobletě dávky stejného býka. Gobleta může mít různou kapacitu (100, 36, 13 ID apod.). Obvykle je na vnější straně goblety uvedeno jméno býka. Do ČR přichází sperma v kontejnerech s tekutým dusíkem, v poslední době pak v suchých parách (Vapor tank). Při dodání do ČR je porovnávána váha kontejneru s vahou při odeslání. Goblety a kanystry v kontejneru jsou jednoznačně označeny číslem a jménem každého býka (viz. obrázek dole).
PŘEKLÁDÁNÍ PEJET MEZI KONTEJNERY Pejety jsou při prodeji překládány do kontejneru zákazníka, inseminátora či službové organizace. Oba kontejnery mají být při překládání bezprostředně vedle sebe (viz. obrázek nahoře), což je jedním z předpokladů jednoduchého a co nejrychlejšího předání. Pejety by měly být při předávání umístěné v gobletách naplněných tekutým dusíkem. To zvyšuje jejich ochranu.
DOPORUČENÉ VYBAVENÍ INSEMINÁTORA K zajištění bezproblémového průběhu inseminace je doporučeno následující vybavení, jehož uložení je optimální v přepravce z nerezové oceli (viz. níže) a skladování na čistém a suchém místě: • Pinzetu (pean) pro práci v kontejneru a s inseminační dávkou • Termonádoba k rozmrazování pejet ve vodní lázni s teploměrem • Ostré, nerezové nůžky k odstřihování čepičky pejety • Papírové utěrky • Inseminační zbraň • Jednorázové ochrané návleky na inseminační zbraň • Jednorázové plastické inseminační rukavice O-Ring
Spiral
Kombicolor
Inseminační zbraň – je z nerezové oceli a patří k ní plastové návleky o shodné velikosti.Vzhledem k tomu, že existují různé typy a velikosti zbraní, je důležité, aby velikost a typ zbraně a návleku byly zcela ve shodě. Inseminační zbraně jsou buď na půlkubíkové či čtvrtkubíkové pejety, nebo o tzv. kombinovanou zbraň. Ochrané návleky - se neliší jenom odlišnou velikostí, ale i typem bezpečnostního kroužku, sloužícího k zajištění fixace obalu na zbrani. FROST LINE cca 12 cm
Vyvarujte se v maximální míře práce nad FROST LINE.
DALŠÍ ZÁSADY Skladový KONTEJNER má být umístěn na dřevěné paletě, v suchém prostředí. Množství dusíku v kontejneru je nutno kontrolovat pravidelným měřením. Výskyt par v hrdle neznamená, že hladina dusíku je dostačující. Při jakékoliv pochybnosti o funkčnosti kontejneru jej neprodleně nahraďte jiným. TEPLOMĚRY vodní lázně pro rozmrazování pejet musí být kontrolovány a zcela funkční. Stanovování teploty vodní lázně pouhým odhadem je nepřípustné. Inseminační ZBRAŇ a NÁVLEKY neumísťujte na místě, kde je nadprůměrně teplo (v létě např. Na okně auta apod.) či podprůměrná teplota (v zimě např. v kufru vozu apod.). Poškozené či prasklé návleky nepoužívejte. Kroužkovou inseminační zbraň nepoužívejte nikdy bez kroužku. TERMOSKU po ukončení práce vylijte a vysušte. Vše udržujte zcela v čistotě. Pro krátkodobou fixaci goblet v hrdle kontejneru používejte PEAN.
VYJÍMÁNÍ A ROZMRAZOVÁNÍ PEJETY * Při vyjímání pejet z kontejneru nejprve upevněte kanystr peanem tak, aby se ID neocitly nad hranicí frost line, tzn. horním koncem goblety cca 6 - 8 cm pod úrovní horní hranice otevřeného kontejneru. • K vyjmutí a manipulaci s pejetou použijte PINZETU. Hrozí-li, že práce přesáhne 10 vteřin, uvolněte kanystr a ponořte jej zpět na dobu minimálně 20 - 30 vteřin. • Pejety mají být skladovány vždy zátkou dolů. Po vyjmutí pejety s ní prudce zatřepte tak, aby odpadla případná kapka dusíku na zátce a ihned pejetu vložte do vodní lázně o teplotě 35º C. V lázni ji ponechte minimálně 45 vteřin. • Rozmrazte jen tolik pejet, kolik spolehlivě vyinseminujete do 10 - 15 minut od rozmrazení. Po dobu od rozmrazení do inseminace zabraňte, aby byla pejeta vystavena výraznějšíí odchylce teploty pod či nad 35oC. • Po vyjmutí poslední pejety z goblety vždy prázdnou gobletu odeberte z kanystru. • Ihned po vyjmutí pejety z kontejneru spusťte kanystr zpět dolu, do kontejneru.
PŘÍPRAVA INSEMINAČNÍ ZBRANĚ • Inseminační zbraň připravujte k inseminaci v prostoru, který sám o sobě nepůsobí na velkou teplotní změnu již rozmrazené pejety. • Připravte si k ruce plastový návlek(y). • Před plněním zbraně si omyjte dostatečně ruce. • Před plněním zbraně 5 - 6x rázně popotáhněte pístem v hlavni zbraně a ujistěte se o poloze pístu (cca v hloubce 15 cm), umožňující bezproblémové zasunutí pejety. • Vyjměte pejetu z vodní lázně a kompletně ji osuště jednorázovou papírovou stěrkou.
• Ověřte si, že jste rozmrazlili pejetu požadovaného býka a že malá vzduchová bublinka je u zavařeného konce. Pokud tomu tak není, jemným nakloněním pejety ji tam dostaňte. • Pokud není identifikace býka jednoznačná, s příslušnou pejetou dále nepracujte. * Vložte pejetu zátkovou stranou do zbraně. Zastaví se v požadované hloubce. Pokud používáte čtvrtkubíkovou pejetu v univerzální zbrani, usaďte nejprve konec pejety na vrchol pístu a pak jemně zatlačte pejetu do zbraně, za současného jemného zpětného pohybu pístem. * Odstřihněte čistými, osušenými nůžkami hlavičku pejety pod úhlem 90o v místě pod zavařeným koncem pejety.
* Nasaďte plastový návlek. Ukončete nasazení pomocí "utažení" návleku kroužkem.
* Zkontrolujte si správné postavení konce inseminační dávky v návleku. Ujistěte se, že nedošlo k poškození obojího a že na konci návleku s ID nevznikly praskliny apod. Pokud ano, návlek s použitím čistých nůžek vyměnte. K výměně návleku před inseminací přistupte i pokud došlo k jeho znečištění. Pejeta je nyní připravena k inseminaci.
KONTROLA TEPLOTY PEJETY PO ROZMRAZENÍ Je velmi důležité udržet, od okamžiku správného rozmrazení do okamžiku inseminace, teplotu pejety 35oC a především minimalizovat kolísání teploty ! Během chladnějšího počasí je potřeba dbát na to, aby zbraň a návlek, které přijdou do kontaktu s pejetou, nebyly studenější než pejeta a abychom pejetu ve zbrani navystavili poklesu teploty cestou do stáje, ve stáji apod. Stejně tak, v horkých měsících je nutné dbát na to, aby zbraň či návlek nebyly rozpáleny teplotou v autě, nebo přímým působením slunce a abychom pejetu nevystavili při přenosu k plemenici vyšší vnější teplotě. Inseminátor, který není schopen tato doporučení akceptovat, bude sice tak jako tak dosahovat nějaké březosti, ta však bude nižší, nežli by mohla být. Především v důsledku snížené motility a vice, či méně zhoršené přežitelnosti spermií. TIPY A DOPORUČENÍ: • věnujte pozornost teplotě zbraně před jejím plněním inseminační dávkou • je-li okolní teplota odlišná, mějte při plnění horní část zbraně uvnitř dlaně, aby jste zamezili plnění pejety do teplotně odlišné zbraně. Ruka musí být samozřejmně čistá ! • použijte návlek (případně čistý ubrousek) nejen k hygienické, ale i k teplotní ochraně. Přenášejte připravenou zbraň z přípravny k plemenici uvnitř svého oblečení nebo ve speciálním zařízení, udržujícím teplotu připravené zbraně (viz. obrázek níže). • zbraň vyjměte z oblečení (či ze zařízení) až v okamžiku vlastní inseminace.
POUŽÍTÍ DVOU INSEMINAČNÍCH NÁVLEKŮ Jako tepelná ochrana, či ve stádech s reprodukčními problem, lze použít i systém dvou plastových návleků. Tento postup je sice o něco dražší (2 návleky), ale v řadě případů vede ke snížení frekvence a objemu bakterií přenesených z vaginy do dělohy. Tím nepřímo působí i ve prospěch zvýšení březosti. K tomu lze dale doporučit: • oba návleky jsou na zbrani i v okamžiku jejího vynětí z oblečení či z ochraného zařízení • zasuňte zbraň se dvěma návleky skrz vaginu až k děložní brance • zatáhněte za návleky zpět tak, až zbraň projde skrze návleky • zasuňte samotnou zbraň skrze cervix
SANITACE PO INSEMINACI Po provedení vlastní inseminace je potřeba se zaměřit na: • prohlédnutí konce zbraně (známky infekce). Případnou infekci zaznamenat pro MVDr. • nakloňte návlek a zbraň, a prázdnou pejetu vyjměte pod úhlem 90º • utáhněte kroužek na zbrani, aby se neztratil • znovu zkontrolujte na pejetě identifikační údaje použitého býka • sejměte rukavici tak, aby návlek a hnůj zůstaly uvnitř. Vytlačte z rukavice vzduch a odložte ji do určeného kontejneru (pytle apod.). • důkladně očistěte a otřete zbraň před jejím navrácením do inseminančí přepravky • je-li zbraň mokrá, zcela ji rozeberte, umyjte v mýdlové a propláchněte v čisté vodě. Otřepáním zbavte zbraň vody a před opětovným sestavením ji důkladně osušte. Striktní dodržování výše uvedených doporučení pomůže maximalizovat šanci na uspěšný výsledek vámi provedené umělé inseminace.
