UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETANOL RIMPANG LEMPUYANG PAHIT (Zingiber littorale Val) TERHADAP Staphylococcus aureus, Escherichia coli, DAN Candida albicans
Oleh: IIM NAWIROH MUKHAROMAH K 100 070 026
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2011 i
UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETANOL RIMPANG LEMPUYANG PAHIT (Zingiber littorale Val) TERHADAP Staphylococcus aureus, Escherichia coli, DAN Candida albicans
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mancapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta
Oleh: IIM NAWIROH MUKHAROMAH K 100 070 026
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2011
ii
iii
MOTTO
Ridho Allah pada hamba-Nya Ridho orang tua pada anaknya Bagai pinang dibelah dua Cita-cita tinggi dengan tekad yang kuat siap maju menghadapi badai ombak kehidupan. Jangan kau dengar orang yang memujimu tetapi dengarlah nasihat orang yang lebih berpengalaman. Jadikanlah sabar dan sholat sebagai penolongmu.
(Q. S. Al Baqarah : 45) “Manusia tidak akan mereguk aroma cinta sebelum ditelan oleh kenestapaan, diusik oleh kehilangan dan diuji oleh kesabaran dan kekalahan yang menyesakkan dada” (Kahlil Gibran)
“Jika ada kemungkinan untuk gagal, berarti ada kemungkinan kita untuk berhasil jadi berfokuslah pada yang menghasilkan kita, maka lihatlah apa yang terjadi”
(Penulis)
iv
PERSEMBAHAN
Kupersembahkan karya kecil ini untuk, Kedua Orang Tuaku, H. M. Sujak.HB dan Hj. Rokhanah M: Secuil kebanggaan kalian atas karya ini adalah kebahagiaanku ͼ
Ibunda “tercinta” kasih terindah yang aku miliki cermin hidup yang
tak pernah lelah memahami, mengajarkan dan mengalirkan cinta dan kasih sayang dengan pengorbanan yang membuatku berarti. ͼ
Ayahanda “Tercinta” di setiap tetes keringatmu, doamu, serta
nasehatmu membuatku lebih memahami betapa kerasnya hidup ini Kakak & kakak iparku: mbak Yuli, mas Kono, Mbak Reni, mas Sholeh, mbak Nina, mas Ali, mbak Ita, mas Ageng, mas Latif, terima kasih atas dukungan dan doa kalian. Adik: Untuk adekku satu-satunya, Ria thanks for all.... Akhirnya tinggal dirimulah, ayo lanjutkan perjuangan kakak-kakakmu yang telah lulus duluan. Semangaaat!!! Untuk Sahabat-sahabatku yang tidak bisa aku sebutkan satu per satu.
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 23 Juni 2011 Peneliti,
Iim Nawiroh Mukharomah
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh Alhamduliiahirobbil`alamin, puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak terhingga untukku untuk terus melangkah, sholawat dan salam semoga senantiasa terlimpah kepada Rosululloh Muhammad SAW, keluarga, sahabat, dan para generasi yang meneruskan estafet perjuangan beliau hingga hari kiamat. Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit (Zingiber Littorale Val) Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli Dan Candida albicans” sebagai salah satu syarat mencapai Derajat sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Terima kasih sebesar-besarnya penulis sampaikan kepada : 1.
Bapak
Prof.
Muhammadiyah
Dr.
Bambang
Surakarta
Setiaji
serta
Ketua
selaku
rektor
Lembaga
Universitas
Penelitian
dan
Pengabdian kepada Masyarakat (LPPM) yang telah membiayai penelitian dari skema penelitian kolaboratif ini. 2.
Bapak Dr. Muhammad Da'i, M. Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
3.
Ibu Ika Trisharyanti D. K., M. Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang
dengan
penuh
kesabaran
memberikan
bimbingan,
nasihat,
pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini. vii
4.
Ibu Rosita Melannisa, M. Si., Apt selaku dosen pembimbing II yang telah meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat, pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
5.
Ibu Ratna Yuliani, M. Biotech. St dan Bapak Prof. Dr. M. Kuswandi, M. Phil., Apt selaku penguji skripsi yang menghantarkan penulis meraih gelar sarjana farmasi.
6.
Bapak dan Ibu dosen Fakultas Farmasi UMS yang telah membagi ilmu dan pengalamannya kepada penulis.
7.
Mbak Nur, Mas Awang, Pak Zainal, Pak Ghofar, Pak Rahmat, dan Pak Toni yang selalu membantu dan mempermudah penyelesaian skripsi ini.
8.
Keluarga besar H. M. Sujak HB, ayah, ibu, kakak, kakak iparku dan adekku Ria, terima kasih atas dukungan dan doa kalian.
9.
Keponakan-keponakanku tercinta Rafi, Aya, Aurel, Kiki, Fian, dan Nathan yang telah memberi kelucuan, kebahagian, dan tawa kalian.
10.
Sahabat-sahabat seperjuangan mbak Bety, Solikah, Anggun, Ica, Febti, Rika, Tiva, Angga, Zainal, atas bantuan dan semangatnya. Temantemanku kelas A; Via, Anik, Agustin, Revty, Desina dan yang lain, serta anak-anak SAINS ’07. Akhir kata semoga apa yang penulis sajikan bisa bermanfaat bagi
perkembangan dunia ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian. Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, 23 Juni 2011
Penulis
viii
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL ........................................................................................ii HALAMAN PENGESAHAN ..........................................................................iii MOTTO DAN PERSEMBAHAN ....................................................................iv DEKLARASI ....................................................................................................vi KATA PENGANTAR ......................................................................................vii DAFTAR ISI ....................................................................................................ix DAFTAR TABEL ............................................................................................xii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................xiii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................xiv DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................xv INTISARI .........................................................................................................xvi BAB I.PENDAHULUAN.................................................................................1 A. Latar Belakang Masalah .....................................................................1 B. Perumusan Masalah ............................................................................3 C. Tujuan Penelitian ................................................................................4 D. Tinjauan Pustaka ................................................................................4 1.
Tanaman Lempuyang Pahit .........................................................4
2.
Metode Penyarian ........................................................................6
3.
Bakteri .........................................................................................7
4.
Jamur ...........................................................................................10
5.
Antimikroba.................................................................................11
ix
6.
Kromatografi Lapis Tipis ............................................................13
E. Keterangan Empiris ............................................................................15 BAB II. CARA PENELITIAN .........................................................................16 A. Metode Penelitian ...............................................................................16 B. Variabel Penelitian .............................................................................16 C. Alat dan Bahan ...................................................................................16 D. Prosedur Penelitian .............................................................................18 1.
Pembuatan Ekstrak ......................................................................18
2.
Sterilisasi Alat dan Bahan ...........................................................18
3.
Pembuatan Media ........................................................................19
4.
Pembuatan Stok Mikroba ............................................................19
5.
Identifikasi Bakteri ......................................................................19
6.
Pembuatan Suspensi Mikroba .....................................................20
7.
Pengujian Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik .....................21
8.
Pembuatan Larutan Stok Ektrak ..................................................21
9.
Pembuatan Seri Kosentrasi Ekstrak.............................................22
10. Penyiapan Kontrol .......................................................................22 11. Uji Aktivitas Antimikroba Metode Dilusi Padat .........................23 12. Skrining Fitokimia .......................................................................23 13. Uji Kromatografi Lapis Tipis ......................................................25 E. Analisis Data ......................................................................................26 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .........................................................27 A. Identifikasi Bakteri .............................................................................27
x
B. Uji Aktivitas Antimikroba ..................................................................30 C. Analisis Kualitatif Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit .........35 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN .........................................................42 A. Kesimpulan .........................................................................................42 B. Saran ...................................................................................................42 DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................43 LAMPIRAN .....................................................................................................48
xi
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit terhadap S. aureus ...............................................32 Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit terhadap E. coli ...................................................33 Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit terhadap C. albicans ...........................................34 Tabel 4. Hasil KLT Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit ...................38
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1.
Tumbuhan dan Rimpang Lempuyang Pahit .............................5
Gambar 2.
Struktur Sel Bakteri...................................................................8
Gambar 3.
Struktur Sel Jamur.....................................................................10
Gambar 4.
Hasil Pengecatan Gram S. aureus dan E. coli ...........................28
Gambar 5.
Hasil Test Manitol terhadap S. aureus ......................................29
Gambar 6.
Hasil Uji Pengamatan Bakteri E. coli pada Media KIA, LIA, dan MIO ...........................................................................29
Gambar 7.
Hasil
Uji
Antimikroba
Ekstrak
Etanol
Rimpang
Lempuyang Pahit terhadap S. aureus........................................33 Gambar 8.
Hasil
Uji
Antimikroba
Ekstrak
Etanol
Rimpang
Lempuyang Pahit terhadap E. coli ............................................33 Gambar 9.
Hasil
Uji
Antimikroba
Ekstrak
Etanol
Rimpang
Lempuyang Pahit terhadap C. albicans ....................................34 Gambar 10.
Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit ......................................................................36
Gambar 11.
Hasil KLT Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit ............37
Gambar 12.
Hasil KLT Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit Setelah disemprot dengan Pereaksi Semprot ............................38
Gambar 13.
Hasil KLT Ekstrak Etanol Rimpang Lempuyang Pahit dengan Fase Gerak Toluen:Etil asetat (93:7) ............................39
xiii
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1.
Komposisi Media ......................................................................49
Lampiran 2.
Komposisi Standar Mc Farland ................................................50
Lampiran 3.
Komposisi Cat Gram .................................................................51
Lampiran 4.
Tabel Interpretasi Diameter Zona Standar Antibiotik...............52
Lampiran 5.
Hasil Uji Sensitivitas Bakteri S. aureus dan E. coli terhadap antibiotik.....................................................................53
Lampiran 6.
Perhitungan Kosentrasi Ekstrak ................................................54
Lampiran 7.
Alat Penelitian ...........................................................................59
xiv
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
C. albicans
: Candida albicans
CFU
: Colony Forming Unit
CMC Na
: Carboxyl Methyl Cellulosa Natrium
E. coli
: Escherichia coli
KBM
: Konsentrasi Bunuh Minimum
KIA
: Kligler Iron Agar
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
LIA
: Lysine Iron Agar
MH
: Mueller Hinton
MIO
: Motility Indol Ornithine
S. aureus
: Staphylococcus aureus
xv
INTISARI
Penelitian sebelumnya menunjukkan lempuyang pahit memiliki aktivitas antimikroba terhadap bakteri Escherichia coli dan cendawan Fusarium oxysporum Schlecht f.sp.cubense. Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas antimikroba ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit (Zingiber littorale Val) terhadap Staphylococcus aureus (bakteri Gram positif), Escherichia coli (bakteri Gram negatif), dan jamur Candida albicans serta mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit. Rimpang lempuyang pahit diperoleh melalui ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Uji aktivitas antimikroba ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans dilakukan dengan metode dilusi padat. Konsentrasi uji untuk Staphylococcus aureus 4%; 5%; 6%; 7% dan 8%; Escherichia coli 1%, 2%,4%, 6%, dan 8% ; sedangkan untuk Candida albicans 0,125%; 0,25%; 0,5%; 1%; 2%; 3% dan 4% dengan suspending agent CMC Na 1%. Analisis kandungan senyawa aktif ekstrak rimpang lempuyang pahit dilakukan dengan metode skrining fitokimia dan kromatografi lapis tipis dengan fase gerak kloroform:metanol (95:5), toluen:etil asetat (93:7) dan fase diam silika gel GF254. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit tidak memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli hingga konsentrasi 8%, sedangkan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit terhadap Candida albicans sebesar 4%. Hasil skrining fitokimia dan kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol rimpang lempuyang pahit mengandung saponin, polifenol, flavonoid, minyak atsiri, dan zerumbone. Kata kunci: Lempuyang pahit (Zingiber littorale Val), antimikroba, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans.
xvi
