TOKSISITAS NIKLOSAMIDA TERHADAP PERTUMBUHAN, KONDISI HEMATOLOGI DAN HISTOPATOLOGI JUVENIL IKAN MAS (Cyprinus carpio)
YOSMANIAR
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009
IPB
2009
YOSMANIAR
C151060231
2
SURAT PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul: Toksisitas niklosamida Terhadap Pertumbuhan, Kondisi Hematologi dan Histopatologi Juvenil Ikan Mas (Cyprinus carpio) adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dandicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini.
Bogor,
Februari 2009
Yosmaniar C151060231
3
ABSTRACT
YOSMANIAR. Toxicity of Niclosamide on the Growth, Hematology and Histophatologi Conditions of juvenile Common Carp (Cyprinus carpio). Under direction of EDDY SUPRIYONO, KUKUH NIRMALA, and SUKENDA Niclosamide as pesticide extensively used for eliminating golden apple snail (Pomacea sp) in paddy field. This study aimed to determine effect of accute and sublethal niclosamide toxicity on the growth, hematology and histopathology conditions of common carp (Cyprinus carpio) juvenil. This research was conducted at Research Station for Enviroment and Toxicology Cibalagung, Bogor. Parameter observed was the mortality of juvenile and water quality. Preliminary research was performed by finding concentration range, lethal time, accute toxicity to take LC50 of 24; 48; 72; dan 96 hours. Data obtained was analyzed using LC50 probit analysis program. Sublethal toxicity of niclosamide used sixteen glass aquaria of 70 x 50 x 60 cm in size at 40 L water volume were used in this experiment completed with aeration system and stocked with 20 juvenil per each. The test fish were satiation fed during the treatment. By using completely experimental randomized design with four treatments and four replications of different nilosamide concentrations: 0.00; 0.01; 0.03; 0.05 mg/L for 12 weeks. Specific growth rate measured and tissue sample were collected (gill, liver, kidney) fourth; eightth and twelfth weeks of exposure time. Blood sample were collected at the beginning; fourth; eighth and twelfth weeks of exposure time. Result of the experiments indicated that the accute toxicity (LC 50) of niclosamide of juvenile common carp (Cyprinus carpio) were on follows: 24 ; 48; 72; and 96 hours wich are 0.195 (0.174 – 0.220); 0.152 (0.137 – 0.169); 0.117 (0.106 – 0.128); dan 0.099 (0.094 – 0.104) mg/L. The niclosamide is extremely toxic (classification A). The research resulted that sublethal concentration of 0.03 mg/L niclosamide significantly effected (P< 0.05) to decreasing specific growth rate (0.62 %). The sublethal concentration in 0.01mg/l increasing of hematocrit and hemoglobin while in concentration of niclosamide 0.03 mg/l to increasing erythrocyte cells and decreasing leucocyte cells. On the sublethal concentration of 0,01 mg/L niclosamide the gill, liver and kidney juvenile of common carp (Cyprinus carpio) show hyperplasia, haemorage and necrosis Keywords: Toxicity, niclosamide, growth, hematology, histopathology, common carp
4
RINGKASAN YOSMANIAR. Toksisitas Niklosamida Terhadap Pertumbuhan, Kondisi Hematologi dan Histopatologi Juvenil Ikan Mas (CyprinuCarpio). Dibimbing oleh EDDY SUPRIYONO, KUKUH NIRMALA dan SUKENDA Penggunaan pestisida dalam bidang pertanian (sawah) yang semakin meningkat telah menimbulkan dampak negatif bagi menurunnya kualitas lingkungan perairan, karena pada umumnya sebagai tempat pembuangan limbah cair pertanian yang masih mengandung residu pestisida. Akibat kegiatan tersebut maka lingkungan perairan tawar yang merupakan sumber air untuk kegiatan budidaya perikanan berpotensi tercemar oleh berbagai bahan aktif yang terkandung dalam formulasi pestisida. Keong mas merupakan hama yang dalam aktifitasnya memotong pangkal batang padi yang masih muda. Pengendalian secara kimia yang umum dilakukan petani Indonesia yaitu dengan menggunakan pestisida jenis moluskisida dengan bahan aktif niklosamida. Moluskisida niklosamida digunakan untuk membunuh hama keong mas tapi juga memiliki potensi untuk membunuh ikan, dimana di beberapa negara di Asia penggunaannya sudah dilarang karena berdampak negatif terhadap lingkungan akuatik . Salah satu jenis ikan air tawar yang berpotensi tecemar adalah ikan mas (Cyprinus carpio) karena biasanya dibudidayakan di kolam, karamba, karamba jaring apung dan sawah. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh toksisitas akut dan subletal moluskisida niklosamida terhadap kondisi pertumbuhan, hematologi dan histopatologi juvenil ikan mas (Cyprinus carpio). Penelitian dilakukan dalam 4 tahap yang meliputi: uji ambang batas, uji waktu letal, toksisitas akut dan toksisitas subletal terhadap pertumbuhan, kondisi hematologi (kadar hematokrit, kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan jumlah leukosit) dan histopatologi (insang, hati dan ginjal). Penelitian dilakukan selama 6 bulan di Instalasi Riset Lingkungan Perikanan Budidaya dan Toksikologi Cibalagung Bogor, menggunakan wadah akuarium kaca. Bahan uji yang digunakan adalah formulasi moluskisida dengan bahan aktif niklosamida (C13H8Cl2N2O4 ) yang berbentuk pekatan dan bewarna kuning kecoklatan. Hewan uji adalah juvenil ikan mas (CyprinuCarpio) dengan 2,92 ± 0,02 g/ekor. Sebelum digunakan ikan diadaptasi selama 12 hari di laboratorium, ikan diberi pakan pelet komersial dengan kandungan protein ± 40% Pada uji ambang batas diaplikasikan 5 konsentrasi niklosamida 0,00 (kontrol); 0,06; 0,10; 0,20; 0,25 mg/L. Ikan uji sebanyak 10 ekor/wadah dengan pengamatan mortalitas pada jam ke 0; 6; 12; 24; 36; dan 48 jam setelah aplikasi. Pada uji waktu letal digunakan konsentrasi ambang atas, yaitu konsentrasi niklosamida 0,25 mg/L ke dalam 4 akuarium dengan waktu memasukkan ikan yaitu: jam ke 0; 12; 24; dan 36. Selanjutnya pada uji toksisitas akut digunakan 7 deretan konsentrasi niklosamida, yaitu: 0,00 (kontrol), 0,08; 0,10; 0,12; 0,14; 0,17; 0,20 mg/L sebanyak 10 ekor/ wadah dengan waktu pengamtan pada jam ke : 2; 6; 8; 10; 12; 24; 36; 48; 60 72; 84; dan 96 jam setelah aplikasi niklosamida.
5
Pada uji subletal niklosamida diaplikasikan 3 konsentrasi moluskisida niklosamida sebesar 10, 30, 50% dari nilai LC50-96 jam dengan nilai konsentrasi, yaitu: 0,00 (kontrol); 0,01; 0,03; dan 0,05 mg/L dalam air. Ikan mas dipelihara dengan kepadatan 20 ekor dalam volume air 40 L. Selama pemaparan ikan uji diberi pakan secara at satiation serta dilakukan pergantian air setiap 48 jam dengan konsentrasi bahan uji yang sama. Pengambilan sampel darah untuk hematologi, adalah: minggu ke 0 (satu jam setelah aplikasi), minggu ke 4, minggu ke 8 dan mingu ke 12. Pengukuran bobot ikan dan pengambilan sampel untuk histologi dilakukan pada minggu ke 4; minggu ke 8 dan minggu ke 12. Lama penelitian 12 minggu. Peubah yang diukur adalah; Laju pertumbuhan, kondisi hematologi dan histopatologi. Untuk mengetahui kelayakan media pemeliharaan dilakukan pengukuran sifat fisika-kimia air meliputi: pH, O2 terlarut, CO2 dan ammonia. Data uji ambang batas dan uji waktu letal dianalisa secara deskriptif, selanjutnya untuk data uji toksisitas akut dianalisis dengan program “probit analysis”. Data yang diperoleh dari uji toksisitas subletal menggunakan rancangan acak lengkap (RAL), analisa data pengaruh perlakuan terhadap pertumbuhan dan hematologi menggunakan anova yang dilanjutkan dengan uji Tukey apabila berbeda nyata. Pengolahan data menggunakan program SPSS versi 13. Analisis data uji toksisitas subletal yaitu pertumbuhan, hematologi, pengukuran kadar hematokrit dengan menempatkan darah pada tabung mikrohematokrit dan disentrifus. Pengukuran kadar hemoglobin dengan metoda Sahli. Penghitungan jumlah eritrosit dan leukosit mengunakan hemositometer dan mikroskop. Untuk data histopatologi dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Nilai konsentrasi ambang bawah moluskisida niklosamida (LC0-48 jam) sebesar 0,06 mg/L dan nilai ambang atas (L100-24 jam) sebesar 0,25 mg/l. Nilai waktu letal moluskisida niklosamida di dalam air yaitu selama 48 jam pada konsentrasi 0,25 mg/L. Nilai LC 50- 24 ; 48; 72; dan 96 jam moluskisida niklosamida terhadap ikan mas adalah 0,195 (0,174 – 0,220); 0,152 (0,137 – 0,169); 0,117 (0,106 – 0,128); dan 0,099 (0,094 – 0,104) mg/L. Niklosamida kategori pestisida sangat berbahaya (golongan A). Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida berpengaruh nyata terhadap kondisi hematologi, yaitu peningkatan hematokrit dan hemoglobin pada konsentrasi 0.01 mg/L dan peningkatan jumlah eritrosit pada konsentrasi 0,03 mg/L, dan penurunan leukosit pada konsentrasi 0.03 mg/L.Tingkat konsentrasi subletal molukisida niklosamida mengakibatkan kerusakan pada insang, hati dan ginjal pada konsentrasi 0,01 mg/L.Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida berpengaruh nyata terhadap penurunan pertumbuhan terjadi mulai pada konsentrasi 0,03 mg/L . Kata kunci: Toksisitas, niklosamida, pertumbuhan, hematologi, histopatologi, ikan mas
6
© Hak Cipta milik IPB, tahun 2009 Hak Cipta di lindungi Undang-undang Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan tau menyebutkan sumber Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah pengutipan tidak merugikan kepentingan wajar IPB. Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB
7
TOKSISITAS NIKLOSAMIDA TERHADAP PERTUMBUHAN, KONDISI HEMATOLOGI DAN HISTOPATOLOGI JUVENIL IKAN MAS (Cyprinus Carpio)
YOSMANIAR
Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sain pada Program Studi Ilmu Perairan
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009
8
Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis: Dr. Ir. Tatag Budiardi, MSi
9
Judul Tesis Nama NRP
: Toksisitas Niklosamida Terhadap Pertumbuhan, Kondisi Hematologi dan Histopatologi Juvenil Ikan Mas (Cyprinus carpio) : Yosmaniar : C 151060231
Disetujui Komisi Pembimbing
Dr. Ir. Eddy Supriyono, MSc Ketua
Dr. Ir. Sukenda, MSc Anggota
Dr. Ir. Kukuh Nirmala, MSc Anggota
Diketahui Ketua Program Studi
Prof. Dr. Ir.Enang Harris MS
Tanggal Ujian: 16 Februari 2009
Dekan Sekolah Pascasarjana
Prof. Dr. Ir. Khairil. A. Notodiputro, MS
Tanggal Lulus:
10
PRAKATA
Alhamdulillahi Rabbill´aalamin. Puji dan syukur kehadirat Allah SWT, yang telah memberikan rahmat dan hidayah- Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan. tesis ini. Tesis dengan judul “Toksisitas Niklosamida Terhadap Pertumbuhan, Kondisi Hematologi dan Histopatologi Juvenil Ikan Mas (Cyprinus carpio)” disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada program Studi Ilmu Perairan Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Dr. Ir.Eddy Supriyono, MSc sebagai Ketua Komisi Pembimbing, Bapak Dr. Ir. Kukuh Nirmala, MSc dan Bapak Dr. Ir.Sukenda, MSc sebagai Anggota Komisi Pembimbing, yang telah meluangkan waktu dan pemikiran untuk mengarahkan dan membimbing penulis, serta Bapak Dr. Tatag Budiardi sebagai Penguji Luar Komisi Pembimbing yang telah memberikan masukan dan saran. Ucapan terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Drs. Sutrisno, Bapak Ir. Imam Taufik, MSi, teknisi dan laboran serta teman - teman dari Program Studi Air yang telah membantu penulis. Bogor, Februari 2009
Yosmaniar
11
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Pekanbaru pada tanggal 14 Oktober 1964 dari ayah B. K Rusli dan ibu Baidar. Penulis merupakan putri ke dua dari lima bersaudara. Pendidikan formal yang diselesaikan SD Seruni, SMP Negeri 4 dan SMA Negeri 4 di Pekanbaru. Pendidikan Strata satu di Fakultas Perikanan Universitas Bung Hatta Padang dan lulus tahun 1988. Tahun 1990 sampai 1993 penulis bekerja sebagai staf peneliti di Sub Balai Penelitian Perikanan Budidaya Air Tawar di Palembang. Tahun 1993 sampai sekarang penulis bekerja sebagai staf peneliti di Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar di Bogor dan tergabung dalam kelompok peneliti Lingkungan Budidaya dan Toksikologi. Tahun 2006, penulis melanjutkan pendidikan S2 pada Program Studi Ilmu Perairan (AIR) Pascasarjana Institut Pertanian Bogor
12
DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL............................................................................................ vi DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
vii
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................
viii
PENDAHULUAN Latar Belakang ....................................................................................... Pendekatan masalah ................................................................................. Tujuan dan Manfaat Penelitian .................................................................. Hipotesis ....................................................................................................
1 3 3 4
TINJAUAN PUSTAKA Pestisida ................................................................................................... Pestisida Dalam Lingkungan Perairan ..................................................... Niklosamida ............................................................................................... Toksisitas Subletal ..................................................................................... Pertumbuhan .............................................................................................. Hematologi................................................................................................. Histopatologi ............................................................................................. Kualitas Air ...............................................................................................
5 6 7 8 8 9 10 11
METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat .................................................................................... Bahan dan Alat........................................................................................... Pelaksanaan Penelitian Ambang Batas ............................................................................................ Waktu Letal................................................................................................ Toksisitas Akut........................................................................................... Toksisitas Subletal Niklosamida Terhadap Pertumbuhan.......................... Toksisitas Subletal Niklosamida Terhadap Hematologi ............................ Toksisitas Subletal Niklosamida Terhadap Histopatologi ......................... Analisis Data ..............................................................................................
12 12 13 13 14 14 15 17 18
HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ambang Batas ............................................................................................ Waktu Letal................................................................................................ Toksisitas Akut...........................................................................................
20 21 20
13
Toksisitas Subletal Pertumbuhan Ikan ...................................................................................... Kondisi Hematologi ................................................................................... Kondisi Histopatologi ................................................................................ Kualitas Air ................................................................................................ Pembahasan................................................................................................
23 25 29 31 32
KESIMPULAN DAN SARAN........................................................................
41
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................
42
LAMPIRAN ....................................................................................................
48
14
DAFTAR TABEL Halaman 1. Klasifikasi pestisida berdasarkan toksisitasnya terhadap ikan....................
7
2. Data mortalitas (%) ikan mas pada uji ambang batas konsentrasi niklosamida…………………………………………… ………… ...........
20
3. Nilai LC 50 moluskisida niklosamida terhadap ikan mas setiap waktu Pemaparan .......................................................................................
22
4. Pertumbuhan ikan mas pada berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida setelah 12 minggu pemaparan ...........................
23
5. Rata-rata hematokrit, hemoglobin, eritrosit dan leukosit Ikan mas setelah 12 minggu ......................................................................................
25
6. Kondisi Histopatologi insang, hati, dan ginjal juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida setelah 12 minggu ...............................
29
7. Kisaran sifat fisika-kimia air pada uji toksisitas letal dan subletal moluskisida niklosamida terhadap ikan mas...............................................
31
15
DAFTAR GAMBAR Halaman 1. Rumus bangun Niklosamida ........................................................................
7
2. Mortalitas (%) ikan mas pada uji waktu letal untuk konsentrasi 0,25 mg/L (LC100-24 jam) ............................................................................
21
3. Nilai LC 50 moluskisida niklosamida terhadap ikan mas pada setiap waktu pemaparan ...............................................................................
22
4. Pertambahan bobot rata-rata ikan mas selama 12 minggu pemaparan moluskisida niklosamida ...........................................................
24
5. Laju pertumbuhan spesifik mas selama 12 minggu pemaparan moluskisida niklosamida..............................................................................
24
6. Kader hematokrit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu ..............................................
26
7. Kadar hemoglobin juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu....................................................................
26
8. Jumlah eritrosit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Rata-rata hematokrit..................................
27
9. Jumlah leukosit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Rata-rata hematokrit..................................
28
10. Kondisi histopatologi insang juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 Minggu .............................................
30
11. Kondisi histopatologi hati dan ginjal juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 Minggu .............................................
30
16
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman 1. Kelangsungan hidup (%) ikan mas pada uji toksisitas letal (jam) ...........................................................................................................
47
2. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC50-24 jam moluskisida niklosamida terhadap ikan Mas.............................................................................................................
48
3. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC 50-48 jam moluskisida niklosamida terhadap ikan mas .....................................................................................................
48
4. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC 50-72 jam moluskisida niklosamida terhadap ikan mas .....................................................................................................
49
5. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC 50-96 jam moluskisida niklosamida terhadap Ikan mas .....................................................................................................
49
6. Bobot rata-rata ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan Berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama12 minggu .......................................................................................
50
7. Bobot ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu (Transformasi logaritma natural) .............................................
51
8. Laju pertumbuhan spesifik(%) ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletalmoluskisida niklosamida selama 12 minggu ......................................................................................
52
9. Kadar hematokrit ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu ..................................................................................................
53
17
10. Kadar hemoglobin ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama12 minggu .......................................................................................
54
11. Jumlah eritrosit ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu ..................................................................................................
55
12. Jumlah leukosit ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu (sel/mm3) .................................................................................
56
13. Analisis statistik terhadap laju pertumbuhan spesifik mas Setelah 12 minggu pemaparan ...................................................................
57
14. Analisis statistik terhadap data hematologi (hematokrit, Hemoglobin, eritrosit) subletal ikan mas setelah 12 minggu pemaparan ................................................................................
58
18
PENDAHULUAN
Latar Belakang Penggunaan pestisida dalam bidang pertanian (sawah) yang semakin meningkat telah menimbulkan dampak negatif bagi menurunnya kualitas lingkungan perairan, karena pada umumnya sebagai tempat pembuangan limbah cair pertanian yang masih mengandung residu pestisida. Akibat kegiatan tersebut maka lingkungan perairan tawar yang merupakan sumber air untuk kegiatan budidaya perikanan berpotensi tercemar oleh berbagai bahan aktif yang terkandung dalam formulasi pestisida. Keong mas merupakan hama yang dalam aktifitasnya memotong pangkal batang padi yang masih muda (Kurniawati et al., 2008). Pengendalian secara kimia yang umum dilakukan petani Indonesia yaitu menggunakan pestisida jenis moluskisida dengan bahan aktif niklosamida (IRRI. 2004). Moluskisida niklosamida digunakan untuk membunuh hama keong mas tapi juga dapat membunuh ikan, sehingga di beberapa negara di Asia penggunaannya sudah dilarang karena berdampak negatif terhadap lingkungan akuatik (Cuong, 2002; Wada, 2004). Sedangkan di Amerika niklosamida biasa digunakan sebagai kontrol populasi ikan lamprey laut (Petromyzon marinus) pada aliran anak sungai danau Great (Schreier et al, 2000). Menurut APHA, AWWA dan WPCF (2005),
uji toksisitas suatu bahan
pencemar dapat dilakukan melalui pengujian terhadap ikan. Spesies ikan yang digunakan harus memenuhi kriteria tertentu, yaitu: 1) sensitif terhadap bahan pencemar; 2) tersedia dalam jumlah yang banyak dengan berbagai ukuran sepanjang tahun; 3) dapat dipelihara di laboratorium; 4) merupakan sumberdaya yang bernilai ekonomis. Salah satu jenis ikan air tawar yang memenuhi kriteria tersebut adalah ikan mas (Cyprinus carpio).
19
Ikan mas termasuk komoditas ekonomis perikanan budidaya air tawar yang biasanya dibudidayakan di kolam sawah, karamba, karamba jaring apung dan sawah. Produksi ikan mas Indonesia tahun 2006 sebesar 247.633ton terdiri dari budidaya di kolam (105.135 ton), karamba (20.822 ton), karamba jaring apung (75.402 ton) dan sawah (46.274 ton) (Ditjen Perikanan Budidaya, 2007) Potensi penggunaan niklosamida diprediksi akan meningkat, hal ini berkaitan dengan semakin luasnya areal sawah yang diserang oleh hama keong mas. Pada tahun 1997 luas serangan keong mas pada sawah di Indonesa sebesar 3.630 Ha sedangkan pada tahun 2007 sudah mencapai 22.110 Ha dan Jawa Barat paling tinggi luas serangannya yaitu mencapai 6.829 Ha (Direktorat Perlindungan Tanaman Pangan, 2008). Estimasi penggunaan niklosamida di sawah per hektar dengan ketinggian air 10 cm sebesar 0,5 mg/L dan yang masuk ke perairan sebesar 50 % yaitu 0,25 mg/L, sedangkan efektifitas pemakaiannya hanya berlangsung selama dua hari. Walaupun demikian belum ada data dari penelitian pestisida pertanian yang umum di perairan (sawah). Menurut Abel (1989), pengaruh toksisitas subletal suatu toksikan terhadap organisme yang daya racunnya tidak menyebabkan kematian secara tidak langsung pada organisme, tetapi menyebabkan gangguan pertumbuhan, reproduksi, kebiasaan makan. Pengaruh bahan pencemar, (termasuk niklosamida) dapat diamati melalui pengukuran fisiologis maupun biokimia. Pengamatan yang dapat dilakukan antara lain hematologi (kadar hematokrit, kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan jumlah leukosit), serta histopatologi (insang, hati dan ginjal) (Heat, 1987). Penggunaan moluskisida niklosamida di Indonesia relatif baru maka belum banyak tersedia informasi sampai saat ini. Luasan serangan hama keong mas yang semakin meningkat berkorelasi dengan peningkatan penggunaan niklosamida. Untuk melihat dampak penggunaan niklosamida terhadap ikan perlu dilakukan penelitian mengenai pengaruh toksiksisitas subletal niklosamida terhadap juvenil ikan mas dari aspek hematologi, histopatologi, dan pertumbuhan,
20
Pendekatan Masalah Moluskisida niklosamida digunakan di sawah untuk memberantas hama keong mas. Luas serangannya semakin meningkat dari tahun ke tahun sehingga penggunaan niklosamida semakin meningkat. Penggunaan niklosamida berpotensi mengakibatkan pencemaran di lingkungan perairan karena digunakan
sebagai
sumber air untuk kegiatan budidaya perikanan air tawar dapat tercemar dan berdampak negatif terhadap hewan akuatik. Untuk itu perlu penelitian dampak penggunaan niklosamida dengan hewan uji ikan mas karena penggunaan bahan ini akan menggangu proses fisiologi ikan dan akan berpengaruh terhadap pertumbuhan Beberapa permasalahan niklosamida dalam penelitian ini yang berhubungan dengan toksisitas moluskisida terhadap ikan mas adalah sebagai berikut: a) Seberapa besar toksisitas akut moluskisida niklosamida terhadap ikan mas; b); Bagaimana pengaruh subletal moluskisida niklosamida terhadap pertumbuhan ikan mas; c) Bagaimana pengaruh subletal moluskisida niklosamida terhadap kondisi hematologis ikan mas yang meliputi kadar hematokrit, kadar hemoglobin, jumlah sel eritrosit, dan jumlah sel leukosit. d) Bagaimana pengaruh subletal moluskisida niklosamida terhadap kondisi histopatologi ikan mas yang meliputi organ insang, hati, dan ginjal. Tujuan Penelitian dan Manfaat Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan pengaruh toksisitas akut dan subletal moluskisida niklosamida terhadap pertumbuhan, kondisi hematologi dan histopatologi juvenil ikan mas (Cyprinus carpio). Manfaat penelitian ini yaitu dengan diketahui pengaruh subletal moluskisida niklosamida terhadap pertumbuhan, kondisi hematologi dan histopatologi juvenil ikan mas, maka dapat diketahui potensi toksisitas niklosamida terhadap organisme perairan khususnya ikan mas sehingga dapat digunakan sebagai acuan dalam penggunaan niklosamida di bidang pertanian pada umumnya dan dampaknya pada perikanan budidaya pada khususnya
21
Hipotesis
Hipotesis yang diajukan dalam penelitian ini adalah jika pada konsentrasi tertentu niklosamida dapat merusak jaringan ikan, maka akan terjadi gangguan fisiologis sehingga akan menurunkan kinerja pertumbuhan pada juvenil ikan mas.
22
TINJAUAN PUSTAKA
Pestisida Pestisida merupakan serangkaian senyawa alamiah maupun sintetis berbagai unsur kimia yang memiliki kemampuan untuk membunuh organisme pengganggu, terutama ditujukan untuk jenis-jenis tertentu. Penggunaan pestisida di bidang pertanian, terutama di negara-negara berkembang mencakup lebih dari 90 % konsumsi pestisida domestik (Kusno, 1995). Menurut Lodang (1994), penggunaan pestisida disamping dapat memberikan keuntungan juga dapat menimbulkan kerugian. Keuntungan yang didapat antara lain: 1) dapat meningkatkan produksi pertanian dan hasil yang cepat; 2) aplikasi di lapangan relatif mudah; 3) dapat digunakan pada areal yang luas dalam waktu yang relatif singkat; 4) dapat diaplikasikan setiap waktu, dengan memperhatikan keadaan cuaca; 5) dapat diperoleh dengan mudah; 6) harga relatif murah dan memberikan keuntungan ekonomi. Kerugian yang ditimbulkan dari penggunaan pestisida adalah:1) mempertinggi resistensi hama; 2) membunuh makhluk lain yang bukan sasaran; 3) gangguan toksik pada manusia bertambah sehubungan dengan bertambahnya volume dan intensitas penggunaan; 4) produk pertanian akan mengandung residu pestisida yang akan mengancam kesehatan para konsumen, terutama petani dan keluarganya; 5) kontaminasi global akibat mobilitas yang tingi, terutama oleh pestisida yang persisten; 6) mengganggu keseimbangan dalam rantai makanan sehingga akan menganggu ekosistem secara keseluruhan; 7) bertambahnya resiko efek sinergik interaksi antara bermacam-macam pestisida; 8) kemungkinan akan terjadi efek genetik jangka panjang akibat dosis subletal pestisida persisten. Connel dan Miller (1995) menyatakan dampak penggunaan pestisida berkaitan erat dengan sifat dasar yang penting terhadap efektifitas pestisida, yaitu: 1)
23
pestisida cukup beracun untuk mempengaruhi seluruh kelompok taksonomi biota, termasuk makhluk bukan sasaran, sampai batas tertentu bergantung pada faktor fisiologi dan ekologi: 2) banyak pestisida yang dapat bertahan terhadap degradasi lingkungan akibatnya dapat bertahan dalam suatu daerah yang diberi perlakuan, sehingga keefektifannya dapat diperkuat. Sifat ini memberikan pengaruh jangka panjang dalam ekosistem alamiah. Pestisida Dalam Lingkungan Perairan Perairan adalah sebagai suatu tempat penampungan utama bagi residu pestisida yang persisten. Pencemaran pestisida terhadap sumberdaya dan lingkungan perairan mengakibatkan kematian hewan dan biota akuatik lainnya, penurunan produktifitas, penurunan kualitas lingkungan dan kualitas ikan. Masuknya pestisida ke dalam perairan melalui berbagai jalur, antara lain: pemakaian langsung untuk membasmi hama tanaman, buangan limbah perkotaan dan industri, limpasan dari areal persawahan, pencucian melalui tanah, penimbunan aerosol dan partikulat, curah hujan dan penyerapan fase uap pada antar fase udara-air (Connel dan Miller, 1995). Di dalam lingkungan, pestisida diserap oleh berbagai komponen
lingkungan
kemudian
berpindah
tempat
(Tarumingkeng, 1992).
Komponen lingkungan seperti unsur-unsur hayati, suhu, air atau udara kemudian mengubah bahan aktif pestisida melalui proses kimia dan biokimia menjadi bahan lain yang masih beracun atau bahan yang toksisitasnya telah hilang sama sekali. Aliran pembuangan pestisida beragam menurut laju arus air permukaan dan jenis tanah, sedangkan pencucian mula-mula bergantung pada adsorbsi/desorbsi antara konstituen tanah dan pergolakan air yang melaluinya (Robinson, 1973). Kelarutan suatu bahan aktif pestisida di dalam air merupakan faktor penting yang akan menetukan persistensinya di lingkungan perairan. Pengaruh langsung pestisida dapat terjadi pada jaringan tubuh ikan, sedangkan pengaruh tidak langsung dapat terjadi
dengan berkurangnya organisme pakan ikan sehingga menghambat
pertumbuhan ikan.
24
Penyerapan residu pestisida yang terdapat dalam perairan oleh hewan air dapat terjadi melalui berbagai cara, seperti mengkonsumsi makanan yang telah terkontaminasi, pengambilan dari air melalui membran insang, difusi kultikular serta penyerapan langsung dari sedimen (Livingstone, 1977). Penyerapan residu pestisida bergantung pada besarnya residu, sifat fisika-kimia, sifat bioakumulatif dan toksisitasnya, maka keracunan yang ditimbulkannya dapat bersifat letal maupun subletal (Kusno, 1995). Berkaitan dengan bahaya yang ditimbulkan oleh pestisida terhadap ikan, Komisi Pestisida (1983) dan Koesoemadinata, (2003) mengklasifikasikan pestisida berdasarkan pada nilai LC50-96 jam seperti pada Tabel 1. Tabel 1. Klasifikasi pestisida berdasarkan toksisitasnya terhadap ikan Tingkat
LC50-96 jam (ppm)
Evaluasi toksisitas
A
<1
Sangat tinggi
B
1 – 10
Tinggi
C
10 – 100
Sedang
D
> 100
Rendah
Komisi pestisida (1983) dan Koesoemadinata, (2003)
Niklosamida Moluskisida
niklosamida
dengan
nama
kimia
2′,5-
dichloro-′4
nitrosalicylanilide (UPAC), rumus empiris C13H8Cl2N2O4 dan rumus bangun seperti pada Gambar 2. Niklosamida adalah berbentuk pekatan yang dapat diemulsikan, berwarna bening kecoklatan titik didih 230 0C : titik uap < 1 mPa (20 0C); kelarutan dalam air 5-8 mg/l pada suhu ruangan, stabil terhadap kondisi panas serta dapat terurai dalam air pada konsentrasi asam dan alkalis (Worthing, 1987). Moluskisida niklosamida berdasarkan cara kerja termasuk racun kontak dan pernafasan (Sekretariat Jenderal Deptan. 2007).
25
Gambar 1. Rumus bangun niklosamida (Worthing, 1987) Toksisitas subletal Pengaruh
toksisitas
subletal
pestisida
secara
tidak
langsung
dapat
menyebabkan penurunan kesempatan untuk menyelamatkan diri atau perkembang biakan dalam populasi alamiah. Pengaruh yang spesifik adalah banyak dan beragam, serta berhubungan dengan spektrum yang luas tanggapan fisiologis dan perilaku, seperti perubahan dalam produksi enzim, laju pertumbuhan, perkembang biakan (Hurlbert, 1975; McEwen dan Stephenson, 1975 dalam Connel dan Miller, 1995). Menurut Schmittou (1991), tekanan lingkungan yang disebabkan oleh pengaruh pestisida yang bersifat subletal juga merupakan faktor eksternal yang akan menyebabkan direduksinya pertumbuhan ikan. Pengaruh toksisitas subletal suatu toksikan terhadap organisme yang daya racunnya tidak menyebabkan kematian secara langsung pada organisme, tetapi menyebabkan gangguan pertumbuhan, reproduksi, kebiasaan makan (Abel, 1989). Pengamatan yang dapat dilakukan antara lain pertumbuhan, hematologi (kadar hematokrit, kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan jumlah leukosit) dan histopatologi (insang, hati dan ginjal) (Heat, 1987). Pertumbuhan Aziz (1989) menyatakan pertumbuhan ikan merupakan suatu pola kejadian yang kompleks dan melibatkan banyak faktor yang berbeda. Selanjutnya menurut Effendi (1979) pertumbuhan adalah perubahan ukuran, baik panjang, berat maupun volume, sehubungan dengan perubahan waktu. Proses pertumbuhan pada ikan mulanya berlangsung lambat, kemudian cepat, dan akhirnya lambat kembali. Pertumbuhan yang demikian disebut autocatalytic.
26
Dengan demikian ikan muda akan mengalami pertumbuhan yang lebih cepat dibandingkan dengan ikan tua. Ikan tua tetap mengalami pertumbuhan, walaupun berlangsung secara lambat (Effendi, 1979). Selanjutnya dikatakan bawa pertumbuhan ikan dipengaruhi faktor internal dan eksternal. Faktor internal merupakan faktor yang meliputi: genetik, seks, umur, daya tahan terhadap penyakit dan parasit. Faktor eksternal meliputi: kompetisi pada populasi, makanan, tingkatan trofik, energi matahari dan keadaan fisika-kima lingkungan. Hematologi Darah pada ikan berfungsi membawa ion-ion anorganik (Na+, Mg+2, Cl-) dan senyawa organik seperti hormon, vitamin, dan beberapa protein plasma. Protein plasma berperan dalam respon kekebalan tubuh, penyangga perubahan pH darah dan pengaturan tekanan osmotik (Bond, 1979). Fungsi darah pada ikan untuk mengedarkan zat makanan hasil pencernaan dan oksigen ke sel-sel tubuh serta membawa hormon dan enzim ke organ yang memerlukannya. Beberapa parameter yang dapat memperlihatkan perubahan pada darah adalah kadar hematokrit (Ht), kadar hemoglobin (Hb), jumlah sel darah merah (leukosit) dan jumlah sel darah putih (leukosit)) (Lagler et al., 1977). Hematokrit Hematokrit (Ht) merupakan perbandingan antara volume sel darah merah dengan plasma darah (Bond, 1979). Menurunnya kadar hematokrit dapat sebagai indikasi rendahnya protein dalam pakan, defisiensi vitamin atau ikan dapat infeksi, sedangkan meningkatnya kadar hematokrit menunjukkan ikan dalam keadaan stress (Wedemeyer & Yasutake, 1977 dan Anderson & Siwick, 1983). Hematokrit dalam darah ikan mas pada kondisi normal adalah sebanyak 27,1% (Peter dan Cech, 1990 dalam Affandi dan Tang, 2002) Hemoglobin (Hb) Sel darah merah mengandung hemoglobin yang merupakan suatu protein dalam eritrosit. Hemoglobin berperan dalam proses pengangkutan oksigen dalam darah dan kadar hemoglobin dalam darah ikan berkaitan dengan jumlah eritrosit (Lagler et al., 1977).
27
Hemoglobin berkaitan dengan eritrosit yaitu kadar atau kandungan eritrosit matang dalam aliran darah. Rendahnya Hb menunjukkan ikan anemia, sedangkan tingginya Hb berkaitan dengan kondisi stres (Blaxhall, 1972) Kadar hemoglobin dalam darah ikan teleostei berkisar antara 37-100% Hb setara dengan 14 gram dalam 100 ml darah dan dalam keadaan sakit akut kadar Hb pada ikan akan turun hingga 27 % (Lucky, 1977). Angka (1983), kadar hemoglobin pada ikan mas dewasa adalah 8,61 ± 0,43 - 10,86 ± 48 (gram per 100 cc volume darah), sedangkan menurut Peter dan Cech, (1990) dalam Affandi dan Tang (2002) kadar Hb dalam darah ikan mas 6,40. Eritrosit Warna eritrosit merah kekuningan, bentuk lonjong, kecil dan berukuran 7-36 mikron (Lagler et al., 1977). Darah ikan sebagian besar terdiri dari sel-sel darah merah yang jumlahnya diperkirakan mencapai 4 juta sel/mm3. Sel darah merah ikan memiliki inti sel yang ukurannya bervariasi antar spesies. Sel darah merah tersebut mengandung hemoglobin dan berfungsi membawa oksigen dari insang ke berbagai jaringan (Moyle dan Cech, 1981). Menurut Angka (1990) volume sel darah merah 100cc volume darah pada ikan mas dewasa berkisar 30,92 ± 0,43% dan 37,4 ± 1,67% dan jumlah sel darah merah per 1cc darah ikan mas (1,61 ± 0,06) x 106 sel sampai (2,04 ± 0,09) x 106 sel. Eritrosit yang terdapat dalam darah ikan mas dalam kondisi normal adalah 1,43 sel x 106/mm3 (Peter dan Cech, 1990 dalam Affandi dan Tang 2002). Leukosit Menurut Angka (1990), jumlah sel leukosit dalam 1cc darah merah ikan berkisar antara (14,70 ± 0,32) x 103 sel – (19,35 ± 0,42) x 103 sel. Affandi dan Tang (2002), sel darah putih pada ikan tidak berwarna dengan jumlah berkisar 20.000 – 150.000 butir, dan dibedakan menjadi
dua golongan, yaitu: agranulosit dan
granulosit. agranulosit digolongkan menjadi limfosit, monosit dan trombosit, seangkan granulosit dibagi menjadi basofil, eoseonofil dan neutrofil. Histopatologi
28
Histopatologi adalah metode yang sensitif dan secara biologis bernilai untuk mengukur efek stres lingkungan terhadap hewan (jaringan), Perubahan histopatologi ini sebagai indikator penting faktor stres lingkungan yang dialami sebelumya dimana perubahannya secara biokimia dan fisiologi. Perubahan ini bisa digunakan untuk meramal efek yang mungkin terjadi seperti pertumbuhan, reproduksi, menghindarkn diri dari predator, dan stabilisasi populasi yang terjadi pada tingkat yang lebih tinggi (MacKim, 1985; Meyer dan Hendricks 1985 dalam Hinton dan Laurtn, 1990) Insang merupakan organ osmoregulasi, yaitu melakukan berbagai fungsi fisiologis, meliputi peredaran gas, regulasi ion, mempertahankan keseimbangan asam basa, dan ekskresi bahan buangan senyawa nitrogen, selain itu insang terus menerus berhadapan polutan di lingkungan medium (Hinton and Laurtn, 1990). Hati penting dalam nutrisi dan pertahanan tubuh sebagai respon terhadap toksikan asal luar tubuh, selain itu merupakan aspek penting bagi nutrisi meliputi simpanan lemak dan karbohidrat (Hinton and Laurtn, 1990). Ginjal berfungsi untuk filtrasi dan mengekskresikan bahan yang tidak dibutuhkan termasuk polutan (niklosamida). Ginjal merupakan organ osmoregulasi, walaupun ginjal juga berfungsi dalam immunitas sel. Ginjal ikan menerima sebagian besar
darah postbranchial, dan luka ginjal sebagai indikator polusi lingkungan
(Hinton and Laurtn, 1990). Kualitas air Suhu berpengaruh secara langsung maupun tidak langsung seperti terhadap aktifitas enzim, tingkat metabolisme maupun kadar oksigen. Tingkat penyerapan racun dapat lebih tingi dengan adanya kenaikan suhu (Macek et al., dalam Arianti, 2002). Bahan polutan cenderung lebih beracun pada air dengan tingkat kesadahan rendah dan nilai pH yang stabil, sedangkan pada kesadahan tingi cenderung menurunkan toksisitas dari polutan. Toksisitas pestisida dalam air akan meningkat dengan berkurangnya konsentrasi oksigen. Hal ini terjadi karena peningkatan tingkat respirasi, sehingga racun yang terpapar pada tubuh ikan akan semakin besar (Mason, 1992). Penurunan konsentrasi oksigen dan peningkatan konsentrasi karbondioksida dapat menyebabkan
29
stres pada ikan sehingga ketahanan ikan terhadap pestisida akan menurun, akibatnya kan mempengaruhi toksisitas pestisida terhadap ikan (Arianti, 2002) Rendahnya oksigen terlarut dalam tubuh ikan akan meningkatkan toksisitas pestisida terhadap ikan.
Boyd (1990) mengemukakan bahwa keberadaan amonia akan mereduksi
masuknya oksigen ke dalam tubuh ikan, hal ini disebabkan insangnya yang rusak.
METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian dilakukan dari bulan Maret hingga Agustus 2008, bertempat di Instalasi Riset Lingkungan Perikanan Budidaya dan Toksikologi Cibalagung-Bogor. Analisis hematologi dan histopatologi di Laboratorium Kesehatan Ikan Departemen Budidaya Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB. Bahan dan Alat Bahan yang dipergunakan selama penelitian adalah sebagai berikut: a. Benih ikan mas yang berasal Desa Ciherang, dengan bobot 2,5-3,0 gram. b. Molusikisida Snaildown produksi Agricon dengan kandungan bahan aktif niklosamida 250 EC. c. Pakan ikan, berupa pelet dengan kandungan protein 40 % (pakan stater udang). d. Aceton p.a sebagai pelarut dan KMnO4 (PK) 20 mg/l sebagai desifektan pada wadah pengujian sebelum penelitian dilaksanakan. e. Bahan kimia untuk analisa kualitas air. f. Bahan kimia untuk histopatologi dan hematologi. g. Penyiapan larutan uji dengan membuat larutan induk Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu: a. Wadah pengujian berupa akuarium kaca yang terdiri dari: 21 unit ukuran 40 x 20 x 20 cm (uji toksisitas akut) dan 16 unit berukuran 70 x 50 x 60 cm (uji toksisitas subletal) yang masing-masing dilengkapi tandon air.
30
b. Blower yang digunakan utuk airasi media uji. c. Peralatan untuk pembuatan berbagai konsentrasi perlakuan, yaitu: gelas ukur, pipet, labu ukur dan bulp. d. Peralatan untuk perhitungan dan pengamatan parameter darah, yaitu: jarum suntik, tabung dan sentrifius mikrohematokrit, skala hematokrit, hemositometer, pipet, gelas objek dan penutup, serta mikroskop. e. Peralatan untuk histopatologi, yaitu: peralatan bedah, botol contoh, larutan fiksasi (Bouins), larutan pencuci (NaCl fisiologis),. f. Timbangan digital dengan ketelitian 0,01 gram. g. Peralatan untuk pengukuran kualitas air, yaitu: termometer, pH meter, DO meter,spektrofotometer. Pelaksanaan Penelitian Ambang Batas Uji ambang batas bertujuan untuk menentukan kisaran letal ambang atas (LC10024 jam) dan konsentrasi letal ambang bawah (LC0-48 jam) (Busvine, 1971). Nilai ambang batas daya racun letal moluskisida terhadap ikan mas dengan deret konsentrasi uji: 0,00; 0,06; 0,10; 0,20; 0,25mg/L. Penghitungan konsentrasi larutan uji ditentukan dengan mengacu pada persamaan berikut: V1.N1 = V2.N2
………………………………………………. (1)
Keterangan: N1
= konsentrasi niklosamida dalam larutan stok
N2
= konsentrasi niklosamida yang diinginkan dalam media air
V1
= volume larutan stok yang akan dimbil
V2
= volume media air penelitian yang diinginkan
Waktu letal Pengujian waktu letal bertujuan untuk mengetahui tingkat peluruhan konsentrasi moluskisida niklosamida dalam air berdasarkan pada kematian ikan. Prosentase penurunan kematian ikan akan dijadikan acuan untuk menentukan presentase dan interval waktu pergantian air bagi kestabilan konsentrasi perlakuan
31
pada tahap pengujian selanjutnya. Konsentrasi moluskisida niklosamida dianggap tidak stabil apabila kematian ikan mencapai 80% yang didentik dengan penurunan konsentrasi
bahan
kimia
tersebut
mencapai
≤
20%
dari
kondisi
awal
(Koesoemadinata, 2003). Pengujian dilakukan dengan mengaplikasikan tingkat konsentrasi nilai LC10024 jam dengan 3 kali ulangan untuk waktu pengamatan 0; 12; 24; 36; 48 jam. Penentuan konsentrasi larutan uji ditentukan dengan mengacu pada persamaan 1. Larutan niklosamida 0,25 mg/L disebar merata pada permukan air untuk ke empat wadah kemudian diaduk dengan pengaduk kaca, selanjutnya dimasukkan ikan pada waktu 0 jam, 12 jam, 24 jam, 36 jam. Pengamatan dilakukan setiap 12 jam. Selama uji stabilitas tidak dilakukan pergantian air Toksisitas akut Pengujian toksisitas akut untuk mencari nilai LC50 dari moluskisida niklosamida terhadap ikan mas yang ditentukan dengan metode uji hayati (bioassay) (Busvine, 1971), untuk menentukan Median Lethal Concentration (LC50) yang besarnya berada antara nilai ambang atas dan ambang bawah yang dapat ditentukan dengan persamaan 2 dan 3 dengan deretan konsentrasi: 0.00; 0,08; 0,10; 0,12; 0,14; 0,17; 0,20 mg/L. Log (N/n) = k log (a/n)
………………………………………
(2)
a/n=b/a=c/b=d/c=e/d=f/e
………………………………………
(3)
Keterangan: N = konsentrasi ambang atas n = konsentrasi ambang bawah K = Jumlah konsentrasi yang diuji (6) a, b, c, d, e, f adalah konsentrasi yang diuji dengan nilai a sebagai konsentrasi terkecil Konsentrasi bahan uji tidak diverifikasi secara analisis kimia dan nilai LC50 ditentukan berdasarkan konsentrasi nominal moluskisida niklosamida dalam wadahwadah penelitian.Wadah yang digunakan dalam uji toksisitas berupa 21 unit
32
akuarium kaca yang berukuran 40 x 20 x 20 cm. Masing- masing akuarium dilengkapi saluran pemasukan dan pengeluaran serta penampungan air pengganti. Banyaknya ikan uji setiap wadah 10 ekor dengan waktu pemaparan selama 24, 48, 72, dan 96 jam dengan peubah yang diukur adalah mortalitas ikan. Toksisistas Subletal Niklosamida Terhadap Pertumbuhan Pengujian dilakukan dengan metode uji hayati penggantian media uji (renewal test), yaitu melakukan pergantian air pemeliharaan setiap 48 jam dengan konsentrasi niklosamida yang sama untuk masing-masing perlakuan. Sebagai perlakuan digunakan 4 konsentrasi, yaitu 0, 10, 30, dan 50 % dari nilai LC50 96 jam, masingmasing perlakuan diulang 4 kali. Wadah yang digunakan berupa 16 unit akuarium kaca yang berukuran.
70 x 50 x 60 cm. Jumlah ikan yang diuji sebanyak 20
ekor/wadah dengan waktu pemaparan 12 minggu. Pengukuran untuk pertumbuhan adalah bobot ikan yang dilakukan minggu ke 4, 8, dan 12 untuk setiap perlakuan. Selama penelitian ikan uji diberi pakan secara at satiation menggunakan pakan pelet komersial dengan kandungan protein 40 %. Pengukuran parameter fisika kimia air dilakukan sebelum dan sesudah ganti konsentrasi media pemeliharaan yaitu: suhu air, pH, 02 terlarut, CO dan amonia. Toksisitas Subletal Niklosamida Terhadap Hematologi Ikan mas yang telah dipaparkan dalam setiap perlakuan pada pengujian subletal niklosamida terhadap pertumbuhan, yang dilakukan pada 1 jam pertama (minggu ke 0), minggu ke 4, minggu ke 8, dan minggu ke 12, masing-masing diambil satu ekor untuk satu akuarium (unit penelitian).
Pengambilan
darah
dilakukan
dengan menggunakan jarum suntik steril pada bagian vena caudalis ikan uji. Jarum suntik tersebut sebelum digunakan terlebih dahulu dibasahi dengan Na-Sitrat 3,8% yang berfungsi sebagai antikoagulan. Sampel darah
diambil untuk pengukuran
parameter hematologis, yaitu kadar hematokrit, kadar hemoglobin, eritrosit dan jumlah leukosit. Kadar Hematokrit
33
Kadar hematokrit diukur dengan metode Anderson dan Siwicki (1993). Darah dihisap dengan menggunakan tabung mikrohematokrit berlapis heparin yang berfungsi mencegah pembekuan darah dalam tabung, sampai volume darah mencapai ¾ bagian tabung kemudian salah satu ujung tabung disumbat dengan critosea untuk selanjutnya disentrifius dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit. Pengukuran kadar hematokrit dilakukan dengan membandingkan volume benda darah terhadap volume seluruh darah dengan menggunakan skala hematokrit dan dinyatakan dalam persentase hematokrit (%Ht). Kadar Hemoglobin Kadar hemoglobin diukur menurut metoda Sahli dengan Sahlinometer (Wedemeyer dan Yasutake, 1977). Darah dihisap menggunakan pipet Sahli hingga mencapai skala 20 m 3, kemudian dipindahkan kedalam tabung Hb yang berisi HCl 0,1 N sampai skala 10 (kuning). Kemudian tunggu selama 3-5 menit agar Hb bereaksi dengan HCl membentuk asam hemarin, kemudian aduk dan tambahkan akuades hingga warnanya sama dengan standar. Pembacaan skala dilakukan dengan melihat tinggi permukaaan larutan yang dikocok dengan skala lajur g% yang menunjukkan banyaknya Hb dalam gram setiap 100 ml darah dan dinyatakan dalam persentase (%Hb). Jumlah Eritrosit Jumlah eritrosit dihitung menurut metoda Blaxhall dan Daisley (1973).Sampel darah diencerkan dengan larutan Hayem untuk menghancurkan sel darah putih agar jumlah sel darah merah dapat dihitung. Pengenceran dilakukan dengan menggunakan pipet pencampur berskala maksimum 11 yang dilengkapi pengaduk. Darah dihisap dengan pipet hingga skala 1, kemudian dihisap larutan Hayem hingga skala 11 menggunakan pipet yang sama. Pipet digoyang selama 15 menit agar darah tercampur secara merata, sedangkan larutan pada ujung pipet yang tidak tercampur segera dibuang. Darah yang teraduk diteteskan kedalam hemositometer
34
yang dilengkapi gelas penutup hingga memenuhi seluruh permukaan yang berskala, selanjutnya dilakukan penghitungan dibawah mikroskop. Jumlah Leukosit Jumlah leukosit dihitung dengan metoda Blaxhall dan Daisley (1973). Sampel darah diencerkan dengan larutan Turks untuk menghancurkan sel darah merah agar jumlah sel darah putih dapat dihitung. Untuk mengencerkan leukosit digunakan pipet berskala maksimal 11 yang dilengkapi pengaduk. Mula-mula darah dihisap hingga skala 1, kemudian dilanjutkan dengan menghisap larutan Turks hingga skala 11. Pencampuran dilakukan dengan mengaduk pipet selam 15 menit tercampur secara merata.
Setelah
pencampuran
selesai,
agar teteskan
darah kedalam
hemositometer yang dilengkapi gelas penutup hingga memenuhi seluruh permukaan yang berskala, selanjutnya dilakukan penghitungan leukosit dibawah mikroskop. Toksisitas Subletal Niklosamida Terhadap Histopatologi Ikan mas yang telah dipaparkan dalam setiap perlakuan pada uji subletal terhadap pertumbuhan, masing-masing diambil satu ekor per unit penelitian untuk sampel organ dalamnya, yaitu: insang, hati dan ginjal untuk pengamatan histopatologis, yang dilakukan pada minggu ke-4, minggu ke-8, dan minggu ke-12. Pembuatan Preparat Histopatologi Fiksasi jaringan dan Parafinisasi a. Fiksasi : untuk mencegah pembusukan jaringan, maka jaringan yang telah diambil kemudian direndam dalam larutan fiksatif selama 3 x 24 jam. Larutan fiksatif yang digunakan ialah larutan Bouins. b. Dehidrasi : mengeluarkan cairan dari dalam sel dengan cara merendam dalam bahan kimia dimulai dari konsentrasi rendah ke konsentrasi tinggi. Pertama-tama jaringan yang dipilih direndam Alkohol 70 % selama 2 beberapa hari, kemudian dilanjutkan direndam berturut-turut dengan alkohol 80 %, 90 %, 95 % dan 100 % masing-masing selama 2 jam.
35
c. Clearing : mengeluarkan alkohol dan memasukkan xylol (parafin larut dalam xylol ; tidak larut dalam alkohol) Setelah didehidrasi jaringan tersebut direndam Alkohol xylol (1:1) ½ jam, dilanjutkan dengan xylol 3 kali masing-masing ½ jam. d. Impregnasi ; penggantian xylol dengan paraffin Cara direndam dalam parafin dengan titik cair 58-60oC;dalam oven yang dipanaskan pada 65-70oC, Xylol paraffin (1:1) ¾ jam. e. Embedding : memasukan paraffin ke dalam sel Jaringan tersebut direndam dengan parafin 3 kali masing-masing ¾ jam. f. Blocking : mencetak jaringan sehingga mudah untuk dipotong Pemotongan jaringan Dilakukan dengan mikrotom, ketebalan sayatan 4 mikrometer ;untuk jaringan lunak setelah dipotong dimasukan ke air suam-suam kuku (+ 400C) sehingga pita potongan jaringan mengapung dan bisa dipotong untuk selanjutnya ditata dalam gelas objek. Pewarnaan jaringan a. Hidrasi : mengeluarkan paraffin Direndam dengan Xylol sebanyak 2 kali masing-masing 3 menit, lalu alkohol 100 % sebanyak 2 kali masing-masing 3 menit, dilanjutkan dengan alkohol 95%, 90%, 80%, 70%, 50% masing-masing 3 menit dan kemudian dicuci dengan akuades 2 kali b. Pewarnaan H-E Direndam dengan Hematoksilin
7 menit, dicuci dengan air
7 menit,
dilanjutkan dengan Eosin 3 menit dan dicuci dengan akuades. c. Dehidrasi: mengeluarkan air Direndam dengan alkohol 50 % sebanyak 2 kali masing-masing 2 menit, dilanjutkan dengan alkohol 70 %, 85 %, 90 %, 100 % masing-masing 2 menit dan kemudian dengan xylol sebanyak 2 kali masing-masing 2 menit.
36
Lalu ditutup dengan gelas penutup yang sudah di tetesi dengan entelan, dikeringkan dalam oven pada suhu 40oC selama 24 jam. Selanjutnya dilakukan pengamatan preparat histologis dengan mikroskop dan dianalisa secara deskriptif. Analisis Data Data komulatif mortalitas ikan mas pada pengujian definitif menggunakan analisis probit (Wallace, 1982) dengan bantuan program “probit analysis” untuk menentukan nilai LC
50
pada waktu pemaparan 24, 48, 72, dan 96 jam, sedangkan
untuk analis data sifat fisika-kimia air (suhu, pH, oksigen terlarut, karbondioksida, amoniak) dilakukan secara deskriptif untuk mengetahui kelayaknya sebagai media uji. Pertumbuhan individu ikan mas selama waktu pemaparan dalam uji toksisitas subletal dihitung berdasarkan model laju pertumbuhan harian individu menurut rumus Ricker (1975): SGR = (lnWt –ln Wo)/∆t x 100% ……………………….(4) Keterangan: SGR Wt Wo ∆t
= laju pertumbuhan harian individu (%) = bobot rata-rata individu pada akhir pengamatan (g) = bobot rata-rata individu pada awal pengamatan (g) = waktu pemaparan
Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap (RAL), analisa data untuk pengaruh perlakuan terhadap pertumbuhan dan hematologi menggunakan analisis varian (anova) yang dilanjutkan dengan uji Tukey apabila berbeda nyata (Steel dan Torrie, 1989). Pengolahan data menggunakan program SPSS versi 13. Pengaruh perlakuan terhadap histopatologi ikan mas dilakukan secara deskiptif.
37
HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ambang Batas Dari uji yang dilakukan diperoleh nilai konsentrasi ambang bawah (LC0-48 jam) sebesar 0,06 mg/L, yaitu konsentrasi tertinggi dari moluskisida niklosamida yang tidak mematikan ikan mas dalam waktu 48 jam dan nilai ambang atas (L100-24 jam) sebesar 0,25 mg/l, yaitu konsentrasi terendah moluskisida niklosamida yang dapat mematikan 100 % ikan mas dalam waktu 24 jam (Tabel 2) Tabel 2. Data mortalitas (%) ikan mas pada uji ambang batas konsentrasi niklosamida Konsentrasi (mg/L) 0,00
Jumlah ikan (ekor) 10
0 0,00
6 0,00
12 0,00
24 0,00
36 0,00
48 0,00
0,06
10
0,00
0,00
0,10
10
0,00
0,00
0,00 0,00
0,00 10,00
0,00 20,00
0,00 30,00
0,20
10
0,00
60,00
60,00
70,00
80,00
0,25
10
0,00
40,00 100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
Mortalitas (%/ jam)
38
Waktu Letal Dari data hasil pengukuran uji waktu letal terhadap niklosamida pada air pemeliharaan ikan mas nilai ambang atas (L100-24 jam) sebesar 0,25 mg/l diperoleh bahwa pergantian air dilakukan setelah 48 jam, karena kematian ikan sebesar 80 %. (Gambar 2).
Gambar 2. Mortalitas (%) ikan mas pada uji waktu letal untuk konsentrasi niklosamisa 0,25 mg/L (LC 100-24 jam) Toksisitas Akut Dari nilai kisaran ambang atas-bawah dan melalui perhitungan dengan menggunakan persamaan (2 dan 3), maka uji toksisitas letal dilakukan pada konsentrasi sebagai berikut: 0,00 (kontrol); 0,08; 0,10; 0,12; 0,14; 0,17 dan 0,20 mg/L. Pengamatan gejala klinis yang timbul dan pencatatan terhadap kelangsungan hidup ikan dilakukan pada waktu 2, 4, 6 , 8, 10, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84 dan 96 jam setelah aplikasi. Pada pengamatan jam ke 6 pada konsentrasi yang diberikan tidak ada kematian ikan. Kelangsungan hidup ikan pada konsentrasi 0,20 mg/L pengamatan jam ke-8 sebesar 83,3% sedangkan pada konsentasi 0,17 mg/L sebesar 80 %.
39
Selanjutnya kelangsungan hidup ikan 0% pada pengamatan jam ke 84 untuk konsentrasi 0,20 mg/L, dan untuk konsentasi 0,17 mg/L terjadi pada jam ke- 96. Pada kontrol tidak terlihat gejala klinis akibat keracunan dan tidak ditemukan ikan yang mati sampai waktu pemaparan 96 jam, hal ini menunjukkan bahwa media pemeliharaan (air) dan kondisi ikan selama pengujian dalam kondisi baik. Data kelangsungan hidup ikan mas selama uji toksisitas akut moluskisida niklosamida (Lampiran 1). Tabel 3. Nilai LC 50 moluskisida niklosamida terhadap ikan mas pada setiap
waktu Pemaparan
Waktu Pemaparan (jam)
Nilai LC 50 (mg/L)
Persamaan garis probit
24
0,195 (0,174 – 0,220)
Y =-5,220 + 4,681 X
48
0,152 (0,137 – 0,169)
Y =-5,220 + 4,681 X
72
0,117 (0,106 – 0,128)
Y =-5,524 + 5,086 X
96
0,099 (0,094 – 0,104)
Y =-18,274 + 11,644 X
Data mortalitas komulatif ikan mas pada uji toksisitas akut, selanjut dianalisis dengan menggunakan analisis probit (Wallace, 1982) dengan bantuan program “probit analysis” untuk menentukan nilai LC50 pada waktu pemaparan 24, 48, 72 dan 96 jam (Lampiran 2, 3, 4 dan 5). Hasil analisis menunjukkan bahwa nilai LC50 pada waktu pemaparan 24, 48, 72 dan 96 jam berturut-turut adalah 0,195; 0,152; 0,117dan 0,099 mg/L (Tabel 3). Hal ini menunjukkan bahwa semakin lama waktu pemaparan nilai LC50 moluskisida niklosamida semakin rendah terhadap ikan mas (Gambar 3).
40
Gambar 3. Nilai LC 50 moluskisida niklosamida terhadap ikan mas pada setiap waktu pemaparan
Toksisitas Subletal Pertumbuhan Ikan Pengaruh subletal perlakuan moluskisida niklosamida terhadap laju pertumbuhan spesifik (SGR) ikan mas secara statistik bahwa konsentrasi 0,03 mg/L dan 0,05 mg/L beda nyata dibanding dengan konsentrasi 0,00 mg/L(kontrol) dan 0,01 mg/L (Tabel 4) Tabel 4. Pertumbuhan ikan mas pada berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida setelah 12 minggu pemaparan Konsentrasi (mg/L) 0,00 0,01 0,03 0,05
Bobot rataan awal (g/ekor) 2,92±0,02 2,92±0,03 2,92±0,02 2,92±0,02
Bobot rataan akhir (g/ekor) 12,41±0,57 11,42±0,57 9,72±0,48 8,45±0,16
Laju Pertumbuhan Spesifik (%)* 1,38±0,26a 1,16±0,17a 0,62±0,14b 0,57±0,07b
*) Angka pada kolom sama yang diikuti huruf sama, menunjukkan tidak beda nyata
(P>0,05)
Pertambahan bobot rata-rata ikan mas pada masing-masing perlakuan bertambah sejalan dengan waktu pemaparan (Gambar 4). Data bobot rata-rata individu ikan mas selama 12 minggu pada masing-masing perlakuan terdapat pada Lampiran 6. Selanjutnya data tersebut ditransformasi kedalam bentuk logaritma
41
natural (ln) untuk menghitung laju pertumbuhan spesifik dari masing-masing perlakuan (Lampiran 7 dan 8).
Gambar 4. Pertambahan bobot rata-rata ikan mas selama 12 minggu pemaparan niklosamida moluskisida
Gambar 5. Laju pertumbuha spesifik ikan mas selama 12 minggu pemaparan moluskisida niklosamida
42
Dari Gambar 5 memperlihatkan bahwa sampai minggu ke 4 belum terlihat pengaruh moluskisida niklosamida terhadap penurunan laju pertumbuhan spesifik ikan mas untuk semua perlakuan dan pengaruhnya mulai terlihat terhadap perlakuan pada minggu ke 8 untuk konsentrasi 0,05 mg/L. Selanjutnya pada minggu ke 12 penurunan laju pertumbuhan spesifik ikan mas terlihat nyata pada konsentrasi 0,03 mg/L dan 0,05 mg/L. Untuk mengetahui pengaruh antar perlakuan digunakan uji Tukey (Lampiran 13) Kondisi Hematologi Data hematologi yang meliputi kadar hematokrit, hemoglobin, jumlah eritrosit dan leukosit dengan konsentrasi subletal niklosamida 0,00 (kontrol); 0,01; 0,03; 0,05 mg/L yang dipaparkan selama 12 minggu dapat dilihat pada Tabel 5; dan Gambar 6, 7, 8 dan 9 serta Lampiran 9, 10, 11, dan 12. Hasil anlisa statistik (Lampiran 13) menunjukkan bahwa pengaruh subletal moluskisida niklosamida pada ikan mas berpengaruh nyata (P< 0,05) terhadap kadar hematokrit (Ht), hemoglobin (Hb), eritrosit dan leukosit. Tabel 5. Rata-rata hematokrit, hemoglobin, eritrosit dan leukosit ikan mas setelah 12 minggu pemaparan moluskisida niklosamida Konsentrasi (mg/L) 0,00 0,01 0,03 0,05
Hematokrit (%) 27,4 ± 7,4a 41,3 ± 3,3b 44,7 ± 4,7b 51,3 ± 5,2b
Hemoglobin (%) 5,1 ± 0,29a 6,3 ± 0,39bc 7,0 ± 0,63bc 8,4 ± 0,60b
Eritrosit (x 106) 1,15 ± 0,01a 1,16± 0,01ab 1,19 ± 0,01b 1,26 ± 0,01c
Leukosit (x 103) 5,58±0,58 a 5,27±0,38a 4,40± 0,11b 4,30± 0,07b
*) Angka pada kolom sama yang diikuti huruf sama, menunjukkan tidak beda nyata (P>0,05)
Dari hasil analisis statistik diperoleh kadar hematokrit pada konsentrasi 0,01; 0,03; 0,05 mg/L berbeda nyata (P<0,05)
dengan kontrol (0,00 mg/L). Hal ini
menunjukkan bahwa pengaruh subletal moluskisida niklosamida pada konsentrasi 0,01 mg/L atau lebih secara nyata dapat meningkatkan prosentase hematokrit darah ikan mas.
43
Gambar 6. Kadar hematokrit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Dari hasil analisis statistik diperoleh kadar hemoglobin pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,01; 0,03; 0,05 mg/L. berbeda nyata (P< 0,05) dengan konsentrasi 0,00 mg/L (kontrol). Konsentrasi 0,01 dan 0,03 mg/L berbeda nyata (P< 0,05) dengan konsentrasi moluskisida niklosamida 0,05 mg/L. Hal ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,01 mg/L dapat meningkatkan kadar hemoglobin dalam darah ikan mas.
Gambar 7. Kadar hemoglobin juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu
44
Gambar 8. Jumlah eritrosit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap jumlah eritosit darah ikan mas secara statistik menunjukkan bahwa konsentrasi 0,03mg/L dan 0,05 mg/L perpengaruh nyata (P< 0,05) terhadap peningkatan jumlah eritosit dibanding dengan konsentrasi niklosamida 0,01 mg/L dan 0,00 mg/L (kontrol).
Hal
ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi niklosamida 0,03 mg/L atau lebih sudah mengakibatkan peningkatan eritrosit pada juvenil ikan mas.
45
Gambar 9. Jumlah leukosit juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap jumlah leukosit darah ikan mas secara statistik menunjukkan bahwa konsentrasi 0,03 dan 0,05 mg/L berpengaruh nyata (P< 0,05) terhadap penurunan jumlah leukosit dibanding
dengan konsentrasi 0,00 mg/L (kontrol) dan 0,01 mg/L. Hal ini
menunjukkan bahwa pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,03 mg/L dapat menurunkan jumlah leukosit dalam darah ikan mas.
46
Kondisi Histopatologi Kondisi histopatologi insang, hati, dan ginjal akibat terpapar moluskisida niklosamida, Pengamatan histologi insang, hati, dan ginjal yang terpapar moluskisida niklosamida tertera pada Tabel 6 Tabel 6. Kondisi histopatologi insang, hati, dan ginjal juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu Konsentrasi (mg/L) 0,00
0,01
4
8
12
Insang
normal
normal
normal
Hati
normal
normal
normal
Ginjal
normal
normal
normal
Insang
hipertropi
hiperplasia
Hati
hemoragi
Ginjal
- hemoragi - nekrosis - Fusi - hiperplasia - hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis - Fusi - hyperplasia - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis
- hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hiperlasia - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hiperlasia - nekrosis
- Hiperplasia - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hiperlasia - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis - hiperlasia - nekrosis
- hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis
- hemoragi - nekrosis - hemoragi - nekrosis
Insang 0,03
Waktu pengamatan (Minggu ke)
Organ
Hati Ginjal Insang
0,05 Hati Ginjal
47
2 4
1
3
Keterangan: 1= fusi; 2= hipertropi 3= hiperplasi 4= nekrosis
Gambar 10. Kondisi histopatologi insang juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu
1 1
2
2
Keterangan: 1= hemoragi 2= nekrosis Gambar 10. Kondisi histopatologi hati dan ginjal juvenil ikan mas yang terpapar moluskisida niklosamida selama 12 minggu
48
Kualitas air Pengukuran sifat fisika-kimia air terdiri atas: suhu, pH, oksigen terlarut, kandungan CO2 bebas dan amonia total selama penelitian berlangsung, baik pada toksisitas akut maupun pada uji sub letal. Data fisika-kimia air tercantum pada Tabel 6. Dari data tersebut diketahui bahwa sifat fisika-kimia air selama penelitian berlangsung dalam kondisi baik dengan konsentrasi kisaran yang masih didalam nilai ambang batas (NAB) untuk perikanan. Tabel 7. Kisaran sifat fisika-kimia air pada uji toksisitas akut dan subletal moluskisida niklosamida terhadap ikan mas Uji
Akut
Subletal
Konsentrasi (mg/L)
7,5-8,0
DO (mg/L) 6,5-7,2
CO2 (mg/L) 1,0-8,4
Amonia (mg/L) 0,02-0,14
26-27
7,5-8,0
6,5-7,2
1,3-8,9
0,02-0,24
0,10
26-27
7,5-8,0
6,5-7,3
1,3-8,6
0,03-0,32
0,12
26-27
7,5-8,0
6,5-7,4
1,1-8,4
0,02-0,33
0,14
26-27
7,5-8,0
6,5-7,4
1,5-7,2
0,02-0,34
0,17
26-27
7,5-8,0
6,5-7,2
1,7-6,8
0,02-0,34
0,20
26-27
7,5-8,0
6,5-7,2
2,0-6,4
0,03-0,34
0,00
26-27
7,5-8,0
6,8-7,4
1,8-6,9
0,01-0,11
0,01
26-27
7,5-8,0
6,5-6,6
1,8-6,9
0,02-0,18
0,03
26-27
7,5-8,0
6,8-7,8
1,9-6,4
0,04-0,19
0,05
26-27
7,5-8,0
6,5-7,2
1,9-5,6
0,04-0,28
25-32 1)
6-9 3)
5-9 3)
10 2)
<2,20 3)
0,00
Suhu (oC) 26-27
0,08
NAB Keterangan:
Parameter
NAB
pH
= Nilai Ambang Batas
1) Menurut Boyd (1982) 2) Menurut Boyd (1988) 3) Menurut Chapman (1992)
49
Pembahasan Dari uji waktu letal dapat diketahui kestabilan niklosamida berdasarkan kelangsungan hidup ikan uji yang akan digunakan sebagai acuan untuk menentukan priode pergantian air pada pengujian berikutnya. Pergantian air dimaksudkan untuk menjaga kestabilan konsentrasi larutan uji selama penelitian berlansung. Hasil uji waktu letal diperoleh bahwa pergantian konsentrasi dilakukan setiap 48 jam sebanyak 100 %. Sistim pergantian air semi statis ini merupakan alternatif yang dapat digunakan untuk meningkatkan akurasi
hasil pengujian toksisitas. Menurut
Kanazawa (1981), metode semi-statis merupakan pendekatan metode baku yaitu metode continuous-flow yang umumnya digunakan untuk mempertahankan konsentrasi bahan kimia agar stabil selama pengujian. Hasil pengamatan pada uji toksisitas akut menunjukkan bahwa gejala klinis akibat keracunan kelihatan pada ikan setelah waktu pemaparan 6 jam terutama pada konsentrasi 0,20 mg/L dan 0,17 mg/L. Gejala yang timbul hampir sama dengan hasil penelitian Schoettger (1970) dimana ikan berenang tidak teratur dengan sesekali menghetak dan kejang-kejang serta mengeluarkan lendir yang berlebihan dari permukan tubuhnya, warna kulit memucat dan frekuensi pergerakkan operkulum menjadi lebih sering tetapi tidak beraturan. Gejala tersebut merupakan tanggapan yang terjadi pada saat zat-zat fisika atau kimia menggangu proses sel atau subsel dalam makhluk hidup sampai suatu batas yang menyebabkan kematian secara langsung (Connel dan Miller, 1995) Kematian ikan mas pada uji toksisitas akut disebabkan oleh masuknya niklosamida ke dalam tubuh ikan melalui penyerapan langsung lewat kulit dan pengambilan dari air melalui membran insang. Hal ini yang menyebabkan terjadinya penghambatan ATP-ase terutama pada mitokondria akson parasinaptik dan sedikit pada endoplasmik retikulum. Menurut Tarumingkeng (1992), penghambatan ATP-ase berkaitan dengan Ca
++
yang menyebabkan peningkatan pelepasan neurotransmiter.
Disamping itu, diduga kematian ikan juga disebabkan niklosamida mampu menimbulkan rangsangan pada sistem syaraf sehingga menyebabkan kejang.
50
Hasil analisa probit moluskisida niklosamida diketahui bahwa nilai LC50 -96 jam terhadap ikan mas sangat rendah yaitu sebesar 0,099 mg/L (0,094 – 0,104) (Tabel 3).
Berdasarkan Komisi Pestisida (1983) dan Koesoemadinata, (2003),
menunjukkan bahwa toksisitas moluskisida niklosamida
terhadap ikan mas
diklasifikasi ke dalam golongan A yaitu pestisida yang memiliki toksisitas sangat tinggi (Tabel 1). Apabila dibandingkan dengan nilai LC50 96 jam niklosamida terhadap ikan nila sebesar 0,8570 mg/L (0,7843-0,9366) (Yosmaniar, 2008) nilainya sedikit berbeda tapi masih masuk kategori yang sama. Selanjutnya EPA (1999) menyatakan bahwa niklosamida sangat toksik terhadap ikan seperti pada ikan rainbow trout ( Oncorhyncus mykiss) dengan nilai LC 50
96 jam sebesar 0,03 mg/L dan ikan lamprey laut (Petromyzon marinus) dengan
nilai LC
50
96 jam yaitu 0,049 mg/L selain itu juga toksik terhadap organisma air
lainnya. Dari hal yang disebutkan di atas membuktikan bahwa pengunaan niklosamida sangat berbahaya bagi ikan. Dari Gambar 3 memperlihatkan bahwa sampai minggu ke 4 belum terlihat pengaruh moluskisida niklosamida terhadap penurunan laju pertumbuhan spesifik ikan mas untuk semua perlakuan dan pengaruhnya mulai terlihat terhadap perlakuan pada minggu ke 8 untuk konsentrasi 0,05 mg/L. Selanjutnya pada minggu ke 12 penurunan laju pertumbuhan spesifik ikan mas terlihat nyata pada konsentrasi 0,03 mg/L dan 0,05 mg/L. Pengaruh subletal moluskisida niklosamida mulai pada konsentrasi 0,03 mg/L dapat menurunkan laju pertumbuhan spesifik ikan mas yang merupakan tekanan lingkungan bagi ikan mas dan dapat menghambat pertumbuhan meskipun selama penelitian berjalan tidak terdapat mortalitas. Schmittou (1991) bahwa tekanan lingkungan yang disebabkan oleh pengaruh pestisida yang bersifat subletal juga merupakan faktor eksternal yang akan menyebabkan direduksinya pertumbuhan ikan. Tereduksinya pertumbuhan ikan mas terjadi karena: (1) niklosamida yang terakumulasi menyebabkan organ tubuh ikan mengalami gangguan sehingga mengurangi nafsu makan , (2) pemanfaatan energi yang berasal dari makanan lebih banyak digunakan untuk mempertahankan diri dari tekanan lingkungan serta
51
mengganti bagian sel yang rusak akibat kontaminasi dengan niklosamida. Pengaruh bioakumulasi insektisida endosulfan selama 12 minggu pemaparan pada benih ikan mas mereduksi pertumbuhan (Taufik, 2005). Darah merupakan bagian penting dari sistem transpor dan merupakan faktor internal yang secara tidak langsung berpengaruh terhadap pertumbuhan, Karena darah berfungsi untuk mengedarkan zat makanan hasil pencernaan dan oksigen ke sel-sel tubuh serta membawa hormon dan enzim ke organ yang memerlukannya. Darah ikan tersusun dari sel-sel yang tersuspensi dalam plasma dan diedarkan keseluruh jaringan tubuh melalui sistem tertutup. Cairan darah ikan antara lain mengandung nutrient dan sisa metabolisme. Sel dan cairan darah mempunyai peran fisiologis yang sangat penting. Beberapa parameter yang dapat memperlihatkankan perubahan pada darah adalah kadar hematokrit (Ht), kadar hemoglobin (Hb), jumlah sel darah merah (eritrosit) dan jumlah sel darah putih leukosit) (Lagler et al., 1977) Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap kadar hematokrit ikan mas pada konsentrasi 0,01 mg/L (41,3%) atau lebih dapat meningkatkan prosentase hematokrit darah ikan mas. Penggunaan niklosamida setelah 1 jam (minggu ke 0) dan minggu ke 4 pada Gambar 6 menunjukkan konsentrasi 0,01 dan 0,00 mg/L belum berpengaruh terhadap kadar hematokrit apabila dibandingkan dengan konsentrasi 0,03 dan 0,05 mg/L. Pada akhir penelitian pengaruh pemaparan niklosamida menunjukkan peningkatan terhadap hematokrit. Hematokrit dalam darah ikan mas pada kondisi normal adalah sebanyak 27,1% (Peter dan Cech, 1990 dalam Affandi dan Tang, 2002). Meningkatnya kadar hematokrit menunjukkan ikan dalam keadaan stress (Wedemeyer & Yasutake, 1977 dan Anderson & Siwick, 1983). Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap kadar hemoglobin darah ikan mas nyata terhadap peningkatan kadar hemoglobin dibanding dengan konsentrasi 0,00 mg/L (kontrol). Pada konsentrasi niklosamida 0,01 mg/L (6,3%) dan 0,03 mg/L (7,0%) tidak berpengaruh nyata (P>0,05) terhadap peningkatan kadar hemoglobin. Hal ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,01 mg/L dapat meningkatkan kadar hemoglobin dalam darah ikan ma).
52
Angka (1983), kadar hemoglobin pada ikan mas dewasa adalah 8,61 ± 0,43 - 10,86 ± 48 (gram per 100 cc volume darah), sedangkan menurut Peter dan Cech, (1990) dalam Affandi dan Tang (2002) kadar Hb dalam darah ikan mas 6,40. Penggunaan niklosamida setelah 1 jam (minggu ke 0) pada Gambar 7 pada perlakuan konsentrasi niklosamida 0,01; 0,03 dan 0,05 mg/L memberikan berpengaruh yang relatif sama terhadap hemoglobin dibanding kontrol. Pada akhir penelitian, konsentrasi niklosamida 0,01 dan 0,03mg/L memberikan pengaruh yang hampir sama terhadap hemoglobin. Blaxhall (1972), tingginya nilai hemoglobin berkaitan dengan kondisi ikan yang stres, begitu juga dengan nilai eritrosit dan hematokrit yang tinggi menunjukkan dalam kondisi stres (Wedemeyer dan Yasutake, 1977). Dampak dari peningkatan nilai nilai hematokrit, hemoglobin dan ertirosit akibat terpapar niklosamida dapat dilihat dari hasil histologi yang menunjukkan pecahnya pembuluh darah pada hati dan ginjal yaitu untuk konsentrasi 0,01; 0,03; 0,05 mg/L sudah terlihat pada minggu ke 4 dan berlanjut sampai minggu ke 12 yang akhirnya mengakibatkan kematian sel. Peningkatan kadar hematokrit dan hemoglobin eritosit dalam darah ikan mas dengan bertambahnya konsentrasi (Tabel 5) dipengaruhi oleh kontaminasi, absorbsi dan akumulasi moluskisida niklosamida yang menyebabkan stres pada ikan mas sehingga hormon-hormon stres seperti kortisol dan epinephrine masuk kedalam peredaran darah dan menyebabkan kontraksi limpa meningkat. Fungsi utama sel darah merah adalah dalam pengangkutan oksigen. El-Deen dan Rongers (1992) peningkatan kontraksi limpa akan mengakibatkan terjadi pelepasan sel-sel darah merah sehingga nilai hematokrit, hemoglobin dan eritosit juga turut meningkat. Dengan meningkatnya nilai hematokrit, hemagolobin dan eritosit maka ikan akan memaksimalkan pengikatan oksigen yang masuk ke dalam jaringan darah Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap jumlah eritosit darah ikan mas secara statistik menunjukkan bahwa konsentrasi 0,03mg/L dan 0,05 mg/L perpengaruh nyata (P< 0,05) terhadap peningkatan jumlah eritrosit
53
dibanding dengan konsentrasi niklosamida 0,01 mg/L dan 0,00 mg/L (kontrol). Hal ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,03 mg/L dapat meningkatkan jumlah eritosit dalam darah ikan mas. Dari Gambar 4 dapat dilihat bahwa jumlah eritrosit setelah 1 jam ( 0 minggu) setelah pemaparan niklosamida relatif sama. Pada akhir penelitian konsentrasi niklosmida 0,05 menunjukkan peningkatan jumlah eritrosit yang paling besar diantara perlakuan. jumlah sel darah merah per 1cc darah ikan mas (1,61 ± 0,06) x 106 sel sampai (2,04 ± 0,09) x 106 sel. Eritrosit yang terdapat dalam darah ikan mas dalam kondisi normal adalah 1,43 sel x 106/mm3 (Peter dan Cech, 1990 dalam Affandi dan Tang 2002). Menurut Angka (1990), jumlah sel leukosit dalam 1cc darah merah ikan berkisar antara (14,70 ± 0,32) x 103 sel – (19,35 ± 0,42) x 103 sel. Affandi dan Tang (2002) Bertambahnya jumlah eritrosit diduga berkaitan dengan kerusakan sel-sel darah akibat pengaruh radikal bebas, sebab menurut Wijaya (1976) dalam Yuda (1999) suatu bahan toksik atau racun dapat menyebabkan kerusakan jaringan yang pada gilirannya dapat menimulkan pelepasan protein heme, yang akan bereaksi dengan peroksidase dan melepaskan ion Fe++. Dengan adanya ion tersebut akan terjadi reaksi fenton dan menghasilkan radikal bebas (OH) yang sangat reaktif. Akibat akhir dari reaksi ini dapat mengakibatkan kerusakan membran sel yang parah dan membahayakan kehidupan sel. Jumlah leukosit ikan mas berkurang secara nyata dibanding dengan kontrol seiring peningkatan konsentrasi subletal niklosamida. Pengurangan jumlah leukosit sebagai respon terhadap stres yang merupakan karakteristik semua jenis vertebrata (Heat, 1987). Respon tersebut dipengaruhi oleh hormon kortikosteroid dan bersifat non spesifk, sebagai akibat adanya suatu stressor baik yang berasal dari dalam maupun dari luar faktor lingkungan Bertambahnya jumlah eritrosit diduga berkaitan dengan kerusakan sel-sel darah akibat pengaruh radikal bebas, sebab menurut Wijaya (1976) dalam Yudha (1999) suatu bahan toksik atau racun dapat menyebabkan kerusakan jaringan yang pada gilirannya dapat menimulkan pelepasan protein heme, yang akan bereaksi
54
dengan peroksidase dan melepaskan ion Fe++. Dengan adanya ion tersebut akan terjadi reaksi fenton dan menghasilkan radikal bebas (OH) yang sangat reaktif. Akibat akhir dari reaksi ini dapat mengakibatkan kerusakan membran sel yang parah dan membahayakan kehidupan sel. Pengaruh subletal dari perlakuan moluskisida niklosamida terhadap jumlah leukosit darah ikan mas secara statistik menunjukkan bahwa konsentrasi 0,03 (4,40 x 106)dan 0,05 mg/L perpengaruh nyata (P< 0,05) terhadap penurunan jumlah leukosit dibanding
dengan konsentrasi 0,00 mg/L (kontrol) dan 0,01 mg/L. Hal ini
menunjukkan bahwa pada konsentrasi subletal moluskisida niklosamida 0,03 mg/L dapat menurunkan jumlah leukosit dalam darah ikan mas. Menurut Angka (1990), jumlah sel leukosit dalam 1cc darah merah ikan berkisar antara (14,70 ± 0,32) x 103 sel – (19,35 ± 0,42) x 103 sel. Affandi dan Tang (2002) Dari Gambar 9 dapat dilihat bahwa pada penggunaan niklosamida setelah 1 jam (minggu ke 0) jumlah leukosit relatif sama, selanjutnya pada minggu ke 4 juga hampir sama, selanjutnya pada minggu ke 12 pengaruh perlakuan niklosamida untuk konsentrasi 0,03 dan 0,05 mg/L menunjukkan penurunan yang relatif sama. Pengurangan jumlah leukosit sebagai respon terhadap stres yang meupakan karakteristik semua jenis vertebrata (Heat, 1987). Dimana respon tersebut dipengaruhi oleh hormon kortikosteroid dan bersifat non spesifik, sebagai akibat adanya suatu stressor baik yang berasal dari dalam maupun dari luar faktor lingkungan. Secara umum pengaruh subletal pemaparan moluskisida niklosamida selama 12 minggu terhadap hematologi menunjukkan peningkatan secara nyata pada konsentrasi niklosamida 0,01 mg/L untuk kadar hematokrit dan kadar hemoglobin dan konsentrasi niklosamida 0,03 untuk jumlah eritrosit pada ikan mas. Sedangkan pengaruh
perlakuan moluskisida niklosamida pada konsentrasi 0,03 dapat
menurunkan jumlah leukosit secara nyata pada ikan mas. Sedangkan pengaruh subletal insektisida endosulfan selama 6 minggu pemaparan tidak berpengaruh terhadap kondisi hematologi (hematokrit, hemoglobin, eritrosit dan leukosit) pada ikan lele (Yudha, 1999).
55
Insang mudah rusak karena langsung kontak dengan air.
Letak insang,
struktur dan mekanisme kontak dengan lingkungan menjadikan insang sangat rentan terhadap perubahan kondisi lingkungan (Irianto, 2005). Kerusakan struktur organ insang yang ringan akan mengganggu seperti kesulitan bernafas. Berkaitan dengan hal ini dapat dilihat dari hasil histopatologi dimana pada konsentrasi 0,01 mg/L niklosamida setelah minggu ke 8 pada insang terjadi hiperplasia dan kematian sel (nekrosis), selanjutnya pada hati dan ginjal terdapat perdarahan (haemorage) dan kematian sel (nekrosis) pada miggu ke 4 Insang merupakan organ respirasi utama pada ikan, epitel insang merupakan bagian utama untuk pertukaran gas. Insang ikan mas yang terpapar niklosamida akan menghalangi penerimaan oksigen. Perubahan yang umum terjadi pada insang ikan mas adalah fusi, hipertropi, hiperplasia, dan nekrosis sel-sel epitel lamela insang seperti pada Gambar 6 kerusakan struktur yang sangat ringan sekalipun dapat menganggu osmoregulasi pada ikan mas. Robert (2001), hiperplasia pada insang terjadi pada tingkat iritasi yang lebih rendah dan biasanya disertai peningkatan jumlah sel-sel mukus di dasar lamela dan mengakibatkan fusi dari lamela. Ruang interlamela yang merupakan saluran air dan ruang produksi mukus dapat tersumbat akibat hiperplasia Hiperplasia mengakibatkan penebalan jaringan epitelium yang terletak di ujung filamen. Hiperplasia dan fusi merupakan hal yang umum akibat terpapar oleh pestisida (termasuk niklosmida). Hal ini biasanya memperlihatkan pemishan antara sel epitelium dan sistim yang mendasari sel tiang yang dapat mengarah kepada hancurnya keutuhan dari struktur lamela sekunder dan dapat menyebabkan peningkatan sel klorid. (Olurin et al, 2006). Nekrosis ditandai oleh infiltrasi sel-sel granuler eosinofilik dan kondisi ini dapat mengurangi efisiensi difusi gas (Hoole et al, 2001) Hati merupakan organ yang mudah mengalami kerusakan terkena polutan karena hati menerima 89 % suplai darah dari vena porta yang mengalirkan darah dari sistem gastrointestinal. Hal ini tercermin dari histopatologi hati dimana kematian sel (nekrosis) pada perlakuan niklosamida 0,01 mg/L pada minggu ke 8, perlakuan 0,03 dan 0,05 mg/L pada minggu ke 4.
56
Ginjal ikan menerima sebagian besar darah postbranchial dan luka yang terjadi pada organ ginjal sebagai indikator polusi lingkungan. Selanjutnya hasil histopatologi pada ginjal ditemukan nekrosis terjadi pada semua perlakuan konsentrasi niklosamida (0,01; 0,03; 0,05mg/L) mulai mingu ke 4, ke 8 dan ke 12. Suhu air sangat penting karena tidak hanya mempengaruhi aktivitas metabolik dan tingkah laku organisme dan pemaparan polutan (bahan pencemar). Secara umum toksisitas dari polutan akan meningkat sejalan dengan peningkatan suhu air (Mason, 1992). Selama penelitian dilaksanakan, baik pada uji akut maupun uji subletal, suhu air relatif stabil yang berkisar antara 26-270C (Tabel 6). Nilai ini masuk dalam kisaran Nilai Ambang Batas (NAB) untuk kehidupan ikan mas. Kestabilan suhu air pada penelitian ini juga memenuhi kriteria yang ditetapkan oleh Komisi Pestisida (1983) yaitu fluktuasinya tidak lebih dari 20C selama penelitian. Nilai pH akan berpengaruh terhadap degradasi pestisida, yaitu laju degradasi akan lambat pada pH di bawah 6,0. Nilai pH air selama penelitian adalah antara 7,58,0 (Tabel 6). Kondisi ini sangat mendukung karena menurut pH air yang baik untuk budidaya ikan pada kolam air tenang adalah sekitar 7,0-8,8. Konsentrasi oksigen terlarut pada uji akut berkisar 6,5-7,4 mg/l, sedangkan pada uji subletal sebesar 6,5-7,8 mg/l (Tabel 6). Konsentrasi oksigen terlarut seperti ini menurut Chapman (1992) termasuk kedalam kisaran yang baik bagi pemeliharaan ikan. Sejumlah polutan akan menjadi lebih toksik pada konsentrasi oksigen yang rendah karena pada kondisi tersebut proses respirasi akan meningkat sehingga racun terekspos terhadap tubuh ikan juga semakin besar (Mason, 1992). Meningkat konsentrasi CO2 dalam air yang dapat menyebabkan stress pada ikan. Kondisi stress dapat menurunkan resistensi ikan terhadap pestisida, dengan demikian akan mempengaruhi toksisitas endosulfan terhadap ikan (Arianti, 2002). Oleh karena itu dalam pengujian toksisitas terhadap organisme ikan menurut Komisi Pestisida (1983) kadar CO2 bebas dalam air harus < 10 ppm.
Kriteria tersebut
terpenuhi oleh kondisi air selama penelitian ini dimana kandungan CO2 bebas dalam air berkisar antara 1,0-8,9 mg/l (Tabel 6).
57
Kandungan amonia dalam air pada uji akut berkisar antara 0,02-0,34 mg/l sedangkan pada uji subletal berkisar antara 0,01-0,28 mg/l (Tabel 6). Kedua nilai kisaran tersebut masih jauh dibawah NAB untuk perikanan yaitu sebesar <2,20 mg/l (Chapman, 1992). Kadar ammonia diatas NAB dapat mereduksi masukan oksigen yang disebabkan oleh rusaknya insang, menambah energi untuk keperluan detoksikasi, mengganggu osmoregulasi dan mengakibatkan kerusakan fisik pada jaringan (Boyd, 1990).
58
KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan. Dari penelitian yang sudah dilakukan dapat disimpulkan, bahwa: 1. Nilai konsentrasi ambang bawah moluskisida niklosamida (LC0-48 jam) sebesar 0,06 mg/L dan nilai ambang atas (L100-24 jam) sebesar 0,25 mg/l. 2. Nilai waktu letal moluskisida niklosamida di dalam air yaitu selama 48 jam pada konsentrasi 0,25 mg/L. 3. Nilai LC 50- 24 ; 48; 72; dan 96 jam moluskisida niklosamida terhadap ikan mas adalah 0,195 0,174 – 0,220); 0,152 (0,137 – 0,169);0,117 (0,106 – 0,128); dan 0,099 (0,094 – 0,104) mg/L. Niklosamida kategori sangat berbahaya (golongan A) 4. Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida berpengaruh nyata terhadap kondisi hematologi, yaitu peningkatan hematokrit dan hemoglobin pada konsentrasi 0.01 mg/L dan jumlah eritrosit 0,03 mg/L, dan penurunan leukosit pada konsentrasi 0.03 mg/L 5. Tingkat konsentrasi subletal
molukisida niklosamida mengakibatkan
kerusakan pada insang, hati dan ginjal pada konsentrasi 0,01 mg/L 6. Konsentrasi subletal moluskisida niklosamida berpengaruh nyata terhadap penurunan pertumbuhan terjadi mulai pada konsentrasi 0,03 mg/L
Saran Penelitian yang berkaitan penggunaan moluskisida niklosamida terhadap ikan masih terbatas untuk itu perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang berapa konsentrasi niklosamida di perairan dan untuk aplikasi niklosamida di lapangan konsentrasi dibawah 0,01 mg/L
59
DAFTAR PUSTAKA Abel PD. 1989. Water Pollution Biology. Chichester Ellis Horwood Limited.. 231 hal Affandi R, Tang UM. 2002. Fisiologi hewan air. Unri Press. Pekanbaru, Riau, Indonesia. 217 h. Anderson DP, Siwicki AK. 1993. Basic hematology and serology for fidh health program. Paper presented in second symposium on diseases in asian aqauaculture “Aquatc Animal Healt and the Enviroment” Phuket Thailand 25-29 th Oktober. Oktober 1993;25-29 Angka SL. 1990. The pathology of walking catfish, Clarian batrachus, infected intraperitoneally with Aeromonas hydrophila. EFS. APHA, AWWA, WPCF. 2005. Toxicity test method for aquatic organism Standard metod for the examination of water and wastewater. Washington DC Sixteen edition. American public health association.. P 689-726 Arianti FD. 2002. Toksisitas insektisida endosulfan terhadap ikan nila (Oreochromis niloticus) dalam lingkungan air tawar. [Tesis]. Bogor. Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. 87 hal Aziz KA. 1989. Pendugaan stok populasi ikan tropis. Institut Pertanian Bogor. 88 hal. Blaxall PC. 1972. Hematological assessment of the health of fresh water fish, A Riview of selected literature. Journal Fish Biology 4: 593 - 604 Bond CE. 1979. Biology of fish. W.B. Philadelphia Saunders Company.. 512 hal. Boyd, CE. 1982. Water quality management in aquaculture and fisheries science. Amsterdam. Elsevier Scientific Publishing Company. 312 hal. Boyd, CE. 1988. Water quality in warmwater fish pond. Alabama. Faurth Printing. Auburn Aniversity Agricultural Experiment Station. USA. 359 hal. Boyd CE. 1990. Water quality in pond for aquaculture. Alabama. Brimingham Publishing Co., 482 hal. Busvine JR.1971. A critical review of techniques for testing insecticides. Cammon wealth Agricultural Boureou. 345 hal Chapman D. 1992 Waterquality Assesment. A guide to the use of biota, sediments and water in environmental monitoring. London. Chapman & Hall.585 hal
60
Connel DW, Miller GJ. 1995. Kimia dan ekotoksikologi pencemaran. Jakarta Penerbit Univ. Indonesia,. ha1331-341. Cuong DN. 2002. Golden apple snail (GAS) in Vietnam:introduction, impact and Management. In: Wada T,Yusa Y, Joshi RC, eds. Proceedings of the Meeting of the Special Working Group on the Golden Apple Snail(Pomacea spp.) at the Seventh International Congress on Medical and Applied Malacology, Los Baños, Laguna,SEAMEO Regional Center for Graduate Study and Research in Agriculture. Los Baños, Laguna: SEAMEORegional Center for Graduate Study and Research in Agriculture. p 49-54. Direktorat Perlindungan Tanaman Pangan. 2008. Luas tambah serangan keong mas 1997 – 2007. Data belum dipublikasi. Jakarta. Direktorat Perlindungan Tanaman Pangan. Departemen pertanian Ditjen Perikanan Budidaya. 2007. Statistik Perikanan Budidaya Indonesia No 8.tahun 2006. Jakarta. Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya. Departemen Kelautan dan Perikanan. 131 hal Edwards CA. 1976. Persistent pesticides in the environment. Ohio. CRC Press. 170 hal. Effendi HI. 1979. Metode biologi perikanan. Bogor.Yayasan Dewi Sri. 112 hal. Effendi H. 2000). Telaah kualitas air bagi pengelola sumberdaya dan lingkungan. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Bogor. Institut Pertanian Bogor. 257 hal El-Deen MAS, Rogers WA. 1992. Accute Toxicity and some Hematological Changes in Grasscarp Expossed to Diquat. J. Aquatic Animal Healt 4: 277280 EPA1999. Registration Eligibility Decision (RED) 3- Trifluoro- methyl 4- nitro
phenol and Agency.
niclosamide. United States Enviromenttal Protection
Heath AG. 1987. Water pollution and fish physiology. Florida. CRC Ress Inc. Boca Raton,. 245 hal. Hinton D E, Laurtn DJ. 1990. Integrative Histopathological Approaches to Detecting Effects of Environmental Stressors on Fishes. American Fisheries Society Symposium 8:51-66 Hoole D, Bucke D, Burgerss, Wellby. 2001. Diseases of carp ad other cyprinid Fishes. Blackwell Science. USA. 264 pp Irianto, A. 2005. Patologi ikan Teleostei. Jokjakarta Gajah Mada Press. 253 hal
61
IRRI
2004. Keong mas. Informasi ringkas http://www.knowledgebank (30 Januari2008)
Teknologi
Padi.
Kanazawa J. 1981. Bioconcentration potential of pesticides aquatic organism. Japan Pesticides Information. No. 39:12-16 Koesoemadinata S. 2003. Metode standar pengujian toksisitas pestisida terhadap ikan. Jakarta.Komisi Pestisida. Direktorat Jenderal Bina Sarana Pertanian. Departemen Pertanian. 75 hal Komisi Pestisida. 1983. Pedoman umum pengujian laboratorium toksisitas letal pestisida pada ikan untuk keperluan pendaftaran. Jakarta. Departemen Pertanian. 18 hal. Kurniawati N, Hidayat W, Suharto H. 2008. Daya tetas dan daya hidup keong mas pada perlakuan pestisida nabati dan insektisida.Prosiding Seminar Apresiasi Hasil Padi Menunjang P2BN. Buku 1. Sukamandi Balai Besar Penelitian Tanaman Padi. Badan Litbang Pertanian.. hal 393-402 Kusno, H. 1995. Pengantar toksikologi lingkungan. Dirjen Pendidikan Tinggi. Jakarta. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. 133 hal. Lagler, K.F., J.E. Bardach, R.R. Miller dan D.R. Passino. 1977. Ichtyology. New York. John Willey and Sons Inc. 506 hal. Livingstone, RJ. 1977. Review of current literature concerning the accute and chronic effect of pesticides on aquatic organism. CRC Crit. Rev. Environ. Control. Lodang, H. 1994. Gambaran penggunaan pestisida pada pertanian (Kasus di Kecamatan Baraka, Kab. Enrekang). Lingkungan dan Pembangunan. Jurnal Pusat Studi Lingkungan Perguruan Tinggi Seluruh Indonesia. Vol. 14(2): 8998. Lucky Z. 1977. Method for the diagnosis of fish diseases. New York. American Publishing Co. Mason, C.F. 1992. Biologi of fresh water pollution. London. Long Man Inc. 250 hal Moyle PB, Cech JJ. 1988. Fishes and introduction to ichthyology. New Jersey. Prentice Hall, Englewood Cliffs, 559 hal. Olurin KB, Olojo EAA, Mbaka GO , Akindele AT. 2006. HIstophatological responses of the gill and liver tissue of clarias gariepnus fingerlings to the herbicide, glyphosate, AfricanJournal of Biotechnology. Academic Journals 5 (24): 2480-2487 pp. Ricker WE. 1975. Computation and interpretation of biological statistic of fish population. Ull. Fish. Res. Board Can, No. 119-382 hal.
62
Robert RJ. 2001. Fish Pathologi. W. B Saunders, USA. Robinson J. 1973. Dynamic of pesticides residues in the enviroment. Dalam c.A. Edwards (ed). Environmental Pollution by Pesticides. London. Plenum. Press, 459 hal. Schmittou HR. 1991. Budidaya karamba, suatu metode ikan di Indonesia. Auburn University. Schoettger RA.1970. Aquatic toxicology of thiodan inseveral fish and aquatic invertebrates, United astates Developmen. Washington DC United States Development of the Interior fish and Wildlife service, Bureau of sport fiheries and wildlife.. 31 hal Schreier TM, DausonVK, Choi|Y, Spanjer NJ, Boogaard MA. 2000. Determinan of niclosamide residues in Rainbow Trout ( Oncorhyncus mykiss) and Cannel Catfish (Ictalurus punctatus) fillet tissue by high performance liquid chromatography.J. Agric. Food Chem. 48,2212-2215 Sekretariat Jenderal Deptan. 2007. Pestisida pertanian dan kehutanan. Pusat Perizinan dan Investasi. Jakarta. Sekretariat Jenderal departemen Pertanian.574 hal Steel RGD, Torrie JH. 1989. Prinsip dan prosedur statistika suatu pendekatan biometrik. Jakarta. PT. Gramedia,. 748 hal. Tarumingkeng RC. 1992. Insektisida: sifat, mekanisme kerja dan dampak penggunaannya. Jakarta. Universitas Kristen Krida Wacana..235 hal. Taufik I. 2005 Pengaruh lanjut bioakumulais insektisida enosulfan terhadap pertumbuhan dan kondisi hematologis ikan mas (Cyprinus carpio). [tesis]. Bogor. Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. 60 hal. Wada T. 2004. Strategies for controlling the applesnail Pomacea canaliculata Lamarck) (Gastropoda:Ampullariidae) in Japanese direct-sown paddy fields.JARQ 38:75-80. Wallace KB. 1982. Specie –selective toxicity of organophosphorus insecticides: a pharmacodinamic phenomenon. In organophosphate, Chemistry, fate and effect. New York. Academic Press. 79-105 Wedemeyer GA, Yasutake W.T. 1977. Clinical method for the assessment of the effect on environmental stress on fish healt. Techniccal paper of the U.S. Fish and wildlife sevice. US depert. Of the interior. Fish and Wildlife Service American 89: 1-17 Worthing. CR. 1987. The pesticide manual. Eight edition. Published by the British Crop Protection Council
63
Yosmaniar. 2008. Toksisitas akut moluskisida niklosmida pada benih ikan nila (Oreochromis niloticus). Teknologi Budidaya Perikanan Sosial Ekonomi Kelautan Perikanan. Jakarta.Prosiding Seminar Nasional Perikanan 2008 Sekolah Tinggi Perikanan Hal 423-429 Yudha LG. 1999. Toksisitas akut dan pengaruh subletal endosulfan terhadap pertumbuhan dan kondisi hematologis ikan lele dumbo (Clarian gariepinus). [Tesis]. Bogor. Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. 60 hal.
64
Lampiran 1. Kelangsungan hidup (%) ikan mas padauji toksisitas akut niklosamida (jam) Waktu Pemaparan (Jam)
Perlakuan No 1
2
3
4
5
6
7
Ulangan Kontrol 1 2 3
0
2
4
6
8
10
12
24
36
48
60
72
84
96
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
0,08 mg/L 1
100
100
100
100
100
100
100
100
100
90
80
80
80
80
2 3
100 100
100 100
100 100
100 100
100 100
100 100
100 100
100 100
100 100
100 90
80 80
90 80
80 70
80 70
0,10 mg/L 1 2 3
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 90 90
90 80 80
80 70 80
70 60 70
50 50 60
50 50 50
0,12mg/L 1 2 3
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
90 80 90
80 70 80
60 60 60
50 60 60
40 50 40
30 40 40
30 30 30
0,14 mg/L 1 2 3
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
80 90 90
80 80 90
80 80 70
70 80 70
50 50 50
40 30 40
30 20 30
20 20 20
20 10 20
0,17 mg/L 1 2 3
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
90 80 80
80 80 80
80 70 70
80 70 70
60 60 50
50 40 40
30 40 30
20 30 20
0 10 0
0 0 0
0,20 mg/L 1 2 3
100 100 100
100 100 100
100 100 100
100 100 100
80 80 80
70 80 70
60 60 70
60 60 60
40 50 40
30 40 30
20 20 20
10 10 20
0 0 0
0 0 0
60 60 60
65
Lampiran 2. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC50-24jam Moluskisida niklosamida terhadap juvenile ikan mas Konsentrasi (mg/L)
Jumlah ikan yang di uji (ekor)
Jumlah ikan yang mati (ekor)
Log X
Probit Y
0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 0,20
30 30 30 30 30 30
0 2 4 7 8 12
1,903 2,000 2,079 2,146 2,230 2,301
1,601 3,498 3,889 4,272 4,378 4,748
Perkiraan garis probit Chi2 (DF= 4;CL = 95%) Chi2 hitung Nilai nominal LC 50 Limit kepercayaan
Y =-10,959 + 6,962 X = 9,456 = 8,599 = 0,195 = 0,174 – 0,220
Lampiran 3. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC50-48jam Moluskisida niklosamida terhadap juvenile ikan mas Konsentrasi (mg/L)
Jumlah ikan yang di uji (ekor)
Jumlah ikan yang mati (ekor)
Log X
Probit Y
0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 0,20
30 30 30 30 30 30
2 7 10 15 17 20
1,903 2,000 2,079 2,146 2,230 2,301
3,498 4,272 4,570 5,001 5,167 5,431
Perkiraan garis probit Chi2 (DF= 4;CL = 95%) Chi2 hitung Nilai nominal LC 50 Limit kepercayaan
Y =-5,220 + 4,681 X = 9,456 = 1,513 = 0,152 = 0,137 – 0,169
66
Lampiran 4. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC50-72jam Moluskisida niklosamida terhadap juvenile ikan mas Konsentrasi (mg/L)
Jumlah ikan yang di uji (ekor)
Jumlah ikan yang mati (ekor)
Log X
Probit Y
0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 0,20
30 30 30 30 30 30
5 12 15 22 23 26
1,903 2,000 2,079 2,146 2,230 2,301
4,033 4,748 5,001 5,623 5,728 6,111
Perkiraan garis probit Chi2 (DF= 4;CL = 95%) Chi2 hitung Nilai nominal LC 50 Limit kepercayaan
Y =-5,524 + 5,086 X = 9,456 = 1,493 = 0,117 = 0,106 – 0,128
Lampiran 5. Analisa probit (Wallace, 1982) untuk menentukan LC50-96jam Moluskisida niklosamida terhadap juvenile ikan mas Konsentrasi (mg/L)
Jumlah ikan yang di uji (ekor)
Jumlah ikan yang mati (ekor)
Log X
Probit Y
0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 0,20
30 30 30 30 30 30
7 15 21 25 30 30
1,903 2,000 2,079 2,146 2,230 2,301
4,272 5,001 5,525 5,968 8,500 8,500
Perkiraan garis probit Chi2 (DF= 4;CL = 95%) Chi2 hitung Nilai nominal LC 50 Limit kepercayaan
Y =-18,274 + 11,644 X = 9,456 = 17,143 = 0,099 = 0,094 – 0,104
67
Lampiran 6. Bobot rata-rata juvenile ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu
Konsentrasi mg/L
0,00
0,01
0,03
0,05
Minggu ke-
Ulangan 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev
0 2.95 2.91 2.89 2.93 2.92 0.02 2.91 2.89 2.95 2.95 2.92 0.03 2.96 2.91 2.90 2.93 2.92 0.02 2.94 2.92 2.90 2.91 2.92 0.02
4 5.15 5.19 5.18 5.12 5.16 0.03 5.15 5.19 4.95 4.97 5.05 0.12 5.21 5.05 5.14 4.80 5.05 0.17 5.11 5.31 4.91 5.08 5.10 0.16
8 8.57 8.33 8.69 8.14 8.43 0.24 8.24 8.28 8.24 8.23 8.25 0.02 8.19 8.25 8.21 8.04 8.17 0.09 7.18 7.19 7.27 7.12 7.19 0.06
12 11.95 12.83 11.88 12.97 12.41 0.57 11.13 12.28 11.27 10.99 11.41 0.57 9.99 9.95 9.95 9.01 9.75 0.48 8.67 8.32 8.35 8.46 8.45 0.16
68
Lampiran 7. Bobot rata-rata juvenil ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu (Transformasi logaritmik natural) Konsentrasi mg/L
0,00
0,01
0,03
0,05
Minggu ke-
Ulangan 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev
0 1.0818 1.0681 1.0612 1.0750 1.0715 0.0088 1.0681 1.0612 1.0818 1.0818 1.0732 0.0102 1.0851 1.0681 1.0647 1.0750 1.0732 0.0090 1.0784 1.0715 1.0647 1.0681 1.0706 0.0058
4 1.6390 1.6473 1.6448 1.6331 1.6410 0.0063 1.6390 1.6467 1.5994 1.6034 1.6221 0.0242 1.6506 1.6194 1.6370 1.5686 1.6189 0.0359 1.6312 1.6696 1.5913 1.6253 1.6293 0.0321
8 2.1483 2.1199 2.1622 2.0968 2.1318 0.0292 2.1090 2.1138 2.1090 2.1078 2.1099 0.0027 2.1029 2.1102 2.1053 2.0844 2.1008 0.0111 1.9713 1.9727 1.9837 1.9629 1.9726 0.0085
12 2.4807 2.5518 2.4748 2.5626 2.5175 0.0461 2.4096 2.5080 2.4221 2.3970 2.4342 0.0503 2.3016 2.2976 2.2976 2.1983 2.4413 0.3541 2.1599 2.1187 2.1223 2.1353 2.1340 0.0186
69
Lampiran 8. Laju pertumbuhan spesifik (%) juvenil ikan mas yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu Minggu ke Konsentrasi mg/L
0.00
0.01
0.03
0.05
Ulangan
4
8
12
1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev
1.9900 2.0686 2.0843 1.9932 2.0340 0.0494 2.0389 2.0911 1.8486 1.8628 1.9603 0.1228 2.0196 1.9689 2.0439 1.7628 1.9488 0.1278 1.9743 2.1361 1.8686 1.9900 1.9922 0.1100
1.8189 1.6878 1.8478 1.6561 1.7526 0.0948 1.6786 1.6682 1.82 1.8014 1.7429 0.0797 1.6153 1.7528 1.6725 1.8421 1.7207 0.0986 1.2146 1.0825 1.4014 1.2057 1.2260 0.1315
1.1871 1.5425 1.1164 1.6636 1.3774 0.2668 1.0736 1.4078 1.1182 1.0328 1.1581 0.1701 0.7096 0.6693 0.6868 0.4067 0.6181 0.1419 0.6450 0.5214 0.4950 0.6161 0.5694 0.0724
70
Lampiran 9. Kadar hematokrit juvenil ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu Minggu ke Konsentrasi mg/L
0.00
0.01
0.03
0.05
Ulangan
0
4
12
1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev 1 2 3 4 Rataan St. Dev
12.7 13.7 136 13.0 13.0 3.6 12.7 14.3 14.7 11.7 13.3 1.3 22.2 19.5 16.6 25.0 20.8 3.6 21.2 25.2 25.8 25.8 24.5 2.2
16.6 14.2 19.5 18.4
38.3 25.5 21.1 25.0 27.4 7.4
17.1
2.3 16.0 19.1 19.5 18.2 18.2 1.5 22.5 26.0 17.7 26.1 23.0 3.9 27.5 32.8 36.8 27.9 31.2 4.4
45.1
37.6 43.2 39.6 41.3 3.3 47.1 50.0 42.6 39.3 44.7 4.7 45.4 56.1 55.3 48.3 51.3 5.2
71
Lampiran 10. Kadar ghemoglobin juvenil ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu Konsentrasi mg/L
0.00
0.01
0.03
0.05
Ulangan 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev 1 2 3 4 Rataan St. dev
0 4.20 4.10 3.90 4.20 4.10 0.14 4.60 6.60 5.00 4.00 5.00 1.10 5.40 5.50 5.80 4.00 5.20 0.80 5.40 5.00 5.20 5.60 5.30 0.26
Minggu ke4 8 4.60 5.00 4.60 4.90 4.60 5.40 4.50 4.50 4.60 4.90 0.52 0.37 4.80 5.80 6.80 5.40 4.40 5.80 5.20 6.60 5.30 5.90 4.58 0.50 6.80 7.60 5.90 6.60 6.80 7.00 6.20 5.90 6.40 6.80 0.40 0.71 6.40 7.80 6.80 7.60 7.20 7.30 7.40 7.80 6.90 7.60 0.44 0.24
12 5.50 5.00 4.80 5.10 5.10 0.29 6.40 6.10 5.90 6.80 6.30 0.39 7.20 6.40 6.60 7.80 7.00 0.63 8.40 8.20 8.40 8.60 8.40 0.16
72
Lampiran 11. Jumlah eritrosit juvenil ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu Konsentrasi Ulangan mg/L 1 2 3 0.00 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.01 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.03 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.05 4 Rataan St. dev
Minggu ke0
4
8
12
0.84 0.86 0.86 0.87 0.86 0.01 0.86 0.86 0.87 0.86 0.86 0.01 0.87 0.86 0.86 0.86 0.86 0.01 0.86 0.86 0.87 0.86 0.86 0.01
1.03 1.04 1.04 1.04 1.04 0.01 1.05 1.04 1.05 1.06 1.05 0.01 1.12 1.1 1.12 1.11 1.11 0.01 1.12 1.12 1.13 1.14 1.13 0.01
1.14 1.14 1.14 1.15 1.14 0.01 1.15 1.16 1.14 1.15 1.15 0.01 1.19 1.19 1.18 1.17 1.18 0.01 1.2 1.21 1.2 1.21 1.21 0.01
1.16 1.14 1.15 1.15 1.15 0.01 1.17 1.16 1.16 1.16 1.16 0.01 1.19 1.18 1.18 1.19 1.19 0.01 1.23 1.26 1.29 1.25 1.26 0.03
73
Lampiran 12. Jumlah leukosit juvenil ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida selama 12 minggu Konsentrasi Ulangan mg/L 1 2 3 0.00 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.01 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.03 4 Rataan St. dev 1 2 3 0.05 4 Rataan St. dev
0 3.39 3.67 3.00 3.95 3.50 0.41 3.49 3.45 3.59 3.48 3.50 0.06 3.30 3.66 3.81 3.20 3.49 0.29 3.56 3.45 3.46 3.58 3.51 0.07
Minggu ke4 8 4.67 5.19 4.70 4.39 5.03 4.03 6.07 5.21 5.14 4.71 0,59 0.64 4.51 4.19 4.57 4.94 4.56 5.46 4.50 4.88 4.54 4.87 0.04 0.52 4.06 4.19 4.25 4.15 4.93 4.24 4.19 4.26 4.36 4.21 0.39 0.05 3.82 4.76 4.14 4.24 4.64 4.45 4.25 4.28 4.20 4.43 0.34 0.24
12 5.99 5.88 4.72 5.74 5.58 0.58 5.78 5.10 5.29 4.90
5.27 0.38 4.50 4.29 4.48 4.33 4.40
0.11 4.40 4.29 4.27 4.24 4.30
0.07
74
Lampiran 13. Analisis statistik terhadap laju pertumbuhan spesifik juvenil ikan mas (g/ekor) setelah 12 minggu pemaparan Anova Jumlah kuadrat
Sumber keragaman Perlakuan Acak Total
SGR
1.918 .376 2.295
db
Kuadrat tengah .639 031
3 12 15
F 20.382
P .000
Lanjutan Uji Tukey Variabel
(I) Perlakuan
SGR
.00 .01
.03 .05
(J) Perlakuan
Selisih rata-rata (I-J)
.01 .03 .05 .00 .03 .05 .00 .01 .05 .00 .01 .03
.21930 .75930(*) .80803(*) -.21930 .54000(*) .58873(*) -.75930(*) -.54000(*) .04873 -.80803(*) -.58873(*) -.04873
Standar kesalahan .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524 .12524
P
.342 .000 .000 .342 .005 .002 .000 .005 .979 .000 .002 .979
Selang kepercayaan 95 % Batas Batas atas bawah -.1525 .5911 .3875 1.1311 .4362 1.1798 -.5911 .1525 .1682 .9118 .2169 .9605 -1.1311 -.3875 -.9118 -.1682 -.3231 .4205 -1.1798 -.4362 -.9605 -.2169 -.4205 .3231
Lanjutan SGR Konsentras (mg/L)
Nilai SGR rata-rata
N 1
.05 .03 .01 .00 Sig.
4 4 4 4
2
.5694 .6181 1.1581 1.1581 .979
.342
75
Lampiran 13. Analisis statistic juvenile ikan mas (g/ekor) yang dipaparkan dengan berbagai konsentrasi subletal moluskisida niklosamida setelah 12 minggu Anova Variabel Hematokrit Hemoglobin Eritrosit Leukosit
Sumber keragaman Perlakuan Acak Total Perlakuan Acak Total Perlakuan Acak Total Perlakuan Acak Total
Jumlah kuadrat 1210.052 352.713 1562.764 22.800 2.000 24.800 .028 .002 .030 4.767 1.229 5.995
db 3 12 15 3 12 15 3 12 15 3 12 15
Kuadrat tengah 403.351 29.393
F
P
13.723
.000
7.600 .167
45.600
.000
.009 .000
45.887
1.589 .102
1.5520
.000 .000
76
Lanjutan Uji tukey Variabel
Ht
(I) Perlakuan
(J) Perlakuan
Selisih ratarata (I-J)
.00
.01 .03 .05 .00 .03 .05 .00 .01 .05 .00 .01 .03 .01
-13.90000(*) -17.27500(*) -23.80000(*) 13.90000(*) -3.37500 -9.90000 17.27500(*) 3.37500 -6.52500 23.80000(*) 9.90000 6.52500 -1.20000(*) -1.90000(*) -3.30000(*) 1.20000(*) -.70000 -2.10000(*) 1.90000(*) .70000 -1.40000(*) 3.30000(*) 2.10000(*) 1.40000(*) -.01250 -.03250(*) -.10750(*) .01250 -.02000 -.09500(*) .03250(*) .02000 -.07500(*) .10750(*) .09500(*) .07500(*) .34000 1.18250(*) 1.28250(*) -.34000 .84250(*) .94250(*) -1.18250(*) -.84250(*) .10000 -1.28250(*) -.94250(*) -.10000
.01
.03 .05
Hb
.00
.03 .05 .01 .00 .03 .05 .03 .00 .01 .05 .05 .00 .01 .03 .00 .01 Eritrosit .03 .05 .01 .00 .03 .05 .03 .00 .01 .05 .05 .00 .01 .03 .01 Leukosit .00 .03 .05 .01 .00 .03 .05 .03 .00 .01 .05 .05 .00 .01 .03 * Nilai selisish rata-rata berbeda nyata
Standar kesalahan 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 3.83358 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .28868 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .01005 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625 .22625
P
.016 .003 .000 .016 .815 .096 .003 .815 .364 .000 .096 .364 .006 .000 .000 .006 .125 .000 .000 .125 .002 .000 .000 .002 .613 .032 .000 .613 .245 .000 .032 .245 .000 .000 .000 .000 .466 .001 .001 .466 .013 .006 .001 .013 .970 .001 .006 .970
Selang kepercayaan 95 % Batas Batas atas bawah -25.2815 -2.5185 -28.6565 -5.8935 -35.1815 -12.4185 2.5185 25.2815 -14.7565 8.0065 -21.2815 1.4815 5.8935 28.6565 -8.0065 14.7565 -17.9065 4.8565 12.4185 35.1815 -1.4815 21.2815 -4.8565 17.9065 -2.0570 -.3430 -2.7570 -1.0430 -4.1570 -2.4430 .3430 2.0570 -1.5570 .1570 -2.9570 -1.2430 1.0430 2.7570 -.1570 1.5570 -2.2570 -.5430 2.4430 4.1570 1.2430 2.9570 .5430 2.2570 -.0423 .0173 -.0623 -.0027 -.1373 -.0777 -.0173 .0423 -.0498 .0098 -.1248 -.0652 .0027 .0623 -.0098 .0498 -.1048 -.0452 .0777 .1373 .0652 .1248 .0452 .1048 -.3317 1.0117 .5108 1.8542 .6108 1.9542 -1.0117 .3317 .1708 1.5142 .2708 1.6142 -1.8542 -.5108 -1.5142 -.1708 -.5717 .7717 -1.9542 -.6108 -1.6142 -.2708 -.7717 .5717
77
Lanjutan Hematokrit (Ht) Konsentras (mg/L)
N
.05 .03 .01 .00 Sig.
4 4 4 4
Nilai Ht rata-rata 1 2 27.4750 41.3750 44.7500 51.2750 1.000 .096
Hemoglobin (Hb) Konsentras (mg/L) .05 .03 .01 .00 Sig.
Nilai Hb rata-rata 2
N 1 5.1000
4 4 4 4
3
6.3000 7.0000 1.000
8.4000 1.000
.125
Eritrosit Konsentras (mg/L)
N
.05 .03 .01 .00
4 4 4 4
1
Nilai Eritrosit rata-rata 2
1.1500 1.1625
.613
3
1.1625 1.1825
1.2575
.245
1.000
Leukosit Konsentras (mg/L)
N
.05 .03 .01 .00
4 4 4 4
Sig.
Nilai Leukosit rata-rata 1 2 4.3000 4.4000 5.2425 5.5825 .970
. .466
78
