SZABÁLYTALAN, NEM SPÓRAKÉPZŐ GRAMPOZITÍV PÁLCÁK
Dr. Szabó Dóra 2014.10.07
Baktériumok klasszifikálása Taxonómia
Faj (=Spezies) Nemzetség(=Genus) Család Rend Osztály Törzs (=Divisio) Királyság (Regnum)
Staphylococcus aureus Staphyloccus genus Micrococcaceae család Bacillales Bacilli Firmicutes Bacteria
Baktériumok klasszifikálása Az egy fajba tartozó baktériumok az alábbi tulajdonságokban megegyeznek: Mikroszkópos és makroszkópos megjelenésük Anyagcseréjük Biokémiai tulajdonságuk Genetikailag a 16s RNS kódoló DNS szekvenciájuk
Részletes bakteriológia Baktériumok tulajdonságai 1. Mikroszkópos Morfológia
Baktériumok szerepe a betegségekben 5. Virulenciafaktorok 6. Pathomechanizmus és klinikai képek
2. Makroszkópos Morfológia (tenyésztés)
7. Labordiagnózis (kórokozó kimutatás) 8. Kezelés
3. Biokémiai tulajdonságok
9. Megelőzés, profilaxis 10. Epidemiológia
4. Szerológiai jellegzetességek (Antigén szerkezet)
SZABÁLYTALAN, NEM SPÓRAKÉPZŐ GRAM-POZITÍV PÁLCÁK Corynebacterium spp. Listeria monocytogenes Erysipelothrix rhusiopathiae Lactobacillus spp.
Corynebacterium spp.
Corynebacterium diphteriae
Diphteroidok Fakultatív
pathogén Normál flóra tagja
Corynebacterium diphteriae Már az ókorban is ismerték 1821-ben Bretonneau írta le önálló kórképként Kórokozóját Klebs, Löffler toxinját Roux, Yersin írta le először Anatoxint Ramon állította elő 1924-ben
Transzmisszió Cseppfertőzéssel emberről emberre Esetleg direkt kontaktussal
Reservoir – csak humán
Lokális gyulladásBaktérium lokális marad!!
infekció helyén epithelsejtek elpusztulnak, gyulladásos reakció erek kitágulnak, leukocyták, vvt-k kiszabadulnak felszínen exudáció, környező szövetekben oedema Exudatum megalvad, - necrotikus epithelen szívós álhártya szürkészöld fibrinből, elhalt leucytákból, vvt-ből álló képződmény, alapjáról nehezen leválasztható
Diphteria pharyngitis
Diphtheria - pseudomembrane
39-éves nő torok. Tünetei: láz, rossz közérzet, torokfájdalom az „álhártya leválasztása után vérzés!
Lágy szájpad - perforáció
PATOGENITÁS Toxin mediálta betegség! Phage acquirálása vezet a toxin termeléshez (lysogén konverzió ) gazdasejt kromoszómájába épült profág kódolja Exotoxin ( polypeptid ) A fragment: toxin funkció B fragment: transport és kötödés
A toxin hatása
A fragment: toxin hatás a receptorhoz való kötődés után – szív, ideg és epitheliális sejtek – a cytopalzmába kerül Toxin
A: ADP-ribozil-transzferáz ADP-ribozil csoport NAD koenzimről EF-2 re (elongációs faktor) EF-2: egyetlen szubsztrátja az enzimnek( spec. hisztidinvariáns a támadáspontja )
a fehérje sejthalál
szintézis leállítása
2-6 napos inkubáció helyi károsodás az exotoxin termelés következményeként
infekció helyén epithelsejtek elpusztulnak, gyulladásos reakció erek kitágulnak, leukocyták, vvt-k kiszabadulnak felszínen exudáció, környező szövetekben oedema Exudatum megalvad, - necrotikus epithelen szívós álhártya szürkészöld fibrinből, elhalt leu-ból, vvt-ből álló képződmény, alapjáról nehezen leválasztható
exudative pharyngitis ( tonsillák, pharynx, larynx ) az exudativum vastag pseudomembrant képez (baktérium, fibrin, lymphocyták, elhalt sejtek …) a pseudomembrán eltávolítása során vérzés alakulhat kijellegzetes tünet! Légutak obstrukciója
Távoli hatás Toxin hatás Perifériás idegek károsodása: lágyszájpad, szemmozgató idegek bénulása Máj, vese, mellékvese károsítás Cardiomyopathia : parenchymatosus degeneráció, zsíros infiltráció, nekrózis, szívdilatáció
ORRDIPHTERIA : véres orrfolyás, orrnyílás körül bemaródások BŐRDIPHTERIA Főleg trópusokon gyakori: szubakut bőrgyulladás álhártyával fedett felületes fekélyképződéssel ( retroaurikuláris, anogenitális régió, köldök ) Toxin felszívódása általában gyér, szisztémás hatás nincs KÖTŐHÁRTYADIPHTERIA KÖLDÖKDIPHTERIA SEBDIPHTERIA VULVADIPHTERIA
Bőr diphteria
Bőr diphteria
Diagnosztika- Festés
Álhártyáról vett minta : Neisser-festés Minta:az elváltozás helyéről- Di-tartályban laborba küldeni
Értékelés: Tenyészetből készített kenetben kínai írásjelre emlékeztetően rendeződött pálcák, ált. végálló szemcsékkel BARNA: metakromatikus szemcsék =Babes-Ernst szemcsék=volutinszemcsék=foszfát polimer szemcsék SÁRGA: többi sejtalkotórész
Tenyésztés
Véres agaron: kicsi, rögös, szürke, szabálytalan telepek
Clauberg táptalaj (K-tellurit medium) glicerinnel hemolizált vér ( vér-glicerolát) , cisztin és tellurit szelektív differenciáló táptala Telepek – barna, fekete telepek ( barna hálóval ), mert a tellurit intracellulárisan redukálódik mitis : 1-2 mm, szürkés-fekete, sima felszínű, könnyen kenhető gravis: 2-3 mm, durva felszínű, szürke, vagy fekete centrum -ált.legsúlyosabb kórképekből ez izolálható intermedius : < 1 mm, sima vagy rögös felszín
Jellegzetes szúrós fokhagyma szag !
Loeffler’s táptalaj dextróz, alvasztott marhasavó, húslébouillon gyors növekedés volutinszemcsék gyorsan nőnek
Corynebaktérium Tenyésztés szelektív táptalajokon Clauberg táptalaj: fekete telepeket képez Löffler táptalaj: fehér telepek képez
Toxintermelés kimutatása
in vivo RÖMER-PRÓBA : tengerimalac leborotvált hasfalába subcutan 0.1mL tenyészet ill. a kontroll állatot előtte 500 E antitoxinnal védjük 2 órával előtte -a csak toxint kapott állat 2-3 nap múlva elpusztul, a másik túlél in vitro ELEK –PRÓBA : antitoxinnal végzett gélprecipitációs próba tox gén kimutatása PCR-rel szövettenyészeten toxinhatás kimutatás
Römer test (tengerimalac)
ELEK-Próba gél-precipitációs reakció
3, Epidemiológiai vizsgálatok: -ribotipizálás (rRNS gének RFLP mintázatának kimutatásán alapuló, hibridizációs molekuláris tipizálási módszer) -SDS-PAGE -PFGE
4., Schick-próba : a betegség kiállása után tartós immunitás marad vissza tengerimalac számára min. letális dózis 1/50-t vizsgálandó egyén bőrébe: ha nincs immunitás, akkor lokális bőrpír, oedema
5.,Immunszerológiai vizsgálat: 14 napos időkülönbséggel levett savópár
Aktuális immunállapot: savó antitoxin titerének vizsgálata passzív haemagglutinációval
Terápia Klinikai gyanú esetén azonnal ! Antitoxin: amíg le nem kötődött a toxin(ló, nyúl, juh, kecske- 20000-100000 U im,iv)
Kórokozó eliminálása antibiotikummal : penicillin, erythromycin, ampicillin, clindamycin, ciprofloxacin, tetracyclin
Prevenció
Kötelező védőoltás (1963 óta jelenlegi séma, 1928 óta oltanak, 1938 óta kötelező)
Di-Per-Te (diphteria-pertussis-tetanus)
Diphteria toxoid
Oltás hatékonysága: vérsavóban megjelenő antitoxikus ellenanyagok megjelenésével és koncentrációjával jellemezhető
Diphtheria elleni védőoltás a világban
Diphtheria Európában
Egyéb corynebacteriumok
C. jeikeium Opportunista patogén, különösen haematológiai betegek, intravascularis katéterrel rendelkezők. Gyakori az antbiotikum rezisztencia C. urealyticum Opportunista patogén Húgyúti fertőzések: erős ureáz termelés –struvit és vesekővek C. ulcerans Identikus exotoxinja révén diphteria C. minutissimum Erythrasma, éles szélű, barnás vörös hámló folt, felületes bőrgyulladás
Listeria monocytogenes
MORFOLÓGIA: coccobacillus Tok, spóra nincs
TENYÉSZTÉS : fakultatív anaerob, első alkalommal szereti a mikroaerofil környezetet Lemezagaron is tenyészik Véresagaron: fehéres-szürkés telepek, hemolitikus zóna, tejsavas szag ( ferde megvilágításban a telepek kékes fénytörésűek) (Szelektív táptalaj: tripaflavin, nalidixsav, natív vérsavóirrizáló zöld telepek)
Gram pozitív, peritrich csillós pálca, vagy
4C-on hűtőben lassan szaporodik- hideg dúsítás !
BIOKÉMIA: CAMP +, kataláz +, glükózt bont, esculin+
22 fokon mozog (flagellum-képzés) – 37 fokon nem !
ANTIGÉN tul.: O, H Szerocsoportok között Ag rokonság Human fertőzések több, mint 90 %-a Ia, Ib, IV b ( IV b sajt epidémia)
Listeria monocytogenes Joseph Lister (1827-1912), angol sebész után lett elnevezve.
Listeria monocytogenes EM
PATOGENITÁS: fakultatív intracelluláris parazita -sejtfal felszíni proteinjével ( internalin ) kapcsolódik az epithelsejt felszíni receptorához ( E-cadherin) -phagocytosisra kerül , phagolysosomába -alacsony pH-n LYSTERIOLYSIN-t (haemolysin) termelkiszabadul a citoplazmába -szaporodik és a sejt aktin polimerizációját fokozza (Act A) -filopodok képződnek -szomszédos epithel sejtet, makrophagot, májsejtet fertőz -kezdődik elölről MPA: monocytosist produkáló ágenst is termel (váladékokból készült kenetekben monocyták)
Listeria monocytogenes
Felnőttkori listeriosis : kontaminált étellel fertőzés (lágy sajtok, kakaó, hentesáru, tej, fertőzött víz) -gastroenteritis -szepszis, meningitis, endocarditis, arthritis, iritis (fertőzés útja?, zoonózis esetek egy részében igazolható –juh, kecske) Listeria meningoencephalitis: kifejezett neurotropizmus Újszülöttkori és időskori purulens meningitisek 3., felnőttkori meningitisek 4. leggyakoribb kórokozója Tünetek: szegényesek Ép T-sejtes immunitás szükséges a szervezetből való eliminálásához immunkomprimáltak különösen veszélyeztetettek)
Perinatalis listerosis Intauterin és újszülöttkori fertőzés: terhességi listeriosis, Korai:intrauterin sepsis-halva születhet a baba (granulomatosis infantiseptica) Késői: 0-3 hetes kor : meningitis, sepsis ( IV.b szerotípus)
Mikrobiológiai diagnosztika
1. Klinikai tüneteknek megfelelő mintákból:
hemokultúra, liquor, conjuntiva váladék, magzatvíz, placenta, genitális váladék, meconium, étel…)
-mikroszkópos vizsgálat -tenyésztés ( véresagar, szelektív agar, dúsítás!)
2. Tengerimalac vagy fiatal nyúl conjunctiva zsákjába kacsnyi mennyiséget oltva, néhány nap alatt purulens conjunctivitis ( Anton-próba ) Egér-oltás: ip.0.5 mL oltva- elpusztul, színtenyészetben izolálható az egér szívvérből, májból, lépből.
3. Epidemiológiai nyomonkövetés: fágtipizálás, NS vizsgálattal
4.Szerotipizálás : tárgylemezagglutinációval
TERÁPIA: cefalosporinokra természetes rezisztencia! Ampicillin + aminoglikozidok jók ( esetleg erythromycin )
IMMUNITÁS Sejtmediált!
Erysipelothrix rhusiopathiae
MORFOLÓGIA: Gram pozitív karcsú pálca, láncokat vagy fonalakat képez, vagy egyedül Csilló, tok, spóra nincs
TENYÉSZTÉS: Véres agaron: kicsi áttetsző, csillogó telepek, alfahemolitikus gyűrűvel Na-azidos agaron : szelektíven tenyészik
BIOKÉMIA: kat-, ox-,Indol-, H2S+
Erysipelothrix rhusiopathiae (Gram-positív pálca)
Erysipelothrix rhusiopathiae véres agaron
1887-ben Rosenbach írta le állatorvosi jelentőség-vágóhídi munkások, állatorvosok, hentesek, halfeldolgozók betegségét okozza ---zoonozis
Sertésorbánc kórokozója- szarvasmarhák, szárnyasok, halak betegsége Évekig túlél szennyezett talajban-pácolást, sózást, füstölést bírja! Hő hatására 60 fokon perceken belül elpusztul.
Ember fertőződése: zoonosis Fertőzött állat, állati termék bőr mikrosérülései, szúrás 2-7 nap inkubációs idő ERYSIPELOID -vörös, szférikusan terjedő bőrgyulladás -helyi oedema -éles határú lila bőrpír -mérsékelt viszketés,fájdalom -kézízületek fájdalmasak -genny általában nincs -láz, általános tünetek 3-4 hét múlva magától is elmúlik, vagy atb hatására hamarabb Ritkán okozhat: -szepszist, és/vagy endocarditist -diffúz cutan formát
Erysipelas a disznóban
Erysipeloid
DIAGNOSZTIKA 1., Beteg bőrelváltozásából kimetszett szövet Beinjektált, majd visszaszívott fiz. konyhasó-oldat -tenyésztés, identifikálás 2., Virulencia-teszt: fehéregér intraperitoneálisan oltva elpusztul, ( kontroll állatokat hiperimmun sertésorbánc savó megvédi ) TERÁPIA :Penicillin : “ drug of choice “
Lactobacillus spp.
Morfológia: változatos Gram pozitív pálcák ( vizsgált mintától, alkalmazott tápközegtől függ )
Tenyésztés: változatos Gram pozitív pálcák ( vizsgált mintától, alkalmazott tápközegtől függ ) tomato-juice agar (pH 5) Rogosa : nagy, fehér, kerek, ép szélű telepek
Biokémia ox-, kat-, gel-, H2S-, esc + v. Glükóz-fermentáció alapján: Homofermentatív( glükózból tejsav) Heterofermentatív (glükózból tejsav, etanol, ecetsav, co2) Fakultatív fermentáló (glükózból tejsav, glükonsavból tejsav+)
Lactobacillus sp. - Gram festés
Epidemiológia Normál flóra tagja szájüreg bél hüvely ( Döderlein-féle bacillus)-tisztasági fok
Lactobacillus
Klinikai kép
Fogszuvasodás Szénhidrátokból
savas végtermék Savi pH –n él, szaporodik Nyálban nagy mennyiségben, jól korrelál caries(hajlam)mal
Műbillentyű endocarditis sebváladékok immunkárosodottak Gyomornedv: tumorra utal
Fertőzés: autogén infekció! Terápia: nehéz, mert gyakran igen rezisztens
ALKALMAZÁSA: probiotikum
preventív, terápiás hatású gyomor-, bélhurut, obstipáció, gyomorsavtúltengés, tumor, hasmenés, bélflóra eltolódás esetén
Probiotikum
A probiotikumok jótékony hatású baktériumok, javítják a bélflóra hatékony működését és az emésztést, kedvezően befolyásolják az immunrendszert és segítik a szervezet vitaminokkal történő ellátását, így gyors regenerálódását.
Gátolják a patogén baktériumok növekedését
pH csökkentés Baktericid proteinek szekretálása
Blokkolják a pathogének tapadását az epitheliális sejtekhez, gátolják az inváziót Nyákot termelnek Modulálják a szervezet immunválaszát
Lactobacillus acidophilus, egyéb lactobacillusok Bifidobacterium spp.
Lactobacillus, Bifidus sp. Joghurt
Prebiotikumok
Olyan nem emésztődő anyagok az élelmiszerekben, melyek jótékonyan hatnak a bélflórára
Egészségetekre!
