SUDARMAJI
UJI DAYA ANTIBAKTERI KOMPONEN MINYAK ATSlRl BUAH KEMUKUS TERHADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS DAN ESCHERZCHIA COLZ
DENGAN CARA BIOGRAM
1
FAKULTAS FARMASI 1 --- I . UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA +
C -
1996
L
-
--
.:<xi
-f
l
i
*
U3I DAYA ANTIBAKTERI ROMPONEN MINYAg ATSIRI BUAH KEMUKUS
23iXWDAP STAPHY1;OWCWS AURWS DAN E S m I ( 7 H I A CULI DENGAN CARA BINRAM
SKRIPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada fakultas farmasi
Universitas Katolik Widya Mandala
Surabaya 1996
Oleh:
Dl SEXVJUI OLEH : 1
.
.
- .. ,* %' - , ,..i \, - .. \ ,,'.
, p ~ ~ i ~i ~ ~ 7, : t - , ~,,i 5 -.-,,..- ___ \,-
y.
? Ii ,-"c.
-J
c
(Dra. DIEN ARIANI L,)
..................... PEMBIMBING I
,*
w$,
,+
.
.
_--
- .' 3
.-.
Q; , i / l L >
/-'
,
(Dra. S R ~ H A R T IApt.)
.
..................... PEMBIMBING 11
KATA PENGANTAR
Zsngan
-~- s n g
~aengucspkanrasa syukur ke!ladirat Tuhal:
Maha Eea, dan dengall segala rahmat s e r t a hidayat-Nya menyertai
telhh
kami dalam menyusun
skriksi
yang
ini,
yang
merupakan p e r s y a r a t a n a k h i r u n t u k menyelesaikan s t u d i pada Fakultas
Farmasi
Universitas
Katolik
Widya
Mand&la
Surabaya. Adapun j u d u l s k r i p s i kami a d a l a h U j i Daya A n t i b a k t e r i Komponen
Staphylococcus Biogram. kami
Buah
Kemukus
nantinya bagi
tradisional
Terhadap
aureus Dan Escherichia col i Dengan
Dimana d a r i h a s i l p e n u l i s a n i n i ,
agar
berguna
Atsiri
Miny ak
pada
dapat
menjadi
perkembangan khususnya
bahan
serta dan
ilmu
besar
Metode harapan
masukan
pemanfaatan
yang obat
pengetahuan
pada
unumnya . Pada ucapkan dan kami,
kesempatan
i n i p u l a dengan s e t u l u s
hati
r a s a t e r i m a k a s i h kepada I b u Dra. Dien A r i a n i
Ibu Dra. S r i H a r t i S. Apt. s e b a g a i t e l a h banyak memberi
yang
petunjuk,
saran
kami
L.
dosen
pembimbing
pengarahan,
bimbingan,
dan meluangkan waktunya
dalam
menyusun
skripsi ini. Dan
pada kesempatan i n i p u l a t a k l u p a
kami
ucapkan
terirna k a s i h kepada almamater F a k u l t a s Farmasi U n i v e r s i t a s
2.111
~:er..t:~eyi1:aecIis:
~ a n l i cispat j r a ~ ~ gkami
--
:-.ssehat yang
bermanfsat
aenycleaalkan tugas akhir ini. perole!:
dari
Fakultas
Farmasi
zehingga
Semoga
semua
UNIKA Widya
Mandala Surabaya ini d a p a t bermanfaat bagi kami
Bhususnya
dan masyarakat pada umumnya.
Surabaya, Nopember 1996
Penulis
iii
fi.3 1% ~ ] ~ i - l
7 7
* + . .. -, FE!?G.4!3T.L.?. ...
I T " ; " "
=FTP.R
......................................
i~
IS1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
LtAFTAR GAMRAR ....................................
i .i
vii
OAFTAR TABEL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . viii
DAFTAR LAMPIfilikJ ......................................
BAB
...................................... 1.1. Latar belakang pernasalahan ................. 1.2. Rumusan permasalahan ........................ 1.3. Tujuan penelitian ........................... 1.4. Hepotesa kerja .............................. I1 . TINJAUAN PUSTAKA ................................ 11.1. Tanaman kemukus (Piper cubeba L . f ) .......
I . PEND.WULUAN
11.1.1. 11.1.2. 11.1.3. 11.1.4. 11.1.5.
ix
1 1 3 3 4 5 5
Klasifikasi tanaman .............. 8 Nama daerah ...................... 8 Morfologi tanaman ................ 8 Zat kandungan .................... 10 Penggunaan ....................... 11
11.2. Minyak Atsiri ............................. 13 11.2.1. Pembuatan Menyak Atsiri ........... 15 11.2.2. Ekstraksi Minyak Atsiri ........... 18 11.3. Staphylococcus aureus ..................... 18 11.3.1. 11.3.2. 11.3.3. 11.3.4. 11.3.5. 11.3.6.
Klasifikasi ...................... Habitat .......................... Morfologi ........................ Fisiologi ........................ Sifat biokimia ................... Resist.ensi.......................
18 18 19 19 20 21
11.3.7. Fatogenitas...................... 21 11.3.8. Fencegahan. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 11.3.9. Fengobatan . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Klasifikasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Habitat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Morfologi ......................... Flsiologi ......................... Sifat biokimie .................... Resistensi ........................ Patogenitas....................... Pencegahan........................ Pengobatan........................ 11.5. Evaluasi Daya Antibakteri .................
23 23 24
24 24 25 25 28 28 29
111 . METODE PENELITIAN .............................. 35 111.1. Bahan penelitian ........................
35
111.1.1. Bahan dasar .................... 111.1.2. R w , an Percobaan ................ 111.1.3. Media perbenihan ............... 111.1.3.1. Mueller Hinton Broth 111.1.3.2. Mueller Hinton Agar . 111.1.3.3. Manitol Salt Phenol Red Agar ............ 111.1.3.4. Eosine Methyline Blue Agar ........... 111.1.4. Larutan 1/2 Mc Farland I ....... 111.1.5. Bahan-bahan lain ...............
35 36 36 36 36
...............................
38
111.2. Alat-Alat
36 37 38 38
111.3.1. Jenis Penelitian............... 40 111.3.2. Metode Penelitian .............. 40 111.3.3. Pengamatan Percobaan ........... 42 111.4. Pelaksanaan penelitian .................. 44 111.4.1. Pemeriksaan Bakteri ............ I I I .4.1.1. Staphylococcus a w e us.................. 111.4.1.2. Escherichia coli .... 111.4.2. Fembuatan Serbuk Buah Kemukus . .
44 44 45 46
I I I .4.3. EL:st.raksi Minyak
Atsiri Euah Kemukus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111.4.4. Fmbuatan Larutan U j i . . . . . . . . . . 111.4.5. Pembuatan Larutan Pembanding... 111.4.6. Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri ........................ 111.4.7. Pembuatan Larutan % Mc Farland I ......................... 111.4.8. Pembuatan Suspensi Bakteri ..... 111.4.9. Penentuan Daya Antibakteri Komponen Minyak Atsiri Buah Kemukus Dengan Cara Biogram Kontak . 111.4.10. Alur Kerja ....................
46
43 47 47
50 5G
51 54
IV . HASIL PERCOBAAN ................................ 55 IV.1. Hasil Pemeriksaan Serbuk Buah Kemukus .... 55 IV.l.l. Secara Makroskopis ............... 55 IV.1.2. Secara Mikroskopis ............... 56
IV.2. Hasil Femeriksaan Bakteri ................ 57
IV -2.1. Staphylococcus aureus ATCC 25923. 57 IV.2.2. Escherichia coli ATCC 25922...... 59 IV.3. Hasil Penentuan Daya Antibakteri Komponen Minyak Atsiri Buah Kemukus ............... 62 IV.3.1. Hasil Pengamatan Hambatan Pertumbuhan Terhadap StaphyJ ococcus
a u r e u s ATCC 25923................ 62 IV.3.2. Hasil Pengamatan Hambatan Perturnbuhan Terhadap Escherichia culi ATCC 25922 ....................... 65
VI . Kesimpulan. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77 VII . SAEIAN ............................................ 78 ABSTRAK ...................................
79
DAFTAR PUSTAKA ................................... 80
DAFTAR GAMI3A.R
$2anb 51%
21 a 1aman
1. Tanarnan kernukus ( P i p e l - cubeha L . f )
.................
35
2. Bentuk buah kemukus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55 3. Fragmen serbuk buah kemukus........................ 57
4. Hasil nyak
pengamatan hambatan pertumbuhan komponen miatsiri buah kemukus terhadap
Staphylococcus
aul*eus ATCC 25923 dengan metode biogram kontak pa-
da media MHA ..................................... 63 5. Hasil
pengamatan hambatan pertumbuhan komponen mi-
nyak atsiri buah kemukus terhadap Escherichia co2i
ATCC 25922 dengan metode biogram kontak pada
media
MHA................................................
66
6. Hasil KLT komponen minyak atsiri buah kemukus yang diamati dengan sinar W.254 nm 7. Hasil
...................
68
KLT komponen minyak atsiri buah kemukus yang
diamati dengan penampak noda asam fosfomolibdat.... 69
8. Blangko positip Staphylococcus aureus ATCC 25923 setelah diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.... 71 9. Blangko positip Escherichia coli
ATCC 25922 setelah
diinkubasi pada suhu 37 " C selama 24 jam.......... 72
DAFTAR TABEL
P A
-x!?r...
halaman
1. kiasil pcmeriksaan makroskopis s e r b u k buah kernukus... 2. Hasil
pemeriksaan
makroskopis
dan
56
mikroskopis
St;aphylucoccus a u r e u s ATCC 25923 pada media Mannitol S a l t Phenol Red Agar ................................ 58 3 . H a s i l u j i b i o k i m i a S t a p h y l o c o c c u s anrerrs ATCC 25923. 59
4. H a s i l
pemeriksaan
Fscherichia coli
makroskopis
ATCC
methyline b l u e a g a r . . 5 . H a s i l perneriksaan
25922
dan
pada
mikroskopis
media
eosine
...............................
uj i
60
EscilelVichia c o l i
biokimia
ATCC 25922 .......................................... 6 1 6 . H a s i l pengamatan daya a n t i b a k t e r i ,
Rf dan warna noda
d a r i komponen minyak atsiri buah kemubus sentrasi
1%( 5 0 u g / 5 u l ) , 3% ( 1 5 0 p g / 5 p l ) ,
5 ~ 1 )t e r h a d a p S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s ATCC
pada
kon-
5% (250pg/ 25923
de-
ngan metode biogram kontak .......................... 64 7 . H a s i l pengamatan daya a n t i b a k t e r i , R f dan warna noda
d a r i komponen minyak a t s i r i buah kemukus sentrasi
5ul)
pada
kon-
1%( 5 0 ~ g / 5 u l ) ,3% ( 1 5 0 u g / 5 ~ 1 ) , 5% (250ug/
t e r h a d a p Escherichia c u l i
ATCC
25922
dengan
metode biogram kontak ............................... 67
Lamp i r an
halaman
i. Gamhar penampang m e l i n t a n g irisan buah kemukus . . . . . . 84
2 . Cara pembuatan l a r u t a n u j i dan larutan pembanding . . . 85 3. S u r a t k e t e r a n g a n d e t e r m i n a s i tanaman kemukus ........ 86 4. Surat
keterangan
uji
biokimia
Staphylococcus
aru-errs ATCC 25923 ................................... 87 5. Surat
ketgrangan
uji
biokimia
Escherichia coli
ATCC 25922 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88
Kemukus (Pipel*cubeba L . F ) telah dikenal oleh masyarakat Indonesia dan secara empiris digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit antara lain disentri dan gangguan saluran pencernaan lain. Telah dilakukan penelitian dengan komponen minyak atsiri buah kemukus mengenai daya antibakterinya terhadap Staphylococcus a u r e u s ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922, dimana kedua bakteri ini menyebabkan gangguan saluran pencernaan yang ditandai dengan diare. Pembuatan larutan uji komponen minyak atsiri buah kemukus dilakukan dengan cara mikrodestilasi air. Destilat yang didapat ditarik dengan N-hexan, kemudian N-hexannya diambil dan diuapkan pada suhu kamar sampsi kering Larutan uji komponen minyak atsiri buah kemukus I%, 3%, 5% dibuat dengan melarutkan sisa kering tersebut dengan kloroform dan daya antibakterinya ditentukan dengan metode biogran kontak. Fase diam yang digunakan adalah silika gel 60 F254 0,2 rnm (E. ~ e r c k )dan fase geraknya adalah kloroform : etanol : asam asetat glasial dengan perbandingan 94 : 5 : 1, dan sebagai pen~anpaknoda digunakan asam fosfomolibdat. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa komponen minyak atsiri buah kemukus 1% (50vg/5~1), 3% (150ug/5~1), 5% (250ug/5~1)menunjukkan daya antibakteri terhadap StapI~,vlococcusaul-eus ATCC 25923 pada Rf 0 , 7 0 dan tidak menunjukkan daya antibakteri terhadap Escherichfa coli ATCC 25922.