SKRIPSI IDENTIFIKASI SENYAWA ASAM FENOLAT PADA SAYURAN INDIGENOUS INDONESIA. Oleh: RIZA ARIS APRIADY F

SKRIPSI

IDENTIFIKASI SENYAWA ASAM FENOLAT PADA SAYURAN INDIGENOUS INDONESIA

Oleh: RIZA ARIS APRIADY F24050276

2010 FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR

IDENTIFIKASI SENYAWA ASAM FENOLAT PADA SAYURAN INDIGENOUS INDONESIA

SKRIPSI Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor

Oleh: RIZA ARIS APRIADY F24050276

2010 FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR

Judul Skripsi : Identifikasi Senyawa Asam Fenolat pada Sayuran Indigenous Indonesia Nama

: Riza Aris Apriady

NIM

: F24050276

Menyetujui Dosen Pembimbing,

Dr. Ir. Nuri Andarwulan, M.Si. NIP: 19630701.198811.2.001

Mengetahui, Ketua Departemen,

Dr. Ir. Dahrul Syah NIP: 19650814.199002.1.001

Tanggal Lulus: 22 Januari 2010

Riza Aris Apriady. F24050276. Identifikasi Senyawa Asam Fenolat pada Sayuran Indigenous Indonesia. Di Bawah Bimbingan Dr. Ir. Nuri Andarwulan, M.Si.

ABSTRAK Jawa Barat merupakan salah satu provinsi penghasil sayur-sayuran yang memiliki peran cukup signifikan dalam menghasilkan jenis sayur-sayuran di Indonesia. Spesies sayuran asli Indonesia yang berasal dari daerah/wilayah/ekosistem tertentu, termasuk spesies pendatang dari wilayah geografis lain tetapi telah berevolusi dengan iklim dan geografis wilayah Indonesia dinamakan sayuran indigenous. Beberapa balai penelitian seperti Balai Penelitian Tanaman Sayuran (Balitsa) bekerjasama dengan Asian Vegetables Research Development Center (AVRDC) telah melakukan pendataan terhadap sayuran ini terutama yang mempunyai kandungan gizi dan non gizi yang bermanfaat secara fisiologis bagi tubuh manusia yaitu vitamin A, zat besi, dan antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa yang sangat baik untuk menangkap radikal bebas. Keberadaan senyawa antioksidan ini akan mencegah penyakit kanker maupun penyakit degeneratif lainnya. Salah satu senyawa antioksidan yang penting yaitu senyawa polifenol. Senyawa polifenol yang ada di sayuran, buah-buahan, dan teh dapat mencegah penyakit degeneratif termasuk kanker melalui aktivitas antioksidatif dan/atau modulasi fungsi beberapa protein. Salah satu senyawa polifenol yang banyak terdapat pada sayuran yaitu flavonoid dan asam fenolat. Senyawa asam fenolat (phenolic acids) mendapatkan perhatian yang lebih dalam beberapa tahun terakhir ini karena pengaruhnya untuk kesehatan manusia. Sebagai polifenol, asam fenolat merupakan antioksidan yang sangat kuat dan memiliki aktivitas antibakteri, antivirus, antikarsinogenik, antiinflamasi, dan aktivitas vasodilatory. Selain itu asam fenolat juga mempunyai peranan untuk melindungi dari kanker dan penyakit jantung. Penelitian ini meneliti kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia yang berasal dari Jawa Barat yaitu kenikir, kecombrang, kemangi, katuk, pohpohan, ginseng, takokak, lembayung, terubuk, labu siam, pepaya, mete, pakis, beluntas, mangkokan putih, mangkokan, kendondong cina, antanan, antanan beurit, krokot, turi, kelor, dan mengkudu. Bagian tanaman yang digunakan untuk penelitian ini bisa berupa daun, batang, dan seluruh bagian tanaman. Penelitian ini dilakukan dalam beberapa tahap yaitu persiapan sampel, pembuatan kurva standar dan Limit of Detection (LOD), analisis asam fenolat dengan HPLC, serta analisis statistik. Analisis asam fenolat dengan HPLC dilakukan secara dua ulangan duplo. Analisis statistik yang digunakan yaitu uji Tukey pada taraf α 5%, uji T pada taraf α 1%, dan principal component analysis (PCA). Hasil penelitian ini mendapatkan data kisaran asam klorogenat 0.08–47.02 mg per 100 gram sampel segar, asam kafeat 0.36 – 8.65 mg per 100 gram sampel segar, dan asam ferulat 0.09– 5.02 mg per 100 gram sampel segar.

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Bandar Lampung pada tanggal 7 April 1987, penulis adalah anak pertama dari Bapak Drs. Nazarudin, SH dan Sundari. Penulis memiliki dua orang adik perempuan yaitu Riska Pahyuni dan Ririn Wirdayani. Penulis menempuh pendidikan sekolah dasar di SD Negeri 1 Bukit, Musi Banyuasin, Sumatra Selatan pada tahun 1993-1999, pendidikan lanjutan tingkat pertama di SLTP Negeri 22 Bandar Lampung pada tahun 19992002, dan pendidikan lanjutan tingkat atas di SMU Negeri 2 Bandar Lampung pada tahun 2002-2005. Penulis diterima di Institut Pertanian Bogor melalui jalur SPMB pada tahun 2005. Penulis diterima di Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan IPB pada tahun 2006 setelah melalui satu tahun TPB (Tahap Persiapan Bersama). Selama menjadi mahasiswa di IPB (Institut Pertanian Bogor). Penulis aktif di berbagai kegiatan baik kegiatan akademik maupun kegiatan ektrakurikuler. Pada bidang akademik, penulis aktif dalam mengikuti berbagai lomba baik nasional maupun internasional di antaranya juara 3 dunia dalam lomba DSDC (Developing Solutions for Developing Countries Competition) di Anaheim, California pada bulan Juni 2009 dan mendapatkan penghargaan dari Menteri Pertanian RI terkait dengan prestasi internasional (DSDC), juara 1 debat bahasa Inggris IPB pada tahun 2007 dan 2008, finalis IEC (Innovative Entrepreneur Challenge) pada tahun 2008, mendapatkan pendanaan dari DIKTI dalam lomba program kreativitas mahasiswa, mendapatkan pendanaan dari IPB dalam program pengembangan kewirausahaan mahasiswa. Selain lomba penulis juga menjadi presenter dalam 37th International Forestry Student Symposium 2009, presenter di National

Students

Conference

UNIKA

Soegijapranata

Semarang

2008,

mendapatkan beasiswa PPA pada tahun 2006, menjadi asisten praktikum kimia dan biokimia pangan, menjadi asisten praktikum teknologi pengolahan pangan. Penulis pernah mengikuti training ISO 9001:2000, ISO 22000:2005, dan Sitem Manajemen Halal, terlibat dalam The International Technical Forum for Cooperation and Exchange between Korea and Indonesia pada tahun 2009, penulis juga aktif dalam mengikuti seminar-seminar yang terkait dengan teknologi

pangan maupun kewirausahaan, di antaranya yaitu International Nano Food Science Technology Conference di Anaheim, California pada tahun 2009, seminar Wirausaha Muda Mandiri 2009, dan seminar Nasional Ketahanan Pangan Bangsa. Pada bidang ekstrakurikuler penulis merupakan anggota dari IFT (Institute of Food Technologist), HMPPI (Himpunan Mahasiswa Peduli Pangan Indonesia), HIMITEPA (Himpunan Mahasiswa Teknologi

Pangan), penulis

pernah

mengkoordinatori bidang akademik dan kerohanian di KEMALA (Kesatuan Mahasiswa Lampung) pada periode tahun 2005-2006. Penulis juga pernah menjadi ketua FCC (Food Chat Club) pada periode tahun 2008-2009. Penulis aktif dalam kepanitiaan kegiatan nasional seperti menjadi wakil pada kegiatan the 7th National Students Paper Competition pada tahun 2008, menjadi PJK pada kegiatan BAUR 2007, dan menjadi penyuluh dalam kegiatan Penyuluhan Keamanan Pangan yang diselenggarakan oleh SEAFAST Center IPB. Dalam selasela kesibukan akademik dan penelitian, penulis menyibukkan dirinya dengan membuka café bersama teman-temannya, café tersebut diberi nama FRIENDS 24 CAFÉ yang menjual produk-produk seafood olahan yang siap santap dan siap saji. Penulis SENYAWA

melakukan ASAM

penelitian

FENOLAT

dengan

PADA

judul

SAYURAN

“IDENTIFIKASI INDIGENOUS

INDONESIA” sebagai syarat untuk meraih gelar sarjana. Penelitian ini dikerjakan dibawah bimbingan Dr. Ir. Nuri Andarwulan, M.Si pada tahun 2010.

KATA PENGANTAR

Segala puji bagi Alloh Azza wa jalla yang telah memberikan kekuatan pada penulis sehingga skripsi dengan judul Identifikasi Senyawa Asam Fenolat Pada Sayuran Indigenous Indonesia dapat diselesaikan. Shalawat serta salam semoga selalu tercurah kepada baginda Rasululloh Muhammad SAW karena beliau telah membawa jalan yang terang benderang kepada manusia. Penulisan skripsi ini tidak terlepas dalam bantuan berbagai pihak, oleh karena itu penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada: 1. Ayah, Ibu, Riska, dan Ririn yang selalu mendo’akan, memberikan nasihat, motivasi, kasih sayang, dan bantuan materil. 2. Ibu Dr. Ir. Nuri Andarwulan, M.Si selaku dosen pembimbing akademik yang telah memberikan nasihat, motivasi, dan masukan dalam pembuatan skripsi ini. 3. Dewi Kurniasih, Riska Rudiyanti Dewi selaku teman satu bimbingan yang selalu memberikan motivasi, masukan, dan do’a. Terima kasih atas kebersamaannya dalam menggapai cita-cita. 4. Teman-teman Friends 24 Cafe (Fahmi, Tiwi, Dilla, Widi, dan Widya). 5. Teman-teman kosan (Dimas, Erwin, Muji, Sobur, Deni, Tri Erza, dan Sigit). 6. Seluruh teman-teman ITP 42 yang telah bersama baik dalam keadaan senang maupun duka selama lebih kurang tiga tahun. 7. Abah, mba Irin, mba Ria, dan kak Marto yang telah membantu penulis di Laboratorium SEAFAST Center IPB.

Penulis menyadari skripsi ini tidak lepas dari kesalahan. Oleh karena itu penulis minta maaf dan dengan senang hati menerima kritik dan saran dari berbagai pihak. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat untuk kehidupan manusia.

Bogor,

Januari 2010

Penulis

i

DAFTAR ISI KATA PENGANTAR. ........................................................................................ i DAFTAR ISI. ...................................................................................................... ii DAFTAR TABEL. .............................................................................................. iv DAFTAR GAMBAR. ......................................................................................... vi DAFTAR LAMPIRAN. ..................................................................................... ix I.

PENDAHULUAN. ....................................................................................... 1 A. LATAR BELAKANG. .............................................................................. 1 B. TUJUAN. .................................................................................................. 3 C. MANFAAT. .............................................................................................. 3

II. TINJAUAN PUSTAKA. .............................................................................. 4 A. SAYURAN INDIGENOUS....................................................................... 4 B. ASAM FENOLAT (PHENOLIC ACID). .................................................. 6 C. IDENTIFIKASI SENYAWA ASAM FENOLAT. ................................... 13 III. BAHAN DAN METODE. ............................................................................ 16 A. BAHAN DAN ALAT. .............................................................................. 16 1. Bahan. ................................................................................................... 16 2. Alat. ...................................................................................................... 18 B. METODE. ................................................................................................. 18 1. Persiapan Sampel. ................................................................................. 18 2. Pembuatan Kurva Standar dan Limit of Detection (LOD). .................. 20 3. Analisis Asam Fenolat pada Sayuran. .................................................. 21 4. Analisis Statistik. .................................................................................. 23 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN. .................................................................... 30 A. KURVA STANDAR ASAM FENOLAT DAN LIMIT DETEKSI.......... 30 1. Standar Asam Fenolat Bentuk Tunggal. ............................................... 30 2. Limit Deteksi. ....................................................................................... 32 3. Standar Asam Fenolat Bentuk Campuran. ........................................... 34 B. TOTAL FENOL. ....................................................................................... 36 C. ANALISIS ASAM FENOLAT PADA SAYURAN INDIGENOUS. ...... 38 D. REKAPITULASI HASIL DAN SENYAWA YANG BELUM TERIDENTIFIKASI PADA SAYURAN INDIGENOUS. ....... 96 ii

E. ANALISIS STATISTIK ..........................................................................105 V. KESIMPULAN DAN SARAN. ....................................................................114 A. KESIMPULAN. ...................................................................................... 114 B. SARAN. .................................................................................................. 115 DAFTAR PUSTAKA. ........................................................................................116 LAMPIRAN. .......................................................................................................120

iii

DAFTAR TABEL Tabel 1. Kandungan Senyawa Flavonoid Pada Sebelas Sayuran Indigenous Jawa

Barat (mg/100 gam sampel segar). ......................................... 5

Tabel 2. Kandungan Senyawa Flavonoid Pada Tiga Belas Sayuran Indigenous

Jawa Barat (mg/100 gam sampel segar). ....................... 6

Tabel 3. Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Indonesia. ...................... 17 Tabel 4. Perhitungan LOD Asam Klorogenat. ................................................... 32 Tabel 5. Perhitungan LOD Asam Kafeat. .......................................................... 33 Tabel 6. Perhitungan LOD Asam Ferulat. .......................................................... 33 Tabel 7. Hasil Penginjeksian Standar Asam Fenolat dalam Bentuk Campuran. 35 Tabel 8. Total Fenol Sayuran Indigenous. ......................................................... 37 Tabel 9. Perhitungan Kandungan Asam Fenolat dengan Kurva Standar Campuran. .................................................................... 39 Tabel 10. Perhitungan Kandungan Asam Fenolat dengan Eksternal Standar Campuran. ............................................................... 40 Tabel 11. Perbandingan Perhitungan Kandungan Asam Fenolat antara Kurva Standar Campuran dan Eksternal Standar Campuran. ... 41 Tabel 12. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mengkudu. ........... 43 Tabel 13. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mangkokan. ......... 45 Tabel 14. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Labu Siam. . 47 Tabel 15. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Lembayung. 49 Tabel 16. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Katuk. ......... 52 Tabel 17. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kemangi. .... 54 Tabel 18. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Pakis. .......... 56 Tabel 19. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Pohpohan. ... 59 Tabel 20. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Pepaya. ..... 61 Tabel 21. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mangkokan Putih. 63 Tabel 22. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Kenikir. ................ 65 Tabel 23. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kelor........... 67 Tabel 24. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kucai. ......... 70 Tabel 25. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Jambu Mete. ............................................................................... 72 iv

Tabel 26. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Buah Takokak. ...... 74 Tabel 27. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Antanan. ................ 77 Tabel 28. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Krokot. .................. 79 Tabel 29. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Antanan Beurit. ..... 81 Tabel 30. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Ginseng. ...... 83 Tabel 31. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Kecombrang. .............................................................................. 85 Tabel 32. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Beluntas. ...... 88 Tabel 33. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Turi. ........... 90 Tabel 34. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Terubuk. ................ 92 Tabel 35. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Kedondong Cina. .. 95 Tabel 36. Kandungan Asam Fenolat Pada Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Segar. .................................................................. 97 Tabel 37. Kandungan Asam Fenolat pada Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Berdasarkan Bagian yang diteliti. ........................ 98 Tabel 38. Rekapitulasi Kadar Air, Total Fenol, dan Asam Fenolat Sayuran Indigenous. ............................................................................101 Tabel 39. Rekapitulasi Komponen yang Terdeteksi Pada Sampel Sayuran Indigenous Menggunakan HPLC. ........................................ 103 Tabel 40. Rekapitulasi Area Unknown pada Waktu Retensi Tertentu. .............. 104 Tabel 41. Uji T pada Perhitungan Kandungan Asam Fenolat antara Kurva Standar Campuran dan Eksternal Standar Campuran. ............. 105 Tabel 42. Akar Ciri (Eigen Value), Proporsi, dan Kumulatif Keragaman dari Sembilan Variabel. .......................................................................107 Tabel 43. Matriks Korelasi Sembilan Variabel. .................................................. 108 Tabel 44. Nilai-Nilai Vektor dari Hubungan antara Masing-Masing Variabel dengan Komponen Utama. .................................................. 108 Tabel 45. Akar Ciri, Proporsi, dan Kumulatif Tiga Variabel...............................110 Tabel 46. Matriks Korelasi Total Fenol, Total Flavonoid, dan Total Asam Fenolat.......................................................................................111 Tabel 47. Nilai-Nilai Vektor dari Hubungan antara Masing-Masing Variabel dengan Komponen Utama. ................................................... 111 v

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur Kimia : (a) turunan asam benzoat (b) turunan asam. ........ 7 Gambar 2. Jalur Shikimate . ............................................................................... 9 Gambar 3. Biosintesis Hidroksibenzoat, Hidroksinamat, dan Flavonoid. .......... 11 Gambar 4. Biosintesis Asam Klorogenat. ........................................................... 12 Gambar 5. Persiapan Sampel. ............................................................................. 24 Gambar 6. Prosedur Analisis Total Fenol. .......................................................... 25 Gambar 7. Metode Ekstraksi Asam Fenolat dari Sayuran Indigenous. .............. 26 Gambar 8. Metode Hidrolisis Basa. ................................................................... 27 Gambar 9. Metode Hidrolisis Asam. .................................................................. 28 Gambar 10. Metode Pembuatan Standar Asam Fenolat. ...................................... 29 Gambar 11. Kromatogram Standar Asam Klorogenat dengan Analisis HPLC. ... 30 Gambar 12. Kromatogram Standar Asam Kafeat dengan Analisis HPLC. ......... 31 Gambar 13. Kromatogram Standar Asam Ferulat dengan Analisis HPLC. .......... 31 Gambar 14. Kromatogram Standar Campuran dengan Analisis HPLC. ............... 35 Gambar 15. Kurva Standar Campuran Asam Klorogenat. .................................... 35 Gambar 16. Kurva Standar Campuran Asam Kafeat. ........................................... 36 Gambar 17. Kurva Standar Campuran Asam Ferulat ........................................... 36 Gambar 18. Kromatogram Ekstrak Mengkudu dengan Analisis HPLC. .............. 43 Gambar 19. Ko-kromatogram Ekstrak Mengkudu dengan Standar Campuran. ... 43 Gambar 20. Kromatogram Ekstrak Mangkokan dengan Analisis HPLC. ............ 45 Gambar 21. Ko-kromatogram Ekstrak Mangkokan dengan Standar Campuran. . 45 Gambar 22. Kromatogram Ekstrak Daun Labu Siam dengan Analisis HPLC. .... 47 Gambar 23. Ko-kromatogram Ekstrak Daun Labu Siam dengan Standar Campuran. ............................................................................ 47 Gambar 24. Kromatogram Ekstrak Daun Lembayung dengan Analisis HPLC... 49 Gambar 25. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Lembayung dengan Standar Campuran. ........................................................................... 49 Gambar 26. Kromatogram Ekstrak Daun Katuk dengan Analisis HPLC. ........... 52 Gambar 27. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Katuk dengan Standar Campuran. ........................................................................... 52 vi

Gambar 28. Kromatogram Ekstrak Daun Kemangi dengan Analisis HPLC. ...... 54 Gambar 29. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Kemangi dengan Standar Campuran. ........................................................................... 54 Gambar 30. Kromatogram Ekstrak Daun Pakis dengan Analisis HPLC. ............ 56 Gambar 31. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Pakis dengan Standar Campuran. 56 Gambar 32. Kromatogram Ekstrak Daun Pohpohan dengan Analisis HPLC...... 59 Gambar 33. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Pohpohan dengan Standar Campuran. ........................................................................... 59 Gambar 34. Kromatogram Ekstrak Bunga Pepaya dengan Analisis HPLC. ....... 61 Gambar 35. Ko-Kromatogram Ekstrak Bunga Pepaya dengan Standar Campuran. ........................................................................... 61 Gambar 36. Kromatogram Ekstrak Mangkokan Putih dengan Analisis HPLC. .. 63 Gambar 37. Ko-Kromatogram Ekstrak Mangkokan Putih dengan Standar Campuran. ............................................................................ 63 Gambar 38. Kromatogram Ekstrak Kenikir dengan Analisis HPLC. .................. 65 Gambar 39. Ko-Kromatogram Ekstrak Kenikir dengan Standar Campuran. ...... 65 Gambar 40. Kromatogram Ekstrak Daun Kelor dengan Analisis HPLC............. 67 Gambar 41. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Kelor dengan Standar Campuran. ........................................................................... 67 Gambar 42. Kromatogram Ekstrak Daun Kucai dengan Analisis HPLC. ........... 70 Gambar 43. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Kucai dengan Standar Campuran. 70 Gambar 44. Kromatogram Ekstrak Daun Jambu Mete dengan Analisis HPLC. . 72 Gambar 45. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Jambu Mete dengan Standar Campuran. ........................................................................... 72 Gambar 46. Kromatogram Ekstrak Buah Takokak dengan Analisis HPLC. ....... 74 Gambar 47. Ko-Kromatogram Ekstrak Buah Takokak dengan Standar Campuran. ........................................................................... 74 Gambar 48. Kromatogram Ekstrak Antanan dengan Analisis HPLC. ................. 77 Gambar 49. Ko-Kromatogram Ekstrak Antanan dengan Standar Campuran. ..... 77 Gambar 50. Kromatogram Ekstrak Krokot dengan Analisis HPLC. ................... 79 Gambar 51. Ko-Kromatogram Ekstrak Krokot dengan Standar Campuran. ....... 79 Gambar 52. Kromatogram Ekstrak Antanan Beurit dengan Analisis HPLC . ..... 81 vii

Gambar 53. Ko-Kromatogram Ekstrak Antanan Beurit dengan Standar Campuran. ........................................................................... 81 Gambar 54. Kromatogram Ekstrak Daun Ginseng dengan Analisis HPLC. ....... 83 Gambar 55. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Ginseng dengan Standar Campuran. ........................................................................... 83 Gambar 56. Kromatogram Ekstrak Bunga Kecombrang dengan Analisis HPLC. ................................................................................ 85 Gambar 57. Ko-Kromatogram Ekstrak Bunga Kecombrang dengan Standar Campuran. ........................................................................... 85 Gambar 58. Kromatogram Ekstrak Daun Beluntas dengan Analisis HPLC. ....... 88 Gambar 59. Ko-Kromatogram Ekstrak Daun Beluntas dengan Standar Campuran. ........................................................................... 88 Gambar 60. Kromatogram Ekstrak Bunga Turi dengan Analisis HPLC. ............ 90 Gambar 61. Ko-Kromatogram Ekstrak Bunga Turi dengan Standar Campuran. 90 Gambar 62. Kromatogram Ekstrak Terubuk dengan Analisis HPLC. ................. 92 Gambar 63. Ko-Kromatogram Ekstrak Terubuk dengan Standar Campuran. ..... 92 Gambar 64. Kromatogram Ekstrak Kedondong Cina dengan Analisis HPLC. ... 95 Gambar 65. Ko-Kromatogram Ekstrak Kedondong Cina dengan Standar Campuran. ........................................................................... 95 Gambar 66. Biplot Hubungan Total Fenol, Asam Klorogenat, Asam Kafeat, Asam Ferulat, Myricetin, Luteolin, Quercetin, Apigenin, dan Kaempferol............................................................................. 109 Gambar 67. Biplot Hubungan Antara Total Fenol, Total Asam Fenolat, dan Total Flavonoid. .......................................................................112

viii

DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.

Gambar Dua Puluh Empat Sayuran Indigenous Indonesia. ........120

Lampiran 2.

Uji Tukey’s Kadar Air Sayuran Indigenous Indonesia. ..............122

Lampiran 3.

Uji Tukey’s Total Fenol Sayuran Indigenous Indonesia. ............124

Lampiran 4.

Uji Tukey’s Asam Fenolat Pada Sayuran Indigenous Indonesia......................................................................................126

Lampiran 5.

Uji Tukey’s Asam Klorogenat Sayuran Indigenous Indonesia. ..128

Lampiran 6.

Uji Tukey’s Asam Kafeat Sayuran Indigenous Indonesia. .........130

Lampiran 7.

Uji Tukey Asam Ferulat Sayuran Indigenous Indonesia. ............132

Lampiran 8.

Kadar Air Sayuran Indigenous Indonesia....................................134

Lampiran 9.

Kadar Air Freeze Drier Sayuran Indigenous Indonesia. .............137

Lampiran 10. Kurva Standar Total Fenol . ........................................................140 Lampiran 11. Total Fenol Sayuran Indigenous Indonesia. ................................141 Lampiran 12. Asam Klorogenat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran. ......................................147 Lampiran 13. Asam Kafeat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran. ......................................153 Lampiran 14. Asam Ferulat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran. ......................................159 Lampiran 15. Asam Klorogenat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran. ..................................165 Lampiran 16. Kafeat Acid Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran. ..................................171 Lampiran 17. Asam Ferulat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran. ..................................177

ix

I.

PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG Indonesia merupakan negara yang kaya sumber daya alam baik hasil perikanan, pertanian, maupun perkebunan. Tanaman sayuran di Indonesia sangat banyak dan bervariasi. Akan tetapi masih banyak dari sayuran tersebut yang belum dimanfaatkan dan diidentifikasi secara ilmiah kandungan senyawa yang bermanfaat untuk kesehatan tubuh manusia. Pemanfaatannya masih terbatas hanya sebagai lalapan maupun campuran gulai. Sayuran sangat diperlukan oleh tubuh untuk memenuhi asupan vitamin, mineral, dan serat seseorang setiap harinya. Jawa Barat merupakan salah satu provinsi penghasil sayur-sayuran yang memiliki peran cukup signifikan dalam menghasilkan jenis sayur-sayuran di Indonesia.

Spesies

sayuran

asli

Indonesia

yang

berasal

dari

daerah/wilayah/ekosistem tertentu, termasuk spesies pendatang dari wilayah geografis lain tetapi telah berevolusi dengan iklim dan geografis wilayah Indonesia dinamakan sayuran indigenous (Anonim, 2007). Beberapa balai penelitian seperti Balai Penelitian Tanaman Sayuran (Balitsa) bekerjasama dengan Asian Vegetables Research Development Center (AVRDC) telah melakukan pendataan terhadap sayuran ini terutama yang mempunyai kandungan gizi dan non gizi yang bermanfaat secara fisiologis bagi tubuh manusia yaitu vitamin A, zat besi, dan antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa yang sangat baik untuk menangkap radikal bebas. Keberadaan senyawa antioksidan ini akan mencegah penyakit kanker maupun penyakit degeneratif lainnya. Salah satu senyawa antioksidan yang penting yaitu senyawa polifenol. Senyawa polifenol yang ada pada sayuran, buah-buahan, dan teh dapat mencegah penyakit degeneratif termasuk kanker melalui aktivitas antioksidatif dan/atau modulasi fungsi beberapa protein. Contohnya konsumsi senyawa polifenol dapat mereduksi kematian akibat penyakit jantung koroner (Hertog, 1995) dengan cara menekan oksidasi lipoprotein berat jenis rendah (Meyer, 1998). Polifenol menunjukkan sifat antagonis dengan reseptor karsinogenesis seperti faktor pertumbuhan

1

asepidermal (Agullo, 1997), dan reseptor arylhidrokarbon (Ashida et al., 2000). Polifenol mengatur sekresi senyawa sitokin, meregulasi siklus sel (Frey et al., 2001) dan ekspresi protein kinase dalam proliferasi sel tumor (Kobuchi et al., 1999). Senyawa polifenol juga menginduksi ekspresi enzim antikarsinogenik (Williamson et al., 1996). Dalam percobaan pada hewan, konsumsi senyawa polifenol dapat menekan karsinogenesis dari beberapa karsinogen (Yang et al., 2001). Kemampuan yang dimiliki oleh polifenol untuk menangkap radikal bebas serta memiliki aktivitas antioksidan mempunyai peranan yang penting untuk melindungi sel dan jaringan dari stres oksidatif dan efek biologis lain yang berhubungan dengan penyakit kronis (Rimbach et al., 2005). Senyawa polifenol dapat menekan efek di dalam usus. seperti efek dalam mengikat besi, menangkap nitrogen reaktif, klorin, dan spesies oksigen, serta menghambat cyclooxygenases dan lipoxygenases (Halliwell et al., 2005). Salah satu senyawa polifenol yang banyak terdapat di sayuran yaitu flavonoid dan asam fenolat. Batari (2007) telah melakukan penelitian terhadap sebelas jenis sayuran indigenous Jawa Barat yaitu kenikir, beluntas, mangkokan, kemangi, pohpohan, katuk, antanan, ginseng, kecombrang, kedondong cina, dan krokot mengenai kandungan senyawa flavonoid (Flavonol dan Flavone) pada sayuran tersebut. Selain itu Rahmat (2009) juga telah melakukan penelitian mengenai kandungan senyawa flavonoid (Flavonol dan Flavone) pada tiga belas jenis sayuran indigenous Jawa Barat yaitu mengkudu, mangkokan putih, labu siam, lembayung, pakis, pepaya, kelor, kucai, turi, jambu mete, terubuk, takokak, dan antanan beurit. Pada penelitian ini dilakukan identifikasi senyawa asam fenolat yang terdapat pada sayuran indigenous Indonesia yang berasal dari Jawa Barat. Asam fenolat memiliki dua jenis golongan yaitu golongan asam hidroksinamat dan golongan asam hidroksibenzoat. Asam fenolat yang dominan terdapat pada sayuran adalah golongan asam

hidroksinamat (Shahidi dan Naczk, 1995).

Bentuk senyawa asam hidroksinamat yang terdapat pada sayuran yaitu asam pkoumarat, asam ferulat, asam kafeat, dan asam klorogenat. Sedangkan menurut hasil penelitian Sakakibara et al. (2003) senyawa asam fenolat yang banyak terdapat pada sayuran yaitu asam ferulat, asam kafeat, dan asam klorogenat.

2

Dengan demikian pada penelitian ini diidentifikasi keberadaan senyawa asam ferulat, asam kafeat, dan asam klorogenat pada sayuran indigenous Indonesia yang berasal dari Jawa Barat. Jenis sayuran yang digunakan pada penelitian ini adalah sayuran lokal yang banyak dan sering dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia. Bagian tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah bagian yang sering dikonsumsi oleh masyarakat. Sayuran yang digunakan dalam penelitian ini adalah sayuran yang digunakan juga oleh Batari (2007) yaitu kenikir, beluntas, mangkokan, kemangi, pohpohan, katuk, antanan, ginseng, kecombrang, kedondong cina, dan krokot maupun yang digunakan oleh Rahmat (2009) yaitu mengkudu, mangkokan putih, labu siam, lembayung, pakis, pepaya, kelor, kucai, turi, jambu mete, terubuk, takokak, dan antanan beurit.

B. TUJUAN Tujuan dari penelitian ini adalah mengidentifikasi kandungan komponen asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia.

C. MANFAAT Manfaat penelitian ini adalah mendapatkan data mengenai kandungan komponen asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia sehingga dapat dimanfaatkan lebih lanjut.

3

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. SAYURAN INDIGENOUS Sayuran indigenous Indonesia adalah spesies sayuran asli Indonesia yang berasal dari daerah/wilayah/ekosistem tertentu, termasuk spesies pendatang dari wilayah geografis lain tetapi telah berevolusi dengan iklim dan geografis wilayah Indonesia (Anonim, 2007). Sayuran ini biasa digunakan oleh masyarakat sebagai lalapan, campuran gulai, maupun obat. Perkembangan budaya dan teknologi menyebabkan perkembangan sayuran indigenous menjadi terdesak, maka potensi sayuran ini harus digali dan dikaji kembali untuk mendapatkan manfaat yang lebih baik dalam meningkatkan gizi keluarga. Pada penelitian ini diidentifikasi kandungan asam fenolat dari sayuran indigenous tersebut. Sayur yang digunakan adalah sayursayuran yang banyak dikonsumsi oleh masyarakat dan banyak tumbuh di Indonesia yang berasal dari provinsi Jawa Barat. Bagian dari sayur-sayuran indigenous yang digunakan dalam penelitian ini adalah bagian yang biasa dikonsumsi (dapat berupa batang, daun, bunga atau seluruh bagian tanaman). Sayuran tersebut diantaranya adalah Kenikir (Cosmos caudatus H.B.K), beluntas (Pluchea indica (L.) Less.), mangkokan putih (Nothopanax scutellarium (Burm.f.) Fosb.), mangkokan (Nothopanax scutellarius (Burm.f.) Merr.), kendondong cina (Polyscias pinnata), kecombrang (Etlingera elatior (Jack) R.M.Sm.), kemangi (Ocimum americanum L.), katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr.), antanan (Centelia asiatica (L.) Urb.), antanan beurit (Hydrocotyle sibthorpioides Lmk.), pohpohan (Pilea melastomoides (Poir.) Bl.), ginseng (Talinum triangulare (Jacq.) Willd.), krokot (Portulaca oleracea L.), turi (Sesbania grandiflora (L.) Pers.), kucai (Allium schoenoprasum L.), takokak (Solanum torvum Swartz), kelor (Moringa pterygosperma Gaertn.), mengkudu (Morinda citrifolia L.), lembayung (Vigna unguiculata (L.) Walp.), terubuk (Saccharum edule Hassk.), labu siam (Sechium edule (Jacq.) Swartz.), pepaya (Carica papaya L.), jambu mete (Anacardium occidentale L.), dan pakis (Arcypteris irregularis (C.Presl) Ching.).

4

Batari (2007) telah melakukan penelitian terhadap sebelas sayuran indigenous Indonesia yaitu kenikir, beluntas, mangkokan, kemangi, pohpohan, katuk, antanan, ginseng, kecombrang, kedondong cina, dan krokot. Penelitian Batari (2007) menunjukkan bahwa kesebelas sayuran indigenous Jawa Barat tersebut mengandung senyawa flavonoid (flavonol dan flavones), lihat Tabel 1. Rahmat (2009) telah melakukan penelitian yang serupa pada tiga belas sayuran indigenous Jawa Barat yaitu mengkudu, mangkokan putih, labu siam, lembayung, pakis, pepaya, kelor, kucai, turi, jambu mete, terubuk, takokak, dan antanan beurit. Penelitian Rahmat (2009) menunjukkan bahwa ketiga belas sayuran indigenous Jawa Barat tersebut mengandung senyawa flavonoid (flavonol dan flavone), lihat Tabel 2. Senyawa flavonoid adalah salah satu antioksidan yang penting bagi tubuh manusia untuk menjaga kesehatan. Sayuran indigenous di atas mengandung senyawa flavonoid (antioksidan) sehingga baik untuk menjaga kesehatan tubuh manusia. Tabel 1. Kandungan Senyawa Flavonoid pada Sebelas Sayuran Indigenous Jawa Barat (mg/100 gram sampel segar) Flavonoid (mg/100 gram sampel segar) Sampel

Flavonol Myricetin Quercetin

Flavon Kaempferol

Luteolin

Apigenin

Total Fenol (mg/100 gram sampel segar)

Kenikir

-

51.28

0.90

-

-

150.01

Beluntas

0.90

5.21

0.28

-

-

83.12

Mangkokan

-

3.69

1.74

-

-

94.30

Kecombrang

-

1.18

-

-

-

80.61

Kemangi

-

1.89

2.47

2.12

0.74

81.18

Katuk

-

4.50

138.14

-

-

149.32

Kedondong Cina

-

28.48

23.71

-

-

79.06

0.13

12.31

8.57

-

-

46.32

Pohpohan

-

1.76

0.25

0.33

-

70.11

Daun ginseng

-

0.41

3.52

-

-

48.91

Krokot

-

0.30

-

-

-

33.46

Antanan

Ket : : Tidak terdeteksi Sumber : Batari (2007)

5

Tabel 2. Kandungan Senyawa Flavonoid pada Tiga Belas Sayuran Indigenous Jawa Barat (mg/100 gram sampel segar) Konsentrasi Flavonoid (mg/100 gram sampel segar) Flavonol Flavon Myricetin

Quercetin

Kaempferol

Luteolin

Apigenin

Total Fenol (mg/100 gram sampel segar)

2.69 2.30 -

2.76 4.46 0.66 95.84

18.47 7.65 20.79

1.32

-

31.62 35.04 92.91 133.59

-

23.67

9.75

-

-

39.23

-

27.35 0.44 12.67

3.33 12.95

-

12.97 6.87

49.53 23.73 74.19

12.49

13.81

9.72

-

-

74.27

8.28 1.57

18.85 125.39 7.42 37.51

5.47 9.91 2.10 10.85

-

11.95 -

44.47 614.72 34.57 121.06

Sampel

Bunga turi Kucai Takokak Daun kelor Pucuk mengkudu Lembayung Terubuk Mangkokan Daun labu siam Bunga papaya Pucuk mete Pakis Antanan beurit Ket :

: Tidak terdeteksi Sumber : Rahmat (2009)

B. ASAM FENOLAT (PHENOLIC ACID) Senyawa asam fenolat mendapatkan perhatian yang lebih dalam beberapa tahun terakhir ini karena pengaruhnya terhadap kesehatan manusia. Sebagai polifenol, asam fenolat merupakan antioksidan yang sangat kuat dan memiliki aktivitas antibakteri, antivirus, antikarsinogenik, antiinflamasi, dan aktivitas vasodilatory (Duthie et al., 2000). Selain itu asam fenolat juga mempunyai peranan untuk melindungi dari kanker dan penyakit jantung (Manach, 2004). Asam fenolat merupakan metabolit sekunder yang sering ditemukan pada tanaman. Senyawa asam fenolat mempunyai peranan yang penting pada tumbuhan yaitu sebagai bahan pendukung dinding sel (Wallace dan Fry, 1994). Asam fenolat membentuk bagian integral pada struktur dinding sel, umumnya dalam bentuk bahan polymeric seperti lignin, membantu proses mekanik, dan halangan bagi invasi mikroba. Lignin merupakan senyawa organik yang paling banyak di bumi setelah selulosa (Wallace dan Fry, 1994). Turunan asam fenolat terdiri dari dua jenis yaitu asam hidroksibenzoat dan asam 6

hidroksinamat. Perbedaan kedua turunan dari senyawa asam fenolat ini terletak pada pola hidroksilasi dan metoksilasi cincin aromatiknya. Struktur kimia kedua senyawa tersebut dapat dilihat pada Gambar 1. Aktivitas biologis yang penting pada senyawa benzoat, klorogenat, kafeat, ferulat, dan asam galat adalah kemampuan aktivitas sitoprotektifnya dan kemampuan dalam menghambat karsinogenesis, mutagenesis, dan generasi tumor

(Birosova,

2005). (a)

(b)

Gambar 1. Struktur Kimia : (a) turunan asam benzoat (b) turunan asam sinamat (Mattila et al., 2002) Senyawa asam fenolat pada tumbuhan disintesis oleh tumbuhan melalui jalur Shikimate (Häkkinen, 2000). Jalur shikimate merupakan hasil dari biosintesis senyawa chorismate yang dapat

berfungsi sebagai prekursor

terbentuknya biosintesis senyawa aromatik asam amino triptofan, fenilalanin, dan tirosin. Jalur shikimate biasa terdapat pada tumbuhan dan mikroorganisme. Shikimate disintesis dari substrat fosfoenolpiruvat dan eritrosa 4-fosfat. Kedua prekursor ini merupakan hasil dari jalur glikolisis dan jalur fosfat pentosa dan mengalami kondensasi menjadi 3-deoxy-D-arabino-heptulosonate 7-phosphate (DAHP) oleh enzim DAHP synthase. Tahapan selanjutnya yaitu pembentukan 3-dehydroquinate oleh enzim 3-dehydroquinate synthase, 3-dehydroshikimate oleh enzim 3-dehydroquinate dehydratase, dan terakhir shikimate oleh enzim shikimate dehydrogenase. Shikimate kemudian dirubah menjadi shikimate 3phosphate oleh enzim shikimate kinase, dan setelah itu menjadi 5-

7

enolpyruvylshikimate 3-phosphate (EPSP) oleh enzim 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase. EPSP kemudian dirubah menjadi chorismate oleh enzim chorismate synthase. Chorismate adalah cabang untuk membentuk asam amino aromatik, yaitu triptofan pada bagian yang satu, dan fenilalanin serta tirosin pada bagian yang lainnya. Jika diperhatikan secara seksama pada bagian akhir jalur shikimate, biosintesis fenilalanin dan tirosin terdapat pada Gambar 2 karena mereka merupakan prekursor kelas penting yaitu senyawa asam fenolat, fenilpropanoid, dan beberapa kelas senyawa asam fenolat lainnya. Pada proses ini membutuhkan perubahan chorismate menjadi prephenate yang dikatalisis oleh chorismate mutase dan arogenate yang dikatalisis oleh prephenat aminotransferase. Enzim arogenate dehydratase merubah arogenate menjadi fenilalanin, sedangkan enzim arogenate dehydrogenase menghasilkan tirosin. Jalur biosintesis shikimate (Shikimate Pathway) pada tumbuhan dapat dilihat pada Gambar 2. Pembentukan asam hidroksinamat (kafeat, ferulat, 5-hydroxyferrulic, dan asam sinapat) dari asam p-koumarat membutuhkan dua jenis reaksi yaitu hidroksilasi dan metilasi. Adanya pelekatan Gugus Hidroksil pada asam pkoumarat akan membentuk asam kafeat (Gambar 3), pembentukan ini dikatalisis oleh monophenol mono-oxygenases, grup enzim tanaman yang sudah sangat terkenal (Macheix et al., 1990). Metilasi pada asam kafeat akan membentuk asam ferulat, yang bersamaan dengan asam p-koumarat, merupakan prekursor lignin (Gambar 3). Metilasi ini dikatalisis oleh omethyltransferase (Macheix et al., 1990). Asam kafeat merupakan substrat untuk 5-hydroxyferrulic acid, yang akan menghasilkan asam sinapat sebagai hasil dari o-metilasi. Pembentukan turunan asam hidroksinamat membutuhkan pembentukan hydroxycinnamte-CoAs,

contoh

p-coumaroyl-CoA

hydroxycinnamoyl-CoA

ligase

atau

hydroxycinnamate-CoAs

masuk

kedalam

oleh

dikatalisis

oglycosyl berbagai

oleh

transferase.

macam

reaksi

phenylpropanoid. (Gambar 3), seperti kondensasi dengan malonyl-CoA membentuk flavonoid atau reduksi NADPH-dependent membentuk lignin. Selain itu hydroxycinnamate-CoAs dapat berkonjugasi dengan asam organik

8

(Strack, 1997). Di biosintesis turunan gula asam hidroksinamat, transfer glukosa dari uridine diphosphoglucose menjadi asam hidroksinamat dikatalisis oleh glucosyl transferase (Strack, 1997).

Ket: Enzim yang terlibat dalam jalur shikimate yaitu: (a) DAHP synthase (E.C. 2.5.1.54), (b) 3-dehydroquinate synthase (E.C. 4.2.3.4), (c) 3-dehydroquinate dehydratase (E.C. 4.2.1.10), (d) shikimate dehydrogenase (E.C. 1.1.1.25), (e) shikimate kinase (E.C 2.7.1.71), (f) 5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase (E.C. 2.5.1.19), (g) chorismate synthase (E.C. 4.2.3.5), (h) chorismate mutase (E.C. 5.4.99.5), (i) prephenate aminotransferase (E.C. 2.6.1.78 and E.C. 2.6.1.79), (j) arogenate dehydratase (E.C. 4.2.1.91), dan (k) arogenate dehydrogenase (E.C. 1.3.1.43, E.C. 1.3.1.78, E.C. 1.3.1.79).

Gambar 2. Jalur shikimate (Vermerris dan Nicholson, 2006)

9

Banyak jalur untuk biosintesis asam hidroksibenzoat pada tanaman, jalur pembentukan ini tergantung dari jenis tanamannya. Asam hidroksibenzoat dapat dibentuk dari jalur shikimate (Gambar 3), terutama dari dehydroshikimic acid. Reaksi ini merupakan reaksi utama untuk pembentukan gallic acid (Haddock et al., 1982). Selain itu asam hidroksibenzoat juga dapat dibentuk melalui degradasi asam hidroksinamat, sama seperti proses β oksidasi pada asam lemak, senyawa antaranya yaitu cinnamoyl-CoA esters (Macheix et al., 1990) (Gambar 3). Asam hidroksibenzoat dapat juga dibentuk melalui degradasi senyawa flavonoid (Strack, 1997). Penjelasan lebih detail mengenai proses pembentukan hidroksibenzoat, hidroksinamat, dan flavonoid melalui jalur shikimate dapat dilihat pada

Gambar 3. Senyawa asam klorogenat

merupakan senyawa ester dari gabungan senyawa asam kafeat dan senyawa quinic acids. Secara ringkas pembentukan asam klorogenat dapat dilihat pada Gambar 4. Asam hidroksibenzoat pada tumbuhan biasanya terdapat dalam bentuk terikat. Asam hidroksibenzoat merupakan komponen struktur kompleks seperti lignin dan tannin yang dapat dihidrolisis (Shahidi et al., 1995). Asam hidroksibenzoat juga ditemukan dalam bentuk asam organik dan turunan gula (Schuster

dan

Herrmann,

1985).

Secara

umum

kandungan

asam

hidroksibenzoat di dalam tumbuhan rendah kecuali blackberry, raspberry (Morsel dan Herrmann, 1974), black currant, red currant (Stohr dan Herrmann, 1975a), dan strawberry (Stohr dan Herrmann, 1975b). Senyawa hidroksibenzoat banyak terdapat pada sayuran seperti bawang (Schmidtlein dan Herrmann, 1975a) dan dengan komponen asam

horseradish (Schmidtlein dan Herrmann, 1975b), hidroksibenzoat yang dominan yaitu senyawa

protocatechuic, p-hydroxybenzoic, dan gallic acid. Asam hidroksinamat banyak terdapat di dalam bahan pangan yang berasal dari tumbuh-tumbuhan. Asam hidroksinamat biasanya terdapat dalam bentuk terikat dan jarang ditemukan dalam bentuk bebasnya. Proses pengolahan buah dan sayuran dengan (Azar et al., 1987), sterilisasi (Rivas dan Luh, 1968) dan fermentasi dalam pembuatan anggur (Singleton, 1980) berkontribusi dalam pembentukan asam hidroksinamat bebas di dalam produk.

10

Keterangan: : Reaksi yang dikatalisis oleh satu jenis enzim

CA4H CHS 4CL PAL

: Reaksi yang dikatalisis oleh lebih dari satu jenis enzim : cinnamic acid 4-hydroxylase : chalcone synthase : 4-coumarate: coenzyme a ligase : phenylalanine ammonialyase

Gambar 3. Biosintesis hidroksibenzoat, hidroksinamat, dan flavonoid (Häkkinen, 2000)

11

Gambar 4. Biosintesis asam klorogenat (Cadenas dan Packer, 2002)

Senyawa asam kafeat merupakan asam hidroksinamat yang banyak ditemukan pada buah-buahan. Asam kafeat banyak ditemukan pada plums, apel, apricots, blueberries, dan tomat dengan kandungan asam kafeat lebih dari 75 %. Senyawa asam p-koumarat merupakan senyawa asam hidroksinamat yang banyak terdapat pada buah sitrus dan nanas (Macheix et al., 1989). Mattila dan

HellstrÖm

(2007) menambahkan bahwa senyawa

asam

hidroksinamat yang banyak ditemukan yaitu kafeat, p-koumarat, dan asam ferulat, biasanya terdapat di bahan pangan dalam bentuk ester sederhana dengan quinic acid atau glukosa. Bentuk terikat dari senyawa asam hidroksinamat ditemukan dalam bentuk ester asam hidroksinamat yaitu quinic,

12

shikimic, tartaric acids, dan senyawa turunan gulanya. Mattila dan HellstrÖm (2007) menambahkan bahwa asam hidroksinamat yang terkenal dalam bentuk terikat yaitu asam klorogenat yang merupakan gabungan dari asam kafeat dan quinic acids. Sedangkan menurut hasil penelitian (Sakakibara et al., 2003) senyawa asam fenolat yang banyak terdapat pada sayuran yaitu asam ferulat, asam kafeat, dan asam klorogenat.

C. IDENTIFIKASI SENYAWA ASAM FENOLAT Analisis kimia dengan metode kromatografi didasarkan pada pemisahan komponen yang terpartisi diantara dua fase dalam suatu kesetimbangan dinamis dan mengalir. Proses ini dilakukan dengan menggerakkan suatu fase secara mekanis (fase gerak), relatif terhadap fase lainnya. Secara teori pemisahan kromatografi yang paling baik akan diperoleh jika fase diam mempunyai luas permukaan sebesar-besarnya, sehingga memastikan kesetimbangan yang baik antar fase. Persyaratan kedua agar pemisahan baik adalah fase gerak harus bergerak dengan cepat sehingga difusi sekecil-kecilnya. Untuk memperoleh permukaan fase diam yang luas, pada sebagian besar sistem kromatografi digunakan penjerap atau penyangga berupa serbuk halus. Untuk memaksa fase gerak bergerak lebih cepat melalui fase diam yang terbagi pada serbuk halus harus digunakan tekanan tinggi. Dengan dipenuhinya kedua persayaratan tersebut, diperoleh teknik kromatografi cair yang paling kuat yakni HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Jadi pada HPLC fase gerak dialirkan dengan cepat dan hasilnya dideteksi dengan instrumen. Komponen utama dari sistem HPLC adalah pompa (tekanan tetap dan volume tetap), penginjeksi, kolom (ekternal dan internal), detektor, dan rekorder atau sistem data yang terintegrasi (Rounds dan Gregor, 2003). Parameter-parameter yang akan mempengaruhi sistem kerja pada HPLC antara lain diameter dari kolom HPLC, ukuran partikel, ukuran lubang pada fase diam, dan tekanan pompa. Terdapat lima tipe HPLC yaitu normal phase chromatography, reversed phase

chromatography,

ion-exchange

chromatography,

size-exclusion

13

chromatography, dan affinity chromatography (Rounds dan Gregor, 2003). Pada penelitian ini, tipe HPLC yang digunakan adalah reversed phase chromatography (RP-HPLC). Fase diam dari HPLC jenis ini adalah senyawa nonpolar, sedangkan fase geraknya polar. Karena hal tersebutlah maka komponen yang akan keluar dahulu adalah komponen yang polar dibandingkan yang nonpolar. Lebih dari 70% teknik pemisahan dengan metode HPLC menggunakan tipe reversed phase. Beberapa contoh teknik pemisahan yang menggunakan metode RP-HPLC adalah analisis protein dari tanaman, protein dari biji-bijian, analisis vitamin larut air dan larut lemak, pemisahan karbohidrat, dan penentuan unsur-unsur pokok dari minuman ringan. reversed phase HPLC dengan metode deteksi yang sangat bervariasi, digunakan untuk menganalisis lemak (Rounds dan Gregor, 2003). Antioksidan, seperti butylated hydroxylanisole (BHA) dan butylated hydroxytoluene (BHT), dapat diekstrak dari bahan pangan kering dan dianalisis dengan menggunakan detektor UV dan fluoresens secara bersamaan. Bahan pangan basah, pigmen (seperti klorofil, karotenoid, dan antosianin), dan komponen Asam Fenolat (seperti vanili) dapat pula dianalisis dengan menggunakan metode RP-HPLC (Rounds dan Gregor, 2003). Kolom reversed phase chromatography lebih sulit untuk rusak dibandingkan dengan kolom silika normal. Hal ini dikarenakan kolom RPHPLC terdiri atas alkil turunan silika dan tidak pernah digunakan dengan larutan basa (karena larutan basa akan menghancurkan ikatan silika). Kolom RP-HPLC dapat digunakan dengan larutan asam tetapi tidak boleh kontak terlalu lama karena asam dapat menimbulkan korosi pada logam yang ada dalam peralatan HPLC. Kandungan logam pada kolom HPLC harus dijaga agar tetap rendah supaya dapat memberikan hasil terbaik pada pemisahan komponen. Salah satu cara untuk mengetahui kandungan logam di dalam kolom HPLC adalah dengan menginjeksikan campuran dari 2,2’- dan 4,4’bipiridin. Bila terdapat ion logam di permukaan silika, maka senyawa 2,2’bipiridin akan mengkelat logam tersebut dan peak dari senyawa yang akan

14

diidentifikasi menjadi tidak teratur sehingga dapat memberikan hasil yang tidak sesuai. Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mendeteksi komponen fenolik dalam bahan pangan dengan metode HPLC. Komponen fenolik merupakan senyawa aromatik, oleh karena itu, senyawa tersebut akan memberikan penyerapan yang baik pada panjang gelombang sinar UV. Asam fenolat merupakan bagian dari senyawa fenolik. Panjang gelombang yang digunakan untuk menentukan komponen asam fenolat yaitu 290 nm untuk asam kafeat, asam ferulat, dan asam klorogenat. (Singh et al., 2008). Fase gerak yang digunakan dalam identifikasi senyawa asam fenolat dengan HPLC adalah metanol-0.4% asam asetat (80:20, v/v) (Singh et al., 2008). Pemisahan senyawa asam fenolat dilakukan menggunakan kolom RP C18 (4.6 x 150 mm, 5µm) dengan kolom guard C-18. Fase gerak yang digunakan yaitu metanol-0.4% asam asetat (80:20, v/v), laju alir 1 mL/menit, panjang gelombang 290 nm, dan kondisi isokratik (Singh et al., 2008). Keuntungan utama dari HPLC adalah kemampuannya untuk menangkap komponen dengan stabilitas panas yang terbatas ataupun yang bersifat volatil. HPLC merupakan metode yang sangat sensitif, tepat, selektif, dan memiliki tingkat

otomatisasi

yang

tinggi,

sehingga

lebih

sederhana

dalam

pengoperasiannya. Di samping itu, HPLC banyak digunakan untuk analisis karena kemudahan injeksi, deteksi, dan pengolahan data serta dapat digunakan untuk berbagai macam sampel seperti sampel cairan, padatan yang dilarutkan, maupun sampel yang labil terhadap pemanasan. Modern HPLC telah banyak diaplikasikan seperti pemisahan, identifikasi, pemurnian, dan penghitungan komponen yang bervariasi.

15

III. BAHAN DAN METODE

A. BAHAN DAN ALAT 1. Bahan Bahan-bahan yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah bahan untuk membuat larutan standar asam fenolat, bahan untuk membuat ekstrak sayuran indigenous, dan bahan untuk analisis kimia. Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan larutan standar adalah standar asam kafeat (Sigma-Aldrich), standar asam ferulat (Sigma-Aldrich), dan standar asam klorogenat (Sigma-Aldrich), water for chromatography (MERCK), dan methanol HPLC grade (MERCK). Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan ekstrak sayuran adalah dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia yang berasal dari provinsi Jawa Barat yaitu kenikir, kecombrang, kemangi, katuk, pohpohan, ginseng, takokak, lembayung, terubuk, labu siam, pepaya, mete, pakis, beluntas, mangkokan putih, mangkokan, kendondong cina, antanan, antanan beurit, krokot, turi, kelor dan mengkudu. Bagian yang digunakan dalam penelitian ini bisa berupa daun, batang, dan seluruh bagian tanaman, methanol (MERCK), BHA (Sigma-Aldrich), asam asetat (MERCK), dan aquadest. Kedua puluh empat jenis sayuran tersebut telah berhasil diidentifikasi oleh pihak “Herbarium Bogoriense”, Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor dengan Kepala Bidang Botani LIPI adalah Dr. Eko Baroto Walujo, APU. Tabel 3 menunjukkan secara lengkap kedua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia yang berasal dari provinsi Jawa Barat, bagian yang digunakan dalam penelitian, serta daerah tempat asal sayuran indigenous tersebut diperoleh. Bahan-bahan yang digunakan untuk analisis kimia adalah methanol (MERCK), asam asetat (MERCK), alufo, water for chromatography (MERCK), folin ciocalteu (MERCK), Na2CO3 (MERCK), aquadest, standar asam galat (Sigma-Aldrich), dan etanol (MERCK).

16

Tabel 3. Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Indonesia

Spesies

Nama Indonesia

Bagian yang digunakan

Sumber Kebun Petani Dramaga Kebun Petani Dramaga

Morinda citrifolia L.

Mengkudu

Daun Muda

Nothopanax scutellarius (Burm.f.) Merr.

Mangkokan

Daun Muda

Sechium edule (Jacq.) Swartz.

Labu Siam

Daun Muda

Pasar Bogor

Vigna unguiculata (L.) Walp.

Lembayung

Daun Muda

Pasar Bogor

Sauropus androgynus (L.) Merr.

Katuk

Daun Muda

Pasar Bogor

Ocimum americanum L.

Kemangi

Daun Muda

Pasar Bogor

Arcypteris irregularis (C.Presl) Ching

Pakis

Daun Muda

Pasar Bogor

Pilea melastomoides

Pohpohan

Daun Muda

Pasar Bogor

Carica papaya L.

Pepaya

Bunga

Pasar Bogor

Nothopanax scutellarium (Burm.f.) Fosb.

Mangkokan Putih

Daun Muda

Kebun Petani Dramaga

Cosmos caudatus H.B.K.

Kenikir

Daun Muda

Pasar Bogor

Moringa pterygosperma Gaertn.

Kelor

Daun Muda

Kebun Petani Dramaga

Allium schoenoprasum L.

Kucai

Seluruh Bagian

Pasar Bogor

Anacardium occidentale L.

Jambu Mete

Daun Muda

Pasar Bogor

Solanum torvum Swartz.

Takokak

Buah

Pasar Bogor

Centelia asiatica (L.) Urb.

Antanan

Seluruh Bagian

Portulaca oleracea L.

Krokot

Daun dan Batang

Hydrocotyle sibthorpioides Lmk.

Antanan Beurit

Seluruh Bagian

Talinum triangulare (Jacq.) Willd.

Ginseng

Daun Muda

Pasar Bogor

Etlingera elatior (Jack) R.M.Sm.

kecombrang

Bunga

Pasar Bogor

Pluchea indica (L.) Less.

Beluntas

Daun Muda

Sesbania grandiflora (L.) Pers.

Turi

Bunga

Saccharum edule Hassk

Terubuk

Bunga

Pasar Bogor

Polyscias pinnata

Kedondong cina

Daun Muda

Kebun Petani Dramaga

Kebun Petani Dramaga Kebun Petani Dramaga Kebun Petani Dramaga

Kebun Petani Dramaga Kebun Petani Dramaga

17

2. Alat Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat untuk membuat larutan standar, ekstrak sayuran, dan analisis. Pada pembuatan larutan standar alat-alat yang digunakan adalah labu takar, gelas ukur, pipet mohr, pipet tetes, neraca analitik, dan spatula. Alat-alat yang digunakan untuk membuat ekstrak sayuran adalah freezer, blender, freeze dryer, Buchi Rotavapor, neraca analitik, blender kering, labu takar, gelas piala, gelas ukur, pipet mohr, pipet tetes, spatula, baskom, botol gelap, ultrasonic Branson 3510,VELP Scientific vortex, IEC Centra-8 centrifuge, dan pisau. Pada proses analisis, alat-alat yang digunakan adalah High Performance Liquid Chromatography (HPLC) UV Vis Hewlet Packard Agilent 1100 series. Kolom HPLC RP C-18 (4.6 x 150 mm, 5µm), alat injektor sampel HPLC, filter syringe 0.45µm (PTFE), vial, oven, neraca analitik, desikator, VELP Scientific vortex, labu takar, gelas piala, tabung reaksi, spatula, gegep,

ultrasonic

Branson

3510,

Shimadzu

UV-2450

UV

Vis

spectrophotometer, IEC Centra-8 centrifuge, dan cawan alumunium.

B. METODE Penelitian ini dilakukan dalam beberapa tahap yaitu persiapan sampel, pembuatan kurva standar dan Limit of Detection (LOD), analisis asam fenolat dengan HPLC, serta analisis statistik. Analisis asam fenolat dengan HPLC dilakukan secara dua ulangan duplo. 1. Persiapan Sampel Mula-mula sampel dicuci sampai bersih, kemudian ditiriskan. Selanjutnya sayuran dibekukan dalam freezer selama satu malam untuk memudahkan proses pengeringan vakum. Waktu pengeringan dengan freeze dryer dapat berlangsung selama satu sampai dua hari tergantung dari banyaknya sampel. Setelah sampel kering, dilakukan penghancuran menggunakan blender kering sampai dihasilkan sampel kering bubuk yang lolos ayakan 32 mesh. Sampel tersebut kemudian dikemas dalam plastik ber-seal dan disimpan dalam freezer. Sampel siap untuk digunakan dalam

18

ekstraksi. Tahap persiapan sampel dapat dilihat pada Gambar 5. Selanjutnya dilakukan analisis kadar air dan total fenol pada sampel. Analisis kadar air dilakukan secara satu ulangan duplo sedangkan analisis total fenol dilakukan secara dua ulangan duplo. Analisis Kadar Air menggunakan metode yang dikembangkan oleh AOAC (1984). Penetapan kadar air merupakan cara untuk mengukur banyaknya air yang terdapat di dalam suatu bahan pangan. Analisis kadar air dilakukan pada sampel sayuran segar (awal) dan

pada sampel sayuran

setelah freeze drying. Penentuan kadar air ini dilakukan dengan metode pengeringan dengan oven biasa. Prinsip dari metode ini adalah air dikeluarkan dari sampel dengan cara menguapkan air yang terdapat dalam bahan pangan. Persiapan yang perlu dilakukan adalah cawan alumunium yang akan digunakan terlebih dahulu dikeringkan dalam oven pada suhu 100oC selama 15 menit kemudian didinginkan dalam desikator Selama 10 menit. Selanjutnya cawan ditimbang dengan menggunakan neraca analitik. Sampel ditimbang sebanyak kurang lebih 5 gram kemudian dikeringkan dalam oven selama kurang lebih 6 jam. Setelah itu didinginkan dalam desikator kemudian ditimbang. Sampel kembali dikeringkan dalam oven selama 30 menit lalu ditimbang kembali. Perlakuan terakhir ini diulangi terus hingga diperoleh berat kering yang relatif konstan (berat dianggap konstan jika selisih berat sampel kering yang ditimbang ≤ 0,0003 gram). Kadar air (%) = W - (W1-W2) x 100% W W

= bobot contoh sebelum dikeringkan (g)

W1 = bobot (contoh + cawan) sesudah dikeringkan (g) W2 = bobot cawan kosong (g) Analisis Total Fenol menggunkan metode yang dikembangkan oleh Shetty et al. (1995) yang dikutip oleh Ishartani (2004). Penentuan total fenol bertujuan untuk mengetahui kandungan senyawa fenol pada sampel. Sampel kering beku bubuk mula-mula diambil sebanyak 50.0 mg dan dilarutkan

19

dalam 2.5 mL etanol 95%, kemudian divorteks. Setelah itu dilakukan sentrifuse terhadap campuran tersebut selama 5 menit dengan kecepatan putaran 358 g. Supernatan diambil sebanyak 0,5 mL dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Kemudian ditambahkan 0.50 mL etanol 95%, 2.5 mL aquadest, dan 2.5 mL reagen folin ciocalteu 50%. Campuran

tersebut

didiamkan dahulu selama 5 menit, lalu ditambahkan 0.5 mL Na2CO3 5% dan divorteks. Setelah itu, sampel disimpan dalam ruang gelap selama satu jam, lalu dilakukan pengukuran dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 725 nm. Prosedur penentuan total fenol dapat dilihat secara ringkas pada Gambar 6. Standar yang digunakan dalam penentuan total fenol adalah asam galat yang dibeli dari Sigma-Aldrich. Standar asam galat dibuat dengan variasi konsentrasi antara 50 – 250 mg/L.

2. Pembuatan Kurva Standar dan Limit of Detection (LOD) a. Pembuatan larutan Standar (Mattila dan kumpulainen, 2002) Sebanyak 24 mg standar yang tersedia dilarutkan dalam 12 mL methanol 62.5%, sehingga diperoleh standar stock dengan konsentrasi 2000 µg/mL. selanjutnya diambil 3.125 mL dari standar stock dimasukan ke dalam labu takar 10 mL, kemudian ditambahkan methanol 62.5% hingga volume mencapai 10 mL, sehingga konsentrasi yang diperoleh adalah 625 µg/mL. Setelah itu dibuat larutan standar campuran dengan cara mencampur ketiga standar yang ada. Volume untuk larutan standar yang dicampur sama besar yaitu 1:1 (v/v). Larutan standar campuran yang digunakan dalam penelitian ini terdiri atas lima konsentrasi, yaitu 125, 250, 375, 500, dan 625 µg/mL. Pembuatan larutan standar campuran dengan konsentrasi 125, 250, 375, 500, dan 625 µg/mL dilakukan dengan melakukan pengenceran dari larutan standar campuran yang memiliki konsentrasi 625 µg/mL. Proses pembuatan larutan standar yang dibutuhkan pada penelitian ini dapat dilihat secara ringkas pada Gambar 10.

20

b. Injeksi larutan standar ke kolom HPLC (Singh et al., 2008). Larutan standar campuran dengan berbagai konsentrasi tersebut diinjeksikan ke dalam kolom RP C-18 (4.6 x 150 mm, 5µm) dengan kolom guard C-18.

Fase gerak yang digunakan yaitu metanol-0.4%

asam asetat (80:20, v/v), laju alir 1 mL/menit, volume yang diinjeksikan 20 µl, panjang gelombang 290 nm, dan kondisi isokratik. c. Pembuatan kurva standar Hasil dari kromatogram standar campuran pada berbagai konsentrasi (125, 250, 375, 500, dan 625 µg/mL ) kemudian dimasukkan ke dalam satu grafik. Dari data masing-masing, dibuat persamaan garis untuk masing-masing standar yang akan digunakan pada perhitungan Limit of Detection (LOD) masing-masing standar. Persamaan garis tersebut juga digunakan pada perhitungan komponen asam fenolat yang terdapat di sampel. d. Perhitungan limit deteksi (Rounds dan Nielsen, 2000) Limit of Detection (LOD) atau limit deteksi diperoleh dengan cara menginjeksikan standar campuran sebanyak sepuluh kali. Konsentrasi yang digunakan untuk menentukan LOD adalah konsentrasi yang terendah yaitu 125 µg/mL. Setelah diperoleh kesepuluh area tersebut, dimasukkan kedalam persamaan kurva standar masing-masing, sehingga diperoleh konsentrasi dan standar deviasinya. Besarnya LOD adalah tiga kali dari nilai standar deviasi.

3. Analisis Asam Fenolat pada Sayuran

a. Ekstraksi Senyawa Asam Fenolat dari Sayuran Indigenous (Mattila dan Kumpulainen, 2002) dengan modifikasi Ekstraksi senyawa asam fenolat dari sayuran indigenous Indonesia melalui tiga tahap yaitu tahap pertama pengekstrakan dengan methanol 62.5%, tahap kedua hidrolisis basa, dan tahap ketiga hidrolisis asam. Tahap pertama yaitu pelarutan sebanyak 0.5 gram sampel kering beku ke dalam 7 mL methanol 62,5%

yang mengandung 10% asam asetat

(85:15;v/v) dan 2 g/L BHA sebagai antioksidan. Kemudian divortex agar campuran homogen. Selanjutnya sampel tersebut di ultrasonik selama 30

21

menit. Kemudian volume sampel dibuat menjadi 10 mL dengan cara menambahkan air destilata (aquadest) ke dalamnya. Setelah itu diambil 1 mL sampel, kemudian disaring dengan penyaring berdiameter 0.45µm filter syringe (PTFE) maka didapatkan asam fenolat yang larut (soluble phenolic acid) dan sampel tersebut siap untuk diinjeksikan ke dalam kolom HPLC. Tahap kedua adalah hidrolisis basa, 9 mL sampel sisa pengekstrakan tahap pertama dilanjutkan dengan proses hidrolisis basa. Hasil ekstrak sampel dari hidrolisis basa merupakan insoluble phenolic acid. Selanjutnya hasil ekstrak tersebut diinjeksikan ke kolom HPLC. Tahap ketiga ialah hidrolisis asam, tahapan ini melanjutkan tahap kedua yaitu melakukan proses hidrolisis asam pada lapisan aqueous hasil pengekstrakan dengan tahap kedua. Hasil pengekstrakan tahap ketiga ini merupakan insoluble phenolic acid yang tahan proses hidrolisis basa. Setelah itu hasil pengekstrakan diinjeksikan ke kolom HPLC. Hidrolisis basa dan asam dilakukan karena asam fenolat berada dalam bentuk terikat, dengan demikian fungsi dari hidrolisis basa dan asam di sini untuk membebaskan asam fenolat tersebut dari berbagai senyawa lainnya yang ada di tanaman. Setelah dapat maka sampel siap untuk diinjeksikan ke kolom HPLC. Pada proses awal pengujian ekstrak sampel sayuran melalui ketiga tahapan ekstraksi menunjukkan bahwa senyawa asam fenolat yang diinginkan (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) terdapat pada ekstrak sampel yang menggunakan tahapan ekstraksi tahap pertama tanpa dilanjutkan ke tahap kedua dan ketiga. Oleh karena itu proses penelitian selanjutnya hanya menggunakan tahapan ekstraksi tahap pertama saja.

Prosedur ekstraksi asam fenolat dari sayuran

indigenous dapat dilihat pada Gambar 7. Adapun prosedur hidrolisis basa dan hidrolisis asam dapat dilihat pada Gambar 8 dan 9. . b. Injeksi ekstrak sampel ke kolom HPLC (Singh et al., 2008). Ekstrak sampel yang telah disaring dengan syringe filter 0.45 µm, diinjeksikan ke dalam kolom RP C-18 (4.6 x 150 mm, 5µm) dengan kolom guard C-18. Fase gerak yang digunakan yaitu metanol-0.4% asam

22

asetat (80:20, v/v), laju alir 1 mL/menit, volume yang diinjeksikan 20 µl, panjang gelombang 290 nm, dan kondisi isokratik. c. Pembuatan Ko-kromatogram Pembuatan ko-kromatogram dilakukan dengan cara menginjeksikan ektrak sampel yang telah ditambahkan standar campuran. Volume pencampuran yang digunakan yaitu 1:1 (v/v). Konsentrasi standar campuran yang digunakan adalah konsentrasi tertinggi yaitu 625 µg/mL. Pembuatan ko-kromatogram ini bertujuan memvalidasi keberadaan senyawa asam fenolat yang diinginkan (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel. Standar campuran yang digunakan untuk membuat ko-kromatogram berfungsi sebagai eksternal standar. d. Identifikasi asam fenolat pada sampel Hasil dari kromatogram sampel kemudian dibandingkan dengan kromatogram standar campuran. Penentuan komponen yang terdapat pada sampel dilihat berdasarkan waktu retensi masing-masing standar. Dari area yang diperoleh, dihitung konsentrasinya dengan menggunakan persamaan garis dari kurva standar campuran yang sudah diperoleh. Selain itu dilakukan pula perhitungan dengan menggunakan eksternal standar, yaitu dengan membandingkan luas area komponen pada sampel dengan luas area pada standar campuran. Standar campuran yang digunakan sebagai eksternal standar adalah standar campuran dengan konsentrasi yang tertinggi (625 µg/mL).

4. Analisis Statistik Analisis statistik yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari uji Tukey, uji T, dan Principal Component Analysis (PCA). Uji Tukey digunakan pada taraf 5% untuk melihat apakah perlakuan yang diberikan pada sampel berpengaruh nyata atau tidak. Uji T digunakan untuk membandingkan perhitungan kandungan asam fenolat antara kurva standar campuran dan eksternal standar campuran pada sampel pada taraf 1%. PCA (Principal Component Analysis) merupakan metode statistik yang dapat mengidentifikasi suatu keragaman dinamakan principal component analysis

23

yang dapat menjelaskan jumlah keragaman dari yang terbesar hingga yang jumlah keragaman terkecil

yang tersembunyi. Analisis ini dapat

menjelaskan 75 % - 90 % dari total keragaman dalam data yang mempunyai 25 sampai 30 variabel hanya dengan dua sampai tiga principal component (Meilgaard et al., 1999).

Sampel

Pencucian

Penirisan

Pembekuan selama 24 jam

Freeze drying selama 48 jam

Sampel kering beku

Penghancuran dengan blender kering

Sampel kering beku (bubuk)

Penyimpanan dalam freezer

Gambar 5. Persiapan sampel

24

50.0 miligram sampel kering beku (bubuk) 2.5 ml etanol 95% Pelarutan

Pemusingan selama 5 menit dengan kecepatan 358 g

supernatan

endapan

0.5 ml supernatan

0.5 ml etanol 95% 2.5 ml aquadest Pencampuran

2.5 ml Folin Ciocalteau 50%

Pendiaman selama 5 menit 0.5 ml Na2CO3 5% Pencampuran

Penyimpanan dalam ruang gelap selama 1 jam

Pembacaan absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 725 nm

Gambar 6. Prosedur analisis total fenol

25

0.5 g sampel kering beku

7 ml Campuran Metanol 62.5% (2 g/L BHA 10% Asam Asetat (85:15;v/v))

Gelas piala 100 ml

Vortex

Ultrasonik 30 menit

Gelas piala 100 ml

Aquadest

(Pencampuran sampai volume 10 ml)

Ambil 1 ml sampel (Tahap 1)

Saring dengan saringan berdiameter 0.45µm syringe filter (PTFE)

9 ml sampel sisanya dilakukan Hidrolisis basa (Tahap 2) kemudian hidrolisis asam (Tahap 3)

Insoluble Phenolic Acid

Soluble Phenolic Acid Gambar 7. Metode ekstraksi asam fenolat dari sayuran indigenous 26

9 ml sampel 12 ml Air destilata (1% Asam Askorbat dan 0.415% EDTA) dan 5 ml NaOH 10 M

Gelas piala 50 ml

Disemprotkan nitrogen Ditutup, Stirer (magnetic stirer) selama 16 jam pada suhu ruangan (20 oC)

Pengaturan pH menjadi pH 2 dengan HCl 6N

Pengekstrakan 3x (15 ml campuran dietil eter dingin dan etil asetat (1:1;v/v))

Vortex 45 detik Sentrifuse 201 g selama 10 menit

Terdapat 2 lapisan yaitu lapisan organic phase dan aqueous

Pemipetan lapisan organic phase (supernatan)

Lakukan hidrolisis asam pada lapisan aqueous

Evaporasi dengan rotary vacuum Residu dilarutkan kembali sebanyak 3kali dalam 1.5 ml metanol/air (75:25;v/v), buat sampai volume 5 ml (labu takar)

penyaringan dengan diameter 0.45µm Syringe Filter (PTFE)

Insoluble Phenolic Acid Gambar 8. Metode hidrolisis basa 27

Lapisan aqueous

Gelas piala 50 ml

2.5 ml HCl pekat 12 N

Inkubasi dalam water bath suhu 85oC selama 30 menit

Pengekstrakan 3x (15 ml campuran dietil eter dingin dan etil asetat (1:1;v/v))

Vortex 45 detik

Sentrifuse 201 g selama 10 menit

Terdapat 2 lapisan yaitu lapisan organic phase dan aqueous

Pemipetan lapisan organic phase (supernatan)

residu (lapisan aqueous)

Evaporasi dengan rotary vacuum

Residu dilarutkan kembali sebanyak 3kali dalam 1.5 ml metanol/air (75:25;v/v), buat sampai volume 5 ml (Labu takar)

penyaringan dengan diameter 0.45µm Syringe Filter (PTFE)

Insoluble Phenolic Acid

Gambar 9. Metode hidrolisis asam

28

24 mg standar asam fenolat

12 ml MeOH(aq) 62.5% Pelarutan

Standar stock

3.125 ml standar stock

Labu takar 10 ml MeOH(aq) 62,5% Pencampuran (sampai volume 10 ml)

Larutan standar asam fenolat

Gambar 10. Metode pembuatan standar asam fenolat

29

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A. KURVA STANDAR ASAM FENOLAT DAN LIMIT DETEKSI 1. Standar Asam Fenolat Bentuk Tunggal Pembuatan standar asam fenolat dalam bentuk tunggal ditujukan untuk mengetahui waktu retensi dari masing-masing standar asam fenolat sehingga dapat diketahui benar kapan munculnya senyawa yang diidentifikasi. Konsentrasi yang digunakan dalam pembuatan standar tunggal ini yaitu 625 µg/mL untuk masing-masing standar asam fenolat. Hasil penginjeksian masing-masing standar asam fenolat yang digunakan dijelaskan sebagai berikut:

a. Asam klorogenat Puncak senyawa asam klorogenat muncul pada kisaran menit ke-2.0 sampai menit ke-2.2. Gambar 11 menunjukkan kromatogram standar asam klorogenat pada konsentrasi 625 µg/mL dengan analisis HPLC.

Gambar 11. Kromatogram standar asam klorogenat dengan analisis HPLC

30

b. Asam kafeat Puncak senyawa asam kafeat muncul pada kisaran menit ke-2.8 sampai ke-3.2. Gambar 12 menunjukkan kromatogram asam kafeat pada konsentrasi 625 µg/mL dengan analisis HPLC.

Gambar 12. Kromatogram standar asam kafeat dengan analisis

HPLC

c. Asam ferulat Puncak senyawa asam ferulat muncul pada kisaran menit ke-6.7 sampai ke-7.3. Gambar 13 menunjukkan kromatogram asam ferulat pada konsentrasi 625 µg/mL dengan analisis HPLC.

]

Gambar 13. Kromatogram standar asam ferulat dengan analisis HPLC

31

2. Limit Deteksi Perhitungan limit deteksi dilakukan dengan cara menginjeksikan standar campuran sebanyak sepuluh kali. Konsentrasi yang digunakan untuk menentukan LOD adalah konsentrasi yang terendah yaitu 125 µg/mL. Setelah diperoleh kesepuluh area tersebut, dimasukkan kedalam persamaan kurva standar masing-masing, sehingga diperoleh konsentrasi dan standar deviasinya. Besarnya LOD adalah tiga kali dari nilai standar deviasi (Rounds dan Nielsen, 2000). Berikut ini hasil perhitungan LOD untuk masing-masing standar asam fenolat.

a. Asam klorogenat Nilai limit deteksi senyawa asam klorogenat yaitu 0.97 (µg/mL) . untuk lebih jelas mengenai cara perhitungannya lihat Tabel 4. Tabel 4. Perhitungan LOD Asam klorogenat replication 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Mean (X) Stdev % RSD LOD= 3x stdev LOD=

Area (µg/mL) 5486.82 126.67 5474.69 126.38 5455.19 125.92 5477.87 126.46 5461.85 126.08 5444.66 125.67 5470.33 126.28 5477.17 126.44 5453.63 125.89 5454.06 125.90 5465.63 126.17 13.65 0.32 0.25 0.26 0.97 0.97

b. Asam kafeat Nilai limit deteksi senyawa asam kafeat yaitu 0.83 (µg/mL) . untuk lebih jelas mengenai cara perhitungannya lihat Tabel. 5

32

Tabel 5. Perhitungan LOD Asam kafeat replication 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Mean (X) Stdev % RSD LOD= 3x stdev LOD=

Area (µg/mL) 10909.70 127.36 10898.30 127.23 10851.10 126.71 10854.25 126.75 10874.70 126.97 10869.25 126.91 10919.40 127.47 10855.40 126.76 10905.70 127.32 10883.10 127.07 10882.09 127.05 25.04 0.28 0.23 0.22 0.83 0.83

c. Asam ferulat Nilai limit deteksi senyawa asam ferulat yaitu 0.80 (µg/mL) . untuk lebih jelas mengenai cara perhitungannya lihat Tabel 6. Tabel 6. Perhitungan LOD Asam ferulat replication 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Mean (X) Stdev % RSD LOD= 3x stdev LOD=

Area (µg/mL) 11255.40 127.95 11290.50 128.35 11289.10 128.33 11288.90 128.33 11244.80 127.83 11282.10 128.26 11260.90 128.02 11229.80 127.67 11230.30 127.67 11268.80 128.11 11264.06 128.05 23.71 0.27 0.21 0.21 0.80 0.80

33

3. Standar Asam Fenolat Bentuk Campuran Pada sayuran terdapat berbagai macam jenis senyawa fenolik baik senyawa asam fenolat, flavonoid, maupun senyawa-senyawa fenolik dalam bentuk lainnya. Pembuatan standar asam fenolat dalam bentuk campuran dimaksudkan agar dapat mengetahui urutan keluar dan waktu retensi

masing-masing

standar

asam

fenolat

ketika

dicampur

sebagaimana yang terjadi pada sampel sayuran yang dianalisis. Pembuatan standar campuran dilakukan dengan cara mencampur ketiga standar asam fenolat dengan perbandingan 1:1 pada tingkat konsentrasi yang sama yaitu pada konsentrasi 625 µg/mL. Adapun konsentrasi yang dibuat untuk standar campuran yaitu 125, 250, 375, 500, dan 625 µg/mL. Pembuatan variasi konsentrasi tersebut dengan cara mengencerkan standar asam fenolat dalam bentuk campuran pada konsentrasi 625 µg/mL. Data dari hasil penginjeksian standar campuran dibuat kurva standar campuran dan persamaan garis untuk masingmasing standar asam fenolat dalam bentuk campuran. Persamaan garis yang didapat dari kurva standar campuran akan digunakan untuk melakukan perhitungan senyawa asam fenolat yang terdapat pada sampel sayuran indigenous. Contoh kromatogram standar campuran yang menggunakan konsentrasi tertinggi 625 µg/mL dapat dilihat pada Gambar 14. Persamaan garis untuk asam klorogenat yaitu y = 42.34x + 123.6, dengan nilai r2 = 0.999. LOD asam klorogenat = 0.97 (µg/mL) Kurva standar campuran asam klorogenat dapat dilihat pada Gambar 15. Persamaan garis asam kafeat yaitu y = 90.07x -561.7, dengan nilai r2 = 0.998. LOD asam kafeat = 0.83 (µg/mL). Kurva standar campuran asam kafeat dapat dilihat pada Gambar 16. Persamaan garis asam ferulat yaitu y = 88.66x -88.99, dengan nilai r2 = 0.999. LOD asam ferulat = 0.80 (µg/mL). Kurva standar campuran asam ferulat dapat dilihat pada Gambar

17. Data hasil penginjeksian standar asam fenolat dalam bentuk campuran dapat dilihat pada Tabel 7.

34

Tabel 7. Hasil penginjeksian standar asam fenolat dalam bentuk campuran No

Standar Asam Fenolat

Rt/waktu retensi (menit ke-)

Persamaan kurva standar campuran

Limit deteksi (LOD) µg/mL

1

Asam klorogenat

2.0-2.2

y = 42.34x + 123.6

0.97

2

Asam kafeat

2.8-3.2

y = 90.07x -561.7

0.83

3

Asam ferulat

6.7-7.3

y = 88.66x -88.99

0.80

Gambar 14. Kromatogram standar campuran dengan analisis HPLC

Konsentrasi (µg/mL) 0 125 250 375 500 625

Area 0 5391 10959 15773 21734 26285

Gambar 15. Kurva standar asam klorogenat dalam bentuk campuran

35

Konsentrasi (µg/mL) 0 125 250 375 500 625

Area 0 10788 20602 33613 44570 55941

Gambar 16. Kurva standar asam kafeat dalam bentuk campuran Konsentrasi (µg/mL) 0 125 250 375 500 625

Area 0 11232 21681 32807 44738 55252

Gambar 17. Kurva standar asam ferulat dalam bentuk campuran

B. TOTAL FENOL Total fenol merupakan perkiraan kasar jumlah senyawa fenolik yang terdapat dalam suatu bahan. Pengukuran total fenol yang dilakukan dalam penelitian ini menggunakan metode yang mereaksikan ekstrak bahan dengan senyawa folin. Senyawa folin dapat bereaksi dengan gugus kromofor pada fenolik dan dapat diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 725 nm. Pengukuran total fenol dilakukan dengan membandingkan fenol yang ada dalam bahan dengan kurva standar fenol yang dibuat dari asam galat. Selain asam galat kurva standar juga dapat mengunakan asam tanat. Pemilihan bahan yang akan dijadikan standar tergantung bentuk mayoritas fenol yang terdapat dalam bahan yang diuji. Pada sampel kali ini total fenol mayoritas berupa polimer asam galat.

36

Perhitungan total fenol pada sampel dilakukan dengan menggunakan persamaan garis dari kurva standar asam galat. Konsentrasi asam galat yang dibuat adalah 50,100, 150, 200, dan 250 mg/L. Persamaan garis total fenol yaitu y = 0.0036x-0.0280 dengan nilai r2 = 0.9963. Kurva standar asam galat dapat dilihat pada Lampiran 10. Perhitungan total fenol, pada sampel dilakukan berdasarkan berat basah dan berat kering sampel. Basis berat basah berarti kandungan fenol dihitung sebanyak berapa miligram dalam 100 gram sampel segar, sedangkan perhitungan berdasarkan basis kering berarti kandungan fenol dihitung sebanyak berapa miligram dalam 100 gram sampel kering. Dari hasil analisis total fenol dua puluh empat sampel, diketahui bahwa total fenol terbanyak berdasarkan berat kering terdapat pada daun jambu mete (4418.4 mg) dan terkecil pada mangkokan (227.7 mg). Nilai total fenol dari dua puluh empat sampel yang dianalisis dapat dilihat pada Tabel 8 dan untuk perhitungan total fenol pada sampel selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 11. Tabel 8. Total Fenol Sayuran Indigenous No

Sampel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga kecombrang Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong cina

Wet Basis [ ] (mg / 100 g sampel segar) 72.72 40.36 66.46 112.55 138.01 86.89 61.56 121.52 66.75 179.88 342.06 107.00 21.01 847.41 158.92 200.52 82.66 144.81 64.64 256.99 742.54 38.43 87.65 189.08

Dry Basis [ ] (mg/ 100 g sampel kering) 499.99 227.74 498.94 719.83 632.66 690.72 573.51 986.69 601.90 1016.83 1736.69 432.75 272.86 4418.38 790.12 1097.23 692.69 922.37 790.76 2511.45 3868.59 393.19 754.68 1297.72

37

C. ANALISIS ASAM FENOLAT PADA SAYURAN INDIGENOUS Hasil penelitian yang telah dilakukan terhadap dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia mengenai kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat), didapatkan bahwa sebagian besar sayuran indigenous Indonesia mengandung asam fenolat terutama asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat. Hanya sebagian kecil yang tidak mengandung ketiga senyawa asam fenolat tersebut diantaranya yaitu mengkudu, daun jambu mete, daun beluntas, dan kedondong cina yang hanya mengandung klorogenat dan asam ferulat, sedangkan daun pakis dan antanan beurit hanya mengandung klorogenat dan asam kafeat, terakhir bunga turi hanya mengandung asam ferulat. Penentuan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel dengan cara melihat waktu retensi masing-masing senyawa asam fenolat pada kromatogram sampel kemudian dibandingkan dengan waktu retensi masing-masing senyawa asam fenolat pada kromatogram standar campuran. Perhitungan mengenai kandungan asam fenolat yang terdapat didalam sampel dilakukan dengan dua cara yaitu dengan menggunakan kurva standar campuran dan menggunakan eksternal standar campuran. Kedua perhitungan ini dilakukan untuk mengetahui perhitungan manakah yang lebih efektif dan lebih baik untuk menghitung kandungan senyawa asam fenolat yang terdapat didalam sampel. Hasil perhitungan dengan kedua cara perhitungan ini dapat dilihat pada Tabel 9 dan Tabel 10. Perhitungan asam fenolat pada sampel didasarkan pada wet basis dan dry basis. Dimana wet basis berarti kandungan asam fenolat dihitung sebanyak berapa milligram dalam 100 gram sampel segar dan dry basis berarti kandungan asam fenolat dihitung sebanyak berapa milligram dalam 100 gram sampel kering. Perbandingan perhitungan dengan menggunakan kurva standar campuran dan eksternal standar campuran dapat dilihat pada Tabel 11.

38

Tabel 9. Perhitungan Kandungan Asam Fenolat dengan Kurva Standar Campuran Wet Basis [ ] (mg/ 100 g sampel segar) Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat Total Asam Fenolat 1 Mengkudu 2.30 0.76 3.06 + 0.09 2 Mangkokan 0.86 1.15 0.24 2.25 + 0.03 3 Daun Labu Siam 5.80 0.55 0.12 6.47 + 0.12 4 Daun Lembayung 4.26 2.03 1.38 7.66 + 0.24 5 Daun Katuk 3.38 1.13 1.10 5.61 + 0.28 6 Daun Kemangi 0.32 2.03 0.16 2.51 + 0.06 7 Daun Pakis 2.58 0.47 3.05 + 0.16 8 Daun Pohpohan 17.47 1.11 0.17 18.74 + 0.39 9 Bunga Pepaya 0.77 1.03 0.75 2.55 + 0.02 Mangkokan Putih 10 14.13 1.69 0.80 16.62 + 0.47 11 Daun Kenikir 4.53 3.64 3.14 11.31 + 0.44 12 Daun Kelor 6.65 2.93 4.41 14.00 + 0.39 13 Daun Kucai 0.08 0.36 0.10 0.53 + 0.01 14 Daun Jambu Mete 13.53 2.88 16.41 + 0.32 15 Buah Takokak 33.14 2.56 0.32 36.02 + 1.70 16 Antanan 9.22 1.19 1.81 12.22 + 0.43 17 Krokot 5.79 0.54 0.22 6.55 + 0.06 18 Antanan Beurit 24.27 1.35 25.62 + 0.53 19 Daun Ginseng 0.38 0.41 0.09 0.87 + 0.01 20 Bunga kecombrang 14.06 0.96 0.13 15.15 + 1.14 21 Daun Beluntas 19.99 8.65 28.65 + 0.66 22 Bunga Turi 0.10 0.10 + 0.00 23 Terubuk 4.17 1.05 0.16 5.37 + 0.15 24 Kedondong cina 47.02 5.02 52.03 + 1.00

No

Sampel

Dry Basis [ ] (mg/ 100 g sampel kering) Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat Total Asam Fenolat 15.85 5.22 21.07 + 0.60 4.84 6.51 1.37 12.72 + 0.19 43.53 4.12 0.93 48.58 + 0.90 27.27 12.95 8.80 49.02 + 1.53 15.50 5.18 5.05 25.73 + 1.30 2.58 16.13 1.28 19.98 + 0.50 24.06 4.35 28.41 + 1.51 141.84 8.97 1.37 152.18 + 3.19 6.93 9.31 6.75 22.99 + 0.18 79.90 9.56 4.51 93.96 + 2.64 23.02 18.48 15.94 57.43 + 2.22 26.91 11.85 17.85 56.61 + 1.60 1.00 4.63 1.32 6.94 + 0.18 70.53 15.02 85.55 + 1.66 164.76 12.74 1.60 179.11 + 8.46 50.47 6.50 9.88 66.85 + 2.37 48.48 4.56 1.84 54.89 + 0.51 154.58 8.62 163.20 + 3.94 4.68 4.96 1.05 10.68 + 0.17 137.42 9.37 1.24 148.04 + 11.15 104.17 45.09 149.26 + 3.46 0.99 0.99 + 0.02 35.89 9.03 1.34 46.26 + 1.27 322.68 34.44 357.13 + 6.65

= Tidak Terdeteksi

39

Tabel 10. Perhitungan Kandungan Asam Fenolat dengan Eksternal Standar Campuran

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Sampel Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga kecombrang Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong cina

Asam klorogenat 2.56 1.17 6.05 4.54 3.76 0.53 2.77 17.79 0.95 14.52 4.88 7.09 0.21 13.91 33.70 9.58 6.01 24.69 0.52 14.32 20.44 4.39 47.58

Wet Basis [ ] (mg/ 100 g sampel segar) Asam kafeat Asam ferulat Total Asam Fenolat 0.68 3.24 + 0.09 0.51 0.14 1.82 + 0.03 0.10 0.05 6.20 + 0.12 1.50 1.29 7.34 + 0.24 0.38 0.98 5.12 + 0.29 1.60 0.09 2.23 + 0.06 0.11 2.88 + 0.16 0.68 0.10 18.57 + 0.40 0.66 0.69 2.30 + 0.02 1.07 0.70 16.30 + 0.47 3.00 3.04 10.92 + 0.44 2.12 4.29 13.50 + 0.40 0.08 0.06 0.35 + 0.01 2.79 16.70 + 0.32 1.85 0.21 35.76 + 1.71 0.57 1.71 11.86 + 0.44 0.15 0.16 6.32 + 0.06 0.82 25.51 + 0.54 0.13 0.04 0.69 + 0.01 0.62 0.07 15.01 + 1.15 8.04 28.48 + 0.67 0.04 0.04 + 0.00 0.65 0.09 5.13 + 0.15 4.95 52.53 + 0.97

Asam klorogenat 17.58 6.58 45.40 29.06 17.23 4.22 25.81 144.45 8.58 82.10 24.76 28.66 2.68 72.55 167.57 52.42 50.37 157.23 6.31 139.92 106.51 37.76 326.53

Dry Basis [ ] (mg/ 100 g sampel kering) Asam kafeat Asam ferulat Total Asam Fenolat 4.68 22.26 + 0.60 2.90 0.79 10.28 + 0.19 0.77 0.40 46.57 + 0.90 9.60 8.28 46.94 + 1.54 1.74 4.51 23.48 + 1.31 12.76 0.72 17.70 + 0.50 0.99 26.80 + 1.53 5.51 0.81 150.76 + 3.21 5.94 6.22 20.74 + 0.18 6.07 3.95 92.12 + 2.65 15.22 15.44 55.42 + 2.24 8.57 17.36 54.59 + 1.61 1.08 0.75 4.50 + 0.18 14.54 87.08 + 1.67 9.21 1.03 177.80 + 8.51 3.11 9.36 64.88 + 2.39 1.26 1.31 52.94 + 0.51 5.25 162.48 + 3.42 1.57 0.50 8.38 + 0.17 6.08 0.71 146.71 + 11.22 41.88 148.39 + 3.48 0.41 0.41 + 0.02 5.61 0.79 44.16 + 1.28 33.97 360.50 + 6.69

= Tidak Terdeteksi

40

Tabel 11. Perbandingan Perhitungan Kandungan Asam Fenolat antara Kurva Standar Campuran dan Eksternal Standar Campuran Wet Basis No

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Sampel

Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga kecombrang Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong cina

Ket : a) A b) B c) ∆ (A-B) d) І∆(A-B)І e) %

Total Asam Fenolat (mg/100g sampel segar) Aa) 3.06 2.25 6.47 7.66 5.61 2.51 3.05 18.74 2.55 16.62 11.31 14.00 0.53 16.41 36.02 12.22 6.55 25.62 0.87 15.15 28.65 0.10 5.37 52.03

Bb) 3.24 1.82 6.20 7.34 5.12 2.23 2.88 18.57 2.30 16.30 10.92 13.50 0.35 16.70 35.76 11.86 6.32 25.51 0.69 15.01 28.48 0.04 5.13 52.53

Dry Basis ∆ (A-B)c) І∆(A-B)Іd) 0.17 0.43 0.27 0.33 0.49 0.29 0.17 0.17 0.25 0.33 0.40 0.50 0.19 0.29 0.26 0.36 0.23 0.11 0.19 0.14 0.17 0.06 0.24 0.49

%e) 5.66 19.23 4.15 4.25 8.74 11.43 5.67 0.93 9.78 1.96 3.51 3.56 35.11 1.79 0.73 2.95 3.54 0.44 21.54 0.90 0.58 58.49 4.54 0.95

Total Asam Fenolat (mg/100g sampel kering) Aa) 21.07 12.72 48.58 49.02 25.73 19.98 28.41 152.18 22.99 93.96 57.43 56.61 6.94 85.55 179.11 66.85 54.89 163.20 10.68 148.04 149.26 0.99 46.26 357.13

Bb) 22.26 10.28 46.57 46.94 23.48 17.70 26.80 150.76 20.74 92.12 55.42 54.59 4.50 87.08 177.80 64.88 52.94 162.48 8.38 146.71 148.39 0.41 44.16 360.50

∆ (A-B)c) І∆(A-B)Іd) 1.19 2.45 2.01 2.09 2.25 2.28 1.61 1.42 2.25 1.84 2.02 2.01 2.44 1.53 1.30 1.97 1.94 0.72 2.30 1.33 0.87 0.58 2.10 3.38

%e) 5.66 19.23 4.15 4.25 8.74 11.43 5.67 0.93 9.78 1.96 3.51 3.56 35.11 1.79 0.73 2.95 3.54 0.44 21.54 0.90 0.58 58.49 4.54 0.95

= hasil perhitungan dengan menggunakan persamaan kurva standar campuran = hasil perhitungan dengan menggunakan persamaan eksternal standar campuran = selisih hasil perhitungan dengan menggunakan kurva standar dan eksternal standar campuran = nilai c) (harga mutlak ; diambil nilai yang positif) = persentase nilai d) dibandingkan dengan nilai a)

41

1. Mengkudu Mengkudu memiliki kadar air sebesar 85.46%, mengandung total fenol sebanyak 72.72 mg/100 gram sampel segar dan 499.99 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel mengkudu, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke-2.28 dan asam ferulat pada menit ke-7.35. Sedangkan senyawa asam kafeat tidak terkandung di dalam sampel mengkudu. Hasil kromatogram ekstrak sampel mengkudu dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 18. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 19. Gambar 19 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam ekstrak mengkudu dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak mengkudu, standar campuran, dan ekstrak mengkudu dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 12. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mengkudu berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 2.30 mg dan asam ferulat yaitu 0.76 mg. Total asam fenolat untuk sampel mengkudu yaitu 3.06 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 15.85 mg dan asam ferulat yaitu 5.22 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mengkudu yaitu 21.07 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mengkudu berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 2.56 mg dan asam ferulat yaitu 0.68 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mengkudu yaitu 3.24 mg.

42

Gambar 18. Kromatogram ekstrak mengkudu dengan analisis HPLC

Gambar 19. Ko-kromatogram ekstrak mengkudu dengan standar campuran

Tabel 12. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mengkudu

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak mengkudu (mAU)

Area pada standar campuran (mAU)

1324

26285 55941 55252

717

Area pada ekstrak mengkudu dengan standar campuran (mAU) 18956 31302 33700

43

Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 17.58 mg dan asam ferulat yaitu 4.68 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mengkudu yaitu 22.26 mg.

2. Mangkokan Mangkokan memiliki kadar air sebesar 82.28%, mengandung total fenol sebanyak 40.36 mg/100 gram sampel segar dan 227.74 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel mangkokan, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke-2.13, asam kafeat pada menit ke-2.85, dan asam ferulat pada menit ke-7.06. Hasil kromatogram ekstrak sampel mangkokan dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 20. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil kokromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 21. Gambar 21 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel mangkokan dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak mangkokan, standar campuran, dan ekstrak mangkokan dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 13. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mangkokan berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.86 mg, asam kafeat yaitu 1.15 mg, dan asam ferulat yaitu 0.24 mg. Total asam fenolat untuk sampel mangkokan yaitu 2.25 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 4.84 mg, asam kafeat yaitu 6.51 mg, dan asam ferulat yaitu 1.37 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan yaitu 12.72 mg.

44

Gambar 20. Kromatogram ekstrak mangkokan dengan analisis HPLC

Gambar 21. Ko-kromatogram ekstrak mangkokan dengan standar campuran

Tabel 13. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mangkokan

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak mangkokan (mAU) 489 457 123

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak mangkokan dengan standar campuran (mAU) 16965 29797 30865

45

Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mangkokan berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 1.17 mg, asam kafeat yaitu 0.51 mg, dan asam ferulat yaitu 0.14 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan yaitu 1.82 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 6.58 mg, asam kafeat yaitu 2.90 mg, dan asam ferulat yaitu 0.79 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan yaitu 10.28 mg. Mangkokan memiliki kandungan total fenol paling rendah.

3. Daun Labu Siam Daun labu siam memiliki kadar air sebesar 86.68 %, mengandung total fenol sebanyak 66.46 mg/100 gram sampel segar dan 498.94 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun labu siam, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.25, asam kafeat pada menit ke- 3.07, dan asam ferulat pada menit ke- 7.21. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun labu siam dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 22. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 23. Gambar 23 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun labu siam dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun labu siam, standar campuran, dan ekstrak daun labu siam dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 14. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun labu siam berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel

46

Gambar 22. Kromatogram ekstrak daun labu siam dengan analisis HPLC

Gambar 23. Ko-kromatogram ekstrak labu siam dengan standar campuran

Tabel 14. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Labu Siam Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak daun labu siam (mAU) 3599 131 67

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun labu siam dengan standar campuran (mAU) 18488 30152 30919

47

segar), asam klorogenat yaitu 5.80 mg, asam kafeat yaitu 0.55 mg, dan asam ferulat yaitu 0.12 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun labu siam yaitu 6.47 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 43.53 mg, asam kafeat yaitu 4.12 mg, dan asam ferulat yaitu 0.93 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun labu siam yaitu 48.58 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun labu siam berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 6.05 mg, asam kafeat yaitu 0.10 mg, dan asam ferulat yaitu 0.05 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun labu siam yaitu 6.20 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 45.40 mg, asam kafeat yaitu 0.77 mg, dan asam ferulat yaitu 0.40 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun labu siam yaitu 46.57mg. Daun labu siam memiliki kandungan senyawa asam kafeat dan asam ferulat terendah dibandingkan dengan sampel lainnya yaitu asam kafeat 4.12 mg/100 gram sampel kering dan asam ferulat 0.93 mg/100 gram sampel kering. Akan tetapi dalam penelitiannya Rahmat (2009) daun labu siam memiliki kandungan senyawa myricetin tertinggi dibandingkan dengan sampel yang lainnya yaitu 69.40 mg/100 gram sampel kering. Oleh karena itu daun labu siam sangat baik sebagai sumber myricetin.

4. Daun Lembayung Daun Lembayung memiliki kadar air sebesar 84.36 %, mengandung total fenol sebanyak 112.55 mg/100 gram sampel segar dan 719.83 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun lembayung, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.13, asam kafeat pada menit ke- 2.77, dan asam ferulat pada menit ke- 6.80. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun lembayung dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 24. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa

48

Gambar 24. Kromatogram ekstrak daun lembayung dengan analisis HPLC

Gambar

25. Ko-kromatogram ekstrak daun lembayung dengan standar campuran

Tabel 15. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Lembayung

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak daun lembayung (mAU) 2292 1618 1402

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun lembayung dengan standar campuran (mAU) 16457 28675 30596

49

asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 25. Gambar 25 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun kacang panjang dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun lembayung, standar campuran, dan ekstrak daun lembayung dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 15. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun lembayung berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.26 mg, asam kafeat yaitu 2.02 mg, dan asam ferulat yaitu 1.38 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun lembayung yaitu 7.66 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 27.27 mg, asam kafeat yaitu 12.95 mg, dan asam ferulat yaitu 8.80 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun lembayung yaitu 49.02 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun lembayung berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.54 mg, asam kafeat yaitu 1.50 mg, dan asam ferulat yaitu 1.29 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun lembayung yaitu 7.34 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 29.06 mg, asam kafeat yaitu 9.60 mg, dan asam ferulat yaitu 8.28 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun lembayung yaitu 46.94 mg. Kandungan senyawa asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun lembayung tidak begitu tinggi. Daun lembayung lebih baik sebagai sumber apigenin karena kandungan senyawa

50

apigeninnya yang tinggi yaitu 114.81 mg/100 gram sampel kering berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Rahmat (2009).

5. Daun Katuk Daun katuk memiliki kadar air sebesar 78.19 %, mengandung total fenol sebanyak 138.01 mg/100 gram sampel segar dan 632.66 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun katuk, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.30, asam kafeat pada menit ke- 2.98, dan asam ferulat pada menit ke- 7.29. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun katuk dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 26. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil kokromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 27. Gambar 27 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun katuk dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun katuk, standar campuran, dan ekstrak daun katuk dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 16. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun katuk berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 3.38 mg, asam kafeat yaitu 1.13 mg, dan asam ferulat yaitu 1.10 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun katuk yaitu 5.61 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 15.50 mg, asam kafeat yaitu 5.18 mg, dan asam ferulat yaitu 5.05 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun katuk yaitu 25.73 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun katuk berdasarkan perhitungan eksternal standar

51

Gambar 26. Kromatogram ekstrak daun katuk dengan analisis HPLC

Gambar 27. Ko-kromatogram ekstrak daun katuk dengan standar campuran

Tabel 16. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Katuk

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak daun katuk (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

1255 302 754

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun katuk dengan standar campuran (mAU) 17470 29116 30158

52

campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 3.76 mg, asam kafeat yaitu 0.38 mg, dan asam ferulat yaitu 0.98 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun katuk yaitu 5.12 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 17.23 mg, asam kafeat yaitu 1.74 mg, dan asam ferulat yaitu 4.51 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun katuk yaitu 23.48 mg. Daun katuk memiliki kandungan senyawa asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat yang tidak begitu tinggi dibandingkan sampel yang lainnya. Akan tetapi daun katuk memiliki kandungan senyawa kaempferol yang tinggi dibandingkan sampel sayuran yang lainnya yaitu 805.48 mg/100 gram sampel kering berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Batari (2007). Dengan demikian daun katuk lebih baik sebagai sumber senyawa kaempferol.

6. Daun Kemangi Daun kemangi memiliki kadar air sebesar 87.42 %, mengandung total fenol sebanyak 86.89 mg/100 gram sampel segar dan 690.72 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun kemangi, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.14, asam kafeat pada menit ke- 2.97, dan asam ferulat pada menit ke- 7.13. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun kemangi dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 28. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 29. Gambar 29 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun kemangi dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram.

53

Gambar 28. Kromatogram ekstrak daun kemangi dengan analisis HPLC

Gambar 29. Ko-kromatogram ekstrak daun kemangi dengan standar campuran Tabel 17. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kemangi

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak daun kemangi (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

323 2004 107

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun kemangi dengan standar campuran (mAU) 16222 29741 30534

54

Perbandingan luasan area antara ekstrak daun kemangi, standar campuran, dan ekstrak daun kemangi dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 17. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kemangi berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.32 mg, asam kafeat yaitu 2.03 mg, dan asam ferulat yaitu 0.16 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun kemangi yaitu 2.51 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 2.58 mg, asam kafeat yaitu 16.13 mg, dan asam ferulat yaitu 1.28 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kemangi yaitu 19.98 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kemangi berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.53 mg, asam kafeat yaitu 1.60 mg, dan asam ferulat yaitu 0.09 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kemangi yaitu 2.23 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 4.22 mg, asam kafeat yaitu 12.76 mg, dan asam ferulat yaitu 0.72 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kemangi yaitu 17.70 mg. Selain mengandung semua asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) daun kemangi juga memiliki kandungan senyawa luteolin yang tinggi yaitu 20.49 mg/100 gram sampel kering berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Batari (2007). 7. Daun Pakis Daun pakis memiliki kadar air sebesar 89.27 %, mengandung total fenol sebanyak 61.56 mg/100 gram sampel segar dan 573.51 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun pakis, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.07 dan asam kafeat pada menit ke- 2.91. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun pakis dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 30. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu

55

Gambar 30. Kromatogram ekstrak daun pakis dengan analisis HPLC

Gambar 31. Ko-kromatogram ekstrak daun pakis dengan standar campuran Tabel 18. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Pakis

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak daun pakis (mAU)

Area pada standar campuran (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

323 2004 107

26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun pakis dengan standar campuran (mAU) 16222 29741 30534

56

retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 31. Gambar 31 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun pakis dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun pakis, standar campuran, dan ekstrak daun pakis dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 18. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun pakis berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 2.58 mg dan asam kafeat yaitu 0.47 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun pakis yaitu 3.05 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 24.06 mg dan asam kafeat yaitu 4.35 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pakis yaitu 28.41 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun pakis berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 2.77 mg dan asam kafeat yaitu 0.11 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pakis yaitu 2.88 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 25.81 mg dan asam kafeat yaitu 0.99 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pakis yaitu 26.80 mg.

8. Daun Pohpohan Daun pohpohan memiliki kadar air sebesar 87.68 %, mengandung total fenol sebanyak 121.51 mg/100 gram sampel segar dan 986.69 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun pohpohan, peak senyawa asam

57

klorogenat muncul pada menit ke- 2.26, asam kafeat pada menit ke- 2.95, dan asam ferulat pada menit ke- 7.08. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun pohpohan dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 32. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 33. Gambar 33 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun pohpohan dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun pohpohan, standar campuran, dan ekstrak daun pohpohan dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 19. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun pohpohan berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 17.47 mg, asam kafeat yaitu 1.10 mg, dan asam ferulat yaitu 0.17 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun pohpohan yaitu 18.74 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 141.84 mg, asam kafeat yaitu 8.97 mg, dan asam ferulat yaitu 1.37 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pohpohan yaitu 152.18 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun pohpohan berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 17.79 mg, asam kafeat yaitu 0.68 mg, dan asam ferulat yaitu 0.100 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pohpohan yaitu 18.57 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 144.45 mg, asam kafeat yaitu 5.51 mg, dan asam

58

Gambar 32. Kromatogram ekstrak daun pohpohan dengan analisis HPLC

Gambar 33. Ko-kromatogram ekstrak daun pohpohan dengan standar campuran Tabel 19. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Pohpohan Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak daun pohpohan (mAU) 10473 887 122

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun pohpohan dengan standar campuran (mAU) 20508 30101 30421

59

ferulat yaitu 0.81 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun pohpohan yaitu 150.76 mg.

9. Bunga Pepaya Bunga pepaya memiliki kadar air sebesar 88.91 %, mengandung total fenol sebanyak 66.75 mg/100 gram sampel segar dan 601.90 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel bunga pepaya, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.04, asam kafeat pada menit ke- 2.95, dan asam ferulat pada menit ke- 7.38. Hasil kromatogram ekstrak sampel bunga pepaya dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 34. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 35. Gambar 35 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel bunga pepaya dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak bunga pepaya, standar campuran, dan ekstrak bunga pepaya dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 20. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga pepaya berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.77 mg, asam kafeat yaitu 1.03 mg, dan asam ferulat yaitu 0.75 mg. Total asam fenolat untuk sampel bunga pepaya yaitu 2.55 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 6.93 mg, asam kafeat yaitu 9.31 mg, dan asam ferulat yaitu 6.75 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga pepaya yaitu 22.99 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga pepaya berdasarkan perhitungan eksternal

60

Gambar 34. Kromatogram ekstrak bunga pepaya dengan analisis HPLC

Gambar 35. Ko-kromatogram ekstrak bunga pepaya dengan standar campuran

Tabel 20. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Pepaya

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak bunga pepaya (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

660 969 1049

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak bunga pepaya dengan standar campuran (mAU) 17440 30084 32303

61

standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.95 mg, asam kafeat yaitu 0.66 mg, dan asam ferulat yaitu 0.69 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga pepaya yaitu 2.30 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 8.58 mg, asam kafeat yaitu 5.94 mg, dan asam ferulat yaitu 6.22 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga pepaya yaitu 20.74 mg.

10. Mangkokan Putih Mangkokan putih memiliki kadar air sebesar 82.31%, mengandung total fenol sebanyak 179.88 mg/100 gram sampel segar dan 1016.83 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel mangkokan putih, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16, asam kafeat pada menit ke- 3.07, dan asam ferulat pada menit ke- 7.22. Hasil kromatogram ekstrak sampel mangkokan putih dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 36. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 37. Gambar 37 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel mangkokan putih dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak mangkokan putih, standar campuran, dan ekstrak mangkokan putih dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 21. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mangkokan putih berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 14.13 mg, asam kafeat yaitu 1.69 mg, dan asam ferulat yaitu 0.80 mg. Total asam fenolat sampel mangkokan putih

62

Gambar 36. Kromatogram ekstrak mangkokan putih dengan analisis HPLC

Gambar 37. Ko-kromatogram ekstrak mangkokan putih dengan standar campuran Tabel 21. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Mangkokan Putih Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak mangkokan putih (mAU) 5951 935 566

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak mangkokan putih dengan standar campuran (mAU) 21130 31163 34571

63

yaitu 16.62 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 79.90 mg, asam kafeat yaitu 9.56 mg, dan asam ferulat yaitu 4.51 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan putih yaitu 93.96 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel mangkokan putih berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 14.52 mg, asam kafeat yaitu 1.07 mg, dan asam ferulat yaitu 0.70 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan putih yaitu 16.30 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 82.10 mg, asam kafeat yaitu 6.07 mg, dan asam ferulat yaitu 3.95 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel mangkokan putih yaitu 92.12 mg. 11. Kenikir Kenikir memiliki kadar air sebesar 80.30 %, mengandung total fenol sebanyak 342.06 mg/100 gram sampel segar dan 1736.70 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel kenikir, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.15, asam kafeat pada menit ke- 2.75, dan asam ferulat pada menit ke- 6.93. Hasil kromatogram ekstrak sampel kenikir dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 38. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 39. Gambar 39 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel kenikir dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada kokromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak kenikir, standar campuran, dan ekstrak kenikir dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 22.

64

Gambar 38. Kromatogram ekstrak kenikir dengan analisis HPLC

Gambar 39. Ko-kromatogram ekstrak kenikir dengan standar campuran

Tabel 22. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Kenikir

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak kenikir (mAU) 1872 2404 2454

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak kenikir dengan standar campuran (mAU) 17258 29598 30211

65

Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel kenikir berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.53 mg, asam kafeat yaitu 3.64 mg, dan asam ferulat yaitu 3.14 mg. Total asam fenolat untuk sampel kenikir yaitu 11.31 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 23.02 mg, asam kafeat yaitu 18.48 mg, dan asam ferulat yaitu 15.93 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel kenikir yaitu 57.43 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel kenikir berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.88 mg, asam kafeat yaitu 3.00 mg, dan asam ferulat yaitu 3.04 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel kenikir yaitu 10.91 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 24.76 mg, asam kafeat yaitu 15.22 mg, dan asam ferulat yaitu 15.44 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel kenikir yaitu 55.426 mg. Daun kenikir memiliki kandungan asam kafeat tertinggi kedua setelah daun beluntas. Kandungan senyawa asam kafeatnya yaitu 18.48 mg/100 gram sampel kering. Oleh karena itu daun kenikir juga bisa menjadi sumber asam kafeat.

12. Daun Kelor Daun kelor memiliki kadar air sebesar 75.27 %, mengandung total fenol sebanyak 107.00 mg/100 gram sampel segar dan 432.75 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun kelor, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.13, asam kafeat pada menit ke- 3.20, dan asam ferulat pada menit ke- 7.22. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun kelor dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 40. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil kokromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 41.

66

Gambar 40. Kromatogram ekstrak daun kelor dengan analisis HPLC

Gambar 41. Ko-kromatogram ekstrak daun kelor dengan standar campuran Tabel 23. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kelor

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak daun kelor (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

2218 1385 2778

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun kelor dengan standar campuran (mAU) 16623 30153 30353

67

Gambar 41 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun kelor dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun kelor, standar campuran, dan ekstrak daun kelor dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 23. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kelor berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 6.65 mg, asam kafeat yaitu 2.93 mg, dan asam ferulat yaitu 4.41 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun kelor yaitu 14.00 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 26.91 mg, asam kafeat yaitu 11.85 mg, dan asam ferulat yaitu 17.85 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kelor yaitu 56.61 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kelor berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 7.09 mg, asam kafeat yaitu 2.12 mg, dan asam ferulat yaitu 4.29 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kelor yaitu 13.50 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 28.66 mg, asam kafeat yaitu 8.57 mg, dan asam ferulat yaitu 17.36 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kelor yaitu 54.59 mg. Daun kelor memiliki kandungan asam ferulat tertinggi kedua setelah kedondong cina yaitu 17.85 mg/100 gram sampel kering.

13. Daun Kucai Daun kucai memiliki kadar air sebesar 92.30 %, mengandung total fenol sebanyak 21.01 mg/100 gram sampel segar dan 272.86 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun kucai, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.04, asam kafeat pada menit ke- 2.99, dan asam

68

ferulat pada menit ke- 7.16. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun kucai dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 42. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil kokromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 43. Gambar 43 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun kucai dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun kucai, standar campuran, dan ekstrak daun kucai dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 24. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kucai berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.077 mg, asam kafeat yaitu 0.36 mg, dan asam ferulat yaitu 0.10 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun kucai yaitu 0.53 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 0.99 mg, asam kafeat yaitu 4.6308 mg, dan asam ferulat yaitu 1.32 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kucai yaitu 6.94 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kucai berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.21 mg, asam kafeat yaitu 0.08 mg, dan asam ferulat yaitu 0.06 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kucai yaitu 0.35 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 2.68 mg, asam kafeat yaitu 1.08 mg, dan asam ferulat yaitu 0.75 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kucai yaitu 4.50 mg. Daun kucai memiliki kandungan asam klorogenat paling rendah dibandingkan dengan sampel yang lainnya yaitu sebesar 0.077 mg/100 gram

69

Gambar 42. Kromatogram ekstrak daun kucai dengan analisis HPLC

Gambar 43. Ko-kromatogram ekstrak daun kucai dengan standar campuran

Tabel 24. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Kucai Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak daun kucai (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

191 173 104

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun kucai dengan standar campuran (mAU) 16437 28579 29984

70

sampel kering. Dengan demikian daun kucai kurang baik jika dikonsumsi sebagai sumber asam klorogenat.

14. Daun Jambu Mete Daun jambu mete memiliki kadar air sebesar 80.82 %, mengandung total fenol sebanyak 847.4081 mg/100 gram sampel segar dan 4418.38 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun jambu mete, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.11 dan asam ferulat pada menit ke- 7.28. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun jambu mete dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 44. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 45. Gambar 45 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun jambu mete dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun jambu mete, standar campuran, dan ekstrak daun jambu mete dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 25. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun jambu mete berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 13.53 mg dan asam ferulat yaitu 2.88 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun jambu mete yaitu 16.41 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 70.53 mg dan asam ferulat yaitu 15.02 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun jambu mete yaitu 85.55 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun jambu mete berdasarkan perhitungan eksternal

71

Gambar 44. Kromatogram ekstrak daun jambu mete dengan analisis HPLC

Gambar 45. Ko-kromatogram ekstrak daun jambu mete dengan standar campuran

Tabel 25. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Jambu Mete Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak jambu mete (mAU) 5594 2577

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak jambu mete dengan standar campuran (mAU) 19429 39253 32366

72

standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 13.91 mg asam ferulat yaitu 2.79 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun jambu mete yaitu 16.70 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 72.55 mg dan asam ferulat yaitu 14.54 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun jambu mete yaitu 87.08 mg. Daun jambu mete memiliki kandungan total fenol tertinggi diantara sampel yang lainnya yaitu 4418.38 mg/100 gram sampel kering. Sandrasari (2009) dalam penelitiannya mengenai kaitan antioksidan dengan total fenol pada ekstrak sayuran indigenous Indonesia menyatakan bahwa semakin tinggi total fenol pada ekstrak sayuran maka semakin tinggi kapasitas antioksidannya, semakin tinggi pula kemampuan sebagai radikal scavenger, kemampuan mereduksi, dan kemampuannya dalam menghambat oksidasi lipid lanjut. Total fenol yang sangat tinggi ini menunjukkan bahwa pada sampel daun jambu mete masih banyak terdapat senyawa antioksidan yang lain selain asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat). Berdasarkan penelitian Rahmat (2009) menyatakan bahwa jambu mete memiliki kandungan senyawa quercetin paling tinggi dibandingkan dengan sampel lainnya yaitu 573.07 mg/100 gram sampel kering.

15. Buah Takokak Buah Takokak memiliki kadar air sebesar 79.89 %, mengandung total fenol sebanyak 158.92 mg/100 gram sampel segar dan 790.12 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel buah takokak, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16, asam kafeat pada menit ke- 3.07, dan asam ferulat pada menit ke- 7.28. Hasil kromatogram ekstrak sampel buah takokak dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 46. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 47.

73

Gambar 46. Kromatogram ekstrak buah takokak dengan analisis HPLC

Gambar 47. Ko-kromatogram ekstrak buah takokak dengan standar campuran

Tabel 26. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Buah Takokak

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak buah takokak (mAU) 11765 1358 171

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak buah takokak dengan standar campuran (mAU) 23292 29844 30125

74

Gambar 47 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel buah takokak dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak buah takokak, standar campuran, dan ekstrak buah takokak dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 26. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel buah takokak berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 33.14 mg, asam kafeat yaitu 2.56 mg, dan asam ferulat yaitu 0.32 mg. Total asam fenolat untuk sampel buah takokak yaitu 36.02 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 164.76 mg, asam kafeat yaitu 12.74 mg, dan asam ferulat yaitu 1.60 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel buah takokak yaitu 179.11 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bauh takokak berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 33.70 mg, asam kafeat yaitu 1.852 mg, asam ferulat yaitu 0.21 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel buah takokak yaitu 35.76 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 167.57 mg, asam kafeat yaitu 9.21 mg, dan asam ferulat yaitu 1.03 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel buah takokak yaitu 177.80 mg. Buah takokak memiliki kandungan total asam fenolat tertinggi kedua setelah kedondong cina. Kandungan total asam fenolatnya sebesar 179.11 mg/100 gram sampel kering. Dengan demikian buah takokak dapat menjadi salah satu alternatif sebagai sumber asam fenolat untuk kebutuhan tubuh manusia. Adanya asam fenolat yang tinggi dapat berfungsi sebagai antioksidan dalam tubuh.

75

16. Antanan Antanan memiliki kadar air sebesar 81.72 %, mengandung total fenol sebanyak 200.52 mg/100 gram sampel segar dan 1097.23 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel antanan, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.11, asam kafeat pada menit ke- 2.96, dan asam ferulat pada menit ke-7.15. Hasil kromatogram ekstrak sampel antanan dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 48. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 49. Gambar 49 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel antanan dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak antanan, standar campuran, dan ekstrak antanan dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 27. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel antanan berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 9.22 mg, asam kafeat yaitu 1.19 mg, dan asam ferulat yaitu 1.80 mg. Total asam fenolat untuk sampel antanan yaitu 12.22 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 50.47 mg, asam kafeat yaitu 6.50 mg, dan asam ferulat yaitu 9.88 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan yaitu 66.85 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel antanan berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 9.58 mg, asam kafeat yaitu 0.57 mg, asam ferulat yaitu 1.71 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan

76

Gambar 48. Kromatogram ekstrak antanan dengan analisis HPLC

Gambar 49. Ko-kromatogram ekstrak antanan dengan standar campuran

Tabel 27. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Antanan Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak antanan (mAU) 4141 503 1556

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak antanan dengan standar campuran (mAU) 18817 29693 32177

77

yaitu 11.86 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 52.42 mg, asam kafeat yaitu 3.10 mg, dan asam ferulat yaitu 9.36 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan yaitu 64.88 mg.

17. Krokot Krokot memiliki kadar air sebesar 88.07 %, mengandung total fenol sebanyak 82.66 mg/100 gram sampel segar dan 692.69 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel krokot, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.05, asam kafeat pada menit ke- 3.04, dan asam ferulat pada menit ke- 7.09. Hasil kromatogram ekstrak sampel krokot dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 50. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 51. Gambar 51 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel krokot dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada kokromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak krokot, standar campuran, dan ekstrak krokot dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 28. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel krokot berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 5.78 mg, asam kafeat yaitu 0.54 mg, dan asam ferulat yaitu 0.22 mg. Total asam fenolat untuk sampel krokot yaitu 6.55 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 48.48 mg, asam kafeat yaitu 4.56 mg, dan asam ferulat yaitu 1.84 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel krokot yaitu 54.88 mg.

78

Gambar 50. Kromatogram ekstrak krokot dengan analisis HPLC

Gambar 51. Ko-kromatogram ekstrak krokot dengan standar campuran

Tabel 28. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Krokot

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak krokot (mAU) 4032 206 200

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak krokot dengan standar campuran (mAU) 18384 29113 29051

79

Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel krokot berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 6.01 mg, asam kafeat yaitu 0.15 mg, asam ferulat yaitu 0.16 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel krokot yaitu 6.32 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 50.37 mg, asam kafeat yaitu 1.26 mg, dan asam ferulat yaitu 1.31 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel krokot yaitu 52.94 mg.

18. Antanan Beurit Antanan beurit memiliki kadar air sebesar 84.30 %, mengandung total fenol sebanyak 144.81 mg/100 gram sampel segar dan 922.37 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel antanan beuritt, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16 dan asam kafeat pada menit ke- 3.06. Hasil kromatogram ekstrak sampel antanan beurit dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 52. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dapat dilihat pada Gambar 53. Gambar 53 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada kokromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel antanan beurit dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak antanan beurit, standar campuran, dan ekstrak antanan beurit dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 29. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel antanan beurit berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 24.27 mg dan asam kafeat yaitu 1.35 mg. Total asam fenolat untuk sampel antanan beurit yaitu 25.62 mg. Dry basis

80

Gambar 52. Kromatogram ekstrak antanan beurit dengan analisis HPLC

Gambar 53. Ko-kromatogram ekstrak antanan beurit dengan standar campuran

Tabel 29. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Antanan Beurit Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak antanan beurit (mAU) 11980 866

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak antanan beurit dengan standar campuran (mAU) 22485 29124 29769

81

(per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 154.58 mg dan asam kafeat yaitu 8.62 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan beurit yaitu 163.20 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel antanan beurit berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 24.68 mg dan asam kafeat yaitu 0.82 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan beurit yaitu 25.51 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 157.23 mg dan asam kafeat yaitu 5.25 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel antanan beurit yaitu 162.48 mg. Antanan beurit memiliki kandungan total asam fenolat tertinggi ketiga setelah kedondong cina dan buah takokak. Besarnya kandungan total asam fenolat yang dikandungnya yaitu 163.20 mg/100 gram sampel kering. Antanan beurit dapat menjadi salah satu sumber asam fenolat yang baik untuk kesehatan manusia.

19. Daun Ginseng Daun ginseng memiliki kadar air sebesar 91.83 %, mengandung total fenol sebanyak 64.64 mg/100 gram sampel segar dan 790.76 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun ginseng, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16, asam kafeat pada menit ke- 3.09, dan asam ferulat pada menit ke- 7.21. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun ginseng dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 54. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 55. Gambar 55 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun ginseng dapat ditentukan

82

Gambar 54. Kromatogram ekstrak daun ginseng dengan analisis HPLC

Gambar 55. Ko-kromatogram ekstrak daun ginseng dengan standar campuran

Tabel 30. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Ginseng Area pada Komponen Asam ekstrak daun Fenolat ginseng (mAU) Asam klorogenat 493 Asam kafeat 258 Asam ferulat 83

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun ginseng dengan standar campuran (mAU) 18076 29940 32879

83

dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun ginseng, standar campuran, dan ekstrak daun ginseng dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 30. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun ginseng berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.38 mg, asam kafeat yaitu 0.40 mg, dan asam ferulat yaitu 0.09 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun ginseng yaitu 0.87 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 4.67 mg, asam kafeat yaitu 4.96 mg, dan asam ferulat yaitu 1.05 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun ginseng yaitu 10.68 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun ginseng berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 0.52 mg, asam kafeat yaitu 0.13 mg, asam ferulat yaitu 0.04 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun ginseng yaitu 0.68 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 6.31 mg, asam kafeat yaitu 1.57 mg, dan asam ferulat yaitu 0.50 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun ginseng yaitu 8.38 mg.

20. Bunga Kecombrang Bunga kecombrang memiliki kadar air sebesar 89.77 %, mengandung total fenol sebanyak 256.99 mg/100 gram sampel segar dan 2511.45 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel bunga kecombrang, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16, asam kafeat pada menit ke- 2.81, dan asam ferulat pada menit ke- 6.98. Hasil kromatogram ekstrak sampel bunga kecombrang dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 56. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-

84

Gambar 56. Kromatogram ekstrak bunga kecombrang dengan analisis HPLC

Gambar 57. Ko-kromatogram ekstrak bunga kecombrang dengan standar campuran Tabel 31. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Kecombrang

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak bunga kecombrang (mAU) 10387 985 113

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak bunga kecombrang dengan standar campuran (mAU) 20829 29700 30713

85

kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 57. Gambar 57 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel bunga kecombrang dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada kokromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak bunga kecombrang, standar campuran, dan ekstrak bunga kecombrang dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 31. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga kecombrang berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 14.06 mg, asam kafeat yaitu 0.96 mg, dan asam ferulat yaitu 0.13 mg. Total asam fenolat untuk sampel bunga kecombrang yaitu 15.15 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 137.42 mg, asam kafeat yaitu 9.37 mg, dan asam ferulat yaitu 1.24 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga kecombrang yaitu 148.04 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga kecombrang berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 14.32 mg, asam kafeat yaitu 0.62 mg, asam ferulat yaitu 0.07 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga kecombrang yaitu 15.01 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 139.92 mg, asam kafeat yaitu 6.08 mg, dan asam ferulat yaitu 0.71 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga kecombrang yaitu 146.71 mg. Bunga kecombrang memiliki kandungan total fenol tertinggi ketiga setelah daun jambu mete dan daun beluntas. Kandungan total fenolnya yaitu 2511.45 mg/100 gram sampel kering.

86

21. Daun Beluntas Daun beluntas memiliki kadar air sebesar 80.81 %, mengandung total fenol sebanyak 742.54 mg/100 gram sampel segar dan 3868.59 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun beluntas, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.15 dan asam kafeat pada menit ke3.14. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun beluntas dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 58. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 59. Gambar 59 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun beluntas dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun beluntas, standar campuran, dan ekstrak daun beluntas dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 32. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun beluntas berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 19.99 mg dan asam kafeat yaitu 8.65 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun beluntas yaitu 28.65 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 104.17 mg dan asam kafeat yaitu 45.09 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun beluntas yaitu 149.26 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun beluntas berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 20.44 mg dan asam kafeat yaitu 8.04 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun beluntas yaitu 28.48 mg.

87

Gambar 58. Kromatogram ekstrak daun beluntas dengan analisis HPLC

Gambar 59. Ko-kromatogram ekstrak daun beluntas dengan standar campuran

Tabel 32. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Daun Beluntas Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak daun beluntas (mAU) 8130 6709

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak daun beluntas dengan standar campuran (mAU) 21663 33126 34114

88

Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 106.51 mg dan asam kafeat yaitu 41.88 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun beluntas yaitu 148.39 mg. Daun beluntas memiliki kandungan asam kafeat tertinggi diantara sampel sayuran lain yaitu 45.09 mg/100 gram sampel kering. Dengan demikian daun beluntas dapat menjadi sumber asam kafeat yang baik. Tingginya senyawa asam kafeat didalam suatu bahan pangan akan memberikan dampak yang baik terhadap kesehatan manusia. Contohnya berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Jian et al. (1999), asam kafeat memiliki efek toksik pada sel tumor U937 dan JAR ketika dosis obatnya lebih dari 50 µg/mL.

22. Bunga Turi Bunga turi memiliki kadar air sebesar 90.23 %, mengandung total fenol sebanyak 38.43 mg/100 gram sampel segar dan 393.19 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel bunga turi, peak senyawa asam ferulat pada menit ke- 6.96. Hasil kromatogram ekstrak sampel bunga turi dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 60. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 61. Gambar 61 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel bunga turi dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak bunga turi, standar campuran, dan ekstrak bunga turi dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 33. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga turi berdasarkan perhitungan kurva standar

89

Gambar 60. Kromatogram ekstrak bunga turi dengan analisis HPLC

Gambar 61. Ko-kromatogram ekstrak bunga turi dengan standar campuran

Tabel 33. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Bunga Turi

Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak bunga turi (mAU)

66

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak bunga turi dengan standar campuran (mAU) 18170 30222 33039

90

campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam ferulat yaitu 0.10 mg. Total asam fenolat untuk sampel bunga turi yaitu 0.10 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam ferulat yaitu 1.00 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga turi yaitu 1.00 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel bunga turi berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam ferulat yaitu 0.04 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga turi yaitu 0.04 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam ferulat yaitu 0.41 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel bunga turi yaitu 0.41 mg. Bunga turi memiliki kandungan total asam fenolat terendah dibandingkan dengan sampel yang lainnya yaitu sebesar 1.00 mg/100 gram sampel kering. Bunga turi kurang baik sebagai sumber asam fenolat karena konsentrasinya yang rendah.

23. Terubuk Terubuk memiliki kadar air sebesar 88.39 %, mengandung total fenol sebanyak 87.65 mg/100 gram sampel segar dan 754.68 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel terubuk, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.16, asam kafeat pada menit ke- 3.07, dan asam ferulat pada menit ke- 7.20. Hasil kromatogram ekstrak sampel terubuk dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 62. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah ko-kromatogram. Hasil ko-kromatogram dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 63. Gambar 63 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel terubuk dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan muncul-

91

Gambar 62. Kromatogram ekstrak terubuk dengan analisis HPLC

Gambar 63. Ko-kromatogram ekstrak terubuk dengan standar campuran Tabel 34. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Terubuk

Komponen Asam Fenolat

Area pada ekstrak terubuk (mAU)

Area pada standar campuran (mAU)

Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

2805 904 129

26285 55941 55252

Area pada ekstrak terubuk dengan standar campuran (mAU) 20512 31193 34051

92

nya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada kokromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak terubuk, standar campuran, dan ekstrak terubuk dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 34. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel terubuk berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.17 mg, asam kafeat yaitu 1.05 mg, dan asam ferulat yaitu 0.16 mg. Total asam fenolat untuk sampel terubuk yaitu 5.37 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 35.89 mg, asam kafeat yaitu 9.02 mg, dan asam ferulat yaitu 1.34 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel terubuk yaitu 46.26 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel terubuk berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 4.38 mg, asam kafeat yaitu 0.65 mg, asam ferulat yaitu 0.09 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel terubuk yaitu 5.13 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 37.76 mg, asam kafeat yaitu 5.61 mg, dan asam ferulat yaitu 0.79 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel terubuk yaitu 44.16 mg.

24. Daun Kedondong Cina Daun kedondong cina memiliki kadar air sebesar 85.43%, mengandung total fenol sebanyak 189.08 mg/100 gram sampel segar dan 1297.72 mg/100 gram sampel kering. Pada sampel daun kedondong cina, peak senyawa asam klorogenat muncul pada menit ke- 2.01 dan asam ferulat pada menit ke- 7.29. Hasil kromatogram ekstrak sampel daun kedondong cina dengan analisis HPLC dapat dilihat pada Gambar 64. Untuk memastikan lebih jauh benar atau tidaknya waktu retensi senyawa asam fenolat yang dianalisis maka dilakukan injeksi sampel yang telah ditambahkan standar campuran, hasilnya dikenal dengan istilah kokromatogram. Hasil ko-kromatogram dapat dilihat pada Gambar 65.

93

Gambar 65 menunjukkan bahwa peak yang terbentuk pada ko-kromatogram mengalami perubahan luas area. Hal ini terjadi karena adanya penambahan standar campuran kedalam sampel. Penentuan komponen yang diidentifikasi dalam sampel daun kedondong cina dapat ditentukan dari peak yang terbentuk, urutan munculnya peak, waktu retensi, dan perubahan luas area yang terjadi pada ko-kromatogram. Perbandingan luasan area antara ekstrak daun kedondong cina, standar campuran, dan ekstrak daun kedondong cina dengan standar campuran dapat dilihat pada Tabel 35. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kedondong cina berdasarkan perhitungan kurva standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 47.02 mg dan asam ferulat yaitu 5.02 mg. Total asam fenolat untuk sampel daun kedondong cina yaitu 52.03 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 322.68 mg dan asam ferulat yaitu 34.44 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kedondong cina yaitu 357.12 mg. Kandungan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) pada sampel daun kedondong cina berdasarkan perhitungan eksternal standar campuran didapatkan nilai sebagai berikut: wet basis (per 100 gram sampel segar), asam klorogenat yaitu 47.58 mg dan asam ferulat yaitu 4.95 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kedondong cina yaitu 52.53 mg. Dry basis (per 100 gram sampel kering), asam klorogenat yaitu 326.53 mg dan asam ferulat yaitu 33.97 mg, sehingga total asam fenolat untuk sampel daun kedondong cina yaitu 360.50 mg. Daun kedondong cina memiliki jumlah kandungan asam klorogenat dan asam ferulat terbesar dibandingkan sampel yang lain yaitu 322.68 mg/100 gram sampel kering dan 34.44 mg/100 gram sampel kering. Dengan demikian daun kedondong cina sangat baik sebagai sumber klorogenat dan asam ferulat. Senyawa asam klorogenat maupun asam ferulat sangat baik bagi kesehatan manusia karena kemampuannya sebagai antioksidan. Penelitian yang dilakukan oleh Laranjinha (1994) menyatakan bahwa asam klorogenat dan asam kafeat menghambat oksidasi LDL secara invitro dan

94

Gambar 64. Kromatogram ekstrak kedondong cina dengan analisis HPLC

Gambar 65. Ko-kromatogram ekstrak kedondong cina dengan standar campuran

Tabel 35. Perbandingan Luasan Area Kromatografi Ekstrak Kedondong Cina Komponen Asam Fenolat Asam klorogenat Asam kafeat Asam ferulat

Area pada ekstrak kedondong cina (mAU) 23715 5108

Area pada standar campuran (mAU) 26285 55941 55252

Area pada ekstrak kedondong cina dengan standar campuran (mAU) 19342 29719 33724

95

melindungi

dari

penyakit

cardiovascular.

Olthof

(2001)

dalam

penelitiannya yang berkaitan dengan absorbsi senyawa asam klorogenat dan asam kafeat dalam tubuh manusia menyatakan bahwa absorbsi senyawa asam klorogenat dalam tubuh manusia sebesar 33% dan absorbsi senyawa asam kafeat dalam tubuh manusia sebesar 95%. Kedondong cina memiliki kandungan total asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) tertinggi dibandingkan sampel lainnya yaitu 357.13 mg/100 gram sampel kering. Dengan demikian kedondong cina dapat berfungsi sebagai sumber asam fenolat untuk kesehatan manusia. D. REKAPITULASI HASIL DAN SENYAWA YANG TERIDENTIFIKASI PADA SAYURAN INDIGENOUS

BELUM

Penelitian ini menunjukkan bahwa kadar air pada sampel sayuran sangat tinggi yaitu berkisar antara 75-92%. Kadar air tertinggi ditemukan pada sampel daun kucai yaitu 92.30% sedangkan kadar air terendah ditemukan pada sampel daun kelor yaitu 75.27%. Data kadar air kedua puluh empat sayuran indigenous Indonesia dapat dilihat secara lengkap pada Lampiran 8. Kadar total fenol pada sampel menunjukkan besarnya jumlah senyawa fenolik yang terdapat didalam sampel tersebut. Kadar total fenol ini mewakili senyawa fenolik yang terdapat di dalam sampel, baik berupa komponen flavonoid, asam fenolat, maupun komponen fenolik yang lain. Kandungan total fenol tertinggi dalam penelitian ini yaitu pada sampel daun jambu mete dengan total fenol sebesar (4418.38 mg) diikuti oleh daun beluntas (3868.59 mg), dan bunga kecombrang (2511.45 mg). kandungan total fenol terendah ditemukan pada sampel mangkokan yaitu (227.74 mg). Selengkapnya data total fenol dapat dilihat pada Lampiran 11. Sampel yang memiliki kandungan asam fenolat tertinggi yaitu kedondong cina dengan kandungan asam fenolat sebesar (357.12 mg) diikuti oleh buah takokak (179.11 mg), dan antanan beurit (163.20 mg). Sampel terendah yaitu bunga turi dengan kandungan asam fenolat sebesar (0.98 mg). Senyawa asam klorogenat tertinggi terdapat pada sampel kedondong cina (322.68 mg) diikuti oleh buah takokak (164.76 mg) dan antanan beurit (154.58 96

mg). Kandungan senyawa asam klorogenat terendah yaitu pada sampel daun kucai (1.00 mg). Kandungan senyawa asam kafeat tertinggi terdapat pada daun beluntas (45.09 mg) diikuti oleh daun kenikir (18.48 mg) dan daun kemangi (16.13 mg). Kandungan senyawa asam kafeat terendah terdapat pada sampel daun labu (4.12 mg). Kandungan senyawa asam ferulat tertinggi terdapat pada sampel kedondong cina (34.44 mg) diikuti oleh daun kelor (17.85 mg) dan daun kenikir (15.94 mg). Kandungan senyawa asam ferulat terendah terdapat pada daun labu (0.93 mg). Tabel 36. Kandungan Asam Fenolat pada Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Segar No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Sayuran Indigenous Indonesia* Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga kecombrang Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong cina

mg Asam Fenolat per 100 gram edible portion 3.06 2.25 6.47 7.66 5.61 2.51 3.05 18.74 2.55 16.62 11.31 14.00 0.53 16.41 36.02 12.22 6.55 25.62 0.87 15.15 28.65 0.10 5.37 52.03

*semua sayuran indigenous di atas dikonsumsi dalam bentuk lalapan

Adapun senyawa asam fenolat dari yang terbanyak ke yang tersedikit yaitu asam klorogenat sebesar (322.68 mg) pada sampel kedondong cina, asam 97

kafeat sebesar (45.09 mg) pada sampel daun beluntas, dan asam ferulat sebesar (34.44 mg) pada sampel kedondong cina. Nilai-nilai tersebut dihitung berdasarkan 100 gram berat kering. Tabel 36 menunjukkan kandungan asam fenolat pada dua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia (mg asam fenolat per 100 gram edible portion). Perhitungan asam fenolat secara lengkap dapat dilihat pada Lampiran 12 sampai Lampiran 17. Tabel 37. Kandungan Asam Fenolat pada Dua Puluh Empat Jenis Sayuran Indigenous Berdasarkan Bagian yang diteliti Sampel

Konsentrasi (mg / 100 g sampel kering) Asam Klorogenat

Asam Kafeat

Asam Ferulat

Bagian Daun Mengkudu

15.85 + 0.31

-

5.22 + 0.29

Mangkokan

4.84 + 0.12

6.51 + 0.054

1.37 + 0.02

Labu Siam

43.53 + 0.89

4.12 + 0.019

0.94 + 0.02

Lembayung

27.27 + 0.78

12.95 + 0.27

8.80 + 0.56

Katuk

15.49 + 1.46

5.18+ 0.089

5.05+ 0.20

Kemangi

2.58 + 0.07

16.13 + 0.46

1.28 + 0.04

Pakis

24.06 + 1.46

4.35 + 0.05

-

Pohpohan

141.84 + 3.20

8.97 + 0.07

1.37 + 0.03

Mangkokan Putih

79.90 + 2.31

9.56+ 0.19

4.51 + 0.23

Kenikir

23.02 + 0.93

18.48 + 0.69

15.93 + 1.40

Kelor

26.91 + 0.66

11.85 + 0.33

17.85+ 0.63

Kucai

0.99 + 0.091

4.63 + 0.08

1.32 + 0.05

Jambu Mete

70.53 + 2.00

-

15.02 + 0.65

Ginseng

4.67 + 0.14

4.96 + 0.04

1.05 + 0.04

Beluntas

104.17 + 1.24

45.09 + 2.39

-

Kedondong Cina

322.68 + 5.54

-

34.44 + 1.12

6.93 + 0.00

9.31 + 0.03

6.75 + 0.18

137.42 + 10.83

9.37 + 0.31

1.24 + 0.02

-

-

0.99 + 0.02

Bagian Bunga Pepaya Kecombrang Turi Seluruh Bagian Antanan

50.47 + 1.83

6.50 + 0.10

9.88 + 0.48

Antanan Beurit

154.58 + 3.27

8.62 + 0.19

-

Terubuk

35.89 + 1.15

9.02 + 0.17

1.34 + 0.02

48.48 + 0.58

4.56 + 0.04

1.84 + 0.10

164.76 + 8.12

12.74 + 0.41

1.60 + 0.07

Daun dan Batang Krokot Bagian Buah Takokak Ket: -: Tidak terdeteksi

98

Tabel 36 menunjukkan jumlah asam fenolat yang akan masuk ke dalam tubuh manusia jika dikonsumsi per 100 gram sampel segar serta dikonsumsi dalam bentuk lalapan. Jika sayuran tersebut diolah terlebih dahulu, misal direbus, ditumis, maupun diolah dengan cara dicampur dengan bahan-bahan pangan yang lain maka nilai kandungan asam fenolat yang masuk ke tubuh akan lebih kecil dari angka-angka tersebut. Hal ini terjadi karena asam fenolat merupakan senyawa yang tidak tahan panas. Senyawa asam fenolat akan rusak jika terkena panas, oleh karena itu kandungan asam fenolat akan berkurang jika sayuran tersebut diolah terlebih dahulu sebelum dikonsumsi. Tabel 37 menunjukkan data asam fenolat berdasarkan pengelompokan bagian tanaman yang digunakan untuk penelitian ini yaitu daun, bunga, buah, daun dan batang, dan seluruh bagian. Pada tabel 37 dapat terlihat bahwa senyawa asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat pada bagian daun lebih banyak jika dibandingkan dengan bagian bunga, batang, seluruh bagian, maupun buah. Namun hal ini juga dipengaruhi oleh jenis sayuran yang dianalisis. (Mattila dan HellstrÖm, 2007) dalam penelitiannya didapatkan kisaran senyawa asam fenolat yaitu asam klorogenat 0.1–23 mg per 100 gram sampel segar, asam kafeat 0.06–49 mg/100 gram sampel segar, dan asam ferulat 0.05– 39 mg/100 gram sampel segar. Pada penelitian ini pun mendapatkan nilai diantara kisaran tersebut yaitu asam klorogenat 0.08–47.02 mg/100 gram sampel segar, asam kafeat 0.36 – 8.65 mg per 100 gram sampel segar, dan asam ferulat 0.09– 5.02 mg per 100 gram sampel segar. Pada penelitian ini asam fenolat yang digunakan hanya tiga jenis yaitu asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat. Dari hasil penelitian terlihat bahwa di sampel masih banyak terdapat senyawa asam fenolat selain ketiga jenis senyawa di atas. Tabel 38 menunjukkan rekapitulasi kadar air, total fenol, dan total asam fenolat. Tabel 39 menunjukkan senyawa asam fenolat yang terdeteksi. Jika ingin mengetahui lebih dalam mengenai senyawa asam fenolat apa saja yang masih terkandung di dalam sayuran indigenous maka dapat dilakukan kajian lebih jauh melalui kemungkinan waktu retensinya. Tabel 40 menunjukkan rekapitulasi komponen-komponen yang mungkin terdapat di

99

dalam sayuran indigenous dan persentase area komponen yang belum teridentifikasi terhadap area seluruh komponen yang terdeteksi pada sayuran indigenous Indonesia. Pada Tabel 40 terlihat bahwa antanan memiliki area unknown tertinggi yaitu sebesar 89%, diikuti oleh daun beluntas sebesar 81%. Hal ini menunjukkan bahwa masih banyak senyawa asam fenolat yang mungkin terdapat pada sampel karena pada penelitian ini hanya tiga jenis asam fenolat saja yang dianalisis berdasarkan ketersediaannya yang cukup banyak dalam tanaman yaitu klorogenat, kafeat, dan asam ferulat. Jika dilihat pada tabel 40, senyawa pada waktu retensi menit ke- 3.3 dan menit ke 4.4 terdapat pada semua sampel sayuran indigenous Indonesia. Area yang tertinggi terdapat pada sampel daun jambu mete yaitu sebesar 22220 (mAU) untuk menit ke 3.3 dan 11450 (mAU) untuk menit ke 4.4. Berdasarkan penelitian Ivanauskas et al. (2008) diduga senyawa yang muncul pada menit ke-3.3 adalah senyawa vanilin sedangkan pada menit ke-4.4 adalah senyawa pkoumarat. Hal ini didasarkan atas urutan kemunculan senyawa tersebut dan waktu retensinya. Selain itu masih terdapat senyawa asam fenolat yang hampir muncul pada semua sampel yaitu pada menit ke 2.7 dan menit ke-9.3. Berdasarkan penelitian Ivanauskas et al. (2008) diduga senyawa yang muncul pada menit ke 2.7 adalah senyawa asam vanillat, sedangkan pada menit ke 9.3 diduga senyawa asam sinapat berdasarkan penelitian Ciska et al. (2006). Hal ini didasarkan atas urutan kemunculan senyawa tersebut dan waktu retensinya. Keempat senyawa asam fenolat yaitu vanillin, p-koumarat, asam vanillat, dan asam sinapat memiliki kontribusi besar dalam persentase area unknown pada beberapa sampel sehingga persentase area unknownnya besar. Jika keempat asam fenolat tersebut diteliti dalam penelitian ini maka kontribusi keempat senyawa tersebut dalam persentase area unknown akan lebih kecil akibatnya persentase area yang terdeteksi pada sampel sayuran indigenous akan semakin besar. Menurut Vermerris dan Nicholson (2006) senyawa p-koumarat dan asam sinapat adalah senyawa yang banyak terdapat di tanaman. Keempat senyawa tersebut yaitu vanillin, p-koumarat, asam vanillat, dan asam sinapat mempunyai aktivitas antioksidan, sehingga dapat membantu tubuh untuk menangkal radikal bebas dan penyakit degeneratif lainnya.

100

Tabel 38. Rekapitulasi Kadar Air, Total Fenol, dan Asam Fenolat Sayuran Indigenous

Sampel

Konsentrasi (mg / 100 g sampel kering)

KA (% wet Basis)

A

Total Fenol Total Asam Fenolat*

Mengkudu

defg

Mangkokan

bcde

82.28

a

Daun Labu Siam

efgh

86.68

cd

Daun Lembayung

cdef

Daun Katuk

85.46

84.36

ab

78.19

Daun Kemangi

fghi

Daun Pakis

ghij

Daun Pohpohan

fghij

87.68

Bunga Pepaya

fghij

88.91

Mangkokan Putih

bcde

Daun Kenikir

87.42

89.27

82.31

bc

80.30

cd

gh

499.99 + 2.64

de

227.74 + 0.51

bcd

21.07 + 0.6

a

12.72 + 0.19

de

e

25.73 + 1.30

bc

27.27 + 0.78

690.72 + 5.56

cde

573.52 + 11.69

e

cd

152.18 + 3.19

k

de

986.69 + 13.31

28.41 + 1.51

j

15.49 + 1.46

a

2.58 + 0.07

0.94 + 0.02

d

12.95 + 0.27

ab

d

8.80 + 0.56

5.18+ 0.089

b

16.13 + 0.46

a

e

5.05+ 0.20

1.28 + 0.04

141.84 + 3.20

c

8.97 + 0.07

a

1.37 + 0.03

6.93 + 0.00

c

9.31 + 0.03

c

6.75 + 0.18

79.90 + 2.31

c

b

22.99 + 0.18

ab

1016.83 + 11.30

i

93.96 + 2.64

i

57.43 + 2.22

a

4.35 + 0.05

e

gh

4.12 + 0.019

a

601.90 + 1.85

1736.69 + 1.88

1.37 + 0.02

5.22 + 0.29

24.06 + 1.46

e

m

a

a

49.02 + 1.53

19.98 + 0.50

6.51 + 0.054

43.53 + 0.89

fg

fg

b

b

719.83 + 14.07

Asam ferulat

-

4.84 + 0.12

fg

48.58 + 0.90

Asam kafeat

15.85 + 0.31

fg

632.66 + 2.13

jk

c

498.94 + 5.35

ef

ij

Asam klorogenat

cd

23.02 + 0.93

f

9.56+ 0.19

18.48 + 0.69

-

4.51 + 0.23

e

15.93 + 1.40

101

Lanjutan Rekapitulasi Kadar Air, Total Fenol, dan Asam Fenolat Sayuran Indigenous Daun Kelor

a

75.27

bc

Daun Kucai

j

92.30

a

Daun Jambu Mete

bcd

Buah Takokak

abc

Antanan

bcd

Krokot

fghij

Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga kecombrang

80.82

p

ab

i

4418.38 + 78.45

6.94 + 0.17

a

85.55 + 1.66

h

l

790.12 + 4.67

179.11 + 8.46

26.91 + 0.66

0.99 + 0.091

d

11.85 + 0.33

f

a

a

4.63 + 0.08

70.53 + 2.00

m

d

6.50 + 0.10

d

a

fg

692.69 + 9.42

fg

g

48.48 + 0.58

a

4.56 + 0.04

cdef

84.30

i

922.37 + 7.23

k

l

154.58 + 3.27

c

8.62 + 0.19

ij

h

91.83

ghij

Daun Beluntas

bcd

Bunga Turi

hij

n

89.77

80.81

90.23

Terubuk

fghij

Kedondong cina

defg

2511.45 + 9.55

o

3868.59 + 129.09 b

bc

790.76 + 6.13 j

j

149.26 + 3.46 a

393.19 + 15.61

88.39

gh

85.43

l

754.68 + 29.56

1297.72 + 2.16

a

4.67 + 0.14

ab

137.42 + 10.83

c

10.68 + 0.17

148.04 + 11.15

k

j

104.17 + 1.24

0.99 + 0.02

f

ef

357.12 + 6.65

n

35.89 + 1.15

322.68 + 5.54

9.88 + 0.48

1.84 + 0.10

4.96 + 0.04

a

1.05 + 0.04

9.37 + 0.31

a

1.24 + 0.02

45.09 + 2.39

c

1.60 + 0.07

-

g

-

46.26 + 1.27

m

15.02 + 0.65

b

88.07

163.20 + 3.94

e

g

50.47 + 1.83

54.88 + 0.51

1.32 + 0.05

a

h

66.85 + 2.37

17.85+ 0.63

12.74 + 0.41

164.76 + 8.12

1097.23 + 11.21

81.72

k

d

56.61 + 1.60

272.86 + 1.72

h

79.89

g

432.75 + 11.61

-

-

a

0.99 + 0.02

9.02 + 0.17

a

1.34 + 0.02

-

g

34.44 + 1.12

A : Total Fenol dihitung berdasarkan mg asam gallat / 100 gram sampel kering - : Tidak terdeteksi * : Total asam fenolat = asam klorogenat + asam kafeat + asam ferulat

102

Tabel 39. Rekapitulasi Komponen yang Terdeteksi pada Sampel Sayuran Indigenous Menggunakan HPLC Waktu Retensi (menit) No

Sampel CH

1 Mengkudu 2 Mangkokan 3 Daun Labu Siam 4 Daun Lembayung 5 Daun Katuk 6 Daun Kemangi 7 Daun Pakis 8 Daun Pohpohan 9 Bunga Pepaya 10 Mangkokan Putih 11 Daun Kenikir 12 Daun Kelor 13 Daun Kucai 14 Daun Jambu Mete 15 Buah Takokak 16 Antanan 17 Krokot 18 Antanan Beurit 19 Daun Ginseng 20 Bunga kecombrang 21 Daun Beluntas

+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

CF

+ + + + + + + + + + + + + + + + + + +

22 Bunga Turi 23 Terubuk 24 Kedondong cina

+ +

+

FR

+ + + + + + + + + + + + + + + +

2.3

2.5

+ + +

3.3

4.4

5.5

6.6

7.4

9.3

11.2

13.1

15.0

+

+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

+ + + + + +

+ + +

+ +

+ + + + + +

+ +

+ +

+

+ + + +

+

+ + + + + + + + + + +

+ + +

2.7

+

+ + + + + +

+ + + + + + + + + + + + + + + + + +

+ + + + + + + + + + + + + + + +

+ + + + + + + + + + + + + + +

+ + + +

+ + +

+ + + + + +

+ +

+ + + + +

+ + +

+

+ + + + + + + +

+ + + + +

+ +

+ + +

+ + + + + + +

21.3

27.5

+ + + +

+ + + + + +

+ +

+ + +

+

+ +

+

+

+ +

+

+

+

+

+ +

+ +

+

= Tidak Terdeteksi 103

Tabel 40. Rekapitulasi Area Unknown pada Waktu Retensi Tertentu

No

2.3

2.5

2.7

3.3

4.4

5.5

6.6

7.4

9.3

11.2

13.1

15.0

744

695

715

658

483

120

735

276

825

194

282

481

251

74

75

121

268

99

977

133

590

152

2975

4212

2431

730

1576

590

416

143

279

532

148

393

315

42

139

41

910

620

1147

354

821

567

705

442

1868

422

852

989

49

1 Mengkudu 2 Mangkokan

191

3 Daun Labu Siam

830

4 Daun Lembayung

8166

5 Daun Katuk 6 Daun Kemangi

134

7 Daun Pakis 8 Daun Pohpohan 9 Bunga Pepaya

707

10 Mangkokan Putih 11 Daun Kenikir

432 730

659

612

749

397

1939

25

3945

33

21478

54

11075

37

2209

30

676

12

17599

22723

80

18302

23631

48

97 129

2488

485

464

151

5238

65

1590

473

126

163

291

385 106

389

1529

160

531

388

250

88

142

12922

50

1120

3674

1095

3258

9876

10148

90

1026

35440

56

1051

279

200

815

123

8753

39

1658

31

113590

58

10307

27

73654

89

4633

25

11314

36

1022

1471

13 Daun Kucai

111

146

370

517

66

34

14642

40030

22220

11450

8752

3113

15 Buah Takokak

557

2959

1354

372

1330

1484

16 Antanan

778

588

1847

1026

5323

19437

17 Krokot

372

1676

1051

398

470

400

170

1915

582

1574

1714

424

183

154

311

256

234

364

382

1187

392

243

396

272

332

31

1165 340

20 Bunga kecombrang

%a

5445

6694

1483

19 Daun Ginseng

(mAU*s)

858

895

850

27.5

2646

1074

14 Daun Jambu Mete

21.3

138

12 Daun Kelor

18 Antanan Beurit

Jumlah komponen unknown

Area komponen unknown pada waktu Retensi tertentu (mAU*s)

Sampel

21 Daun Beluntas

426

432

233

652

23133

22 Bunga Turi

288

1343

1026

1422

817

23 Terubuk

1205

1782

643

478

685

24 Kedondong cina

804

7035

1206

267

265

307 3015

2348

688

738

585

21351

1468

601

1111

1557

383

1298 116

21023

212

231

359

998

74

359

1454

106

22633

829

71

5108

948

96

96

108

241

107 5774

124

802

1043

437

799

1959

9

3659

13

31972

1726

84247

81

88

801

6794

38

4793

21

15724

25

= Tidak Terdeteksi 104

E. ANALISIS STATISTIK 1. Uji Tukey Data hasil penelitian ini diolah dengan menggunakan uji Tukey’s HSD (p< 0.05). Hasil uji statistik tersebut menunjukkan bahwa setiap perlakuan yang dikenakan pada sampel berpengaruh nyata terhadap jumlah komponen yang terdeteksi pada sampel. Hal ini terlihat dari nilai signifikansi sampel yang dihasilkan yaitu < dari taraf α 0.05. Untuk hasil selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 2 sampai Lampiran 7. 2. Uji T Uji T digunakan juga dalam pengolahan data pada penelitian ini. Uji T digunakan terhadap dua cara perhitungan yang dilakukan. Pertama menggunakan persamaan kurva standar campuran dan yang kedua menggunakan standar eksternal campuran. Tujuan penggunaan uji T ini adalah untuk mengetahui apakah dengan cara perhitungan yang berbeda akan menimbulkan perbedaan yang signifikan terhadap hasil yang diperoleh. Uji T yang dilakukan disini adalah uji dua perlakuan bebas menggunakan dua sisi pada taraf α= 1% terhadap tujuh belas sampel. Hal ini dilakukan karena tujuh sampel lainnya yaitu bunga turi, mangkokan, katuk, kemangi, papaya, kucai, dan ginseng memiliki konsentrasi yang kecil sehingga menjadi data pencilan dan harus dibuang. Setelah dilakukan pengujian maka diperoleh data sebagai berikut: Tabel 41. Uji T pada Perhitungan Kandungan Asam Fenolat antara Kurva Standar Campuran dan Eksternal Standar Campuran t-Test: Paired Two Sample for Means Berat kering total asam fenolat Kurva Standar Campuran Mean 103.3850754 Variance 6886.754388 Observations 17 Pearson Correlation 0.999889568 Hypothesized Mean Difference 0 df 16 t Stat 2.65578224 P(T<=t) one-tail 0.00863215 t Critical one-tail 2.583487179 P(T<=t) two-tail 0.017264301 t Critical two-tail 2.920781621

Eksternal Standar Campuran 102.3767659 7046.162857 17

105

Tabel 41 menunjukkan bahwa P (T<=t) two tail > 0.01 yaitu 0.0173>0.01. Dengan demikian perhitungan dengan kurva standar campuran dan eksternal standar campuran tidak berbeda nyata pada taraf α=1%. Bila melihat data pada Tabel 11, perhitungan persentase antara selisih hasil perhitungan dengan kurva standar campuran dengan perhitungan eksternal standar pada bunga turi, ginseng, kucai, mangkokan, dan kemangi memiliki perbedaan nilai yang lebih dari 10%. Hal ini mengindikasikan bahwa perhitungan dengan menggunakan eksternal standar tidak memberikan hasil yang baik bila kandungan komponen yang diidentifikasi memiliki jumlah yang sangat rendah di dalam sampel. Berdasarkan hasil pada Tabel 11, dapat dilihat bahwa bila konsentrasi komponen lebih rendah dari 20 mg/100 gram berat kering, maka hasil yang diberikan oleh perhitungan dengan menggunakan eksternal standar campuran menjadi tidak benar dan memiliki tingkat kesalahan yang besar (lebih dari 10%). Sebaiknya, bila komponen yang akan diidentikasi pada sampel jumlahnya sangat rendah (lebih rendah dari 20 mg/100 gram berat kering), perhitungan dilakukan dengan menggunakan kurva standar, agar hasil yang diperoleh lebih baik. Namun bila jumlah komponen cukup tinggi, perhitungan dengan menggunakan eksternal standar tidak terlalu menjadi masalah, karena bila dilihat dari Tabel 11, perbedaan hasil antara perhitungan dengan kurva standar dan eksternal standar tidak melebihi 10%. 3. Principal Component Analysis (PCA) Metode statistik yang dapat mengidentifikasi suatu keragaman dinamakan principal component analysis yang dapat menjelaskan jumlah keragaman dari yang terbesar hingga yang jumlah keragaman terkecil yang tersembunyi. Analisis ini dapat menjelaskan 75 % - 90 % dari total keragaman dalam data yang mempunyai 25 sampai 30 variabel hanya dengan dua sampai tiga principal component (Meilgaard et al., 1999). Berdasarkan data kandungan flavonoid pada sayuran indigenous Indonesia yang telah diteliti oleh Batari (2007) dan Rahmat (2009) maka dilakukanlah analisis PCA (Principal Component Analysis) antara total

106

fenol dengan asam fenolat (asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat) dan flavonoid (myricetin, luteolin, quercetin, apigenin, dan kaempferol). a. Analisis Hubungan antara Total fenol, Asam klorogenat, Asam kafeat, Asam ferulat, Myricetin, Luteolin, Quercetin, Apigenin, dan Kaempferol Hasil olahan data analisis kesembilan senyawa dengan menggunakan PCA (Principal Component Analysis) menghasilkan data akar ciri (eigen value) dengan proporsi dan kumulatif keragaman dari sembilan variabel yang dapat dilihat pada Tabel 42. Tabel 42. Akar Ciri (Eigen Value), Proporsi, dan Kumulatif Keragaman dari Sembilan Variabel Variabel

Akar Ciri Proporsi Kumulatif

Total Fenol

2.155

0.239

0.239

Myricetin

1.557

0.173

0.412

Luteolin

1.300

0.144

0.557

Quercetin

1.115

0.124

0.681

Apigenin

0.966

0.107

0.788

Kaempferol

0.873

0.097

0.885

Asam klorogenat

0.595

0.066

0.951

Asam kafeat

0.305

0.034

0.985

Asam ferulat

0.135

0.015

1.000

Berdasarkan dua komponen utama tersebut, maka dari Tabel 44 diambil nilai mutlak (absolut) tertinggi dari nilai-nilai vektor ciri (yang dicetak tebal pada Tabel 44). Komponen pertama (PC1) dibagi dalam dua kelompok dimana kelompok pertama memiliki hubungan yang positif, yaitu quercetin dan kelompok kedua yang memiliki hubungan negatif yakni luteolin. Komponen utama kedua (PC2) dibagi dalam dua kelompok juga, dimana kelompok pertama memiliki hubungan positif, yakni kaempferol dan kelompok kedua memiliki hubungan negatif, yaitu asam kafeat. Seperti diperlihatkan pada Tabel 42, komponen utama satu (PC1) dan komponen utama dua (PC2) memiliki persentase keragaman yang lebih besar dari komponen lainnya. Komponen utama pertama (PC1)

107

mampu menerangkan keragaman data sebesar 23.9 %, sedangkan komponen utama kedua (PC2) mampu menerangkan keragaman data sebesar 17.3 %, sehingga keseluruhan keragaman yang dapat diterangkan oleh kedua komponen utama tersebut pada grafik biplot adalah sebesar 41.2 %.

Total Fenol

1

Myricetin

0.235

Luteolin

-0.118 -0.127 1

Quercetin

0.447

Apigenin

-0.133 -0.161 -0.058 0.132

Kaempferol

-0.145 -0.101 -0.084 -0.078 -0.078 1

Asam klorogenat

0.305

0.054

Asam kafeat

0.425

-0.075 0.182

Asam ferulat

0.191

-0.086 -0.052 0.634

Asam kafeat

Asam ferulat

klorogenat

Asam

Kaempferol

Apigenin

Quercetin

Luteolin

Variabel

Myricetin

Total Fenol

Tabel 43. Matriks Korelasi Sembilan Variabel

1

0.182

-0.075 1

-0.157 0.065

1

-0.171 -0.067 1

-0.031 0.090 0.063

-0.210 0.036 1 0.125

0.459 -0.174 1

Tabel 44. Nilai-Nilai Vektor dari Hubungan antara Masing-Masing Variabel dengan Komponen Utama Variabel

PC 1 (23.9%) PC 2 (17.3%)

Total Fenol

0.489

-0.383

Myricetin

0.188

-0.136

Luteolin

-0.161

-0.236

Quercetin

0.525

0.098

Apigenin

-0.035

0.034

Kaempferol

-0.083

0.461

Asam klorogenat

0.400

0.060

Asam kafeat

0.078

-0.640

Asam ferulat

0.499

0.379

108

Grafik biplot PC1 dan PC2 pada Gambar 66 membagi sayuran ke dalam empat kelompok berdasarkan senyawa yang dikandungnya. Masing-masing kelompok terdiri dari objek-objek yang digambarkan sebagai titik-titik. Objek-objek dengan karakteristik yang sama digambarkan sebagai titik-titik yang posisinya berdekatan (Sartono et al., 2003). Kelompok pertama terdiri dari daun katuk, bunga turi, mangkokan, daun kucai, daun pakis, krokot, mengkudu, bunga pepaya, mangkokan putih, dan daun ginseng. Kelompok kedua terdiri dari antanan, daun kelor, kedondong cina, dan daun lembayung. Kelompok ketiga terdiri dari antanan beurit, daun kenikir, daun jambu mete, bunga kecombrang, daun beluntas, dan buah takokak. Kelompok keempat terdiri dari daun kemangi, terubuk, daun pohpohan, dan daun labu siam.

Ket: 1 : Antanan 2 : Antanan Beurit 3 : Buah Takokak 4 : Bunga Kecombrang 5 : Bunga Pepaya 6 : Bunga Turi

7 : Daun Beluntas 8 : Daun Ginseng 9 : Daun Jambu Mete 10 : Daun Kacang Panjang 11 : Daun Katuk 12 : Daun Kelor

13 : Daun Kemangi 14 : Daun Kenikir 15 : Daun Kucai 16 : Daun Labu 17 : Daun Pakis 18 : Daun Pohpohan

19 : Kedondong Cina 20 : Krokot 21 : Mangkokan Kecil 22 : Mangkokan Putih 23 : Mengkudu 24 : Terubuk

Gambar 66. Biplot hubungan total fenol, asam klorogenat, asam kafeat, asam ferulat, myricetin, luteolin, quercetin, apigenin, dan kaempferol

109

Grafik biplot sebelumnya dapat menginterpretasikan hubungan antara dua atribut. Grafik biplot akan menggambarkan variabel sebagai garis berarah. Dua variabel yang memiliki korelasi positif akan digambarkan sebagai dua buah garis dengan arah yang sama atau membentuk sudut sempit (<90°), sedangkan dua variabel yang memiliki korelasi negatif akan digambarkan dalam bentuk dua garis dengan arah berlawanan atau membentuk sudut tumpul (>90°) (Sartono et al., 2003). Namun pada analisis data kali ini, keragaman data yang ditampilkan hanya sebesar 41.2% sehingga tidak dapat mewakili keseluruhan komponen yang dianalisis. Dengan demikian hasil analisisnya tidak dapat menjelaskan korelasi dari masing-masing senyawa yang dianalisis. b. Analisis Hubungan Total Fenol, Total Flavonoid, dan Total Asam Fenolat Hasil olahan data analisis ketiga senyawa dengan menggunakan PCA (Principal Component Analysis) menghasilkan data akar ciri (eigen value) dengan proporsi dan kumulatif keragaman dari tiga variabel yang dapat dilihat pada Tabel 45 . Tabel 45. Akar Ciri, Proporsi, dan Kumulatif Tiga Variabel Variabel Akar Ciri Proporsi Kumulatif 1

1.410

0.470

0.470

2

0.993

0.331

0.801

3

0.596

0.199

1.000

Berdasarkan dua komponen utama tersebut, maka dari Tabel 45 diambil nilai mutlak (absolut) tertinggi dari nilai-nilai vektor ciri (yang dicetak tebal pada Tabel 45). Komponen pertama (PC1) hanya terdiri dari satu kelompok yang memiliki hubungan positif yaitu total fenol. Komponen utama kedua (PC2) dibagi dalam dua kelompok, dimana kelompok pertama memiliki hubungan positif, yakni total flavonoid dan kelompok kedua memiliki hubungan negatif, yaitu total asam fenolat. Seperti diperlihatkan pada Tabel 45, komponen utama satu (PC1) dan komponen utama dua (PC2) memiliki persentase keragaman yang lebih besar dari komponen lainnya.

110

Tabel 46. Matriks Korelasi Total Fenol, Total Flavonoid, dan Total Asam Fenolat Variabel Total Fenol

Total Fenol Total Flavonoid Total Asam Fenolat 1

Total Flavonoid

0.200

1

Total Asam Fenolat

0.354

0.008

1

Tabel 47. Nilai-Nilai Vektor dari Hubungan antara Masing-Masing Variabel dengan Komponen Utama Variabel

PC 1 (47.0%) PC 2 (33.1%)

Total Fenol

0.704

-0.010

Total Flavonoid

0.354

0.871

Total Asam Fenolat

0.615

-0.491

Komponen utama pertama (PC1) mampu menerangkan keragaman data sebesar 47.0 %, sedangkan komponen utama kedua (PC2) mampu menerangkan keragaman data sebesar 33.1 %, sehingga keseluruhan keragaman yang dapat diterangkan oleh kedua komponen utama tersebut pada grafik biplot adalah sebesar 80.1 %. Grafik biplot PC1 dan PC2 pada Gambar 67 membagi sayuran ke dalam empat kelompok berdasarkan senyawa yang dikandungnya. Masing-masing kelompok terdiri dari objek-objek yang digambarkan sebagai titik-titik. Objek-objek dengan karakteristik yang sama digambarkan sebagai titik-titik yang posisinya berdekatan (Sartono et al., 2003). Kelompok pertama terdiri dari bunga turi, mengkudu, daun labu siam, bunga pepaya, daun lembayung, daun kelor, dan antanan. Kelompok kedua terdiri dari daun katuk, daun kenikir, dan daun jambu mete. Kelompok ketiga terdiri dari mangkokan putih, antanan beurit, daun pohpohan, buah takokak, bunga kecombrang, daun beluntas, dan kedondong cina. Kelompok empat terdiri dari daun kucai, mangkokan, daun kemangi, daun ginseng, daun pakis, krokot, dan terubuk.

111

Ket: 1 : Antanan 2 : Antanan Beurit 3 : Buah Takokak 4 : Bunga Kecombrang 5 : Bunga Pepaya 6 : Bunga Turi

13 : Daun Kemangi 7 : Daun Beluntas 14 : Daun Kenikir 8 : Daun Ginseng 15 : Daun Kucai 9 : Daun Jambu Mete 10 : Daun Kacang Panjang 16 : Daun Labu 17 : Daun Pakis 11 : Daun Katuk 18 : Daun Pohpohan 12 : Daun Kelor

19 : Kedondong Cina 20 : Krokot 21 : Mangkokan Kecil 22 : Mangkokan Putih 23 : Mengkudu 24 : Terubuk

Gambar 67. Biplot hubungan antara total fenol, total asam fenolat, dan total flavonoid Sampel-sampel yang terletak pada kuadran pertama (bunga turi, mengkudu, daun labu siam, bunga pepaya, daun lembayung, daun kelor, dan antanan) dan keempat (daun kucai, mangkokan, daun kemangi, daun ginseng, daun pakis, krokot, dan terubuk) mengandung sedikit total flavonoid, total fenol, dan total asam fenolat. Selanjutnya sampel-sampel yang terletak pada kuadran kedua (daun katuk, daun kenikir, dan daun jambu mete) mengandung total flavonoid dan total fenol yang tinggi, namun sampel-sampel pada kuadran kedua ini mengandung sedikit total asam fenolat. Sampel-sampel yang terletak pada kuadran ketiga (mangkokan putih, antanan beurit, daun pohpohan, buah takokak, bunga kecombrang, daun beluntas, dan kedondong cina) mengandung total asam fenolat dan total fenol yang tinggi, namun sampel-sampel pada kuadran ketiga ini 112

mengandung sedikit total asam fenolat. Grafik biplot di atas juga dapat menginterpretasikan hubungan antara dua atribut. Grafik biplot akan menggambarkan variabel sebagai garis berarah. Dua variabel yang memiliki korelasi positif akan digambarkan sebagai dua buah garis dengan arah yang sama atau membentuk sudut sempit (<90°), sedangkan dua variabel yang memiliki korelasi negatif akan digambarkan dalam bentuk dua garis dengan arah berlawanan atau membentuk sudut tumpul (>90°) (Sartono et al., 2003). Pada Gambar 67 sebelumnya dapat dilihat bahwa total fenol membentuk sudut sempit (<90°) baik dengan total flavonoid maupun dengan total asam fenolat. Dengan demikian total fenol memiliki korelasi positif terhadap total flavonoid dan total asam fenolat, sehingga semakin tinggi total fenol maka baik total flavonoid maupun total asam fenolat akan tinggi juga. Begitu pula sebaliknya jika total fenol rendah maka total flavonoid dan total asam fenolat akan rendah juga. Total flavonoid dan total asam fenolat juga membentuk sudut sempit (<90°). Hal ini menunjukkan bahwa total flavonoid dan total asam fenolat berkorelasi positif, semakin tinggi total flavonoid maka akan semakin tinggi pula total asam fenolatnya dan sebaliknya jika total flavonoid rendah maka total asam fenolat pun akan rendah.

113

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN Kadar total fenol pada sampel menunjukkan besarnya jumlah senyawa fenolik yang terdapat di dalam sampel tersebut. Kadar total fenol ini mewakili senyawa fenolik yang terdapat di dalam sampel, baik berupa komponen flavonoid, asam fenolat, maupun komponen fenolik yang lain. Kandungan total fenol tertinggi dalam penelitian ini yaitu pada sampel daun jambu mete dengan total fenol sebesar (4418.38 mg) diikuti oleh daun beluntas (3868.59 mg), dan bunga kecombrang (2511.45 mg). kandungan total fenol terendah ditemukan pada sampel mangkokan yaitu (227.74 mg). Kedua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia mengandung cukup banyak asam fenolat terutama asam klorogenat, asam kafeat, dan asam ferulat. Tiga sampel yang memiliki kandungan asam fenolat terbanyak adalah daun kedondong cina (357.13 mg), buah takokak (179.11 mg), dan antanan beurit (163.20 mg). Adapun senyawa asam fenolat dari yang terbanyak ke yang tersedikit yaitu asam klorogenat sebesar (322.68 mg) pada sampel kedondong cina, asam kafeat sebesar (45.09 mg) pada sampel daun beluntas, dan asam ferulat sebesar (34.44 mg) pada sampel kedondong cina. Nilai-nilai tersebut dihitung berdasarkan 100 gram berat kering. Pada penelitian ini mendapatkan data kisaran asam klorogenat sebesar 0.08–47.02 mg per 100 gram sampel segar, asam kafeat sebesar 0.36 – 8.65 mg per 100 gram sampel segar, dan asam ferulat sebesar 0.09– 5.02 mg per 100 gram sampel segar. Hasil uji statistik dengan menggunakan metode PCA (Principal Component Analysis) terhadap total fenol, asam klorogenat, asam kafeat, asam ferulat, myricetin, luteolin, quercetin, apigenin, dan kaempferol pada kedua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia mampu menerangkan keragaman data sebesar 41.2% dengan hanya menggunakan dua komponen utama yaitu komponen utama satu (PC1) sebesar 23.9% dan komponen utama dua (PC2) sebesar 17.3%. Dua variabel yang memiliki korelasi positif akan digambarkan sebagai dua buah garis dengan arah yang sama atau membentuk sudut sempit (<90°), sedangkan dua variabel yang memiliki korelasi negatif

114

akan digambarkan dalam bentuk dua garis dengan arah berlawanan atau membentuk sudut tumpul (>90°) (Sartono et al., 2003). Namun pada analisis data kali ini, keragaman data yang ditampilkan hanya sebesar 41.2% sehingga tidak dapat mewakili keseluruhan komponen yang dianalisis. Dengan demikian hasil analisisnya tidak dapat menjelaskan korelasi dari masing-masing senyawa yang dianalisis. Hasil uji statistik dengan menggunakan metode PCA (Principal Component Analysis) yang dilakukan terhadap total fenol, total asam fenolat, dan total flavonoid pada kedua puluh empat sayuran indigenous Indonesia mampu menerangkan keragaman data sebesar 80.1% dengan hanya menggunakan dua komponen utama yaitu komponen utama satu (PC1) sebesar 47.0% dan komponen utama dua (PC2) sebesar 33.1%. Hasil uji statistik ini juga menunjukkan bahwa total fenol memiliki korelasi positif terhadap total flavonoid dan total asam fenolat (sudut yang dibentuk antara total fenol terhadap total flavonoid dan total asam fenolat <90o), sehingga semakin tinggi total fenol maka baik total flavonoid maupun total asam fenolat akan tinggi dan sebaliknya jika total fenol rendah maka baik total flavonoid maupun total asam fenolat akan rendah.

B. SARAN Pada kedua puluh empat jenis sampel sayuran indigenous Indonesia ini ternyata masih banyak mengandung jenis-jenis asam fenolat yang lainnya. Dengan demikian perlu penelitian lanjutan untuk mengetahui komponen asam fenolat yang lain selain yang telah diteliti saat ini. Kedua puluh empat jenis sayuran indigenous Indonesia ini memiliki kandungan asam fenolat dan flavonoid yang cukup tinggi sehingga sangat baik untuk dikembangkan menjadi produk pangan baru yang siap santap dan siap saji.

115

DAFTAR PUSTAKA Agullo, G, Gamet-Payrastre L, Manenti S, Viala C, Remesy C, Chap H, Payrastre B. 1997. Relationship Between Flavonoid Structure and Inhibition of Phosphatidylinositol 3-Kinase: Acomparison with Tyrosine Kinase and Protein Kinase C Inhibition. Biochem. Pharmacol. 53 (1997) 1649-1657. Anonim. 2007. Http ://www. republika. co. id/. [4 Januari 2009] AOAC. 1984. Official Method of Analysis. Assosiation of Official Analytical Chemistry, Washington D.C. Ashida, H, Fukuda I, Yamashita T, Kanazawa K. 2000. Flavones and Flavonols at Dietary Levels Inhibit a Transformation af Aryl Hydrocarbon Receptor Induced By Dioxin. FEBS Lett. 476 (2000) 213-217. Azar, M, Verette E, and Burn S. 1987. Identification of Some Phenolic Compounds In Bilberry. Batari, R. 2007. Identifikasi Senyawa Flavonoid pada Sayuran Indigenous Jawa Barat. Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian, IPB. Bogor. Birošova L, Mikulašova M, Vaverkova Š. Antimutagenic Effect of Phenolic Acids. 2005. Biomed. Pap. Med. Fac. Univ. Palacky. Olomouc. Czech. Repub. 149(2) (2005) 489-91. Cadenas, E and Packer, L. 2002. Handbook of Antioxidants Second Edition Revised and Expanded. Marcel Dekker, Inc. New York Ciska, E, Karamaæ, M, Kosiñska, A. 2005. Antioxidant Activity of Extracts of White Cabbage and Sauerkraut. Pol. J. Food Nutr. Sci. 14/55 (2005) 367373. Duthie, GG, Duthie SJ, Kyle JAM. 2000. Plant Polyphenols in Cancer and Heart Disease: Implications as Nutritional Antioxidants. Nutr. Res. Rev. 13 (2000) 79-106. Frey, RS, Li J, Singletary KW. 2001. Effects of Genistein on Cell Proliferation and Cell Cycle Arrest in Nonneoplastic Human Mammary Epithelial Cells: Involvement of Cdc2, P21(Waf/Cip1), P27(Kip1), And Cdc2C Expression. Biochem. Pharmacol. 61 (2001) 979-989. Haddock, EA, Gupta RK, Al-Shafi SMK, Layden K, Haslam E, Magnolato D. 1982. The Metabolism of Gallic Acid and Hexahydroxydiphenic Acid in Plants: Biogenetic and Molecular Taxonomic Considerations. Phytochem. 21 (1982) 1049-1062. Hakkinen, S. 2000. Flavonols and Phenolic Acids in Berries and Berry Products. Doctoral dissertation. Fac. Med. Univ. Kuopio. Finland. Halliwell, B., Rafter, J., and Jenner A. 2005. Health Promotion by Flavonoids, Tocopherols, Tocotrienols, and Other Phenols: Direct Or Indirect Effects? Antioxidant Or Not? Am. J. Clin. Nutr. 81 (2005) 268S-276S (Suppl.) Hertog, MGL, Kromhout D, Aravanis C, Blackburn H, Buzina R, Fidanza F, Giampaoli S, Jansen A, Menotti A, Nedeljkovic S, Pekkarinen M, Simic 116

BS, Toshima H, Feskens EJM, Hollman PCH, Katan MB. 1995. Flavonoid Intake and Long-Term Risk of Coronary Heart Disease and Cancer In The Seven Countries Study. Arch. Intern. Med. 155 (1995) 381-386. Ishartani, D. 2004. Pengaruh Pengeringan Terhadap Sifat Fisiko Kimia dan Fungsional Tepung Kecambah Kacang Tunggak (Vigna unguiculata) Hasil Germinasi dengan Natrium Alginat sebagai Elisator Senyawa Antioksidan. Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Ivanauskas, L, Jakštas, V, Radušienė, J, Lukošius, A, Baranauskas, A. 2008. Evaluation of Phenolic Acids and Phenylpropanoids in the Crude Drugs. J. Med. 44 (1) (2008). Jian, Hong Yan, AN, Cheng Cai, Feng J, Ci, YX, Li Y, Sugisawa A, Izumitani M, Chen ZL. 1999. Effect of Caffeic Acid on The Tumor Cells U937 Evaluated by an Electrochemical Voltammetric Method. Chin. Chem. Lett. 10 (1999) 781−782. Kobuchi, H, Roy S, Sen CK, Nguyen HG, Packer L. 1999. Quercetin Inhibits Inducible ICAM-1 Expression in Human Endothelial Cells Through The JNK Pathway. Am. J. Physiol. 277 (1999) C403-C411. Laranjinha, JA, Almeida, LM, Madeira, VM. 1994. Reactivity of Dietary Phenolic Acids with Peroxyl Radicals: Antioxidant Activity Upon Low Density Lipoprotein Peroxidation. Biochem. Pharmacol. 48 (1994) 487494 Macheix J-J, Fleuriet A, Billot J. 1990. Fruit Phenolics. Boca Raton, USA: CRC Press. Macheix, J-J, Fleuriet A, and Billot J. 1989. Fruit Phenolics.CRC Press, Boca Raton, FL. Manach, C, Scalbert A, Morand C, Re´me´sy C, Jime´nez L. 2004. Polyphenols: Food Sources and Bioavailability. Am. J. Clin. Nutr. 79 (2004) 727-747. Mattila, P. and Hellstrom, J. 2007. Phenolic Acids in Potatoes, Vegetables, and Some of Their Products. J. Food Com. Anal. 20 (2007) 152–160 Mattila, P. and Kumpulainen, J. 2002. Determination of Free and Total Phenolic Acids in Plant-Derived Foods by HPLC with Diode-Array Detection. J. Agric. Food Chem. 50 (2002) 3660-3667. Meilgaard, M, Civille, G and Carr, BT. 1999. Sensory Evaluation Techniques. Third Ed. CRC Press, Florida. Meyer, AS, Heinonen M, Frankel EN. 1998. Antioxidant Interactions of Catechin, Cyanidin, Caffeic Acid, Quercetin, and Ellagic Acid on Human LDL Oxidation. Food Chem. 61 (1998) 71-75. Mosel, H.D. und Herrmann, K. 1974. Die Phenolischen Inhalsstoffe der Obstes.IV. Die Phenolischen Inhalsstoffe der Brombeeren und Himbeeren und Deren Deren Veranderun gen Wahrend Wachstum und Reife der Fruchte. Z. Lebensm.Unters. Forsch. 154 (1974) 324

117

Olthof, Margreet R, Hollman PCH, and Katan MB. 2001. Chlorogenic Acid and Caffeic Acid are Absorbed in Humans. Journal of Nutrition. 131 (2001) 131:66-71. Rahmat, H. 2009. Identifikasi Senyawa Flavonoid Pada Sayuran Indigenous Jawa Barat. Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian, IPB. Bogor. Rimbach G, Fuchs J, and Packer L. 2005. Application of Nutrigenomics Tools to Analyze The Role of Oxidants and Antioxidants in Gene Expression. in: Rimbachg, Fuchs J, Packer L, Editors. Nutrigenomics. Boca Raton, Fla.: Taylor and Francis. P 1–12. Rivas, N and Luh, BS. 1968. Polyphenolic Compounds in Tomatoes Pastes. J. Food Sci. 33 (1968) 358 Rounds, MA and SS. Nielsen. 2000. Basic Principles of Chromatography. Di dalam : Nollet, LML. (Ed). Food Analysis by HPLC, Second Edition, Revised and Expanded. Marcell Dekker, Inc., New York. Rounds, MA, and JF. Gregor. 2003. High Performance Liquid Chromatography. Di dalam : Nielsen, S. S. (Ed.). Food Analysis, Third Edition. Plenum Publisher, New York. Sakakibara, H, Honda Y, Nakagawa S, Ashida H, and Kanazawa K. 2003. Simultaneous Determination of All Plyphenols in Vegetables, Fruits, and Teas. J. Agric. Food Chem. 51 (2003) 571-581. Sandrasari, DA. 2009. Kapasitas Antioksidan dan Hubungannya dengan Nilai Total Fenol Ekstrak Sayuran Indigenous. Tesis. IPB. Sartono, B, FM Affendi, UD, Syahfitri IM, Sumertajaya, dan Y. Anggraeni. 2003. Analisis Variabel Ganda. Dept. Statistika. IPB. Bogor. Schmidtlein, H. and Herrmann, K. 1975a. On The Phenolics Acids of Vegetables. I . Hydroxycinnamic Acids and Hidroxybenzoic Acids of Brassica Species and Leaves of Other Cruciferae. Z. Lebensm. Unters. Forsch.,159 (1975) 139 Schmidtlein, H. and Herrmann, K. 1975b. On The Phenolics Acids of Vegetables. IV. Hydroxycinnamic Acids and Hidroxybenzoic Acids of Vegetables and Potatoes. Z. Lebensm. Unters. Forsch.,159 (1975) 255 Schuster, B. and Herrmann, K. 1985. Hydroxyenzoic and Hydroxycinnamic Acid Derivatives in Soft Fruits. Phytochem. 24 (1985) 2761. Shahidi, F and Naczk, M. 1995. Food Phenolics. Technomic Publishing Co, Lancaster, Basel. Singleton, VL. 1980. Grape and Wine Phenolics, Background and Prospects.In Proceedings of The Symposium o Grape and Wine Centennial, University of California, Davis, CA, p.215 Stohr, A. und Herrmann, K. 1975a. Die Phenolischen Inhalsstoffe der Obstes.IV. Die Phenolischen Inhalsstoffe der Johannisbeeren, Stachelbeeren und Kulturheidelbeeren Veranderungen der Phenolsauren und Catechine

118

Wahrend Wachstum und Reife Von Swarzen Johannisbeeren. Z. Lebensm. Unters. Forsch., 159 (1975) 31 Stohr, A. and Herrmann, K. 1975b. The Phenols of Fruits.V.The Phenols of Strawberries and Their Changes During Development and Ripeness of Fruits. Z. Lebensm. Unters. Forsch., 158 (1975) 341 Strack, D. 1997. Phenolic Metabolism. in: Dey PM, Harborne JB, Eds. Plant Biochemistry. London, UK: Academic Press, p 387–416. U.P. Singh, A. Suman, M. Sharma, JN, Singh, Amitabh Singh, S. Maurya. 2008. HPLC Analysis of the Phenolic Profiles in Different Parts of Chilli (Capsicum annum) and Okra (Abelmoschus esculentus L.) Moench. The Intern. J. Altern. Med. 5 (2008) 2. Vermerris, W and Nicholson, R. 2006. Phenolic compound Biochemistry. Springer. USA Wallace G, Fry SC. 1994. Phenolic Components of The Plant Cell Wall. Int Rev Cytol 151 (1994) 229–267 Williamson, G, Plumb GW, Uda Y, Price KR, Rhodes MJC. 1996. Dietary Quercetin Glycosides: Antioxidant Activity and Induction of The Anticarcinogenic Phase II Marker Enzyme Quinone Reductase in Hepalclc7 Cells. Carcinogenesis 17 (1996) 2385-2387. Yang, CS, Landau JM, Huang MT, Newmark HL. 2001. Inhibition of Carcinogenesis by Dietary Polyphenolic Compounds. Annu. Rev. Nutr. 21 (2001) 381-406.

119

LAMPIRAN Lampiran 1. Gambar Kedua Puluh Empat Sayuran Indigenous Indonesia

Kenikir

Beluntas

Mangkokan

Antanan

(Nothopanax scutellarium)

Kemangi

Bunga Kecombrang

Antanan beurit

Daun ginseng

Kucai

Takokak

Kedondong cina

Pakis

Krokot

Katuk

Bunga turi

Pohpohan

120

Bunga pepaya

Daun Labu Siam

Daun jambu mete

Daun mengkudu

Terubuk

Lembayung

Mangkokan Putih

Daun kelor

121

Lampiran 2. Uji Tukey’s Kadar Air Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20

21 22 23 24

Value Label Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga Kecombran g Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong Cina

N 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2

122

Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: kadar_air Type III Sum of Squares

Source Model sampel

df

Mean Square

F

Sig.

348312.412(a)

24

14513.017

10794.431

.000

10794.431

.000

348312.412

24

14513.017

Error

32.268

24

1.344

Total

348344.680

48

a R Squared = 1.000 (Adjusted R Squared = 1.000)

Homogeneous Subsets Kadar _Air a,b

Tukey HSD

Subset sampel Daun Kelor Daun Katuk Buah Takokak Daun Kenikir Daun Beluntas Daun Jambu Mete Antanan Mangkokan Mangkokan Putih Antanan Beurit Daun Lembayung Kedondong Cina Mengkudu Daun Labu Siam Daun Kemangi Daun Pohpohan Krokot Terubuk Bunga Pepaya Daun Pakis Bunga Kecombrang Bunga T uri Daun Ginseng Daun Kucai Sig.

N 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2

1 75.273750 78.186450 79.886400

.061

2 78.186450 79.886400 80.304150 80.805850 80.820800 81.724550 82.279150 82.310100

.142

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) = 1.344. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.000. b. Alpha = .05.

3

79.886400 80.304150 80.805850 80.820800 81.724550 82.279150 82.310100 84.300200 84.364850

.078

4

80.805850 80.820800 81.724550 82.279150 82.310100 84.300200 84.364850 85.429850 85.455300

.057

5

82.279150 82.310100 84.300200 84.364850 85.429850 85.455300 86.679600

.089

6

84.300200 84.364850 85.429850 85.455300 86.679600 87.420000 87.684550 88.066900 88.386150 88.910450

.062

7

85.429850 85.455300 86.679600 87.420000 87.684550 88.066900 88.386150 88.910450 89.266550 89.767200

.100

8

86.679600 87.420000 87.684550 88.066900 88.386150 88.910450 89.266550 89.767200 90.226950

.334

9

87.420000 87.684550 88.066900 88.386150 88.910450 89.266550 89.767200 90.226950 91.825800 .089

10

87.684550 88.066900 88.386150 88.910450 89.266550 89.767200 90.226950 91.825800 92.301350 .061

123

Lampiran 3. Uji Tukey’s Total Fenol Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20

21 22 23 24

Value Label Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga Kecombran g Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong Cina

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

124

Te sts of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Total_Fenol Source Model sampel Error Total

Type III Sum of Squares 219642457a 219642457 75640.672 219718098

df 24 24 72 96

Mean Square 9151769.041 9151769.041 1050.565

F 8711.284 8711.284

Sig. .000 .000

a. R Squared = 1.000 (Adjusted R Squared = 1.000)

Homogeneous Subsets Total_Fenol Tukey HSD

a,b

Subset sampel Mangkokan Daun Kucai Bunga Turi Daun Kelor Daun Labu Siam Mengkudu Daun Pakis Bunga Pepaya Daun Katuk Daun Kemangi Krokot Daun Lembayung Terubuk Buah Takokak Daun Ginseng Antanan Beurit Daun Pohpohan Mangkokan Putih Antanan Kedondong Cina Daun Kenikir Bunga Kecombrang Daun Beluntas Daun Jambu Mete Sig.

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

1 227.7436 272.8625

2

3

393.1891 432.7506

432.7506 498.9447 499.9851

5

498.9447 499.9851 573.5146

6

573.5146 601.9034 632.6609

7

632.6609 690.7185 692.6928

8

690.7185 692.6928 719.8315 754.6846

9

10

11

12

13

14

15

16

719.8315 754.6846 790.1223 790.7635 922.3677 986.6874

986.6874 1016.833

1016.833 1097.234 1297.718 1736.691 2511.455 3868.588

.944

.986

Means f or groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) = 1050.565. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000. b. Alpha = .05.

4

.364

.192

.614

.586

.461

.268

.450

1.000

.104

1.000

1.000

1.000

1.000

4418.379 1.000

125

Lampiran 4. Uji Tukey’s Total Asam Fenolat pada Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20

21 22 23 24

Value Label Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga Kecombran g Daun Beluntas Bunga Turi Terubuk Kedondong Cina

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

126

Te sts of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Total_Asam_Fenolat Source Model sampel Error Total

Type III Sum of Squares 1175227.897 a 1175227.897 918.616 1176146.513

df

Mean Square 48967.829 48967.829 12.759

24 24 72 96

F 3838.038 3838.038

Sig. .000 .000

a. R Squared = .999 (Adjusted R Squared = .999)

Homogeneous Subsets Total_Asam_Fenolat a,b

Tukey HSD

sampel Bunga Turi Daun Kucai Daun Ginseng Mangkokan Daun Kemangi Mengkudu Bunga Pepaya Daun Katuk Daun Pakis Terubuk Daun Labu Siam Daun Lembayung Krokot Daun Kelor Daun Kenikir Antanan Daun Jambu Mete Mangkokan Putih Bunga Kecombrang Daun Beluntas Daun Pohpohan Antanan Beurit Buah Takokak Kedondong Cina Sig.

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

1 .989675 6.941800

2 6.941800 10.683075 12.724400

10.683075 12.724400 19.982750

4

12.724400 19.982750 21.065850

5

6

Subset 7

8

9

10

11

12

13

19.982750 21.065850 22.987100 25.728375 28.411375 46.256825 48.583875 49.024125 54.885500

48.583875 49.024125 54.885500 56.606300 57.434875

57.434875 66.850625 85.552625 93.962025 148.0364 149.2603 152.1826 163.2019 179.1060

.769

.809

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) = 12.759. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000. b. Alpha = .05.

3

.066

.172

.158

.131

.105

.058

.161

.992

1.000

1.000

357.1251 1.000

127

Lampiran 5. Uji Tukey’s Asam Klorogenat Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20

21 23 24

Value Label Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga Kecombran g Daun Beluntas Terubuk Kedondong Cina

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

128

Te sts of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Chlorogenic_Acid Type III Sum of Squares 910521.209a 910521.209 773.977 911295.186

Source Model sampel Error Total

df

Mean Square 39587.879 39587.879 11.217

23 23 69 92

F 3529.257 3529.257

Sig. .000 .000

a. R Squared = .999 (Adjusted R Squared = .999)

Homogeneous Subsets Chlorogenic_Acid a,b

Tukey HSD

Subset sampel Daun Kucai Daun Kemangi Daun Ginseng Mangkokan Bunga Pepaya Daun Katuk Mengkudu Daun Kenikir Daun Pakis Daun Kelor Daun Lembayung Terubuk Daun Labu Siam Krokot Antanan Daun Jambu Mete Mangkokan Putih Daun Beluntas Bunga Kecombrang Daun Pohpohan Antanan Beurit Buah Takokak Kedondong Cina Sig.

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

1 .995050 2.576275 4.675075 4.844200 6.927875

2

6.927875 15.498400

3

15.498400 15.846075 23.023525 24.063250

4

23.023525 24.063250 26.908675 27.266950

5

27.266950 35.891250

6

35.891250 43.528625

7

8

9

10

11

12

13

14

43.528625 48.479900 50.468150 70.532875 79.898750 104.1717 137.4216 141.8413 154.5843 164.7634

.649

.074

.075

.974

.070

.195

.351

1.000

1.000

1.000

.961

1.000

1.000

322.6822 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) = 11.217. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000. b. Alpha = .05.

129

Lampiran 6. Uji Tukey’s Asam Kafeat Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 15 16 17 18 19 20

21 23

Value Label Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pakis Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Buah Takokak Antanan Krokot Antanan Beurit Daun Ginseng Bunga Kecombran g Daun Beluntas Terubuk

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

130

Te sts of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Caffeic_Acid Source Model sampel Error Total

Type III Sum of Squares 15285.513 a 15285.513 20.938 15306.452

df

Mean Square 764.276 764.276 .349

20 20 60 80

F 2190.068 2190.068

Sig. .000 .000

a. R Squared = .999 (Adjusted R Squared = .998)

Homogeneous Subsets Ca ffe ic_ Acid a,b

Tu key HSD

sa mpe l Da un La bu Sia m Da un Pa kis Krokot Da un Ku ca i Da un Ginsen g Da un Ka tu k An ta nan Ma ngkokan An ta nan Beu rit Da un Po hpo ha n Te ru buk Bu nga Pep aya Bu nga Kecombran g Ma ngkokan Pu tih Da un Ke lo r Bu ah Ta ko kak Da un Le mba yun g Da un Ke man gi Da un Ke nikir Da un Be lu ntas Sig.

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

1 4.12 06 25 4.34 81 00 4.56 31 00 4.63 08 25 4.96 10 00 5.17 95 50

2

3

Su bse t 4

5

6

7

4.96 10 00 5.17 95 50 6.50 31 00 6.50 63 75 8.61 76 50 8.97 34 00 9.02 52 50 9.30 99 50 9.37 08 25 9.55 59 00 11 .8 52 000 12 .7 39 400 12 .9 54 350 16 .1 30 525 18 .4 76 000

.563

.051

.761

.490

1.00 0

1.00 0

45 .0 88 650 1.00 0

Me ans for group s in ho moge ne ous sub se ts a re d isplayed . Ba sed on Type III Su m of Squa re s Th e erro r term is Mean Squa re (Error) = .34 9. a. Uses Harmonic Me an Sample Size = 4.00 0. b. Alph a = .05.

131

Lampiran 7. Uji Tukey Asam Ferulat Sayuran Indigenous Indonesia

Univariate Analysis of Variance Be twe en-Subje cts Factors sampel

1 2 3 4 5 6 8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 19 20

22 23 24

Value Label Mengkudu Mangkokan Daun Labu Siam Daun Lembayung Daun Katuk Daun Kemangi Daun Pohpohan Bunga Pepaya Mangkokan Putih Daun Kenikir Daun Kelor Daun Kucai Daun Jambu Mete Buah Takokak Antanan Krokot Daun Ginseng Bunga Kecombran g Bunga Turi Terubuk Kedondong Cina

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

132

Te sts of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Ferrulic_Acid Source Model sampel Error Total

Type III Sum of Squares 9189.622a 9189.622 14.413 9204.035

df

Mean Square 437.601 437.601 .229

21 21 63 84

F 1912.813 1912.813

Sig. .000 .000

a. R Squared = .998 (Adjusted R Squared = .998)

Homogeneous Subsets Fe rr ulic _Ac id a,b

Tu key HSD

sa mpe l Da un La bu Sia m Bu nga T uri Da un Ginsen g Bu nga Kecombran g Da un Ke man gi Da un Ku ca i Te ru buk Da un Po hpo ha n Ma ngkokan Bu ah Ta ko kak Krokot Ma ngkokan Pu tih Da un Ka tu k Me ngkudu Bu nga Pep aya Da un Le mba yun g An ta nan Da un Ja mbu Me te Da un Ke nikir Da un Ke lo r Ke don do ng Cina Sig.

N 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

1 .934 67 5 .989 67 5 1.04 70 25 1.24 39 25 1.27 59 75 1.31 59 25 1.34 03 50 1.36 79 75 1.37 37 75 1.60 31 50 1.84 24 50

2

Su bse t 4

5

6

7

4.50 74 25 5.05 04 00 5.21 98 00 6.74 92 25 8.80 28 75 9.87 93 75 15 .0 19 775 15 .9 35 350 17 .8 45 650 .479

.857

Me ans for group s in ho moge ne ous sub se ts a re d isplayed . Ba sed on Type III Su m of Squa re s Th e erro r term is Mean Squa re (Error) = .22 9. a. Uses Harmonic Me an Sample Size = 4.00 0. b. Alph a = .05.

3

1.00 0

.192

.463

1.00 0

34 .4 42 975 1.00 0

133

Lampiran 8. Kadar Air Sayuran Indigenous Indonesia No 1

Mengkudu

Sampel

Ulangan 1

duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.6334 5.4098

W sampel (g) 5.0035 5.0036

W cawan + sampel kering (g) 6.3634 6.1353 rata-rata

KA (%BB) 85.41 85.50 85.46

KA (%BK) 585.41 589.68 587.54

2

Mangkokan

1

1 2

5.7064 5.8591

5.0044 5.0013

6.5978 6.7408 rata-rata

82.19 82.37 82.28

461.41 467.23 464.32

3

Daun Labu Siam

1

1 2

5.6337 5.4056

5.0039 5.0023

6.2832 6.0890 rata-rata

87.02 86.34 86.68

670.42 632.02 651.22

4

Daun Lembayung

1

1 2

5.4208 5.5092

5.0015 5.0016

6.1893 6.3047 rata-rata

84.63 84.10 84.36

550.81 528.74 539.77

5

Daun Katuk

1

1 2

5.4265 5.6530

5.0060 5.0024

6.5359 6.7268 rata-rata

77.84 78.53 78.19

351.23 365.86 358.55

6

Daun Kemangi

1

1 2

5.7258 5.8735

5.0090 5.0044

6.3725 6.4865 rata-rata

87.09 87.75 87.42

674.55 716.38 695.46

7

Daun Pakis

1

1 2

6.4985 6.3114

5.0014 5.0010

7.0038 6.8797 rata-rata

89.90 88.64 89.27

889.79 779.99 834.89

8

Daun Pohpohan

1

1 2

6.3103 5.0800

5.0022 5.0023

6.9260 5.6964 rata-rata

87.69 87.68 87.68

712.44 711.53 711.99

134

No 9

Bunga Pepaya

Sampel

Ulangan 1

duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.8067 5.3970

W sampel (g) 5.0024 5.0025

10

W cawan + sampel kering (g) 6.3455 5.9677 rata-rata

KA (%BB) 89.23 88.59 88.91

KA (%BK) 828.43 776.56 802.49

Mangkokan Putih

1

1 2

5.5580 6.4061

5.0006 5.0006

6.4488 7.2845 rata-rata

82.19 82.43 82.31

461.36 469.29 465.32

11

Kenikir

1

1 2

5.5313 5.3366

5.0015 5.0016

6.4269 6.4112 rata-rata

82.09 78.51 80.30

458.45 365.44 411.95

12

Daun Kelor

1

1 2

5.8628 5.6355

5.0009 5.0006

7.1044 6.8669 rata-rata

75.17 75.37 75.27

302.78 306.09 304.43

13

Daun Kucai

1

1 2

5.7090 5.3995

5.0015 5.0016

6.0826 5.7960 rata-rata

92.53 92.07 92.30

1238.73 1161.44 1200.08

14

Daun Jambu Mete

1

1 2

5.4214 5.5111

5.0010 5.0010

6.3836 6.4672 rata-rata

80.76 80.88 80.82

419.75 423.06 421.40

15

Buah Takokak

1

1 2

5.5554 6.4044

5.0005 5.0007

6.6045 7.3669 rata-rata

79.02 80.75 79.89

376.65 419.55 398.10

16

Antanan

1

1 2

5.4129 5.6364

5.0007 5.0007

6.3375 6.5396 rata-rata

81.51 81.94 81.72

440.85 453.66 447.26

135

No 17

Krokot

Sampel

Ulangan 1

duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.8146 5.5433

W sampel (g) 5.0008 5.0008

W cawan + sampel kering (g) 6.4236 6.1278 rata-rata

KA (%BB) 87.82 88.31 88.07

KA (%BK) 721.15 755.57 738.36

18

Antanan Beurit

1

1 2

5.7096 5.4140

5.0007 5.0007

6.4909 6.2029 rata-rata

84.38 84.22 84.30

540.05 533.88 536.97

19

Daun Ginseng

1

1 2

5.3986 5.7389

5.0005 5.0005

5.8073 6.1477 rata-rata

91.83 91.82 91.83

1123.51 1123.21 1123.36

20

Bunga kecombrang

1

1 2

5.7216 5.6655

5.0006 5.0006

6.2408 6.1697 rata-rata

89.62 89.92 89.77

863.14 891.79 877.46

21

Daun Beluntas

1

1 2

5.8775 5.9305

5.0007 5.0008

6.7843 6.9434 rata-rata

81.87 79.75 80.81

451.47 393.71 422.59

22

Bunga Turi

1

1 2

5.6460 5.4553

5.0004 5.0006

6.2120 5.8667 rata-rata

88.68 91.77 90.23

783.46 1115.51 949.49

23

Terubuk

1

1 2

5.7216 5.6655

5.0005 5.0005

6.2699 6.2787 rata-rata

89.04 87.74 88.39

812.00 715.48 763.74

24

Kedondong cina

1

1 2

5.4257 5.2971

5.0003 5.0003

6.0210 6.1589 rata-rata

88.09 82.77 85.43

739.96 480.22 610.09

136

Lampiran 9. Kadar Air Freeze Drier Sayuran Indigenous Indonesia No 1

Sampel Mengkudu

Ulangan 1

Duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.8602 5.7080

W sampel (g) 2.0016 2.0024

W cawan + sampel kering (g) 7.6684 7.5178 rata-rata

KA (%BB) 9.66 9.62 9.64

KA (%BK) 10.70 10.64 10.67

2

Mangkokan

1

1 2

5.5246 5.5407

2.0002 2.0003

7.2470 7.2601 rata-rata

13.89 14.04 13.97

16.13 16.34 16.23

3

Daun Labu Siam

1

1 2

5.6348 5.4100

2.0007 2.0022

7.4936 7.2706 rata-rata

7.09 7.07 7.08

7.63 7.61 7.62

4

Daun Lembayung

1

1 2

5.5578 5.3357

2.0009 2.0010

7.3811 7.1689 rata-rata

8.88 8.39 8.63

9.74 9.15 9.45

5

Daun Katuk

1

1 2

5.5414 5.8123

2.0004 2.0006

7.3504 7.6214 rata-rata

9.57 9.57 9.57

10.58 10.59 10.58

6

Daun Kemangi

1

1 2

5.4209 5.5100

2.0008 2.0024

7.2262 7.3180 rata-rata

9.77 9.71 9.74

10.83 10.75 10.79

7

Daun Pakis

1

1 2

6.4058 6.5010

2.0008 2.0008

8.2590 8.3547 rata-rata

7.38 7.35 7.36

7.96 7.94 7.95

8

Daun Pohpohan

1

1 2

6.3105 5.0803

2.0005 2.0007

8.0939 6.8628 rata-rata

10.85 10.91 10.88

12.17 12.24 12.21

137

No 9

Sampel Bunga Pepaya

Ulangan 1

Duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.5308 5.3974

W sampel (g) 2.0009 2.0012

W cawan + sampel kering (g) 7.3594 7.2293 rata-rata

KA (%BB) 8.61 8.46 8.54

KA (%BK) 9.42 9.24 9.33

10

Mangkokan Putih

1

1 2

5.8629 5.4205

2.0007 2.0007

7.6351 7.1893 rata-rata

11.42 11.59 11.51

12.89 13.11 13.00

11

Daun Kenikir

1

1 2

5.7753 5.6743

2.0009 2.0009

7.6390 7.5348 rata-rata

6.86 7.02 6.94

7.36 7.55 7.45

12

Daun Kelor

1

1 2

5.4202 5.5093

2.0007 2.0008

7.2935 7.3774 rata-rata

6.37 6.63 6.50

6.80 7.10 6.95

13

Daun Kucai

1

1 2

5.8425 5.7735

2.0008 2.0008

7.5968 7.5271 rata-rata

12.32 12.36 12.34

14.05 14.10 14.07

14

Daun Jambu Mete

1

1 2

5.5602 5.5431

2.0005 2.0005

7.4725 7.4570 rata-rata

4.41 4.33 4.37

4.61 4.52 4.57

15

Buah Takokak

1

1 2

5.9172 5.6753

2.0004 2.0005

7.6518 7.4151 rata-rata

13.29 13.03 13.16

15.32 14.98 15.15

16

Antanan

1

1 2

6.5005 5.3360

2.0005 2.0007

8.3263 7.1609 rata-rata

8.73 8.79 8.76

9.57 9.63 9.60

138

No 17

Krokot

Sampel

Ulangan 1

Duplo 1 2

W cawan kosong (g) 5.8623 5.3282

W sampel (g) 2.0013 2.0012

W cawan + sampel kering (g) 7.7476 7.2135 rata-rata

KA (%BB) 5.80 5.79 5.79

KA (%BK) 6.15 6.15 6.15

18

Antanan Beurit

1

1 2

5.8775 5.6903

2.0008 2.0012

7.7091 7.5239 rata-rata

8.46 8.37 8.42

9.24 9.14 9.19

19

Daun Ginseng

1

1 2

5.6347 5.7880

2.0012 2.0012

7.4702 7.6251 rata-rata

8.28 8.20 8.24

9.03 8.93 8.98

20

Bunga kecombrang

1

1 2

5.7222 5.9302

2.0006 2.0006

7.5948 7.8006 rata-rata

6.40 6.51 6.45

6.84 6.96 6.90

21

Daun Beluntas

1

1 2

5.4130 5.6369

2.0011 2.0011

7.2128 7.4333 rata-rata

10.06 10.23 10.14

11.18 11.40 11.29

22

Bunga Turi

1

1 2

5.4126 5.8139

2.0006 2.0009

7.1490 7.5396 rata-rata

13.21 13.75 13.48

15.22 15.95 15.58

23

Terubuk

1

1 2

5.6366 5.7087

2.0011 2.0013

7.4448 7.5184 rata-rata

9.64 9.57 9.61

10.67 10.59 10.63

24

Kedondong cina

1

1 2

5.7091 5.5093

2.0010 2.0011

7.4711 7.2729 rata-rata

11.94 11.87 11.91

13.56 13.47 13.52

139

Lampiran 10. Kurva Standar Total Fenol konsentrasi

Absorbansi

0

0.00000

50

0.13460

100

0.30180

150

0.51022

200

0.70154

250

0.87332

Kurva Standar Total Fenol

Absorbansi

1.0000 y = 0.0036x - 0.0280 0.9000 R² = 0.9963 0.8000 0.7000 0.6000 0.5000 0.4000 0.3000 0.2000 Lampiran 11. Total Fenol Sayuran Indigenous 0.1000 0.0000 -0.1000 0 50 100 150 200

250

300

Konsentrasi (mg/L)

140

Lampiran 11. Total Fenol Sayuran Indigenous Indonesia Wet Basis No

1

2

3

4

Sampel

Mengkudu

Mangkokan

Daun Labu Siam

Daun Lembayung

Ulangan

W sampel (mg)

1

50.4

2

50.4

1

50.9

2

50.7

1

51.0

2

51.3

1

50.5

2

50.5

Duplo

Absorbansi

[ ] (mg/L)

[ ] (mg fenolik /100 g sampel segar)

1 2 1 2

0.2958 0.2984 0.2958 0.2991

89.9472 90.6667 89.9528 90.8611 rata-rata

72.3914 72.9705 72.3959 73.1270 72.7212 72.7212 + 0.38

1 2 1 2

0.2545 0.2538 0.2534 0.2548

78.4833 78.2833 78.1778 78.5556 rata-rata

40.4139 40.3109 40.2566 40.4511 40.3582 40.3582+ 0.09

1 2 1 2

0.3031 0.3091 0.3023 0.3087

91.9694 93.6417 91.7611 93.5139 rata-rata

65.9223 67.1210 65.7730 67.0294 66.4614 66.4614 + 0.71

1 2 1 2

0.4461 0.4568 0.4452 0.4341

131.7000 134.6572 131.4389 128.3667 rata-rata

112.6830 115.2132 112.4596 109.8310 112.5467 112.5467 + 2.20

Dry Basis

STDEV

0.38

0.09

0.71

2.20

(%) RSD

[ ] (mg fenolik /100 g sampel kering

STDEV

(%) RSD

0.53

497.7179 501.6989 497.7487 502.7749 499.9851 499.9851 + 2.64

2.64

0.53

0.22

228.0584 227.4772 227.1705 228.2683 227.7436 227.7436 + 0.51

0.51

0.22

1.07

494.8977 503.8961 493.7766 503.2085 498.9447 498.9447 + 5.35

5.35

1.07

1.95

720.7032 736.8861 719.2743 702.4622 719.8315 719.8315 + 14.07

14.07

1.95

141

5

6

7

8

Daun Katuk

Daun Kemangi

Daun Pakis

Daun Pohpohan

1

50.7

2

50.7

1

50.5

2

50.3

1

50.4

2

50.3

1

50.7

2

50.8

1 2 1 2

0.3851 0.3851 0.3831 0.3824

114.7500 114.7472 114.2028 113.9917 rata-rata

138.4003 138.3970 137.7403 137.4857 138.0058 138.0058 + 0.47

1 2 1 2

0.4216 0.4156 0.4234 0.4229

124.8861 123.2194 125.3972 125.2528 rata-rata

87.0298 85.8683 87.3859 87.2853 86.8923 86.8923 + 0.70

1 2 1 2

0.3579 0.3639 0.3475 0.3487

107.1889 108.8722 104.3111 104.6500 rata-rata

62.0986 63.0738 60.4314 60.6277 61.5579 61.5578 + 1.25

1 2 1 2

0.6169 0.6019 0.6050 0.5968

179.1331 174.9639 175.8333 173.5444 rata-rata

123.7706 120.8899 121.4907 119.9092 121.5151 121.5151 + 1.64

0.47

0.70

1.25

1.64

0.34

634.4694 634.4540 631.4437 630.2765 632.6609 632.6609 + 2.13

2.13

0.34

0.80

691.8110 682.5785 694.6423 693.8422 690.7185 690.7185 + 5.56

5.56

0.80

2.04

578.5522 587.6380 563.0194 564.8486 573.5146 573.5146 + 11.69

11.69

2.04

1.35

1005.0018 981.6112 986.4891 973.6476 986.6874 986.6874 + 13.31

13.31

1.35

142

9

10

11

12

Bunga Pepaya

Mangkokan Putih

Daun Kenikir

Daun Kelor

1

51.0

2

51.0

1

50.4

2

50.8

1

51.0

2

50.8

1

50.2

2

50.3

1 2 1 2

0.3697 0.3682 0.3688 0.3668

110.4722 110.0444 110.2333 109.6722 rata-rata

66.9707 66.7114 66.8259 66.4858 66.7485 66.7485 + 0.20

1 2 1 2

0.6150 0.6126 0.6274 0.6246

178.6028 177.9444 182.0472 181.2750 rata-rata

178.5127 177.8547 181.9554 181.1836 179.8766 179.8766 + 2.00

1 2 1 2

0.2048 0.2044 0.2050 0.2047

64.6650 64.5667 64.7339 64.6294 rata-rata

342.1425 341.6222 342.5070 341.9543 342.0565 342.0565 + 0.37

1 2 1 2

0.2562 0.2577 0.2728 0.2667

78.9444 79.3500 83.5472 81.8556 rata-rata

104.3853 104.9215 110.4713 108.2345 107.0032 107.0032 + 2.87

0.20

2.00

0.37

2.87

0.31

603.9078 601.5693 602.6019 599.5345 601.9034 601.9034 + 1.85

1.85

0.31

1.11

1009.1233 1005.4037 1028.5848 1024.2217 1016.8334 1016.8334 + 11.30

11.30

1.11

0.11

1737.1274 1734.4858 1738.9780 1736.1723 1736.6909 1736.6909 + 1.88

1.88

0.11

2.68

422.1631 424.3318 446.7769 437.7305 432.7506 432.7506 + 11.61

11.61

2.68

143

13

14

15

16

Daun Kucai

Daun Jambu Mete

Buah Takokak

Antanan

1

50.6

2

50.8

1

50.3

2

50.2

1

50.5

2

50.6

1

50.5

2

50.4

1 2 1 2

0.3197 0.3154 0.3154 0.3153

96.5833 95.3889 95.3889 95.3556 rata-rata

21.2051 20.9429 20.9429 20.9356 21.0066 21.0066 + 0.13

1 2 1 2

0.5659 0.5844 0.5915 0.5800

164.9722 170.1161 172.0872 168.8794 rata-rata

827.1445 852.9352 862.8180 846.7347 847.4081 847.4081 + 15..05

1 2 1 2

0.4682 0.4632 0.4638 0.4689

137.8250 136.4528 136.6139 138.0250 rata-rata

159.6121 158.0230 158.2095 159.8437 158.9221 158.9221 + 0.94

1 2 1 2

0.6993 0.6989 0.6848 0.6883

202.0139 201.9111 198.0111 198.9583 rata-rata

202.3174 202.2145 198.3086 199.2572 200.5244 200.5244 + 2.05

0.13

15.05

0.94

2.05

0.63

275.4411 272.0347 272.0347 271.9396 272.8625 272.8625 + 1.72

1.72

0.63

1.78

4312.7245 4447.1967 4498.7257 4414.8676 4418.3786 4418.3786 + 78.45

78.45

1.78

0.59

793.5529 785.6521 786.5797 794.7045 790.1223 790.1223 + 4.67

4.67

0.59

1.02

1107.0452 1106.4819 1085.1098 1090.3006 1097.2344 1097.2344 + 11.21

11.21

1.02

144

17

18

19

20

Krokot

Antanan Beurit

Daun Ginseng

Bunga kecombrang

1

51.0

2

50.8

1

50.2

2

50.2

1

50.9

2

50.9

1

51.0

2

51.4

1 2 1 2

0.4363 0.4363 0.4475 0.4473

128.9694 128.9806 132.0778 132.0194 rata-rata

81.6828 81.6898 83.6515 83.6145 82.6597 82.6597 + 1.12

1 2 1 2

0.5766 0.5839 0.5848 0.5757

167.9306 169.9583 170.2194 167.6861 rata-rata

143.9373 145.6753 145.8992 143.7278 144.8099 144.8099 + 1.14

1 2 1 2

0.4981 0.4917 0.4977 0.4902

146.1278 144.3722 146.0389 143.9444 rata-rata

65.0870 64.3050 65.0474 64.1145 64.6385 64.6385 + 0.50

1 2 1 2

0.3088 0.3100 0.3106 0.3119

93.5506 93.8906 94.0500 94.4111 rata-rata

255.8292 256.7590 257.1950 258.1825 256.9914 256.9914 + 0.98

1.12

1.14

0.50

0.98

1.36

684.5067 684.5657 701.0042 700.6946 692.6928 692.6928 + 9.42

9.42

1.36

0.78

916.8096 927.8802 929.3057 915.4751 922.3676 922.3676 + 7.23

7.23

0.78

0.78

796.2504 786.6843 795.7660 784.3534 790.7635 790.7635 + 6.13

6.13

0.78

0.38

2500.0967 2509.1831 2513.4442 2523.0947 2511.4547 2511.4547 + 9.55

9.55

0.38

145

21

22

23

24

Daun Beluntas

Bunga Turi

Terubuk

Kedondong cina

1

50.5

2

50.9

1

50.4

2

50.3

1

50.3

2

50.3

1

50.3

2

50.3

1 2 1 2

0.4604 0.4561 0.4845 0.4892

135.6683 134.4850 142.3533 143.6761 rata-rata

724.5051 718.1858 760.2048 767.2687 742.5411 742.5411 + 24.78

1 2 1 2

0.2222 0.2024 0.2217 0.2215

69.5000 63.9889 69.3639 69.2972 rata-rata

39.2526 36.1400 39.1757 39.1381 38.4266 38.4266 + 1.53

1 2 1 2

0.4874 0.4619 0.4403 0.4631

143.1528 136.0917 130.0778 136.4250 rata-rata

91.9622 87.4261 83.5628 87.6403 87.6479 87.6479 + 3.43

1 2 1 2

0.7944 0.7952 0.7938 0.7970

228.4444 228.6750 228.2861 229.1611 rata-rata

188.9160 189.1067 188.7851 189.5087 189.0791 189.0791 + 0.32

24.78

1.53

3.43

0.32

3.34

3774.6218 3741.6986 3960.6148 3997.4176 3868.5882 3868.5882 + 129.09

129.09

3.34

3.97

401.6409 369.7921 400.8543 400.4690 393.1891 393.1891 + 15.61

15.61

3.97

3.92

791.8332 752.7755 719.5104 754.6193 754.6846 754.6846 + 29.56

29.56

3.92

0.17

1296.5985 1297.9071 1295.6998 1300.6661 1297.7179 1297.7179 + 2.16

2.16

0.17

146

Lampiran 12. Asam Klorogenat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran Wet Basis No

1

2

3

4

Sampel

Mengkudu

Mangkokan

Daun Labu Siam

Daun Lembayung

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

1

0.5004

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5004

1

0.5007

2

0.5006

Duplo

Area (mAU)

[ ] (µg/ml)

1 2 1 2

1323.9320 1312.6516 1339.9066 1367.8566

28.3498 28.0834 28.7271 29.3873 rata-rata

2.2817 2.2602 2.3120 2.3651 2.3048 2.3048 + 0.05

1 2 1 2

489.2159 475.3908 471.9960 469.4764

8.6352 8.3087 8.2285 8.1690 rata-rata

0.8893 0.8557 0.8474 0.8413 0.8584 0.8584 + 0.02

1 2 1 2

3598.8005 3476.3115 3617.8108 3501.2615

82.0784 79.1854 82.5274 79.7747 rata-rata

5.8833 5.6759 5.9154 5.7181 5.7982 5.7982 + 0.12

1

2291.7854

51.2089

4.3815

2 1 2

2278.6458 2177.5278 2185.1613

50.8986 48.5103 48.6906 rata-rata

4.3549 4.1506 4.1660 4.2632 4.2632 + 0.12

[ ] (mg/100 g sampel segar)

Dry Basis STDEV

0.05

0.02

0.12

% RSD

1.98

2.49

2.05

[ ] (mg/100 g sampel kering) 15.6872 15.5398 15.8960 16.2613 15.8461 15.8461 + 0.31 5.0185 4.8287 4.7821 4.7475 4.8442 4.8442 + 0.12 44.1673 42.6106 44.4089 42.9277 43.5286 43.5286 + 0.89

STDEV

% RSD

0.31

1.98

0.12

2.49

0.89

2.05

0.78

2.86

28.0231 0.12

2.86

27.8533 26.5464 26.6450 27.2669 27.2669 + 0.78

147

5

Daun Katuk

1

0.5005

2

0.5004

1

1255.0250

26.7224

3.2230

14.7752

2

1240.4932

26.3791

3.1816

14.5854

1

1269.4100

27.0621

3.2640

2

1476.6963

31.9579

3.8544

rata-rata

1

6

Daun Kemangi

2

0.5007

0.5005

7

Daun Pakis

0.5005

2

0.5005

8

Daun Pohpohan

2

0.5007

0.5007

14.9630

3.3808

15.4984

3.3808 + 0.32

15.4948 + 1.46

2.6052

4.7030

0.3277

2

326.2233

4.7856

0.3335

1

318.3721

4.6002

0.3206

2

314.7267

4.5141

0.3146

2.5006

0.3241

2.5763

0.3241 + 0.01

2.5763 + 0.07

2.55

2.5483

2121.6980

47.1917

2.7340

25.4717

2

2098.6494

46.6474

2.7025

25.1779

1

1913.7180

42.2796

2.4494

2

1910.7860

42.2103

2.4454

6.07

22.8204

24.0633 24.0633 + 1.46

137.1386

16.8892

2

11015.8000

257.2556

17.7749

1

10899.1000

254.4993

17.5844

2

10924.0000

255.0874

17.6251

0.07

2.55

1.46

6.07

3.20

2.26

22.7830

2.5828

244.4379

rata-rata

0.16

2.5828 + 0.16

10473.1000

9.39

2.6510 0.01

1

1

1.46

17.6700

322.7235

rata-rata

1

9.39

1

rata-rata

1

0.32

144.3297 0.39

2.26

142.7834 143.1133

17.4684

141.8413

17.4684 + 0.39

141.8413 + 3.20

148

9

Bunga Pepaya

1

0.5006

2

0.5007

1

660.3296

12.6767

0.7685

6.9298

2

659.9706

12.6682

0.7680

6.9252

1

660.0141

12.6692

0.7680

2

660.3975

12.6783

0.7686

6.9307

0.7683

6.9279

0.7683 + 0.00

6.9279 + 0.00 77.7578

rata-rata

1 10

Mangkokan Putih

2

0.5004 0.5004

11

Daun Kenikir

2

0.5007 0.5006

12

Daun Kelor

2

0.5005 0.5004

6.9258

5950.5132

137.6219

13.7553

2

6079.8428

140.6765

14.0606

1

6056.4434

140.1238

14.0053

2

6357.0000

147.2225

14.7148

83.1822

14.1340

79.8987

14.1340 + 0.41

79.8987 + 2.31 22.1852

1

1871.9208

41.2924

4.3696

2

1892.0000

41.7667

4.4197

1

1952.5836

43.1975

4.5712

2

2035.4462

45.1546

4.7783

rata-rata

1

0.04

1

rata-rata

1

0.00

79.1714

4.05

23.2087

26.4554

2

2201.8245

49.0842

6.4902

1

2307.7971

51.5871

6.8212

2

2288.6118

51.1340

6.7613

2.90

0.93

4.05

0.66

2.44

24.2602 23.0235

6.5414

2.31

22.4400 0.18

23.0235 + 0.93

49.4716

rata-rata

2.90

4.5347 + 0.18 2218.2285

0.04

79.4836 0.41

4.5347

1

0.00

26.2482 0.16

2.44

27.5867 27.3444

6.6535

26.9087

6.6535 + 0.16

26.9087 + 0.66

149

1 13

Daun Kucai

2

0.5004 0.5006

1

190.6369

1.5833

0.0695

2

192.7118

1.6323

0.0717

1

203.4619

1.8862

0.0828

2

203.0501

1.8765

0.0824

rata-rata

1 14

Daun Jambu Mete

2

0.5004

0.5005

1 15

Buah Takokak

2

0.5007 0.5009

16

Antanan

1

0.5005

2

0.5003

9.13

1.0758 0.9951 0.9951 + 0.09

67.5495

129.1966

12.9554

2

5937.8291

137.3224

13.7703

1

5915.6328

136.7981

13.7177

2

5894.2720

136.2936

13.6671

0.38

2.84

71.7980 71.5239 70.5328

13.5276 + 0.38

70.5328 + 2.00 158.3010

11764.5000

274.9386

31.8400

2

11692.6000

273.2404

31.6434

1

12857.5000

300.7534

34.8296

2

12644.3000

295.7180

34.2464

2.00

2.84

8.12

4.93

1.83

3.64

157.3232 1.63

4.93

173.1643 170.2651

33.1399

164.7634

33.1399 + 1.63

164.7634 + 8.12

1

4141.1738

94.8884

9.5031

51.9993

2

4149.4580

95.0840

9.5227

52.1065

1

3888.6860

88.9250

8.9059

2

3912.1914

89.4802

8.9615

rata-rata

9.13

71.2601

13.5276

1

0.09

1.0703

0.0766

5593.7822

rata-rata

0.9310 0.01

0.0766 + 0.01

1

rata-rata

0.9031

0.34

3.64

48.7313 49.0355

9.2233

50.4681

9.2233 + 0.34

50.4681 + 1.83

150

1 17

Krokot

2

0.5008 0.5009

1

4032.4270

92.3200

5.8471

2

3976.3142

90.9947

5.7631

1

3931.7144

89.9413

5.6964

2

4023.6401

92.1124

5.8339

rata-rata

1 18

Antanan Beurit

2

0.5005 0.5007

19

Daun Ginseng

1

0.5006

2

0.5006

20

Bunga kecombrang

2

0.5005

0.5007

1.20

47.7364 48.4799 48.4799 + 0.58 152.8803

11980.0000

280.0283

24.0019

11981.1000

280.0543

24.0041

1

12492.7000

292.1375

25.0398

2

11994.8000

280.3779

24.0319

1.20

3.27

2.12

0.14

3.06

10.83

7.88

152.8944 0.51

2.12

159.4912 153.0711

24.2694

154.5842

24.2694 + 0.51

154.5842 + 3.27

1

493.3846

8.7337

0.3890

4.7590

2

471.2376

8.2106

0.3657

4.4740

1

496.0759

8.7973

0.3918

2

486.7547

8.5771

0.3820

0.01

3.06

4.7936 4.6737

0.3821

4.6751

0.3821 + 0.01

4.6751 + 0.14

129.5680

1

10387.4000

242.4138

13.2584

2

11068.5000

258.5002

14.1382

1

12201.9000

285.2692

15.6023

2

10380.3000

242.2461

13.2492

129.4784

14.0620

137.4216

14.0620 + 1.11

137.4216 + 10.83

rata-rata

0.58

48.8888

5.7852 + 0.07

2

rata-rata

1

48.2955 0.07

5.7852

1

rata-rata

48.9989

1.11

7.88

138.1661 152.4739

151

21

Daun Beluntas

1

0.5002

2

0.5001

1

8129.5073

189.0861

20.1954

105.2167

2

7913.6680

183.9884

19.6509

102.3801

1

8074.8691

187.7957

20.0576

2

8081.9307

187.9625

20.0754

104.5914

19.9948

104.1717

19.9948 + 0.24

104.1717 + 1.24

rata-rata

1 22

Bunga Turi

2

0.5008 0.5007

0.24

1.19

104.4986

1.24

1.19

-

-

1.15

3.21

5.54

1.72

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

23

Terubuk

1

0.5008

2

0.5008

1

2804.7361

63.3240

4.0680

35.0269

2

2789.4839

62.9637

4.0448

34.8277

1

2918.1096

66.0016

4.2400

2

2971.2512

67.2568

4.3206

rata-rata

1 24

Kedondong cina

2

0.5004 0.5002

0.13

3.21

36.5081 37.2023

4.1684

35.8912

4.1684 + 0.13

35.8912 + 1.15 316.2453

1

23714.8000

557.1847

46.0773

2

23987.5000

563.6254

46.6100

1

24503.6000

575.8148

47.6180

2

24574.0000

577.4776

47.7555

327.7631

47.0152

322.6822

47.0152 + 0.81

322.6822 + 5.54

rata-rata

319.9009 0.81

1.72

326.8193

*ND: tidak terdeteksi

152

Lampiran 13. Asam Kafeat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran Wet Basis No

1

Sampel

Mengkudu

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

Duplo

Area (mAU)

[ ] (µg/ml)

1 2 1 2

ND

ND

Dry Basis

[ ] (mg/100 g sampel segar)

STDEV

% RSD

ND

-

-

[ ] (mg/100 g sampel kering)

STDEV

% RSD

ND

-

-

0.05

0.83

0.02

0.46

0.27

2.09

rata-rata

2

3

4

Mangkokan

Daun Labu Siam

Daun Lembayung

1

0.5004

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5004

1

0.5007

2

0.5006

1 2 1 2

456.9399 449.9770 439.6225 440.1553

11.3094 11.2321 11.1172 11.1231 rata-rata

1.1647 1.1568 1.1449 1.1455 1.1530 1.1530 + 0.01

1 2 1 2

131.0545 125.4963 125.1032 130.4019

7.6913 7.6296 7.6252 7.6840 rata-rata

0.5513 0.5469 0.5466 0.5508 0.5489 0.5489 + 0.00

1

1617.6472

24.1961

2 1 2

1599.2568 1534.4312 1530.5905

23.9920 23.2722 23.2296 rata-rata

0.01

0.00

0.83

0.46

2.0702 2.0528 1.9912 1.9875 2.0254 2.0254 + 0.04

6.5726 6.5277 6.4609 6.4643 6.5064 6.5064 + 0.05 4.1388 4.1056 4.1032 4.1349 4.1206 4.1206 + 0.02 13.2409

0.04

2.09

13.1292 12.7353 12.7120 12.9543 12.9543 + 0.27

153

1

5

Daun Katuk

2

0.5005

0.5004

1

302.1453

9.5908

1.1568

2

268.7315

9.2198

1.1120

1

281.9349

9.3664

1.1297

2

275.4024

9.2939

1.1209

rata-rata

6

Daun Kemangi

1

0.5007

2

0.5005

7

Daun Pakis

0.5005

2

0.5005

8

Daun Pohpohan

0.5007

2

0.5007

1.71

5.1788

1.1298

5.1796

1.1298 + 0.02

5.1796 + 0.09

2003.6323

28.4815

1.9848

15.7774

2127.8755

29.8609

2.0809

16.5416

1

2122.1563

29.7974

2.0765

2

1990.5109

28.3359

1.9746

0.06

2.83

16.5064

1.71

0.46

2.83

0.05

1.25

0.07

0.78

15.6967

2.0292

16.1305

2.0292 + 0.06

16.1305 + 0.46

1

174.7454

8.1764

0.4737

4.4132

2

167.8596

8.0999

0.4693

4.3719

1

155.1020

7.9583

0.4611

2

157.8238

7.9885

0.4628

0.01

1.25

4.2955 4.3118

0.4667

4.3481

0.4667 + 0.01

4.3481 + 0.05

1

886.5911

16.0796

1.1110

9.0213

2

869.9148

15.8945

1.0982

8.9174

1

868.7194

15.8812

1.0973

2

890.3997

16.1219

1.1139

rata-rata

0.09

5.1387

2

rata-rata

1

5.0978 0.02

1

rata-rata

1

5.3029

0.01

0.78

8.9099 9.0450

1.1051

8.9734

1.1051 + 0.01

8.9734 + 0.07

154

9

Bunga Pepaya

1

0.5006

2

0.5007

1

968.9445

16.9939

1.0302

9.2899

2

966.7228

16.9693

1.0287

9.2764

1

975.7687

17.0697

1.0348

2

977.5554

17.0895

1.0360

rata-rata

10

Mangkokan Putih

1

0.5004

2

0.5004

11

Daun Kenikir

0.5007

2

0.5006

12

Daun Kelor

0.5005

2

0.5004

9.3313

1.0324

9.3100

1.0324 + 0.00

9.31 + 0.03

934.7219

16.6140

1.6606

9.3871

937.5071

16.6449

1.6637

9.4045

1

978.6330

17.1015

1.7093

2

995.6935

17.2909

1.7282

0.03

1.99

9.6625

0.34

0.19

1.99

0.69

3.75

0.33

2.78

9.7695

1.6904

9.5559

1.6904 + 0.03

9.5559 + 0.19

1

2403.6433

32.9227

3.4839

17.6883

2

2671.4573

35.8961

3.7985

19.2859

1

2485.7473

33.8342

3.5803

2

2581.9116

34.9019

3.6933

0.14

3.75

18.1781 18.7517

3.6390

18.4760

3.6390 + 0.14

18.4760 + 0.69

1

1385.1165

21.6145

2.8580

11.5586

2

1388.0983

21.6476

2.8624

11.5763

1

1487.6622

22.7530

3.0085

2

1477.2754

22.6377

2.9933

rata-rata

0.03

9.3422

2

rata-rata

1

0.34

1

rata-rata

1

0.00

0.08

2.78

12.1674 12.1057

2.9306

11.8520

2.9306 + 0.08

11.8520 + 0.33

155

1 13

Daun Kucai

2

0.5004 0.5006

1

172.6932

8.1536

0.3580

2

151.3006

7.9161

0.3476

1

178.1852

8.2146

0.3607

2

176.1268

8.1917

0.3597

rata-rata

1

0.5004

Daun Jambu Mete

2

0.5005

4.5151 0.01

1.69

4.6853

0.08

1.69

-

-

0.41

3.24

0.10

1.52

4.6723

0.3565

4.6308

0.3565 + 0.01

4.6308 + 0.08

1 2

14

4.6506

ND

ND

1

ND

-

-

ND

2 rata-rata

1 15

Buah Takokak

2

0.5007 0.5009

1

1358.1204

21.3148

2.4684

2

1399.2783

21.7717

2.5213

1

1501.2277

22.9036

2.6524

2

1466.0884

22.5135

2.6072

rata-rata

1 16

Antanan

2

0.5005 0.5003

12.2724 12.5355 0.08

3.24

13.1872 12.9625

2.5624

12.7394

2.5624 + 0.08

12.7394 + 0.41 6.4777

1

502.9733

11.8205

1.1838

2

530.8669

12.1302

1.2148

1

494.4480

11.7259

1.1743

2

500.3095

11.7909

1.1809

6.4615

1.1885

6.5031

1.1885 + 0.02

6.5031 + 0.10

rata-rata

6.6474 0.02

1.52

6.4258

156

1 17

Krokot

2

0.5008 0.5009

1

205.9765

8.5231

0.5398

2

217.1317

8.6470

0.5477

1

219.5417

8.6737

0.5493

2

208.0424

8.5460

0.5413

4.5358

0.5445

4.5631

0.5445 + 0.00

4.5631 + 0.04 8.6527

rata-rata

1 18

Antanan Beurit

2

0.5005 0.5007

1

865.8284

15.8491

1.3585

2

815.5635

15.2910

1.3106

1

888.9601

16.1059

1.3805

2

869.8019

15.8932

1.3622

rata-rata

1 19

Daun Ginseng

2

0.5006 0.5006

1 20

Bunga kecombrang

2

0.5005

0.5007

0.86

4.6036

2.20

8.7930 8.6177

4.9592

9.1011

0.4054

251.7245

9.0310

0.4023

1

266.9262

9.1998

0.4098

2

256.6473

9.0857

0.4047

0.77

5.0130 4.9610 4.9610 + 0.04

9.1791

17.1735

0.9393

2

1024.9144

17.6153

0.9634

1

1087.9912

18.3157

1.0017

2

971.6897

17.0244

0.9311

2.20

0.04

0.77

0.31

3.31

4.9508

0.4055 + 0.00

985.1131

0.19

4.9210 0.00

0.4055

1

0.86

8.6768 8.6177 + 0.19

258.0371

0.04

8.3481 0.03

1.3530

2

rata-rata

4.5894 0.00

1.3530 + 0.03 1

rata-rata

4.5236

0.03

3.31

9.4152 9.7896 9.0994

0.9589

9.3708

0.9589 + 0.03

9.3708 + 0.31

157

21

Daun Beluntas

1

0.5002

2

0.5001

1

6709.4155

80.7274

8.6221

44.9206

2

6200.2446

75.0743

8.0183

41.7750

1

6994.0791

83.8879

8.9597

2

7042.7061

84.4277

9.0173

46.9797

8.6544

45.0886

8.6544 + 0.46

45.0886 + 2.39

rata-rata

1 22

Bunga Turi

2

0.5008 0.5007

0.46

5.30

46.6793

2.39

5.30

-

-

0.17

1.85

-

-

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

23

Terubuk

1

0.5008

2

0.5008

1

904.3893

16.2772

1.0457

9.0036

2

874.8511

15.9493

1.0246

8.8222

1

940.9094

16.6827

1.0717

2

911.5239

16.3564

1.0507

rata-rata

24

Kedondong cina

1

0.5004

2

0.5002

0.02

1.85

9.2278 9.0474

1.0482

9.0252

1.0482 + 0.02

9.0252 + 0.17

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

*ND: tidak terdeteksi

158

Lampiran 14. Asam Ferulat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Kurva Standar Campuran No

1

2

3

4

Sampel

Mengkudu

Mangkokan

Daun Labu

Daun Lembayung

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

1

0.5004

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5004

1

0.5007

2

0.5006

Wet Basis [ ] (mg/100 g sampel STDEV segar) 0.7316 0.7285 0.7571 0.04 0.8196 0.7592 0.7592 + 0.04

Duplo

Area (mAU)

[] (µg/ml)

1 2 1 2

716.9307 713.5448 745.0707 813.8764

9.0900 9.0518 9.4074 10.1835 rata-rata

1 2 1 2

123.4839 121.5137 120.6384 116.7219

2.3965 2.3743 2.3644 2.3202 rata-rata

0.2468 0.2445 0.2435 0.2390 0.2434 0.2434 + 0.00

1 2 1 2

66.5307 60.5090 64.0168 68.9661

1.7541 1.6862 1.7258 1.7816 rata-rata

0.1257 0.1209 0.1237 0.1277 0.1245 0.1245 + 0.00

1

1402.1360

16.8185

1.4390

2 1 2

1391.5419 1203.8270 1351.3488

16.6990 14.5817 16.2456 rata-rata

1.4288 1.2476 1.3900 1.3763 1.3763 + 0.09

0.00

0.00

% RSD

5.57

1.35

2.35

Dry Basis [ ] (mg/100 g sampel STDEV kering) 5.0299 5.0088 5.2055 0.29 5.6350 5.2198 5.2198 + 0.29 1.3928 1.3798 1.3741 1.3484 1.3738 1.3738 + 0.02 0.9439 0.9074 0.9287 0.9587 0.9347 0.9374 + 0.02

% RSD

5.57

0.02

1.35

0.02

2.35

0.57

6.42

9.2036 0.09

6.42

9.1382 7.9796 8.8901 8.8029 8.8029 + 0.57

159

5

Daun Katuk

1

0.5005

1 2

754.1463 708.8474

9.5098 8.9988

1.1470 1.0854

2

0.5004

1 2

738.0394 682.3416

9.3281 8.6999

1.1251 1.0493

rata-rata

1.1017 1.1017 + 0.04

5.0504 5.0504 + 0.20 1.2229

1 6

7

Daun Kemangi

Daun Pakis

2

0.5007 0.5005

5.2581 4.9756 0.04

3.93

5.1576 4.8103

1

106.7285

2.2075

0.1538

2 1

118.4433 115.3667

2.3396 2.3049

0.1630 0.1606

2

120.3667

2.3613 rata-rata

0.1646 0.1605

1.3081 1.2760

0.1605 + 0.00

1.2760 + 0.04

1

0.5005

1 2

2

0.5005

1 2

ND

ND

ND

0.00

-

2.95

-

1.2961 1.2768

ND

0.20

3.93

0.04

2.95

-

-

0.03

2.33

rata-rata

1 8

Daun Pohpohan

2

0.5007 0.5007

1

121.9771

2.3795

0.1644

1.3350

2 1

125.4892 133.9678

2.4191 2.5148

0.1671 0.1738

2

127.3133

2.4397 rata-rata

0.1686 0.1685

1.3688 1.3680

0.1685 + 0.00

1.3680 + 0.03

0.00

2.33

1.3572 1.4109

160

9

10

11

12

Bunga Pepaya

Mangkokan Putih

Daun Kenikir

Daun Kelor

1

0.5006

2

0.5007

1

0.5004

2

0.5004

1

0.5007

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5004

1 2 1

1048.9993 983.7863 989.1446

12.8354 12.0999 12.1603

0.7781 0.7335 0.7372

2

1000.5964

12.2895 rata-rata

0.7450 0.7485 0.7485 + 0.02

6.7182 6.7492 6.7492 + 0.18

1 2 1 2

566.1655 640.6119 623.5053 642.9271

7.3895 8.2292 8.0363 8.2553 rata-rata

0.7386 0.8225 0.8032 0.8251 0.7974 0.7974 + 0.04

4.1752 4.6496 4.5406 4.6643 4.5074 4.5074 + 0.23

1

2454.3301

28.6862

3.0356

15.4122

2 1 2

2252.8960 2733.7730 2721.6177

26.4142 31.8381 31.7010 rata-rata

2.7952 3.3691 3.3546 3.1386 3.1386 + 0.28

14.1916 17.1056 17.0320 15.9354 15.9354 + 1.40

1 2 1 2

2777.9026 2791.8565 2997.2290 2911.8584

32.3358 32.4932 34.8096 33.8467 rata-rata

4.2756 4.2965 4.6027 4.4754 4.4126 4.4126 + 0.16

0.02

0.04

0.28

0.16

2.72

5.06

8.79

3.52

7.0166 6.6145 6.6476

17.2919 17.3760 18.6148 18.0999 17.8456 17.8456 + 0.63

0.18

2.72

0.23

5.06

1.40

8.79

0.63

3.52

161

13

14

15

16

Daun Kucai

Daun Jambu Mete

Buah Takokak

Antanan

1

0.5004

2

0.5006

1

0.5004

2

0.5005

1

0.5007

2

0.5009

1

0.5005

2

0.5003

1 2 1 2

103.9391 119.2102 119.8153 119.2691

2.1761 2.3483 2.3551 2.3490 rata-rata

0.0956 0.1031 0.1034 0.1031 0.1013

0.00

3.79

1.2412 1.3394 1.3433 1.3398 1.3159

0.1013 + 0.00

1.3159 + 0.05 15.7199 15.3329 14.7898 14.2365 15.0198 15.0198 + 0.65

1 2 1 2

2576.6816 2511.0510 2418.9636 2325.1406

30.0662 29.3260 28.2873 27.2291 rata-rata

3.0149 2.9407 2.8366 2.7304 2.8807 2.8807 + 0.12

1 2 1 2

171.0071 161.2283 152.3360 146.9178

2.9325 2.8222 2.7219 2.6608

0.3396 0.3268 0.3152 0.3081

rata-rata

0.3225 0.3225 + 0.01

1.6032 1.6032 + 0.07

18.5547 18.9699 17.4441 17.1429 rata-rata

1.8583 1.8998 1.7470 1.7169 1.8055 1.8055 + 0.09

10.1681 10.3956 9.5594 9.3944 9.8794 9.8794 + 0.48

1 2 1 2

1556.0731 1592.8781 1457.6032 1430.8989

0.12

0.01

0.09

4.31

4.28

4.85

1.6885 1.6249 1.5672 1.5320

0.05

3.79

0.65

4.31

0.07

4.28

0.48

4.85

162

17

18

Krokot

Antanan Beurit

1

0.5008

2

0.5009

1

0.5005

2

0.5007

1 2 1 2

200.2538 242.5063 217.3275 215.0501

3.2624 3.7390 3.4550 3.4293 rata-rata

ND

ND

0.2066 0.2368 0.2188 0.2172 0.2199 0.2199 + 0.01

0.01

5.70

-

-

1.7315 1.9845 1.8337 1.8201 1.8424 1.8424 + 0.10

0.10

5.70

-

-

0.04

3.74

0.02

1.48

1 2 1 2

ND

ND

rata-rata

19

20

Daun Ginseng

Bunga kecombrang

1

0.5006

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5007

1 2 1 2

83.4330 87.4127 82.2128 72.4216

1.9448 1.9897 1.9310 1.8206 rata-rata

0.0866 0.0886 0.0860 0.0811 0.0856 0.0856 + 0.00

1 2 1 2

112.8013 118.3186 119.1943 119.0906

2.2760 2.3382 2.3481 2.3469 rata-rata

0.1245 0.1279 0.1284 0.1284 0.1273 0.1273 + 0.00

0.00

0.00

3.74

1.48

1.0597 1.0842 1.0522 0.9920 1.0470 1.0470 + 0.04 1.2165 1.2498 1.2550 1.2544 1.2439 1.2439 + 0.02

163

1 21

Daun Beluntas

2

0.5002 0.5001

1 2 1 2

ND

ND

ND

-

-

ND

-

-

0.02

2.36

0.02

1.22

1.12

3.24

rata-rata

22

23

24

Bunga Turi

Terubuk

Kedondong cina

1

0.5008

2

0.5007

1

0.5008

2

0.5008

1

0.5004

2

0.5002

1 2 1 2

65.8811 58.7343 60.9278 65.8243

1.7468 1.6662 1.6909 1.7462 rata-rata

0.0987 0.0941 0.0955 0.0986 0.0967 0.0967 + 0.00

1 2 1

128.9623 122.6145 126.4453

2.4583 2.3867 2.4299

0.1579 0.1533 0.1561

2

125.3671

2.4177 rata-rata

0.1553 0.1557 0.1557 + 0.00

1.3373 1.3403 1.3403 + 0.02

1 2 1 2

5107.8135 5176.5942 5444.8887 5435.7998

58.6150 59.3908 62.4169 62.3143 rata-rata

4.8473 4.9114 5.1617 5.1532 5.0184 5.0184 + 0.16

33.2685 33.7088 35.4264 35.3682 34.4430 34.4430 + 1.12

0.00

0.00

0.16

2.36

1.22

3.24

1.0095 0.9629 0.9772 1.0091 0.9897 0.9897 + 0.02 1.3598 1.3202 1.3441

*ND: tidak terdeteksi

164

Lampiran 15. Asam Klorogenat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran Wet Basis No

1

2

Sampel

Mengkudu

Mangkokan

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

1

0.5004

2

0.5006

Area (mAU)

[ ] (µg/ml)

[ ] (mg/100 g sampel segar)

1

1323.9320

31.4802

2.5336

2

1312.6516

31.2120

2.5120

1

1339.9066

31.8601

2.5642

2

1367.8566

32.5246

2.6177

rata-rata

2.5569

17.5793

2.5569 + 0.05

17.5793 + 0.32

3

Daun Labu Siam

0.5005

2

0.5004

4

Daun Lembayung

2

0.5007

0.5006

% RSD

STDEV

% RSD

0.32

1.79

0.12

1.85

0.90

1.98

0.78

2.70

17.4194 17.2710 0.05

1.79

17.6296 17.9973

489.2159

11.6325

1.1980

6.7604

2

475.3908

11.3038

1.1641

6.5693

1

471.9960

11.2230

1.1558

2

469.4764

11.1631

1.1497

0.02

1.85

6.5224 6.4876

1.1669

6.5849

1.1669 + 0.02

6.5849 + 0.12

1

3598.8005

85.5716

6.1336

46.0470

2

3476.3115

82.6591

5.9249

44.4798

1

3617.8108

86.0237

6.1660

2

3501.2615

83.2524

5.9674

rata-rata

1

STDEV

[ ] (mg/100 g sampel kering)

1

rata-rata

1

Dry Basis

Duplo

0.12

1.98

46.2903 44.7990

6.0480

45.4040

6.0480 + 0.12

45.4040 + 0.90

29.8206

1

2291.7854

54.4937

4.6625

2

2278.6458

54.1812

4.6358

1

2177.5278

51.7769

4.4300

2

2185.1613

51.9584

4.4456

rata-rata

4.5435

29.0594

4.5435 + 0.12

29.0594 + 0.78

0.12

2.70

29.6496 28.3339 28.4332

165

5

Daun Katuk

1

0.5005

2

0.5004

1

1255.0250

29.8418

3.5992

16.4999

2

1240.4932

29.4962

3.5575

16.3089

1

1269.4100

30.1838

3.6405

2

1476.6963

35.1126

4.2349

rata-rata

6

Daun Kemangi

1

0.5007

2

0.5005

7

Daun Pakis

0.5005

2

0.5005

1 8

Daun Pohpohan

2

0.5007 0.5007

8.51

16.6891

1.47

8.51

0.07

1.57

1.47

5.70

3.23

2.23

19.4143

3.7580

17.2280

3.7580 + 0.32

17.2280 + 1.47

1

322.7235

7.6737

0.5348

4.2509

2

326.2233

7.7569

0.5406

4.2970

1

318.3721

7.5702

0.5275

2

314.7267

7.4835

0.5215

rata-rata

1

0.32

0.01

1.57

4.1935 4.1455

0.5311

4.2217

0.5311 + 0.01

4.2217 + 0.07

1

2121.6980

50.4494

2.9227

27.2300

2

2098.6494

49.9013

2.8910

26.9342

1

1913.7180

45.5040

2.6362

2

1910.7860

45.4343

2.6322

24.5232

rata-rata

2.7705

25.8121

2.7705 + 0.16

25.8121 + 1.47

139.7135

0.16

5.70

24.5608

1

10473.1000

249.0275

17.2064

2

11015.8000

261.9317

18.0980

1

10899.1000

259.1568

17.9062

2

10924.0000

259.7489

17.9471

145.7286

rata-rata

17.7894

144.4479

17.7894 + 0.40

144.4479 + 3.23

146.9532 0.40

2.23

145.3964

166

9

Bunga Pepaya

1

0.5006

2

0.5007

1

660.3296

15.7012

0.9518

8.5832

2

659.9706

15.6927

0.9513

8.5786

1

660.0141

15.6937

0.9514

2

660.3975

15.7028

0.9519

rata-rata

10

Mangkokan Putih

1

0.5004

2

0.5004

11

Daun Kenikir

0.5007

2

0.5006

1

12

Daun Kelor

2

0.5005

0.5004

0.03

8.5791

0.00

0.03

2.33

2.84

0.94

3.79

0.66

2.30

8.5841

0.9516

8.5813

0.9516 + 0.00

8.5813 + 0.00

1

5950.5132

141.4902

14.1419

79.9434

2

6079.8428

144.5654

14.4492

81.6809

1

6056.4434

144.0090

14.3936

2

6357.0000

151.1556

15.1079

rata-rata

1

0.00

0.41

2.84

81.3665 85.4044

14.5232

82.0988

14.5232 + 0.41

82.0988 + 2.33

1

1871.9208

44.5102

4.7101

23.9140

2

1892.0000

44.9876

4.7606

24.1705

1

1952.5836

46.4282

4.9130

2

2035.4462

48.3985

5.1215

26.0030

rata-rata

4.8763

24.7580

4.8763 + 0.18

24.7580 + 0.94 28.2057

0.18

3.79

24.9445

1

2218.2285

52.7446

6.9742

2

2201.8245

52.3546

6.9226

1

2307.7971

54.8744

7.2558

2

2288.6118

54.4182

7.1955

29.1007

rata-rata

7.0871

28.6620

7.0871 + 0.16

28.6620 + 0.66

27.9971 0.16

2.30

29.3446

167

13

Daun Kucai

1

0.5004

2

0.5006

1

190.6369

4.5329

0.1990

2.5854

2

192.7118

4.5823

0.2012

2.6136

1

203.4619

4.8379

0.2124

2

203.0501

4.8281

0.2120

rata-rata

1 14

15

Daun Jambu Mete

Buah Takokak

2

0.5004

0.5005

1

0.5007

2

0.5009

16

Antanan

2

0.5005 0.5003

3.41

2.7594

0.09

3.41

2.01

2.78

8.18

4.88

1.85

3.52

2.7538

0.2062

2.6781

0.2062 + 0.01

2.6781 + 0.09

69.5422

1

5593.7822

133.0079

13.3376

2

5937.8291

141.1886

14.1579

1

5915.6328

140.6609

14.1050

2

5894.2720

140.1529

14.0541

73.2779

rata-rata

13.9137

72.5458

13.9137 + 0.39

72.5458 + 2.01

0.39

2.78

73.8194 73.5435

1

11764.5000

279.7342

32.3954

161.0621

2

11692.6000

278.0245

32.1974

160.0778

1

12857.5000

305.7233

35.4051

2

12644.3000

300.6539

34.8181

rata-rata

1

0.01

1.64

4.88

176.0259 173.1070

33.7040

167.5682

33.7040 + 1.64

167.5682 + 8.18 53.9610

1

4141.1738

98.4681

9.8616

2

4149.4580

98.6651

9.8813

1

3888.6860

92.4645

9.2603

2

3912.1914

93.0234

9.3163

rata-rata

9.5799

52.4195

9.5799 + 0.34

52.4195 + 1.85

54.0689 0.34

3.52

50.6709 50.9772

168

17

Krokot

1

0.5008

2

0.5009

1

4032.4270

95.8823

6.0727

50.8896

2

3976.3142

94.5481

5.9882

50.1815

1

3931.7144

93.4876

5.9210

2

4023.6401

95.6734

6.0595

rata-rata

1 18

Antanan Beurit

2

1 19

Daun Ginseng

2

1 20

Bunga kecombrang

2

0.5005 0.5007

0.5006 0.5006

0.5005

0.5007

0.07

1.17

49.6186

0.59

1.17

3.29

2.10

0.14

2.29

10.90

7.79

50.7788

6.0104

50.3671

6.0104 + 0.07

50.3671 + 0.59 155.5171

1

11980.0000

284.8583

24.4159

2

11981.1000

284.8844

24.4181

1

12492.7000

297.0492

25.4608

2

11994.8000

285.2102

24.4460

rata-rata

24.6852

157.2326

24.6852 + 0.52

157.2326 + 3.29 6.3926

155.5314 0.52

2.10

162.1727 155.7093

1

493.3846

11.7316

0.5225

2

471.2376

11.2050

0.4991

1

496.0759

11.7956

0.5254

2

486.7547

11.5740

0.5155

rata-rata

0.5156

6.3081

0.5156 + 0.01

6.3081 + 0.14

132.0138

6.1056 0.01

2.29

6.4274 6.3067

1

10387.4000

246.9897

13.5087

2

11068.5000

263.1848

14.3944

1

12201.9000

290.1346

15.8684

2

10380.3000

246.8209

13.4994

rata-rata

14.3177

139.9204

14.3177 + 1.12

139.9204 + 10.90

1.12

7.79

140.6699 155.0743 131.9236

169

1 21

Daun Beluntas

2

1 22

Bunga Turi

2

0.5002 0.5001

0.5008 0.5007

1

8129.5073

193.3020

20.6457

107.5626

2

7913.6680

188.1698

20.0975

1

8074.8691

192.0028

20.5069

2

8081.9307

192.1707

20.5249

rata-rata

20.4437

106.5105

20.4437 + 0.24

106.5105 + 1.24

104.7068 0.24

1.17

106.8397

1.24

1.17

-

-

1.16

3.07

5.58

1.71

106.9331

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

1 23

Terubuk

2

1 24

Kedondong cina

2

0.5008 0.5008

0.5004 0.5002

1

2804.7361

66.6905

4.2842

2

2789.4839

66.3278

4.2609

1

2918.1096

69.3863

4.4574

2

2971.2512

70.6499

4.5386

39.0792

rata-rata

4.3853

37.7592

4.3853 + 0.13

37.7592 + 1.16 320.0490

1

23714.8000

563.8862

46.6315

2

23987.5000

570.3705

47.1678

1

24503.6000

582.6422

48.1826

2

24574.0000

584.3161

48.3210

rata-rata

36.8891 36.6885 0.13

3.07

38.3802

323.7292 0.81

1.71

330.6944 331.6445

47.5757

326.5293

47.5757 + 0.81

326.5293 + 5.58

*ND: tidak terdeteksi

170

Lampiran 16. Asam Kafeat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran Wet Basis No

1

Sampel

Mengkudu

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

Duplo

Area (mAU)

[ ] (µg/ml)

ND

ND

Dry Basis

[ ] (mg/100 g sampel segar)

STDEV

% RSD

[ ] (mg/100 g sampel kering)

STDEV

% RSD

ND

-

-

ND

-

-

0.05

1.87

0.02

2.46

0.27

2.83

1 2 1 2 rata-rata

1 2

Mangkokan

2

0.5004 0.5006

1

456.9399

5.1052

0.5258

2

449.9770

5.0274

0.5178

1

439.6225

4.9117

0.5058

2

440.1553

4.9176

0.5065

rata-rata

1 3

Daun Labu Siam

2

0.5005 0.5004

1 4

Daun Lembayung

2

0.5007

0.5006

2.9217 0.01

1.87

2.8545 2.8579

0.5140

2.9003

0.5140 + 0.01

2.9003 + 0.05 0.7879

1

131.0545

1.4642

0.1050

2

125.4963

1.4021

0.1005

1

125.1032

1.3977

0.1002

2

130.4019

1.4569

0.1044

rata-rata

2.9669

0.7545 0.00

2.46

0.7521 0.7840

0.1025

0.7696

0.1025 + 0.00

0.7696 + 0.02

9.8902

1

1617.6472

18.0731

1.5463

2

1599.2568

17.8677

1.5288

1

1534.4312

17.1434

1.4668

2

1530.5905

17.1005

1.4631

9.3579

1.5013

9.6018

1.5013 + 0.04

9.6018 + 0.27

rata-rata

0.04

2.83

9.7777 9.3814

171

1 5

Daun Katuk

2

0.5005 0.5004

1

302.1453

3.3757

0.4071

2

268.7315

3.0024

0.3621

1

281.9349

3.1499

0.3799

2

275.4024

3.0769

0.3711

rata-rata

1 6

Daun Kemangi

2

0.5007 0.5005

7

Daun Pakis

1

0.5005

2

0.5005

8

Daun Pohpohan

2

0.5007 0.5007

5.12

1.7416 1.7424 1.7424 + 0.09 12.4006

22.3856

1.5600

2

2127.8755

23.7737

1.6567

1

2122.1563

23.7098

1.6523

2

1990.5109

22.2390

1.5498

3.60

13.1341 12.7559 12.7559 + 0.46

1

174.7454

1.9523

0.1131

1.0538

2

167.8596

1.8754

0.1086

1.0123

1

155.1020

1.7329

0.1004

2

157.8238

1.7633

0.1022

0.9517

0.1061

0.9883

0.1061 + 0.01

0.9883 + 0.05 5.5573

886.5911

9.9054

0.6844

869.9148

9.7191

0.6715

1

868.7194

9.7058

0.6706

2

890.3997

9.9480

0.6873

rata-rata

0.46

3.60

0.05

5.54

0.07

1.27

12.3193

1.6047

2

5.12

13.1695 0.06

1.6047 + 0.06

1

0.09

1.7013

0.3801 + 0.02 2003.6323

rata-rata

1

1.6601 0.02

0.3801

1

rata-rata

1.8665

0.01

5.54

0.9353

5.4528 0.01

1.27

5.4453 5.5812

0.6785

5.5091

0.6785 + 0.01

5.5091 + 0.07

172

1 9

Bunga Pepaya

2

0.5006 0.5007

1

968.9445

10.8255

0.6563

2

966.7228

10.8007

0.6548

1

975.7687

10.9018

0.6609

2

977.5554

10.9217

0.6621

rata-rata

10

Mangkokan Putih

1

0.5004

2

0.5004

11

Daun Kenikir

2

0.5007 0.5006

12

Daun Kelor

0.5005

2

0.5004

0.54

5.9596

0.6585

5.9381

0.6585 + 0.00

5.9381 + 0.03

934.7219

10.4432

1.0438

5.9005

937.5071

10.4743

1.0469

5.9181

1

978.6330

10.9338

1.0928

2

995.6935

11.1244

1.1119

6.2854

1.0738

6.0704

1.0738 + 0.03

6.0704 + 0.19 14.4282

1

2403.6433

26.8547

2.8418

2

2671.4573

29.8468

3.1584

1

2485.7473

27.7720

2.9388

2

2581.9116

28.8464

3.0525

0.03

3.15

6.1777

0.54

0.19

3.15

0.70

4.58

0.33

3.87

16.0358 0.14

4.58

14.9210 15.4983

2.9979

15.2208

2.9979 + 0.14

15.2208 + 0.70

1

1385.1165

15.4752

2.0462

8.2755

2

1388.0983

15.5085

2.0506

8.2933

1

1487.6622

16.6209

2.1977

2

1477.2754

16.5048

2.1824

rata-rata

0.03

5.9705

2

rata-rata

1

5.9043 0.00

1

rata-rata

1

5.9179

0.08

3.87

8.8882 8.8261

2.1192

8.5708

2.1192 + 0.08

8.5708 + 0.33

173

1 13

Daun Kucai

2

0.5004 0.5006

1

172.6932

1.9294

0.0847

2

151.3006

1.6904

0.0742

1

178.1852

1.9908

0.0874

2

176.1268

1.9678

0.0864

rata-rata

1

0.5004

Daun Jambu Mete

2

0.5005

0.9642 0.01

7.31

1.1355

0.08

7.31

-

-

0.41

4.51

0.10

3.20

1.1224

0.0832

1.0806

0.0832 + 0.01

1.0806 + 0.08

1 2

14

1.1005

ND

ND

1

ND

-

-

ND

2 rata-rata

1 15

Buah Takokak

2

0.5007 0.5009

1

1358.1204

15.1736

1.7572

2

1399.2783

15.6334

1.8105

1

1501.2277

16.7724

1.9424

2

1466.0884

16.3799

1.8969

rata-rata

1 16

Antanan

2

0.5005 0.5003

8.7365 9.0012 0.08

4.51

9.6570 9.4310

1.8517

9.2064

1.8517 + 0.08

9.2064 + 0.41 3.0795

1

502.9733

5.6195

0.5628

2

530.8669

5.9311

0.5940

1

494.4480

5.5242

0.5533

2

500.3095

5.5897

0.5598

3.0632

0.5675

3.1051

0.5675 + 0.02

3.1051 + 0.10

rata-rata

3.2503 0.02

3.20

3.0273

174

17

Krokot

1

0.5008

2

0.5009

1

205.9765

2.3013

0.1458

1.2214

2

217.1317

2.4259

0.1536

1.2875

1

219.5417

2.4528

0.1553

2

208.0424

2.3244

0.1472

1.2337

0.1505

1.2611

0.1505 + 0.00

1.2611 + 0.04 5.2812

rata-rata

1 18

Antanan Beurit

2

0.5005 0.5007

1

865.8284

9.6735

0.8291

2

815.5635

9.1119

0.7810

1

888.9601

9.9319

0.8513

2

869.8019

9.7178

0.8329

rata-rata

1 19

Daun Ginseng

2

0.5006 0.5006

1 20

Bunga kecombrang

2

0.5005

0.5007

3.13

1.3018

3.64

5.4223 5.2459 5.2459 + 0.19 1.5709

258.0371

2.8829

0.1284

251.7245

2.8124

0.1253

1

266.9262

2.9822

0.1328

2

256.6473

2.8674

0.1277

0.19

3.64

0.04

2.45

0.31

5.13

1.5325 0.00

2.45

1.6250 1.5624

0.1286

1.5727

0.1286 + 0.00

1.5727 + 0.04

5.8827

1

985.1131

11.0062

0.6020

2

1024.9144

11.4508

0.6263

1

1087.9912

12.1556

0.6648

2

971.6897

10.8562

0.5938

5.8025

0.6217

6.0757

0.6217 + 0.03

6.0757 + 0.31

rata-rata

3.13

5.3054

0.8236

2

0.04

4.9746 0.03

0.8236 + 0.03 1

rata-rata

0.00

0.03

5.13

6.1204 6.4970

175

1 21

Daun Beluntas

2

0.5002 0.5001

1

6709.4155

74.9608

8.0062

2

6200.2446

69.2721

7.3986

1

6994.0791

78.1412

8.3459

2

7042.7061

78.6845

8.4039

rata-rata

1 22

Bunga Turi

2

0.5008 0.5007

41.7118 38.5464 0.46

5.74

43.4816

2.40

5.74

-

-

0.17

2.99

-

-

43.7839

8.0387

41.8809

8.0387 + 0.46

41.8809 + 2.40

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

23

Terubuk

1

0.5008

2

0.5008

1

904.3893

10.1043

0.6491

5.5891

2

874.8511

9.7743

0.6279

5.4065

1

940.9094

10.5123

0.6753

2

911.5239

10.1840

0.6542

rata-rata

24

Kedondong cina

1

0.5004

2

0.5002

0.02

2.99

5.8148 5.6332

0.6516

5.6109

0.6516 + 0.02

5.6109 + 0.17

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

*ND: tidak terdeteksi

176

Lampiran 17. Asam Ferulat Sayuran Indigenous dengan Perhitungan Eksternal Standar Campuran Wet Basis No

1

2

3

4

Sampel

Mengkudu

Mangkokan

Daun Labu Siam

Daun Lembayung

Ulangan

W sampel (g)

1

0.5004

2

0.5002

1

0.5004

2

0.5006

1

0.5005

2

0.5004

1

0.5007

2

0.5006

Duplo

Area (mAU)

[ ] (µg/ml)

1 2 1 2

716.9307 713.5448 745.0707 813.8764

8.1098 8.0715 8.4281 9.2064 rata-rata

1 2 1 2

123.4839 121.5137 120.6384 116.7219

1.3968 1.3745 1.3646 1.3203 rata-rata

0.1439 0.1416 0.1405 0.1360 0.1405 0.1405 + 0.00

1 2 1 2

66.5307 60.5090 64.0168 68.9661

0.7526 0.6845 0.7241 0.7801 rata-rata

0.0539 0.0491 0.0519 0.0559 0.0527 0.0527 + 0.00

1

1402.1360

15.8607

1.3570

2 1 2

1391.5419 1203.8270 1351.3488

15.7409 13.6175 15.2862 rata-rata

1.3468 1.1651 1.3079 1.2942 1.2942 + 0.09

[ ] (mg/100 g sampel segar) 0.6527 0.6496 0.6783 0.7410 0.6804 0.6804 + 0.04

STDEV

% RSD

0.04

6.23

0.00

0.00

2.35

5.56

Dry Basis [ ] (mg/100 g sampel STDEV kering) 4.4875 4.4663 4.6636 0.29 5.0943 4.6779 4.6779 + 0.29 0.8118 0.7988 0.7931 0.7673 0.7928 0.7928 + 0.02 0.4050 0.3683 0.3897 0.4198 0.3957 0.3957 + 0.02

% RSD

6.23

0.02

2.35

0.02

5.56

0.57

6.85

8.6795 0.09

6.85

8.6139 7.4519 8.3651 8.2776 8.2776 + 0.57

177

1

5

Daun Katuk

2

1

6

7

Daun Kemangi

Daun Pakis

2

0.5005

0.5004

0.5007

0.5005

1

0.5005

2

0.5005

1

754.1463

8.5308

1.0289

4.7168

2

708.8474

8.0183

0.9671

1

738.0394

8.3486

1.0069

2

682.3416

7.7185

0.9309

4.2677

rata-rata

0.9835

4.5085

0.9835 + 0.04

4.5085 + 0.20

0.6688

4.4335 0.04

4.41

4.6160

1

106.7285

1.2073

0.0841

2

118.4433

1.3398

0.0934

1

115.3667

1.3050

0.0909

2

120.3667

1.3616

0.0949

0.7542

rata-rata

0.0908

0.7220

0.0908 + 0.00

0.7220 + 0.04

0.20

4.41

0.04

5.23

-

-

0.03

3.96

0.7422 0.00

5.23

0.7229

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

8

Daun Pohpohan

1

0.5007

2

0.5007

1

121.9771

1.3798

0.0953

0.7741

2

125.4892

1.4195

0.0981

0.7964

1

133.9678

1.5154

0.1047

2

127.3133

1.4401

0.0995

rata-rata

0.00

3.96

0.8502 0.8080

0.0994

0.8072

0.0994 + 0.00

0.8072 + 0.03

178

1

9

Bunga Pepaya

2

0.5006

0.5007

1

1048.9993

11.8661

0.7193

2

983.7863

11.1284

0.6746

1

989.1446

11.1890

0.6783

2

1000.5964

11.3186

0.6862

rata-rata

1

10

Mangkokan Putih

2

0.5004

0.5004

1

11

Daun Kenikir

2

0.5007

0.5006

1

12

Daun Kelor

2

0.5005

0.5004

6.1166

6.2185

3.6185

0.6401

2

640.6119

7.2465

0.7243

1

623.5053

7.0530

0.7049

2

642.9271

7.2727

0.7269

5.79

3.9850

3.9517 3.9517 + 0.23

14.9162

27.7629

2.9379

2

2252.8960

25.4843

2.6968

1

2733.7730

30.9239

3.2724

2

2721.6177

30.7864

3.2578

9.10

16.6145

15.4408 15.4408 + 1.40

16.8038

31.4231

4.1550

2

2791.8565

31.5809

4.1758

1

2997.2290

33.9041

4.4830

2

2911.8584

32.9384

4.3553

1.40

9.10

0.63

3.63

16.5406

3.0412

2777.9026

5.79

13.6920 0.28

3.0412 + 0.28

1

0.23

4.1091

0.6991

2454.3301

2.96

4.0943 0.04

0.6991 + 0.04

1

0.18

6.1874

6.2185 + 0.18

6.4044

rata-rata

2.96

0.6896

566.1655

rata-rata

6.0835 0.02

0.6896 + 0.02

1

rata-rata

6.4867

16.8882 0.16

3.63

18.1305 17.6141

4.2923

17.3592

4.2923 + 0.16

17.3592 + 0.63

179

1 13

Daun Kucai

2

0.5004 0.5006

1

103.9391

1.1757

0.0516

2

119.2102

1.3485

0.0592

1

119.8153

1.3553

0.0595

2

119.2691

1.3491

0.0592

rata-rata

1 14

Daun Jambu Mete

2

0.5004

0.5005

1 15

Buah Takokak

2

0.5007 0.5009

1 16

Antanan

2

0.5005 0.5003

6.71

0.7730 0.7456 0.7456 + 0.05

15.2393

29.1469

2.9228

2

2511.0510

28.4045

2.8483

1

2418.9636

27.3629

2.7439

2

2325.1406

26.3015

2.6374

0.12

4.46

14.8511 14.3065

2.7881

14.5371 14.5371 + 0.65 1.1138

171.0071

1.9344

0.2240

2

161.2283

1.8238

0.2112

1

152.3360

1.7232

0.1996

2

146.9178

1.6619

0.1925

6.71

0.65

4.46

0.07

6.69

0.48

5.13

13.7516

2.7881 + 0.12 1

0.05

0.7695

0.0574

2576.6816

rata-rata

0.7691 0.00

0.0574 + 0.00

1

rata-rata

0.6706

1.0501 0.01

6.69

0.9922 0.9569

0.2068

1.0282

0.2068 + 0.01

1.0282 + 0.07 9.6460

1

1556.0731

17.6020

1.7628

2

1592.8781

18.0183

1.8045

1

1457.6032

16.4881

1.6513

2

1430.8989

16.1861

1.6210

8.8700

rata-rata

1.7099

9.3564

1.7099 + 0.09

9.3564 + 0.48

9.8741 0.09

5.13

9.0356

180

1 17

18

Krokot

Antanan Beurit

2

0.5008 0.5009

1

0.5005

2

0.5007

1

200.2538

2.2652

0.1435

1.2023

2

242.5063

2.7432

0.1737

1

217.3275

2.4584

0.1557

2

215.0501

2.4326

0.1541

1.2911

rata-rata

0.1567

1.3135

0.1567 + 0.01

1.3135 + 0.11

1.4559 0.01

8.01

1.3048

0.11

8.01

-

-

0.04

7.82

0.02

2.61

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

2 rata-rata

19

Daun Ginseng

1

0.5006

2

0.5006

1

83.4330

0.9438

0.0420

0.5143

2

87.4127

0.9888

0.0440

0.5388

1

82.2128

0.9300

0.0414

2

72.4216

0.8192

0.0365

rata-rata

1 20

Bunga kecombrang

2

0.5005

0.5007

0.00

7.82

0.5067 0.4464

0.0410

0.5015

0.0410 + 0.00

0.5015 + 0.04

0.6820

1

112.8013

1.2760

0.0698

2

118.3186

1.3384

0.0732

1

119.1943

1.3483

0.0737

2

119.0906

1.3471

0.0737

rata-rata

0.0726

0.7095

0.0726 + 0.00

0.7095 + 0.02

0.00

2.61

0.7154 0.7207 0.7200

181

21

Daun Beluntas

1

0.5002

2

0.5001

1 2 1

ND

ND

ND

-

-

ND

-

-

0.02

5.71

0.02

2.09

1.12

3.30

2 rata-rata

1 22

23

Bunga Turi

Terubuk

2

0.5008 0.5007

1

0.5008

2

0.5008

1

65.8811

0.7452

0.0421

2

58.7343

0.6644

0.0375

1

60.9278

0.6892

0.0389

2

65.8243

0.7446

0.0421

rata-rata

0.0401

0.4108

0.0401 + 0.00

0.4108 + 0.02

24

Kedondong cina

2

0.5004 0.5002

0.3840 0.00

5.71

0.3983 0.4303

1

128.9623

1.4588

0.0937

0.8069

2

122.6145

1.3870

0.0891

0.7672

1

126.4453

1.4303

0.0919

2

125.3671

1.4181

0.0911

rata-rata

1

0.4307

0.00

2.09

0.7912 0.7844

0.0915

0.7874

0.0915 + 0.00

0.7874 + 0.02 32.7938

1

5107.8135

57.7786

4.7781

2

5176.5942

58.5566

4.8424

1

5444.8887

61.5915

5.0934

2

5435.7998

61.4887

5.0849

34.8996

rata-rata

4.9497

33.9717

4.9497 + 0.16

33.9717 + 1.12

33.2354 0.16

3.30

34.9579

*ND: tidak terdeteksi

182