PENGARUH METIL PARABEN DALAM BERBAGAI KONSENTRASI TERHADAP ZONA HAMBAT ISOLAT MIKROBA MERUGIKAN PADA SISTEM KULTUR JARINGAN ANGGREK GENUS CATTLEYA DI MITRA ANGGREK INDONESIA
SKRIPSI
Disusun oleh:
Disusun Oleh: TRI JIBA 08330062
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2012 i
PENGARUH METIL PARABEN DALAM BERBAGAI KONSENTRASI TERHADAP ZONA HAMBAT ISOLAT MIKROBA MERUGIKAN PADA SISTEM KULTUR JARINGAN ANGGREK GENUS CATTLEYA DI MITRA ANGGREK INDONESIA
SKRIPSI Diajukan Kepada Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang Sebagai Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Pendidikan Biologi
Disusun oleh: TRI JIBA 08330062
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2012
ii
HALAMAN PERSETUJUAN DOSEN PEMBIMBING Nama
:
TRI JIBA
Nim
:
08330062
Jurusan
:
Biologi
Fakultas
:
Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Judul Skripsi :
Pengaruh Metil Paraben Dalam Berbagai Konsentrasi Terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba Merugikan pada Sistem Kultur Jaringan Tanaman Anggrek Genus Cattleya Di Mitra Anggrek Indonesia
Diajukan untuk dipetanggungjawabkan dihadapan Dewan Penguji Guna Memperoleh Gelar Sarjana Pendidikan Starta Satu (S-1) pada Jurusan Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang
Menyetujui
iii
LEMBAR PENGESAHAN
Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang Sebagian dari Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Pendidikan Biologi
Mengesahkan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang
Dekan,
(Dr. M. Syaifuddin, MM. )
iv
LEMBAR PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini: Nama : Tri Jiba Tempat Tanggal Lahir : Pasuruan, 21 Agustus 1989 NIM : 08330062 Fakultas/Jurusan : K.I.P/ Biologi Menyatakan bahwa skripsi yang berjudul “Pengaruh Metil Paraben dengan Berbagai Konsentrasi Terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba Merugikan pada Sistem Kultur Jaringan Anggrek Genus Cattleya di Mitra Anggrek Indonesia” adalah bukan skripsi orang lain, baik sebagian maupun keseluruhan, kecuali dalam bentuk kutipan yang sudah disebutkan sumbernya. Demikian surat pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan apabila ini tidak benar, saya bersedia mendapatkan sanksi akademis. Malang, 03 November 2012 Yang Menyatakan
(Tri Jiba)
Mengetahui
v
MOTTO DAN PERSEMBAHAN “Hai orang-orang yang beriman, jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Sesungguhnya Allah beserta orang-orang yang sabar”.( Terjemahan Q.S AlBaqarah : 153 )
“Untuk dapat bertahan dalam menjalani hidup diperlukan perjuangan agar tetap bertahan”. “ Sabar dan tawakkal akan membawa kita kepada jalan yang terang”(Tri Jiba)
“ Menghadapi setiap cobaan dengan pikiran tenang dan panjang, akan membawa kepada titik terang yang akan membantu dalam menghadapi cobaan yang ada”(Imam Suyuti)
Dengan iringan do’a dan syukur, kupersembahkan skripsi ini sebagai wujud bakti, cinta dan sayangku kepada:
Ibuku tercinta “Yayuk Kumbinani”, Bapakku tersayang “Suparno” motivasi hidupku, kakak-kakakku Agus Purwanto, Sri Rahayu dan adikku Niya Khabita yang telah mendukungku dalam menyelesaikan skripsi ini, tak lupa the partner of my life Imam Suyuti yang tak henti membantu dan memberikan support kepadaku selama ini serta sahabat baikku Ayuk Damayanti, Fajar Hadi Susanti dan Nila Hariesta Citrarini (Gank Doyan) yang senantiasa mengerti segala kekurangan dan kesusahanku dan tak akan terhapus dari memori hidupku.
vi
KATA PENGANTAR Assalamu’alaikum Wr.Wb.
Bismillahirrohmanirrahim Puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, taufiq, hidayah, serta inayah-Nya. Sholawat dan salam semoga tercurahkan kepada suri tauladan kita Nabi Muhammad SAW, sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir skripsi dengan judul “Pengaruh Metil Paraben dalam Berbagai Konsentrasi Terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba Merugikan pada Sistem Kultur Jaringan
Anggrek
Genus Cattleya di Mitra Anggrek Indonesia’’. Adapun penyusunan skripsi ini merupakan salah satu syarat yang harus dipenuhi dalam menyelesaikan Program Sarjana Strata Satu (S1) Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang Penulis menyadari sepenuhnya bahwa tanpa adanya bantuan tenaga, pikiran informasi, bimbingan, motivasi dan sumbangan doa dari berbagai pihak skripsi ini tidak dapat terselesaikan dengan baik. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih kepada: 1. Ayahanda Suparno, Ibunda Yayuk Kumbinani dan kakak saya Agus Purwanto serta adik saya Niya khabita yang telah memberikan dukungan, do’a dan semangat kepadaku yang tiada putus- putusnya kepada saya. 2. Bapak Dr. M. Syaifuddin, MM selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Malang. 3. Ibu Dra. Sri Wahyuni, M.Kes selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Malang. 4. Ibu Dra. Siti Zaenab, M.Kes selaku pembimbing I yang telah meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan, petunjuk serta saran yang sangat berharga dalam menyusun skripsi ini, dan Ibu Dra. Sri Wahyuni, M.Kes
vii
selaku pembimbing II yang dengan penuh kesabaran memberikan bimbingan kepada penulis hingga dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. 5. Drs. Untung Santoso, M.Si yang telah berkenan mengizinkan saya untuk mengikuti penelitian beliau dan menggunakan laboratorium beliau sehingga terselaesaikannya skripsi ini. 6. Mas Arisandy dan teman- teman asisten Laboratorium Kimia. 7. Yang tercinta dan tersayang Imam Suyuti, termakasih telah menjadi bagian dari hidup saya selama ini dan insya Allah untuk selamanya dan terimakasih atas dukungan serta perhatiannya sehingga saya bisa menyelesaikan skripsi yang penuh dengan lika liku ini. 8. Sahabat- sahabat baikku Ayuk Damayanti, Fajar Hadi Susanti, Nila Hariesta C, Sefia Ika Yuliana, terima kasih banyak atas dukungan kalian, maaf aku sering merepotkan kalian selama ini. 9. Semua teman-, teman-teman Kost Anti Galau, Dian P, Mawan Edi, Rahmat Dirjo, Hafid, Fajar, Lisa, Gother, Dhea. 10. Keluarga Besar UPT Perpustakaan UMM yang telah bnyak memberikan dukungan dan bantuan sehingga skripsi ini terselesaikan. Semoga Allah berkenan membalas amal baik yang telah diberikan, amien. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu penulis menerima saran dan kritik demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi semua pihak yang membutuhkan. Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Malang, 03 November 2012 Penulis,
Tri Jiba
viii
DAFTAR ISI LEMBAR SAMPUL LUAR .......................................................................... i LEMBAR SAMPUL DALAM ...................................................................... ii LEMBAR PERSETUJAN ............................................................................. iii LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... iv SURAT PERNYATAAN ............................................................................... v KATA PENGANTAR…………………………………………………….vi ABSTRAK ...................................................................................................... viii DAFTAR IS .................................................................................................... ix DAFTAR TABEL…………………………………………………………xii DAFTAR GRAFIK………………………………………………………..xiii DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………………....xiv
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang .............................................................................. 1 1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 6 1.3 Tujuan Penelitian........................................................................... 6 1.4 Manfaat Penelitian......................................................................... 7 1.5 Batasan Masalah ............................................................................ 7 1.6 Definisi Operasional……………………………………………. . 8
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tanaman Anggrek Cattleya ........................................................... 10 2.2.1 Mengenal karakteristik Cattleya .............................................. 11 2.2.1.1 Daun .................................................................................... 11 2.2.1.2 Batang ................................................................................. 12 2.2.1.3 Akar ..................................................................................... 12 2.2.1.4 Bunga .................................................................................. 13 2.2.2 Ragam Jenis Cattleya ............................................................... 14 2.2.2.1 Cattleya Spesies ................................................................... 14 2.2.2.2 Cattleya Hibrida .................................................................. 14 2.2.3 Merawat Cattleya ..................................................................... 15 2.2.3.1 Intensitas Cahaya ................................................................ 15 2.2.3.2 Temperatur .......................................................................... 15 2.2.3.3 Penyiraman .......................................................................... 16 2.2.3.4 Kelembaban Udara (RH) .................................................... 16 2.2.3.5 Pemupukan .......................................................................... 17 2.2.3.6 Repotting ............................................................................. 17 2.2.3.7 Media Tanam ...................................................................... 18 2.3 Sistem Kultur Jaringan Pda Tanaman Anggrek ............................ 19 ix
2.4 Mikroba Kontaminan .................................................................... 21 2.5 Tinjauan Tentang antimikroba ..................................................... 25 2.5.1 Mekanisme Kerja Antimikroba ................................................. 25 2.5.1.1 Antimikroba yang Menghambat Metabolisme Sel Mikrob 26 2.5.1.2 Antimikroba yang Menghambat Sisntesis Dinding Sel Mikroba .............................................................................. 26 2.5.1.3 Antimikroba yang Menghambat Permeabilitas Membran Sel Mikroba ......................................................................... 26 2.5.1.4 Antimikroba yang Menghambat Sintesis Protein Sel Mikroba .............................................................................. 27 2.5.1.5 Antimikroba yang Menghambat Sintesis atau Merusak Asam Nukleat Sel Mikroba ................................................. 27 2.5.2 Mekanisme resistensi terhadap antimikroba ............................ 27 2.6 Isolasi Mikroba .............................................................................. 28 2.6.1 Menyiapkan Ruangan .............................................................. 28 2.6.2 Pemindahan dengan alat inokulasi ........................................... 29 2.6.3 Teknik Pertumbuhan Mikroorganisme .................................... 30 2.6.3.1 Teknik Piringan Goresan..................................................... 30 2.6.3.2 Metode Tuang .................................................................... 30 2.6.3.3 Teknik Sebar ....................................................................... 31 2.6.3.4 Teknik Pengenceran ............................................................ 31 2.6.3.5 Teknik Micromanipulator ................................................... 32 2.6.4 Isolasi pada Cawan ................................................................... 32 2.6.5 Isolasi pada Medium Cair ........................................................ 33 2.6.6 Isolasi Sel Tunggal ................................................................... 33 2.7 Pengukuran Aktivitas antimikroba ................................................ 34 2.8 Bahan Pengawet makanan ............................................................. 35 2.9 Metil Paraben ................................................................................ 38 2.10 Kerangka Konsep Penelitian ......................................................... 42 2.11 Hipotesa…………………………………………………………. 43
BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian .............................................................................. 44 3.2 Tempat dan waktu Penelitian ........................................................ 44 3.3 Populasi dan Teknik Sampling...................................................... 45 3.3.1 Populasi ...................................................................................... 45 3.3.2 Sampel ........................................................................................ 45 3.4 Variabel Penelitian ........................................................................ 46 3.4.1 Jenis Variabel ............................................................................. 46 3.4.1.1 Variabel Bebas .................................................................... 46 3.4.1.2 Variabel Terikat .................................................................. 46 3.4.1.3 Variabel Kontrol.................................................................. 47 x
3.4.2 Definisi Operasiona Variabel .................................................... 47 3.5 Rancangan Percobaan ................................................................... 48 3.6 Prosedur Penelitian ........................................................................ 51 3.6.1 Persiapan Penelitian .................................................................... 51 3.6.1.1 Alat ...................................................................................... 51 3.6.1.2 Bahan ................................................................................... 52 3.6.2 Sterilisasi Alat............................................................................. 52 3.6.3 Proses Pembuatan Media Tumbuh Mikroba............................... 53 3.6.4 proses Pembuatan Konsentrasi Antimikroba .............................. 53 3.6.5 Inokulasi Isolat Mikroba ............................................................. 54 3.6.6 Pengamatan ................................................................................. 55 3.7 Teknik Pengumpulan Data ............................................................ 56 3.8 Teknik Analisis Data…………………………………………… . 56 3.8.1 Uji Normalitas ............................................................................ 57 3.8.2 Uji Homogenitas ......................................................................... 58 3.8.3 Uji Anova Satu Arah .................................................................. 59 3.8.4 Beda Jarak Nyata Duncan ........................................................... 62
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ............................................................................ 64 4.2 Hasil Analisa Data ......................................................................... 66 4.2.1 Analisis Uji Normalitas Data ..................................................... 66 4.2.2 Analisis Uji Homogenitas Data ................................................. 66 4.2.3 Analisis Anova Satu Arah ........................................................ 67 4.2.4 Analisis Uji Duncan ................................................................... 68 4.3 Pembahasan ................................................................................... 69 4.3.1 Pengaruh Pemberian Metil Paraben Terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba D ......................................................................... 69 4.3.2 Konsentrasi Metil Paraben yang Paling Efektif terhadap Daerah Zona Hambat Isolat Mikroba D .................................................. 74 4.3.3 Hasil Identifikasi Isolat Mikroba ................................................ 76
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan.................................................................................... 81 5.2 Saran .............................................................................................. 81
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 83 LAMPIRAN .................................................................................................... 87
xi
DAFTAR TABEL Tabel
Halaman
Tabel 3.1 : Tabel 3.2 : Tabel 3.3 : Tabel 3.4 : Tabel 4.1:
Uji Normalitas ............................................................................... 58 Uji Homogenitas ........................................................................... 59 Anava Satu Jalan ........................................................................... 61 Tabel Ringkas Uji Duncan 5% ...................................................... 63 Data Pengamatan Diameter Zona Hambat isolat mikroba D dengan Perlakuan Metil Paraben .............................................................. 64 Tabel 4.2 : Ringkasan Analisis Varians 1 Jalan Konsentrasi Metil Paraben terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba D ...................................... 67 Tabel 4.3 : Uji Duncan 5% Konsentrasi Metil Paraben terhadap Zona Hambat Isolat Mikroba D ........................................................................... 68 Tabel 4.4 : Hasil Identifikasi Isolat Mikroba Merugikan pada Sistem Kultur Jaringan Anggrek………………………………………………...77
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
Lampiran 1 : Tabel Hasil Pengamatan ............................................................ 87 Lampiran 2 : Uji Normalitas (Liliefors)………………………………………..... 88 Lampiran 3 : Uji Homogenitas (Baerlet)……………………………………….. 91 Lampiran 4 : Analisis Varians 1 Arah (One Way Anova)………………….. 94 Lampiran 5 : Uji Beda Jarak Nyata Duncan……………………………….. 97 Lampiran 6 : Tabel Z……………………………………………………….. 99 Lampiran 7 : Tabel Nilai Kritis untuk Uji Normalitas (Lilliefors).................. 101 Lampiran 8 : Tabel Uji Square untuk Uji Homogenitas (Bartlett)……………. 102 Lampiran 9 : Tabel F untuk Analisis Varians................................................. 103 Lampiran 10: Tabel Uji Beda Jarak Nyata Duncan………………………... 104 Lampiran 11: Foto- Foto Penelitian………………………………………… 106 Lampiran 12: Hasil Uji Pendahuluan……………………………………….. 110 Lampiran 12: Laporan Hasil Identifikasi……………………………………. 111
xiii
DAFTAR GAMBAR Gambar
Halaman
Gambar 2.1 Cattleya Labiata ........................................................................... 11 Gambar 2.2 Cattleya Bow Bells ....................................................................... 11 Gambar 2.3 Tingkat Gradasi Gangguan Kontaminasi dengan macam media . 22 Gambar 2.4 Rumus Struktur Metil Paraben ..................................................... 39 Gambar 3.1 Skema The Post Test Only Control Group Design ...................... 49 Gambar 3.2 Denah Rancangan Acak Lengkap ................................................ 50 Gambar 3.3 Goresan Streaking ........................................................................ 55 Gambar 4.1 Grafik Diameter Zona Hambat Isolat D berdasarkan Konsentrasi Metil Paraben ................................................................................ 65 Gambar 4.2 Gambar Mikroskopis Isolat Mikroba NN 2-2 .............................. 77 Gambar 4.2 Gambar Mikroskopis Isolat Mikroba C ....................................... 77 Gambar 4.2 Gambar Mikroskopis Isolat Mikroba D ....................................... 78 Gambar 4.2 Gambar Mikroskopis Isolat Mikroba E ........................................ 78
xiv
Daftar Pustaka Anonymous 1, 2008. (http://ekmon-saurus.blogspot.com/2008/11/bab-8-daya-kerjaantimikroba-dan.html, diakses pada 23 Februari 2012) Brooks G.F, Carrols K.C, Butel J.S, & Morse S.A. 2007. Medical Microbiology. 24th ed .U.S.A : Mc Graw Hill. Cahyana. 2006. Kasiat dan Manfaat Daun Sirih Obat Mujarab dari Masa ke Masa. Jakarta : Agromedia Pustaka. Comber. J.B. 1990. Orchids of Java. Bentham-Moxon Trust. The Royal Botanic Gardens. Kew. 407 pp. Clem Tisdell. 1999. Biodiversity, Conservasition and Sustainable Development. Principles and Practices with Asian Examples. Edward Elgar Pulb. Lim. UK. P:159175. Crib, P. 1994. New Initiative In The Conservation of Orchids. Proc. Strategies for Flora Conservation in Asia. The Kebun Raya Bogor. P:85-90. Clontz, Lucia. 2009. Microbial Limit and Bioburden Tests. United states of Amerika : CRC Press. Dwidjoseputro, 2002. Dasar- Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan. Eko, Wuri Oktavi. 2010. Pengaruh Pemberian Dekok Daun Sirih Hijau (Piper betle L) dan Daun Sirih Merah (Piper crocatum) terhadap penurunan suhu tubuh pada tikus putih (Rattus norvegicus). Skripsi, Jurusan Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadyah Malang, Malang. Fajar, Kusuma Dewi. 2010. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Buah Mengkudu (Morinda Citrifolia, Linnaeus) Terhadap Bakteri Pembusuk Daging Segar. Surakarta: MIPA Universitas Sumatra Utara. Gandahusada S. 2000. Parasitologi Kedokteran. Jakarta: FKUI. Gunawan, L. W. 2002. Budidaya Anggrek. Penebar Swadaya: Jakarta Guyton & Hall. 2002. Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC. Hanafiah, Kemas Ali.2000. Rancangan Percobaan Teori dan Aplikasi. Jakarta: PT. RajaGrafindo Persada. xv
Handayani, S., Dkk. 2005. Optimisasi Waktu Reaksi dan Konsentrasi Ion Hidroksida Pada Sintesis Flavonoid dan Fenol Menggunakan Benzaldehida dan Turunannya. Yogyakarta: Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Yogyakarta. Hertiana, T. dan I. Purwanti. 2002. Minyak atsiri hasil destilasi ekstraketanol daun sirih (Piper betle L) dari beberapa daerah di Yogyakarta dan aktivitas antijamur tehadap Candida albicans. Yogyakarta : Penebar Swadaya. Harjono, 1994. Laporan Hasil Inventarisasi Anggrek di Kawasan Semeru Selatan. Dep.Hut. Dir. Jen. Perlindungan Hutan dan Pelestarian Alam. Taman Nasional Bromo Tengger Semeru. Malang. 73 hal. Indrawati, Titin. 2008. Pengaruh Pemberian Filtrat Cabe Rawit (Caspicum frutescen) Dalam Berbagai Konsentrasi Terhadap Zona Hambat Jamur Penyebab Sariawan (Candida albicans) Secara in-vitro. Skripsi, Jurusan Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadyah Malang, Malang. Iskandar. 2005. Kumpulan 1001 Obat Tradisional Indonesia. Jakarta: Dayang Sumbi. Issebacher, Kurt J. 1999. Harrison Prinsip-Prinsip Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta: EGC. Jawetz,dkk.2001. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Salemba Medika. J.M.Gibson, Md. 1999. Mikrobiologi dan Patologi Modern untuk Perawat. Jakarta: EGC. Katzung, B.G. 2001. Farmakologi Dasar dan Klinik Jakarta: EGC.
Obat Antijamur. Edisi 5.
Kuswadji. 2008. Penyebab Kandidiasis Aspek Klinis Bagian Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin. Jakarta: FKUI. Lestari, S. 1993. Mengenal dan Bertanam Anggrek. Aneka Ilmu: Malang Lita Soetopo, Bernadinus Widhiartadi, and Dyah Ayu Kusumaningtyas. 2003. The Existence and Ornamental potential of Epiphyte and Terrestrial Orchids at Bromo Tengger Semeru National Park East Java Indonesia. Paper presented at The Botanical gardens International conference. Eka Karya Botanic Gardens-LIPI. Bedugul-Bali. 6 hal. Miftachul, Haniah. 2008. Isolasi Jamur Endofit Dari Daun Sirih (Piper Betle L.) Sebagai Antimikroba Terhadap Escherichia coli, Staphylococcus Aureus Dan Candida albicans. Malang.
xvi
Marton, Anthoni. 2008. Balai Pengkajian Teknolongi Pertanian Yogyakarta. Yogyakarta: Primatani. Moeljanto, Rini Damayanti. 2003.Khasiat dan Manfaat Daun Sirih Obat Mujarab dari Masa ke Masa. Jakarta: Agromedia Pustaka. Nugraha, Ari Widya. 2007. Jamur Candida albicans. Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. Noer, Dewi .2010. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid dari Daun Sirih Merah. Malang: Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana malik ibrahimMalang. Nasir, 1998. Metodologi Penelitian Jilid 2. Gramedia: Jakarta Pleczar, 2002. Microbiology. Gramedia: Jakarta Puspitaningtyas, D.M., Sofi Mursidawati, Sutrisno dan Jauhar Asikin. 2003. Anggrek Alam di Kawasan Konservasi Pulau Jawa. LIPI. Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Bogor. hal: 1-2 Ridwan. 2004. Metodologi Penelitian. Erlangga: Jakarta Robinson, T. 1991. Kandungan Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi. Bandung: ITB. Robbin. 2006. Dasar Patologis Penyakit. Jakarta: EGC. Rofieq, Ainur. 2003. Metodelogi Penelitian.Malang: UMM Press. Sastroamidjojo, Seno.2001. Obat Asli Indonesia.Jakarta: Dian Rakyat. Sudewo, B. 2007. Basmi Penyakit dengan Sirih Merah. Jakarta: PT Agromedia Pustaka. Sudjana. 2005. Metode Statistik. Bandung: Penerbit Tarsito. Santoso, Untung dan Nursandi, Fatimah. 2003. Kultur Jaringan Tanaman. UMM Press: Malang Sudjana, 1996. Metode Statistika. Tarsito: Bandung Sugiyono. 2009. Metode Penelitian. Alfabeta: Bandung Supriyadi, S. 2004. Budidaya Sapi. Bumi Aksara: Jakarta Waluyo, Lud. 2010. Teknik Metode Dasar Mikrobiologi. UMM Press: Malang
xvii
Volk dan Wheeler. 1990. Mikrobiologi Jilid I. Erlangga: Surabaya. Wiryowidagdo, S. 2008.Kimia & Farmakologi Bahan Alam. Jakarta: EGC.
xviii
