Počítání bezbarvých bičíkovců a améb ve vodě (zkušenosti z mezilaboratorních porovnávacích zkoušek) Petr Pumann, Tereza Pouzarová Vodárenská biologie 2013 6.-7.2.2013, Praha
Mikroskopické organismy v pitné vodě Na výstupu z úpravny (z povrchového zdroje) – organismy ze surové vody (řasy, sinice, ...) V distribuční síti – přibývá heterotrofních organismů (bezbarví bičíkovci, améby, nálevníci, mikromycety, …)
Státní zdravotní ústav
MPZ – mikroskopický obraz v pitné vodě Především rozsivky
– ALE rozhodně se nejedná o typický vzorek pitné vody
Státní zdravotní ústav
250 jedinci / ml
– Vzorky jsou stabilní – Nebývá problém vyhodnotit výsledky
300
200 150 100
50 0
2012
Programy pořádané SZÚ Od roku 2009 navíc jeden nepovinný vzorek s heterotrofními organismy Většina laboratoří výsledky tohoto vzorku zašle
Státní zdravotní ústav
2009 - Vzorek 1
1
2
3
4
Centrické rozsivky 1. centrické rozsivky různé velikosti 1a – valvární pohled 1b – pleurální pohled 2. Aulacoseira sp.
3.
Melosira varians (mrtvá)
Penátní rozsivky 4. Synedra (Fragilaria) 5. Nitzschia sp. 6. Navicula – mrtvá
7.
b
a
Synedra (Fragilaria) ulna – mrtvá (pleurální pohled)
6
10µm 7
100µm
5
2009 - Vzorek 1
1
3
2
4
Zelené řasy
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12.
Coelastrum microporum ? Tetraedron caudatum Dictyosphaerium sp. Scenedesmus acuminatus 5 Micractinium sp. Actinastrum hantzschii Tetrastrum sp. Lagerheimia geneviensis Chlamydomonas sp. Chlorogonium sp. Gloeotila pelagica
7
6
Žlutozelené řasy
13. Goniochloris mutica Obrněnky 14. ?
10µm 10
13
11
Sinice
15. Pseudanabaena limnetica 8
9
12
14
15 100µm
2009 - vzorek 4 heterotrofní organismy
améby bezbarvý bičíkovec
shluk bakterií
cysta (améby?)
Státní zdravotní ústav
améba
500
2009
400 Vz. 1 (rozsivky) jedinci / ml
Pouze 12 účastníků z 35 zaznamenalo améby Jinak buď bez nálezu nebo jen bezbarví bičíkovci
300 200 100 0 200
jedinci / ml
150
100
50 Státní zdravotní ústav
2009
0
2009 Vz. 4 (heterotrofové)
2010 - Vzorek 1
Asterionella formosa
Nitzschia acicularis
centrická rozsivka
Státní zdravotní ústav
Chrysococcus sp.
2010 - Vzorek 4 heterotrofní organismy
améba
améba
bezbarvý bičíkovec (nebo zoospora micromycéty)
bezbarvý bičíkovec
bezbarvý bičíkovec spora micromycéty ? a shluk bakterií, který se nekvantifikuje
Státní zdravotní cysta (améby) ? ústav
500
2010
2010
400
Bez negativních nálezů!!!
jedinci / ml
Vz. 1 (rozsivky)
300 200 100 0 500
2010
jedinci / ml
400
Vz. 4 (heterotrofové) 300 200 100
Státní zdravotní ústav
0
3500
2011 - Vzorek 4 bezbarví bičíkovci
Státní zdravotní ústav
Vz. 1 (rozsivky) 900 800
300
2011
250
700 600
jedinci / ml
jedinci / ml
2012
500 400 300
200
200 150 100 50
100
0
0
Vz. 4 (heterotrofové)
2011
20000 jedinci / ml
Chyba ve sborníku
15000 10000 5000
1600 1400 1200
1000
jedinci / ml
25000
800 600
400 200
0
0
2012
Trocha nejistoty z naší strany
Státní zdravotní ústav
Vzorky méně stabilní a zpracovávány až cca 24 hodin po přípravě Nepovinné vzorky – menší snaha mít výsledky správně za každou cenu (méně koluze a falzifikace výsledků) Obtížné stanovit vztažnou hodnotu odpovídající skutečnosti Malá zkušenost s podobnými typy vzorků
Příčiny špatného stavu (1) Na kurzech se to moc (nebo spíš vůbec) neučí, takže často to lidé z provozních laboratoří skoro neznají – Z praxe známy příklady falešně pozitivních nálezů u velmi zodpovědných, ale málo zkušených pracovníků – Bohužel na dostatečné úrovni to neznají ani lektoři Státní zdravotní ústav
Příčiny špatného stavu (2) Pozorování heterotrofů mnohem složitější Nevýrazná barva Neleží spořádaně na mřížce Často malé rozměry Mohou lyzovat
Státní zdravotní ústav
Co s tím? Metodická / vzdělávací pracoviště – Zlepšit přípravu laboratorníků – Vylepšení metodiky ???
Laboratoře – Být jistý alespoň ve skupinovém určení (kdo nepozná amébu, nemůže dělat dobře rozbory pitné vody) – Být pozorný při mikroskopování (to se lehko řekne)
Pracovníci využívající výsledky
Státní zdravotní ústav
– Uvědomovat si, že výsledky nálezu heterotrofních organismů jsou zatíženy značnou nejistotou – K jejich nálezům přistupovat spíš semikvantitativně (nulový nález, mírný nález, významný nález)
Díky za pozornost
Жуков Б.Ф. (1993): Атлас пресноводных гетеротрофных жгутиконосцев
