PENGHAMBATAN PEROKSIDASI LIPID SEL KHAMIR Candida sp. Y390 OLEH EKSTRAK DAGING BUAH SALAK BONGKOK (Salacca edulis Reinw.)
DEDE FALAHUDIN
PROGRAM STUDI BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2008
ABSTRAK DEDE FALAHUDIN. Penghambatan Peroksidasi Lipid Sel Khamir Candida sp.Y390 oleh Ekstrak Daging Buah Salak Bongkok (Salacca edulis Reinw.). Dibimbing oleh ANNA P. ROSWIEM dan EMAN KUSTAMAN. Salak Bongkok merupakan jenis salak yang berasal dari desa Bongkok, kecamatan Conggeang, Sumedang, Jawa Barat. Salak Bongkok diketahui memiliki senyawa aktif sebagai antioksidan dan menghambat asam urat secara in vitro. Penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas antioksidasi ekstrak salak Bongkok secara in vivo menggunakan sel khamir Candida sp.Y390 sebagai model percobaan. Ekstrak salak daging buah Bongkok mengandung senyawa fenolik, alkaloid, flavonoid, saponin, dan tanin. Ekstrak salak muda dan tua konsentrasi 1200 ppm dan 2000 ppm bersifat prooksidan terhadap sel khamir Candida sp.Y390 kondisi normal. Ekstrak salak tua 200 ppm dapat menghambat peroksidasi lipid sel khamir yang diberi parasetamol 0.3% lebih tinggi yaitu sebesar 61.06% dibandingkan vitamin C 0.225 mg/mL yaitu sebesar 53.65%. Ekstrak daging buah salak tua 200 ppm sudah mampu menurunkan lipid peroksida sel khamir yang diberi parasetamol 0.3%.
ABSTRACT DEDE FALAHUDIN. Inhibition of Lipid Peroxidation Yeast Cell Candida sp. Y390 with flesh Extract of Bongkok Snake Fruit (Salacca edulis Reinw.). Under the direction of ANNA P. ROSWIEM and EMAN KUSTAMAN. Bongkok snake fruit comes from Bongkok village, Conggeang district, Sumedang, West Java. This fruit has bioactive molecule as antioxidant and inhibits ureic acid by in vitro assay. This research was done for determining antioxidant activity of Bongkok snake fruit crude extract by in vivo assay using yeast cell Candida sp.Y390 as experimental model. It’s crude extract has secondary metabolite compound such as alkaloid, saponin, flavonoid, phenolic, and tannin. Crude extract immature and mature snake fruit 1200 ppm and 2000 ppm has prooxidant activity for normal yeast cell. Mature fruit snake crude extract 200 ppm could inhibit lipid peroxidase of yeast cell which was treated by paracetamol 0.3% higher is 61.06% compared with Vitamin C 0.225 mg/mL is 53.65%. Mature snake fruit crude extract has been reduce peroxide lipid yeast cell that has treated by parasetamol 0.3%.
PENGHAMBATAN PEROKSIDASI LIPID SEL KHAMIR Candida sp. Y390 OLEH EKSTRAK DAGING BUAH SALAK BONGKOK (Salacca edulis Reinw.)
DEDE FALAHUDIN
Skripsi sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Sains pada Program Studi Biokimia
PROGRAM STUDI BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2008
Judul Skripsi : Penghambatan Peroksidasi Lipid Sel Khamir Candida sp. Y390 oleh Ekstrak Daging Buah Salak Bongkok (Salacca edulis Reinw.) Nama : Dede Falahudin NRP : G 44104002
Disetujui Komisi Pembimbing
Dr. Anna P Roswiem, M.S. Ketua
Ir. Eman Kustaman Anggota
Diketahui
Dr. drh. Hasim, DEA. Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Tanggal lulus :
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Purwakarta pada tanggal 10 Mei 1985 sebagai anak pertama dari empat bersaudara pasangan Yasin dan Masfuroh. Tahun 2004 penulis lulus dari SMA (Plus) 1 Cisarua-Bandung dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPM (USMI) pada program studi Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA). Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah melaksanakan Praktik Lapang (PL) di PT Indolakto Sukabumi selama periode Juli sampai Agustus 2007, dan menyusun laporan dengan judul Uji Mutu Susu Kental Manis Secara Mikrobiologi. Selain itu, penulis aktif dalam organisasi kemahasiswaan, yaitu ketua departemen Sosial Kemasyarakatan (SOSMAS) pada Kesatuan Aksi Mahasiswa Muslim Indonesia (KAMMI) Daerah Bogor periode 2006-2008, dan departemen Kerohanian dan Kewirausahaan pada Community of Research and Education in Biochemistry (CREB’s) periode 2006-2007.
PRAKATA Puji dan syukur senantiasa terpanjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini. Tema yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan April ini adalah antioksidan, dengan judul Penghambatan Peroksidasi Lipid Sel Khamir Candida sp. Y390 oleh Ekstrak Daging Buah Salak Bongkok (Salacca edulis Reinw.). Ungkapan terimakasih penulis ucapkan kepada semua pihak yang telah membantu selama kegiatan penelitian dan penyusunan karya ilmiah. Penulis mendapatkan banyak bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung yang terlibat dalam pelaksanaannya. Terima kasih penulis ucapkan kepada Dr. Anna P Roswiem, MS selaku pembimbing utama, Ir. Eman Kustaman selaku pembimbing kedua dan Dr. Heddy Julistiono, MS selaku pembimbing lapangan serta semua karyawan di Balitbiologi LIPI. Penelitian ini dapat terlaksana atas bantuan dana proyek di Balitbiologi LIPI. Ungkapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada keluarga di Subang, Purwakarta dan teman-teman Biokimia 41, Nanda, Andre, Avriadi teman satu bimbingan, semangat ya, untuk sahabat terbaik Mayang Arum yang selalu memberi dukungan moril, materil, doa dan semangat selama penelitian dan penyusunan karya ilmiah ini. Tak lupa saya ucapkan terima kasih untuk saudara seperjuangan di KAMMI Bogor 2004-2008. Penulis menyadari penulisan karya ilmiah ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari berbagai pihak. Semoga karya ilmiah ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Bogor, Agustus 2008
Dede Falahudin
DAFTAR ISI Halaman DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... ix DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... ix PENDAHULUAN ..............................................................................................
1
TINJAUAN PUSTAKA Tanaman Salak Bongkok (Salacca edulis Reinw.) .................................... Khamir Candida sp .................................................................................... Radikal Bebas dan Peroksidasi Lipid......................................................... Parasetamol. ............................................................................................... Antioksidan ................................................................................................ Vitamin C. ..................................................................................................
1 2 2 4 4 5
BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat ......................................................................................... Metode ...................................................................................................... Analisis Statistik .......................................................................................
6 6 8
HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Daging Buah Salak Bongkok ..................................................... Uji Fitokimia Daging Buah Salak Bongkok............................................... Kurva Pertumbuhan Sel Khamir Candida sp.Y390 ................................... Pengukuran Peroksidasi Lipid Sel Khamir Candida sp. Y390 dengan HPLC. ............................................................................................ Penentuan Konsentrasi Ekstrak Daging Buah Salak Bongkok .................. Penghambatan Peroksidasi Lipid oleh Ekstrak Daging Buah Salak Bongkok. ....................................................................................................
8 9 10 10 11 12
KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................................... 13 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 14 LAMPIRAN ...................................................................................................... 17
DAFTAR GAMBAR Halaman 1
Buah salak Bongkok (Salacca edulis Reinw.) ............................................
2
2
Sel khamir Candida sp. ................................................................................
2
3
Mekanisme pembentukan lipid peroksida ...................................................
3
4
Reaksi pembentukan MDA dari PUFA teroksidasi ......................................
3
5
Struktur kimia kompleks MDA-(TBA)2 ......................................................
4
6
Struktur parasetamol ....................................................................................
4
7
Pembentukan metabolit reaktif NAPQI hasil metabolisme parasetamol oleh enzim sitokrom P-450 ......................................................
4
Mekanisme pembentukan radikal bebas dari struktur parasetamol oleh enzim/H2O2 ...........................................................................................
4
Struktur dasar flavonoid ..............................................................................
5
8 9
10 Kurva pertumbuhan sel khamir Candida sp................................................. 10 11 Kurva standar TMP-(TBA)2 ........................................................................ 11 12 Bentuk puncak kromatogram kurva standar MDA-(TBA)2 .......................... 11 13 Bentuk puncak kromatogram perlakuan ekstrak 200 ppm (atas) dan kurva standar TMP-(TBA)2 (bawah)...................................................... 11 14 Konsentrasi lipid peroksida sel khamir dengan perlakuan ekstrak muda dan ekstrak tua .................................................................................... 12 15 Konsentrasi lipid peroksida sel khamir yang diberi perlakuan. ................... 13
DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1
Tahapan penelitian ...................................................................................... 18
2
Ekstraksi daging buah salakBongkok (Harbone 1287) ................................ 19
3
Rendemen ekstrak daging salak Bongkok muda dan tua ............................ 19
4
Pembuatan kurva pertumbuhan sel khamir ................................................... 20
5
Populasi rerata pertumbuhan khamir Candida sp ......................................... 20
6
Penentuan kurva standar TMP (Li et al. 2004) ........................................... 21
7
Kurva standar TMP ..................................................................................... 21
8
Pengukuran lipid peroksida suspensi sel khamir Candida sp. terhadap penambahan ekstrak daging buah salak muda dan tua .................. 22
9
Pengukuran lipid peroksida suspensi sel khamir Candida sp. terhadap penambahan ekstrak daging buah salak muda ............................... 23
10 Pengukuran lipid peroksida suspensi sel khamir Candida sp. terhadap penambahan ekstrak daging buah salak tua ................................... 24 11 Pengukuran lipid peroksida suspensi sel khamir Candida sp. pada penelitian utama ................................................................................... 25 12 Pengukuran lipid peroksida suspensi sel khamir Candida sp. pada penelitian utama ................................................................................... 26 13 Hasil pengolahan data kurva pertumbuhan sel khamir Candida sp. dengan metode ANOVA ............................................................................... 27 14 Hasil pengolahan lipid peroksida penelitian pendahuluan dengan metode ANOVA .............................................................................................. 27 15 Hasil pengolahan data lipid peroksida penelitian utama dengan metode ANOVA .......................................................................................................... 28 16 Hasil pengukuran konsentrasi MDA penelitian pendahuluan dan utama dengan metode HPLC ..................................................................................... 29
