PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL HERBA ALFALFA (Medicago Sativa L.) TERHADAP PERTUMBUHAN VOLUME ADENOCARSINOMA MAMMAE MENCIT C3H BESERTA ANALISIS HISTOPATOLOGINYA
SKRIPSI
Oleh : Amirudin 125010872
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS WAHID HASYIM SEMARANG 2016
SKRIPSI PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL HERBA ALFALFA (Medicago Sativa L.) TERHADAP PERTUMBUHAN VOLUME ADENOCARSINOMA MAMMAE MENCIT C3H BESERTA ANALISIS HISTOPATOLOGINYA
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
Oleh : Amirudin 125010872
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS WAHID HASYIM SEMARANG 2016
SURAT PERNYATAAN Yang bertanda tangan dibawah ini: Nama
: Amirudin
NIM
: 125010872
Judul Skripsi
: Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Herba Alfalfa (Medicago sativa L.) Terhadap Pertumbuhan Volume Adenocarcinoma Mammae Mencit C3H Beserta Analisis Derajat Histopatologinya.
Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi saya tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi. Sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapak karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah skripsi saya dan disebutkan dalam daftar pustaka. Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dapat digunakan sebagaimana mestinya. Semarang, Maret 2016
Amirudin
HALAMAN PERSEMBAHAN
MOTTO
“Ilmu lebih utama dari pada harta. Sebab ilmu adalah warisan para nabi, adapun harta adalah warisan Qorun, Firaun dan lainnya. Ilmu lebih utama dari harta karena ilmu itu menjaga kamu, kalau harta kamulah yang menjaganya. “(Ali bin Abi Thalib )
Kupersembahkan untuk : Kedua orang tuaku sebagai wujud hormatku Almamaterku sebagai wujud terima kasihku
KATA PENGANTAR
Syukur alhamdulillah senantiasa penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-NYA, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian serta penyusunan skipsi yang berjudul “Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Herba Alfalfa (Medicago sativa L.) terhadap Pertumbuhan Volume Adenocarcinoma Mammae Mencit C3H Beserta Analisis Derajat Histopatologinya.” sebagai syarat gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang. Penulis menyadari bahwa skripsi ini tidak dapat terwujud tanpa bantuan, bimbingan, dukungan dan dorongan semangat oleh semua pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada: 1.
Sri Susilowati, S.Si., M.Si., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang dan pembimbing atas segala bimbingan dan perhatian selama penelitian dan penulisan skripsi ini.
2.
Risha Fillah Fitria, M.Sc., Apt. dan Yance Anas, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji atas segala masukan dan koreksinya.
3.
Seluruh dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang atas ilmu yang diberikan kepada penulis.
4.
Laboran Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang.
5.
Seluruh staff Laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang.
6.
Ibu dan Ayah tercinta serta adik-adikku atas segala do’a dan kasih sayangnya.
7.
Teman-teman seperjuangan baik dalam praktek maupun dalam penyusunan skripsi : Wahid Muhaimin, Gharsina, Fajar Indah terimakasih atas dukungan dan kerjasamanya selama ini.
8.
Teman-temanku Winda Afriani, Nenny Eryana, Nila Meta, Ana Rahmawati, Wahyu Wulandari, Arifah, Muhtarom Munalifata, Nandang Prasetyo Wibowo, Tegar Bagus Prasetya, Erni Retnoningsih dan Ahmad Khoirudin serta Dhiyaul Hasyimi..
9.
Teman-teman angkatan 2012 Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang, semoga sukses untuk kalian semua.
10. Semua pihak yang telah membantu penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Untuk itu, segala kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi kebaikan di masa mendatang. Semoga karya ini dapat bermanfaat untuk semua pihak.
Semarang, Maret 2016
Penulis
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ..........................................................................
ii
SURAT PERNYATAAN.................................................................................
iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................
iv
KATA PENGANTAR .....................................................................................
v
DAFTAR ISI ....................................................................................................
vii
DAFTAR TABEL ............................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xi
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................
xii
INTISARI.........................................................................................................
xiii
ABSTRACT .......................................................................................................
xiv
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ...................................................................
1
B. Rumusan Masalah .............................................................................
4
C. Tujuan Penelitian ..............................................................................
4
D. Manfaat Penelitian ............................................................................
4
E. Tinjauan Pustaka...............................................................................
5
1. Kanker Payudara .........................................................................
5
2. Model Xenograft .........................................................................
12
3. Herba Alfalfa (Medicago sativa L.) ............................................
13
4. Ekstraksi ......................................................................................
16
5. Cairan Penyari .............................................................................
17
F. Landasan Teori .................................................................................
18
G. Hipotesis ...........................................................................................
19
BAB II METODE PENELITIAN ....................................................................
20
A. Desain dan Variabel Penelitian ........................................................
20
B. Bahan dan Alat Penelitian .................................................................
21
1. Bahan Penelitian..........................................................................
21
2. Alat Penelitian .............................................................................
22
C. Pemilihan Hewan uji .........................................................................
22
1. Populasi dan sampel ....................................................................
22
2. Kriteria inklusi dan eksklusi .......................................................
23
D. Tahapan Penelitian ............................................................................
23
1. Pembuatan ekstrak etanol herba alfalfa.......................................
23
a) Pengumpulan bahan ..............................................................
23
b) Determinasi tanaman .............................................................
24
c) Pembuatan serbuk simplisia herba alfalfa .............................
24
d) Pembuatan ekstrak etanol herba alfalfa.................................
24
2. Uji pengaruh ekstrak etanol
herba alfalfa terhadap
pertumbuhan volume tumor mencit C3H adenocarcinoma mammae ......................................................................................
26
a) Persiapan hewan uji...............................................................
26
b) Proses inokulasi tumor ..........................................................
26
c) Penentuan dosis dan pembuatan sediaan uji .........................
27
1) CMC-Na...........................................................................
27
2) Ekstrak etanol herba alfalfa .............................................
27
3) Dosis bubur kanker ..........................................................
28
d) Perlakuan sediaan uji ekstrak etanol herba alfalfa terhadap mencit C3H adenocarcinoma mamma ..................................
28
e) Pengukuran volume adenocarcinoma mammae ...................
29
f) Pemeriksaan histopatologi dengan metode pengecatan Hematoksilin dan Eosin (H&E) ............................................
29
E. Analisis Data .....................................................................................
33
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN..........................................................
34
A. Determinasi Tanaman .......................................................................
34
B. Pembuatan Ekstrak Etanol Herba Alfalfa .........................................
35
C. Pembuatan Model Adenocarcinoma Mammae dengan Inokulasi Tumor pada Mencit C3H ..................................................................
37
D. Pengaruh Ekstrak Etanol Herba Alfalfa terhadap Pertumbuhan Volume Adenocarcinoma Mammae Mencit C3H ...........................
39
E. Pengaruh Ekstrak Etanol Herba Alfalfa terhadap Skor Derajat Histopatologi Adenocarcinoma Mammae Mencit C3H ...................
43
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN .........................................................
48
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
49
Lampiran ..........................................................................................................
56
DAFTAR TABEL Tabel I.
Tabel Skor Derajat Histopatologi Kanker Menurut Eltson dan Ellist ...........................................................................................
Tabel II.
Rata-Rata Selisih Volume Adenocarcinoma Mammae Pre dan Post Kelompok Kontrol dan Perlakuan .......................................
Tabel III.
30
40
Hasil Uji T-Berpasangan Dan Uji Wilcoxon Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Herba Alfalfa (Medicago Sativa L.)
Tabel IV.
pada Pertumbuhan Volume Adenocarcinoma Mammae .............
42
Derajat Histopatologi Adenocarcinoma Mammae Mencit C3H...
44
DAFTAR GAMBAR Gambar 1.
Skema mekanisme perubahan sel normal menjadi sel kanker .
8
Gambar 2.
Tanaman herba alfalfa ..............................................................
14
Gambar 3.
Skema desain penelitian ...........................................................
20
Gambar 4.
Skema proses pembuatan ekstrak etanol ..................................
25
Gambar 5.
Skema tahapan penelitian .........................................................
31
Gambar 6.
Tanaman alfalfa (Medicago sativa L.) untuk determinasi .......
35
Gambar 7.
Ekstrak etanol herba alfalfa ......................................................
37
Gambar 8.
Bubur kanker payudara mencit C3H ........................................
38
Gambar 9.
Gambaran
makroskopis
mencit
C3H
normal
dan
adenocarcinoma mammae pada mencit C3H ..........................
38
Gambar 10.
Adenocarcinoma mammae yang berhasil diisolasi .................
39
Gambar 11.
Rata-rata selisih volume adenocarcinoma mammae (mm3) tiap kelompok perlakuan ekstrak etanol herba alfalfa dan kontrol adenocarcinoma mammae ...........................................
Gambar 12.
Gambaran mikroskopis
sel
41
glandula mammae akibat
perlakuan ekstrak dan kelompok kontrol adenocarcinoma mammae ..................................................................................
44
Gambar 13. Rata-rata derajat histopatologi adenocarcinoma mammae mencit C3H ..............................................................................
45
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.
Surat Keterangan Hasil Determinasi Tanaman ......................
Lampiran 2.
Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian di Universitas Wahid Hasyim ........................................................................
Lampiran 3.
56
59
Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian di Universitas Negeri Semarang ....................................................................
60
Lampiran 4.
Perhitungan Larutan Stok dan Ekstrak ...................................
61
Lampiran 5.
Perhitungan Pemberian Ekstrak Dosis 250 mg/KgBB ...........
64
Lampiran 6.
Perhitungan Volume Adenocarcinoma Mammae ...................
67
Lampiran 7.
Skor Derajat Histopatologi .....................................................
71
Lampiran 8.
Hasil Uji Normalitas Data Volume Tumor Pre dan Post ......
73
Lampiran 9.
Hasil Statistik Volume Tumor Pre dan Post ..........................
76
Lampiran 10.
Hasil Uji Anova Satu Jalan Rata-rata Selisih Volume Adenocarcinoma Mammae Semua Kelompok Perlakuan ......
78
Lampiran 11.
Hasil Uji Kruskal-Wallis Derajat Histopatologi .....................
80
Lampiran 12.
Perhitungan Rendemen ...........................................................
82