lK(;t,t 2t)t)3 l0 (EdisiKhtsu\) 631)-6t3 DuetbtkunJi.Irka d
.JurnalKedoklerrnGigi trnirersitas lndonesia ISSN0854-164X
PENGARUHMEMBRAN AMNION TERHADAPJUMLAH SEL FIBROBLAS PADA PROSES PENYEMBUHANLUKA (Kajian HistologispadaGingivaKelinci) Margareta Rinastiti
Karlasisu.aProgramMagisterMinar Sludi Bionaterial FakultasKcdoktcranCiigitlnivcrsitasGadjahN{ada
lUargarela Rinastiti: PengamhMembran Amnion terhadapJumlah Sel Fibroblaspada Proses Pen)embuhan Luka (Kaiiant{islolosispadaCingi\a Kelinci) JurnalKedokteran Gigi Universilas lndonesra. 2003il0 (EdlsiKhusus):639-6.1i
Abstrdct P r o l i l e r a t i opDh a s ei s l h e s e c o n do f t h e t h r e ep h a s e si n w o u n dh e a l i n gI n t h i s p h a s ef,i b r o b l a sits a p i \ o l a l c o m p o n e n tt h e m i g r a i i o na n d p r o l i f e r a t i o o n f f i b r o b l a s t sa f e i n f l u e n c e d b) FGF IGF P and FGF. Amniolic nlembra.e (AM) '!hich consisl5of seleral gfowth faclors that play an imponant foie rn wound heaLingcan be used as ransplantationmaterLal\.This stud) inlestigaredthe influenceof AM on t h e n u m b e r o l l i b r o b l a scr e l l s i n t h e p r o c e s s o f \ ! o u . d h e a l i n g o n r a b b i t s g i n g i ! a T h i r t . - , j i \ r a b b i t s w e r e di\rdedinto2 groupso . n e i s t h e c o n t . o lg r o u p( ( ) a f d t h e o t h e f i s t h e t r e a l m e ngt r o u p( I ) t s a c ho f l h e g r o u p s $ e r e d i ' i d e d i n l o 6 g r o ' r p s . c o m p o \ c do l I f a b b i r sb a s c do r t h e d a t e o f t e r r n a t i o n .i . e 1 ' . 1 " . 5 " . ? ' l 0 ' a n d 1 . 1 : ' d aa) f t e rw o u n d e d F i v e I n ! e r so f A M w e r ea p p l i c a t e o d n I g r o u pw o u n d i n ga n d C g t r r u pw o u n d n r gs e r e l e t o p e n H i s t o l o g i c ael ! a l u a t i o nN a s d o n er o c a l c u l a t e the ntrmbeo r f fibroblasl c c l l s . D a l a n a l ) s i ss a s d o n e b y u s i n gM A N O V A T h e r e s u l t ss h o w e dt h e r er l a s a s i g n i f i c a ndt i f f e r e n c e (pi0,05) in the number of fibroblasl cells bet$een T and C gfoups anrong the groups of termjnation d a t e sT h c o n c h a ! i n g t h e h i g h e snt u m b e ro f f i b r o b l a s cr e l l s a s i n I l 0 ! : r o u p . lct a n b e c o n c l u d e tdh a t A M e n h a n c c tdh c n u m b e ro f f i b r o b l a 5ct e l l sl n t h e p r o c e s o s f ! i o u n d h e a l i n go n r a b b i ts g i n g i v a l K e \ w o r d s W o u n dh e a l i n gf:i b r o b l a sai m n l o l r cn r c n b r a n c
Pcndahuluan P . r \e n r b r h a r , l r \ J In(rupJldrl reslorasi lerhadap fungsi dan struktur i a r i n g a tr ra n g l e r k c n aJ c j . r \ c . a r a u r n ' r n t prosespe|re|lrbuharluld rerdrridafl la,e r r r f l a r r r a , i l. a ' e p r o l , f e r a . i . l a n t r . r mJrrrrd\i fa\c Prolilcr.r. nrcr'rpaka|l 1.,.( ' t " n p prrhailrr l'.k.r diland.ri .lel' prolilerasisel flbroblassertasel-selendote
TemuIlmiahKPPIKGX11l
rarrg beri,tra, kcdalatn /o/ urrtuL jaringangranulasi.: merrbenruk Fibroblas merupakan salah satu lJkror ]ani berpera|lpenli|lg dalarn l-a\e pr 'liferr.i. I ung.i ' ama darr fibr"bla. adalah memproduksikolagendan protein ertru tellulur ,?d/,"r.r (ECM) )-ang mcnrpdkdnkomf'onenlerrinc p,rdanro\es r\:crlcra'r aldu perbakan iartrgatt.fC\a el dan d p e r l r r ( " r r , r r r ' u l r n e r r r r r r i a n. g rang pcnhrrlulr rlarah h:Lrrr lcrurrhLrlr.rr
berfungsi memba\\'a nutrisi-. untuk mendukungpenlembuhanluka.'-' Pada keadaannormal. fibroblasmefupakansel yangtidak aktif denganlaiu proliferasidan yang lambat.Namun aklifrtasmetabolisme setelahterjadi perlukaanflbroblas akan meljadi.el )ang akuf dan mampuunrul berDrolifera.i der)p.an cepal serlL 0ermrgrasr, llbrobla.unlul Migra
tran\Jorm\ls grot\!h !d, tor-Ba.t tTll-Bt. plcttelet-.1?,i*d qron th t../,ror I PDCFI ddn rur tlCI r diketohui eptd"rnul entth i,-r. sebagai g/olrl,4 Jdctor yang bertanggung ia$ab terhadap rnigrdri dan proliferasi fibroblas." Secara umum. resPon Jan ngan denganIipe )ang 5amalerhddapperlukaan addlah sdmd. Perheddancul'up penlin! antara penyembuhanluka di dacrah oral oan ba8rantubuh lain adalahadanla /eral Iike node d^ri penyembuhan luka oral dengan(iri kha. dapatterjadipen)enrbuhan luka yang lebih cepat dibandingkandengan Lulrt. kemungkinan terjadinla jarittgan parul lebih sedikit sefta Woses-renodelling dan regenerasiyang cepal.o' Walaupun demikiaD harus diingat bahwa tidak ada luka bail pada kulit. mulo.i oral maupun or^r ranpd terjddr pembenlulanjatingan PaJrr parL( pida pro.c. penrembuhatrnra. tidakdalal Inenulup. lu[d )ang lepi-reprn)a u n r u k m c n g u r a n su r kuran lula. teriadi lonrralsr luka berlebrhan )ang dapal menimbulkan jaringan parut.! Sedangkan pada beberapabedah periodonlal..errng dibutuhkan suatu .rcdlbld untuk migrasr .el-.el -elrrngga lerjadr regcnera.i ddn penyembuhaDyang baik.' Kasus-kasus \ualu sub\tan\r)dng terscbulrnembutuhlan lualita. dapat IrerrrbantuInerrirtgkatkatr penyembuhanluka. 640
Membran amnion (MA). suatu lapisanterdalamdari membranfetal, bila darrdrolahiecaratepaldapal diper.iapkan disimpan dan digunakan sebagai suatu '" (ub.lrar urtuk lrdn.planta'i \4y'. yang mernpunyai beberapa sifat .ehingga secara klinis menguntungkan banyak digunakan sebagai promotor penyembuhan ulserasi kronis, bahan vagina,bahan altifcial untuk rekonstruksi untuk rekonstruksikerusakan lransplantasi okularsertasebagaidresJirg biologispada tindakan lukabakardanpera*atanberbagai oleh yang ditimbulkan Efek bedah.rr'3 berikul a) pemakaran VA adalahsebagat rasa Padaluka )anBdangkal:mengurangi dan mendukung sakit,menjagakontaminasi Pada terjadinya reepit€lia'isasi. b) proses yang membantu dalam: kerusakan angiogenesis luka.mendulung debrideme|l dan sebagaim tetial grart menunjukkan perhailarrlukd dalamsallrr )ang lebih cepal
Vembranamnion)ang di'impan ' C .elama I bulan pada ruhu _80 mengekspresikanadanya transforming growth factor-alpha (TGF'C,\, ketutino.lte Fn\lh lacnr lKrrf l. bash libroblull !rc\rth la,htr rbl CI r. TUI- 01. TCf 02 fattu' lUl-pl. LCL krrati\octk 8rc14lh growth (KCFR) dan hepatacyte rdceplor t,dor recprtar rHCl Rl. Berbagai8row,? Jactor ini dapat memicu terjadinya jarirrganselelahtrdnsplantasi epitelialisa.i MA. SelaiDitu didugabahua FCF.KGf dan HCf berperan pentrng dalam penyembuhan luka." penelitian ini merupakan Penelitian \ang bermak.ud mengetahui a*al pengaruh membran amnion t€rhadaP jumlah sel fibroblas Pada Proses perryembuhan Iukapadagingivakelinci.
Bahan dan Cara Kerja Bahanyang digunakanrMembran amnion yang dipersiapkandengan cara Pu.at produl.i lvophili'.t*t. RSUD Jaringan Banl Biomareridl Surabayaukuran Dr.Soetomo/FK-UNAIR, 2x2cm. Larutan l0% buffer formalin TemuIlmiahKPPIKGXIII
Fibroblas pada Ptuses Penyenbuhah Luka(KaJiah Histologis pada Gingi|a Kelinci)
Pengaluh Menbran Annion terhadap J|lnlahSel
ketamin HCI (8OrngAgBB) secara padapaha.Setelahitu dibuat intramuskular perlukaanpadagingivarahangatasantara incisivusdan premolarmenggvn^kanpunch biopsy deng n kedalaman hingga panci ,rbpsl menyentuhtulang alveolar. Pada kelompokP, luka ditutupd€nganmembran '', amnionyang disusunsebanyak5 lapis dijahitkan hingga menutupi seluruh permukaanluka menggunakanbenang/,orrcsorbable d^n jatum atraumatik dengan metodemattres.Luka dibersihkandengan Nacl fisiologis dan luka ditekandengan kapas untuk kontrcl perdarahanpasca operasi. Setelahoperasi,luka dioles dengan larutan antiseptik. Pada hari ke Janngan 1,3,5,7,10,14 dilakukandekapitasi. yangdiambildifikasasidenganlarutan10% buffer formalin, dilakukan proses pewamaanHE. Dilakukan penghitungan jumlah sel fibroblas pada 3 lapangan pandangmenggunakan mikoskop cahaya 400x. Data p€nelitian denganperbesaran diuji d€nganMANOVA.
bahan-bahan pembuatan blok parafin, bahan-bahanpewan}aianhaemotorylin d^n eosin (HE), k€tamin HCl, antiseptik, analgetik, alkohol, benang jahit nonresorbablelkura\ 4.0, NaCl fisiologis. Alat yang dibutuhkan:punch biopsy Q 5mm,jarum atraumatikukuran4.0, gunting dan pinset b€dah, needle holder, piring penelitian: Penelitian ini Cara menggunakan 36 kelinci yang secan acak dibagi menjadi dua k€lompok, yaitu ke,ompok kontrol (K) dan kelompok perlakuan(P). Masing-masingkelompok terdiri dari 18ekorkelinciyangdibagilagi terdiri menjadi6 kelompok,masing-masing dari 3 ekor kelinci, sesuai denganhari yaitu hari ke 1,3,5,7,10 dan 14 dekapitasi, perlukaan. Keiompok K dibual setclah perlukaaDyang dibiarkan terbuka dan kelompok P perlukaandiaplikasi dengan membran amnion. Satu jam sebelum operasi,kelincidiberianalgetiksecaraintra oral kemudian dianestesimenggunakan
Hasil
RERATAruMLAH SELFIBROBLAS 500 400 300 E 200 100 0
11861
,-I112
-./''213 72
||
-:-Kelompok P --{- K€lompokK
Hari GambarL
Tabe
HasrluirMANOvA
Effect Hotelling'sTrace
TemullmiahKPPIKGxlll
Value
F
HyDothesisdf
219.9535 27 . 8 8 8
Erordf
Sis.(D< 0.05)
5.000 12.000
.000
64t
reratajumlah yang te(inggi dibandingkan denganhari lain pada kelompokP. Dari penelitian.secara pengamatanmikroskopistanpak bahwa Dari hasil laringangranulasipada Pl0 lebih padat deskriptif tampak rerata jumlah sel dcrgan Kl0 darr .erabul diband'ntsk.rrr tlbroblaspada kelompok P lebih banyak Hal in kolagenpadaPlO mulaimenebat. dengan kelompokK. Dengan dibandingkar jumlah se dengan bahwa menunjukkan u.ii MANOVA. terdapatperbedaanyang qangal \inlesis banlal. llbroblds)arg bermakna(p<0,05) pada jumlah sel juga lebihbaik sehingga kolagen Jarjngarr fibroblas kelompokK dan kelomPokP mengalami luka mulai yang rusak akibat Pada dianlarakelompokhari dekapitasi. dapa srrrkhrrDariha.ilter'ebrrt perbarlair hari pertanra. baik pada kelornpokK meningkatkarr vlA bahwa dikatakan nllupLrn lielompok I' bolut]r dUtrnrpal Ini-ljra di,rrpr,,ltrra\i fibroblr' \chrrlUi: adanyasel fibroblas.Hal ini disebabkan penyembuhan dapatmeningkat. kualitas luka terjadinya r€sponpalingawalterhadap jumlah sc hari ke-14, Pada adalah intlamasi yang bertungsi P mengalaml pada kelompok ibroblas meDdestruksimikroorganrsme Suna penurur.rr. Didrga disebabkanlaretrr jaringan perbaikan terjadinya nrenyiapkan lIka sudahmencapa prosespenvcrnbLthan akanmonculpadathse iklt. Sel tjbroblas dari lasc rrraturas ,^rval lahap akhir. kcd a. yailu laseproliLratil)-angdimulal , l i t r r r ' d a r J r r ' a d a r r l pr e r r u r t r r irr.rrrrnr l i r l :rrr pada hnri ke-4 ala(r ke-5 Dari hasil sel tibroblasdan adanyaserabutkolagetr jumlahreratasel flbroblas Pl pengamatan. )dng ler\r:uI setaraIebih leratrrr.Darr K3. Hal inr lebih banyakdibandingkan pergamdldrr mrkrosloois.kelompokPla FCFdan didugakar€na adanyakandungan te\lorasiiafirrgat' \uJ.rh Incncalarii rarnpak ICF'-B pada mcrnbranamnion clapal lang hark. Padakelornpol'Kl4. trra.ilt r)rcnracu lerjadinyamigrasifibroblasyaDg scl tihtobltts rerljlJi p(r|ngr,rrlrjurrrr:rir lcbih cepal.Selainilu dari pcnganlatan bahua la:e Il| mcndndakan Perrrngkatrrr rnikroskopistampak bahwa iaringan Srhingga diduP... b(rakhrr. prorrferarr bclurrr nekrotikkelompokPl .iauhlebihsedikit lcloinpok K rna'ih Inerncrh'krn$aklL K L llal iri kelompok dibandingkar dengan lahapnahrrasl. untrkluencapar destruksi Drenunjukkan bahtva Pembahasan
pa.la kc,orrrn,'kP lebrtr rrikroor'.:arrr.rne cepat sehingga Inigrasi sel-sel yallg diperlukarruDtuk penyembuhanluka bisa lcriidi lebihcepatpula. Padahari ke 5 dan 7 reralaju lah r l h , " b l i , \t : , L h k c l , ' r r r p nlk' ( h i l l b r \ . , . ' k. \ ( l r ' r JrharrJingka dn c r g a qk e l o r r r p . K adrnta !r"\,th Jd't r tan} benangcurrg Jr$db lcrhddanrrrgrrsi darr prrlifcr.r\i .
642
Kesimpulan Dan k(.chrruh,flrhi.ir ler.cbtrl ,hp:rl dr\IIt,'rlk rrr btihwa \4A dapjl rn(nnqkalk:rn rrrrrl;rlncrfibr,'l'la'detr'-atr :urn,ah\el Jlbroblas)ang lebih ban\aL lada kelompok P d,bandinelanden!'an dianrara kelompok hari lelompok K yaitu dengan reratajunlah sel dekapilasi, llbroblar redintgi pada P10 SehinSSa lul'a InenJadi ,lidugakral;ri. pen)embuhan lebihbaik. pencliliall PeIeliti,rnrnt Inelupakan .r$al. sehintgaperlu dilalulan penelitian lebrlr lanjur dengan mengamali reakti peradangan. pembenlulan sel epitel. pembutuhdarah baru dan serabullolagen )ar)g dapal menJadi indikalor kualilas p€nyembuhanluka dengan menggunakan
TemullmiahKPPIKGXl11
(KaJtdn Pengatuh Menbrun Annan terhadaPJunLdhS.l l'thtublLttPdLl'tPrasesPehtenbuhah Luka Keltncu Gingjrd Hisktagis Pdda
j r r r n l " hs r r h r e '\ c n a l a t i | | r ! d p r rd r J . r r r\ !J " i lebihban)ak.
Daftar Pustaka L
2. J
4.
5.
6.
-.
8.
Rubin E and Farbcr JL, Essetutul Pathol.)g,. 2"' ed. Philadelphia :Ja Co. 1995. 47-61 Lippnrcot Auknil I. Biolog) of wound heallng Peiadontalog )000 ?000.22:4'l-50 l l d k r i r el nd I I n o\ r . i o l d r j a \ .H . e l l ' r oo ! \ o l g r n p r \ a .$ o u n d h e dnl s Pe,!orlontolag2A0A2000. 24:127'152 l go[.urical$or.nd.r1 H . . o r J $ . H e Jn o r dm . L c o pr<, . l e a l l i n J e 'l L n d o d l o o l l7:401-408 (ordn RS. KJmdr\ dnd Colir' T p . , t hl " e . B o ' ' r ' . . , . . P l ' i l d d e l p h i a W B Sanders Co 1999 97 109 SchorSL. Ellis I. lr$in C-r, Ban)aldl K. DolmanC. gllbertAI) and Seneviralre .l.r.orn Lr\l \Jbpot'udr'onof fcrdl-ll( d.ld grn!i\d fb'oblds ' hdrdcren.drion ror $oJnd hedlnc poLeruJ 'ignrl'Ldnc< dired,e ol penodonlal d1drheprogre*ron Otul Dis 1996.212):155-166 . r e p( n . P D a ! . e K l o . - l e s r o r ' \p' e " . ' RD. Kon C, DanielsJ. Khaw PT and l n J n . 5 D u \ \ r d r d u r d t b r o bd ' r e \ h r br t n e n o r \ p .d L e r e r ( ( ' . \ r r d c e l l u i d matrrx reorganlzatron ano dcti\lti. Bt t Det'na''l meldl'oprorernd'. l00l . 14.1:229-237 petersonLJ. Ellis 111E. Hupp JR and Tuckcr. MR. Cantcnpattln ordl on.l MdtilltldLtul su/Fcn l"' ed St.Lours M o s b \l q 9 7 5 7 N ' 6 8
TemuIlmlahKPPIKGXIII
L r r r . r ' l, .1\ ' r l d n' . L ' o l rsl J J r J I a r r L I I D < \ e r o p n eol rl l h e l _ u u ! i . a \ o r . e o l animal and of guidedlissue regeneration lJole' P,rt.dahtal l-unJI n )uru tqql i2615 M. DagobeioM 10. SolomonAR. Osenblatt ZhonghuaJ. PuugfelderSC and Tseng la and of interleukin SGC, supplession eDrr\elral l, In hLmdn rmbd irrerle.rkin c(,-! c'hLied orr rhe dmnioli.membrarre rlondl nd"l\ B, tOpthJlfto' 20ol 85:,14,1-.119 I L DJd lls dnd Blan.o AA Anrrorrc ranrplanldlror Ter,b.dne 1999 .8'l:748-152 k J Opthalnalag" of E and Koller J. Utilisation 12. Panakova loel,rt ,nenbrare.in lhe rreatmenlol n burnsand otherskin defecB. Adr.ances TisstleBdnkng. Vol l. Singapore:Wotld l998:165-18l Scienlific. Y and J. Ohaqhi s, Shimmasaki 13. shlmrnura Tsubota K. Anliinflamatory eiiecls oi .1 r "r.. men,l_rinerratr'lrdnrdl'onrl orr.ldr.rrld-c ur'oroer ( /a"J )00 20i,108-,113 c'. 1,1.KoizumiNJ. lnatomi,TJ Sotozomo FullwoodNJ. QuantockAJ and Kinoshiia S. GroMh irctor mRNA and Pfotein in p r . , . J ' e dr u r d r . m n i o r im . e m b r r n.(/ ' tr.'R€r 2000 20(3):l7l-l7? l ' \ b J L d l ' ra r k . r l J . r dr p \ " d D i r e l r L ' RSUD , BankJaringan PusarBiomaiefial Dr.Soetomo , FK-UNAIR. Surabay? Aguslus,2002
o
611
