NASKAH PUBLIKASI
UJI BANDING EFEKTIVITAS KETOCONAZOLE 1% DENGAN ZINC PYRITHIONE 1% SECARA IN VITRO TERHADAP PERTUMBUHAN Pityrosp orum ova le
Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi persyaratan dalam memperoleh derajat Sarjana S-1 Fakultas Kedokteran
Disusun o leh : A. ENGGAR SAWITRI P. P. S J 5000 800 40
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA 2011
1
ABSTRAK A. Enggar Sawitri Putri Permata Sari, J500080040, 2011, Uji Banding Efek tivitas Ketoconazole 1 % dengan Zinc pyrithio ne 1% secara in vitro te rhad ap Pertumbuhan Pityrosporum ovale, Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta. Latar be lakang : Pityro sp orum o va le adalah ragi lipofilik yang merupakan flora normal kulit manusia pada orang dewasa. Pityro sporum o va le merupakan faktor etiologi atau berperan primer pada patogenesis ketombe. Ketokonazol merupakan anti jamur golongan imidazol mempunyai spektrum yang luas, bersifat fungistatik, dan bekerja dengan cara menghambat sintesis ergosterol yaitu komponen yang penting untuk integritas membran sel jamur. Zinc pyrithione pada kulit kepala berketombe dapat menormalkan keratinisasi, mengurangi produksi sebum kulit kepala yang merupakan habitat atau tempat bersarang jamur sehingga dapat mengurangi jumlah organisme Pityrosporu m ovale. Tujuan : Membandingkan efektivitas antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro dalam menghambat pertumbuhan Pityro sp orum ovale. Metode : Metode penelitian ini menggunakan desain eksperimental laboratorik dengan pendekatan p osttest on ly control group design. Subjek dalam penelitian ini adalah Pityro sporu m ovale yang diperoleh dari hasil biakan isolat klinik murni. Sampel pada penelitian ini meggunakan 30 cawan petri media SDA yang berisi biakan Pityro sporu m o va le yang dibuat sumuran, terdiri dari 10 cawan petri pertama yang diberi perlakuan dengan menambahkan ketokonazol 1%, 10 cawan petri kedua yang diberi perlakuan dengan menambahkan zinc pyrithione 1% , dan 10 cawan petri ketiga yang diberi perlakuan dengan menambahkan akuades steril sebagai kontrol negatif. Data primer hasil penelitian, yaitu mengukur diameter zona bening atau zona hambat yang terbentuk. Hasil penelitian diuji dengan uji statistik uji t tidak berpasangan dengan program SP SS 17,0. Hasil : 10 cawan petri media SDA yang ditambahkan ketokonazol 1% didapatkan hasil adanya zona bening, 10 cawan petri media SDA yang ditambahkan zinc pyrithione 1% didapatkan hasil adanya zona bening, dan 10 cawan petri media SDA kontrol negatif didapatkan hasil tidak terbentuk zona bening. Melalui uji t tidak berpasangan dapat diambil kesimpulan ada perbedaan yang bermakna antara ketokonazol 1% dan zinc pyrithione 1% (p=0,000). Kesimpulan : Ada perbedaan antara efektivitas ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro terhadap pertumbuhan Pityro sporum ovale. Ketokonazol 1% lebih efektif dibanding dengan zinc pyrithione 1% terhadap pertumbuhan Pityro sp orum o va le. Kata k unci : Pityro sporum o va le, ketombe, ketokonazol 1%, zinc pyrithione 1%
2
ABSTRACT A. Enggar Savitri Pu tri Permata Sari, J500080040 , 2011 , Compa ra tive Effectiveness Test Ketocona zole 1% with Zinc p yrithione 1% growth in vitro against Pityrosp orum ova le, Faculty of Medicin e, University o f Muha mmadiyah Su raka rta . Backg round : Pityro sporu m ovale is a lipoph ilic yea st that is a no rmal flora of hu man sk in in adults. Pityrospo ru m ovale is an etiologic factor or a primary role in th e pa thogenesis o f dandruff. Ketoconazole is an an tifunga l imida zole group ha s a broad spectrum, is fung istatik, and works by inhibiting the synthesis of ergo stero l is an essential co mpon en t for th e integ rity of funga l cell membran es. Zinc p yrith ion e dand ruff on the scalp, which help s no rmalize k eratinization , redu cing scalp sebum p rodu ction which is th e habitat or n esting sites so as to redu ce th e a mount of fungu s organism Pityrosporum o va le. Objective : Compa ring efficacy of ketoconazole 1 % with zinc pyrithion e 1% in vitro in inhibiting the growth of Pityrospo ru m ovale. Methods : This resea rch method using a laboratory exp erimen tal d esign approa ch to po sttest o nly con trol group design. Subjects in this study were Pityrospo ru m ovale cu ltu re resu lts obtain ed from pure clin ica l iso la tes. Th e sa mple in this study receipts 30 Petri dishes con taining culture medium S DA Pityrospo ru m ovale mad e sinks, con sistin g of 10 petri d ish es were first treated b y adding 1% ketoconazole, 10 second p etri d ish trea ted by adding zinc pyrithion e 1%, and 10 th ree p etri d ishes trea ted b y adding sterile d istilled water a s nega tive contro l. The result is a primary data wh ich mea su re th e d ia meter o f clear zones or inh ibitio n zones formed. The resu lts were tested with a statistical test o f unpa ired t test with SPSS 17.0. Results : 10 SDA med ia petri d ish that is added k etoconazole 1% ob tained results clea r the zon e, 10 p etri dishes SDA med ium were added zinc p yrithion e 1% ob ta ined results clear th e zo ne, and 10 p etri dishes S DA media n egative con tro l ob ta ined resu lts do not form clear zones. Through th e unpa ired t test can b e concluded there were sign ificant differen ces between k eto cona zo le 1% and zin c pyrithion e 1% (p = 0.000). Conclusion : Th ere is a d ifference between th e effectiveness of keto cona zo le 1% with zin c p yrithion e 1% g ro wth in vitro aga in st Pityro sporum ovale. Keto cona zo le 1% is more effective than zin c pyrith ione 1 % to the growth of Pityrospo ru m ovale Keywords : Pityrospo ru m ovale, dandruff, keto cona zo le 1% , zin c p yrith ione 1%
3
I. PENDAHULUAN A. Latar Be lakang Pityrospo rum o va le adalah ragi lipofilik yang merupakan flora normal kulit manusia pada orang dewasa (Cafarchia et al., 2011). Pityrosporum o va le merupakan anggota dari genus Malassezia sp . dan termasuk familia Cryptococcacea e (Brooks et al., 2007). Pada kondisi normal, kecepatan pertumbuhan jamur Pityrosporum o va le kurang dari 47 %. Jika ada faktor pemicu yang dapat mengganggu kesetimbangan flora normal pada kulit kepala, maka akan terjadi peningkatan kecepatan pertumbuhan jamur Pityro sporum o va le yang dapat mencapai 74 %. Banyaknya populasi Pityro sporum o va le inilah yang memicu terjadinya ketombe (Burns et al., 2010). Faktor predisposisi lainnya seperti suhu tinggi, kelembaban tinggi atau faktor endogen seperti kulit berminyak, keringat yang berlebihan, hiperproloferasi epidermis, keturunan, stres, pengobatan imunosupresif, dan penyakit sistemik (Cafarchia et al., 2011). Banyak peneliti yang menyimpulkan bahwa meningkatnya kolonisasi Pityro sporum ovale merupakan faktor etiologi atau berperan primer pada patogenesis ketombe (Hay, 2011) Ketombe atau dand ruff merupakan suatu kelainan yang ditandai oleh adanya skuama yang berlebihan pada kulit kepala (sca lp ) yang 2 menunjukkan proses deskuamasi fisiologi yang lebih aktif tanpa disertai tanda-tanda inflamasi. Nama lain ketombe adalah Pityriasis cap itis (Pityriasis sicca) (Brown et al., 2007). Ketombe adalah kelainan kulit kepala umum yang mempengaruhi hampir separuh penduduk dunia usia pubertas dan pada setiap g en der maupun etnis. Tidak ada penduduk di setiap wilayah geografis yang bebas tanpa dipengaruhi oleh ketombe pada tahap tertentu dalam kehidupan mereka (Ranganathan et a l., 2010). Ketombe banyak diderita penduduk di daerah beriklim tropis, temperatur tinggi dan udara yang lembab. P revalensi dermatitis seboroik diperkirakan 3-5%. Jika ketombe yang merupakan dermatitis seboroik ringan ditambahkan, angka kejadian mencapai 15-20 % (Indranarum, 2001). Pada Ras Kaukasia terdapat sekitar 50% yang menderita ketombe dari kedua jenis kelamin, sedangkan pada ras lain angka insidensinya belum diketahui. P ada masa anak-anak, ketombe relatif jarang dan ringan. Kelainan ini biasanya mulai timbul pada masa pubertas, mencapai insiden tertinggi usia sekitar 20 tahun kemudian berkurang frekuensinya setelah usia 50 tahun (Burns et al., 2010). Ketombe pada umumnya dianggap sebagai permulaan atau bentuk paling ringan (tanpa peradangan) dari dermatitis seboroik (DS) dikulit kepala. Gangguan ketombe berarti kelainan pada proses pengelupasan sel stratum korneum kulit kepala yang lebih cepat dari pada biasa, membentuk skuama halus, bersisik abu-abu keperakan dan kering, terakumulasi pertama pada daerah parietal dan temporal atas kulit kepala (P ray, 2001). Pada ketombe menggaruk kulit kepala secara berlebihan harus dihindari karena dapat menyebabkan kerusakan kulit yang selanjutnya dapat
4
meningkatkan risiko infeksi bakteri (H arris on et a l., 2009). Bebe rapa orang yang me milik i faktor res iko lebih re nta n terha da p ketombe me nyebabka n ketombe cenderung menja di ga ngguan kronis a ta u be rulang. Mes kipun 3 ketombe tida k dapat disembuhka n, biasa nya cukup m udah dikontrol denga n meraw at kulit kepala ya ng te pa t dan menja ga ke bers iha n rambut. Walaupun mungkin terjadi da lam w aktu s ingkat, ketombe ce nderung ka mbuh sepanjang hidup sese ora ng ata u se um ur hidup. Ketombe tidak ha nya me nimbulkan gata l di kulit kepala teta pi juga bisa mengganggu penampila n dan menurunka n keperca yaan diri seseora ng. O le h karena itu, pengobata n yang segera me nja di sa ngat pe nting untuk a lasan s osial (Stoppler, 2008). Seme njak Pityrosporu m o vale dia ngga p pe nyebab terpenting da lam keja dian ketombe , pem beria n sampo ya ng menga ndung agen a ntimikroba dan a ge n kera tinolitik me njadi ya ng paling pokok diguna kan untuk me ngatasi ketombe seperti ketokonazol 1% dan zinc pyrithione 1%. T ujua n pengoba tan topika l a da lah untuk me ngurangi ra sa ga tal, mengura ngi jumla h mikroorganis me , membersihka n rambut ke pa la dari s is ik-s is ik, da n sisa-s is a sebum yang merupakan manifestasi klinis dari ketombe (Indranarum , 2001). Ketokonazol merupakan anti jamur golongan im idazol mempunya i spe ktrum ya ng luas, bers ifat fungis tatik, dan be kerja de nga n cara me nghambat s intes is ergosterol ya itu komponen yang pe nting untuk inte grita s me mbra n se l ja mur. Ketokona zol 1% me mpunyai efek a nti ketombe denga n harga le bih murah dan memiliki efektivitas ya ng ham pir sama de ngan ketokona zol 2% (Indra na rum, 2001). E fe k zinc pyrithione pada kulit ke pala berketombe a da la h menorma lka n kera tinisas i da n me ngura ngi produks i se bum. Pema ka ian sampo zinc pyrithione a ka n me nurunka n ka dar lipid permukaa n kulit ke pa la ya ng merupakan habita t atau tempat bersarang jam ur se hingga da pat me ngurangi jumlah orga nisme Pityro sporum o va le. Zinc pyrithione dikemas sebagai sa mpo anti ketombe denga n ha rga yang relatif lebih mura h diba ndingka n de ngan ketokona zol (Kaur, 2010). Dengan memperhatikan latar belaka ng di atas , pene liti ingin membandingkan sampo ya ng menga ndung ketokonazol 1% de ngan zinc pyrithione 1% yang pa da umumnya digunakan untuk me ngobati ketombe , denga n skripsi ya ng berjudul : “U ji e fe ktivitas a ntara ketokona zol 1% denga n zinc pyrithione 1% secara in vitro dalam menghambat pe rtumbuha n Pityro sporum o vale ”.
B . Rumusan Masalah
Berdasarkan latar bela ka ng di ata s, ya ng menja di rumusa n masa la4h penelitia n ini a pa ka h efe ktivitas ketokona zol 1% sebanding de ngan zinc pyrithione 1% se cara in vitro da lam me nghambat pe rtumbuha n Pityro sporum o vale.
C. Tuju an Penelitian Mengetahui adanya perbandinga n efe ktivita s a nta ra ketokona zol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro terhadap pertum buha n Pityrosporum o va le.
5
D.
Manfaat Penelitian 1. Manfaat teoritis − Memberikan informas i yang bermanfaa t bagi ilm u pe ngetahuan − 2.
dalam bida ng kedokteran terapan. Sebagai dasar untuk menge mba ngkan pengoba ta n ketombe le bih la njut.
pe ne litian
te nta ng
Manfaat prak tis Dari has il penelitia n ini, diharapkan da pat mem berikan informasi ke pa da te na ga medis menge na i efektivitas zinc pyrithione 1% ya ng mempunya i kemampua n mengimbangi ketokona zol 1% da lam dalam mengham ba t pertumbuhan Pityrospo ru m ovale.
II. METODE PENELITIAN A.
Jenis Pene litian Jenis penelitia n ya ng digunakan a da la h pe ne litian e ks pe rime nta l laboratorik de ngan me ngguna ka n metode rancanga n e ks pe rime nta l sederhana (posttest o nly con trol group design ) karena pe nulis memberika n perlakua n terha dap s ubjek dan tidak memberika n perla kuan se ba ga i kontrol kemudia n me ngevaluas i has il a khir (Taufiqurrahman, 2008).
B.
Ruang Lingk up Penelitian 1. Ruang lingk up ilmu Pene litian ini ada la h penelitia n di bidang Ilmu M ikrobiologi da n Ilmu Kese ha tan K ulit dan K elam in.
2.
Ruang lingk up tempat Pene litian dila ksanakan di Laboratorium M ikrobiolog i Fa kulta s Kedoktera n Univers ita s M uhamma diyah Surakarta.
3.
Ruang lingk up waktu Pene litian dila ksana ka n pa da bula n J uni 2011.
C.
Subjek Penelitian Subje k da lam penelitia n ini adala h Pityrospo ru m ovale yang diperoleh dari hasil biakan is olat klinik m urni di Laboratorium M ikrobiologi Fakultas Kedokte ran U niversitas D ipone goro Semarang.
D.
Estimasi Besar Sampe l Besar sam pe l pada pe ne litian ini me ggunakan 30 c awan petri me dia Saboura ud Dekstrosa A gar yang beris i biakan Pityro sporum o va le yang dibuat s um uran, terdiri dari 10 caw an petri pertama ya ng diberi perlakua n denga n me na mbahka n ketokonazol 1% , 10 caw an petri ke dua yang diberi perlakua n de ngan menam ba hkan zinc pyrithione 1% , da n 10 caw an petri
6
ketiga yang diberi perlakua n denga n menamba hkan akua des steril se ba ga i kontrol ne gatif. Me nurut M urti (2010), besa r sa mpel yang diguna ka n denga n mempe rtimbangkan tujuan dan desa in penelitia n, as pe k statistik, etika, bia ya , dan w aktu.
E.
Bahan dan Alat 1. Bahan 1. 1
1. 2
2.
F.
Bahan uta ma − Sampo ketokonazol 1% − Sampo zinc pyrithione 1% Bahan uji daya a ntifungi − Media Sa boura ud D ekstrosa A gar − Standar M c Fa rla nd 5 − NaCl 0,9% − Biakan jamur Pityro sporum o va le − Akua des s teril
Alat − Oh se kolong − Lidi kapas − M ikropipet − Ge las ukur − Penga duk − Cawan petri − Ala t pembua t s umuran − Au tocla ve − Inkubator − Lampu s piritus − Masker − Sarung tanga n − Penggaris
Cara Ke rja 1. Sterilisasi alat Alat-alat ya ng a ka n digunakan pada proses uji da ya a ntifungi dic uc i bersih kemudia n dikeringka n da n disterilkan dalam a uto clave pa da suhu 121o C se lama 30 menit.
2.
Pe rsiap an suspensi jamur Dimbil 1 o hse Pityrospo ru m ovale dari bia ka n is olat klinik murni la lu dita nam pada me dia Saboura ud Dekstrosa Agar. Diinkubas i pada s uhu 37o C sela ma 24 ja m hingga didapatka n koloni jamur P ityro sp orum ovale. Diambil 1 o hse Pityro sporum o va le dari koloni jam ur ke mudian dimasukka n ke dalam NaCl 0,9% dikoc ok hingga homoge n untuk
7
disamakan kekeruhan denga n sta ndar Mc Farla nd 5 (Harmita da n Maks um, 2008).
3.
Pe laksanaan u ji daya antifung i Pada 30 cawa n pe tri media Sa bouraud De ks trosa A gar dibuat sumura n berdia mete r 4 mm se ba nyak dua s umura n. Kapas lidi steril dice lupkan ke da lam laruta n suspe ns i jamur Pityrospo rum ovale lalu dite ka n-tekan pada dinding tabung rea ks i 27 hingga ka pa snya tidak terla lu basa h, kemudian dioles ka n pada setia p permukaa n me dia Saboura ud D ekstrosa Agar seca ra merata. Me dia ya ng s udah dibua t sumura n da n dioles larutan s us pe ns i jamur Pityrospo rum ovale kem udia n dibuat 10 cawan petri pertama yang diisi de ngan 50µ ketokona zol 1% , 10 cawan pe tri kedua ya ng diis i de ngan 50 µ zinc pyrithione 1%, dan 10 caw an petri ketiga ya ng diis i de ngan 50µ akuades ste ril seba ga i kontrol negatif. Selanjutnya diinkubas i pada s uhu 37o C se lama 24 ja m.
4.
Pe meriksaan sampel pe nelitian
Sete lah sampe l diinkubas i selama 24 jam pada suhu 37o C , me dia dikeluarka n dari inkubator dan kem udia n diukur dia meter zona be ning ya ng terbentuk, pe ngukuran menggunakan penggaris satua n centimete r (cm).
8
G.
Rancangan Penelitian Dimbil 1 o hse Pityrosporum o va le dari bia ka n isolat klinik murni lalu dita nam pada me dia Saboura ud Dekstrosa A ga r
Diinkubas i pada s uhu 37o C se la ma 24 jam hingga dida pa tka n koloni ja mur Pityrospo ru m ovale
Dia mbil 1 oh se Pityrospo rum o va le dari koloni jam ur kem udia n dimas ukka n ke da lam NaC l 0,9%
Disa ma ka n kekeruhan de ngan s tandar Mc Farland 5
Pada 30 caw an petri media Sa bouraud De kstrosa A gar dibuat sumura n berdiam eter 4 mm seba nyak dua sumura n
Larutan suspens i jam ur Pityrosporu m ovale diambil denga n me ngguna ka n ka pas lidi steril kem udia n dioles ka n pada setiap permukaan media Sa boura ud Dekstrosa A gar secara merata
Media yang s udah dibuat s umuran da n dioles la rutan s us pe ns i jamur
Pityro sporum o va le kemudia n dibuat 10 caw an petri pe rta ma ya ng diis i denga n 50µ ketokona zol 1% , 10 cawa n petri kedua yang diis i denga n 50µ zinc pyrithione 1% , dan 10 cawa n petri ketiga yang diis i denga n 50 µ a kuades steril seba ga i kontrol ne gatif.
Diinkubas i dalam suhu 37o C sela ma 24 jam
Diukur diame ter zona bening yang terbe ntuk
9
H.
Cara Peng umpulan Data Data yang dikumpulkan a da lah data primer hasil penelitia n, ya itu diame ter zona be ning atau zona hambat ya ng terbentuk, diukur denga n me nggunakan penggaris satuan centimeter (cm). Z ona hambat dis ini tampa k sebagai area jernih atau bers ih ya ng menge liling i s umuran.
I.
Variabe l Penelitian 1. Variabel bebas Dala m pe ne litian ini yang termasuk variabel be bas a da la h jenis obat, ya itu: − Ketokonazol 1% − Zinc pyrithione 1% Skala : N om inal
2.
Variabel terik at Dala m pe ne litian ini ya ng te rmas uk va ria be l terika t a da lah zona be ning pertumbuhan Pityro sporum ovale secara in vitro . Skala : Ras io
3.
Variabel luar 3. 1
3. 2
J.
Variabel luar terkenda li − Suhu inkuba si − Lama inkubasi − Cara is ola si jamur − Media pembia kan − Umur bia ka n Pityro sporum o vale − Jumlah koloni Pityrospo ru m ova le − Sterilitas alat dan ba ha n − Kete litian pe ngukuran da n pe ngamata n − Kontaminas i kuman a tau mikroba lain dari uda ra Variabel luar tida k terke ndali − Kecepata n pertumbuhan Pityrospo ru m ovale
30
Analisis Data Data ya ng dikumpulkan, die dit, dikoding, ditabulas i, dan e ntering. Data ya ng diperole h diuji s tatistik denga n menggunakan uji t tida k berpasanga n de ngan program SPSS 17,0. Sya rat uji t tida k berpasa ngan, yaitu : 1. M emeriksa syarat uji t tida k berpasa ngan. 2. D ata harus berdistribusi normal (w ajib). 3. V arians data boleh sa ma , boleh juga tidak sa ma. 4. J ika memenuhi s yara t (dis tribusi data normal), ma ka dipilih uji t tidak berpasanga n. 5. J ika tidak meme nuhi syara t (data tidak berdistribus i norma l), dila kukan terle bih dahulu transformasi data.
10
6. 7.
K.
J ika variabel baru has il transformas i berdistribus i norma l, maka dipa ka i uji t tida k berpasanga n. J ika va riabe l ba ru hasil transformas i tidak be rdistribus i norma l, maka dipilih uji Ma nn-W hitne y (Dahlan, 2009).
Definisi Ope rasio nal 1. Zo na bening pertumbuhan Pityrosp urum ova le pada ketombe
31 Ada lah daya a ntifungi dari ketokona zol 1% dan zinc pyrithione 1% terhadap P ityro sp urum o va le yang dilihat dari zona be ning pada masing-mas ing media Sabouraud Dekstrosa Agar ya ng diukur dari zona be ning te rluar de ngan menggunakan pe ngga ris sa tuan ce ntimete r (cm).
2.
Ke toko nazo l 1 % Sampo yang terda pat kandungan bahan aktif ketokona zol 1% ya ng mem punyai efektivita s da lam me nghambat pertum buha n jamur Pityrospo rum o va le.
3.
Zinc pyrithione 1% Sampo ya ng terdapat ka ndunga n bahan aktif zinc pyrithione 1% ya ng mem punyai efektivita s da lam me nghambat pertum buha n jamur Pityrospo rum o va le.
L.
Pelaksanaan Penelitian Tabe l 1. Jadwal penelitia n
Kegiatan P enyusuna n P roposa l P ermohona n izin pe ne litian Ujian P roposa l R evis i P roposa l P engumpulan Data P engola han Data P enyusuna n Skrips i Ujian Skrips i
Bulan Maret April Mei J uni J uli 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
11
III. HASIL DAN PEMBAHASAN A.
Hasil Penelitian P enelitian mengenai uji efektivitas antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro dalam menghambat pertumbuhan Pityrospo rum ovale dilaksanakan pada bulan Juni-Juli 2011. P enelitian ini menggunakan metode penelitian eksperimental laboratorik, dengan subjek penelitian adalah Pityrospo ru m ovale yang diperoleh dari hasil biakan isolat klinik murni. Besar sampel pada penelitian ini meggunakan 30 cawan petri media Sabouraud Dekstrosa Agar yang berisi biakan Pityrosporum ovale yang dibuat sumuran, terdiri dari 10 cawan petri pertama yang diberi perlakuan dengan menambahkan ketokonazol 1% , 10 cawan petri kedua yang diberi perlakuan dengan menambahkan zinc pyrithione 1%, dan 10 cawan petri ketiga yang diberi perlakuan dengan menambahkan akuades steril sebagai kontrol negatif. Dari 30 media tersebut diperoleh data sebagai berikut : Tabel 2. D iameter zona bening dengan menambahkan ketokonazol 1% Jenis o bat Diameter zo na bening Ketokonazol 1% Kiri Kanan Rata-rata A 4,5 4,5 4,50 B 5,0 6,2 5,60 C 5,2 6,1 5,65 D 4,5 5,5 5,00 E 4,5 5,7 5,10 F 4,7 5,0 4,85 G 5,0 5,1 5,05 33 H 5,3 5,2 5,25 I 5,4 5,0 5,20 J 4,8 5,3 5,05
Grafik 1. Daya hambat ketokonazol 1% terhadap Pityrospo ru m ovale Ketoconazol 32 1% 6 5 4
Rata-rata d iameter zona bening
3 2 1 0 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
12
Dari data Tabel 2 dan Grafik 1 diatas maka dapat diketahui bahwa terdapat daya hambat pada biakan P ityro sp orum o va le dalam sumuran Sabouraud Dekstrosa Agar yang diberi perlakuan dengan menambahkan ketokonazol 1%. Nilai rata-rata daya hambat tersebut 5,125 cm ; nilai daya hambat terbesar 5,65 cm ; dan nilai daya hambat terkecil 4,5 cm. Tabel 3. D iameter zona bening Jenis o bat Zinc P yrithione 1% A B C D E F G H I J
dengan menambahkan zinc pyrithione 1% Diame ter zona bening Kiri Kanan Rata-rata 4,0 3,8 3,90 3,4 3,2 3,30 3,3 3,0 3,15 3,0 3,3 3,15 4,5 4,2 4,35 4,2 4,2 4,20 34 4,0 4,3 4,15 4,3 5,0 4,65 4,0 4,5 4,25 4,5 4,5 4,50
Grafik 2. Daya hambat zinc pyrithione 1% terhadap Pityrospo ru m ovale Zinc pyrithione 1% 5 4 3
Rata-rata d iameter zona bening
2 1 0 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Dari data Tabel 3 dan Grafik 2 diatas maka dapat diketahui bahwa terdapat daya hambat pada biakan P ityro sp orum o va le dalam sumuran Sabouraud Dekstrosa Agar yang diberi perlakuan dengan menambahkan zinc pyrithione 1%. Nilai rata-rata daya hambat tersebut 3,96 cm ; nilai daya hambat terbesar 4,65 cm ; dan nilai daya hambat terkecil 3,15 cm. P ada kontrol negatif yang terdiri dari 10 media Sabouraud Dekstrosa Agar yang diberi perlakuan dengan menambahkan akuades steril didapatkan hasil tidak terbentuk zona bening.
13
B.
Analisis Data Penelitian mengenai Uji efektivitas antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro dalam menghambat pertumbuhan Pityro sporum ovale dilakukan sebanyak 10 kali replikasi pada tiap perlakuan. Data yang diperoleh diuji statistik menggunakan uji t tidak berpasangan. 1. Uji normalitas data Tabel 4. Tes normalitas untuk mengetahui distribusi data normal dengan menggunakan S hapiro-Wilk Jenis Obat Shapiro-Wilk Statistik
df
Sig.
Ketokonazol 1%
.946
10
.622
Zinc Pyrithione 1%
.870
10
.101
Dari data Tabel 4 diatas maka dapat diketahui uji normalitas data menggunakan uji Shapiro-Wilk karena sampel yang diambil kurang dari 50 sampel. Pada uji S hapiro-Wilk, ketokonazol 1% mempunyai nilai p = 0,622 sedangkan zinc pyrithione 1% mempunyai nilai p = 0,101. Karena keduanya mempunyai nilai p > 0,05 menunjukkan bahwa distribusi nilai ketokonazol 1% dan zinc pyrithione 1% berdistribusi normal (Dahlan, 2009). 2. Uji t tid ak berpasang an Tabel 5. La vene’s Test untuk mengetahui homogenitas dari varian ketokonazol 1% dan zinc pyrithione 1% Levene's Test for Equality of Variances
Zona bening
Equal variances assumed
F
Sig.
4.257
.054
Equal variances not assumed Dari data Tabel 5 diatas menunjukkan nilai signifikasi adalah 0,054. Karena diperoleh nilai p > 0,05 maka dapat disimpulkan bahwa varian ketokonazol 1% dan zinc pyrithione 1% adalah sama. Karena didapatkan varian sama, maka untuk melihat hasil uji t menggunakan equal varian ces a ssumed (Dahlan, 2009).
14
Tabel 6. Ind ep endent sa mp el test t-test for Equality of Means
t
df
Sig. (2tailed )
95% Confidence Mean Std. Error Interval o f the Differen ce Difference Difference
Lower Zona Equal variances 5.622 bening assumed
18
.000
1.16500
0.20724
Upper
0.72961 1.60039
Dari data Tabel 6 diatas didapatkan hasil signifikasi (2-tailed ) adalah 0,000, dengan perbedaan rerata (mean d ifference) sebesar 1,16500. Karena nilai p < 0,05, maka diambil kesimpulan “ada perbedaan antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro terhadap pertumbuhan Pityro sporum o vale” (Dahlan, 2009). C.
Pembahasan Penelitian ini menguji efektivitas antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro dalam menghambat pertumbuhan Pityro sporum o va le dengan melihat terbentuk atau tidak terbentuknya zona hambat pada media Sabouraud Dekstrosa Agar. Pada penelitian ini setiap media Sabouraud Dekstrosa Agar dibuat dua sumuran sehingga akan didapatkan rata-rata untuk masing-masing zona hambat. P engujian dalam dua kali ulangan (dua sumuran) dimaksudkan agar menghasilkan kesimpulan reliabel, konsisten, bukan hanya karena faktor peluang (Murti, 2010). Hasil penelitian ini, pada 30 cawan petri media Sabouraud Dekstrosa Agar yang terdiri dari : (1) 10 cawan petri media Sabouraud Dekstrosa Agar yang berisi biakan Pityrospo ru m o va le yang diberi perlakuan dengan menambahkan ketokonazol 1% didapatkan hasil adanya zona bening pada 10 media. Efektivitas ketokonazol 1% pada penelitian ini mempunyai nilai rata-rata daya hambat 5,125 cm, nilai daya hambat terbesar 5,65 cm, dan nilai daya hambat terkecil 4,5 cm ; (2) 10 cawan petri media Sabouraud Dekstrosa Agar yang berisi biakan Pityrospo ru m o va le yang diberi perlakuan dengan menambahkan zinc pyrithione 1% didapatkan hasil adanya zona bening pada 10 media. Efektivitas zinc pyrithione 1% pada penelitian ini mempunyai nilai rata-rata daya hambat 3,96 cm, nilai daya hambat terbesar 4,65 cm, dan nilai daya hambat terkecil 3,15 cm ; (3) 10 cawan petri media Sabouraud Dekstrosa Agar yang berisi biakan Pityro sporum o va le yang diberi perlakuan dengan menambahkan akuades steril sebagai kontrol negatif didapatkan hasil tidak terbentuk zona bening. Hal tersebut menunjukkan bahwa Pityrospo ru m ovale dapat hidup pada media Sabouraud Dekstrosa Agar yang dibuat pada penelitian ini dan efektivitas antijamur yang digunakan pada penelitian ini merupakan kekuatan dari efektivitas dari antijamur tersebut.
15
Hasil dari nilai rata-rata daya hambat ketokonazol 1% 5,125 cm dan zinc pyrithione 1% 3,96 cm didapatkan perbedaan rata-rata 1,165 cm. Hal ini juga dibuktikan melalui uji t tidak berpasangan. Pada Tabel 6, dengan perbedaan rerata (mea n differen ce) sebesar 1,16500 dan didapatkan hasil signifikasi (2-ta iled) adalah 0,000. Karena nilai p < 0,05 (signifikasi 2-tailed 0,000) maka dapat diambil kesimpulan “ada perbedaan antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro terhadap pertumbuhan 38 Pityro sporum o va le” (Dahlan, 2009). Pada hasil yang didapatkan, diketahui bahwa ketokonazol 1% mempunyai daya hambat yang lebih besar dibanding dengan zinc pyrithione 1%. Metode pengujian antijamur yang digunakan pada penelitian ini adalah metode difusi. Metode ini dapat dilakukan dengan menggunakan cakram disk atau sumuran yang kedalamnya dimasukkan antimikroba atau antijamur dan ditempatkan pada media padat yang telah diinokulasikan dengan bakteri atau jamur indikator. P ada media tersebut setelah diinkubasi akan terlihat daerah zona bening atau zona hambat di sekitar sumuran atau cakram disk. Diameter zona hambatan tersebut merupakan ukuran kekuatan hambatan dari substansi antimikroba atau antijamur. Lebarnya zona hambat yang terbentuk ditentukan oleh konsentrasi senyawa efektif yang digunakan. Metode ini merupakan dasar pengujian kuantitatif karena mengukur zona hambat yang didapatkan dan senyawa tersebut bisa bebas berdifusi ke seluruh media. Zona hambat (k illing zon e) tampak sebagai daerah yang tidak memperlihatkan pertumbuhan kuman disekitar cakram d isk atau sumuran. Z ona hambat dipengaruhi oleh ada atau tidaknya penyerapan obat kedalam agar dan kepekaan kuman terhadap obat tersebut (Harmita dkk., 2008). Ukuran atau diameter zona hambat dapat dipengaruhi oleh banyak faktor, antara lain : kepadatan atau viskositas dari media biakan, kecepatan difusi suatu obat, konsentrasi suatu obat pada sumuran, sensitivitas organisme terhadap suatu obat, dan interaksi obat dengan media (Harmita dkk., 2008). P ada penelitian ini disekitar zona bening dari biakan Pityro sporum o va le dalam sumuran Sabouraud Dekstrosa Agar yang diberi perlakuan dengan menambahkan ketokonazol 1% masih terdapat koloni Pityro sporum o va le (titik putih) yang bisa dikarenakan terdapat salah satu faktor diatas dan tidak meratanya difusi ketokonazol 1% pada media Sabouraud Dekstrosa A gar karena pembuatan media yang kurang homogen. Struktur kimia yang berbeda juga akan mempengaruhi kelarutan serta stabilitas senyawa-senyawa tersebut terhadap pemanasan, logam berat, udara, cahaya, dan derajat keasaman (Katzung, 2004). Pada zinc pyrithione 1% zona bening yang terbentuk bersih dikarenakan obat berdifusi secara merata pada media Sabouraud Dekstrosa Agar. Ketokonazol merupakan anti jamur topikal bekerja dengan cara menghambat pembentukan 1 4-α-sterol demeth ylase, suatu enzim Cytochrome P450 (CYP) sebagai katalis oksidator yang sangat diperlukan untuk sintesis ergosterol. Sehingga mengganggu biosintesis ergosterol membran sitoplasma jamur yang merupakan sterol utama untuk
16
mempertahankan integritas membran sel jamur dengan cara mengatur fluiditas dan keseimbangan dinding membran sel jamur. Penurunan jumlah ergosterol akan mempengaruhi permeabilitas membran menjadi tidak sesuai untuk hidup dan pertumbuhan sel jamur. Hal ini akan mengakibatkan peningkatan permeabilitas dinding sel jamur sehingga berakibat pada hilangnya material intraseluler esensial pada jamur dan hambatan pertumbuhan. M ekanisme ini yang mengakibatkan efek pertumbuhan jamur terhambat. Dari mekanisme ini ketokonazol dianggap sebagai agen antimikroba (Phillips et al., 2002). Aksi kerja zinc pyrithione sebagai anti jamur yang bersifat fungistatik tidak diketahui secara pasti. Zinc pyrithione merupakan penghambat transpor membran jamur. Dari berbagai macam dugaan mekanisme kerja belum ditemukan aksi kerja utama zinc pyrithione. Z inc pyrithione digunakan sebagai bahan aktif sampo anti ketombe, efek zinc pyrithione pada kulit kepala berketombe adalah menormalkan keratinisasi, mengurangi produksi sebum karena dengan pemakaian sampo akan menurunkan kadar lipid permukaan kulit kepala yang merupakan habitat atau tempat bersarang jamur sehingga dapat mengurangi jumlah organisme Pityrospo ru m ovale dan zinc pyrithione dianggap sebagai agen keratinolitik (Schwartz et al., 2011). Dalam penelitian Pierard et a l., 2003 (in vivo) dilakukan secara acak untuk membandingkan efektivitas sampo ketokonazol 2% dengan sampo zinc pyrithione 1%, diperoleh data statistik secara signifikan menunjukkan bahwa ketokonazol lebih efektif dengan subyek menunjukkan 73% perbaikan dan sampo zinc pyrithione 1% dengan subyek menunjukkan 67% perbaikan. Pemberian sediaan ketokonazol secara topikal dapat ditoleransi dengan baik sedangkan efek samping yang tidak diinginkan jarang terjadi. Keberadaan ketokonazol di keratin stratum komeum kulit hanya dapat tereliminasi oleh pergantian korneosit stratum komeum. Hal ini diduga sebagai penyebab ketokonazol dalam hal rendahnya angka kekambuhan akibat rekolonisasi Pityro sporu m ovale di kulit kepala (Pierrard et a l., 2002) sedangkan sediaan zinc pyrithione yang setelah pengolesan sampo pada kulit kepala, partikel zinc pyrithione akan dideposisikan di kulit kepala dan tidak hilang hanya dengan dibilas dengan air akan tetapi secara bertahap akan berkurang jumlahnya sampai dua atau tiga hari setelah pengolesan. Deposisi zinc pyrithione tergantung pada konsentrasi sampo, lama kontak dengan kulit, pH sampo dan asal deterjen pada formulasi sampo (Loden et a l., 2002). Terapi antijamur topikal untuk Pityrospo ru m o va le memberikan respon baik, akan tetapi sangat mungkin terjadi kekambuhan karena perubahan siklus hidup mikroorganisme dan juga dipengaruhi oleh faktor endogen pejamu. Terapi topikal dapat menghilangkan rasa gatal atau reaksi peradangan dan mengurangi populasi P ityro sp orum o va le, selain itu juga menjadi pilihan karena harganya relatif lebih murah, mudah didapat, dan efek sampingnya juga kecil (Gupta et al., 2002).
17
IV. SIMPULAN DAN SARAN A.
Simpulan 1. Terdapat perbedaan efektivitas yang signifikan (p < 0,05) antara ketokonazol 1% dengan zinc pyrithione 1% secara in vitro terhadap pertumbuhan Pityrosp orum o va le. 2. Ketokonazol 1% mempunyai daya hambat yang lebih besar dibanding dengan zinc pyrithione 1% terhadap pertumbuhan Pityro sporum o vale.
B.
Saran 1. P erlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mencari konsentrasi kadar hambat minimum dari ketokonazol dan zinc pyrithione dalam menghambat pertumbuhan Pityrospo ru m ovale. 2. P erlu dilakukan penelitian dengan menggunakan bahan aktif murni (bukan sampo) dari ketokonazol dan zinc pyrithione dalam menghambat pertumbuhan Pityrospo ru m ovale. 3. Diharapkan adanya penelitian lebih lanjut mengenai efektivitas ketokonazol dan zinc pyrithione pada ketombe secara in vivo.
18
DAFTAR PUSTAKA Bergbrant, I. M. 1995. S eborrhoeic dermatitis and Pityrospo ru m yea sts. Department of Dermatology, University of Gothenburg, Sahlgrenska Hospital, Gotborg, Sweden. Brooks, G. F., Butel, J. S., Morse, S. A. 2007. Mik robio logi kedokteran. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC. Brown, R. G., Burns, T. 2007. Lectu re Notes on Derma to log y Ed isi Kesembilan . Jakarta : Erlangga. Burns, T., Breathnach, S., Cox, N., Griffiths, C. 2010. Rook ’s Textbook of Dematology. Oxford : Blackwell Scientific publications. Cafarchia, C., Gasser, R. B., Figueredo, L. A., Latrofa, M. S., Otranto, D. 2011. Advances in the identification of Mala ssezia. Mol Cell Probes. 2011 Feb;25(1):1-7. E pub 2010 Dec 28. Dipartimento di Sanità Pubblica e Zootecnia, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università di Bari, Str. prov. le per Casamassima Km 3, 70010 Valenzano, Bari, Italy. Dahlan, M. S. 2009. S ta tistik un tuk Kedok teran dan Keseha tan. Jakarta : Salemba Medika. Hal 85. Dawson, T. L. 2007. M alassezia g lobosa dan restricta : Terobosan Pemahaman tentang Etiologi dan Pengoba tan Keto mb e dan Sebo rrheic Dermatitis mela lu i Whole-Genome Analisis. Jurnal P rosiding S imposium Dermatologi Investigasi (2007) 12, 15-19. The Procter & Gamble Company, C incinnati, Ohio, Amerika Serikat. Djuanda, A., Hamzah, M., Aisah, S. 2005. Ilmu Penyakit Kulit d an Kelamin. Jakarta : Balai Penerbit FKUI. Gupta, A. K., Bluhm, R., Summerbel, R. 2002. Pityriasis versico lor. J Eur Acad Dermatol. 43 Grimalt, R. 2007. Panduan Praktis untuk Gangguan Scalp. Ju rnal Pro sid ing Simposiu m Dermatolog i Investiga si (2007) 12, 10-14. Departemen Dermatology, University of Barcelona, Barcelona, Spanyol. Harmita., Radji, M. 2008. Ana lisis Ha ya ti. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC. Hal 651-652. Hal 7-9. Harrison, S., Bergfeld, W. F. 2009. Disea ses o f the ha ir and na ils. Department of Dermatology, Cleveland Clinic Foundation, 9500 Euclid Avenue/A61, Cleveland, OH 44195, USA. Indranarum, T., Suyoso, S. 2001. Pen ata laksanaan Tin ea Kap itis. Berkala Ilmu penyakit Kulit dan Kelamin vol.13 No. 42 1 April 2001. Hal 30-35. Katzung, B. G. 2004. Ba sic & Clin ical Pharmaco logy. Singapore : T he M cGrawHill Companies. Hal 656. Kaur, I. P., Kakkar, S. 2010. To pical d elivery of antifunga l agents. University Institute of Pharmaceutical Sciences, Panjab University, Chandigarh, India. Kerr, K., Darcy, T., Henry, J., Mizoguchi, H., Schwartz, J. R., Morrall, S., F illoon, T., Wimalasena, R., Fadayel, G., Mills, K. J. 2011. Epidermal changes asso cia ted with symp toma tic reso lu tion of dand ruff: biomarkers of scalp health. Int J Dermatol.
19
Lamore, S. D., Wondrak, G. T. 2011. Zinc p yrith ion e impa irs zinc homeo sta sis and up regu lates stress response g en e expression in recon structed human ep id ermis. Department of Pharmacology and Toxicology, College of Pharmacy and Arizona Cancer Center, University of Arizona, 1515 North Campbell Avenue, Tucson, AZ, 85724, USA. Loden, M., Wessman, C. 2000. Th e antidandruff effica cy o f a shampoo conta in ing piro ctone o la mine and sa lycilic acid in comparison to that o f a zin c pyrithion e sha mpoo . Int J Cosmetic. Miranda, K. C., de Araujo, C. R., Costa, C. R., P assos, X. S., de Fatima, L. F. O., do Rosario, R., S ilva, M. 2007. An tifungal a ctivities o f azole agents against th e Ma la ssezia species. Int J Antimicrob Agents;29:281-4. Murti, B. 2010. Desain dan Ukuran Sa mpel untuk Pen elitia n Kuan titatif dan Kua lita tif d i Bidang Kesehatan. Yogyakarta : Gajah Mada University Press. Hal 131-132. Nematian, J., Ravaghi, M., Gholamrezanezhad, A., Nematian, E. 2006. In crea sed ha ir sh edding may be asso cia ted with the presen ce of Pityrospo ru m ovale. 44 Am J Clin Dermatol. 2006;7(4):263-6. Department of Mycology, Faculty of Medicine, Azad University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Phillips, R. M., Rosen, T. 2002. Topical an tifunga l agents. In : Wolverton E. S, editor. Comprehensive dermatology drug therapy. Indianapolis, Indiana : W. B Saunders C ompany. Pierard, F. C., Uhoda, E., Loussouarn, G., Saint, L. D., P ierrad, G. E. 2003. Effect of residan ce time on the efficacy of antidand ru ff sha mpoos. Int J Cosmetic. Pray, W. S. 2001. Dand ruff and S eborrheic Derma titis. Didapat dari : http://www.medscape.com/viewarticle/407641. Ranganathan, S., Mukhopadhyay, T. 2010. Dandru ff: the most commercia lly exploited skin d isease. CavinKare Research Centre, No.12 Poonamallee Road, Ekkattuthangal, C hennai - 600 097, India. Indian J Dermatol. 2010 Apr-Jun;55(2):130-4. Schmidt, R. T., Braren, S., F olster, H., Hillemann, T., Oltrogge, B., P hilipp, P., Weets, G., Fey, S. 2011. Efficacy of a p iro cton e ola mine/climba zo l shampoo in compa rison with a zinc p yrithion e shampoo in subjects with mod erate to severe dandruff. Research & Development, Beiersdorf AG, Unnastrasse 48, 20245 Hamburg, Germany. Schwartz, J. R., Shah, R., Krigbaum, H., Sacha, J., Vog,t A., B lume, P . U. 2011. New insigh ts on d andruff/sebo rrho eic d erma titis: th e ro le of the scalp fo llicular in fund ibu lu m in effective treatment strateg ies. Br J Dermatol. 2011 Oct;165 Suppl 2:18-23. doi: 10.1111/j.1365-2133.2011.10573.x. Se lden, S. 2010 . Sebo rrh eic Dermatitis. Department of Dermatology, Eastern Virginia Medical School. Setiabudy, R., Bahry, B. 2008. Fa rmako log i dan Terap i. Jakarta : Balai Penerbit FKUI. Hal 574-575. Sherwood, L. 2001. Fisiologi Manusia da ri Sel k e S istem. Jakarta : P enerbit Buku Kedokteran EGC. Hal 402-404. Siregar, R. S. 2005. Atlas Berwa rna Sa ripati Pen yakit Kulit. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran E GC. Hal 104-106.
20
Stoppler, M. C. 2008. Dandruff. Didapat dari : http://www.emedicinehealth.com/dandruff/article_em.htm 45 Stringer, J. L. 2008. Kon sep Da sa r Fa rmakologi : Paduan Un tuk Maha siswa (Basic Concep ts in Pha rmacology : a Student’s Su rviva l Guide). Jakarta : EGC. Hal 211-216. Subakir. 1992. Pengaruh Suhu Peng eraman pada Biakan Ma lassezia furfur. Cermin D unia Kedokteran. Taufiqurrahman, M. A. 2008. Pengan tar Metodolog i Penelitian untuk Ilmu Keseha tan. Surakarta : LPP UNS dan UPT Penerbitan dan Percetakan UNS (UNS Press). Hal 99-109. Tjay, T. H., Rahardja, K. 2002. Obat-oba t p en ting: khasiat, p enggunaan dan efekefek sampingnya. Jakarta : Penerbit PT. Elex Media Komputindo Kelompok Gramedia. Hal 95. Wahyuli, H. N., Cuta, R. S. P . 2006. Kero ntokan Rambu t. Surabaya : Bagian Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin FK UNAIR/RSU dr. Soetomo.
