Využití rutinního stanovení koncentrací moderních hypotenziv metodou LC/MS/MS v léčbě i v monitorování efektu léčby u jedinců s hypertenzí
B. Sokolová, T. Gucký, M. Branný, V. Krečman, H. Skřičíková, L. Hebká, D. Stejskal,
Hypertenze – vysoký krevní tlak ¾ nejčastější kardiovaskulární onemocnění ¾ diagnóza hypertenze je založena na opakovaném a reprodukovatelném
zjištění zvýšeného krevního tlaku ¾ trvalá arteriální hypertenze poškozuje krevní cévy v ledvinách, v srdci a mozku,
zvyšuje incidenci ledvinového selhání, ischemické choroby srdeční, srdečního selhání a iktu. ¾ epidemiologické studie ukazují, že rizika poškození ledvin, srdce i mozku jsou v
přímé souvislosti s mírou zvýšení krevního tlaku
¾ konkrétní příčinu hypertenze lze určit pouze u 10 – 15 % pacientů (stenóza
renální arterie, Cushingova choroba,…) ¾ u pacientů, u nichž se organická příčina hypertenze zjistit nedá, hovoříme o
esenciální hypertenzi – zvýšení krevního tlaku bývá obvykle způsobeno kombinací četných faktorů 9 genetické faktory 9 psychický stres 9 faktory prostředí a výživy (zvýšený přívod kuchyňské soli, snížený přísun
draslíku a vápníku) ¾ bylo zjištěno, že účinné medikamentózní snížení krevního tlaku zabraňuje
poškození krevních cév a podstatně snižuje morbiditu a mortalitu
¾ hypertenze je multifaktoriální onemocnění, a proto se k její léčbě používají
látky s různým mechanismem účinku, které jsou rozděleny do 5 skupin
1) Diuretika 2) Látky blokující sympatický nervový systém 3) Blokátory vápníkových kanálů 4) Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI) a antagonisté angiotensinu II (AATII) 5) Vazodilatační látky
Často se k léčbě používá dvojkombinace nebo trojkombinace antihypertenziv (vyjímkou ale nejsou ani čtyři nebo pět současně užívaných antihypertenziv)
Diuretika ¾ snižují krevní tlak tím, že snižují množství sodíku v organismu ¾ postačují zajistit přiměřenou farmakoterapii při mírné a středně závažné
hypertenzi. ¾ při těžších hypertenzích se používají v kombinaci s dalšími antihypertenzivy
furosemid
hydrochlorothiazid
chlorthalidon
Látky blokující sympatický nervový systém Centrálně působící látky ¾ tlumí funkci sympatického nervového systému. Přesný mechanismus účinku
není dosud přesně znám. ¾ u pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí
klonidin
rilmenidin
moxonidin
Látky blokující sympatický nervový systém
β‐sympatolytika ¾ působí inhibičně na adrenergní β‐receptory ¾ u pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí metoprolol
bisoprolol
betaxolol carvedilol
Blokátory vápníkových kanálů ¾ inhibují vstup vápníku do buněk hladkého svalstva artérií ¾ mají rovněž antianginózní a antiarytmické účinky
amlodipin
felodipin
verapamil
Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI) ¾ tyto látky inhibují enzym, který je zodpovědný za vznik angiotenzinu II
(způsobuje arteriální vazokonstrikci a zvyšuje retenci sodíku)
trandolapril
ramipril
perindopril
Antagonisté angiotensinu II (AATII) ¾ působí selektivněji něž ACEI ¾ mají schopnost blokovat účinky angiotenzinu dokonaleji, protože vytvořit
angiotenzin II mohou i jiné enzymy valsartan
telmisartan
losartan
Proč stanovovat antihypertenziva
¾
při terapii více léčiv je častá non‐compliance pacientů
¾
nutnost monitoringu antihypertenziv u osob s torpidní hypertenzí, u kterých se přikročí k terapii metodou renální denervace
¾
metoda se může uplatnit při intoxikaci léky uvedených skupin
Příprava vzorku 9 50 μl séra se smíchá s 10 μl IS (klonidin‐d4, carvedilol‐d4, furosemid‐d5). 9 vzorek se precipituje 50 μl 10% kyseliny trichloroctové 9 centrifugace 10 min při 10000 ot. 9 50 μl supernatantu se přepituje do vialky 9 5 μl se nastříkne do LC/MS/MS systému
LC/MS/MS metoda 9 LC – Waters 2695, MS ‐ QuatroPremier 9 kolona: Synergy Polar (150 x 2,6 mm) 9 MFA: 0,01 M octan amonný s 0,1% kys. mravenčí, MFB: ACN 9 gradientový mód: 0 ‐ 7 min: 25% MFB – 90% MFB, 7‐10 min: zpět na výchozí podmínky 9 ESI + , ESI‐ (furosemid, hydrochlorothiazid)
Látka
Rt (min)
Přechod (m/z)
Mód
Metoprolol
3.89
268 → 115
pozitivní
Bisoprolol
6.04
326 → 115
pozitivní
Betaxolol
7.43
308 →115
pozitivní
Carvedilol
9.17
407 →223
pozitivní
Amlodipin
8.43
431 →234
pozitivní
Felodipin
10.22
338 →300
pozitivní
Verapamil
9.03
455 →165
pozitivní
Perindopril
6.64
369 →172
pozitivní
Trandolapril
8.58
431 →233
pozitivní
Ramipril
8.02
417 →234
pozitivní
Losartan
8.25
423 →207
pozitivní
Valsartan
8.81
436 →235
pozitivní
Telmisartan
10.00
515 →275
pozitivní
Moxonidin
3.31
242 →205
pozitivní
Rilmenidin
6.58
181 →95
pozitivní
Klonidin
4.72
230 →213
pozitivní
Furosemid
10.80
329 →204
negativní
Hydrochlorothiazid
5.14
296 → 269
negativní
Chlorthalidon
4.84
322 →240
pozitivní
Clonidin‐d4 (IS)
4.78
234 → 216
pozitivní
Carvedilol‐d4 (IS)
9.10
411 → 228
pozitivní
Furosemid‐d5 (IS)
10.87
334 → 226
negativní
Diuretika
Chlorthalidon
Centrálně působící látky
β‐sympatolytika
Blokátory vápníkových kanálů
Amlodipin
Felodipin
Verapamil
Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI)
Antagonisté angiotensinu II (AATII) 1 2 0 6 2 1 s a r ta n y _ 1 0 0
1 0 .0 0
100
%
Telmisartan
4: M R M of 1 C hannel ES + T IC 6 .0 8 e 3
0
2 .0 0
4 .0 0
6 .0 0
8 .0 0
1 2 0 7 3 0 v a ls a r ta n
1 0 .0 0
1 2 .0 0
1 4 .0 0 1: M R M of 1 C hannel ES + T IC 3 .0 4 e 4
1 2 .0 0
1 4 .0 0 M R M of 1 C hannel ES + T IC 1 .0 2 e 3
8 .8 1
100
%
Valsartan
0
2 .0 0 4 .0 0 1 2 0 7 1 7 lo s a r ta n 1 1 S m ( M n , 5 x 4 )
6 .0 0
8 .0 0
1 0 .0 0
8 .2 5
100
%
Losartan
1 4 .3 2
2 .1 6
0
2 .0 0
4 .0 0
6 .0 0
8 .0 0
1 0 .0 0
1 2 .0 0
1 4 .0 0
T im e
Blízká budoucnost ¾ převedení metody na nový přístroj QTRAP 4500 (Ab Sciex) ¾ stanovení dalších látek
9 9 9 9 9 9
perindoprilát ramiprilát trandolaprilát spironolakton a metaboitem indapamid amilorid
Děkuji za pozornost
