BAB II TINJAUAN PUSTAKA
A. Pengertian Lekosit Sel darah putih ( lekosit ) rupanya bening dan tidak berwarna, bentuknya lebih besardari sel darah merah, tetapi jumlah sel darah putih lebih sedikit. Diameter lekosit sekitar10 µm. Batas normal jumlah lekosit berkisar 4.000 – 10.000 / mm³
darah.Lekosit di dalam tubuh berfungsi untuk
mempertahankan tubuh terhadap benda –benda asing ( foreign agents) termasuk kuman – kuman penyebab penyakit infeksi. Lekosit yang berperan adalah monosit, netrofil, limfosit.Lekosit juga memperbaiki kerusakan vaskuler.Lekosit yang memegang peranan adalah eosinofil sedangkan basofil belum di ketahui pasti.( Depkes,1989 )
B. Pembentukan Lekosit Sel – sel polimorfonuklear dan monosit dalam keadaan normal hanya di bentuk didalam sumsum tulang, sedangkan sel – sel limfosit dan sel – sel plasma diproduksi dalam bermacam – macam organ limfoid termasuk limfe, limpa, tonsil, dan bermacam–macamsel – sel limfoid yang lain di dalam sumsum tulang, usus dan sebagainya.Sel – sel darah putih yang di bentuk di dalam sumsum tulang, terutama granulosit akan di simpan di dalam sumsum sampai mereka diperlukan di dalam sistem sirkulasi,kemudian bila
4
kebutuhannya meningkat maka akan menyebabkan granulosit tersebut dilepaskan. Dalam keadaan normal granulosit yang bersirkulasi di dalam seluruh aliran darah kira –kira tiga kali daripada jumlah granulosit yang di simpan dalam sumsum, jumlah ini sesuai dengan persediaan granulosit selama enam hari.( A.C Guyton,1995 ).
C. Penggolongan Lekosit Berdasarkan jenis granula dalam sitoplasma dan bentuk intinya, sel darah putih digolongkan menjadi dua golongan :
1. Lekosit bergranula a. Eosinofil Eosinofil adalah granulosit dengan inti yang terbagi 2 lobus dan sitoplasma bergranula kasar, refraktil dan berwarna merah tua oleh zat warna yang bereaksi asam yaitu eosin.Walaupun mampu melakukan fagositosis eosinofil tidak mampu membunuh kuman. (F.K Widman,1989) b. Basofil Mempunyai bentuk bulat, dan intinya sukar dilihat sebab tertutup oleh granula.Granulanya sangat besar bulat,berwarna ungu tua, jumlahnya banyak tetapi letaknya tidak begitu rapat. Kadang – kadang vakuol tampak berwarna pucat dalam sitoplasma.
5
c. Netrofil Sel – sel ini di sebut lekosit polimorfonuklear karena bentuk intinya bermacam –macam.Ada dua jenis netrofil yaitu netrofil batang dan netrofil segment. Ciri –cirri netrofil batang : inti berbentuk seperti batang ,bentuk ginjal atau huruf S, warna ungu tua.Sitoplasma kemerahan dan granula kecil – kecil halus, warna lembayung muda.Sedangkan netrofil segmen berbentuk bulat, sitoplasma kemerah – merahan banyak.Mempunyai inti terdiri 2-5 lobus yang di hubungkan dengan benang kromatin, warnaungu tua padat. Granulanya kecil – kecil ,warna lembayung muda banyak tetapi terpisah.
2. Lekosit tidak bergranula a. Limfosit Sel limfosit mempunyai ukuran yang kecil, kira-kira hampir sama dengan SDM. Limfosit adalah sel lekosit kedua terbanyak di dalam darah sesudah lekositnetrofil. Antara 25% dan 35% dari jumlah seluruh lekosit darah adalah limfosit,mempunyai ciri – ciri sebagai berikut : diameter antara 8 – 10 mikron, nukleous bundar atau lonjong, berlekuk atau berbentuk seperti ginjal dengan kromatin kasar,sitoplasma sedikit, berwarna biru muda dan tanpa granula.( Depkes,1989 ). b. Monosit
6
Monosit adalah sel darah yang kasar.Konsentrasi sel monosit ini di dalamdarah antara 5% sampai 10%. Sel monosit ini hanya berada dalam darah selama24 jam saja, untuk selanjutnya bermigrasi ke berbagai jaringan, menetap disana dan berubah menjadi sel dengan sitoplasma yang lebih besar dan kerap kali berlekuk-lekuk, dengan diameter antara 16 - 20 mikron, nukleous bervariasi biasanya berbentuk ginjal, kromatin tersusun dalam untaian dengan warna lembayung muda, sitoplasma banyak berwarna biru keabu – abuan.(Sadikin,M,2002 ). c. Sel Plasma Sel Plasma mempunyai cirri-ciri : ukuran 8-20 um, berbentuk bulat, berwarna keungu-unguan , kromatin tersusun retikulair seperi jarijari sepeda , membran inti tidak jelas,danbutir inti tidak ada. (Depkes 1989).
D. Hemopoisis Sel Darah Putih / Lekosit 1. Seri granulosit a. Mieloblast Mieloblast adalah sel termuda diantara seri granulosit. Sel ini memiliki inti bulat yang berwarna biru kemerah-merahan, dengan satu atau lebih anak inti, kromatin inti halus dan tidak menggumpal. Sitoplasma berwarna biru dan sekitar inti menunjukkan warna yang lebih muda.Mieloblast biasanya lebih kecil daripada rubriblast dan
7
sitoplasmanya kurang biru dibandingkan rubriblast.Jumlahnya dalam sumsum tulang normal adalah< 1% dari jumlah sel berinti.
8
b. Promielosit Dalam fase ini sitoplasma seri granulosit telah memperlihatkan granula berwarna biru tua / biru kemerah-merahan.Berbentuk bulat dan tidak teratur.Granula sering tampak menutupi inti.Granula ini terdiri dari lisozom yang mengandung mieloperoksidase, fosfatase asam, protease dan lisozim.Inti promielosit biasanya bulat dan besar dengan struktur kromatin kasar.Anak inti masih ada tetapi biasanya tidak jelas.Jumlah sel ini dalam sumsum tulang normal adalah 1-5 %. c. Mielosit Pada mielosit granula sudah menunjukkan diferensiasi yaitu telah mengandung laktoferin, lisozim peroksidase dan fosfatase lindi.Inti sel mungkin bulat atau lonjong atau mendatar pada satu sisi, tidak tampak anak inti, sedangkan kromatin menebal.Sitoplasma sel lebih banyak dibandingkan dengan promielosit.Jumlahnya dalam keadaan normal adalah 2-10 %. d. Metamielosit Dalam proses pematangan, inti sel membentuk lekukan sehingga sel berbentuk seperti kacang merah, kromatin menggumpal walaupun tidak terlalu padat. Sitoplasma mengandung granula kecil berwarna kemerah-merahan.Sel ini dalam keadaan normal tetap berada dalam sumsum tulang dengan jumlah 5-15 %.
9
e. Neutrofil Batang dan Segmen Metamielosit menjadi batang apabila lekukan pada inti melebihi setengah ukuran inti yang bulat sehingga berbentuk seperti batang yang lengkung. Inti menunjukkan proses degeneratif, kadangkadang tampak piknotik pada kedua ujung inti. Sitoplasma mengandung granula halus berwarna kemerah-merahan.Dalam darah tepi ditemukan hanya 2-6% dari sel-sel leukosit normal.Selanjutnya sel ini menjadi neutrofil segmen.Dalam sumsum tulang normal sel ini merupakan 10-40 % dari sel berinti.
2. Seri Limfosit a. Limfoblast dan Prolimfosit Limfoblast memiliki inti bulat berukuran besar dengan satu atau beberapa anak inti, kromatin inti tipis rata dan tidak menggumpal.Sitoplasma
sedikit
dan
berwarna
biru.Prolimfosit
menunjukkan kromatin lebih kasar tetapi belum menggumpal seperti limfosit.Kadang-kadang sulit membedakan limfoblast dari limfosit dan pada keadaan ragu-ragu dianjurkan untuk menganggap sel itu sebagai limfosit. b. Limfosit Besarnya sel 10 – 15 mikron , Ada yang besar (limposit besar), ada yang sedang (limposit sedang), ada yang kecil (limposit kecil).Inti sel, letaknya dalam sel eksentrik, Bentuk inti Oval / bulat dan relatif
10
besar, Warna inti Biru gelap, Kromatin kompak memadat, Membran inti kurang jelas terlihat, Butir inti(nucleoli) tidak ada, sitoplasma, luasnya/lebarnya
relatif
sempit,Warna
sitoplasma
Oxyphil,
Perinuklear Zone umumnya tidak ada,Granula dalam sitoplasma tidak ada. Kalau ada granula disebut granula Azurophil.Fungsi berhubungan aktifitas imunitas seluler dan imunitas humoral.
3. Seri Monosit a. Monoblast dan Promonosit Monoblast dan promonosit dalam keadaan normal sulit dikenal atau dibedakan dari mieloblast dalam sumsum tulang, tetapi pada keadaan abnormal misalnya pada proliferasi berlebihan sel seri ini, monobalst dan promonosit dapat dikenali dari intinya yang memperlihatkan lekukan terlipat atau menyerupai gambaran otak dan sitoplasma dengan pseudopodia. b. Monosit Besarnya sel 10 – 22 mikron, Inti sel, Letaknya dalam sel eksentrik.Bentuk inti menyerupai otak (brain like form), Warna inti kemerah-merahan/keunguan, Kromatin tersusun lebih kasar, butir inti (nucleoli) tidak ada, Sitoplasma, Luasnya/lebarnya relatif lebih besar kadang-kadang ada pseudopodia, Warna sitoplasma biru pucat, Perinuklear Zone tidak ada, Granula dalam sitoplasma kadang-kadang ada granula Azurophil, Fungsi melakukan fagositosis.
11
c. Seri Plasmosit Sel Plasma (Plasmosit) mempunyai hubungan erat dengan limfosit.Sel pelopor plasmosit maupun limfosit terdapat dalam jaringan limfoid dan keduanya merupakan unsur penting dalam sistem imun tubuh.Akibat stimulasi antigen, sel limfosit B mengalami transformasi blast dan membentuk sel plasma yang memproduksi immunoglobulin. Plasmosit dalam keadaan normal tidak tampak dalam darah tepi tetapi dijumpai dengan jumlah sekitar 1 % dari sel berinti dalam sumsum tulang.Dalam keadaan normal plasmablast dan proplasmosit tidak dapt dijumpai dalam sumsum tulang tetapi tampak pada keadaan-keadaan tertentu yang disertai proliferasi berlebih dan juga peningkatan produksi imunoglobulin. Ukuran,bentuk dan struktur plasmablast sulit dibedakan dari blast yang lain, tetapi hanya satu cara yang dapat dipakai untuk membedakan plasmosit dari seri balst yang lain, yaitu bentuk inti yang eksentrik dan adanya bagian zona jernih melingkar (halo) disekitar inti.
E. Metode Hitung Jumlah Lekosit Pada pemeriksaan hitung jumlah lekosit di gunakan metode : 1. Metode bilik hitung Prinsip metode ini adalah darah di encerkan dalam pipet lekosit, kemudian di masukkan ke dalam kamar hitung.Jumlah lekosit di hitung dalam
12
volume tertentu dengan menggunakan faktor konversi jumlah lekosit per ul darah.nilai
normalnya
adalah
4.000
-
10.000
/
mm
darah.(Gandasoebrata,2007) 2. Metode sediaan apus Prinsip metode ini setetes darah di buat hapusan pada slide, dicat, dan di periksa di bawah mikroskop.Dengan jalan ini dapat di hitung jumlah lekosit perlapang pandang.(Gandasoebrata,2007 ). Tiap – tiap perhitungan lekosit harus di kontrol dengan pemeriksaan sediaanhapusan darahnya.Penaksiran jumlah lekosit harus di lakukan pada daerah penghitung (counting area ) yaitu bagian untuk hapusan tempat eritrosit–erotrosit terletak berdampingan satu dengan yang lainnya, tetapi tidak saling bertumpukan. Bila didapatkan 20 – 30 lekosit perlapang pandang ini kira – kira sesuai dengan jumlah lekosit 5.000 Bila di dapatkan 30-40 lekosit perlapang pandang ini kira – kira sesuai dengan jumlah lekosit 7500,Bila di dapatkan 40 – 50 per lapang pandang ini sesuai dengan jumlah lekosit kira– kira 10.000.(Depkes,1989.Hematologi )terhadap lekosit di laporkan jumlah, hitung jenis dan kelainan morfologi. Jumlah lekosit menggunakan sediaan apus dilaporkan meningkat,normal,atau menurun.
3. Evaluasi Lekosit Terdapat tiga hal yang di lakukan evaluasi sel darah putih : 1. Estimasi jumlah sel darah putih
13
Kesan jumlah sel darah putih pada preparat darah apus ini hanya di gunakan untuk mengkorfirmasi apabila hasil yang di keluarkan dalam perhitungan sel darah putih benar atau tidak. Maka untuk sementara di anjurkan dalam melakukan estimasi jumlah sel darah putih menggunakan lensa obyektif 10 X untuk melihat luasnya kemudian dengan lensa obyektif 40 X untuk mengamati sel darah putih yang ada di daerah ekor preparat. 2. Hitung jenis sel darah putih Pemeriksaan differensial jenis sel – sel ini dapat di kerjakan terlebih dahulu setelah selesai pemeriksaan orientasi umum karena termasuk pemeriksaan rutin.Cara ini menggunakan obyektif 40 X. 3. Mencari kemungkinan sel darah putih abnormal Bila di temukan sel – sel darah putih abnormal atau sel – sel darah putih yang tidak lazim perlu di laporkan, misalnya yang dapat di jumpai antara lain : hiper segmen, sel plasm abiru, granula toksik, vacuolisasi, benda dohle, benda supras, batang aurer.( FK.Undip,2001)
F. Sediaan Apus Darah Tepi Penilaian kualitas hapusan darah tepi Ciri – ciri sediaan yang baik : a. Sediaan tidak melebar sampai pinggir kaca obyek, panjangnya setengah sampaidua pertiga panjang kaca. b. Harus ada bagian yang cukup tipis untuk di periksa.
14
c. Pinggir sediaan itu rata dan sediaan tidak boleh berlubang – lubang atau bergaris– garis d. Jika diperiksa di bawah mikroiskop eritrosit – eritrosit harus sama rata tersebar pada bagian yang akan di periksa, tidak menyusun gumpalan atau rouleux e. Penyebaran lekosit tidak boleh buruk, lekosit – lekosit itu tidak boleh berhimpunan pada pinggir – pinggir atau ujung – ujung sediaan. f. Ujung ekornya tidak berbentuk bendera robek. g. Pengecatan yang baik.(Depkes,1991).
G. Morfologi preparat hapus darah tepi Pada preparat hapus terdapat tiga bagian, yaitu : 1. Kepala : bagian dimana darah di letakkkan sebelum di hapus. 2. Ekor
: bagian ujung preparat atau akhir apusan.
3. Badan : bagian tengah antara ekor dan kepala. Gambar 1. Bagian – bagian dari apusan darah tepi yang baik
kepala
badan
ekor
15
Seluruh badan preparat dapat di bagi menjadi enam zona berdasarkan susunan populasi sel darah merah, berturut – turut mulai dari kepala ke arah ekor sebagaiberikut :
I II III
IV V
VI
Gambar 2.Skema Diagram Preparat Apus Darah Tepi Metode Longitudinal dengan arah pergerakan yang ditunjukkan dengan Tanda Anak Panah.( Workshop Diagnosa hematologi, 1987 )
Zona I : disebut zona irreguler Didaerah ini distribusi sel darah merah tidak teratur, ada yang padat, bergerombolsedikit atau banyak dan tidak selalu sama pada tiap – tiap preparasi. Zona ini meliputi lebih kurang 3 % dari seluruh badan preparat.
Zona II : disebut zona tipis. Sel– sel darah merah disini distribusinya tidak teratur atau tidak merata,saling bertumpuk ( over laping ) dan berdesakan, zona ini meliputi lebih kurang 14 %.
Zona III : Disebut zona tebal
16
Sel – sel di daerah ini bergerombol rapat / padat, saling bertumpukan dan berdesakan.zona ini merupakan zona terluas meliputi hampir separuh luas seluruh preparat lebihkurang 45 %.
17
Zona IV : disebut zona tipis Gambaran zona ini sama dengan zona II, hanya luasnya lebih besar sedikit daripada luas zona II, lebih kurang 18 %. Zona V : disebut zona “ eve “ atau zona reguler Di mana sel – sel tersebar rata tidak saling bertumpukan atau berdesakan , sehingga bentuk – bentuknya masih asli / utuh tidak mengalami perubahan – perubahan invitro. zona ini meliputi daerah seluas lebih kurang 11 %. ZonaVI : disebut zona sangat tipis Terletak di ujung preparat sebelum menjadi ekor.Disini sel – selnya tidak padat dan lebih longgar di banding sel darah merah di zona IIatau IV.pada umumnya telah membentuk gerombolan sel – sel yang tersusunberderet – deret. zona ini meliputi daerah seluas lebih kurang 9 %. (FK.Undip,2001)
H. Pewarnaan
sediaan
apus
18
darah
tepi
Setelah kualitas dan morfologi preparat sediaan apus darah tepi telah memenuhisyarat, maka preparat tersebut siap untuk di warnai atau di cat. dalam mewarnai yangdi pakai adalah pewarnaan dengan prinsip Romanowsky, seperti giemsa, wright, maygrunwald.(Ganda Soebrata,2007) Pada prinsipnya dari pewarnaan Romanowsky adalah penggunaan dua zat warna yang berbeda, yaitu azur B ( trimetil tionin ) yang bersifat basa dan Eosin Y (tetrabromflurecein ) yang bersifat asam. Azur B akan mewarnai komponen sel yang bersifat asam seperti asam seperti kromatin sedangkan eosin Y akan mewarnai komponen sel yang bersifat basa seperti granula eosinofil. ikatan eosin Y pada azur B dapat menimbulkan warna ungu, dan keadaan
ini
di
kenal
sebagai
efek
RomanowskyGiemsa.
(Rukman
kiswary,1995).
I. Manfaat hitung jumlah lekosit dalam klinik. Pemeriksaan hitung jumlah lekosit dalam klinik bermanfaat untuk mengetahui adatidaknya infeksi, peradangan, dan tumor.selain itu pemeriksaan ini
sangat
membantu
sebagai
petujuk
mieloproliferatif. ( A. V Hoffbrand, 1990).
19
diagnosis
adanya
kelainan
J. Kerangka teori
Jumlah Absolut Metoda Estimasi Jumlah Lekosit Jumlah lekosit
Jenis-Jenis Lekosit
Alat
Granula
K. Kerangka Konsep
Estimasi Hasil Jumlah Lekosit Jumlah Absolut
L. Hipotesis Ada kesesuaian hasil hitung jumlah lekosit dengan menggunakan estimasi dan absolut.
20
