LABORATORNÍ PŘÍRUČKA. Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové

Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky Účinnost od

15. 9. 2015

Verze č.

Tímto předpisem se ruší

Verze č. 3, platnost od 1. 4. 2014

Jméno a příjmení, funkce

4

Datum

Podpis

Odborný garant

RNDr. Gabriela Červená, Ph.D. PharmDr. Jana Podzimková

11. 9. 2015

Zpracoval

MUDr. Hana Jiroušová

9. 9. 2015

Přezkoumal

MUDr. Vít Řeháček Hana Krejčí

Schválil

MUDr. Vít Řeháček

Jméno MUDr. Hana Jiroušová

10. 9. 2015 14. 9. 2015

Rozdělovník Funkce Vedoucí jištění kvality Trans P: Intranet FN HK (Vnitřní předpisy) Internet FN HK (www.fnhk.cz/ Dodavatelé a partneři/ Laboratorní příručky

Počet 1 (originál) 1 1 1

Tento dokument je vlastnictvím FNHK a jeho šíření mimo organizaci v jakékoliv formě bez souhlasu schvalovatele je zakázáno. Každý zaměstnanec odpovídá za to, že pracuje s platnou verzí dokumentu. Pořízené kopie jsou pouze informativní!

Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015

Strana 1 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové

Obsah Úvod ..............................................................................................................................3 Základní informace o laboratoři ..................................................................................3 2.1. Identifikace laboratoře, důležité údaje a kontakty ....................................................3 2.2. Zaměření laboratoře ................................................................................................4 2.3. Organizace laboratoře a její vnitřní členění ..............................................................4 2.4. Systém kontroly kvality (úroveň a stav akreditace pracoviště) .................................6 3. Pojmy a zkratky ............................................................................................................6 4. Přehled prováděných vyšetření ....................................................................................7 5. Procesy před laboratorním vyšetřením ........................................................................8 5.1. Manuál pro odběr biologického materiálu a doporučený odběrový systém ..............8 5.2. Požadavkové listy (žádanky) ................................................................................. 10 5.3. Ústní požadavky na vyšetření (dodatečná a opakovaná vyšetření) ......................... 10 5.3.1. Požadavky na STATIM vyšetření .................................................................. 11 5.4. Transport primárního vzorku ................................................................................. 11 5.5. Skladování vzorků................................................................................................. 11 6. Kritéria pro odmítnutí vadných (kolizních) primárních vzorků .............................. 11 7. Uvolňování výsledků ................................................................................................... 12 7.1. Výdej výsledků ..................................................................................................... 12 7.1.1. Typizace HLA I. a II. třídy PCR SSP metodikou ...........................................12 7.1.2. Typizace RHD variant a slabých D typů PCR SSP metodikou ....................... 12 7.1.3. Telefonické vydávání výsledků......................................................................13 7.2. Změny výsledků po jejich vydání (po uzavření výsledkového protokolu) .............. 13 7.2.1. Oprava identifikační části a oprava výsledkové části ..................................... 13 7.2.2. Zrušení žádanky ............................................................................................ 14 7.3. Hlášení výsledků ve varovných (kritických) intervalech ........................................ 14 8. Způsoby řešení reklamací a stížností ......................................................................... 14 8.1. Reklamace ............................................................................................................ 14 8.2. Stížnosti ................................................................................................................ 14 8.3. Konzultační činnost laboratoře .............................................................................. 14 9. Přílohy ......................................................................................................................... 14 10. Revize a změnové řízení .............................................................................................. 16 1. 2.



Strana 2 z 17


1. Úvod Cílem tohoto dokumentu je podání informace zdravotnickým pracovištím o laboratorních metodách, které zajišťuje laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky na Transfuzním oddělení Fakultní nemocnice v Hradci králové. Informace jsou zaměřeny jen na metody týkající se molekulárně genetického vyšetření laboratoře v oblasti identifikace erytrocytového RhD antigenu, tzn. kvalitativní (variantní antigen) a kvantitativní odchylky (slabý antigen) a typizace HLA antigenního systému I. a II. třídy pro program orgánových transplantací. Laboratorní příručka je součástí řízené dokumentace a je pravidelně aktualizována. Laboratorní příručka pro laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky (č. 17) je v celém rozsahu dostupná žadatelům našich služeb na webových stránkách Fakultní nemocnice Hradec Králové: ●www.fnhk.cz - dodavatelé a partneři – laboratorní příručky – Laboratorní příručka laboratoře HLA systému a PCR diagnostiky ●Intranet – informace – vnitřní předpisy – laboratorní příručka – 7.64 Laboratorní příručka laboratoře HLA systému a PCR diagnostiky ● Transfuzní disk (P) – Příručky TO

2. Základní informace o laboratoři 2.1.

Identifikace laboratoře, důležité údaje a kontakty

Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky, nákladové středisko 6474 Vedoucí lékař laboratoře Zástupce vedoucího lékaře, vedoucí auditor, správce dokumentace

Vedoucí laborantka, správce měřidel, přístrojový technik

Odborný garant

JOP VŠ Úseková laborantka Zástupce Zdravotní laborantky

MUDr. Řeháček Vít

tel. 495 833445

e-mail: [email protected], [email protected]

MUDr. Jiroušová Hana

tel. 495 833992

e-mail: [email protected]

Krejčí Hana

tel. 495 832 301


RNDr. Červená Gabriela, Ph.D. PharmDr. Jana Podzimková

tel. 495 833 562 495 832 289 fax. 495 832 025

e-mail:[email protected] e-mail: [email protected]

Mgr. Synková Kamila

tel. 495 833 562 fax. 495 832 025


Nováková Romana Dagmar Nixová Drešerová Zita Kostková Václava Radová Monika Ivana Vaňková Vavrušková Andrea Bc. Tereza Chudobová

tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562 tel. 495 833 562

e-mail:[email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected] e-mail: [email protected]



Strana 3 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Transfuzní oddělení, Fakultní nemocnice , Sokolská 581, 500 05 Hradec Králové – Nový Hradec Králové, IČO: 00179906

Adresa Vedoucí lékař TO Vedoucí jištění kvality TO


tel. 495 833 445 fax. 495 833 020


MUDr. Jiroušová Hana

tel. 495 833 992 fax. 495 833 020



tel. 495 833 445 fax. 495 833 020


Krejčí Hana

tel. 495 832 301 fax. 495 833 020


(manažer kvality)

Vedoucí lékař laboratorního úseku Vedoucí laborantka TO

2.2. Zaměření laboratoře Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky provádí stanovení HLA typu vyšetřovaného jedince neboli HLA typizaci, a to pomocí dvou metod - sérologicky a molekulárně geneticky. Sérologické vyšetření definuje HLA antigeny, tj. molekuly HLA exprimované na buněčných membránách a molekulárně genetické vyšetření určuje HLA alely, tj. sekvence oligonukleotidů kódující HLA antigeny. Principem sérologického vyšetření je mikrolymfocytotoxický test za použití „panelu protilátek“ (soubor diagnostických sér pokrývajících spektrum známých HLA specifit). Sérologicky se stanovují HLA antigeny I. třídy (HLA-A, -B, -C) a antigen HLA-B27. Molekulárně genetické vyšetření HLA systému se stanovuje pomocí polymerázové řetězové reakce za použití sekvenčně specifických primerů (PCR-SSP). Výsledek vyšetření je interpretován na úrovni nízkého rozlišení (low resolution). ● PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA u konkrétní HLA oblasti (lokus -A*, -B*, -DRB1*, DQB1*). Detekce a následné vyhodnocení PCR produktů se provádí elektroforeticky. ● Dále provádí vyšetření RHD genotypizace (D-Weak, D-Partial) metodou PCR SSP. 2.3. Organizace laboratoře a její vnitřní členění Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky je součástí Transfuzního oddělení (budovy č. 19 a budova č.13) v areálu Fakultní nemocnice Hradec Králové. Laboratoř se nachází v přízemní budově č.13 a má 2 místnosti. Provozní doba laboratoře č. 17: pondělí – pátek: 7.00 – 15.30 Transplantační služba na telefon pondělí – neděle: 15.30 – 7.00 Laboratoř slouží denně transplantační pohotovost na telefonu: 602 872 676 Po výzvě koordinátora pro orgánové transplantace (FN HK nebo KST Praha) si sloužící laborantka přichází pro odebrané vzorky osobně na určené místo.



Strana 4 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové ORGANIZAČNÍ SCHÉMA laboratoře HLA systému a PCR diagnostiky

Vedoucí laboratoře MUDr. Vít Řeháček

Zástupce vedoucího laboratoře MUDr. Hana Jiroušová

Odborný garant RNDr. G. Červená, Ph.D.

Oddělení zdravotnické techniky Metrolog FN HK

Vedoucí jištění kvality

PharmDr. J. Podzimková

MUDr. H. Jiroušová

JOP VŠ Mgr. K. Synková

Vedoucí jištění kvality, manažer kvality, správce dokumentace, vedoucí auditor MUDr. H. Jiroušová

(předatestační příprava)

Úseková laborantka

Vedoucí laborantka (správce měřidel, přístrojový technik) Hana Krejčí

Auditor

R. Nováková

Zástupce úsekové laborantky D. Nixová

Zdravotní laborantky Bc. Chudobová, Radová, Drešerová, Kostková, Vaňková, Vavrušková



Strana 5 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové 2.4. Systém kontroly kvality (úroveň a stav akreditace pracoviště) ● Pracoviště je součástí FNHK, která získala v roce 2008 Certifikát o Akreditaci od SAK ČR ● Od roku 2002 je Transfuzní oddělení držitelem Certifikátu v systému řízení kvality ČSN EN ISO 9001 : 2000, od roku 2009 pak ČSN EN ISO 9001:2008 ● Laboratoř získala Osvědčení o úspěšném splnění podmínek AUDIT I. NASKL ČSL JEP (2009, 2011) a AUDIT II. NASKL (2013). ● Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky získala akreditaci ČIA pro laboratorní metody PCR (17. 5. 2013).

3. Pojmy a zkratky CET ČR ČSN DNA EHK EN ISO HLA IČZ IKK ISTO JOP VŠ MZ PC PCR SM SJ SOP SSP SÚKL VŠ TBSDR TO

Continuing Education and Training, testování kontroly kvality Česká republika Česká soustava norem Deoxyribonukleová kyselina Externí hodnocení kvality Mezinárodní organizace pro standardizaci Human Leukocyte Antigen (Hlavní histokompatibilní systém člověka) Identifikační číslo zařízení Interní kontrola kvality Informační systém transfuzního oddělení Jiný odborný vysokoškolský pracovník Ministerstvo zdravotnictví Personál computer (osobní počítač) Polymerase Chain Reaction (polymerázová řetězová reakce) směrnice Směrnice jakosti Standardní operační postup Sequence Specific Primers (sekvenčně specifické primery) Státní ústav pro kontrolu léčiv Vysokoškolský pracovník Trombocyty směsné, deleukotizované z buffy-coatu, v resuspenzním roztoku SSP+ Transfuzní oddělení



Strana 6 z 17


4. Přehled prováděných vyšetření IMUNOLOGIE pro orgánové transplantace: SOP II.3.8.21. Typizace genů HLA systému metodou PCR SSP Princip metody: PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA pacienta na konkrétní HLA oblasti (-A*, -B*, -DRB1* či –DQB1*). Prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva ethidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast: transplantační program (transplantace ledvin a kostní dřeně), příbuzenské transplantace kostní dřeně, IKK a EHK. IMUNOHEMATOLOGIE pro genotypizaci RHD (kvalitativní a kvantitativní odchylky): SOP II. 3.8.22. Typizace RHD variant (Partial D-TYPE) a slabých D typů (WEAK DTYPE) PCR SSP. Princip metody: prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva etidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast -vyšetření se provádí u dárců krve a krevních složek, novorozenců, těhotných žena a pacientů v případě diskrepantního výsledku vyšetření získaného sérologickou metodikou. IMUNOLOGIE pro genotypizaci HLA systémů asociovaných s chorobami metodou PCR SSP: SOP II 3.8.23 Typizace genů HLA systému asociovaných s chorobami metodou PCR SSP. Princip metody: PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA pacienta na konkrétní HLA oblasti (-A*, -B*, -DRB1* či –DQB1*). Prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva ethidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast: Vyšetření predispozičních alel pro autoimunitní onemocnění.



Strana 7 z 17


5. Procesy před laboratorním vyšetřením 5.1.

Manuál pro odběr biologického materiálu a doporučený odběrový systém

Vyšetření HLA systému sérologickou a/nebo PCR metodou Typ laboratorní metody (vyšetření)

Primární vzorek

Laboratoř

Poznámka

Protilátky antileukocytové, antitrombocytové

5 ml srážlivé žilní krve nebo 2 ml séra

zkumavka bez protisrážlivého činidla dle firemního typu včetně gelové

HLA systém I.třídy lokus A, B, C sérologicky

5 ml nesrážlivé žilní krve, nebo lymfocytární suspenze ze sleziny či uzliny

heparinum natrium dle firemního typu zkumavky

HLA B27 antigen sérologicky

5 ml nesrážlivé žilní krve


CM test (cross-match)

5 ml nesrážlivé žilní krve 5 ml srážlivé žilní krve



EDTA, dle firemního typu zkumavky





HLA systém I. a II. třídy PCR metodou Typizace RHD weak/varianty Celiakie (typizace DQ2, DQ8)

HLA (sérologická laboratoř)

HLA (PCR laboratoř)



Strana 8 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Časová odezva Typ laboratorní metody (vyšetření) Protilátky antileukocytové antitrombocytové HLA systém I. třídy lokus - A, B, C (sérologicky) HLA-B27 (sérologicky)

CM test (cross-match) HLA systém I. a II. třídy oblast - A*, B*, DRB1* DQB1* metodou PCR

Laboratoř

Časová odezva

Vyšetření mimo pracovní dobu

Vyšetření STATIM

HLA

2 týdny

ne

ne

5 hod.

pro transplantační program

ne

5 hod.

ne

ne

4 hod.

transplantační program

transplantační program (aktuální cross match)

6 hod.

transplantační program

ano transplantační program kadaverozní dárce

(sérologická laboratoř)





HLA systém I. a II. třídy oblast - A*, B*, DRB1*, DQB1* metodou PCR


6 hod.

ne

ne

Typizace RHD variant a slabých D typů metodou PCR


6 hod.

ne

ano

Celiakie, typizace DQ2, DQ8 metodou PCR


4 hod.

ne

ne



Strana 9 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Odběrové systémy pro vyšetření a množství vzorku Laboratoř HLA/PCR

sérologicky

Vyšetření

Zkumavka VACUTAINER

Množství žilní krve

HLA I. třída

ZELENÁ / Heparin

5 ml

HLA-B27

ZELENÁ / Heparin ČERVENÁ / bez protisrážlivého

5 ml

Antileukocytové protilátky Antitrombocytové protilátky CM test – cross match

činidla

ČERVENÁ / bez protisrážlivého činidla

ZELENÁ / Heparin (od dárce) ČERVENÁ / bez protisrážlivého

5 ml 5 ml 2x 5 ml

činidla (od příjemce)

HLA I. třída A,B HLA II. třída DR, DQ PCR

Typizace RHD variant a slabých D typů Typizace DQ2, DQ8

5.2.

RŮŽOVÁ / K2EDTA FIALOVÁ / K3EDTA RŮŽOVÁ / K2EDTA FIALOVÁ / K3EDTA RŮŽOVÁ / K2EDTA FIALOVÁ / K3EDTA RŮŽOVÁ / K2EDTA FIALOVÁ / K3EDTA

5 ml 5 ml 5 ml 5 ml

Požadavkové listy (žádanky)

-

název, adresu a IČZ zdravotnického zařízení – žadatele jméno a příjmení pacienta rodné číslo pacienta zdravotní pojišťovnu pacienta diagnózu nemoci žádost o vyšetření datum odběru vzorku odebraný materiál (typ vzorku) podpis odesílajícího lékaře

5.3. Ústní požadavky na vyšetření (dodatečná a opakovaná vyšetření) Ústní nebo telefonické požadavky na dodatečná vyšetření jsou akceptovány pouze po konzultaci mezi odesílajícím lékařem a pracovníkem laboratoře s vysokoškolským vzděláním v oboru Hematologie a transfuzní lékařství. Podmínkou dodatečného vyšetření je správně odebraný, ještě stabilní vzorek v dostatečném množství. Přijatý dodatečný požadavek je zaevidován a proveden.



Strana 10 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové 5.3.1. Požadavky na STATIM vyšetření Požadavky na STATIM (urgentní vyšetření) jsou určeny pouze pro genotypizaci RHD odchylku: - dárců krve a krevních složek (při výrobě TBSDR) - u rodiček těsně po porodu RhD pozitivního plodu (aplikace profylaxe do 72 hodin po porodu) 5.4. Transport primárního vzorku Vzorky pro PCR diagnostiku je třeba dodat v pracovní době do 9.00 hodin do přízemí budovy č. 19 (laboratoř expedice transfuzních přípravků s nepřetržitým provozem 24 hodin), kde je vzorek vložen do označeného stojanu pro laboratoř č. 17, na žádance je zaznamenán čas + datum doručení vzorku. Po telefonické výzvě si osobně přichází odpovědná osoba laboratoře č. 17 pro materiál, který přijímá ke zpracování. 5.5.

Skladování vzorků

a) primární vzorky se skladují v chladnici při teplotě +2°C až +8°C po odběru se musí dopravit nejlépe do 9.00 hodin do laboratoře, pokud nelze jinak a odebraný vzorek bude doručen do laboratoře až následující den, je třeba uchovávat vzorek v chladnici při teplotě +2°C až +8°C, při které je stabilita primárního vzorku 7 dní b) izolovaná DNA v označené PCR mikrozkumavce se skladuje v mrazícím boxu při teplotě < - 20°C + 5°C.

6. Kritéria pro odmítnutí vadných (kolizních) primárních vzorků Identifikační označení primárního vzorku - Správně zvolená zkumavka pro požadované vyšetření - Zkumavka uzavřená uzávěrem (dle typu firemní zkumavky) - Zkumavka nepotřísněná biologickým materiálem (krví) - Číselný kód vyšetření na TO nesmí překrývat štítek na zkumavce z oddělení

► SPRÁVNĚ OZNAČENÝ VZOREK Na štítku uveďte tyto údaje jednoznačně identifikující vyšetřovaného v souladu s údaji na žádance: 1. dárce : číselný kód dárce s číslem odběru (pro dárce krve) 2. pacient: jméno pacienta datum (den, měsíc, rok) narození datum odběru vzorku Vzorek krve nesmí být hemolytický ! Vyšetřují se jen správně označené vzorky! ► Chybně označený vzorek a vzorky nesplňující požadavky na standardní značení a odběr nelze vyšetřit (rozbití zkumavky, potřísněný biologickým materiálem, nedostatečné množství materiálu, neoprávněný požadavek, znehodnocený vzorek), vzorky se zlikvidují na TO dle platných vnitřních předpisů – směrnice FN SM_05 „Nakládání s odpady“ a nutně musí být vyžádán odběr nového vzorku dle požadavků standardního značení. ► Zacházení s tzv. vzácnými (jedinečnými) vzorky – viz Metodický pokyn č. 04/09 Tento dokument je vlastnictvím FNHK a jeho šíření mimo organizaci v jakékoliv formě bez souhlasu schvalovatele je zakázáno. Každý zaměstnanec odpovídá za to, že pracuje s platnou verzí dokumentu. Pořízené kopie jsou pouze informativní!


Strana 11 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Požadavek na zaslání nového vzorku k vyšetření ▪ vyřizuje v pracovní době laborantka přijímající materiál k vyšetření telefonickou domluvou s žadatelem o vyšetření. - provede záznam na zaslanou žádanku – jméno kontaktní osoby na oddělení, které byl požadavek předán, a čas telefonického oznámení požadavku - provede záznam do deníku „Neakceptovatelné vzorky“. Odmítnout lze tyto případy: ● žádanku o vyšetření, kde chybí nebo jsou nečitelné základní údaje, které nelze telefonicky doplnit a ověřit ● žádanku o vyšetření nebo zkumavku potřísněnou biologickým materiálem ● nedostatečné množství materiálu způsobené chybným odběrem, rozlitím, rozbitím odběrové nádoby ● chybně nebo nedostatečně označený primární vzorek ● chybně odebraný primární vzorek (jiná, než doporučená odběrová nádoba, jiný protisrážlivý roztok, sražený, hemolytický primární vzorek)

7. Uvolňování výsledků 7.1.

Výdej výsledků

Výsledek vyšetření v rámci denního programu je vydán do 6 hodin po zahájení vyšetření. 7.1.1. Typizace HLA I. a II. třídy PCR SSP metodikou ● Kniha pracovních záznamů (PCR laboratoř - izolace DNA). Datum a číselný kód vzorku, jméno, příjmení, rodné číslo, zdravotní pojišťovna pacienta, lékař požadující vyšetření, podpis pracovníka provádějícího HLA vyšetření. ● PCR protokol (příprava Master Mixu, amplifikace DNA). Číselný kód vzorku, datum, podpis pracovníka provádějícího HLA vyšetření, komentář, jméno, příjmení, RČ, ZP pacienta, komentář, podpis, Lot polymerázy a délkového standardu ● Pracovní protokol (Worksheet). Jméno, příjmení, RČ, číselný kód vzorku, diagnóza, datum, podpis pracovníka provádějícího HLA vyšetření a podpis zodpovědného VŠ pracovníka, výsledek vyšetření, fotografie gelu. ● Konkrétní tabulka pro interpretaci výsledků popř. aktuální verze PC softwaru ● Specifikační tabulka ● Databáze fotografií v PC (Dokumenty → Foto elfo). ● Dokumentace výsledků, zápis do databáze ISTO v PC; odeslání výsledků v písemné formě poštou. Pravidla pro sdělování výsledků viz. SJ 5.8./15189 7.1.2. Typizace RHD variant a slabých D typů PCR SSP metodikou ● Kniha pracovních záznamů (PCR laboratoř - izolace DNA). Datum a číselný kód vzorku, jméno, příjmení, RČ, ZP pacienta, lékař požadující vyšetření, podpis pracovníka provádějícího HLA vyšetření. ● Pracovní protokol (Worksheet) včetně vyhodnocovacího diagramu. Tento dokument je vlastnictvím FNHK a jeho šíření mimo organizaci v jakékoliv formě bez souhlasu schvalovatele je zakázáno. Každý zaměstnanec odpovídá za to, že pracuje s platnou verzí dokumentu. Pořízené kopie jsou pouze informativní!


Strana 12 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Jméno, příjmení, RČ, číselný kód vzorku, diagnóza, datum, podpis pracovníka provádějícího HLA vyšetření a podpis zodpovědného VŠ pracovníka, výsledek vyšetření, fotografie gelu (viz příloha). ● Konkrétní tabulka pro interpretaci výsledků – součástí pracovního protokolu ● Databáze fotografií v PC (Dokumenty → Výsledky SSP FOTO→ D Weak a D Varianta). ● Dokumentace výsledků, zápis do databáze ISTO v PC; odeslání výsledků v písemné formě poštou. Pravidla pro sdělování výsledků viz.SJ 5.8./15 189 7.1.3. Telefonické vydávání výsledků Viz. Metodický pokyn ke SJ 5.8./15189 – SDĚLOVÁNÍ systému a PCR diagnostiky

VÝSLEDKŮ laboratoř HLA

■ Výsledky vyšetření se telefonicky pacientům nesdělují. Telefonické sdělování výsledků vyšetření je pouze ● v rámci FNHK: Porodnická a gynekologická klinika ● Koordinátorka transplantačního centra IV. Interní hematologické kliniky FNHK (Karolína Doskočilová) ● Koordinátorka transplantačního centra urologické kliniky FNHK (Malgorzata Grofová) ● KST Praha (Koordinační středisko transplantací Praha) Výsledky vyšetření z laboratoře HLA systému a PCR diagnostiky z transplantační služby se odesílají pomocí elektronického komunikačního systému TRINIS. V případě selhání systému lze sdělit výsledky vyšetření faxem, vytištěné potvrzení o odeslání zprávy faxem obsahuje datum, čas, příjemce výsledků, odesílatele výsledků, počet stran výsledků. Zakládá se k dokumentaci dárce. Sdělované výsledky ● HLA genotypizace: HLA systém I. a II. třídy (A*, B*, DRB1*, DQB1*) ● genotypizace RHD odchylek (D weak/varianta) ■ Pravidla pro sdělování výsledků: ■ nabídka pro volajícího - odeslat OPIS výsledku vyšetření ■ odeslat e-mailem: [email protected] , [email protected] ■ Zodpovědnost za sdělování výsledků vyšetření : ● JOP VŠ laboratoře HLA systému a PCR diagnostiky: Mgr. K. Synková, RNDr. G. Červená, Ph.D. ● Pověřená osoba konající transplantační službu: úseková laborantka R. Nováková, Ivana Vaňková, M. Radová, Z. Drešerová, A. Vavrušková, D. Nixová, V. Kostková, Bc. T. Chudobová ● Kvalifikovaná osoba TO: MUDr. V. Řeháček, MUDr. H. Jiroušová, MUDr. J. Černohorská 7.2.

Změny výsledků po jejich vydání (po uzavření výsledkového protokolu)

7.2.1. Oprava identifikační části a oprava výsledkové části Opravy v identifikační a výsledkové části jsou evidovány v protokolu Změna zprávy: a) odpovědná osoba provede opravu v textu v databázi PC b) vytiskne opravený (správný) výsledek vyšetření Tento dokument je vlastnictvím FNHK a jeho šíření mimo organizaci v jakékoliv formě bez souhlasu schvalovatele je zakázáno. Každý zaměstnanec odpovídá za to, že pracuje s platnou verzí dokumentu. Pořízené kopie jsou pouze informativní!


Strana 13 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové c) provede kontrolu správnosti spolu s druhou osobou (viz výše) d) zaznamená opravu výsledku do protokolu „ Změna zprávy“: datum, čas, číslo vyšetření, jmenovka + podpis, poznámka e) původní zprávu označí: datum, „OPRAVA výsledku“, jmenovka + podpis f) v textu podtrhne slovo, větu, číslo..., které bylo opraveno. Výsledky, které byly propuštěny mimo TO, musí být označeny jako neshoda – závažná, a musí být zaznamenány do karty neshod, případně nahlášeny jako nežádoucí událost. O neshodě musí být neprodleně informován žadatel, kterému je ihned po opravě odeslán nový výsledkový list se správnými údaji. 7.2.2. Zrušení žádanky Zrušení žádanky žadatelem – po telefonické domluvě Zrušení žádanky z důvodu velký neshod v základních údajích – telefonická žádost o vydání nové žádanky, provedeme záznam do listu chybová hlášení 7.3. Hlášení výsledků ve varovných (kritických) intervalech Platí pro ostatní laboratoře TO, pro laboratoř (č. 17) HLA systému a PCR diagnostiky je pouze povinnost STATIM vyšetření genotypizace RHD od rodiček po porodu, kdy je rozhodující interval pro podání profylaktického anti-D gamaglobulinu do 72 hodin po porodu RhD pozitivního plodu RhD negativní matce. Platí zde pouze povinné hlášení výsledku vyšetření (v nutném případě i telefonicky).

8. Způsoby řešení reklamací a stížností 8.1. Reklamace Reklamace jsou řešeny individuálně telefonicky nebo e-mailem. 8.2. Stížnosti Ve Fakultní nemocnici v Hradci Králové přijímá stížnosti, podněty a oznámení, eviduje a zajišťuje jejich interpretaci a včasné vyřízení odbor řízení kvality a kontroly podle směrnice SM _46 FN HK Postup pro vyřizování stížností. 8.3. Konzultační činnost laboratoře V problematice imunologie transplantací a imunohematologie pro genotypizaci RHD antigenu v souvislosti s výsledky vyšetření podává MUDr. Vít Řeháček nebo jeho zástupce. Otázky ohledně organizace laboratoře, laboratorních metod a organizace odběru vzorků mohou podávat vysokoškolsky vzdělaní pracovníci laboratoře.

Izolace a uchování lidské DNA (RNA) Fotografie gelu Elektroforéza nukleových kyselin Amplifikace metodou PCR

94119 94191 94193 94199

222/818 222/818 222/818 222/818

odbornost

1 2 3 4

Kód pojišťovna

Laboratorní výkony a účtované kódy pro pojišťovny:

9. Přílohy Příloha č. 1 Žádanka o vyšetření Tento dokument je vlastnictvím FNHK a jeho šíření mimo organizaci v jakékoliv formě bez souhlasu schvalovatele je zakázáno. Každý zaměstnanec odpovídá za to, že pracuje s platnou verzí dokumentu. Pořízené kopie jsou pouze informativní!


Strana 14 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové Příloha č. 1 Žádanka o vyšetření Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky Zdravotnická laboratoř č.8267 akreditovaná ČIA dle ČSN EN ISO 15189:2007

Fakultní nemocnice, Sokolská 581, 500 05 Hradec Králové - Nový Hradec Králové Vedoucí laboratoře: MUDr. Vít Řeháček, tel.:495833445, e-mail: [email protected] Kontakt : RNDr. G. Jamborová, Ph.D., Mgr. K. Synková, tel.: +420 495833562, fax: +420 495 832 025, e-mail: [email protected]

ŽÁDANKA O VYŠETŘENÍ Jméno a příjmení pacienta: Rodné číslo:

Datum a čas odběru vzorku:

Kód pojišťovny: Diagnóza: Ordinující lékař (jméno, adresa, razítko a podpis): IČP: Odbornost: tel./fax/e-mail: Požadavky na vyšetření (zaškrtněte prosím požadované vyšetření) název vyšetření – B27 – A,-B,-Cw – DQ2, DQ8

metoda (sérologická typizace) (sérologická typizace HLA antigenů I. třídy) (PCR-SSP genotypizace - celiakie)

požadavek na vzorek 5 ml/ heparin 5 ml/ heparin 5 ml/ K3EDTA

(MCT)

●HLA – A*, B*, DRB1*

(PCR-SSP genotypizace HLA genů I. a II. třídy)

2-3 ml séra (srážlivá krev) 2-3 ml séra (srážlivá krev) 5 ml/ heparin (dárce) 2-3 ml séra (příjemce) 5 ml/ K3EDTA

●HLA – DRB1*

(PCR-SSP genotypizace genů II. třídy)

5 ml/ K3EDTA

●Weak, Partial D-Type

(PCR-SSP RHD genotypizace)

5 ml/ K3EDTA

(Capture-P) -match test

(MCT)

● akreditovaná metoda – ČIA Vyšetření příbuzných pacienta indikovaného k transplantaci: Jméno a příjmení : Rodné číslo: Vztah k pacientovi:

Poznámka: Odběr primárního vzorku (izolace DNA) byl proveden s informovaným souhlasem pacienta a dle pokynů laboratorní příručky (www.fnhk.cz) Zkratky: Capture-P ČIA MCT PCR-SSP RHD Weak D-Type Partial D-Type

detekce protilátek proti trombocytům metodou pevné fáze český institut pro akreditaci mikrolymfocytotoxický test polymerázová řetězová reakce se sekvenčně specifickými primery gen RH systému slabý D antigen variantní D antigen

Vyplňuje laboratoř: Číslo vyšetření: …………………………….Datum a čas přijetí vzorku:……………………….. Převzal a přezkoumal:



Strana 15 z 17


10. Revize a změnové řízení Aktualizace dokumentu dle potřeby, revize se řídí SJ 4.2.3/ 01 Řízení dokumentů na TO FN HK. 1. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

2. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

3. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

4. Revize dne:

Záznam o změně:

Provedl:

Schválil:



Strana 16 z 17

Transfuzní oddělení Fakultní nemocnice Hradec Králové 5. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

6. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

7. Revize dne:

Záznam o změně:

Schválil:

Provedl:

8. Revize dne:

Záznam o změně:

Provedl:

Schválil:



Strana 17 z 17

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA. Laboratoř HLA systému a PCR diagnostiky

Recommend Documents